PLOS ONE: Epstein Barr Virus et Helicobacter pylori co-infections sont positivement associées avec sévère Gastrite pédiatrique Patients

Résumé

Contexte

H. pylori de l'infection est acquise pendant l'enfance et provoque une réponse inflammatoire chronique de la muqueuse gastrique, ce qui est considéré comme le principal facteur de risque d'acquérir le cancer gastrique (GC) plus tard dans la vie. Plus récemment, l'infection par le virus d'Epstein-Barr (EBV), ont également été associés à CG. Le rôle de l'EBV dans les réponses inflammatoires précoces et sa relation avec H. pylori de l'infection reste mal étudiée. Ici, nous avons évalué si l'infection à EBV chez les enfants en corrélation avec le stade de la gastrite et si la co-infection avec H. pylori
affecté la gravité de l'inflammation.

Méthodologie /Principales constatations

333 patients pédiatriques souffrant de douleurs abdominales chroniques ont été étudiés. A partir de ces biopsies gastriques ont été prélevés et l'inflammation classés selon le système de Sydney; le sang périphérique a été établi et des anticorps contre EBV (IgG et IgM anti-VCA) et H. pylori
(anti-bactéries entières IgG et anti-CagA) ont été mesurées dans le sérum. Nous avons constaté que les enfants infectés par EBV ont présenté seulement une légère mononucléaires (MN) et aucun polymorphonucléaires (PMN) l'infiltration de cellules, tandis que ceux qui sont infectés par H. pylori
présenté MN modéré et PMN doux. En revanche, les patients co-infectés par les deux pathogènes étaient significativement associés à une gastrite sévère. Fait important, la co-infection de H. CagA + /l'EBV de pylori + avait une forte association avec MN sévère (PR 3.0) et des cellules PMN (PR 7.2) que les cas avec un seul H. pylori
CagA + infection.

Conclusions /Importance

Co-infection par l'EBV et H. pylori
chez les patients pédiatriques est associée à une gastrite sévère. Même les infections simples avec H. Le CagA + souches de pylori sont associées à légère à modérée infiltration plaidant pour un effet coopératif de H. pylori
et EBV dans la muqueuse gastrique et révélant un rôle critique pour l'EBV précédemment non-apprécié. Cette étude souligne la nécessité d'étudier les deux agents pathogènes pour comprendre le mécanisme derrière des dommages graves de la muqueuse gastrique, ce qui pourrait identifier les enfants à un risque accru de présenter des lésions plus graves plus tard dans la vie

Citation:. Cárdenas-Mondragón MG , Carreón-Talavera R, Camorlinga-Ponce M, Gomez-Delgado A, Torres J, Fuentes-Panana EM (2013) Epstein Barr Virus et Helicobacter pylori
Co-infection sont associés positivement à sévère chez les patients pédiatriques Gastrite . PLoS ONE 8 (4): e62850. doi: 10.1371 /journal.pone.0062850

Editeur: Yoshio Yamaoka, Veterans Affairs Medical Center (111D), États-Unis d'Amérique

Reçu le 26 Décembre 2012; Accepté 26 Mars 2013; Publié le 24 Avril, 2013 |

Droit d'auteur: © 2013 Cárdenas-Mondragón et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, à condition que l'auteur et la source originelle sont crédités

Financement:. Cette étude a été partiellement soutenue par subvention FIS /IMSS /PROT /G2011 /941 (à MG Cárdenas-Mondragón) du Fondo de Investigación en Salud (FIS) -IMSS et subventions 178199 (à MGC-M) et 69450 (J. Torres ) à partir de CONACYT. Les bailleurs de fonds ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit

Intérêts concurrents:.. Les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts existent

Introduction

infections persistantes conduisent souvent à une inflammation chronique, un facteur de risque de cancer bien documenté. Le cancer gastrique (GC) commence généralement par un processus inflammatoire principalement associée à l'infection par Helicobacter pylori
( H. pylori
) [1]. GC est le quatrième type le plus commun de cancer et la deuxième cause de décès par pays, en particulier d'Asie et d'Amérique latine cancer dans le monde entier, affectant [2]. Plus récemment, GC a également été associée au virus d'Epstein-Barr (EBV), mais le rôle de l'infection virale dans les réponses inflammatoires gastriques précoces reste mal étudiée.

H. pylori
infecte plus de 50% de la population mondiale, avec une prévalence plus élevée dans les pays en développement. L'infection est généralement acquise tôt dans la vie; au Mexique, environ 50% des enfants sont infectés par l'âge de 10 ans [3]. Une inflammation après une infection chez l'enfant est généralement associée à un faible niveau de polynucléaires (PMN) et les cellules mononucléaires (MN), l'infiltration de la muqueuse gastrique [4]. Il a été suggéré que le plus tôt l'infection, plus le risque de présenter GC plus tard dans la vie, concevable en raison d'une longue durée (décennies) une réaction inflammatoire chronique à l'infection [5].

Seule une fraction de H. les personnes infectées par pylori développent la maladie gastro-duodénale: < 15% ulcère gastro-duodénal, < 3% GC et < 1% lymphome de MALT [6]. Le résultat de H. pylori de l'infection dépend aussi de l'environnement, l'hôte et facteurs bactériens. Parmi les plus importants facteurs de virulence bactérienne est l'îlot de pathogénicité (CagPAI), qui code pour un système IV de sécrétion de type (T4SS) qui translocation l'effecteur protéine CagA dans les cellules épithéliales [7]. CagA active de multiples voies de signalisation de déclenchement phénotypes cellulaires associés à la transformation oncogénique [7]. En outre, des souris transgéniques exprimant CagA développent adénocarcinomes du tube digestif. Sur la base de ces données, CagA a été reconnue comme l'oncoprotéine bactérienne d'abord connu [8], [9].

infection à EBV a toujours été associé à plusieurs types de lymphome, carcinome du nasopharynx (NPC) [10], [11] et plus récemment à la GC [12], [13], [14]. infection à EBV se produit également dans la petite enfance et habituellement persiste dans les cellules B, avec la plupart des individus infectés par le virus portant asymptotiquement dans une phase de latence dans ces cellules. On ne sait pas quand EBV infecte la muqueuse gastrique et si l'infection induit une réaction inflammatoire, comme on l'observe avec H. pylori
. EBV réactivation des cellules infectées B a été proposée pour faciliter l'infection de la face basolatérale épithéliale [15]. Dans ce scénario, le titre d'anticorps anti-EBV contre les protéines structurales a été proposé de mettre en corrélation avec le niveau de réactivation virale et en tant que marqueur pronostique dans NPC [10], [16], [17].

à notre connaissance, aucune étude ont déjà tenté de déterminer si l'infection à EBV chez les enfants est associée à une inflammation de la muqueuse gastrique ou s'il existe un effet coopératif entre EBV et H. pylori
en corrélation avec la sévérité de la réaction inflammatoire. Dans cette étude, nous avons analysé les anticorps contre EBV et H. pylori
dans les sérums des patients pédiatriques souffrant de douleurs abdominales chroniques. Nos résultats suggèrent fortement que seule infection soit par EBV ou H.
pylori est associée à une légère à modérée, une réponse inflammatoire de la muqueuse gastrique; Cependant, la co-infection avec les deux agents pathogènes est significativement associée à une gastrite sévère. Même l'infection par H. La cagA + des souches de pylori ne sont pas associées à des réponses inflammatoires sévères en l'absence de l'EBV. Ces données plaident en faveur d'un rôle critique jusqu'alors inconnue de l'infection par l'EBV dans l'induction d'une réponse inflammatoire dans la muqueuse gastrique des enfants.

Ethique Déclaration
Matériels et méthodes

Le Comité d'éthique de la recherche nationale IMSS a approuvé ce projet. Les parents ou les tuteurs des patients ont été informés de la nature de l'étude et ceux qui souhaitent participer ont signé un consentement éclairé par écrit avant le prélèvement des échantillons.

Aperçu

Population étudiée.

l'étude a inclus 333 patients pédiatriques (âgés de 0-17 ans) ont participé à cause de douleurs abdominales récurrentes à l'unité gastro-entérologie, Hôpital pédiatrique du Centro Medico Nacional SXXI, Instituto Mexicano del Seguro social (IMSS), à Mexico, entre Septembre 1994 et Octobre 2001. Les enfants ont été soumis à l'endoscopie et des biopsies gastriques ont été prélevés antre et corpus pour le diagnostic histopathologique. Le sang périphérique a également été appelée et les sérums ont été conservés à -80 ° C jusqu'au moment du test pour les anticorps.

Les données recueillies.

Les données socio-démographiques et l'information clinique a été enregistrée dans les questionnaires au moment de l'inclusion. Les informations recueillies comprenaient l'âge, le sexe, les symptômes cliniques et le diagnostic clinique basé sur l'endoscopie, l'histologie et la présentation clinique. Les patients avec un antibiotique, un inhibiteur de la pompe à protons ou traitements antiacides trois semaines précédentes pour un prélèvement d'échantillon ont été exclus de l'étude.

L'examen histopathologique
laboratoire Méthodes.

Deux échantillons de biopsie ont été obtenus à partir de l'antre et deux à partir du corpus gastrique. Une biopsie a été utilisé pour H. pylori de la culture et le second a été utilisé pour l'examen histologique. Une biopsie de l'antre et un du corpus ont été fixés dans la formaline, enrobés de paraffine et colorées à l'hématoxyline et l'éosine (HE). La réponse inflammatoire a été évalué selon le système de Sydney [18] par un seul pathologiste expérimenté. Les paramètres évalués étaient H. positivité, polynucléaires et mononucléaires l'infiltration de cellules de pylori, qui ont été classés en comparant avec des schémas publiés (échelles analogiques). Infiltration par les cellules polynucléaires et mononucléaires a été notée de absent à sévère dans les deux corpus et de l'antre, et le site avec l'infiltration plus élevé a été considéré comme le résultat final.

Collecte de sang.

Un échantillon du sang veineux (4 ml) ont été prélevés sur tous les patients. Des échantillons de sérum ont été stockés utilisés pour analyser les anticorps IgG et IgM contre le VEB protéine capside virale (VCA), ainsi que des anticorps IgG dirigés contre H. pylori
extraits de cellules entières et contre la protéine de CagA par immuno-enzymatique (ELISA).

Détermination des anticorps anti-EBV VCA.

Les anticorps anti-EBV VCA ont été déterminées à l'aide ELISA kits commerciaux (HUMAINE, Wiesbaden, Allemagne), pour IgG anti-VCA (catalogue 51204) et pour IgM anti-VCA (catalogue 51104) en suivant les instructions du fabricant. En bref, 100 ul de la dilution appropriée du sérum patient (1: 100 pour les IgM et IgG 1:20) ont été déposés sur le puits correspondant à l'antigène VCA déjà attaché, et mis à incuber pendant 1 heure (IgG) ou 30 min (IgM ) à 25 ° C. Ensuite, les puits ont été lavés quatre fois avec du tampon de lavage et 100 pi de conjugué à la Peroxydase anti-IgG humaine de lapin ou un anticorps IgM ont été ajoutés et mis en incubation pendant 30 min à 25 ° C. Les plaques ont été ensuite lavées cinq fois et 100 ul de réactif de substrat (3,3 ', 5,5' tétraméthylbenzidine (TMB) - peroxyde d'hydrogène) ont été ajoutés et mis en incubation pendant 15 min à 25 ° C dans l'obscurité. La réaction est ensuite stoppée avec 100 pl de solution d'arrêt (acide sulfurique à 0,5 mol /L) et les plaques ont été lues dans un lecteur ELISA (ThermoScientific, Multiskan Ascent) à une absorbance de 450 nm. La valeur indiquée est la moyenne de deux essais indépendants. Un sous-groupe d'échantillons a été réalisée en quatre utilisant différents lots du kit ELISA pour vérifier la reproductibilité. Les calculs pour les titres d'anticorps ont été réalisés selon les instructions du fabricant et les valeurs sont rapportées comme HU unités /ml. Un patient a été considéré comme EBV séropositifs lorsque les sérums ont été testés positifs soit pour IgG et /ou IgM.

Détermination des anticorps anti-ensemble H. pylori
extraits et anti-CagA.

anticorps IgG dirigés contre H. pylori
et CagA ont été déterminées en utilisant les tests ELISA précédemment validé dans une population mexicaine [19]. Les puits ont été revêtues avec soit un extrait soniqué d'un mélange de trois H. pylori des souches isolées chez des malades du Mexique (0,5 ug /puits dans 100 pi de tampon carbonate pH 9,6), soit avec CagA recombinante (0,1 ug /puits dans du même tampon que ci-dessus) et on fait incuber pendant une nuit à 4 °. Ensuite, les plaques ont été bloquées avec 200 pi de PBS-gélatine (0,1%) pour H. pylori
entier extrait et avec du PBS-lait (2,5%) pour CagA et incubé à 4 ° pendant une nuit. Les sérums ont été dilués 1: 1000 pour H. pylori
et 1: 200 pour CagA et 100 ul ont été ajoutés dans chaque puits et mis en incubation pendant une heure à 37 ° C. Une cent ul d'une dilution 1: 1000 de l'anticorps anti-IgG humaine des anticorps conjugués à la phosphatase alcaline ont été ajoutés et les plaques ont été incubées pendant 30 min à température ambiante, puis 100 ul de substrat de p-nitrophénylphosphate (Sigma, St. Louis MO Etats-Unis. n ° 2770) dans un tampon glycine-MgCl2-ZnCl. Plaques ont été lues dans un lecteur ELISA à une absorbance de 405 nm. Tous les échantillons ont été analysés en double et chaque plaque inclus quatre positifs et quatre échantillons de sérum négatifs. Les patients ont été considérés comme positifs pour H. Les anticorps pylori de quand les unités ELISA étaient ≥1.0, et CagA lorsque les unités ELISA étaient ≥1.5, selon les seuils validés [19].

Analyse statistique

Les différences statistiques des variables continues entre les groupes de patients ont été déterminées avec t
test de Student ou avec le test de Mann-Whitney U pour les variables non normalement distribuées. Les différences entre les trois ou plusieurs variables continues ont été comparées par une ANOVA, suivie par un test de Bonferroni, soit par le test de Kruskal-Wallis unidirectionnelle, suivie par le test U de Mann-Whitney. Les différences entre les variables catégoriques ont été estimées en utilisant le chi carré ( X ^{2
) avec correction de continuité de Yate ou le test exact de Fisher pour les petits échantillons. Variables avec plus de deux catégories ont été analysées à l'aide de Mantel-Haenszel X 2
avec une tendance linéaire. La signification statistique a été fixé à p≤0.05. La force des associations entre les groupes de la qualité de l'inflammation et IgG anti-VCA ont été estimées en utilisant des ratios de prévalence (PR) et les intervalles de confiance à 95% (IC).}

Voir Résultats Caractéristiques des patients étudiés

333 échantillons gastriques de patients pédiatriques souffrant de douleurs abdominales chroniques ont été étudiés, 197 (59,2%) étaient des femmes et 136 (40,8%) de sexe masculin avec un âge moyen et médian de 10,1 ± 3,7 (moyenne ± écart-type) et 10 ans , respectivement ( Table
1
). Tous les patients ont été diagnostiqués avec la gastrite atrophique non (NAG) par l'examen histologique; la morphologie des cellules épithéliales n'a pas été atypique et aucune atrophie glandulaire n'a été trouvé. La fréquence de l'infection par l'EBV était de 64,3% et de H. pylori
53,4%, alors que 33,9% présentaient des anticorps contre CagA. Dans la plupart des enfants a présenté la muqueuse gastrique avec une légère infiltration de MN (78%) et pas d'infiltration des PMN (75%); seulement 7,5% a présenté une infiltration grave de MN et 4,5% des cellules PMN ( Table
1
). En raison du faible nombre d'échantillons ayant une activité sévère, des échantillons ayant un diagnostic de la gastrite modérée et grave ont été combinées pour le reste de l'analyse. La séroprévalence H. pylori
et EBV chez les enfants étudiés selon l'âge est décrite dans Table
S1
.

Degré d'inflammation et d'infection soit avec EBV ou H . pylori

Nous avons identifié 214 enfants atteints d'une infection à EBV [179 étaient IgG et 35 étaient positifs IgM (7 seulement IgM et 28 IgM et IgG)], 9,8% de ces cas ont montré une infiltration de MN sévère, et 13,1% une infiltration PMN modérée à sévère ( Table
2
). Tous les 35 enfants (28 + 7) positifs pour les IgM ont été considérés dans l'infection primaire et présenté une légère inflammation et aucune activité. D'autre part, 178 enfants ont été infectés par H. pylori
et de ces 14% ont montré sévère infiltration de MN et 16,9% modérée à sévère infiltration PMN. Parmi les 112 enfants infectés par le H. pylori cagA de + 18,8% des souches avaient sévère infiltration de MN et 24,1% modérée à sévère infiltration PMN. Considérant que, aucun des 66 enfants sans infection présenté MN sévère, ni l'infiltration des PMN
.

titrages significativement plus élevés d'anticorps anti-EBV ont été trouvés seulement dans une légère infiltration PMN, ce qui suggère que l'anti-EBV des titres d'anticorps plus élevés ne sont pas représentatifs de la inflammation plus sévère dans la gastrite pédiatrique ( Table
S2
). D'autre part, une corrélation positive de H. les titres d'anticorps de pylori et la sévérité de la gastrite a été observé comme il a été rapporté précédemment [20], [21].

Degré d'inflammation liée à l'interaction entre l'infection par l'EBV et H. pylori

Nous avons ensuite abordé s'il y avait une interaction entre l'infection à la fois avec H. pylori
et EBV, et cette analyse sont présentés dans le Table
3
(voir aussi la figure 1). Nous avons constaté que la plupart des enfants sans infection ( HP
- /EBV) et les enfants avec seulement l'infection à EBV ( HP
- /EBV +) avait une infiltration de MN doux et pas PMN la muqueuse gastrique. Cas avec MN modérée et cellules PMN douces étaient plus fréquentes chez les patients avec seulement H. pylori de l'infection ( HP
+ /EBV) et à la fois avec H. pylori
et l'infection EBV ( HP
+ /EBV +). En revanche, plus de 80% des cas avec MN sévère et infiltration PMN modérée à sévère est survenue chez les patients présentant une co-infection ( HP
+ /EBV +).

interactions positives entre les H. pylori
CagA et EBV selon le degré d'inflammation ont également été analysés et un résultat similaire a été observée ( Table
3
), seulement H. CagA + /le EBV de pylori + patients doubles positifs étaient significativement associés à une inflammation sévère pour les deux MN et PMN infiltrat (Figure 2). Ces résultats soutiennent que H. pylori de l'infection ne suffit pas de développer une gastrite sévère.

Pour confirmer encore l'effet combiné de l'EBV mixte et H. pylori de l'infection, nous avons déterminé l'importance de l'association de co-infection avec les cas montrant une MN sévère ou infiltration PMN modérée à sévère ( Table
4
). Dans cette analyse, afin de déterminer si l'association observée de l'EBV et H. pylori de l'infection par la gastrite sévère pourrait être influencée par l'âge, les patients ont été divisés en deux groupes d'âge selon la médiane: ≤10 (groupe 1) et > 10 (groupe 2), et la prévalence des rapports (PR) ont été ajustés par ces groupes d'âge. Lorsque les patients avec co-infection ( HP
+ /EBV +) ont été comparés aux patients sans infection ( HP
- /EBV) valeurs de PR pour MN sévère et l'infiltration des PMN étaient undefined parce qu'aucun des enfants non infectés ( HP
- /EBV) avait MN sévère ou l'infiltration des PMN. Lorsque les patients avec co-infection ( HP
+ /EBV +) ont été comparés aux patients avec un seul H. pylori de l'infection ( HP
+ /EBV) PR de d'infiltration sévère étaient 2.2 pour MN et 4,1 pour PMN; ce dernier avec une signification statistique (p = 0,01).

Lorsque des cas avec la co-infection (CagA + /EBV +) ont été comparés à des cas de seulement H. pylori de l'infection ( HP
CagA- /EBV) PR de étaient 5,4 pour MN et 8,5 pour PMN. De même, lorsque les patients atteints de co-infection (CagA + /EBV +) ont été comparés à des cas avec un seul H. CagA + infection (le CagA de pylori + /EBV-PR de étaient 3.0 pour MN et 7,2 pour PMN ( Table
4
). Le niveau de l'infiltration des PMN a également montré la signification statistique soutenant que co- l'infection est nécessaire de développer une gastrite sévère chez les enfants, et donc en soulignant un rôle crucial pour l'EBV qui ne peut être fourni même par le facteur de virulence CagA (p = 0,003).

Discussion

H pylori infection
. est acquise au début de la vie durant l'enfance et de la présence des bactéries induit une réaction inflammatoire de la muqueuse gastrique qui, dans la plupart des cas ne provoque pas de maladie. Cependant, chez certains individus, la longue durée des déclencheurs de l'inflammation chronique de graves dommages à l'épithélium gastrique qui augmente le risque de développer des lésions précancéreuses, qui à son tour augmente le risque de se retrouver avec une vie en danger GC.

Certains des co-facteurs qui favorisent une réaction inflammatoire plus sévère peut présenter très tôt dans l'enfance. La nature inflammatoire de la CG indique un rôle critique pour un agent immunogène, et conformément à cela, CG est un cancer principalement d'étiologie infectieuse. Bien que l'association de H. pylori
avec GC et des lésions inflammatoires précoces est bien documentée, seules quelques études ont analysé la participation de l'infection à EBV chez les patients souffrant de gastrite, âgé de trois d'entre eux chez les adultes plus de 40 ans [22], [23], [24] et deux rapports de cas chez les jeunes femmes de 18 [25] et 17 ans [26]. A notre connaissance, ce dernier est le seul cas de l'EBV et la gastrite rapporté à ce jour chez un patient pédiatrique dans lequel ont été trouvés des taux sériques élevés d'anticorps anti-VCA (IgG et IgM). D'autres études ont examiné la présence de séquences d'EBV dans des échantillons de gastrite. Un rapport récent a révélé des séquences EBV par PCR quantitative en 15/50 et 5/6 de la gastrite pédiatrique et adulte, respectivement [27]. Une autre étude récente chez les adultes a révélé que près de 90% (12/13) de gastrite atrophique présentes séquences EBV chroniques [28]. Pris ensemble, ces données confirment un rôle important pour l'EBV dans les réactions inflammatoires précoces de la muqueuse gastrique.

Des études chez les adultes atteints NPC ont constaté que la progression de la maladie est en corrélation avec l'augmentation des anticorps contre les antigènes EBV de réactivation [10], [16] , [17]. Nous avons supposé que le même phénomène peut se produire dans GC et que l'étude des enfants avec une infection à EBV peut aider à identifier les patients atteints d'une inflammation sévère de la muqueuse gastrique, potentiellement plus à risque de développer des lésions précancéreuses. Les anticorps dirigés contre les protéines du cycle lytique EBV peuvent refléter des niveaux plus élevés d'infection de l'épithélium du tractus digestif supérieur et servir ainsi comme un marqueur de la progression de la lésion. Toutefois, lorsque nous avons analysé l'infection à EBV chez les enfants, on n'a pas observé la corrélation attendue avec la gastrite sévère, et des niveaux plus élevés d'anticorps anti-EBV soit IgG ou IgM, ce qui reflète les infections aiguës ou chroniques, ont été trouvés préférentiellement dans les cas de gastrite doux. Ainsi, EBV seule infection n'explique pas les cas de gastrite sévère.

Jusqu'à présent, les études ont été limitées à H. pylori
infection et ont montré que chez les enfants, il est généralement associé à une légère à modérée inflammation (MN infiltration de cellules) et une légère à l'activité absent (PMN cellule d'infiltration), bien qu'une inflammation et l'activité sévère est observée dans quelques cas . Lorsque nous avons analysé la co-infection à la fois avec H. pylori
et EBV nous avons constaté que les enfants infectés par les deux agents pathogènes avaient la plus forte association avec la gastrite sévère, telle que mesurée par une infiltration grave de MN (inflammation) et des cellules PMN (activité) dans la muqueuse gastrique. En revanche, les patients HP
- /VEB + préférentiellement présenté une légère inflammation (MN infiltration de cellules) et aucune activité (absence de cellules PMN); tandis que ceux HP
+ /EBV a présenté une inflammation modérée et une activité modérée. Nos résultats suggèrent que la co-infection par l'EBV et H. pyori
est nécessaire pour provoquer une gastrite sévère, soutenant un rôle important pour l'EBV, au moins chez les patients pédiatriques. Cet effet accru est également vrai pour les patients infectés par le H. Les souches CagA de + de pylori, déjà connus pour être associés à une plus grande virulence et un risque accru de GC. Dans nos analyses, les enfants co-infectés par CagA + /EBV + ont montré une association significative plus forte avec la gastrite sévère que infecté par CagA + /EBV, soutenant en outre la nécessité de l'EBV pour provoquer une gastrite grave, même en présence d'hautement pathogène H. CagA + souches de pylori. Fait intéressant, la co-infection par l'EBV et H. pylori
CagA souches négatives ne déclenchent stades sévères de gastrite, argumentant contre EBV complétant la pathogenèse de moins virulente CagA négative H. pylori
souches et ainsi soutenir encore l'importance de CagA.

Il est postulé que pour infecter les cellules épithéliales, EBV doit sortir d'abord de la latence des cellules B, une étape déclenchée par l'expression du facteur de transcription Zta, qui est l'ordonnanceur principal du cycle lytique. Cependant, les signaux extracellulaires dans le tractus digestif supérieur qui déclenchent l'expression Zta sont inconnus. CagA est une oncoprotéine que, parmi les nombreuses fonctions documentées induit une perte de la polarité des cellules épithéliales, permettant le transport des protéines basolatéral vers la face apicale [29]. Il pourrait être possible que la signalisation CagA pourrait fonctionner comme déclencheur du cycle lytique EBV et CagA induit la perte de la polarité cellulaire pourrait également favoriser EBV tropisme pour les cellules épithéliales. Arguant contre celle-ci, nous avons observé les patients pédiatriques infectés par EBV (214 cas) que par H. pylori
(178 cas), ce qui pourrait indiquer que l'infection par la bactérie ne se produit pas nécessairement la première.

Il est important d'examiner comment EBV et H. pylori
interagir dans la muqueuse gastrique dans les études futures. Deux mécanismes possibles sont envisagés: l'un est tout simplement par le biais d'additifs réponses inflammatoires provoquant une augmentation des dommages aux tissus. Un second mécanisme est à travers des interactions plus intimes entre EBV et H. Les gènes pylori de, e.g.
le CagA putative mentionné ci-dessus et de la coopération Zta. H. pylori de l'infection a également été liée positivement à MALT lymphome gastrique [30] soutenir une activation accrue /signalisation des cellules B qui transitent par la muqueuse gastrique. Dans ce scénario, l'un des principaux inducteurs de l'expression Zta et le cycle lytique VEB dans des cultures de lymphocytes B est la protéine kinase C (PKC) [31], [32] et CagA est un activateur connu de cette kinase [33]. l'expression ectopique de CagA chez des souris transgéniques soutient que cette protéine est la première oncoprotéine bactérienne décrite et en tant que telle, elle se comporte comme oncoprotéines virales [8], [9]. Il est intéressant de CagA et VEB oncogènes LMP2A LMP1 et déclencher l'activation de NFkB et MAP kinases, des voies de signalisation importantes pour la survie cellulaire et la prolifération accrue au cours de la transformation oncogène [34], [35]. L'activation commune des voies de signalisation par les deux pathogènes suggère un mécanisme commun de l'infection /transformation de l'épithélium gastrique.

Bien que nos données prend en charge que la co-infection de EBV avec H. pylori
est nécessaire pour provoquer une inflammation gastrique sévère et l'activité, exigence de EBV semble être plus grande pour l'induction de l'activité sévère dans la muqueuse gastrique. activité sévère est donnée par un grand infiltrat de cellules polynucléaires imprégnant la lamina propria et les glandes gastriques, qui à leur tour activent et sécrètent des médiateurs plus pro-inflammatoires, améliorant ainsi et de perpétuer la réaction inflammatoire locale et l'augmentation du risque de dommages graves et irréversibles à la muqueuse gastrique. Dans H. pylori de l'infection, l'IL-8 semble être la principale neutrophiles attirer cytokine [4], [36], [37]. IL-1β a été trouvé surexprimé dans des échantillons de tumeurs NPC, une cytokine importante pour le recrutement des PMN [38]. Il est possible que le rôle combiné de l'IL-8 et les résultats de l'IL-1 ß dans l'augmentation de l'activité observée dans VEB et H. pylori
Les patients co-infectés
.

En conclusion, nos résultats suggèrent fortement que l'EBV est impliqué dans la physiopathologie des lésions gastriques graves chez les enfants infectés par le H. pylori
. Nos résultats suggèrent également que, en l'absence d'infection par EBV H. pylori
ne suffit pas pour déclencher une gastrite sévère chez les enfants. Cette étude souligne la nécessité d'étudier les deux agents pathogènes conjointement pour comprendre le mécanisme derrière des dommages graves de la muqueuse gastrique tôt dans la vie, ce qui pourrait avoir des implications pour le diagnostic de la maladie et le traitement correct; aussi, il pourrait aider à identifier les enfants présentant un risque accru de présenter des lésions plus graves plus tard dans la vie.

Informations complémentaires
Tableau S1.
pourcentages cumulatifs de cas et de H. pylori
et EBV séroprévalence
doi:. 10.1371 /journal.pone.0062850.s001
(DOCX)
Tableau S2.
Corrélation entre les titres d'anticorps et la sévérité de la gastrite
doi:. 10.1371 /journal.pone.0062850.s002
(DOCX)

• PLOS ONE: Suppression ciblée de KCNE2 Causes Gastrite kystique Profunda gastrique et néoplasie
• PLOS ONE: Gene Expression Profiling dans la muqueuse gastrique de Helicobacter pylori-infectés et non infectés Patients Subissant chronique Superficial Gastrite