PLoS ONE: Epstein Barr Virus e Helicobacter pylori co-infezione sono positivamente associato con grave gastrite in pazienti pediatrici

Astratto

Sfondo

H. pylori
infezione viene acquisita durante l'infanzia e provoca una risposta infiammatoria cronica della mucosa gastrica, che è considerato il principale fattore di rischio per l'acquisizione cancro gastrico (GC) più tardi nella vita. Più recentemente, l'infezione da virus di Epstein-Barr (EBV) sono anche stati associati con GC. Il ruolo di EBV nelle risposte infiammatorie primi e il suo rapporto con H. pylori
infezione rimane poco studiato. Qui, abbiamo valutato se l'infezione da EBV nei bambini correlato con la fase di gastrite e se co-infezione con H. pylori
influenzato la gravità dell'infiammazione.

Metodologia /Principali risultati

Sono stati studiati 333 pazienti pediatrici affetti da dolore addominale cronico. Da loro, biopsie gastriche sono state prese e l'infiammazione classificati secondo il sistema di Sydney; sangue periferico è stato redatto e anticorpi contro EBV (IgG e IgM anti-VCA) e H.
pylori (IgG anti-batteri interi e anti-CagA) sono stati misurati nel siero. Abbiamo scoperto che i bambini infettati solo da EBV presentati mononucleare lieve (MN) e l'infiltrazione di cellule nessuno polimorfonucleati (PMN), mentre quelli infettati da H. pylori
presentato MN moderata e PMN mite. Al contrario, i pazienti coinfettati con entrambi i patogeni sono risultati significativamente associati con grave gastrite. È importante sottolineare che, co-infezione di H. pylori CagA +
/EBV + ha avuto una forte associazione con una grave MN (PR 3.0) e le cellule PMN (PR 7.2) rispetto ai casi con un'unica H. pylori CagA +
infezione.

Conclusioni /Significato

La co-infezione da EBV e H. pylori
in pazienti pediatrici è associato con grave gastrite. Anche le infezioni singole con H. pylori CagA +
ceppi sono associati con lieve a moderata infiltrazione sostenendo per un effetto cooperativo di H. pylori
e EBV nella mucosa gastrica e rivelando un ruolo critico per EBV in precedenza non-apprezzato. Questo studio sottolinea la necessità di studiare entrambi i patogeni per capire il meccanismo che sta dietro gravi danni della mucosa gastrica, che potrebbe identificare i bambini ad un aumentato rischio di presentare le lesioni più gravi nel corso della vita

Visto:. Cárdenas-Mondragón MG , Carreón-Talavera R, Camorlinga-Ponce M, Gomez-Delgado a, Torres J, Fuentes-panana EM (2013) Epstein Barr Virus e Helicobacter pylori
co-infezione sono positivamente associato con grave gastrite in pazienti pediatrici . PLoS ONE 8 (4): e62850. doi: 10.1371 /journal.pone.0062850

Editor: Yoshio Yamaoka, Veterans Affairs Medical Center (111D), Stati Uniti d'America

Ricevuto: 26 Dicembre, 2012; Accettato: 26 marzo 2013; Pubblicato: 24 Aprile 2013

Copyright: © 2013 Cárdenas-Mondragón et al. Questo è un articolo ad accesso libero distribuito sotto i termini della Creative Commons Attribution License, che permette l'uso senza restrizioni, la distribuzione e la riproduzione con qualsiasi mezzo, a condizione che l'autore originale e la fonte sono accreditati

Finanziamento:. Questo studio è stato parzialmente sostenuto dalla concessione FIS /IMSS /PROT /G2011 /941 (per MG Cárdenas-Mondragón) dal Fondo de Investigación en Salud (FIS) -IMSS, e concede 178.199 (a MGC-M) e 69450 (di J. Torres ) da CONACYT. I finanziatori avevano alcun ruolo nel disegno dello studio, la raccolta e l'analisi dei dati, la decisione di pubblicare, o preparazione del manoscritto

Competere interessi:.. Gli autori hanno dichiarato che non esistono interessi in competizione

Introduzione

infezioni persistenti spesso portano a infiammazione cronica, un fattore di rischio di cancro ben documentato. cancro gastrico (GC) in genere inizia con un processo infiammatorio principalmente associata ad infezione da parte di Helicobacter pylori
( H. pylori
) [1]. GC è il quarto tipo più comune di cancro e la seconda causa di morte per cancro in tutto il mondo, che colpisce in particolare i paesi dell'Asia e dell'America latina [2]. Più recentemente, GC è stata anche associata con il virus di Epstein-Barr (EBV), ma il ruolo dell'infezione virale nelle prime risposte infiammatorie gastriche rimane poco studiato.

H. pylori
infetta oltre il 50% della popolazione mondiale, con una prevalenza maggiore nei paesi in via di sviluppo. L'infezione è generalmente acquisito primi anni di vita; in Messico, circa il 50% dei bambini sono infettati dall'età di 10 [3]. Infiammazione dopo l'infezione nei bambini è solitamente associato ad un basso livello di polimorfonucleati (PMN) e le cellule mononucleate (MN) infiltranti la mucosa gastrica [4]. È stato suggerito che il precedente l'infezione, maggiore è il rischio di presentare GC tardi nella vita, concepibile a causa di una lunga durata (decenni) reazione infiammatoria cronica all'infezione [5].

Solo una frazione H. pylori
individui infetti sviluppano la malattia gastroduodenale: < 15% ulcera peptica, < 3% GC e < 1% linfoma MALT [6]. Il risultato di H. pylori
infezione dipende anche ambientale, host e fattori batterici. Tra i più importanti fattori di virulenza batterica è l'isola di patogenicità (CagPAI), che codifica per un tipo di sistema di secrezione IV (T4SS) che trasloca la proteina CagA effettrici nelle cellule epiteliali [7]. CagA attiva molteplici vie di segnalazione scatenanti fenotipi cellulari associati con la trasformazione oncogena [7]. Inoltre, i topi transgenici che esprimono CagA sviluppano gli adenocarcinomi del tratto digestivo. Sulla base di questi dati, CagA è stato riconosciuto come il oncoprotein batterica prima nota [8], [9].

infezione da EBV è stato costantemente associato a diversi tipi di linfoma, carcinoma nasofaringeo (NPC) [10], [11] e, più recentemente, di GC [12], [13], [14]. infezione da EBV si verifica anche nella prima infanzia e di solito persiste nelle cellule B, con la maggior parte degli individui infetti che trasportano il virus asintomatica in una fase latente in queste cellule. Non è chiaro se EBV infetta la mucosa gastrica e se l'infezione induce una reazione infiammatoria, come osservato con H. pylori
. EBV riattivazione da cellule B infettate è stato proposto per facilitare l'infezione del viso basolaterale epiteliale [15]. In questo scenario, il titolo di anticorpi anti-EBV contro proteine ​​strutturali è stato proposto per correlare con il livello di riattivazione virale e come marcatore prognostico nel NPC [10], [16], [17].

a nostra conoscenza, nessuno studio ha precedentemente affrontato se l'infezione da EBV nei bambini è associata a infiammazione della mucosa gastrica o se esiste un effetto di cooperazione tra EBV e H. pylori
correlazione con la gravità della reazione infiammatoria. In questo studio, abbiamo analizzato anticorpi contro EBV e H. pylori
nel siero di pazienti pediatrici con dolore addominale cronico. I nostri risultati suggeriscono fortemente che solo l'infezione da EBV sia o H. pylori
è associato con un lieve a moderata risposta infiammatoria nella mucosa gastrica; tuttavia, co-infezione con entrambi i patogeni è significativamente associato con grave gastrite. Anche l'infezione con H. pylori
cagA + ceppi non è associato a risposte infiammatorie gravi in ​​assenza di EBV. Questi dati sostengono un ruolo critico precedentemente sconosciuta di infezione da EBV nell'induzione di una risposta infiammatoria nella mucosa gastrica dei bambini.

Materiali e Metodi

Etica Dichiarazione

Il IMSS nazionale Comitato Etico di ricerca approvato questo progetto. I genitori o tutori dei pazienti sono stati informati sulla natura dello studio e coloro che sono disposti a partecipare firmato un consenso informato scritto prima della raccolta del campione.

Panoramica

popolazione dello studio.

lo studio ha incluso 333 pazienti pediatrici (0-17 anni) hanno partecipato a causa di ricorrenti dolori addominali presso l'unità di Gastroenterologia, Ospedale pediatrico del Centro Medico Nacional SXXI, Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS), a Città del Messico, tra il settembre 1994 e ottobre 2001. I bambini sono stati sottoposti a endoscopia e biopsie gastriche sono state prese da antro e corpo per la diagnosi istopatologica. Il sangue periferico è stato anche disegnato e sieri sono stati conservati a -80 ° C fino testato per gli anticorpi.

dati raccolti.

i dati socio-demografici e informazioni cliniche è stato registrato in un questionario al momento dell'inclusione. Le informazioni raccolte incluso età, sesso, sintomi clinici e la diagnosi clinica sulla base di endoscopia, istologia e presentazione clinica. I pazienti con antibiotici, inibitori della pompa protonica o trattamenti antiacido tre settimane precedenti per assaggiare la raccolta sono stati esclusi dallo studio.

Metodi di laboratorio

L'esame istopatologico.

Due campioni bioptici sono stati ottenuti da de antro e due dal corpus gastrica. Una biopsia è stato utilizzato per H. pylori
la cultura e il secondo è stato utilizzato per l'esame istologico. Una biopsia da l'antro e uno dal corpus sono stati fissati in formalina, inclusi in paraffina e colorati con ematossilina ed eosina (HE). La risposta infiammatoria è stata classificata secondo il sistema Sydney [18] da un singolo esperto patologo. I parametri valutati sono stati H. pylori
positività, polimorfonucleati e infiltrazione di cellule mononucleate, che sono stati classificati a confronto con gli schemi pubblicati (scale analogiche). Infiltrazione di cellule mononucleate polimorfonucleati e è stata classificata da assente a grave in entrambi i corpus e antro, e il sito con l'infiltrazione più alto è stato considerato come il risultato finale.

Raccolta di sangue.

Un campione di sangue venoso (4 ml) è stato elaborato da tutti i pazienti. campioni di siero archiviati sono stati utilizzati per analizzare anticorpi IgG e IgM anti EBV proteina del capside virale (VCA), così come gli anticorpi IgG contro H. pylori
estratti di cellule intere e contro la proteina CagA da immunoenzimatico (ELISA).

Determinazione degli anticorpi anti-EBV VCA.

Gli anticorpi anti-EBV VCA sono stati determinati utilizzando ELISA kit commerciali (UMANA, Wiesbaden, Germania), per IgG anti-VCA (catalogo 51204) e per IgM anti-VCA (catalogo 51104) seguenti istruzioni del produttore. Brevemente, 100 microlitri della diluizione appropriata paziente siero (1: 100 per IgM e 1:20 per IgG) sono stati depositati sulla corrispondente bene con l'antigene VCA già collegato, e incubate per 1 ora (IgG) o 30 min (IgM ) a 25 ° C. Successivamente, i pozzetti sono stati lavati quattro volte con tampone di lavaggio, e 100 ml di IgG antiumano coniugato con perossidasi o anticorpi di coniglio IgM sono stati aggiunti e incubate per 30 minuti a 25 ° C. Piastre sono state quindi lavate cinque volte e 100 ml di reagente di substrato (3,3 ', 5,5' Tetrametilbenzidina (TMB) - perossido di idrogeno) sono stati aggiunti e incubate per 15 min a 25 ° C al buio. La reazione è stata quindi bloccata con 100 ml di soluzione di arresto (acido solforico 0,5 mol /L) e le piastre sono stati letti in un lettore ELISA (Thermoscientific, salita Multiskan) ad un'assorbanza di 450 nm. Il valore riportato è la media di due analisi indipendenti. Un sottogruppo di campioni è stato fatto in quadruplicato utilizzando diversi lotti del kit ELISA per verificare la riproducibilità. I calcoli per titoli anticorpali sono state fatte in base alle istruzioni del fabbricante e i valori sono riportati come HU unità /ml. Un paziente è stato considerato EBV sieropositivi quando i sieri sono risultati positivi sia per IgG e /o anticorpi IgM.

Determinazione degli anticorpi anti-tutto H. pylori
estratti e anti-CagA.

anticorpi IgG contro H. pylori CagA
e sono stati determinati utilizzando test ELISA precedentemente convalidato in una popolazione messicana [19]. Wells sono stati rivestiti sia con un estratto sonicato di una miscela di tre H. pylori
ceppi isolati da pazienti messicana (0,5 mg /pozzetto in 100 pl di tampone carbonato pH 9.6) o con CagA ricombinante (0,1 mg /pozzetto in stesso tampone come sopra) e incubate a 4 ° notte. Successivamente, le piastre sono state bloccate con 200 microlitri di PBS-gelatina (0,1%) per H. pylori
intero estratto e con PBS latte (2,5%) per CagA e incubate a 4 ° notte. I sieri sono stati diluiti 1: 1000 per H. pylori Comprare e 1: 200 per CagA e 100 microlitri sono stati aggiunti in ogni pozzetto e incubate per un'ora a 37 ° C. Cento microlitri di una diluizione 1: 1000 di IgG anti-umane anticorpi coniugati con fosfatasi alcalina sono stati aggiunti e le piastre sono state incubate per 30 min a temperatura ambiente, seguito da 100 ml di substrato p-nitrofenilfosfato (Sigma; St. Louis MO USA. No. 2770) in tampone glicina-MgCl2-ZnCl. Le piastre sono state lette con un lettore ELISA in assorbanza a 405 nm. Tutti i campioni sono stati analizzati in duplicato e ogni piatto inclusi quattro positivo e quattro campioni di siero negativi. I pazienti sono stati considerati positivi per H. pylori
anticorpi quando le unità ELISA erano ≥1.0, e per CagA quando le unità ELISA erano ≥1.5, secondo le cut-off convalidati [19].

Analisi statistica

Le differenze statistiche di variabili continue tra gruppi di pazienti sono stati determinati con t
test di Student o con il test di Mann-Whitney per le variabili non normalmente distribuite. Differenze tra tre o più variabili continue sono stati confrontati ANOVA, seguita da test di Bonferroni o dal test unidirezionale Kruskal-Wallis, seguiti dal test di Mann-Whitney U. Le differenze tra variabili categoriali sono stati stimati utilizzando il quadrato Chi ( X ^{2
) test con correzione di continuità di Yate o test esatto di Fisher per i piccoli campioni. Le variabili con più di due categorie sono stati analizzati utilizzando Mantel-Haenszel X 2
con tendenza lineare. La significatività statistica è stata fissata a p≤0.05. La forza delle associazioni tra gruppi del grado di infiammazione e IgG anti-VCA sono stati stimati utilizzando rapporti di prevalenza (PRS) e gli intervalli di confidenza al 95% (IC).}

Risultati

Caratteristiche dei pazienti studiati

333 campioni gastrici da pazienti pediatrici con dolore addominale cronico sono stati studiati, 197 (59,2%) erano di sesso femminile e 136 (40,8%), di sesso maschile, con un'età media e mediana di 10,1 ± 3,7 (media ± SD) e 10 anni rispettivamente ( Tabella
1
). Tutti i pazienti sono stati diagnosticati con gastrite atrofica non (NAG) attraverso l'esame istologico; la morfologia delle cellule epiteliali non era atipica ed è stato trovato nessun atrofia ghiandolare. La frequenza di infezione da EBV è stata 64,3% e H. pylori
53,4%, mentre il 33,9% ha presentato anticorpi contro CagA. Nella maggior parte dei bambini mucosa gastrica presentato con un lieve infiltrazione di MN (78%) e nessuna infiltrazione di PMN (75%); solo il 7,5% ha presentato una grave infiltrazione di MN e il 4,5% delle cellule PMN ( Tabella
1
). A causa del basso numero di campioni con un'attività intensa, campioni con una diagnosi di gastrite moderata e grave sono stati combinati per il resto dell'analisi. La sieroprevalenza per H. pylori
e EBV nei bambini studiati secondo l'età è descritta in Tabella
S1
.

grado di infiammazione e infezione da EBV sia o H . pylori

Sono stati identificati 214 bambini con infezione da EBV [179 erano IgG e IgM 35 erano positivi (7 solo IgM e 28 IgM e IgG)], il 9,8% di questi casi ha mostrato una grave infiltrazione MN, e 13,1% di infiltrazione PMN moderata-grave ( Tabella
2
). Tutti i 35 bambini (28 + 7) positivi per IgM sono stati considerati in infezione primaria e presentato lieve infiammazione e l'attività nessuno. D'altra parte, 178 bambini sono stati infettati con H. pylori
e di coloro che il 14% ha mostrato una grave infiltrazione MN e il 16,9% infiltrazioni PMN moderata-grave. Tra i 112 bambini infettati con H. pylori CagA +
ceppi 18,8% ha avuto una grave infiltrazione MN e 24,1% infiltrazioni PMN moderata-grave. Considerando che nessuno dei 66 bambini senza infezione presentato grave MN né PMN infiltrazione
.

significativamente più elevati titoli di anticorpi anti-EBV sono stati trovati solo in lieve infiltrazione PMN, suggerendo che più elevati anti-EBV titoli anticorpali non sono indicativi di più grave infiammazione nella gastrite pediatrica ( Tabella
S2
). D'altra parte, una correlazione positiva di H. pylori
titoli anticorpali e la gravità gastrite è stato osservato come è stato riportato in precedenza [20], [21].

grado di infiammazione legati all'interazione tra l'infezione da EBV e H. pylori

Abbiamo affrontato prossimo se ci fosse qualche interazione tra l'infezione sia con H. pylori
e EBV, e questa analisi è presentato in Tabella
3
(vedi anche figura 1). Abbiamo scoperto che la maggior parte dei bambini senza infezione ( HP
- /EBV) e bambini con solo l'infezione da EBV ( HP
- /+ EBV) aveva una infiltrazione MN mite e non PMN in la mucosa gastrica. I casi con MN moderato e cellule PMN miti erano più frequenti nei pazienti con solo H. pylori
infezione ( HP
+ /EBV) e sia con H. pylori
e infezione da EBV ( HP
+ /EBV +). Al contrario, oltre l'80% dei casi con grave MN e moderata-grave infiltrazione PMN si è verificata in pazienti con co-infezione ( HP
+ /EBV +).

interazioni positive tra H. pylori CagA
e EBV secondo il grado di infiammazione sono stati analizzati e sono stati osservati un risultato simile ( Tabella
3
), solo H. pylori CagA +
/pazienti doppi positivi EBV + sono risultati significativamente associati con grave infiammazione sia per MN e PMN infiltrato (Figura 2). Questi risultati sostengono che H. pylori
infezione da sola non è sufficiente a sviluppare una grave gastrite.

Per confermare ulteriormente l'effetto combinato di EBV misto e H. pylori
infezione, abbiamo determinato l'importanza dell'associazione di co-infezione con i casi che mostra una grave MN o moderata-grave infiltrazione PMN ( Tabella
4
). In questa analisi, per valutare se l'associazione osservata di EBV e H. pylori
infezione con grave gastrite potrebbe essere influenzato da età, i pazienti sono stati divisi in due gruppi di età secondo la mediana: ≤10 (gruppo 1) e > 10 (gruppo 2), e di prevalenza rapporti (PR) sono stati adeguati da questi gruppi di età. Quando i pazienti con co-infezione ( HP
+ /+ EBV) sono stati confrontati contro pazienti senza infezione ( HP
- /EBV) valori PR per grave MN e PMN infiltrazione erano indefinito perché nessuno dei bambini non infetti ( HP
- /EBV) ha avuto gravi MN o PMN infiltrazione. Quando i pazienti con co-infezione ( HP
+ /+ EBV) sono stati confrontati contro i pazienti con singolo H. pylori
infezione ( HP
+ /EBV) PR di per grave infiltrazione erano 2.2 per MN e 4.1 per PMN; quest'ultimo con significatività statistica (p = 0,01).

Quando casi con co-infezione (CagA + /+ EBV) sono stati confrontati con i casi di solo H. pylori
infezione ( HP
CagA- /EBV) PR di erano 5.4 per MN e 8.5 per PMN. Allo stesso modo, quando i pazienti con co-infezione (CagA + /+ EBV) sono stati confrontati con i casi con un'unica H. pylori CagA +
infezione (CagA + /EBV-PR è erano 3.0 per MN e 7.2 per PMN ( Tabella
4
). Il livello di infiltrazione PMN ha anche mostrato significatività statistica di supporto che co- infezione è necessario sviluppare gastrite grave nei bambini, e quindi indicando un ruolo critico per EBV che non possono essere forniti anche per il fattore di virulenza CagA (p = 0,003).

Discussione

H. pylori
infezione viene acquisita precocemente durante l'infanzia, e la presenza dei batteri induce una reazione infiammatoria della mucosa gastrica, che nella maggior parte dei casi non provoca malattie. Tuttavia, in alcuni individui trigger infiammazione durature croniche gravi danni all'epitelio gastrico aumentando il rischio di sviluppare lesioni precancerose, che a loro volta aumentano il rischio di finire con un pericolo di vita GC.

Alcuni dei co-fattori che promuovono una reazione infiammatoria più gravi possono presentare presto durante l'infanzia. La natura infiammatoria GC denota un ruolo critico per un agente immunogeno e in accordo con ciò, GC è un cancro principalmente eziologia infettiva. Mentre l'associazione di H. pylori
con GC e lesioni infiammatorie precoce è ben documentata, solo pochi studi hanno analizzato la partecipazione di infezione da EBV nei pazienti con gastrite, tre di loro negli adulti più di 40 anni [22], [23], [24] e due casi clinici nelle donne giovani di 18 [25] e 17 anni [26]. A nostra conoscenza, il secondo è l'unico caso di EBV e gastrite segnalati fino ad oggi in un paziente pediatrico, in cui sono stati trovati alti livelli sierici di anticorpi anti-VCA (IgG e IgM). Altri studi hanno esaminato la presenza di sequenze EBV in campioni gastrite. Un recente rapporto ha trovato sequenze EBV mediante PCR quantitativa in 15/50 e 5/6 di gastrite pediatrica e adulta, rispettivamente, [27]. Un altro recente studio negli adulti ha rilevato che circa il 90% (12/13) di gastrite atrofica presenti sequenze EBV croniche [28]. Nel loro insieme questi dati supportano un ruolo importante per l'EBV nelle reazioni infiammatorie primi della mucosa gastrica.

Gli studi negli adulti con NPC hanno trovato che la progressione della malattia correla con un aumento di anticorpi contro gli antigeni EBV riattivazione [10], [16] , [17]. Abbiamo ipotizzato che un fenomeno simile si può verificare in GC e che lo studio dei bambini con infezione da EBV può aiutare a identificare i pazienti con grave infiammazione della mucosa gastrica, potenzialmente a rischio più elevato di sviluppare lesioni precancerose. Gli anticorpi contro le proteine ​​del ciclo litico EBV potrebbe riflettere livelli elevati di infezione degli epiteli tratto digestivo superiore e quindi servire come marker per la progressione della lesione. Tuttavia, quando abbiamo analizzato infezione da EBV nei bambini, non abbiamo osservato la correlazione prevista con grave gastrite, e più elevati livelli di anticorpi anti-EBV sia IgG o IgM, che riflette le infezioni acute o croniche, sono stati trovati preferenzialmente nei casi con gastrite lieve. Così, EBV singola infezione non spiega i casi di grave gastrite.

Fino ad ora, gli studi sono stati limitati a H. pylori
infezione e hanno dimostrato che nei bambini è di solito associato con un lieve a moderata infiammazione (infiltrazione di cellule MN) e un lieve all'attività assente (infiltrazione di cellule PMN), anche se una grave infiammazione e l'attività sono osservati in alcuni casi . Quando abbiamo analizzato co-infezione con entrambi i H. pylori
e EBV abbiamo scoperto che i bambini infettati da entrambi i patogeni hanno avuto la più forte associazione con grave gastrite, come misurato da una grave infiltrazione di MN (infiammazione) e le cellule PMN (Attività) nella mucosa gastrica. Al contrario, i pazienti HP
- /+ EBV preferenzialmente presentato lieve infiammazione (infiltrazione di cellule MN) e nessuna attività (assenza di cellule PMN); mentre quelli HP
+ /EBV presentato infiammazione moderata e lieve attività. I nostri risultati suggeriscono che la co-infezione con EBV e H. pyori
è necessario provocare gravi gastriti, sostenendo un ruolo importante per EBV, almeno nei pazienti pediatrici. Questa maggiore effetto è stato vero anche per i pazienti infettati con H. pylori
ceppi CagA +, già note per essere associate con maggiore virulenza e aumentato rischio di GC. Nella nostra analisi, i bambini coinfettati con CagA + /EBV + hanno mostrato una significativamente più forte associazione con gastrite grave di infezione da CagA + /EBV, sostenendo ulteriormente la necessità di EBV di causare gravi gastrite, anche in presenza di alta patogenicità H. pylori
ceppi CagA +. È interessante notare che, co-infezione da EBV e H. pylori CagA
ceppi negativi non innescare gravi fasi di gastrite, argomentando contro EBV completando la patogenesi di meno virulenti CagA negativo H.
pylori ceppi e quindi ancora sostenere l'importanza di CagA.

Si ipotizza che per infettare cellule epiteliali, EBV deve uscire prima dalla latenza cellule B, un passo innescato da espressione del fattore di trascrizione ZTA, che è l'orchestratore principale del ciclo litico. Tuttavia, i segnali extracellulari nel tratto digestivo superiore che scatenano espressione ZTA sono sconosciute. CagA è un oncoproteina che tra molte funzioni documentate induce la perdita della polarità in cellule epiteliali, permettendo il trasporto di proteine ​​basolaterale verso la faccia apicale [29]. Potrebbe essere possibile che la segnalazione CagA potrebbe funzionare come innesco del ciclo litico EBV, e CagA indotta perdita di polarità delle cellule potrebbe anche favorire tropismo EBV per le cellule epiteliali. Argomentando contro quest'ultimo, abbiamo osservato i pazienti più pediatrici con infezione da EBV (214 casi) che con H.
pylori (178 casi), il che potrebbe indicare che l'infezione con i batteri non si verifica necessariamente prima.

E 'importante affrontare come EBV e H. pylori
interagiscono nella mucosa gastrica in studi futuri. Due possibili meccanismi sono immaginato: una è semplicemente attraverso additivi risposte infiammatorie che causano un aumento dei danni al tessuto. Un secondo meccanismo è attraverso interazioni più intime tra EBV e H. pylori
geni, ad es.
il CagA putativo di cui sopra e la cooperazione ZTA. H. pylori
l'infezione è stata anche legata positivamente alla linfoma MALT gastrico [30] sostenendo una maggiore attivazione /segnalazione delle cellule B in transito attraverso la mucosa gastrica. In questo scenario, uno dei principali induttori di espressione ZTA e ciclo litico EBV in colture di cellule B è la proteina chinasi C (PKC) [31], [32], e CagA è un attivatore noto di questa chinasi [33]. espressione ectopica di CagA in topi transgenici sostiene che questa proteina è il primo oncoprotein batterica descritto e come tale si comporta in modo simile a oncoproteine ​​virali [8], [9]. È interessante notare che, CagA e EBV oncogeni LMP1 e LMP2A grilletto attivazione di NFκB e MAP chinasi, importanti vie di segnalazione per un aumento della sopravvivenza e la proliferazione cellulare durante la trasformazione oncogena [34], [35]. L'attivazione comune delle vie di segnalazione da entrambi i patogeni suggerisce un meccanismo comune di infezione /trasformazione dell'epitelio gastrico.

Anche se i nostri dati supporta che la co-infezione di EBV con H. pylori
è necessaria per causare grave infiammazione e l'attività gastrica, requisito EBV sembra essere maggiore per induzione dell'attività grave nella mucosa gastrica. attività grave è dato da una grande infiltrato di cellule polimorfonucleati permeano la lamina propria e le ghiandole gastriche, che a loro volta attivano e secernere mediatori più pro-infiammatorie, aumentando così e perpetuare la reazione infiammatoria locale e ad aumentare il rischio di danni gravi e permanenti per la mucosa gastrica. In H. pylori
infezione, IL-8 sembra essere il principale neutrofili attrarre citochine [4], [36], [37]. IL-1β è stato trovato sovraespresso in campioni di tumore NPC, una citochina importante per PMN reclutamento [38]. E 'possibile che il ruolo combinato di IL-8 e risultati IL-1b nella maggiore attività osservata in EBV e H. pylori
pazienti co-infetti
.

In conclusione, i nostri risultati suggeriscono fortemente che EBV è coinvolto nella fisiopatologia delle lesioni gastriche gravi nei bambini infettati con H. pylori
. I nostri risultati suggeriscono anche che, in assenza di infezione da EBV, H. pylori
non è sufficiente per innescare gastrite grave nei bambini. Questo studio sottolinea la necessità di studiare entrambi i patogeni congiuntamente per capire il meccanismo che sta dietro gravi danni della mucosa gastrica primi anni di vita, il che potrebbe avere implicazioni per la diagnosi della malattia e il trattamento corretto; Inoltre, potrebbe aiutare ad identificare i bambini con un aumento del rischio di presentare le lesioni più gravi più tardi nella vita.

Informazioni di supporto
Tabella S1.
percentuali cumulative di casi e H. pylori
e EBV sieroprevalenza
doi:. 10.1371 /journal.pone.0062850.s001
(DOCX)
Tabella S2.
Correlazione tra titoli anticorpali e la gravità gastrite
doi:. 10.1371 /journal.pone.0062850.s002
(DOCX)

• PLoS ONE: Soppressione mirata di KCNE2 cause gastrite cistica Profunda e gastrico Neoplasia
• PLoS ONE: profili di espressione genica in mucosa gastrica da Helicobacter pylori-infetti e non infetti pazienti sottoposti cronica superficiale Gastritis