Low Helicobacter pylori primaire resistentie tegen claritromycine in de maag biopten van dyspeptische patiënten van een stad in het binnenland van São Paulo, Brazil

Low Helicobacter pylori primaire resistentie tegen claritromycine in de maag biopten van dyspeptische patiënten van een stad in het binnenland van São Paulo, Brazilië vakantie abstracte achtergrond
claritromycine, amoxicilline, en een pomp proton remmer zijn de meest voorkomende drugs aanbevolen als eerste lijn triple therapie voor H. pylori
behandeling, wat resulteert in eradicatiepercentages bijna 80%, variërend regionaal, voornamelijk te wijten aan noodgevallen en verhogingen van claritromycine resistente stammen. Nucleotide substituties op de H. pylori
domein V van het 23S rRNA fractie zijn betrokken bij de macrolide weerstand en de A2142G en A2143G mutaties overheersend in klinische isolaten wereldwijd, waaronder in Brazilië. Als H. pylori
cultuur is veeleisend, onderzochten we de primaire voorkomen van H. pylori
A2142G en A2143G rDNA 23S mutaties aan de hand van een moleculaire benadering rechtstreeks op de maag biopten van dyspeptische patiënten achtereenvolgens woonde bij het Ziekenhuis das Clinicas van Marilia, São Paulo, Brazilië.
Methods
biopsie monsters verkregen van 1137 dyspeptische patiënten, werden onderworpen aan histopathologie en H. pylori
diagnose door histologie en PCR. PCR /RFLP test werd gebruikt om de A2142G en A2143G puntmutaties te detecteren op domein V van de H. pylori
23S rDNA geassocieerd met clarithromycine weerstand. Door de ontwikkelde test, een 768 bp PCR amplicon overeenkomt to1728 tot 2495 bp van de 23S H. pylori
rDNA is beperkt met MboII
voor A2142G mutatie detectie en met BsaI
voor A2143G mutatie detectie. Het optreden van 23S rDNA A2142G resulteert in twee DNA-fragmenten (418 en 350 bp) en 23S rDNA A2143G resulteert in drie DNA-fragmenten (108, 310 en 350pb) door een geconserveerde BsaI
restrictieplaats.
Resultaten
de PCR-werkwijze voor de diagnose H. pylori
gepresenteerd sensitiviteit, specificiteit en nauwkeurigheid van 77,6%, 79,3% en 78,6%, respectievelijk, vergeleken met histologie de gouden standaard werkwijze voor H. pylori
diagnose gebruikt in onze routine. Prevalentie van H. pylori hotels met claritromycine resistente genotypen was 2,46%, met een overwicht van A2143G 23S rDNA puntmutatie.
Conclusies
De PCR /RFLP test was een snelle en accurate H. pylori
diagnostische en clarithromycine weerstand bepalingsmethode nuttig voor de dagelijkse praktijk. Als prevalentie van primaire resistentie van H. pylori
voor claritromycine te wijten aan A2142G en A2143G mutaties blijft laag in Marilia, de standaard claritromycine met triple therapie is nog steeds geldig.
Sleutelwoorden
Helicobacter pylori
Clarithromycin weerstand Helicobacter pylori
23S rDNA maag ziekten nucleïnezuur gebaseerde diagnostische Achtergrond
Het is algemeen aanvaard dat de Helicobacter pylori
, een Gram-negatieve microaerophylic bacterie, is betrokken bij diverse klinische spijsverteringskanaal aandoeningen zoals chronische gastritis, ulcus en darmzweren , maagkanker en lymfoproliferatieve aandoeningen [1]. Behandeling van H. pylori
infectie resulteert in genezing van ulcera en een vermindering van het risico op maagkanker en lymfoom [2, 3].
Zodra de bacterie H. pylori
gedetecteerd in gewijzigde maagslijmvlies, de aangegeven behandeling bestaat uit een triple antibioticum regime waaronder methronidazol, claritromycine, amoxicilline, tinidazole, tetracycline en fluoroquinolonen geassocieerd met een pomp proton-remmer, zoals omeprazol, lansoprazol of pantoprazol [4-6]. H. pylori
eradicatiepercentages met een aantal gecombineerde agenten en regimes zijn dicht bij 80% [7-9], variërend van land tot land en regionaal, binnen landen [10]. Verschillende factoren dragen bij tot dit lage H. pylori
genezing waaronder de inefficiëntie van het antibioticum penetratie in het maagslijmvlies, inactivering van het antibioticum door de zuursecretie van de maag [11], gebrek aan therapietrouw [12] en vooral, noodgevallen en het verhogen van H. pylori
antibiotica-resistente stammen [13]. Zo regionale H. pylori
weerstand toezicht is van groot belang voor onderzoek en behandeling van strategieën.
In Brazilië, een land van continentale afmetingen, het grootste deel van het beoefenen van artsen maken gebruik van de klassieke triple regime bestaat uit claritromycine, amoxicilline en een protonpompremmer gedurende zeven dagen als eerste lijn therapie voor H. pylori-infectie
[5, 14] te overwinnen. Dit regime is bewezen wereldwijd inefficiënt geworden, vooral als gevolg van het ontstaan ​​en de toename van de H. pylori
stammen die resistent zijn voor claritromycine, waarbij de bacterie behandeling rendement van 55% reduceert tot 100% [15-18]. Onder Braziliaanse plaatsen, H. pylori
clarithromycine weerstand biedt hoge prevalentie, variërend 7-16% bij volwassenen [19-22] en 27% bij kinderen [23]. Dienovereenkomstig, gezien het klinisch belang van de primaire H. pylori
resistentie tegen claritromycine, de prevalentie moeten worden beschouwd voor het kiezen van uitroeiing regimes [24].
Bepaling van H. pylory in vitro
gevoeligheid voor antibiotica kunnen worden uitgevoerd door standaardtechnieken zoals agar diffusie, agar verdunnings- en bouillon microdilutie methoden en de E-toets. Vanwege de langzame groei en de bijzondere eisen van H. pylori
cultuur, deze benadering is niet betrouwbaar voor gebruik in de meeste routine klinische laboratoria, voornamelijk in ontwikkelingslanden. Derhalve moleculaire tests gericht H. pylori
resistentie geassocieerde genmutaties rechtstreeks van gastrische biopsie specimens hebben het potentieel voor gebruik in grootschalige studies [25-29]. Ondernemingen De moleculaire mechanisme van resistentie clarithromycine omvat mutaties in de sequentie van het H. pylori
domein V van het 23S rRNA fractie die betrokken is bij de peptiltransferase ribosoombindingsplaats voorkomen van de ligatie van de macrolide het rRNA [30]. Het belangrijkste kenmerk puntmutaties zijn A naar G op posities 2142 en 2143, A naar C op 2142 [31-33], A naar T in 2144 [34], T naar C op 2717 [35] en C naar A op 2694 [ ,,,0],36]. De A2142G en A2143G mutaties zijn overheersende in klinische isolaten wereldwijd, waaronder in Brazilië [21, 37-40]. Dus, met het oog op een grootschalig onderzoek naar clarithromycine primaire weerstand rechtstreeks van biopsie specimens uit te voeren van 1137 patiënten woonden in het ziekenhuis das Clínicas van Marilia, een stad in het binnenland van São Paulo, Brazilië, ontwikkelden we een polymerase kettingreactie in verband met beperking fragment lengte polymorfisme (PCR-RFLP) test om de A2142G en A2143G nucleotidesubstituties detecteren domein V van de H. pylori
23S rDNA.
Methods
patiënten
1137 volwassen patiënten die wonen in de stad Marilia, staat São Paulo in Brazilië, in de leeftijd 19-91 jaar, die achtereenvolgens ondergaan gastroscopie (EGD) voor pijn in de bovenbuik of dyspeptische klachten van februari 2003 had tot en met december 2006 op de gastro-enterologie polikliniek van het ziekenhuis das Clínicas van Marília Medical School, werden geïncludeerd in deze studie.
Endoscopie en biopsies Ondernemingen De EGD werd bereikt door fibroendoscope (GIF-XP20, GIF-XQ20) of video-endoscoop (GIF-100), beide van Olympus, Shinjuku-ku, Tokyo, Japan. Maag- of duodenale zweer diagnostische werd bepaald door endoscopie en twee fragmenten van het antrum werden verzameld om de snelle urease en histopathologische tests. De biopsie voor de snelle ureasetest werd verder onderworpen aan DNA extractie. Het protocol dat wordt gebruikt is in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki en werd onder vermelding van referentienummer 388/01 door de Ethische Commissie in Human Research van Marilia Medical School, goedgekeurd. In de Ethische Commissie goedgekeurd onderzoeksprotocol een schriftelijke geïnformeerde toestemming van elke patiënt opgenomen in deze studie werd afgezien omdat alle maag biopsie geanalyseerde monsters waren dezelfde biopsieën routinematig gebruikt voor urease snelle test als onderdeel van de gastro-enterologie poliklinische dienst van het ziekenhuis das Clinicas van Marilia Medical School en dus geen specifieke patiënt interventie was nodig zijn voor de inschrijving in het voorgestelde onderzoek. Dienovereenkomstig, afzien van de schriftelijke informed consent heeft geen nadelige invloed op de rechten en het welzijn van de proefpersonen in dit onderzoek, en ook de vertrouwelijkheid van de identiteit van de patiënten werd gegarandeerd.
Histologie
Een antral exemplaar werd gefixeerd in formol oplossing bij 10% en ingebed in paraffine. Secties werden Giemsa gekleurd voor H. pylori
evaluatie en gekleurd met hematoxiline en eosine voor beoordeling van histopathologische veranderingen [41].
Polymerase kettingreactie, restrictie-analyse en sequentiebepaling
Dezelfde biopsie voor de snelle urease test werd aan DNA-extractie ingediend met de tewerkstelling van de GFX DNA-extractie kit gekocht van Amersham /Pharmacia Biotech, volgens de instructies van de fabrikant. DNA werd gekwantificeerd in agarose gelelektroforese met behulp van de Invitrogen, Grand Island, New York, USA, lage massa ladder en 50-100ug van totaal DNA werden in de PCR reacties met de oligonucleotiden: Hp23Sr6 sense (5 'CACACAGGTAGATGAGATGAGTA3') en antisense Hp23Sr7 (CACACAGAACCACCGGATCACTA3 '), waarbij een fragment van 768pb overeenkomt met het V-domein van de H. pylori
23S rDNA (figuur 1) geamplificeerd. Om de problemen van uitgebreid genetisch polymorfisme voor nauwkeurige PCR detectie van H. pylori
overwinnen, werd het oligonucleotide constructie uitgevoerd na een vergelijkende analyse van de 23S rDNA van H. pylori Kopen en aanverwante organismen beschikbaar Genenbank op MegAlign Lasergene software . PCR conditie was 94 ° C 5 'gevolgd door 40 cycli van 94 ° C 30 "/60 ° C 30" /72 ° C 30 "en één cyclus bij 72 ° C 7', met een totaal volume van 25 ul bevattende 1 × PCR buffer, 200 uM dNTPs, 2,0 mM MgCl 2, 1 pM van elke oligonucleotide, 1,25 U Taq DNA Polimerase Platinum Brazilië (Invitrogen). In alle PCR-reacties een negatieve en een positieve controle werden gebruikt die overeenkomt met, respectievelijk, steriel water en H. pylori
PCR positief maag biopten. De geamplificeerde fragmenten werden geknipt met MboII Kopen en BsaI
(New England Biolabs). Deze enzymen onderscheiden mutaties in de H. pylori
domein V van het 23S rDNA op de posities 2142 en 2143, respectievelijk. In aanwezigheid van de A2142G mutatie verkregen restrictie DNA fragmenten van 418 bp en 350 bp en in aanwezigheid van de A2143G mutatie resulterende fragmenten van 108, 310 e 350 bp. Als controle van MboII
digestie gebruikten we een PCR-geamplificeerd DNA-fragment van 601 bp overeenkomende met de Leishmania major
chitinase gen dat een restrictieplaats voor MboII
bevat. Een geconserveerde BsaI
restrictieplaats aan het 768 bp PCR amplicon is de positieve controle voor digestie met het enzym produceert DNA-fragmenten van 108 en 660 bp in afwezigheid van A2143G mutatie. De producten van de PCR-reacties en restrictie-analyse werden opgelost in 1,5% agarose gels, gekleurd met ethidiumbromide en gefotografeerd onder UV-licht. 23S rDNA 768 bp PCR amplicons uit vier maag biopten (twee positieve en twee negatief voor H. pylori
histologische test) met claritromycine gevoelige MboII
en BsaI
restrictiepatroon en van tien maag biopten met clarytromycin resistente MboII
(drie monsters) en BsaI
(zeven monsters) beperking patronen werden naar sequencing ingediend DyeTM Terminator v3.0 cyclus sequencing Ready Reaction kit en een ABI-3100 machine gekocht bij Applied Biosystem, volgens de instructies van de fabrikant. Nucleotide sequentiebepaling werd uitgevoerd in duplo en vergelijkende analyse werd uitgevoerd door basic nucleotide BLAST uitlijning [42] uitgevoerd. Figuur 1 Moleculaire diagnose van Helicobacter pylori door PCR en RLFP detectie van domein V van het 23S rRNA mutaties A2142G en A2143G verantwoordelijk voor claritromycine weerstand. A. Vertegenwoordiging van de H. pylori
23S coderende gen (Genbank: HPU27270), positie van de primers die voor PCR en de A2142 en A2143 uit fractie V van het 23S rDNA, grootte van de verkregen fragmenten met restrictie-enzymen BsaI en MboII
in PCR-fragmenten die de mutaties A2142G en A2143G, en de interne BsaI
restrictieplaats van de 768 bp amplicon, zijn aangegeven. B, C en D. Agarose gel gekleurd met ethidiumbromide bevattende een PCR diagnostische analyse restrictieanalyse van de 768pb amplicon met MboII Kopen en BsaI
respectievelijk. 1-10 corresponderen met verschillende menselijke biopsie specimens; C-, negatieve controle PCR, M-100 bp ladder gekocht van Invitrogen. Groottes van de DNA-fragmenten worden aangegeven op de linker- of rechterkant van elke gel figuur.
Statistische analyse
H. pylori
diagnostische tests werden geëvalueerd door het berekenen van sensitiviteit, specificiteit en nauwkeurigheid in dienst histologie als de gouden standaard.
Resultaten en discussie
Dit is de eerste Braziliaanse grootschalige studie over H. pylori
diagnose en clarithromycine weerstand rechtstreeks uit biopsie specimens van 1137 opeenvolgende patiënten over een periode van vier jaar tot de bovenste gastroscopie ingediend, in een stad in het interieur van São Paulo, Brazilië.
Gastric ziekte uitkomst van alle patiënten in deze studie gevolgd aan de gastro-enterologie polikliniek van het ziekenhuis das Clínicas van Marília werd onderzocht door endoscopie en histopathologie. Endoscopische vondsten van maag- of darmzweren ziekte (PUD) was aanwezig in 123 patiënten. Verschillende mates van chronische gastritis (CG) waargenomen door histopathologie bij 706 patiënten en normale maagslijmvlies, geassocieerde of niet gastro-oesofageale refluxziekte (GERD) werd in 290 patiënten. Achttien patiënten werden gediagnosticeerd als adenocarcinoma (15) en MALT lymfoom (3) en werden uitgesloten van de studie. . Epidemiologische analyse, klinische uitkomst en H. pylori
prevalentie van deze monsters werden onlangs gepubliceerd [43]
Detectie van H. pylori
is rechtstreeks afkomstig uit biopsie specimens uitgevoerd door drie verschillende tests: histologie, een huishouden snelle ureasetest en PCR met de primers Hp23Sr6 /R7 waarbij een 768 bp fragment van de bacterie domein V van het 23S rDNA amplificeren. Histologie is de gouden standaard H. pylori
diagnostische test die werkzaam zijn in onze klinische routine die samen met histopathologische analyse wordt gebruikt om te beslissen voor H. pylori
eradicatie. Het huishouden snelle urease test toonde een zeer lage positief voorspellende waarde voor H. pylori
gerelateerde maag- ziekten en een hoge verschil in vergelijking met histologie; bijgevolg werden de gegevens uit de studie uitgesloten (gegevens niet getoond). De 23S rDNA PCR-methode ontdekt H. pylori
in 488 maag biopten exemplaren, waar histologie positief voor 451 biopten monsters was. Vergelijkende analyse van de PCR uitgevoerd met de Hp23Sr6 /r7 met histologie vertoonden gevoeligheid, specificiteit en nauwkeurigheid van 77,6%, 79,3% en 78,6%, respectievelijk (Tabel 1). Aangezien beide tests werden uitgevoerd op één en ander biopsie en H. pylori infectie
presenteert een centraal kenmerk van infecties [44, 45], nauwkeurigheid van 78,6% is aanvaardbaar voor een betrouwbare diagnostische test. Het kan worden aangetoond door consistentie van de H. pylori
detectie door PCR en histologie die werkzaam zijn in CG (53,1% en 52,7%, respectievelijk) en PUD (61,2% en 62,6%, respectievelijk) patiënten (Tabel 1). PCR gedetecteerd H. pylori
van 12,75% bij patiënten met normale maagslijmvlies terwijl histologie positief slechts 0,8% van de monsters was. Deze resultaten kunnen verklaard worden door de meer gevoelige eigenschap van het nucleïnezuur gebaseerde methode. Om de diagnose van H. pylori verbeteren
sommige auteurs suggereren dat de analyse van meervoudige biopsies [44]. Met het oog op de specificiteit van de PCR-fragmenten verkregen amplicons van twee monsters met een histologische test voor H. pylori
positieve en twee monsters met een histologisch onderzoek bevestigen voor H. pylori
negatief werden gesequenced. BLASTN analyse van alle vier biopsie versterkte PCR-fragmenten met de 23S rDNA H. pylori
specifieke primers [Genbank: KF680642, Genbank: KF680643, Genbank: KF680644 en Genbank: KF680645] onthulde identiteit van 100% met de 23S rDNA referent voor verschillende stammen van H. pylori
. Dienovereenkomstig ontwikkelde PCR is een snelle en accurate en kan worden gebruikt als een praktische werkwijze voor de detectie van H. pylori
infection.Table 1 Klinische resultaten en vergelijking van H. pylori diagnosemethoden
PUD ( n = 123)
CG (n = 706)
N (n = 290)

Zijn +
His
His +
His
His +
His

T
PCR +
63
13
76
286
89
375 1
36
37
488
PCR
14
33
47
86
245
331 1
252
253
631
T
77
46
123
372
334
706 2
288
290
1119
CG
chronische gastritis, PUD
maagzweer, N
normale maagslijmvlies geassocieerd of niet gastro-oesofageale refluxziekte (GERD), PCR
polymerase chain reaction, Zijn
histologie.
Antibioticum behandeling van maag-en vaatziekten wordt aanbevolen wanneer H. pylori
diagnose is positief en de bacterie klassieke eradicatietherapie samengesteld van claritromycine, amoxicilline en een pomp proton-remmer is voorgeschreven. De gekozen therapie vormen een hoge uitval van H. pylori
eradicatie in gebieden waar resistentie voor clarithromycine is hoger dan 15%, waarschijnlijk in reactie op het wijdverbreide gebruik van deze antibiotica voor luchtweginfecties, vooral bij kinderen [9]. Global stator van H. pylori
voor claritromycine loopt van 1 tot 29% [46]. In Brazilië onderzoeken zien clarithromycine een weerstand prevalentie van 7-16% bij volwassenen [19, 20, 22, 47] en 27% bij kinderen [23]. Aldus teneinde de empirische keuze van H. pylori geassocieerde ziekte
therapie te verbeteren hebben we de regionale snelheid van H. pylori
clarithromycine weerstand door detectie van de belangrijkste verwante puntmutaties, A2142G en A2143G in domein V van de H. pylori
23S rDNA.
Zo werden alle 488 H. pylori
PCR-positieve monsters geanalyseerd met RFLP van het 768 bp PCR-fragment verkregen met primers Hp23Sr6 /7 met de restrictie-enzymen MboII
en BsaI
met sporen mutaties A2142G en A2143G in domein V van de H. pylori
23S rDNA, respectievelijk (figuur 1). Slechts 12 monsters (2,46%) toonde het gemuteerde restrictiepatroon, drie (25%) herbergen A2142G mutatie zeven (58,3%) en A2143G één monster (8,7%) vertoonden beide rDNA puntmutaties in het 23S PCR rDNA 768 bp fragment. Eén monster toonde gedeeltelijke digestie met het enzym MboII
(figuur 1). Het punt mutaties A2142G en A2143G van de amplicons verkregen uit drie [Genbank: KF680646, Genbank: KF680647 en Genbank: KF680647] en zeven [Genbank: 680.649, Genbank: 680.650, Genbank: 680.651, Genbank: 680.652, Genbank: 680.653, Genbank: 680.654 en Genbank: 680.655] verschillende biopten monsters respectievelijk werden bevestigd door sequencing. Er was geen verband van claritromycine H. pylori
weerstand puntmutaties met de leeftijd of geslacht (gegevens niet getoond) van de patiënten '. Ondernemingen De prevalentie van H. pylori
clarithromycine-resistentie gevonden in onze regio was vergelijkbaar met die in de ontwikkelde landen, zoals Italië en Duitsland [7] en in de Zuid-Amerikaanse ontwikkelingsland Paraguay [48]. Deze resultaten bevestigen de hoge regionale variabiliteit van H. pylori
resistentie tegen antibiotica en ondanks toenemende clarithromycine-resistentie de hele wereld, in Marilia, werd een lage weerstand tarief gehandhaafd over de periode van vier jaar. Bovendien PCR /RFLP een snelle en nauwkeurige werkwijze voor het detecteren van clarithromycine weerstand door een genmutatie direct maag biospsy monsters en kan gebruikt worden samen met histologie beslissen voorschrijven van claritromycine bevattend regime therapie.
H. pylori
23S domein V A2142G en A2143G puntmutaties zijn de belangrijkste mutaties gevonden in H. pylori
klinische isolaten die resistent zijn voor claritromycine. We vonden een hogere prevalentie van A2143G in vergelijking met A2142G mutatie in onze monsters die in overeenstemming is met het merendeel van de Braziliaanse studies met inbegrip van de Staten van Minas Gerais, São Paulo en Recife [20, 34, 36]. A2143G maar niet A2142G puntmutatie toont een synergetisch effect van claritromycine en amoxicilline, die onderling gebruikt in de eerste lijn H. pylori
regime [49], de versterking van de noodzaak om deze clarithromycine 23S rDNA puntmutatie vóór behandeling te onderzoeken. Eén monster koesterde zowel A2142G en A2143G mutaties op domein V van de H. pylori
23S rDNA dat ook werd gevonden in drie H. pylori
isolaten verkregen van patiënten van de Braziliaanse staat Minas Gerais [20]. Deze resultaten samen met het optreden van partiële digestie van een 768 bp 23S rDNA PCR-fragment (figuur 1) kan indicatief maag kolonisatie van verschillende stammen van H. pylori
zijn [50].
In Minas Gerais, Brazilië, clarithromycine weerstand steeg van 4,48% in 1996 tot 19,05% in 2000 [20], waarschijnlijk door de toepassing van macroliden bij de behandeling van andere infectieziekten. Er werden geen significante verschillen in monsters bestand tegen clarithromycine volgens de periode van de studie vinden (gegevens niet getoond). Deze gegevens tonen aan dat in onze regio het voorschrijven en het gebruik van macroliden wordt niet uitgevoerd op een hoge schaal. Meer onderzoek is nodig om deze hypothese te bevestigen.
Clarithromycine weerstand vermindert de klinische werkzaamheid van claritromycine gebaseerde drievoudige therapie. Echter, zoals prevalentie van primaire resistentie van H. pylori
voor claritromycine te wijten aan de rDNA 23S A2142G en A2143G nucleotidesubstituties blijft laag in Marilia, de standaard claritromycine met triple therapie is nog steeds geldig als de meest effectieve empirische eerste lijn eradicatie voor H. pylori infectie
.
Conclusies
ontwikkelde PCR gericht op het 23S rDNA-gen van H. pylori
is snel en nauwkeurig en kan worden gebruikt als een praktische werkwijze voor de detectie van H .pylori
infectie rechtstreeks op de maag biopten. Bovendien kan de H. pylori
23S rDNA PCR verkregen fragment worden gebruikt om puntmutaties te detecteren 1728-2495 bp van de H. pylori
23S rDNA domein V geassocieerd clarithromycine weerstand. Prevalentie van primaire weerstand van H. pylori
voor claritromycine als gevolg van 23S rDNA A2142G en A2143G nucleotidesubstituties blijft laag in Marilia, waardoor de standaard claritromycine met triple therapie is nog steeds geldig als de meest effectieve empirische eerste lijn eradicatie van H. pylori
infectie
Afkortingen
PUD.
maagzweer ziekte
CG:
Chronische gastritis

GERD:
gastro-oesofageale refluxziekte
PCR:
Polymerase kettingreactie
RFLP:
restrictiefragment lengte polymorfisme.
verklaringen
Dankwoord
Wij zijn dankbaar voor Dr. Adriana Augusta Pimenta de Barros voor haar zorg aan alle patiënten opgenomen in de studie en Alex Gusmão da Silva voor zijn bijdrage in de uitvoering van de statistische analyse. Dit werk werd ondersteund door de Fundação de Amparo een Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP), Research Grants 03 /01223-0, 08 /01394-4; Fellowships RABL 2008 /01395-0, GACL 2005 /02482-6, THH 2003 /03675-7.
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen. 12876_2013_1025_MOESM1_ESM.pdf Authors 'originele bestand voor figuur 1 Concurrerende belangen Ondernemingen De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende rente.
Auteurs bijdragen
RBS voerde de verwerking van de monsters, moleculaire studies, interpretatie van de gegevens en meegewerkt aan het ontwerp van het manuscript. RABL, GACL en THH voerde de moleculaire studies en heeft bijgedragen aan de verwerving en interpretatie van moleculaire data; MAS ontwierp de experimenten, hebben bijgedragen aan data-analyse en de opstellers van het manuscript. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Ongedifferentieerde-type adenocarcinoom van de maag: prognostische impact van drie histologische types
• Veiligheid en de voorlopige resultaten van de peri-operatieve chemotherapie en hypertherme intraperitoneale chemotherapie (HIPEC) voor hoog-risico maagkanker patients