Mechanisme vun gastroprotection vun methanol Extrait vun Melastoma malabathricum Blieder

Mechanisme vun gastroprotection vun methanol Extrait vun Melastoma malabathricum VerfÜgung Blieder VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Melastoma malabathricum VerfÜgung L. (Melastomaceae) eng kleng shrub mat verschiddenen Medikamenter benotzt gëtt. Déi heiteg Etude war duerchgefouert der gastroprotective Mechanisme vun methanol Extrait vun M. malabathricum VerfÜgung Blieder (MEMM) an deër ze bestëmmen. VerfÜgung Method VerfÜgung d'Mechanismussen an d'Extrait vun gastroprotection (50, 250, 500 mg /kg) mat der pylorus-ligation zu Grenzwäerter Modell studéiert Hellef Volumen, pH, gratis a Ganzen Aciditéit vun gastric Jus, an gastric Mauer mucus Inhalt sech huet. D'Abannung vun endogenous nitric It (NO) an sulfhydryl (néirens) awer am gastroprotective Effet vun MEMM goufen och gemooss. MEMM zu der neier Étude ënnerworf war, anti-demagogesch an phytochemical Analyse an HPLC profiling. VerfÜgung Resultater VerfÜgung MEMM aus verschiddenen phyto-Atomer mat quercitrin als Deel vun hinnen identifizéiert ginn. MEMM an quercitrin: i) bedeitend (p &Si besteet; 0,05) reduzéiert d'Volumen a Aciditéit vun gastric Jus iwwerdeems de pH an gastric Mauer mucus Inhalt waarden .; II) bedeitend (p &Si besteet; 0,05) iwwerdribblen fir de Niveau vun SOD, GTP an GTR iwwerdeems vill (p &Si besteet; 0,05) den Niveau vun CAT, MPO an TBARS Aktivitéiten reduzéiert .; III) Nofolleg gastroprotective Aktivitéit wann Dir d'Ethanol-entschlof gastric oppent assay évaluéieren, déi vun N G-nitro-l-arginine Duerch Kris géinge verschlëmmeren (L-NAME réckgängeg war; en inhibitor vun KENG synthase) an N VerfÜgung - ethylmaleimide (Nem; e sulfhydryl (néirens) Blocker). MEMM inhibited der lipoxygenase (LOX) an xanthine oxidase (XO) Aktivitéite mat der héchster Affinitéit fir de fréieren iwwerdeems quercitrin héich Affinitéit fir XO Aktivitéit huet. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung MEMM engem gastroprotective Aktivitéit Schatzkummer wéinst deelweis zu der Presenz vun quercitrin, seng neier Étude an Anti-demagogesch Aktivitéiten, an iwwer d'modulation vun KENG a néirens Gruppen. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Melastoma malabathricum VerfÜgung Melastomaceae Methanol Gastroprotective Mechanismen Nitric It Sulfhydryl Grupp neier Étude Anti-demagogesch Background Extrait VerfÜgung Peptic ulcers sinn eng gemeinsam Stéierungen vun der ganzer gastrointestinal TRACT. Vu bal 8 bis 10% vun der globaler Bevëlkerung vun peptic ulcers betraff, ronn 5% vun hinnen aus gastric ulcers leiden [1]. D'ulcers datt d'gastrointestinal System Afloss ginn normalerweis duerch e Mëssverhältnis tëscht zerstéierende an defensive Facteuren am Mo. [1] Carlton. Obwuel den multifactorial Krankheet considéréiert, ass et gefält generell dass bal all peptic ulcers un d'Wonn vun Helicobacter pylori VerfÜgung an de grousse therapeutesch Zil verbonne sinn ass den H. pylori VerfÜgung Wonn ze stellen. Moment, ass den éischte-Linn medezineschen Traitement vun gastric oppent viséieren eradicating H. pylori VerfÜgung Wonn an normalerweis baséiert op dräi Behandlung Prozedur, wat d'Benotzung vun gastric oppent inhibitors (dh histamine H 2-antagonists Équipe, Proton Pompel inhibitors, oder sucralfate an Bismut) a Kombinatioun mat zwou Zorte vun Antibiotiken [2]. Mä de Fait datt et verschidde Facteuren aner wéi H. pylori VerfÜgung datt gastric oppent Opstellung ausléisen kann sollt net ignoréiert ginn [3]. Verschidde Approche gewiescht an der Behandlung vun gastric oppent verbonne mat deenen Net-H benotzt. pylori VerfÜgung -related Facteure wéi Seier secretion reduzéieren an mucus Produktioun waarden mä dës Approche gewiescht wéi déi zweet-Linn Behandlung erauskoum. VerfÜgung Trotz hir Effizienz an eradicating H. pylori VerfÜgung, d'Behandlung komplex ass a vun deier, d'Benotzung vun op d'mannst zwee Antibiotiken a Kombinatioun mat gastric Seier inhibitors sensibiliséieren. Dëst geschéckt bewierkt oft puer onpassend Säit Effekter (i.e. Antibiotike Resistenz, um Terrain, benotzen) [2,3]. Trotz der Tatsaach, datt H. pylori VerfÜgung Aids hunn graduell uechter d'Majoritéit vun den industrialiséierte Länner Fro äntwerten, e moderate Erhéijung vun Echec vun H. pylori VerfÜgung Kampf Behandlungen ass soss observéiert [2]. Dëst ass wäit vun der Associatioun vun deene Standard antiulcer Agenten mat verschiddenen onpassend Säit Effekter ëmmer. An Contrepartie vun hirem verschiddenste ongewollt Effekter an d'Optriede vun Antibiotike-resistent H. pylori VerfÜgung analyséieren, d'Sich no neien a sécher Net-Antibiotike gastroprotective Agenten aus natierleche Quelle, besonnesch Planzen, weiderhin an der ganzer Welt ze klammen [2, 4]. VerfÜgung Ee vun de Planzen, déi benotzt ginn gastric oppent zu Malaysia unzegesin ass Melastoma malabathricum VerfÜgung L. (Famill Melastomaceae). Lokal fir d'Malaiesch bekannt als "Senduduk VerfÜgung", M. malabathricum VerfÜgung ass Iwwerfloss am Indeschen Ozean Island, an South an Südwestlech Asien, Taiwan, China, Süd-Pazifik an Australien fonnt. Verschiddenen Deeler vun der Planz an Malaiesch traditionell Medikamenter benotzt eng Rei vu ailments mat de Blieder unzegesin, besonnesch, zeréckgegraff gastric ulcers ënner anerem [5] unzegesin. Wëssenschaftler hunn, hunn de M. malabathricum VerfÜgung Deeler gi verschidde pharmacological Aktivitéiten ze weise gemellt [5-7]. Aner ewéi fir hir traditionell benotzen als antiulcer Agent, war M. malabathricum VerfÜgung am Moment Etude baséiert op de Fait gewielt, dass et eent vun de bekannteste Kraider zu Malaiesch Medikamenter Folklore ass, mee dobäi opgepasst Opmierksamkeet ënnert der Communautéit. Desweideren, M. malabathricum VerfÜgung huet gemellt ginn héich total phenolic Inhalt ze enthalen an héich neier Étude an Anti-demagogesch Aktivitéiten [5-7] ze huele, wat an de Mechanisme vun antiulcer vun all awer /dovu wichteg sinn. Et ass bekannt, datt gastric oppent, besonnesch déi vun Ethanol induce, ass mat Ros Generatioun assoziéiert. Ethanol penetrates séier d'gastric mucosa wéi et ass, konnt d'Schutzpatrounin Panz ze solubilize a bewierkt der Verëffentlechung vun hydroperoxy-fräi Radikaler an superoxide anion. Dës fräi Radikaler Cause eng Erhéijung vun oxidative Stress an Stoffer, déi am Tour, Erhéijunge vum Niveau vun malondialdehyde, engem Bewaacher vun fräi Lipid peroxidation. Insgesamt kann Ethanol-entschlof Liewer Effekt direkt via Generatioun vun reaktiv metabolites oder indirekt aner Mechanismen via Aktivéierung Ausdrock ginn, datt endlech oxidative Schued Iwwerleeung [7]. Dofir, dovu /awer mat antioxidants Aktivitéit spillen eng ganz wichteg Roll, déi fräi Radikaler op scavenging an Lipid peroxidation inhibit. An lieu vun deem, M. malabathricum VerfÜgung ass eng formidabel neier Étude Aktivitéit [7] an, also huele Untersuchungshaft, ass ugeholl antiulcer Potential ze besëtzen. Eis virdrun Kontroll vun methanol Extrait vun M. malabathricum VerfÜgung (MEMM) fir antiulcer Potential géint ethanol- an indomethacin-entschlof gastric oppent Modeller ass soss gemellt [8]. MEMM gouf fonnt Ethanol-entschlof zu attenuate, mä indomethacin-entschlof, gastric oppent Opstellung Carlton. D'Kapazitéit vun MEMM huele souwuel d'gastroprotection an Anti-demagogesch Aktivitéiten [5] ass am Géigesaz zu deem vu indomethacin, déi just anti-demagogesch Aktivitéit Nofolleg. Dës Blumm schéngt ze schloen, dass den Extrait gastroprotection via e Mechanismus activéiert déi net zu deem vun Anti-inflammation verbonnen ass. Desweideren, kéint den anti-demagogesch Aktivitéit vun MEMM méiglecherweis aus der vun indomethacin Nofolleg ee ënnerscheet. eng inhibitor souwuel COXs ginn (i.e. COX-1 an COX-2), indomethacin ass méi selektiv fir COX-1, wat fir oprecht Schutzpatrounin gastric mucosal futti néideg ass [9]. D'Kapazitéit vun MEMM indomethacin-entschlof gastric oppent Équipe ze rechnen hindeit datt MEMM kéint och COX-1 Aktioun inhibited a mat der Opstellung vun konstitutiven PG Amëschung datt d'gastric mucosa ënner anerem ze schützen hëllefen. Op der aner Hand, d'Kapazitéit vun MEMM anti-demagogesch Aktivitéit ze huele kéint ginn wéinst senger Fähegkeet d'COX-2-ofhängeg Äntwert mat der carrageenan-entschlof Grenzwäerter d'Patt edema Test verbonne zu inhibit [5; 9]. Aner wéi déi, MEMM och contrarily PGE vun activating COX-2, Virwaat gestiermt kéinten Aarbecht 2 Synthes, déi gemellt gouf zu engem vu senge kenne, déi PGE receptor 4 (EP vun bindend anti-demagogesch Aktivitéit ze huele 4) [10]. Ausserdeem, huet PGE 2 bekannt ginn Virleefer fir d'Équipe vun cyclopentenone prostaglandins (cyPG) ze ginn, dass anti-demagogesch [11] enormen. Desweideren, déi ëmmer d'PGE 2 Synthes, wat dann hëlt de gastric mucus Produktioun ze aktivéieren, kënnt via d'Aktivatioun vun der EP 3 kenne [10] geschéien. Dëst kéint erëm hëllefen d'Fähegkeet vun MEMM erklären vermëttelt anti-demagogesch Aktivitéit iwwerdeems, an der selwechter Zäit, antiulcer Aktivitéit géint de ethanol- noutwänneg, awer net indomethacin-entschlof Modell. Trotz dësen Virschléi, ass kee Versuch huet den méiglech Mechanisme vun gastroprotection vun MEMM ze bestëmmen, déi benotzt ginn hätt d'observéiert antiulcer Aktivitéit ze erklären. VerfÜgung Berécksichtegung vun de genannte-ernimmt Rapport [8] an aner Rapporte gemaach vun Hussain et al. [6], déi de antiulcer Potential vun meng Extrait vun M. malabathricum VerfÜgung benotzt nëmmen ee Modell vun gastric oppent (i.e. Ethanol-entschlof Modell), der aktueller Enquête gemeet goufen évaluéieren. Obwuel M. malabathricum VerfÜgung nach ni an der Behandlung vun H. pylori VerfÜgung Wonn benotzt ginn, déi vun hir aarmséileg antibacterial Aktivitéit ënnerstëtzt gëtt [12,13], d'traditionell Gebrauch vun der Planz fir d'Behandlung vun gastric oppent justifiéieren der Presenz Fuerschung mat Hoffnung eng Alternativ /natierlech gastroprotective Agent als Ersatz fir de Moment sinn Säit Effekt-baring Drogen an der zweeter-Linn Behandlung benotzt get. mat verschiddenen deër Modeller. VerfÜgung Method VerfÜgung Chemesch VerfÜgung D'Chemikalien an dëser Etude benotzt gi vun analytesch hierer Alles dëser Tatsaach Rechnung, déi heiteg Etude anzeschätzen op der méiglech Mechanisme vun gastroprotection vun MEMM ze ermëttelen an hat virbereet ginn direkt virun benotzen. Déi folgend Drogen sech benotzt: ranitidine (Fläch Aldrich, USA), quercitrin (Fläch Aldrich, USA), absolute Ethanol (Fischer Wëssenschaftlech, USA), N-ethylmaleimide (Panda) (Fläch-Aldrich, USA), N G -nitro-l-arginine Duerch Kris géinge verschlëmmeren (L-Numm) (Fläch-Aldrich, USA), carbenoxolone (CBX) (Fläch-Aldrich, USA) an diethyl ETHER (Fischer wëssenschaftlech, USA). VerfÜgung Plant Material Kollektioun a Virbereedung vun MEMM VerfÜgung d'Blieder vun M. malabathricum VerfÜgung sech tëscht August a September 2010 aus Serdang, Selangor, Malaysia, a bestëmmt eng Schlaang aus dem Institut vun Bioscience (IBS), Universiti Putra Malaysia (UPM) gesammelt, Serdang, Selangor, Malaysia. E Bong specimen, ACP-0017, gouf bei der Herbarium vun der IBS, UPM, Malaysia verschéckt. De Buedem gedréchent Blieder (40 g) sech am Verhältnis vun 1:20 mat methanol fir 24 h dräi Mol bei Raumtemperatur eenzock (w /v) an der methanol supernatant verdämpt war (40 ° C) ënnert reduzéiert Drock ze dryness geplatzt engem Rendement vun 12.8 g gedréchent an Rouleau methanol Extrait (Prozentsaz Kriseperiod ≈ 32% war). VerfÜgung Phytochemical Schädel an HPLC Analyse vun MEMM VerfÜgung d'phytochemical Schädel an d'HPLC Analyse vun MEMM war no der virdrun gemellt Method standing [ ,,,0],7]. Phytochemical Kontroll vun MEMM war duerchgefouert der Präsenz vun flavonoids, triterpenes ze bestëmmen, tannins, Alkaloïden an saponins no der konventionell Ëmwelt- ëmschriwwen below.i) Flavonoids
Ongeféier 10.0 g vun MEMM getrennt gekachten war fir 2 bis 3 min zu 100 ml vu Waasser an e Waasser-Bad. Bis 3 ml vun der filtrate, 3 ml vun Seier-Alkohol (Ethanol: Waasser: Konzentratioun Salz- Seier an d'Verhältnis vun 1: 1: 1), staark Magnesium (1 cm) an 1 ml vun T-amyl-Alkohol notéiert goufen. D'Dampgemësch sech dann observéiert fir eng rose-orange oder verstoussen Faarf change.ii) Triterpenes
Ongeféier 1.0 g vun MEMM getrennt war fir 24 h am ETHER ofgebaut. 1 ml vun der filtrate war bis dryness verdämpt an der Ermächtegung an e puer Drëpsen acetic anhydride redissolved an dann e puer Drëpsen an heiansdo Schwiewel-Seier goufen zu der Léisung notéiert. D'Dampgemësch sech dann fir eng gréng Faarf change.iii observéiert) Tannins
ongeféier 0,2 g vun MEMM getrennt war an 5 ml vu Waasser gekacht. D'Dampgemësch waren gi si an Filter. E puer Drëpsen (3 Drëpsen) vun 5% ferric Mord Léisung huet fir d'filtrate notéiert a fir eng blo-schwaarz Manéier formation.iv) Alkaloïden
ongeféier 0,5 g vun MEMM war separat mat 10 gekachten observéiert ml vu no Salz- Seier (Alkohol) an engem Test Rouer fir 5 min. D'Dampgemësch waren gi si an de Protokoll ze plënneren erlaabt. All vun der supernatant Flëssegkeeten war an aneren Test Rouer Filter an 1 ml vun all filtrate war berücksichtegt déi dräi Drëpsen Dragendorff d'reagent (KaliumiodidPëlle Bismut Kaliumiodid Léisung) ugebaut, Hënt a observéiert fir den Optrëtt vun engem orange-roude Fleck an enger Manéier formation.v) Saponins
ongeféier 0,2 g vun MEMM war mat Waasser huelen an d'Mëschung war fir eng unhalend Mousse observéiert. déi HPLC Analyse vun MEMM VerfÜgung Leeschtung war no der viregter Rapport [4 ] awer mat liichte Ännerungen. An dowéinst, MEMM (10 mg) war an 1 ml methanol gespaart. D'Léisung war duerch e filter Patroun (pore Gréisst vun 0,45 μm) virun Analyse huet. D'Filter Prouf war mat der HPLC System analyséiert aus der Waters Delta 600 mat 600 spiller, photodiode vill heescht (Waters 996). An engem Phenomenex Luna (5 μm) (Torrance, CA, USA) Kolonne (4,6 mm i.d. × 250 mm). Zwee Léisungsmëttelen mat den A an B hunn fir elution vun den Atomer benotzt. E war 0,1% meng formic Seier an B war acetonitrile. Initialen ware 95% A a 5% B mat engem linear packt 25% B op t wäitreechend VerfÜgung 12 min an dësem Zoustand = war fir 8 min haten. B gouf reduzéiert zréck bis 15% op t VerfÜgung = 22 min an op dëser Bedéngung fir aner 8 min (t VerfÜgung = 30 min) haten. Op t VerfÜgung = 35 min, hannescht de Programm fir d'éischt Léisungsmëttelbad Zesummesetzung. De Flux Taux benotzt gouf 1.0 ml /min an der Sprëtz Volumen war 10 μl. D'Kolonn Uewen war bei 27 ° C Formatioun an der eluent bei 210, 254, 280, 300, 330 an 366 nm iwwerwaacht gouf. D'Reklassement Mol, Héichpunkt Beräicher an UV Spektre vun de groussen Moundalpen goufen analyséiert. D'HPLC Analyse gouf zu Laboratoire vun Phytomedicine, Medikamenter Planze Division, Forest Research Institut vu Malaysia (FRIM), Kepong, Malaysia gemaach VerfÜgung hun Déieren VerfÜgung Männlech Sprague Dawley deër (180-200 g;. 8-10 70-80% Loftfiichtegkeet;; 12 h Liicht /Däischtert Zyklus) an Wochen al) huet sech aus der Veterinary Déieren Eenheetspräis, Fakultéit vun Veterinary Medezin, Universiti Putra Malaysia (UPM), Malaysia an huet ënner Raumtemperatur (27 ± 2 ° C kritt den Déieren Holding Eenheetspräis, Fakultéit fir Medezin a Gesondheet Sciences, UPM. Si huet sech mat Iessen a Waasser ad libitum VerfÜgung aus dem Ufank vun den Experimenter Pleséier. D'Etude Protokoll vum haitegen Etude war déi Déieren Haus an Benotzt Comité, Fakultéit fir Medezin a Gesondheet Sciences, UPM (: UPM /FPSK /Classeuren /BR-bräuchen /00449 ethneschen averstaane keen) abruecht. D'deër sech am Aklang mat aktuellen UPM Richtlinne fir d'Pfleeg vun Labo Déieren an ethesch Normen fir Ënnersich vun experminteller Péng am bewosst Déieren [14] ophuelen. All Experiment tëschent 09.30 an 18.30 h gehaal d'Auswierkunge vun Ëmwelt- Ännerungen ze minimiséieren. Fasting war fir 48 h virun all assays applizéiert Hellef vun deër Zougang erlaabt sech ze nëmme Waasser. VerfÜgung Entschlossenheet vun der méiglech Mechanisme vun gastroprotection vun MEMM VerfÜgung Pylorus ligation-entschlof ulceration VerfÜgung Pylorus ligation war no higeriicht ze der Method vum Shay et al. [15] mat liicht Modifikatioune. Drësseg deër sech zoufälleg an 5 Gruppen agedeelt (n = 6). Group-ech (Kontroll) war mat sengem Gefier behandelt (10% DMSO), Group-II (positiv Kontroll, ranitidine) um 100 mg /kg (po) kritt huet, Group-III, -IV a-V, sech deër behandelt mat MEMM (50, 250 an 500 mg /kg, bzw.). Pylorus ligation war standing 1 h no der Administratioun vun der Test awer op 48 h fasted deër. Ketamine HCl (100 mg /kg, intramuscular) an xylazine HCl (16 mg /kg, intramuscular) waren benotzt vun deër virun ligation vun der pylorus zu anesthetize. Eng 2 cm laang Trauer war an der beleidegt just ënnert de sternum op den Nodeel deër feieren. De Mo ausgestallt, an engem Ufang war ronderëm de pyloric sphincter an Kierf an enger knapper bestuede batter. Care gouf geholl iwwerdeems bestuede dirgaange sensibiliséieren Blutt kritt an bestuede ze verhënneren. D'beleidegt huet sutured, an der Haut war vun all Blutt Flecken oder Hals gebotzt. D'Déiere waren 6 h der ligation vun cervical dislocation geaffert. VerfÜgung Entschlossenheet vun Volumen, PH, gratis a Ganzen Aciditéit vun gastric Inhalt VerfÜgung der Mamm goufen ofgegruewen an d'Inhalter sech Headbanging eraus, gesammelt, an um 2500 Ziichter centrifuged fir 10 min. De Volume an pH vun der gastric Jus gemooss gouf a gouf duerch Srivastava et al beschriwwen gratis a Ganzen Aciditéit Estimatioun no der Method ënnerworf un. [16]. Free Aciditéit war mat 0,01 N Natrium hydroxide vun titration alles (NaOH) mat Duerch orange reagent bis d'Faarf vun der Léisung ass gielzeg. De Volume vun Buvette dobäi bemierken war. Dunn, zwee bis dräi Drëpsen phenolphthalein war dobäi an d'Léisung titrated war bis engem definitive rosa Faarf schéngt. D'total Volume vun NaOH derbäi war bemierken an dat entsprécht am Ganzen Aciditéit. Aciditéit war mat der folgender Formule berechent: $$ \\ mathrm {Aciditéit} = \\ frac {\\ mathrm {spréch} \\ kern0.5em \\ mathrm {vun} \\ kern0.5em \\ mathrm {NaOH} \\ Mol \\ mathrm {Normalitéit} \\ kern0.5em \\ mathrm {vun} \\ kern0.5em \\ mathrm {NaOH} \\ mol 100} {0,1} \\ mathrm {m} \\ mathrm {e} \\ mathrm {q} /1 $$ Estimatioun vun gastric Mauer mucus Inhalt
Gastric Mauer mucus Inhalt war vun der Method beschriwwen Corne sech et al. [17] mat liicht Modifikatioune. De Mo ass laanscht de gréissere curvature, gewien opgemaach, an zu 0,16 M sucrose /0,05 M Natrium acetate, pH 5.8 fir 2 h an 10 ml vun 0,1% Alcian Blue Beweegung. D'exzessiv Hoerfaarw war dann déi zwee successive rinses vun 0,25 M sucrose Léisung (15 min all) geläscht. De Rescht hannendrun mat der gastric mucus complexed sech fir 1 min an all 30 min November mat 0,5 M MgCl 2 fir 2 h an Hënt intermittently ofgebaut. Déi blo Extrait war dann kritesch mat gläicher Volume vun diethyl ETHER Hënt an déi doraus resultéierend Salmiakgeescht war fir 10 min bei 3600er Ziichter centrifuged. D'absorbance (sel) vun Alcian Blue an meng futti war um 580 nm mat engem spectrophotometer liesen. gastric mucosal lesion zu L-NAME Pre-behandelt deër d'Quantitéit vun Alcian Blue Extrait pro Gramm naass Mo. dann aus engem Standard rop berechent huet. VerfÜgung Ethanol-entschlof VerfÜgung D'Abannung vun endogenous NEE zu modulating den Ethanol-entschlof gastroprotective Aktivitéit huet no der Method vun Andreo et al disziplinéiert. [18], mä mat liicht Modifikatioune. Männlech deër sech zoufälleg an zwielef Gruppen ënnerdeelt (n = 6) an fasted fir 24 h awer gratis Zougang zu Waasser erlaabt. (70 mg /kg; en inhibitor vun KENG synthase) si sech dann mat Salins oder L-NAME Pre-behandelt spéit intraperitoneally (IP) an 30 min, d'Déiere scho Gefier (10% DMSO), 100 mg /kg CBX (positiv Kontroll Grupp) oder 500 mg /kg MEMM (po). Eng Stonn no der Administratioun vum Test Léisungen, war gastric oppent entschlof mat 5 ml /kg absolute Ethanol an all Gruppen. Op der aner Hand, L-Arginine (200 mg /kg) war verwalt, 30 min der Salins oder L-NAME Behandlung an, duerno 30 min méi spéit vun den Ethanol Administratioun. All deër goufen 1 HR spéider vun aussetzt diethyl ETHER geaffert. De Mo ass laanscht de gréissere curvature opgemaach der oppent Géigend (ua) ze bestëmmen, wéi déi Balan beschriwwen et al. [19]. De Prozentsaz Schutz war mat der folgender Formule berechent: $$ \\ mathrm {Protection} \\ lénks (\\% \\ riets) = \\ frac {\\ lénks (\\ mathrm {U} \\ mathrm {A} \\ \\ mathrm {Kontroll} \\ hbox {-} \\ mathrm {U} \\ mathrm {A} \\ \\ mathrm {p} \\ mathrm {r} \\ mathrm {e} \\ hbox {-} \\ mathrm {behandelt} \\ \\ mathrm {Grupp} \\ riets)} {\\ lénks (\\ mathrm {U} \\ mathrm {a} \\ \\ mathrm {Kontroll} \\ riets)} \\ mol 100 \\% $$ Ethanol-entschlof gastric mucosal lesion vun Nem Pre-behandelt deër VerfÜgung d'Engagement ze ermëttelen vun sulfhydryl (néirens) Grupp vun de modulation vun gastroprotective Aktivitéit Ethanol-entschlof, beschriwwen de Prozedure vun Andreo et al. [18] huet sech mat liicht Modifikatioune adoptéiert. D'deër sech zoufälleg an 12 Gruppen ënnerdeelt (n = 6) an fasted fir 24 h awer gratis Zougang zu Waasser erlaabt. Déi Erfarung huet mat Pre-Behandlung (i.p.) vun Salins oder Nem (10 mg /kg), e sulfhydryl (SH-) blocker. Drësseg min der Pre-Behandlung Regiment, goufen d'deër verwalte (po) mam Auto (10% DMSO), 100 mg /kg CBX (positiv Kontroll Grupp) oder 500 mg /kg MEMM vun der Administratioun vun 5 ml /kg Ethanol duerno spéider Stonn gastric ulceration zu induce. All Déieren sech geaffert 1 h der Ethanol vun aussetzt diethyl ETHER feieren. De Mo gouf geläscht an gastric Schued war ëmschriwwen virun sech. VerfÜgung Biochemical Analyse vun Mo. Stoffer VerfÜgung der macroscopic gebueden, superoxide dismutase (SOD) [20], catalase (CAT) [21], myeloperoxidase (MPO) Nexten [22], glutathione peroxidase (GTP) [23], glutathione reductase (GTR) [24] an thiobarbituric Seier reaktiv Substanzen (TBARS) [25] Aktivitéit Aktivitéiten am Mo. Stoffer d'Grenzwäerter waren gemooss. D'gastric mucosa war vun der antral Deel vun de Mo. knappen engem scrapper an gespäichert bei 4 ° C fir biochemical Estimatioun benotzt. Unzehuelen gastric mucosa war haut de mucosal homogenate (pH 7,2) ze preparéieren. D'homogenate war dann um Ziichter 3000 fir 10 min centrifuged an der supernatant war fir Analyse vun neier Étude Typ op Ethanol entschlof gastric mucosal Schued benotzt kritt. An all neier Étude Ofwier assays, ranitidine (100 mg /kg) -pretreated Grupp war den positiven Kontroll Grupp considéréiert. VerfÜgung Entschlossenheet vun SOD Aktivitéit VerfÜgung D'Aktivitéit vun SOD alles war op d'inhibition vun der Opstellung vun nicotinamide adenine baséiert dinucleotide, phenazine methosulfate an Héicht blo tetrazolium formazan [20]. Ongeféier 0,5 ml vun Otemschwieregkeeten homogenate war mat 0,4 ml vun Ethanol an chloroform Mëschung an centrifuged gemëscht. Fir d'supernatant, assay Mëschung (Natrium pyrophosphate Prellbock (0.025 M, pH 8.3), nitroblue tetrazolium, phenazine methosulphate a reduzéiert nicotinamide adenine dinucleotide (NADH)) ugebaut an incubated bei 30 ° C fir 90 ass. D'Reaktioun war déi Zousätzlech vun kennen acetic Seier verhaft a mat n VerfÜgung -butanol gemëscht. D'Intensitéit vun der Faarf vun butanol entwéckelt sech um 560 nm gemooss. D'SOD Aktivitéit war vun der Ofschloss vun inhibition vun dëser Reaktioun gemooss an ass als millimole /min /mg FAQ ausgedréckt. VerfÜgung Entschlossenheet vun CAT Aktivitéit VerfÜgung war d'Aktivitéit vun CAT colorimetrically bei 620 nm assayed wéi vun der Method vun beschriwwen Sinha [21]. D'Reaktioun Mëschung vun 1,5 ml mat 1.0 ml phosphate Prellbock (0.01 M, pH 7.0), 0,4 ml vun 2.0 M H 2O 2 an 1.0 ml vun Otemschwieregkeeten homogenate. D'Reaktioun war déi Zousätzlech vun 2.0 ml vun dichromate-acetic Seier reagent gestoppt (5% KaliumiodidPëlle dichromate a kennen acetic Seier Mëschung am Verhältnis vun 1: 3). Resultater sinn als millimole /min /mg FAQ ausgedréckt. VerfÜgung Entschlossenheet vun MPO Aktivitéit VerfÜgung D'Aktivitéit vun MPO gemooss gouf no der Method vum Bradley et al beschriwwen. [22] awer mat liichte Ännerungen. D'homogenized Echantillon waren gefruer an fir dräimol thawed a bei 40 ° C an 1500 g fir 10 min centrifuged. Ongeféier 100 μl vun der homogenized supernatant war bis 1,9 ml vun 10 mmol /L phosphate Prellbock (pH 6.0) an 1.0 ml vun 1.5 mmol /LO-dianisidine hydrochloride mat 0,0005% (w /v) H 2O dobäi 2. D'absorbance war um 450 nm op engem UV spectrophotometer an der MPO Aktivitéit zu gastric Stoffer bewäert gouf als μmoles /min /mg FAQ. VerfÜgung Entschlossenheet vun GTP Aktivitéit ausgedréckt VerfÜgung der Aktivitéit vun GTP vun der Method vun Rotruck beschriwwen gemooss gouf et al. [23] mat liicht Modifikatioune. D'Reaktioun Mëschung, déi 0,2 ml vun Texter 0,4 M, Tris - HCl Prellbock, pH 7.0, 0,1 ml vun 10 mm Natrium azide, 0,2 ml vun Otemschwieregkeeten homogenate (déi Otemschwieregkeeten zu 0,4 M Tris-HCl Prellbock, pH 7.0 homogenized), 0,2 ml glutathione an 0,1 ml vun 0,2 mm Waasserstoff Hem war dann fir 10 min bei Raumtemperatur incubated. D'Reaktioun war déi Zousätzlech vun 0,4 ml vu 10% TCA an subjection dem centrifugation Prozess verhaft. D'supernatant war fir glutathione Inhalt assayed andems Ellmans reagent (19.8 mg vun 5, 5'-dithiobisnitro benzoic Seier (DTNB) an 100 ml vun 0.1% Natrium Nitratveruerdnung). En Dokter Verschwannen ass souguer gemaach vun 6,22 × 103 μmol war benotzt d'Aktivitéit vun GTP ze bestëmmen. D'Aktivitéit Aktivitéit war als international Ënnerdeelunge vun enzymatic Aktivitéit /g vun FAQ ausgedréckt. International Wunnenge sinn als μmoles vun hydroperoxides transforméiert /min /ml vun Aktivitéit. VerfÜgung Entschlossenheet vun GTR Aktivitéit ausgedréckt VerfÜgung Den Niveau vun GTR war vun der Method vun Ellman sech [24]. Approximately1.0 ml vun supernatant war mat 0,5 ml vun Ellmans reagent (19.8 mg vun 5, 5'-dithiobisnitro benzoic Seier (DTNB) an 100 ml vun 0.1% Natrium Nitratveruerdnung) an 3.0 ml vun phosphate Prellbock (0,2 M, behandelt pH 8.0 ). D'absorbance war um 412 nm liesen an de GTR Aktivitéit war den μmoles /min /mg Otemschwieregkeeten ausgedréckt. VerfÜgung Entschlossenheet vun TBARS Inhalt VerfÜgung d'Ausmooss vun LPO vun analyséiert de Niveau vun TBARS am gastric mucosa gemooss gouf no der viregter Method [25] awer mat klengen Ännerungen. Zu 0,5 ml vun Otemschwieregkeeten homogenate, 1,5 ml vu 20% acetic Seier, 0,2 ml vun SDS an 1.5 ml vun TBA bäigebaut. Déi Mëschung ass op 4 ml mat destilléiert Waasser a gehëtzter fir 1 Stonn bei 95 ° C gemaach huet. No ofkillt gouf, 4,0 ml vun butanol-pyridine Mëschung derbäi a gutt Hënt. Dëst Mëschung ass dann um Ziichter 4000 fir 10 min centrifuged. D'Bio futti war geholl an hir absorbance war um 532 nm liesen an d'Resultater sech als n mol /g FAQ ausgedréckt. VerfÜgung Estimatioun vun FAQ VerfÜgung d'FAQ Inhalt vun der gastric Otemschwieregkeeten no der Method vun Lowry et ugeholl gouf al. [26] awer mat liichte Ännerungen. D'Otemschwieregkeeten Prouf an der Standarden (1.0 mg /ml Bovine serum albumin an duebel destilléiert Waasser) an verschiddenen Krunn sech mat 5.0 ml vun an dat (48% Natrium KaliumiodidPëlle tartarate behandelt, 2% Koffer sulphate an 3% Natrium kënne vun 1:48 (v /v)). Dunn Folin phenol reagent (1: 2) war fir d'Reaktioun Mëschung notéiert a fir 30 min bei Raumtemperatur ze stoen erlaabt. D'optesch Dicht war um 710 nm mat Waasser als reagent eidel liesen. VerfÜgung An kënschtlech anti-demagogesch Aktivitéit vun MEMM VerfÜgung A-kënschtlech Effet vun MEMM op nitric It VerfÜgung Zell Kultur an Stimulatioun VerfÜgung der Matière 264,7 Zell Linn (murine monocytic macrophages) (europäesch Collection vun Zell Kulturen, Porton Down, UK) gouf mat 10% vun DMEM nohalteg nà FBS, 4.5 g /L Zocker, L-glutamine (2 mm), Natrium pyruvate (1 mm), penicillin (50 U /ml) an streptomycin (50 μg /ml) a 5% CO 2 op 37 ° C. D'Zellen (4 × 10 5 Zellen /gutt) sech an enger 96-gutt zappen rakommen a fir 2 h op 37 ° C an enger CO 2 incubator incubated ausdrécken vun Zellen ze erlaben, an da ausgeléist mat stimuli (100 u /ml vun IFN-g a 5 μg /ml vun LPe) mat oder ouni d'Präsenz vun MEMM an der Konzentratioun variéieren tëscht 12.5-100 μg /ml. DMSO (Auto) benotzt gouf de MEMM ze verbidden. D'Finale Konzentratioun vun DMSO war assuréiert 0,1% vun all de Kulturen ze ginn. Zellen sech dann fir 17-20 h op 37 ° C an enger CO 2 incubator incubated. Déi war KENG Determinatioun Leeschtung vun der cultured supernatant géint d'Griess assay subjecting an déi reschtlech Zellen am gutt waren fir Zell Nuetsvolen assay getest VerfÜgung Nitrite Determinatioun VerfÜgung D'Konzentratioun vun nitrite (nee 2 . - ), war eng stabil metabolite vun nEE zu Kultur mëttelfristeg, mat der Griess assay [27] alles. Eng gläichberechtegt Volume vun Griess reagent war mat der Kultur supernatant gemëscht an der Faarf Entwécklung war um 550 nm gemooss. D'Quantitéit vun nitrite an der Kultur supernatant war baséiert op der Norm rop vun engem Natrium nitrite (0-100 μM) frësch preparéiert an deionized Waasser alles. Prozentsaz vun de KENG inhibition andems der Formel ënnert berechent war: $$ \\ mathrm {KENG} \\ \\mathrm{inhibitory}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{\\left[\\mathrm{N}{{\\mathrm{O}}_2}^{\\hbox{-}}\ ight]}_{\\mathrm{control}}*\\hbox{--} {\\left[\\mathrm{N}{{\\mathrm{O}}_2}^{\\hbox{-}}\ ight]}_{\\mathrm{sample}}}{{\\left[\\mathrm{N}{{\\mathrm{O}}_2}^{\\hbox{-}}\ ight]}_{\\mathrm{control}}*}\\times $$ 100 \\% wou; VerfÜgung * Kontroll ass de nitrite Niveau vun IFN-γ /LPe-entschlof Grupp VerfÜgung Zell Nuetsvolen VerfÜgung D'cytotoxicity vun MEMM op der cultured Zellen vun assaying der Reduktioun vun 3 bestëmmt war. - (4,5-Police-2-thiazolyl) -2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) [27]. D'MTT reagents (0,05 mg /ml) waren an steril PBS, pH 7.0 Sursis an dann notéiert an all gutt Kierzunge fir d'supernatant Stoppen. Dëst gouf fir 4 h op 37 ° C vun der incubation vun de Rescht Zellen dann déi plus vun 100 μl vun 100% DMSO an der Wells duerno d'formazan Salzer ze verbidden gemaach. D'absorbance war um 570 nm gemooss. De Prozentsaz vun Zell Nuetsvolen war no folgend Formule berechent: $$ \\ mathrm {Zell} \\ \\ mathrm {Nuetsvolen} \\ lénks (\\% \\ riets) = \\ frac {\\ mathrm {O} {\\ mathrm {D}} _ {\\ mathrm {Kontroll}} * \\ hbox {-} \\ mathrm {O} {\\ mathrm {D}} _ {\\ mathrm {Prouf}}} {\\ mathrm {O} {\\ mathrm {D}} _ All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• E Roman Method, digital Nepgen Scannen bieden KRAS Gentherapie amplification zu gastric Cancers: Abannung vun overexpressed Wildwest-Typ KRAS zu afgerappt sécher a Kriibs Zell growth
• Frankräich Profil Analyse vun diffusen-Typ gastric cancers