Plasma mRNA Ausdrock Niveau vun BRCA1 an TS als potentiell predictive biomarkers fir Chimiotherapie zu gastric cancer

Plasma mRNA Ausdrock Niveau vun BRCA1 an TS als potentiell predictive biomarkers fir Chimiotherapie zu gastric Kriibs VerfÜgung méiglech VerfÜgung Objective- VerfÜgung Privatauto Chimiotherapie baséiert op predictive biomarkers kann Efficacitéit schreift. Allerdéngs, an der Zäit vun der éischter Diagnos kritt entholl Otemschwieregkeeten wäert net bei der Zäit vun Krankheet Werdegang observéiert genetesch hire Restaurant spigelen. Mir iwwerpréift hunn, ob Plasma mRNA Niveauen an en chemosensitivity engem GPA fir entholl Niveauen kënnen. VerfÜgung Method VerfÜgung An 150 gastric Kriibs Patienten, mRNA Niveau vun BRCA1 an TS sech zu Plasma évaluéieren an entholl Otemschwieregkeeten vläit. De Mann-Whitney U-Test gouf benotzt fir mRNA Ausdrock Niveau tëscht entholl Echantillon suer- kënschtlech VerfÜgung Empfindlechkeet oder Resistenz zu docetaxel an pemetrexed vergläichen. All Statistik Tester goufen zwee-eesäitegen VerfÜgung Resultater VerfÜgung bedeitendst kennenzeléieren tëscht Plasma an entholl mRNA Niveau vun BRCA1 (Rho = 0,696, P &Si besteet; 0.001) Et goufen. An TS (Rho = 0,620, P &Si besteet; 0.001). BRCA1 Niveauen an Plasma (docetaxel-senisitive: 1,25; docetaxel-resistent: 0,50, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) an entholl (docetaxel-senisitive: 8,81; docetaxel-resistent: 4,88, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) sech positiv mat docetaxel Empfindlechkeet assoziéiert. TS Niveauen an Plasma (pemetrexed-senisitive: 0,90; pemetrexed-resistent: 1,82, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) an entholl (pemetrexed-senisitive: 6,56; pemetrexed-resistent: 16,69, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) sech negativ verbonne mat pemetrexed Empfindlechkeet. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Plasma mRNA Ausdrock Niveauen déi an der entholl Spigel an eng villverspriechend Roll als potentiell predictive biomarkers fir Chimiotherapie hun kann. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Plasma mRNA Gastric Kriibs Chemosensitivity Predictive uweist HDRA Erschléisse VerfÜgung D'Norm éischte-Linn Chimiotherapie regimen fir lokalen avancéiert oder metastatic gastric Kriibs ass cisplatin oder oxaliplatin mat aner Drogen kombinéiert, dorënner docetaxel an pemetrexed [1], [2]. Allerdéngs, Steiren Iwwerliewe bleift hongreg - ëm ee Joer. Nee Standard Approche fir zweet-Linn Therapie gëtt, obwuel docetaxel puer Aktivitéit gewisen huet [3]. Personaliséiert Chimiotherapie baséiert op der mRNA Ausdrock vun predictive biomarkers kéinten hëllefen Behandlung Efficacitéit an verlängeren Iwwerliewe vun deene Patienten [3] schreift -. [8] Broscht Kriibs waat Gentherapie 1 (BRCA1), e wesentleche Bestanddeel vun der Pluralitéit DNA Schued gefléckt VerfÜgung Weeër a Weeër an bewosst Äntwerte microtubule Schued Équipe, gëtt als eng Ënnerscheed modulator vun Iwwerliewe mat cisplatin an taxanes gin. Preclinical a Krankheete Studien hu bericht, dass BRCA1 Niveau vun entholl mat cisplatin an taxanes chemosensitivity verbonnen ass. Entholl mat héije Ausdrock vun BRCA1 ass 800-ze-méi wéi 1000-fantastesch géintiwwer docetaxel, mä 10-1000-fantastesch resistent cisplatin [4]. Mir hun virdrun observéiert datt BRCA1 mRNA Niveauen am effusions negatif mat Platin Empfindlechkeet verbonne waren awer positiv mat docetaxel Empfindlechkeet vun gastric Kriibs Patienten verbonne [5]. Dës bruet huet an gastric Patienten validéiert Erhalen zweet-Linn docetaxel: Steiren Iwwerliewe 9,5 Méint zu deene mat niddereg BRCA1 Niveauen am primäre entholl war, 19,1 vun deene mat mëttlerem Niveauen, a 25,8 Méint an déi mat héijen Niveauen (P VerfÜgung = 0,006 ) [3]. Pemetrexed ass eng nei Zort vu Waasser-soluble quinazoline Quartier analog, Akten als direkten a speziell thymidylate synthase (TS) inhibitor. Low Ausdrock vun thymidylate synthase (TS) huet gemellt gi mat Äntwert ze pemetrexed-baséiert Therapie an haett Kriibs [7], [8]. VerfÜgung entholl Otemschwieregkeeten ass déi grouss Quell fir uweist Examen am Moment verbonne ginn. Allerdéngs, an mol entholl Otemschwieregkeeten vläicht fir Gentherapie Ausdrock Analyse genuch ginn. Desweideren, kann net spigelen der Zäit vun der éischter Diagnos kritt entholl Otemschwieregkeeten genetesch hire Restaurant op d'Zäit vun Krankheet Werdegang observéiert [9], zënter metastatic an alleréischter erhéijen aus dem selwechten Patient am Frankräich, epigenetic an transcriptomic Niveauen variéiere kann [9] - [ ,,,0],13]. Ausserdeem, initial Chimiotherapie vläicht selwer Gentherapie Ausdrock Niveauen [14], [15] ofzeänneren. Libre entholl Zell-gratis definitiv Saieren kéint also eng nëtzlech, Net-invasiv Hëllefsprogramm fir Noféierung Ännerungen am Laf vum Traitement ginn [10], obviating de Besoin fir eng nei-Fro der Zäit vun de beschten Behandlung bestëmmend. Ausserdeem, kann et engem nëtzlech GPA ginn, wann nëmmen e klenge Betrag vun entholl Otemschwieregkeeten disponibel ass. Eis virdrun Erfahrung an haett Kriibs bewisen, dass epidermal Wuesstem Faktor receptor (EGFR) kennen serum eng gutt predictive Bewaacher fir Hëftprothes Kriibs Patienten inhibitors Erhalen EGFR tyrosine kinase kéint [16]. Ausserdeem, kann Plasma TS mRNA virum Agrëff fonnt Net-invasively am Blutt ginn an der Ausdrock Niveau vu Plasma TS hat groussen Potential wéi predictive biomarkers fir raltitrexed Empfindlechkeet vun gastric Kriibs [17]. Fir Datum, ass awer wéineg iwwert d'Potential Gebrauch vu Plasma mRNA bekannt fir chemosensitivity vun docetaxel an pemetrexed virausgesot. Desweideren, obwuel RNS an Circulatioun Verëffentlechung ass stabil [10], [18], mat am Moment sinn Methoden, just eng kleng Quantitéit vun mRNA kann aus Plasma oder serum kritt ginn, déi souwuel d'Efficacitéit vun mRNA Reduktioun an d'Konsequenz vun mRNA assays Limite [10]. am Moment studéieren VerfÜgung, adoptéiert mir e praktescht a praktesch Method fir ze erkennen Plasma mRNA, baséiert op RNS Offäll a grouss RT-Hinnen alleguer (qRT-Hinnen alleguer), a benotzt dës Method ob Niveauen Plasma mRNA ze kontrolléiere kann engem GPA fir entholl Niveauen ginn chemosensitivity zu virausgesot -. éischt an engem Pilot Etude vun 40 Patiente an dann an engem total Kohort vun 150 Patienten VerfÜgung spontan a Methoden VerfÜgung kennen VerfÜgung vun Oktober 2010 bis Juli 2011, 150 frësch -removed gastric erhéijen a vläit Blutt Echantillon aus der selwechter Patienten goufen aus de Chiffer vu Zukunft a General befënnt, opzebréngen Tower Spidol, Nanjing, China kritt. All d'Patienten hunn keng Chimiotherapie virum Agrëff dobäi. Déi frësch gastric erhéijen a Blutt Echantillon waren um 4 ° C gehaalen a bannent 15 Minutten vun Kollektioun op de Labo geschéckt. D'Etude VerfÜgung gouf duerch den institutionnelle IFLA- Kritik Verwaltungsrot vun opzebréngen Tower Hospital guttgeheescht gehéiert zu der Medical School vun Nanjing Universitéit, a schrëftlech informéiert Averständnes war vun all Patienten gëtt. All Déier Experiment am Aklang mat der chinesescher Koordinatioun Comité op Cancer Research Spillconditiounen fir d'Wuel vun Déieren an d'Déieren Protection Law gesuergt. All analyséiert, dorënner och Medellin Empfindlechkeet Testen, Gentherapie Ausdrock Analyse an Déier Experimenter, goufen déi verschidde Enquêteuren duerchgefouert individuell ouni Wëssen vun de Resultater vun den aneren Observatiounen ze handele. VerfÜgung Design Sécuritéit VerfÜgung Mir éischt e Pilot studéieren an 40 duerchgefouert Patienten (Dorënner 1A). Dorënner S1: Fir all entholl Echantillonen, Empfindlechkeet op docetaxel an pemetrexed war 1 kënschtlech VerfÜgung vun histoculture Drogenofhängeger Äntwert assay (HDRA) [19] an am VIVO VerfÜgung vun xenografts zu immunodeficient Maus Modeller [20] (Zousätzleche Fichier iwwerpréift , AB sinn online). Zousätzlech, souwuel d'Maus xenografts an der Original frësch entholl Echantillon waren formalin-fix a paraffin-Ënnerbewosstsinn (FFPE) fir d'Analyse vun BRCA1 an TS mRNA Ausdrock. BRCA1 an TS Ausdrock ass och an der vläit Blutt Echantillonen analyséiert. Figur 1 Flow Charts Patient Laun a Experimenter weisen gesuergt. Pilot Etude vun 40 Patiente (A) an total Kohort vun 150 gastric Kriibs Patienten (B). VerfÜgung Baséierend op d'Experienz vun de Pilot Etude, déi mir eis Conclusiounen am Ganzen Kohort vun 150 gastric Kriibs Patienten (Dorënner 1B ze validéieren ). An dëser Kohort, goufen d'selwecht Prozeduren duerchgefouert, mat der Ausnam vun der zu VIVO VerfÜgung Testen vun chemosensitivity. D'mRNA Niveauen an Plasma an FFPE entholl Stoffer vun BRCA1 an TS sech évaluéieren an de Mann-Whitney U-Test benotzt gouf mRNA Ausdrock Niveau tëscht entholl Echantillon ze vergläichen suer- kënschtlech VerfÜgung Empfindlechkeet oder Resistenz zu docetaxel an pemetrexed. VerfÜgung fir komplett Detailer vun all Methodologie, gesinn Weider Fichier 1, sinn online. VerfÜgung an kënschtlech VerfÜgung chemosensitivity an de Pilot studéieren an der Fresh entholl Stoffer VerfÜgung total Kohort goufen zu 4 ° C Hanks "ausgeglachen zu de Labo geschéckt Salz Léisung mat 1% penicillin /streptomycin. Uplanzen sech mat Hanks "ausgeglachen Salz Léisung zweemol an Schwéngs- an kleng Stécker vun ongeféier 10 mg gewäsch, wat dann an op déi bereet collagen Fläch plazéiert goufen 24-gutt microplates. Placke waren fir 7 Deeg op 37 ° C an der Präsenz vun Drogen opgeléist mat RPMI 1640 mëttelfristeg wouvun 20% An et Kallef serum incubated an zu engem humidified Atmosphär huet 95% Loft-5% CO mat 2. Konzentratioune vun Drogen waren 100 μg /ml fir docetaxel [21], an 400 μg /ml fir pemetrexed [7]. HDRA Prozedure goufen duerch Furukawa a Kollegen als gemellt standing [19] mat liicht Modifikatioune. inhibition Tarif (%) = (1-T /C) x 100, wou T der absorbance vun behandelt entholl /Gewiicht mengen ass an C ass d'mengen absorbance vun Kontroll entholl /Gewiicht: d'inhibition Taux war mat der folgender Formule berechent. mat dem Mindestloun P VerfÜgung Wäert Method All Echantillon waren an sensibel a resistent Gruppen klassifizéiert als vun Lausen a Schumacher geännert [22]. VerfÜgung An VIVO VerfÜgung chemosensitivity an de Pilot Etude VerfÜgung All frësch-geläscht chirurgesch entholl Otemschwieregkeeten nees Stécker vun 3 × 3 × 3mm geschnidde gouf 3, dee bannent 30 Minutten zu 9-18 athymic immunodeficient Mais transplantéiert goufen, als eng "erschéngt". An all erschéngt, wann der entholl zu enger Gréisst vun 50-100 mm gewuess 3, Mais mat xenografts ze behandelen zoufälleg sech mat docetaxel 15 mg /kg /d, IP oder pemetrexed 20 mg /kg /d, IP oder kee Behandlung (Kontroll). Individuell entholl Bänn (V) sech duerch d'Formel "V = (Längt × Breed × Breed) /2" berechent an am Verglach zu de Wäerter um Ufank vun Behandlung der famill entholl Volumen ze kréien. Paracetamol behandelt-ze-Kontroll Wäerter vu Familljemembere entholl Volumen sech als "inhibition Taux vun VIVO VerfÜgung" an sech agesat Empfindlechkeet op docetaxel oder pemetrexed ze bewäerten. VerfÜgung mRNA Ausdrock vun de Pilot studéieren an de ganzen Kohort VerfÜgung Two milliliters vun Blutt waren zu héich Krunn virum Agrëff, huet bei 4 ° C an geschéckt un den Labo bannent 15 Minutten gesammelt. Total RNS aus Plasma war mat TRIzol LS an chloroform Quecksëlwer, a sidd mat der PureLink RNS Mini Kit (Ambion, Karlsbad CA, USA). Total RNS aus FFPE entholl Stoffer war am Aklang mat enger propriétaire Prozedur (europäesche Brevet Zuel EP1945764-B1) ofgebaut. No RNS erauszéien an Offäll, M-MLV Réckproduktioun Transcriptase Kit (Invitrogen, Karlsbad CA, USA) war benotzt cDNA ze generéieren fir Q-Hinnen alleguer den Ausdrock vun β-actin z'entdecken (ACTB - benotzt als endogenous Kontroll) an de Genen iwwerpréift . All Kéier vun Reaktioun och eng positiv Kontroll vun kommerziell Mënsch haett an Liewer RNS (Stratagene, La Jolla, CA, USA) als calibrators an negativ Kontrollen ouni RNS an ëmgedréint transcriptase. Schabloun cDNA war mat spezifesche primers an Ämter Kick mat Taqman Universal Master Mix (Obwuel Biosystems, Foster City, CA, USA). Relativer Gentherapie Ausdrock quantifications sech no der Komparativ CT Method berechent. Finale Resultater goufen vun der Formel mRNA Ausdrock sech Niveau = 2 - △△ CT [6], [23] an huet sech mat der Stratagene Software analyséiert VerfÜgung Reproducibility a Stabilitéit vun der Gentherapie Ausdrock assay zu Plasma VerfÜgung. d'reproducibility vun der Gentherapie Ausdrock assay war gläichzäiteg mat zwou Methoden getest. Fir d'éischt Method, Blutt Echantillon aus fënnef Patienten goufen aus dem éischten Dag un de fënneften Dag virun Agrëff an der selwechter Zäit all Dag gesammelt. Während dëser Zäit, scho Patienten weder Chimiotherapie nach extra Behandlung. Gene Ausdrock Niveauen (Héich /Tëscherapport vs niddereg) huet fir all Prouf sech, an de Prozentsaz vun identesch Resultat war fir all Patient berechent. Fir d'zweet Method, Blutt war eemol all eenzel vun engem zousätzleche zéng Patiente zréckgräifen, an all Prouf war zu fënnef aliquots ënnerdeelt. Gene Ausdrock Niveauen (Héich /Tëscherapport vs niddereg) huet fir all aliquot sech, an de Prozentsaz vun identesch Resultat war fir all Patient berechent. D'reproducibility Taux wéi den Duerchschnëtt vun all 15 Prozentzuelen (5 Patienten aus Method een an 10 Patienten aus Method zwee) definéiert war. VerfÜgung Fir d'Stabilitéit vun der Bluttprouwen, verschidden Plasma aliquots vun der selwechter Prouf ze Test sech bereet ënner verschidde Konditiounen. Aliquots sech fir 30 min, 1 h bei Raumtemperatur oder op Äis incubated, 1,5 h oder 2 h. qRT-Hinnen alleguer deemools gesuergt, an Matière ΔCt Wäerter vu verschiddene Gentherapie sech am Verglach mat der Norm Protokoll (ΔCt = CT Gentherapie-CT ACTB). VerfÜgung statistique Analysë VerfÜgung De Mann-Whitney U- Test an der Kruskal-Wallis Test sech ze Test Associatiounen tëscht mRNA Niveauen a Krankheete Beméien an tëscht Empfindlechkeet op all chemotherapeutic Agent a Krankheete Charakteristiken benotzt. D'Spearman Geleeënheet Korrelatioun Test war fréier d'Korrelatioun tëscht zu VIVO VerfÜgung an kënschtlech VerfÜgung inhibition Tariffer an tëscht Plasma an entholl mRNA Ausdrock Niveauen ze bewäerten. De Mann-Whitney U-Test gouf benotzt fir mRNA Ausdrock Niveau tëscht entholl Echantillon suer- kënschtlech VerfÜgung Empfindlechkeet oder Resistenz zu docetaxel an pemetrexed vergläichen. Receiver Fonctionnementskäschten Charakteristiken (ROC) Kéieren waren Sensibilitéit ze bewäerten gebaut, Spezifizitéit, a jeweilege ënnert de Kéieren (AUCs) mat hire 95% Vertraue Intervalle (Direktiven ugeet). Mir propagéieren der optimiséiert präventive Wäert fir Cepheid vun der Zomm vun Empfindlechkeet a Spezifizitéit Autofuerer bedeit a kucken de globale Fehler (Feld Wuerzel vun der Zomm [1-Empfindlechkeet] 2 + [1-specifi Stad] 2) , an déi vun der Distanz vum präventive Wäert fir d'Top-lénks Eck vun der ROC rop kucken [24]. All Statistik Tester goufen zwee-eesäitegen, a Bedeitung war um P VerfÜgung &dra setzen; 0,05 (two-eesäitegen). All analyséiert goufen benotzt SPSS gesuergt, Versioun 16,0. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Charakteristiken vun all Patienten sinn an Table 1. D'Majoritéit vun de Patienten dës Männercher waren (73.3%), an der predominant Histologie war adenocarcinoma. Wüüst-véier (62.7%) Patienten hu Etapp III Krankheet. Lymph Node Investitiounen ware präsent an 115 (76.7%) patients.Table 1 Patienten- Charakteristiken VerfÜgung charakteristesche
Pilot Etude
Total Kohort *
N = 40 VerfÜgung VerfÜgung N = 150
N (%)
N (%)
Alter TNT, Steiren (Gamme) 63 VerfÜgung (40-83)
64 (29-84) VerfÜgung Sex VerfÜgung Männlech VerfÜgung 31 (77.5) VerfÜgung 110 (73.3) VerfÜgung Weiblech VerfÜgung 9 (22.5) zu 40 (26.7)
entholl Site VerfÜgung Distal Mo. VerfÜgung 12 (30,0) 57 VerfÜgung (34.0) VerfÜgung Proximal Mo. VerfÜgung 19 (47,5) 62 (41,3)
Lait Mo. VerfÜgung 9 (22.5) zu 37 (24.7) VerfÜgung Etapp VerfÜgung ech VerfÜgung 4 (10.0) zu 17 (11.3) VerfÜgung II VerfÜgung 9 (22.5) zu 34 (22,7) VerfÜgung III VerfÜgung 25 (62,5) 94 VerfÜgung (62.7) VerfÜgung IV VerfÜgung 2 (5.0) VerfÜgung 5 (3,3) VerfÜgung Histological Schouljoer VerfÜgung 1 VerfÜgung 0
3 (2.0) VerfÜgung 2 VerfÜgung 8 (20.0) zu 31 (20.7) VerfÜgung 3 VerfÜgung 22 (55.0) zu 71 (47.3) zu Bréissel 1-2
0 VerfÜgung 2 (1,3) zu Bréissel 2-3 VerfÜgung 10 (25.0) zu 43 (28.7) VerfÜgung Lymph Node Metastasen VerfÜgung Nee VerfÜgung 9 (22.5)
35 (23.3) VerfÜgung Jo VerfÜgung 31 (77.5) VerfÜgung 115 (76.7) VerfÜgung * déi total Kohort vun der original 40 Patiente an de Pilot Etude plus eng zousätzlech 110 Patienten abegraff ofgeschloss. VerfÜgung d'reproducibility vum Plasma mRNA erkennen war 92% fir BRCA1, an 89% fir TS. D'mRNA Ausdrock Niveauen sech stabil an der Raumtemperatur oder Äis incubation fir 30 min, 1h, 1,5 h an 2 h (Zousätzleche Fichier 1: Dorënner S2, sinn online). VerfÜgung Pilot Etude VerfÜgung Empfindlechkeet op docetaxel an pemetrexed war erfollegräich an der 40. frësch entholl Echantillon vun HDRA évaluéieren. Eelef Brieder vun immunodeficient Mais (9-18 Mais pro erschéngt, 148 Mais am Ganzen) mat Mënsch-ofgeleet xenografts sech aus all 40 chirurgesch uplanzen fir an VIVO VerfÜgung Analyse vun Empfindlechkeet erfollegräich etabléiert. D'Spearman Geleeënheet Korrelatioun Test e wesentleche Korrelatioun tëscht kënschtlech VerfÜgung an VIVO VerfÜgung inhibition Tariffer fir docetaxel (Rho = 0,900, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) zougedréckt a pemetrexed (Rho = 0,836, P VerfÜgung &Si besteet 0.001) (Zousätzleche Fichier 1;: Dorënner S3, AB, sinn online) VerfÜgung BRCA1 mRNA Niveauen an all 40 entholl Echantillon erfollegräich évaluéieren goufen, an 32 vläit Bluttprouwen, an zu 10 Brieder vun Maus Modeller, iwwerdeems TS mRNA Niveauen. sech zu all 40 entholl Echantillonen, all 40 Bluttprouwen, an 9 Brieder vun Maus Modeller erfollegräich évaluéieren. D'Spearman Geleeënheet Korrelatioun Test weisen eng Korrelatioun tëscht Plasma an entholl mRNA Niveau vun BRCA1 (Rho = 0,647, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) an tëscht Plasma an entholl Niveau vun TS (Rho = 0,615, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) (Weider Fichier 1: Dorënner S4, AB, sinn online). Béid Plasma an entholl BRCA1 Niveauen sech mat docetaxel Empfindlechkeet soll (Rho = 0,492, P VerfÜgung = 0,004 an Rho = 0,527, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001 bzw.), a béid Plasma an entholl TS Niveauen mat pemetrexed Resistenz soll ( Rho = -0,627, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001 an Rho = -0,443, P VerfÜgung = 0,004, respektiv, Spearman Geleeënheet Korrelatioun Test) (Zousätzleche Fichier 1: Dorënner S5, AD, sinn online). BRCA1 mRNA Niveau méi héich, an d'docetaxel-senisitive wéi an der docetaxel-resistent Maus Modeller (11.26 vs 2,63; P VerfÜgung &Si besteet; 0.001), während TS Niveau méi héich, an d'pemetrexed-resistent wéi an der pemetrexed-senisitive Mais ( 3,34 vs 7,27; P VerfÜgung = 0,013, Mann-Whitney U-Test) (Zousätzleche Fichier 1: Dorënner S6, AB, sinn online) VerfÜgung Total Kohort VerfÜgung BRCA1 an TS mRNA Ausdrock erfollegräich zu entholl évaluéieren war. Stoffer aus all 150 Patienten. Der Detektioun Taux zu Plasma huet 82,00% fir BRCA1 an 90,67% fir TS. Table S1, sinn online: D'mengen mRNA Niveauen an Plasma an entholl ginn an Weider Fichier 1 gewisen. Et war kee groussen Veräin tëscht Medeziner Beméien an der mRNA Ausdrock Niveau vun BRCA1 oder TS (P > 0,05). VerfÜgung engem positive Korrelatioun tëscht Plasma an entholl mRNA Niveau vun BRCA1 (Rho Et war = 0,696, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001) an TS (Rho = 0,620, P VerfÜgung &Si besteet; 0,001, Spearman Geleeënheet Korrelatioun Test) (Dorënner 2A-B). Nee Differenzen an baseline Charakteristiken huet laut Plasma mRNA Niveauen, entholl mRNA Niveauen observéiert, oder kënschtlech VerfÜgung chemosensitivity. Figur 2 kennenzeléieren tëscht Plasma an entholl mRNA Ausdrock Niveau vun (A) BRCA1 a (B) TS zu 150 gastric Kriibs Patienten. Et war e wesentleche Korrelatioun tëscht Plasma an entholl mRNA Ausdrock Niveaue vu béiden Genen (P VerfÜgung &Si besteet; 0,001 bzw.) VerfÜgung BRCA1 Niveauen an Plasma (docetaxel-senisitive:. 1,25; docetaxel-resistent: 0,50, P
&si besteet; 0.001) an entholl (docetaxel-senisitive: 8,81; docetaxel-resistent: 4,88, P VerfÜgung &si besteet; 0.001) sech mat docetaxel Empfindlechkeet positiv assoziéiert. BRCA1 Niveauen an Plasma an entholl sech méi an der docetaxel-senisitive wéi an der docetaxel -resistant Grupp. TS Niveauen an Plasma (pemetrexed-senisitive: 0,90; pemetrexed-resistent: 1,82, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) an entholl (pemetrexed-senisitive: 6,56; pemetrexed-resistent: 16,69, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) sech negativ mat pemetrexed Empfindlechkeet assoziéiert. TS Niveauen an Plasma an entholl sech manner an der pemetrexed-senisitive wéi an der pemetrexed-resistent Grupp. (Well 3A-D, Mann-Whitney U-Test). Figur 3 Am kënschtlech chemosensitivity verbonne mat Plasma an entholl Ausdrock Niveau vun BRCA1and TS zu 150 gastric Kriibs Patienten. BRCA1 Niveauen an Plasma (A) an entholl (B) waren héich an de docetaxel-senisitive wéi an der docetaxel -resistant Grupp. TS Niveauen an Plasma (C) an entholl (D) goufen ënneschten an der pemetrexed-senisitive wéi an der pemetrexed-resistent Grupp. D'Linnen mat an de Këschte mat de medians. D'Schnurres vun Këscht Diagrammen:. SE, 95% CI VerfÜgung Empfindlechkeet vun chemosensitivity en gounge vun 63% bis 71% vum Plasma a vun 70% op 78% fir entholl mRNA. Spezifizitéit gounge vun 78% op 90% fir Plasma an 79% fir entholl mRNA (Table 2, Dorënner 4) .Table 2 Empfindlechkeet a Spezifizitéit vun Plasma an entholl Gentherapie Ausdrock Niveau fir d'Cepheid vun chemosensitivity VerfÜgung Gene Ausdrock VerfÜgung
Chemotherapeutic Agenten
N
optimal präventive
Empfindlechkeet
Spezifizitéit
AUC (95% CI) VerfÜgung VerfÜgung P
Plasma VerfÜgung BRCA1 VerfÜgung Docetaxel VerfÜgung 123 VerfÜgung 0,76 VerfÜgung 63% zu 90% VerfÜgung 0.77 (0.67-0.87) VerfÜgung &Si besteet; 0,001 VerfÜgung TS VerfÜgung Pemetrexed VerfÜgung 136 VerfÜgung 1,01 VerfÜgung 71% zu 78% VerfÜgung 0.78 (0.69-0.87) VerfÜgung &Si besteet; 0,001 VerfÜgung entholl VerfÜgung BRCA1 VerfÜgung Docetaxel VerfÜgung 123 VerfÜgung 6,09 VerfÜgung 70% zu 79% VerfÜgung 0,75 (0.66-0.84) VerfÜgung &Si besteet; 0,001 VerfÜgung TS VerfÜgung Pemetrexed VerfÜgung 136 VerfÜgung 8,08 VerfÜgung 78% zu 79% VerfÜgung 0.83 (0.76-0.90) VerfÜgung &Si besteet; 0,001 VerfÜgung Dorënner 4 ROC Kéiren d'Sensibilitéit an Spezifizitéit vun Plasma an entholl Gentherapie Ausdrock weist an chemosensitivity en . (A) BRCA1 an docetaxel (n = 123); (B) TS an pemetrexed (n = 136). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Am Moment studéieren, BRCA1 an TS mRNA Niveauen an Plasma huet mat Niveauen an vläit FFPE entholl Otemschwieregkeeten soll. BRCA1 an TS mRNA Niveauen am souwuel Plasma an entholl sech mat kënschtlech VerfÜgung chemosensitivity frësch explanted gastric Kriibs assoziéiert. Desweideren, zougedréckt Plasma mRNA Niveau bedeitend Empfindlechkeet a Spezifizitéit vun chemosensitivity virausgesot. Geholl zesummen, dëse Conclusiounen weg datt Plasma mRNA entholl mRNA Spigelen a vläicht e nëtzlechen Outil fir en chemosensitivity beweisen. VerfÜgung D'Method mer etabléiert Plasma mRNA z'entdecken, baséiert op RNS Beräicherung vun Offäll Kolonne, erméiglecht méi genee, sensibel an reproducible erkennen , méi einfach ze bedénge a séier Resultater [10], [25], et machbar Iddi Gentherapie Ausdrock Analyse zu Dag Medeziner Praxis [25] bruecht. der kontaminéierte mRNA vun Net-entholl Quellen, wéi ageschalt lymphocytes, stromal Zellen oder libre entholl Zellen, kann nett [26] Allerdéngs, aus [10], [27] a vläicht deelweis erklären firwat d'Korrelatioun tëscht Plasma an entholl Ausdrock ass manner wéi perfekt. VerfÜgung Desweideren, entholl heterogeneity och fir e puer Verännerlechkeet Kont kann. Spezifizitéit gounge vun 78% op 90% fir Plasma iwwerdeems 79% fir entholl. D'manner perfekt Spezifizitéit vun entholl gin kann och wéinst der heterogeneity vun der entholl Otemschwieregkeeten selwer, wat fir en Sensibilitéit fir d'Benotzung vun Plasma mRNA weider Ënnerstëtzung léint. VerfÜgung rezenten Etuden der Zell-gratis mRNA Ausdrock vu verschiddene Genen iwwerpréift hunn, dorënner TS [28], β-catenin [29], hTERT [26], [30], [31], CK19 [32], [33], MUC1 [34], CXCR4 [35], Bmi-1 [35 ], Her-2 [36] an DKK1 [24], hunn dës Studie fir fréi Diagnos op de Gebrauch vun Zell-gratis mRNA do, entholl Stadium an Krankheet iwwerwaacht. Am Géigesaz, fir déi bescht vun eisem Wëssen, déi heiteg Etude ass d'éischt d'Potential Roll vu Plasma mRNA fir en docetaxel an pemetrexed chemosensitivity vun zolidd erhéijen ënnersicht. Eis Conclusiounen proposéiere eng villverspriechend Roll fir Plasma mRNA Ausdrock wéi engem predictive uweist zu gastric Kriibs an déi Beweiser fir de Gebrauch vu Plasma mRNA an ouni déi néideg Chimiotherapie fir Patiente Auswiel fir s-Fro der Zäit vun Krankheet Werdegang. Ausserdeem, kann Plasma mRNA beweisen och nëtzlech fir Patiente Iwwerwachung am neoadjuvant oder adjuvant Kader behandelt ginn. D'Behandlung plangen fir dës Patienten no hirem mRNA chemosensitivity Profil generéiert ginn. Zum Beispill, kann gastric Kriibs Patienten mat nidderegen Niveau vu Plasma TS mRNA mat pemetrexed-baséiert Chimiotherapie behandelt ginn, während déi mat héijen Niveau vu Plasma BRCA1 vu Behandlung mat docetaxel profitéiere kéint. VerfÜgung Trotzdeem, solle mer drun, dass eiser Etude hu vläicht puer Aschränkungen. Déi aktuell Etude baséiert op Patienten, déi Therapie-granzt sinn. Vun Sammelt hirem Plasma virum Agrëff an erhéijen richteg no gesin, kéint mir bewisen Plasma mRNA Wäert fir Patiente Iwwerwachung vun der neoadjuvant oder adjuvant Kader behandelt ginn. Dunn, Chimiotherapie d'Detectioun Empfindlechkeet a Wäert vun plécke an mRNA libre vum Ufank Investitiounen besonnesch fir Patiente reservéiert zweeter Linn ass nach onkloer. Elo sinn déi Saachen déi mir och weider studéieren op Patienten mat Investitiounen eraus a kann net rischteg feieren oder zweet Linn Chimiotherapie ze kréien. Mir wäerten d'läscht Resultater zu der nächster Zukunft hunn déi den Inhalt verwisen enthale wäerten. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung An Conclusioun, Plasma mRNA Ausdrock Niveau vun BRCA1 an TS kéint déi vun der entholl Spigel an eng villverspriechend Roll als potentiell hutt vläicht predictive biomarkers fir docetaxel an peretrexed zu gastric Kriibs. Dës bruet ginn virleefeg an nëmmen suggestiv op dësem Punkt, a jidwereen vun dësen vläit uweist-Chimiotherapie hypotheses muss validéiert ginn, ier an Iddi Dag Medeziner Praxis benotzt ginn. E Medeziner Prozess ass de Moment fir entworf ginn d'Roll vun ugebueden Behandlung ze validéieren baséiert op de Plasma mRNA Ausdrock vun BRCA1 an TS. VerfÜgung Weider Fichier VerfÜgung Notes VerfÜgung Jie Shen, Jia Wei matgehollef gläich un dëser Aarbecht. VerfÜgung Deklaratioune VerfÜgung Arbeschterlidder VerfÜgung Dëst Wierk war déi Subventioune vun der National Natural Science Foundation of China (Stipendie Nr 81401969, 81300339) ënnerstëtzt, den Major International (Regional) Gemeinsam Research Project vu China (Grant Nr 81220108023 ), an Top Six Talenter Project vun Jiangsu Province (Grant Nr 2011ws005). Aarbecht am Labo Dr Rosell d'ass deelweis duerch Subventiounen aus La Caixa Foundation finanzéiert. VerfÜgung Roll vun der Finanzéierung Quell VerfÜgung D'Finanzéiere Quellen hu keng Roll an der Etude Design, Daten Kollektioun, analyteschen, Daten Interpretatioun, oder schrëftlech vun de Rapport VerfÜgung Electronic zousätzlecht Material VerfÜgung 12967_2014_355_MOESM1_ESM.doc Weider Fichier 1:. Zousätzlecht Method. Table S1. Mengen mRNA Niveauen an Plasma an entholl. Figur S1. Original entholl a vläit Maus xenografts. (A) D'Wirklechkeet vun der als adenocarcinoma festgestallte original entholl mat deelweiser Panz Zell carcinoma. (B) vläit xenografts zu immunodeficient Mais, bestätegt duerch hematoxylin-eosin staining. Et huet kee groussen morphological Differenzen tëscht der original entholl Prouf an der vläit xenografts an der Maus Modeller. Figur S2. Confirmatioun vun der Stabilitéit vum Plasma mRNA. Plasma mRNA Niveau vun all de Genen huet stabil no fir verschidde Konditiounen ënnerworf ginn. Figur S3. Kennenzeléieren tëscht kënschtlech VerfÜgung an VIVO VerfÜgung inhibition Tariffer fir (A) docetaxel a (B) pemetrexed an de Pilot studéieren. Figur S4. Korrelatioun tëschent Plasma an entholl mRNA Ausdrock vun (A) BRCA1 (n = 32) an (B) TS (n = 40) an de Pilot studéieren. Figur S5. Kennenzeléieren tëscht mRNA Ausdrock Niveauen an an eng kënschtlech VerfÜgung chemosensitivity an de Pilot studéieren. (A) entholl BRCA1 an docetaxel Empfindlechkeet; (B) Plasma BRCA1 an docetaxel Empfindlechkeet; (C) entholl TS an pemetrexed Empfindlechkeet; an (D) Plasma TS an pemetrexed Empfindlechkeet. Figur S6. mRNA Ausdrock Niveauen an an VIVO VerfÜgung chemosensitivity. Mat Hëllef vun engem entholl inhibition präventive vun 50%, sech Maus Modeller opgedeelt (A) docetaxel-senisitive an docetaxel-resistent subgroups a (B) pemetrexed-senisitive an pemetrexed-resistent subgroups. BRCA1 mRNA Niveauen (dots) waren héich an de docetaxel-senisitive Grupp wéi an der docetaxel-resistent Grupp (P VerfÜgung &Si besteet; 0.001), an TS Niveauen (dots) waren héich an de pemetrexed-resistent Grupp wéi an der pemetrexed- sensibel Grupp (P VerfÜgung = 0.013). (Intrigue 666 KB) Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen d'Linken op d'Auteuren' original deposéiert Fichieren fir Biller. 12967_2014_355_MOESM2_ESM.gif Auteuren 'original Datei fir Figur 1 12967_2014_355_MOESM3_ESM.gif Auteuren' original Datei fir Figur 2 12967_2014_355_MOESM4_ESM.gif Auteuren 'original Datei fir Figur 3 12967_2014_355_MOESM5_ESM.gif Auteuren' original Datei fir Figur 4 Wettsträit Interessi VerfÜgung D'Auteuren erklären, datt si keng Competitioun Interessi hunn. VerfÜgung Auteuren 'Contributiounen VerfÜgung JS, no vir kucken, WXG an BRL der Fuerschung entworf an de Pabeier geschriwwen. JS, W, LXY, zzz, LX a CC standing der Fuerschung. YTD, XPQ an no vir kucken analyséiert Daten. Wuel an RR erausgi Pabeier. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• D'Roll vun der CCL22-CCR4 Achs am Metastasen vun gastric Kriibs Zellen an omental Mëllechstrooss Flecken
• Prognostic Auswierkunge vun 25-hydroxyvitamin D Niveauen am gastric cancer