Plasma-mRNA ekspressionsniveauer af BRCA1 og TS som potentielle prædiktive biomarkører for kemoterapi i gastrisk kræft

Plasma-mRNA ekspressionsniveauer af BRCA1 og TS som potentielle prædiktive biomarkører for kemoterapi i mavekræft
Abstract
Mål
Personlig kemoterapi baseret på prædiktive biomarkører kan maksimere effektiviteten. Dog vil tumorvæv opnået på tidspunktet for første diagnose afvige genetiske ændringer observeret på tidspunktet for sygdomsprogression. Vi har undersøgt, om plasma-mRNA-niveauer kan være et surrogat for tumor niveauer i forudsige kemosensitivitet. Salg Metoder Salg In 150 mavecancerpatienter blev mRNA-niveauer af BRCA1 og TS vurderet i plasma og parret tumorvæv. Mann-Whitney U-test blev anvendt til at sammenligne mRNA ekspressionsniveauer mellem tumorprøver udviser in vitro
følsomhed eller resistens over for docetaxel og pemetrexed. Alle statistiske tests var tosidet
Resultater
Der var signifikante korrelationer mellem plasma og tumor mRNA niveauer af BRCA1 (rho = 0,696, P < 0,001). Og TS (rho = 0,620, P < 0,001). BRCA1 niveauer i plasma (docetaxel-følsom: 1,25; docetaxel-resistent: 0,50, P
< 0,001) og tumor (docetaxel-følsom: 8,81; docetaxel-resistent: 4,88, P
< 0,001) var positivt forbundet med docetaxel følsomhed. TS-niveauer i plasma (pemetrexed-følsom: 0,90; pemetrexed-resistent: 1,82, P
< 0,001) og tumor (pemetrexed-følsom: 6,56; pemetrexed-resistent: 16,69, P
< 0,001) var negativt forbundet med pemetrexed følsomhed.
Konklusioner
Plasma mRNA ekspressionsniveauerne afspejler dem i tumoren og kan have en lovende rolle som potentielle prædiktive biomarkører for kemoterapi.
Nøgleord
Plasma mRNA mavekræft kemosensitivitet Predictive biomarkør HDRA Introduktion
standard first-line kemoterapi for lokalt fremskreden eller metastatisk mavekræft er cisplatin eller oxaliplatin kombineres med andre lægemidler, herunder docetaxel og pemetrexed [1], [2]. Men median overlevelse stadig mager - omkring et år. Ingen standard tilgang til andetvalgsbehandling eksisterer, selv om docetaxel har vist en vis aktivitet [3]. Personlig kemoterapi baseret på mRNA ekspressionen af ​​prædiktive biomarkører kunne bidrage til at maksimere behandling effekt og forlænge overlevelsen hos disse patienter [3] - [8].
Brystkræft modtagelighed gen 1 (BRCA1), en væsentlig komponent i flere DNA-skader reparation veje og veje, der er involveret i cellulære responser på mikrotubulus skader, anses for at være en differentiel modulator af overlevelse med cisplatin og taxaner. Prækliniske og kliniske undersøgelser har rapporteret, at BRCA1 niveau af tumor er forbundet med cisplatin og taxaner kemosensitivitet. Tumor med høj ekspression af BRCA1 er 800-til-mere end 1000 gange følsom over for docetaxel, men 10-1000 gange resistent over for cisplatin [4]. Vi har tidligere observeret, at BRCA1 mRNA-niveauer i udgydelser negativt var forbundet med platin følsomhed, men positivt associeret med docetaxel følsomhed i mavecancerpatienter [5]. Disse resultater blev valideret i gastrisk patienter, der fik anden-line docetaxel: median overlevelse var 9,5 måneder hos dem med lave BRCA1 niveauer i primær tumor, 19,1 i dem med mellemliggende niveauer, og 25,8 måneder hos dem med høje niveauer (P
= 0,006 ) [3]. Pemetrexed er en ny form for vandopløseligt quinazolin folat analog, virker som en direkte og specifik thymidylatsyntase (TS) hæmmer. Lav ekspression af thymidylatsyntase (TS) er blevet rapporteret at være associeret med respons på pemetrexed-baseret behandling i lungecancer [7], [8].
Tumorvæv er den vigtigste kilde til biomarkør undersøgelse på nuværende tidspunkt. Imidlertid kan tumorvæv til tider være utilstrækkelige til genekspression analyse. Desuden kan tumorvæv opnået på tidspunktet for første diagnose afvige genetiske ændringer observeret på tidspunktet for sygdomsprogression [9], eftersom metastatiske og primære tumorer fra den samme patient kan variere på genomiske, epigenetiske og transkriptom niveauer [9] - [ ,,,0],13]. Endvidere indledende kemoterapi kan selv ændre genekspressionsniveauer [14], [15]. Cirkulerende tumor cellefrie nukleinsyrer kunne således være et nyttigt, ikke-invasiv værktøj til sporing ændringer under behandlingen [10], hvorved behovet for en ny biopsi på tidspunktet for bestemmelse af bedste behandling. Desuden kan det være et nyttigt surrogat når kun en lille mængde tumorvæv er tilgængelig. Vores tidligere erfaring med lungekræft vist, at epidermal vækstfaktor receptor (EGFR) mutationer i serum kunne være en god prædiktiv markør for lungekræft patienter, der fik EGFR tyrosinkinaseinhibitorer [16]. Desuden kan plasma TS mRNA detekteres ikke-invasivt i blod før operation og ekspressionsniveauet af plasma TS havde stort potentiale som prædiktive biomarkører for raltitrexed følsomhed i gastrisk cancer [17]. Til dato, dog lidt om den potentielle anvendelse af plasma mRNA til at forudsige kemosensitivitet af docetaxel og pemetrexed. Selv om RNA frigivet i omløb er stabil [10], [18], med aktuelt tilgængelige metoder, kun en lille mængde af mRNA kan fås fra plasma eller serum, hvilket begrænser både effekten af ​​mRNA udvinding og konsistensen af ​​mRNA analyser [10].
i den foreliggende undersøgelse, vedtog vi en praktisk og bekvem metode til plasma mRNA detektion, baseret på RNA oprensning og kvantitativ RT-PCR (QRT-PCR), og brugt denne metode til at undersøge, om plasma mRNA-niveauer kan være et surrogat for tumor niveauer forudsige kemosensitivitet -. først i en pilotundersøgelse af 40 patienter og derefter i en samlet kohorte af 150 patienter
Materialer og metoder
patienter
fra oktober 2010 til juli 2011, 150 frisk -removed gastriske tumorer og parrede blodprøver fra de samme patienter blev opnået fra Institut for Onkologi og General Surgery, Drum Tower Hospital, Nanjing, Kina. Alle patienter har ikke modtaget nogen kemoterapi før operation. Den friske gastrisk tumorer og blodprøver blev holdt ved 4 ° C og sendes til laboratoriet inden for 15 minutter efter opsamling.
Undersøgelsen blev godkendt af Institutional Ethics Review Board of Drum Tower Hospital tilknyttet Medical School of Nanjing Universitet, og skriftligt informeret samtykke blev leveret af alle patienter. Alle eksperimenter dyr blev udført i overensstemmelse med den kinesiske koordineringsudvalg kræftforskningsinitiativ forordninger for dyrevelfærd og Dyrenes Beskyttelse Law. Alle analyser, herunder narkotika følsomhed testning, genanalyse og dyreforsøg, blev udført af forskellige forskere, der handler individuelt uden kendskab til resultaterne af de øvrige analyser.
Undersøgelse design
Vi først foretaget en pilotundersøgelse i 40 patienter (figur 1A). For hver tumor prøve blev følsomhed over for docetaxel og pemetrexed undersøgt in vitro
ved histoculture lægemiddelrespons assay (HDRA) [19], og in vivo
efter xenografter i immundefekte musemodeller [20] (Yderligere fil 1: Figur S1 , AB tilgængelig online). Desuden både mus xenotransplantater og de oprindelige friske tumorprøver blev formalinfikseret og paraffinindlejret (FFPE) til analyse af BRCA1 og TS-mRNA-ekspression. BRCA1 og TS udtryk blev også analyseret i de parrede blodprøver. Figur 1 Flow diagram, der viser patientens disposition og eksperimenter udført. Pilotundersøgelse i 40 patienter (A) og samlede kohorte af 150 mavecancerpatienter (B).
Baseret på resultaterne af pilotundersøgelsen, vi lovede at validere vores resultater i den samlede kohorte af 150 mavecancerpatienter (figur 1B ). I denne kohorte blev de samme procedurer gennemføres, med undtagelse af in vivo
test af kemosensitivitet. MRNA-niveauerne i plasma og FFPE tumorvæv af BRCA1 og TS blev vurderet og Mann-Whitney U-test blev anvendt til at sammenligne mRNA ekspressionsniveauer mellem tumorprøver udviser in vitro
følsomhed eller resistens over for docetaxel og pemetrexed.
for fuldstændige oplysninger om al metodologi, se Ekstra fil 1, tilgængelige online. Salg In vitro
kemosensitivitet i pilotundersøgelsen og den samlede kohorte
Friske tumorvæv blev sendt til laboratoriet i 4 ° C Hanks 'afbalancerede saltopløsning med 1% penicillin /streptomycin. Prøver blev vasket med Hanks balancerede saltopløsning to gange og hakket i små stykker på ca. 10 mg, som derefter blev placeret på præparerede kollagen overflader i 24-brønds mikroplader. Pladerne blev inkuberet i 7 dage ved 37 ° C i nærvær af stoffer opløst med RPMI 1640 medium indeholdende 20% føtalt kalveserum og holdt i en befugtet atmosfære indeholdende 95% luft-5% CO 2. Koncentrationer af lægemidler var 100 ug /ml for docetaxel [21], og 400 ug /ml for pemetrexed [7]. HDRA procedurer blev udført som rapporteret af Furukawa og kolleger [19] med små modifikationer. Inhiberingen blev beregnet ved anvendelse af følgende formel: inhiberingshastighed (%) = (1-T /C) x 100, hvor T er den gennemsnitlige absorbans af behandlede tumor /vægt og C er den gennemsnitlige absorbans af kontrol tumor /vægt. Alle prøver blev klassificeret til følsomme og resistente grupper med minimum P
værdis metode som modificeret af Lausen og Schumacher [22]. Salg In vivo
kemosensitivitet i pilotundersøgelsen
Hver frisk fjernet kirurgisk tumor vævet blev skåret i stykker af 3 × 3 × 3 mm 3, som blev transplanteret inden for 30 minutter til 9-18 athymiske immunsvækkede mus, betegnet en "panel". I hvert panel, når tumoren voksede til en størrelse på 50-100 mm 3, mus med xenografter blev randomiseret til behandling med docetaxel 15 mg /kg /d, ip eller pemetrexed 20 mg /kg /d, ip eller ingen behandling (kontrol). Individuelle tumorvolumener (V) blev beregnet ved formlen "V = (længde x bredde x bredde) /2" og sammenlignet med værdierne ved starten af ​​behandlingen for at opnå den relative tumorvolumen. Median behandlet-til-kontrol værdier for relativ tumor volumen blev kaldt "hæmning rate in vivo
" og blev anvendt til at vurdere følsomhed over for docetaxel eller pemetrexed.
MRNA ekspression i pilotundersøgelsen og den samlede kohorte
Two milliliter blod blev opsamlet i EDTA-rør før indgrebet, holdt ved 4 ° C og sendes til laboratoriet inden for 15 minutter. Totalt RNA fra plasma blev ekstraheret med TRIzol LS og chloroform og oprenset med PureLink RNA Mini Kit (Ambion, Carlsbad, CA, USA). Total RNA fra FFPE tumorvæv blev ekstraheret i overensstemmelse med en proprietær procedure (europæisk patent nummer EP1945764-B1). Efter RNA-ekstraktion og oprensning blev M-MLV revers transkriptase (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) anvendes til at generere cDNA for Q-PCR til påvisning af ekspression af β-actin (ACTB - anvendt som endogen kontrol) og generne undersøgt . Hver batch af reaktionen omfattede en positiv kontrol fra kommercielt humant lunge og lever RNA (Stratagene, La Jolla, CA, USA) som kalibratorer og negative kontroller uden RNA og revers transkriptase. Template cDNA blev amplificeret med specifikke primere og prober under anvendelse Taqman Universal Master Mix (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Relative genekspression kvantificeringer blev beregnet efter den sammenlignende Ct-metoden. De endelige resultater blev bestemt ved formlen mRNA-ekspression niveau = 2 - △△ Ct [6], [23] og blev analyseret med Stratagene software
Reproducerbarhed og stabilitet af genekspression assayet i plasma
. reproducerbarheden af ​​genekspression assay blev testet samtidigt med to metoder. For første metode blev blodprøver fra fem patienter opsamlet fra den første dag til den femte dag før operation på samme tidspunkt hver dag. I denne periode fik patienterne hverken kemoterapi eller særbehandling. Gene udtryk niveauer (høj /mellemliggende vs lav) blev bestemt for hver prøve, og procentdelen af ​​identiske resultater blev beregnet for hver patient. For den anden metode blev blod udtaget en gang hver fra yderligere ti patienter, og hver prøve blev delt i fem portioner. Genekspressionsniveauer (høj /mellemliggende vs lav) blev bestemt for hver alikvot, og procentdelen af ​​identiske resultater blev beregnet for hver patient. Den reproducerbarhed blev defineret som gennemsnittet af alle 15 procenter (5 patienter fra metode én og 10 patienter fra metode to).
For at teste stabiliteten af ​​blodprøverne blev forskellige plasma portioner af den samme prøve udarbejdet i henhold forskellige betingelser. Portioner blev inkuberet ved stuetemperatur eller på is i 30 minutter, 1 time, 1,5 time eller 2 timer. QRT-PCR blev derefter udført, og rå ACt værdier af forskellig gen blev sammenlignet med standard-protokol (ACt = Ct gen-Ct ACTB).
statistiske analyser
Mann-Whitney U- test og Kruskal-Wallis testen blev brugt til at teste forbindelser mellem mRNA-niveauer og kliniske karakteristika og mellem følsomhed overfor hver kemoterapeutisk middel og kliniske karakteristika. Spearman rank korrelation test blev anvendt til at vurdere sammenhængen imellem in vivo
og in vitro
hæmning satser og mellem plasma og tumor mRNA ekspressionsniveauer. Mann-Whitney U-test blev anvendt til at sammenligne mRNA ekspressionsniveauer mellem tumorprøver udviser in vitro
følsomhed eller resistens over for docetaxel og pemetrexed. Receiver opererer egenskaber (ROC) kurver blev konstrueret til at vurdere følsomhed, specificitet, og respektive under kurverne (AUC) med deres konfidensintervaller 95% (CIS). Vi undersøgte den optimerede cut-off værdi for forudsigelse ved at maksimere summen af ​​følsomhed og specificitet og minimere den samlede fejl (kvadratroden af ​​summen [1-følsomhed] 2 + [1-speci by] 2) samt ved at minimere afstanden mellem afskæringsværdi til det øverste venstre hjørne af ROC-kurven [24]. Alle statistiske tests var to-sidet, og signifikans blev sat til P
< 0,05 (to-sidet). Alle analyser blev udført ved anvendelse af SPSS version 16.0. Search Results Salg Karakteristik af alle patienter er vist i tabel 1. Størstedelen af ​​patienterne var mænd (73,3%), og den fremherskende histologi var adenocarcinom. Ninety-fire (62,7%) patienter havde stadie III sygdom. Lymfeknudemetastaser var til stede i 115 (76,7%) patients.Table 1 patient karakteristika
Karakteristisk
Pilotundersøgelse
Total kohorte *
N = 40

N = 150
N (%)
N (%)
Alder, år, median (interval)
63 (40-83)
64 (29-84)
Sex
Mand
31 (77,5)
110 (73,3)
Female
9 (22,5)
40 (26,7)
Tumor websted
Distal mave
12 (30,0)
57 (34,0)
proksimal mave
19 (47,5)
62 (41,3)
Hele mave
9 (22.5)
37 (24,7)
Stage
jeg
4 (10,0)
17 (11,3)
II
9 (22,5)
34 (22,7)
III
25 (62,5)
94 (62,7)
IV
2 (5,0)
5 (3.3)
Histologisk klasse
1
0
3 (2.0)
2
8 (20,0)
31 (20,7)
3
22 (55,0)
71 (47,3)
Blandet 1-2
0
2 (1.3)
Blandet 2-3
10 (25,0)
43 (28,7)
lymfeknudemetastase
Ingen
9 (22,5)
35 (23,3)
Ja
31 (77,5)
115 (76,7)
* den samlede kohorte bestod af de oprindelige 40 patienter indgår i pilotundersøgelsen plus yderligere 110 patienter.
reproducerbarheden af ​​plasma mRNA detektion var 92% for BRCA1, og 89% for TS. MRNA Ekspressionsniveauerne var stabile efter stuetemperatur eller is inkubation i 30 min, 1 time, 1,5 timer og 2 h (Yderligere fil 1: Figur S2, tilgængelig online).
Pilotundersøgelse
Følsomhed over for docetaxel og pemetrexed var succes vurderet i de 40 friske tumor prøver ved HDRA. Elleve paneler af immunsvækkede mus (9-18 mus per panel, 148 mus i alt) med humant afledte xenotransplantater blev etableret med succes fra alle 40 kirurgiske prøver til in vivo
analyse af følsomhed. Den Spearman rank korrelation test viste en signifikant sammenhæng mellem in vitro
og in vivo
hæmning satser for docetaxel (Rho = 0,900, P
< 0,001) og pemetrexed (rho = 0,836, P
<0,001) (Ekstra fil 1: Figur S3, AB, tilgængelig online)
BRCA1 mRNA niveauer lykkedes vurderet i alle 40 tumorprøver, i 32 parrede blodprøver, og i 10 paneler af musemodeller, mens TS mRNA-niveauer. lykkedes vurderet i alle 40 tumorprøver, alle 40 blodprøver, og i 9 paneler af musemodeller. Den Spearman rank korrelation test viste en korrelation mellem plasma og tumor mRNA niveauer af BRCA1 (Rho = 0,647, P
< 0,001) og mellem plasma og tumor niveauer af TS (rho = 0,615, P
< 0,001) (Yderligere fil 1: Figur S4, AB, tilgængelig online). Både plasma og tumor BRCA1 niveauer blev korreleret med docetaxel følsomhed (rho = 0,492, P
= 0,004 og rho = 0,527, P
< 0,001 henholdsvis), og begge plasma og tumor TS niveauer korreleret med pemetrexed modstand ( rho = -0,627, P
< 0,001 og rho = -0,443, P
= 0,004 henholdsvis Spearman rank korrelation test) (Ekstra fil 1: Figur S5, AD, tilgængelig online). BRCA1 mRNA-niveauer var højere i docetaxel-følsomme end i docetaxel-resistente musemodeller (11,26 vs 2,63; P
< 0,001), mens TS-niveauer var højere i pemetrexed-resistent end i pemetrexed-følsomme mus ( 3,34 vs 7,27; P
= 0,013, Mann-Whitney U-test) (Ekstra fil 1: Figur S6, AB, tilgængelig online)
Samlet kohorte
BRCA1 og TS mRNA ekspression blev succesfuldt vurderet i tumor. væv fra alle 150 patienter. Den opdagelse sats i plasma var 82,00% for BRCA1 og 90,67% for TS. De gennemsnitlige mRNA-niveauer i plasma og tumor er vist i supplerende fil 1: Tabel S1, tilgængelig online. Der var ingen signifikant sammenhæng mellem de kliniske karakteristika og mRNA ekspressionsniveauerne af BRCA1 eller TS (P > 0,05).
Der var en positiv korrelation mellem plasma og tumor mRNA niveauer af BRCA1 (Rho = 0,696, P
<0,001) og TS (Rho = 0.620, P
< 0,001, Spearman rank korrelation test) (figur 2A-B). Ingen forskelle i baseline-karakteristika blev observeret efter plasma mRNA niveauer, tumor mRNA-niveauer, eller in vitro
kemosensitivitet. Figur 2 Korrelationer mellem plasma og tumor mRNA ekspressionsniveauer af (A) BRCA1 og (B) TS i 150 mavecancerpatienter. Der var en signifikant korrelation mellem plasma og tumor mRNA ekspressionsniveauer af begge gener (P
< 0,001, henholdsvis)
BRCA1 niveauer i plasma (docetaxel-sensitive:. 1,25; docetaxel-resistente: 0,50, P
< 0,001) og tumor (docetaxel-følsom: 8,81; docetaxel-resistent: 4,88, P
< 0,001) var positivt associeret med docetaxel følsomhed. BRCA1 niveauer i plasma og tumor var højere i docetaxel-følsomme end i docetaxel-resistente gruppe. TS-niveauer i plasma (pemetrexed-følsom: 0,90; pemetrexed-resistent: 1,82, P
< 0,001) og tumor (pemetrexed-følsom: 6,56; pemetrexed-resistent: 16,69, P
< 0,001) var negativt forbundet med pemetrexed følsomhed. TS-niveauer i plasma og tumor var lavere i pemetrexed-følsomme end i pemetrexed-resistente gruppe. (Figur 3A-D, Mann-Whitney U-test). Figur 3 In vitro kemosensitivitet forbundet med plasma og tumor ekspressionsniveauer af BRCA1and TS i 150 mavecancerpatienter. BRCA1 niveauer i plasma (A) og tumor (B) var højere i docetaxel-følsomme end i docetaxel-resistente gruppe. TS-niveauer i plasma (C) og tumor (D) var lavere i pemetrexed-følsomme end i pemetrexed-resistente gruppe. Linjerne inde kasserne betegnet medianerne. De whiskers af kassediagrammer:. SE, 95% CI
Følsomhed forudsige kemosensitivitet varierede fra 63% til 71% for plasma og fra 70% til 78% for tumor mRNA. Specificitet varierede fra 78% til 90% for plasma og 79% for tumor mRNA (tabel 2, figur 4) .table 2 Følsomhed og specificitet af plasma og tumor genekspressionsniveauer til forudsigelse af kemosensitivitet
Genekspression

Kemoterapeutika
N
Optimal cut-off
Følsomhed
Specificitet
AUC (95% CI)

P
Plasma
BRCA1
Docetaxel
123
0,76
63%
90%
0,77 (0,67-0,87)
<0,001
TS
Pemetrexed
136
1,01
71%
78%
0,78 (0,69-0,87)
< 0,001
Tumor
BRCA1
Docetaxel
123
6.09
70%
79%
0,75 (0,66 til 0,84)
< 0,001
TS
Pemetrexed
136
8,08
78%
79%
0,83 (0,76-0,90)
< 0,001
Figur 4 ROC kurver viser sensitivitet og specificitet af plasma og tumor genekspression i forudsige kemosensitivitet . (A) BRCA1 og docetaxel (n = 123); (B) TS og pemetrexed (n = 136).
Diskussion
I den foreliggende undersøgelse blev BRCA1 og TS-mRNA-niveauer i plasma korreleret med niveauerne i parret FFPE tumorvæv. BRCA1 og TS-mRNA-niveauer i både plasma og tumor blev associeret med in vitro
kemosensitivitet af frisk eksplanteret mavekræft. Desuden viste plasma mRNA niveauer betydelig følsomhed og specificitet forudsige kemosensitivitet. Tilsammen disse resultater viser, at plasma mRNA spejle tumor mRNA og kan vise et nyttigt redskab til at forudsige kemosensitivitet.
Metode vi etableret at opdage plasma mRNA, baseret på RNA berigelse ved rensning kolonne, muliggør mere præcis, følsom og reproducerbar påvisning , nemmere håndtering og hurtigere resultater [10], [25], hvilket gør det muligt for rutinemæssig genekspression analyse i daglig klinisk praksis [25]. Imidlertid er kontaminering af mRNA af ikke-tumor kilder, såsom aktiverede lymfocytter, stromale celler eller cirkulerende tumorceller, kan ikke udelukkes [10], [26], [27] og kan delvis forklare, hvorfor korrelationen mellem plasma og tumor udtryk var mindre end perfekt.
Desuden tumor heterogenitet kan tegne sig for nogle variation så godt. Specificitet varierede fra 78% til 90% ved plasma mens 79% for tumor. Jo mindre perfekt specificitet i tumor kan meget vel skyldes heterogenitet tumorvæv selv, som egner yderligere støtte til anvendelse af plasma-mRNA til forudsigelse følsomhed. Nyt studier har undersøgt den cellefrie mRNA ekspression af adskillige gener, herunder TS [28], β-catenin [29], hTERT [26], [30], [31], CK19 [32], [33], MUC1 [34], CXCR4 [35], Bmi-1 [35 ], Her-2 [36] og DKK1 [24] disse undersøgelser har fokuseret på anvendelsen af ​​cellefri mRNA for tidlig diagnose, tumor staging og overvågning sygdom. I modsætning til vores bedste viden, nærværende undersøgelse er den første til at undersøge den potentielle rolle af plasma mRNA for at forudsige docetaxel og pemetrexed kemosensitivitet af solide tumorer. Vores resultater tyder på en lovende rolle for plasma mRNA udtryk som en prædiktiv biomarkør i mavekræft og fremlægge dokumentation for brugen af ​​plasma mRNA i udvælgelsen kemoterapi for patienter uden behov for re-biopsi på tidspunktet for sygdomsprogression. Derudover kan plasma mRNA også være nyttigt for at overvåge patienter, der behandles i neoadjuverende eller adjuverende. Planen for disse patienter behandling kunne genereres efter deres mRNA kemosensitivitet profil. For eksempel kan gastrisk cancer patienter med lave niveauer af plasma TS mRNA behandles med pemetrexed kemoterapi, mens dem med høje niveauer af plasma BRCA1 kunne drage fordel af behandling med docetaxel.
Ikke desto mindre bør vi konstatere, at vores undersøgelse kan have nogle begrænsninger. Den aktuelle undersøgelse er baseret på patienter, som er terapi-naive. Ved at samle deres plasma før operation og tumorer lige efter operationen, kunne vi vist plasma mRNA værdi til overvågning af patienter, der behandles i neoadjuverende eller adjuverende. Derefter påvisning følsomhed og værdien af ​​optagning cirkulerende mRNA fra tidlig metastaser især for patienter reservere anden linje kemoterapi er stadig uklart. Nu er vi også at udføre yderligere undersøgelse på patienter med metastaser og kan ikke modtage kirurgi eller modtage anden linje kemoterapi. Vi vil have de seneste resultater i den nærmeste fremtid, som vil indeholde ovennævnte indhold.
Konklusion
Afslutningsvis plasma mRNA ekspressionsniveauer for BRCA1 og TS kunne spejle dem i tumoren og kan have en lovende rolle som potentiel prædiktive biomarkører for docetaxel og peretrexed i gastrisk kræft. Disse resultater er foreløbige og kun uanstændige på dette tidspunkt, og hver af disse parrede biomarkør-kemoterapi hypoteser skal valideres, før det anvendes i rutinemæssig daglig klinisk praksis. Et klinisk forsøg i øjeblikket designet med henblik på at validere rolle tilpasse behandling baseret på plasma mRNA ekspressionen af ​​BRCA1 og TS.
Yderligere fil
Noter
Jie Shen Jia Wei bidrog ligeligt til dette arbejde.
erklæringer
Tak
Dette arbejde blev støttet af tilskud fra National Natural Science Foundation of China (tilskud nr 81.401.969, 81.300.339), Major International (Regional) fælles forskningsprojekt Kina (Grant nr 81220108023 ), og Top Seks Talents Projekt i Jiangsu-provinsen (Grant nr 2011ws005). Arbejde i Dr. Rosell laboratorium er delvist finansieret af en bevilling fra La Caixa Foundation.
Rolle finansieringskilde
Den finansieringskilder havde ingen rolle i undersøgelsen design, dataindsamling, dataanalyse, data fortolkning eller skriftligt rapporten

• Rolle CCL22-CCR4 akse i metastase af gastriske cancerceller i oment matte pletter
• Prognostiske virkninger af 25-hydroxyvitamin D niveauer i gastrisk cancer