Grënnung an characterization vun engem Metastasen Modell vu mënschlechen gastric Kriibs an Sauna mice

Grënnung an characterization vun engem Metastasen Modell vu mënschlechen gastric Kriibs an Sauna Mais VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Eng Maus Modell vun Metastasen vum Mënsch gastric Kriibs ass eng vun de wichtegsten Instrumenter fir de biologeschen Mechanismen Mënsch gastric Kriibs Metastasen ënnersicht Basisdaten. An dësem Pabeier, gegrënnt mir eng Maus Modell vun metastatic Mënsch gastric Kriibs an Sauna Mais datt eng héich Taux vun entholl Équipe an Metastasen wéi aktuell Modeller huet. VerfÜgung Method VerfÜgung der Maus Modell vun metastatic Mënsch gastric Kriibs ze generéieren, frësch entholl Stoffer vu Patienten, déi sech Agrëff fir gastric Kriibs hun sech am Recht a lénks groins vun Sauna Mais subcutaneously implanted. Wann der implanted Otemschwieregkeeten bis 1 Kubikzentimeter opgewues, huet de Mais ëmbruecht, an der entholl Stoffer goufen iwwerpréift an resected. D'entholl Stoffer sech an Sauna Mais implanted an zu agebousst Ënnersichung, immunohistochemical staining ënnerworf, an real-Zäit Hinnen alleguer fir cytokeratin 8/18 (CK8 /18), E-cadherin, wiere Zell Haftung Protein-1 (VCAM-1) an intercellular Haftung Protein-1 (ICAM-1). De Mais sech och fir Metastasen an hir peritoneum, postwendend misse Discours, an intern Organer vun histopathological Ënnersichung analyséiert. Stoffer aus dës Organer gesammelt goufen, fir wirklech iwwerpréift. VerfÜgung Resultater VerfÜgung No zéng Generatioune vun ofgestouss, all Mais entholl Wuesstem um implanted Positioun entwéckelt, 94% vun de Mais entwéckelt Metastasen zu der retroperitoneum an viscera. D'implanted an metastatic entholl haten déi selwecht histological Funktiounen iwwert all Generatiounen, an Metastasen war an der esophagus, Mo, Mëlz, Liewer, Nier, adrenal, Daarm, an Bauchspaicheldrüs observéiert. Dës metastatic erhéijen réischt kee Magnéitfeld Ausdrock vun CK8 /18, E-cadherin, VCAM-1, an ICAM-1. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Dëse Modell gëtt fir Versteesdemech der metastatic Prozess vum Mënsch gastric Kriibs als wäertvoll Hëllefsmëttel déngen.
Schlësselwieder VerfÜgung Characterization Grënnung Gastric Kriibs Metastasen Mouse Modeller Background VerfÜgung Gastric Kriibs ass déi véiert stäerkste gemeinsam malignancy an der zweeter Virwaat Ursaach vum Kriibs Doudesfäll nëmmen zu haett Kriibs an d'Welt [1]. Obwuel d'Iwwregens hätt vun Patienten mat fréi gastric Kriibs huet déi aktuell Methode vun Diagnos a Behandlung gemaach länger ginn, de 5-Joer Iwwerliewe Taux der Diagnos vun gastric Kriibs Patienten mat all Etappe ass &Si besteet; 50% [2]. Metastasen Konte vun Deel vun der héich veruerteelt aus gastric Kriibs. Den Undeel vun de Patienten mat gastric Kriibs aus peritoneum Metastasen Stierwen ass ongeféier 50% [3]. Dofir, huet Metastasen engem Schwéierpunkt vu ville gastric Kriibs Etuden ginn. Metastasen ass e ganz komplexe Prozess, mat multiplen hannereneen Schrëtt [4]. Genen mat Zell Haftung assoziéiert, motility, Prolifératioun, Survival, ukuerbelt, an Signal transduction eng wichteg Roll an Kriibs Metastasen [5-8] spillen. Wéi dës Proteinen kollektiv Aarbecht Metastasen ze förderen bleift ganz wéineg verstan. Eng Maus Modell vun metastatic gastric Kriibs VerfÜgung ass eng extrem wäertvoll Hëllefsmëttel der metastatic Prozess zu Versteesdemech. Den éischte Mënsch carcinoma Modell an Sauna Mais gouf 1969 vun Rygaard an Povlsen duerch hypodermical Transplantatioun vun mënschlëchen Colon Kriibs Otemschwieregkeeten etabléierter [9]. Obwuel d'transplantéiert entholl seng malignant Charakteristiken zréckbehalen, verluer et seng metastatic Potential, an d'Original Struktur an Behuele vun der entholl verännert [10]. A metastatic Modell vu mënschlechen Colon Kriibs éischte vun Morikawa 1988 benotzt Mënsch Colon Kriibs Zellen subserously implanted an cecum [11] gebaut. Dëse Modell huet orthotopic entholl Wuesstem a Liewer Metastasen. Furukawa weider dësem Modell vun 1993 geännert duerch surgically Mënsch gastric Kriibs Otemschwieregkeeten an der tunica serosa gastria vun Sauna Mais [12] stitching. Dëse Modell entwéckelt erhéijen robustly a weisen eng ganz héich Taux vun Metastasen un der Liewer. Zanter Stéierungen vun der Haftung vun der Otemschwieregkeeten entholl seng biologesch a malignant gelooss Mäe, beschriwwen der Maus Modeller erëmgewielt d'Integritéit vun der gesidd erhéijen fir e "Patient-gären-Modell" [13, 14]. Verdéngt, hu vill Maus Modeller vun metastatic Mënsch gastric Kriibs ginn duerch orthotopic Transplantéiere vu gastric Kriibs Otemschwieregkeeten entsteet [15-18] D'Maus Modeller vun metastatic Mënsch gastric Kriibs VerfÜgung gemellt sou wäit verkleeden Multiple Erausfuerderungen. der orthotic ofgestouss an Sauna Mais néideg Agrëff, an der implanted entholl Stoffer aus Mënsch Zell Linn gastric Kriibs ofgeleet goufen amplaz Patienten. Als Resultat, ass d'Prozedur déckt a konnt schwéier Kriis an Doud am Mais féieren. Desweideren, obwuel den Taux vun orthotopic entholl Opstellung ass bal 80-100%, den Taux vun Metastasen net esou héich; der Liewer entholl metastatic Tariffer sech bei 45-60% [16, 17] an dat mat der peritoneum op enger renger 40% [18]. Sou, Opstelle vun dësen Maus Modeller kéint aus verbessert Methoden Virdeel dass Transplantatioun méi einfach maachen hätt an zu engem méi sécherlech Metastasen Resultat. An dësem Rapport, beschriwwen mir eng Maus Modell vun metastatic Mënsch Mo. Kriibs datt d'Problemer vun virdrun Maus Modeller Adressen. Mir etabléierten eiser Maus Modell vun metastatic Mënsch Mo. Kriibs duerch subcutaneous ofgestouss vun entholl surgically direkt aus Patienten mat gastric Kriibs ofgeleet Stoffer. Am Verglach zu aner Maus Modeller virdru beschriwwen, dat Maus Modell Formen erhéijen bei engem héijen Taux a méi wichteg ass, weist sécherlech Metastasen. VerfÜgung Method VerfÜgung IFLA- Ausso VerfÜgung de All Ëmwelt- der Benotzung vun experminteller Déieren an entholl Stoffer sensibiliséieren aus Patienten mat gastric Kriibs an dëser Etude vun der Ethik Comité vun Medezin a Science Research Institut vun Gansu Province (Labo Déieren Wëssenschaft Grupp a Krankheete Prozess Grupp, Referenzmaterial Nummer: P201108150024) guttgeheescht goufen, dorënner d'guttgeheescht Programmer der Kollektioun, Ofwécklung an ofgestouss vun entholl Stoffer aus Patienten mat gastric Kriibs, an der resection, Stockage an Examen entholl Stoffer aus Sauna Mais. All Etude Participanten gëtt Awëllegung an d'Etude fir matzemaachen. VerfÜgung Déieren a Krankheete entholl Stoffer VerfÜgung BALB /C Sauna Mais bei 4-6 Wochen vun Alter an 16-18 g zu Gewiicht, souwuel männlechen wéi weiblechen, sech gëtt vun Shanghai entholl Institut an spezifesch-pathogen-gratis (SPF) Zoustand reared. Entholl Stoffer sech vu Patienten mat gastric Kriibs kritt deen Agrëff an d'Gansu entholl Hospital mécht. Déi frësch entholl Stoffer sech direkt no resection implanted. Séminairen Date vun de Patienten opgezielt ginn an Table 1.Table 1 Séminairen Donnéeën VerfÜgung Samplea
Histopathologic Klassifikatioun
Séminairen Etappen VerfÜgung Rate vun lymph Node Metastasen

1. VerfÜgung schlecht ënnerscheet adenocarcinoma VerfÜgung PT4aN3a M0 IIIc VerfÜgung 7/30 VerfÜgung 2. VerfÜgung adenocarcinoma mëttelméisseg ënnerscheet VerfÜgung PT4aN0M0 IIb VerfÜgung 0/12 VerfÜgung 3. VerfÜgung ulcerative Typ mëttelméisseg ënnerscheet adenocarcinoma VerfÜgung PT4aN0M0 IIb VerfÜgung 0/30 VerfÜgung 4. VerfÜgung schlecht ënnerscheet adenocarcinoma VerfÜgung PT4aN3a M0 IIIc VerfÜgung 16/17 VerfÜgung a1st a 4. Otemschwieregkeeten gastric Kriibs sech kaum ënnerscheet adenocarcinoma an lymph Node Metastasen hunn. 2. an 3. waren adenocarcinoma mëttelméisseg ënnerscheet a kee lymph Node Metastasen hunn VerfÜgung Subcutaneous ofgestouss vun frësch entholl Stoffer an Sauna Mais VerfÜgung Déi frësch entholl Stoffer aus Patienten mat gastric Kriibs resected sech zu 1 Kubikzentimeter stinn Stécker geschnidde déi mat DMEM verdënntem sech mëttel, an dann an d'Recht subcutaneously implanted a lénks armpits an groins vun Sauna Mais mat 16-gague Nol ënner aseptic Zoustand. All Prouf war bis véier Mais implanted, 5-6 Stécker (0,8 l) pro Maus. Der Sauna Mais sech dono zu SPF Conditioun reared, an der entholl Wuesstem op Sauna Mais war deeglech iwwerpréift. Eemol de entholl op der Sauna Mais bis 1 Kubikzentimeter ugebaut huet, war d'Maus vun cervical dislocation an der entholl Stoffer sech an aseptic Conditioun iwwerpréift an resected ëmbruecht. D'entholl Otemschwieregkeeten aus all Mais an dräi Deeler getrennt huet - ee fir weider Ronn vun ofgestouss an Sauna Mais benotzt gouf, huet den Trainer vun CK8 fir agebousst Examen an immunohistochemical (IHC) staining zu 10% formaldehyde fix /18, E-cadherin, VCAM-1, an ICAM-1, ass den drëtte zu flëssegem Stéckstoff an zu -80 ° C fir real-Zäit Hinnen alleguer Analyse vun CK8 /18, E-cadherin, VCAM-1, an ICAM-1 gespäichert. De Mais sech fir entholl Metastasen an hir peritoneum, postwendend misse Discours, Liewer, Mëlz, Mo, intestines, Nier, haett, an Gehir Leschten an iwwerpréift. Agesammelte Stoffer sech fir agebousst Ënnersichung zu 10% formaldehyde fest. VerfÜgung Grënnung an characterization vun Maus Modell vun metastatic Mënsch gastric Kriibs VerfÜgung D'Otemschwieregkeeten excised entholl war fir de Recht subcutaneously implanted an groins vun 5 Sauna Mais ënner aseptic Conditioun lénks mat 5-6 Stécker (0,8 l) pro Maus. Déi sollen an verwässeren vun entholl Otemschwieregkeeten, Wuesstem Examen an resection vun der entholl an der Sauna Mais, Stockage an Ënnersichung vum implanted entholl Stoffer, metastatic entholl Stoffer, a Maus Kierper sech considéréiert gëtt wéi uewe beschriwwen. Implanted entholl Stoffer fir zéng Generatiounen passaged goufen. VerfÜgung Effekt vun de Site vun ofgestouss waat op den Taux vun Metastasen VerfÜgung Als beschriwwen, war d'implanted Mënsch gastric Kriibs Otemschwieregkeeten aus Sauna Mais subcutaneously bei verschiddene zu dräi Gruppe vun Sauna Mais implanted Siten ënner aseptic Zoustand. An der Moyenne vun 5-6 Stécker goufen an Mais implanted, mat engem Grupp Stoffer op der rietser Säit an huet groins, déi aner Grupp op der rietser Säit an huet armpits, an den drëtten op zwou Plazen am Réck feieren. Als verwisen, Wuesstem Examen an resection vun der entholl an der Sauna Mais sech considéréiert gëtt. Weider Analysë abegraff Ënnersiche vun entholl Wuesstem op verschidden Siten an Metastasen an der peritoneum an postwendend misse Discours. VerfÜgung Aféierung an Metastasen vun virdrun gefruer an passaged Mënsch Otemschwieregkeeten gastric Kriibs an Sauna Mais VerfÜgung D'implanted Mënsch gastric Kriibs Stoffer aus véiert passaged an aachte Generatioun vun ofgestouss an Sauna Mais sech an flëssegem Stéckstoff gespäichert a subcutaneously an Sauna Mais op der rietser implanted a lénks groins wéi uewe beschriwwen. Weider Analysë abegraff Ënnersiche vun entholl Wuesstem op verschidden Siten an Metastasen an der peritoneum an postwendend misse Discours. VerfÜgung agebousst Ënnersiche vun der implanted an metastatic Mënsch gastric Stoffer aus Sauna Mais VerfÜgung D'implanted an metastatic Mënsch gastric Kriibs Stoffer aus Sauna Mais sech zu 10% formaldehyde fix, an paraffin Ënnerbewosstsinn, an Rubriken Géigewier, Kierchefënster zu Hematoxylin-eosin staining (HIEN). D'drënner waren eng Olympus BX50 Liicht microscope bewäert benotzt, an Bild Acquisitioun war vun Mias agebousst workstation 4.0 System gesuergt. VerfÜgung IHC staining VerfÜgung den Ausdrock Niveau vun E-cadherin, VCAM-1, ICAM-1, an CK8 /18 goufen duerch immunohistochemistry an der implanted an metastatic entholl Stoffer aus Sauna Mais an der chirurgesch uplanzen benotzt fir ofgestouss iwwerpréift. Sektiounen fir staining gebraucht goufen aus der chirurgesch uplanzen, déi implanted an metastatic entholl Stoffer, an Stoffer kritt datt metastatic erhéijen enthalen. Reagents fir staining benotzt goufen SP-9000 Histostain ™ -plus Trikoten, 3-3'-Diaminobenzidine tetrahydrochloride (botzt) Trikoten, Primär- Maus monoclonal antibodies géint E-cadherin (1: 200 dilution), ICAM-1 (1: 500 dilution) , an der Primärschoul Kanéngchen polyclonal antibody géint VCAM-1 (1: 500 dilution) (Peking Zhongshan Golden Bréck Déi Co Ltd., Peking, China). D'IHC staining drënner sech onofhängeg vun zwee pathologists évaluéieren, an all Differenz zu der Decisioun Resultat war vun Konsens geléist. Staining Intensitéit war als negativ, schwaach, moderéiert, oder staark évaluéieren. D'Liicht microscope an Bild Acquisitioun Software waren déi selwecht wéi uewen. VerfÜgung Total RNS erauszéien a real-Zäit Hinnen alleguer VerfÜgung Total RNS vun Trizol (Sheng gong Déi, Shanghai, China) aus dem implanted an metastatic entholl Stoffer ofgebaut gouf, datt gewuess an Sauna Mais an aus der chirurgesch uplanzen fir ofgestouss ginn, d'Instruktioune folgenden Fabrikant. D'cDNA war vun ëmgedréint transcriptase (Sheng gong Déi) Wierderbuch, laut de Recommandatiounen d'Hiersteller. D'SYBR premix Ex TaqTM (TaKaRa Déi, Dalian, China) war fir d'real-Zäit Hinnen alleguer benotzt. Déi 20-μl Reaktioun aus 10 μl SYBR premix Ex TaqTM, 1 μl DNA Skelett, 0,4 μl all primer, an 8.2 μl DH 20. D'Hinnen alleguer Vëlos Zoustand war: 37 ° C fir 5 min, 95 ° C fir 30 ass, an 40 Zykle vun 95 ° C fir 5 ass zu 60 ° C fir 30 ass. De β-actin mRNA war wéi intern Kontroll, an d'Reaktioun Mix war den negativen Kontroll ouni de Skelett DNA benotzt ginn. All vun der Echantillon waren 3 Mol onofhängeg gemooss, an déi grouss Hinnen alleguer Donnéeën sech mat der Komparativ CT Method analyséiert. Kuerz, war d'Differenz zu Zyklus loung, ΔCT, wéi d'Differenz tëschent der getest Gentherapie a mënschlech β-actin alles. Mir kritt dann ΔΔCT vun der Differenz tëschent den zwou Gruppen ze fannen. Déi fantastesch Ännerung war den 2 -ΔΔCT berechent. D'primers sinn an Table 2.Table 2 Primers an der real-Zäit benotzt opgezielt Hinnen alleguer VerfÜgung Gene
Stiermer primer
Réckproduktioun primer

β-actin
5'-TGGCACCCAGCA
5'-CTAAGTCATAGT
CAATGAA-3'
CCGCCTAGAAGCA-3'
E-cadherin
5'-GAGTGCCAACTG
5'-AGTCACCCACCT
GACCATTCAGTA-3'
CTAAGGCCATC-3'
ICAM-1
5'-TGTATGAACTGA
5'-CACCTGGCAGCG
GCAATGTGCAAGA-3'
TAGGGTAA-3'
VCAM-1
5'-GGCGCCTATACC
5'-AGAGCACGAGAA
ATCCGAAA-3'
GCTCAGGAGAA-3'
Resultater VerfÜgung entholl Équipe an Metastasen Vun de véier Mais mat der 1. chirurgesch uplanzen implanted, nëmmen ee entwéckelt entholl um Site vun ofgestouss vun 76 Deeg (Figebam. 1a) VerfÜgung. Twenty-fënnef Deeg méi spéit, war d'Maus vun cervical dislocation an analyséiert fir erhéijen ëmbruecht. Entholl Otemschwieregkeeten am Duerchschnëtt vun 1 Kubikzentimeter vun Gréisst, ugewisen eng intakt Enveloppe a schwéier Textur (Figebam. 1b). Metastasen an der retroperitoneum war vun audiovisuellem Inspektioun (Figebam. 1c) fonnt. Nee Metastasen war an hirem peritoneum, postwendend misse Discours, Liewer, Mëlz, Mo, intestines, Nier, haett, an Gehir fonnt. Figebam. 1 Metastatic entholl Wuesstem vun der implanted Otemschwieregkeeten gastric Kriibs kritt surgically (X 400). engem, b: Implanted Kriibs Otemschwieregkeeten gewuess Kubikzentimeter zu ~ 1 a ugewisen eng intakt Enveloppe a schwéier ugesin; c: entholl metastasized an der Maus retroperitoneum; d, E: De implanted Otemschwieregkeeten an metastatic erhéijen bestoung vun Pro ënnerscheet carcinoma Zellen an e puer mesenchyma Zellen a Blutt kritt, mat e puer funktionéiert glandular Discours. De Kriibs Zellen zougedréckt donkel-Kierchefënster Kären an Buch Zytoplasma an gefeelt normal Undeel tëscht ervirgaangen an Zytoplasma; f: Implanted entholl Otemschwieregkeeten einfach VerfÜgung agebousst Analyse weist verroden, datt de implanted an metastatic entholl Stoffer vun Pro ënnerscheet carcinoma Zellen ëmzesetzen, an nëmmen e wéineg vun mesenchyma a Blutt pompelen. Dëse Stoffer gesäit diffused, gefeelt Struktur, an glandular lumen gläichen. Desweideren, ugewisen d'Zellen donkel-Kierchefënster Kären Buch Zytoplasma, an misproportioned Kären an Zytoplasma (Figebam. 1d, E, f). Ähnlech Resultater goufen zu engem parallel Etude sensibiliséieren ofgestouss vun der entholl Otemschwieregkeeten an 4 Mais kritt; nëmmen eng Maus entwéckelt entholl (Duerchschnëttsgréisst: 1,5 Kubikzentimeter) 26 Deeg ofgestouss. Nee Metastasen war an hirem peritoneum, postwendend misse Discours, Liewer, Mëlz, Mo, intestines, Nier, haett, an Gehir observéiert. Wéinst Mais mat der 2. implanted a 4. chirurgesch uplanzen zougedréckt kee Wuesstem entholl. VerfÜgung Stabilitéit vun der implanted entholl folgende Passage an Multiple Generatiounen VerfÜgung der entholl, datt aus dem 1. chirurgesch specimen entwéckelt war fir zéng Generatiounen passaged. Den Taux vun entholl Wuesstem war 100% an déi vun Metastasen zu retroperitoneum an viscera war 80-100% (am Duerchschnëtt 94%), egal ob de primären Otemschwieregkeeten benotzt gouf frësch oder gefruer (Table 3). D'viscera Metastasen war an der lymph Wirbelen ronderëm esophagus, ënnert gastric mucosa, tunica serosa gastria, Mëlz, Liewer Portal Géigend, Mëtt venae an Il hepaticus, Liewer parenchyma, Liewer zréckzekommen, keen Auto hilum, Nier parenchyma, adrenal drüs Daarm serosa observéiert, Bauchspaicheldrüs, an spermaduct (Figebam. 2). D'Generatioun Zäit ass 16 days.Table 3 Stabilitéit an Taux vun Metastasen vun verschiddenen positionsa VerfÜgung verännerleche VerfÜgung implanted erhéijen VerfÜgung Nee
Wuesstem zu implanted Positioun (%)
Metastasen retroperitoneum (%)
Viscera (%)
Generation Zäit (Deeg)
Passage Zuel VerfÜgung 1. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5 ) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 80 (4/5) VerfÜgung 20 VerfÜgung 2. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 80 (4/5)
100 (5/5) VerfÜgung 14 VerfÜgung 3. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 80 (4/5) VerfÜgung 14 VerfÜgung 4. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 80 (4/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 15 VerfÜgung 5. VerfÜgung 5
100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 80 (4/5) VerfÜgung 14 VerfÜgung 6. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 80 (4/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 13 VerfÜgung 7. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5 /5) VerfÜgung 17 VerfÜgung 8. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 18 VerfÜgung 9. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 17 VerfÜgung 10. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5 /5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 18 VerfÜgung gespäichert zu flëssegem Stéckstoff VerfÜgung 4. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5)
100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 17 VerfÜgung 8. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 100 (5/5) VerfÜgung 18 VerfÜgung Aféierung an verschidden Positiounen VerfÜgung Groins VerfÜgung 50 bis 100 (50/50) VerfÜgung 94 (47/50) VerfÜgung 94 (47/50 VerfÜgung) 16 VerfÜgung Back VerfÜgung 10 bis 100 (10/10) VerfÜgung 30 (3/10) VerfÜgung 10 (1/10) VerfÜgung 20 VerfÜgung Armpits
10 bis 100 (10/10) VerfÜgung 0 (0/10) VerfÜgung 30 (3/10) 14
engem No zéng Generatioune vun ofgestouss, all Mais um entholl Wuesstem entwéckelt implanted Positioun, an 94% vun Mais entwéckelt Metastasen zu der retroperitoneum an viscera, egal ob de entholl Quell frësch oder gefruer war. D'Moyenne Zäit entholl vun dotéiert ass 16 Deeg. D'groin vun Mais ass beschte Aféierung Positioun, déi zu 94% retroperitoneum an viscera Metastasen VerfÜgung Figebam. 2 agebousst Ënnersiche vun der entholl datt de viscera (X 100) metastasized. Mikro-Metastasen war an der lymph Wirbelen ronderëm d'esophagus (e) observéiert, ënnert der gastric mucosa (b), an an anere Beräicher wéi tunica serosa gastria (c), parenchyma ënner hepatic zréckzekommen (d), Liewer Portal Géigend (E ), Il hepaticus (f), Mëlz (g), centrals venae hepatic (h), Bauchspaicheldrüs (i), keen Auto hilum (j), keen Auto parenchyma (k), adrenal drüs (l), Daarm serosa (m), spermaduct (n), an haett (o) VerfÜgung den Taux vun Metastasen vun der an verschidden Positiounen implanted entholl VerfÜgung Aféierung an verschidden Positiounen vum Taux vun Metastasen betraff, mä net den Taux vun entholl Wuesstem. Ofgestouss an der groin schéinen 94% retroperitoneum an viscera Metastasen; ofgestouss nees zréck schéinen 30% retroperitoneum Metastasen an 10% viscera Metastasen; ofgestouss an armpits schéinen keng retroperitoneum Metastasen an 20% viscera Metastasen. D'Generatioun Zäit war: 16 Deeg fir an der groins, 20 Deeg fir déi am Réck implanted implanted erhéijen, an 14 Deeg fir déi am armpits implanted (Table 3). D'metastatic viscera abegraff Liewer (50%), Nier (44%), Daarm (28%), esophagus (12%), Bauchspaicheldrüs (12%), Mo. (6%), Mëlz (6%), an spermaduct (6 %) (Table 4) .Table 4 Metastasen an der visceraa VerfÜgung Implanted Positioun
Nee
viscera Metastasen (%)
Liewer (%) VerfÜgung
Nier (%)
Daarm (%)
Esophagus (%)
Lëtzebuergesch (%)
Mo. (%) VerfÜgung
Mëlz (%)
Spermaduct (%)
Groins VerfÜgung 50 zu 94 (47/50) VerfÜgung 50 (25/50) VerfÜgung 44 ( 22/50) VerfÜgung 28 (14/50) VerfÜgung 12 (6/50) VerfÜgung 12 (6/50) VerfÜgung 6 (3/50) VerfÜgung 6 (3/50)
6 (3/50) VerfÜgung Back VerfÜgung 10 zu 10 (1/10) VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 10 ( 1/10) VerfÜgung 10 (1/10) VerfÜgung 0 VerfÜgung Armpits VerfÜgung 10 zu 30 (3/10) VerfÜgung 20 (2/10) VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 10 (1/10) VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung eng Liewer an Niere sech d'viscera mat héchsten Taux vun Metastasen (44-50%), an der Mo Mëlz an spermaduct sech déi ënnescht (6%) VerfÜgung Characterization vun der implanted an metastatic entholl VerfÜgung d'IHC an real-Zäit réischt Hinnen alleguer Resultater datt ICAM-1, VCAM-1, an CK8 /18, awer net E-cadherin, sech virun allem op Chirurgie an an der implanted entholl vun Primär- a éischte Generatioun (Lalumi ausgedréckt. 3). Wéi an Table 5 gewisen, de Primär- a éischte Generatioun vum entholl zougedréckt positive staining fir VCAM-1 an CK8 /18, mä d'Kierzunge Generatiounen zougedréckt schwaach staining fir dësen Proteinen: VCAM-1 staining war als mëttelméisseg positive Faarwen (++) an der Primärschoul, schwaach Signal (+) an der éischter Generatioun, an CK8 /18 staining war wéi schwaach Signal (+) an der éischter Generatioun stoung. Erhéijen bei all Etappe zougedréckt negativ staining fir E-cadherin hierkommen metastatic entholl bei all Generatiounen negativ staining fir E-cadherin zougedréckt, ICAM-1, VCAM-1, an CK8 /18. Wéi fir d'gët, mir VCAM-1 mRNA an de Primär- a éischte Generatioun implanted entholl fonnt mä net um metastatic Etapp. E-cadherin an ICAM-1 gët sech an all Generatiounen vun implanted an metastatic erhéijen net fonnt. Figebam. 3 IHC Analyse vun den Ausdrock vun E-cadherin, VCAM-1, ICAM-1 an CK8 /18 (X 200). CK8 /18 Ausdrock war an der chirurgesch specimen fir ofgestouss benotzt fonnt (en) an an der Primärschoul implanted entholl Stoffer (b), mee net an der F1 Generatioun implanted entholl Stoffer (c), VCAM-1 war an der chirurgesch specimen ausgedréckt ( d), an an der Primärschoul implanted entholl Stoffer (E), mee net an der F2 Generatioun implanted entholl Stoffer (f). E-cadherin Ausdrock war an der chirurgesch specimen (g) net Magnéitfeld an der Primärschoul implanted entholl Stoffer (h). ICAM-1 war an der chirurgesch specimen (i) ausgedréckt, awer net an der Primärschoul implanted entholl Stoffer (j) VerfÜgung Table 5 Expression vum E-cadherin, ICAM-1, VCAM-1 an CK8 /18 an der erhéijen um Agrëff, op ofgestouss a während Metastasen VerfÜgung verännerleche
Nee
Protein expressiona
mRNA expressiona

E-cadherin

ICAM-1

VCAM-1

CK8/18

E-cadherin

ICAM-1

VCAM-1

surgical specimen VerfÜgung 1 VerfÜgung - VerfÜgung +++ VerfÜgung +++ VerfÜgung +++ VerfÜgung primär VerfÜgung 1 VerfÜgung Implanted entholl VerfÜgung - VerfÜgung -
++ VerfÜgung + VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0,0927 VerfÜgung Metastatic entholl VerfÜgung - VerfÜgung - VerfÜgung - VerfÜgung - VerfÜgung 0 VerfÜgung 0
0 VerfÜgung 1. VerfÜgung 5 zur VerfÜgung Implanted entholl VerfÜgung - (0/5) VerfÜgung - (0/5) VerfÜgung + (5/5) VerfÜgung - (0/5 ) VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0,1997 VerfÜgung Metastatic entholl VerfÜgung - (0/5) VerfÜgung - (0/5) VerfÜgung - (5/5) VerfÜgung - ( 0/5) VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 2. ~ 10. VerfÜgung 45 VerfÜgung Implanted entholl VerfÜgung - (0/45) VerfÜgung - (0/45)
- (0/45) VerfÜgung - (0/45) VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung Metastatic entholl VerfÜgung - (0/42) VerfÜgung - (0 /42) VerfÜgung - (0/42) VerfÜgung - (0/42) VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung 0 VerfÜgung aMolecular Analyse vun der implanted an metastatic erhéijen réischt kee Magnéitfeld Ausdrock vun CK8 /18, E-cadherin, VCAM-1 an ICAM-1, ausser positive staining fir VCAM-1 an der implanted entholl Stoffer vun der éischter Generatioun VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Cancer vun Prolifératioun charakteriséiert ass, Invasioun, an Metastasen. Méi wéi 90% vun veruerteelt vu Kriibs ass zu Metastasen well doduerch enorm Recherche wourop [19]. Metastasen ass eng komplizéiert a kaum Prozess verstanen Proteinen mat Funktiounen zu Zell Haftung, ECM ofgeschnidden sensibiliséieren, an motility [19-21]. Vill Studien iwwert hunn gastric Kriibs Metastasen gemellt ginn [22-26]. Allerdéngs, nokënnt meescht vun dësen Studien huet kënschtlech gehaal, d'metastatic Prozess rescht dass zu VIVO existeiert. Dat seet ee brauch fir en Déier Modell vun Kriibs Metastasen dass e sécherlech a konsequent phenotype huet. Am Moment studéieren, e Modell vun metastatic Mënsch gastric Kriibs war vun hypodermic inoculation an Sauna Mais mat Kriibs Stoffer surgically vu Patienten mat gastric Kriibs kritt etabléiert. All Mais entwéckelt entholl Wuesstem um implanted Positioun an retroperitoneum Metastasen, an 94% vun Mais entwéckelt Metastasen zu der viscera, egal ob de entholl Quell war frësch oder gefruer. D'implanted an metastatic entholl déi selwecht Funktiounen iwwert all Generatiounen haten, an der viscera Metastasen war zu lymph Wirbelen ronderëm d'esophagus, ënnert der gastric mucosa, tunica serosa gastria, Mëlz, Liewer Portal Géigend, Mëtt venae an Il hepaticus, Liewer parenchyma observéiert, Liewer zréckzekommen, keen Auto hilum, Nier parenchyma, adrenal drüs Daarm serosa, an Bauchspaicheldrüs. Metastasen war sécherlech an dëser Maus Modell. D'retroperitoneum Metastasen méiglecherweis aus dem dissociation vun entholl Zellen aus dem implanted entholl, Aféierung an Leeschteberäich op enger Spëtzepositioun Glands virgedroen, an Transport op d'retroperitoneum. Dëst kann fir d'entholl Kont Liewer Portal Géigend, Mëtt venae metastasizing an, an Il hepaticus, souwéi an tunica serosa gastria, keen Auto hilum, adrenal of, an Daarm serosa. Metastasen hätt och duerch d'lymph Wirbelen geschitt; erhéijen waren an der lymph Wirbelen ronderëm esophagus, ënnert gastric mucosa, Mëlz, Bauchspaicheldrüs, an Niere parenchyma observéiert VerfÜgung D'Optriede vun Metastasen op de Site vun ofgestouss subcutaneously ofhängeg ze ginn ebenfalls:. ofgestouss an der groin zu 100% retroperitoneal Metastasen schéinen a 94% viscera Metastasen; ofgestouss nees zréck schéinen 30% retroperitoneum Metastasen, an 10% viscera Metastasen; ofgestouss an armpits schéinen keng retroperitoneum Metastasen an 20% viscera Metastasen. Dës Blumm ass mat Metastasen konsequent mat entholl Wuesstem microenvironment dorënner Blutt pompelen an lymph Verdeelung assoziéiert. Tatsächlech huet d'Maus groin méi Blutt kritt an lymph Netzwierker, an postwendend misse Discours an viscera Flux wéi der zréck. Obwuel d'armpits räich Blutt kritt an lymphatic Netzwierker hunn, ass d'Richtung vun der vena anterograde, an déi meescht vun lymph Verbindung mat haett, trachea an Rippenfell, Plazen, wou erfreet gastric Kriibs translocated kritt. Dofir, Resultater déi einfach Method vun subcutaneous ofgestouss vun Kriibs Zellen an der groins vun Sauna Mais effizient an engem Modell vun metastatic Mënsch gastric Kriibs. Dëse Modell huet eng héich viscera Metastasen Tarif wéi dat an der Literatur an Untersuchungshaft [13-18] a liicht ze aner Zorte vu mënschlechen Kriibs applizéiert ginn hätt. VerfÜgung entholl Invasioun mat Kierzunge vun Investitiounen ass déi grouss Ursaach vun morbidity a veruerteelt an Patienten mat Kriibs. Cancer Metastasen ass e komplexe Prozess, an deem entholl Zellen aus der Primärschoul entholl Mass trennen, opgeholl duerch d'wiere System, extravasate an aner Stoffer an wuessen an neie erhéijen [27-30]. Dorënner verschiddenste Prozesser, eng Verfall vun de Kondom Eegeschafte vun der Primärschoul entholl Zellen ass eng kritesch Faktor fir entholl Werdegang [28]. Et ass bekannt, datt Zell Haftung fir entholl Werdegang responsabel ass, sensibiliséieren Molekülle datt eng Roll am Zell-Zell Haftung an Zell-Matrixentgasung Haftung [31-34] spillen. Zell Haftung spillt eng wichteg Roll an der zwou verschidden Etappe vun der entholl metastatic Prozess - d'huele aus der Primärschoul entholl an hir Haftung fir d'circulatory System [27]. Dofir, Leeschtung Zell Haftung Molekülle enger kritescher Roll an der Invasioun an Metastasen vun enger Rei vu mënschlechen erhéijen. VerfÜgung E-cadherin spillt eng wichteg Roll an der Zell-Zell Haftung vun epithelial Stoffer [35]. Nieft senger Roll am normalen Zellen, kann dës Zell Haftung Protein eng grouss Roll an malignant Zell Transformatioun, entholl Entwécklung, an Werdegang Leeschtung. De Verloscht vun Integritéit entholl Otemschwieregkeeten kënnen ze lokal Invasioun Féierung [36]. Dofir, Verloscht vun Funktioun vun E-cadherin zu entholl Stoffer deemolegt Weltbild mat invasiveness an Metastasen vun erhéijen [37]. Ënnersich weisen, datt aberrant E-cadherin Ausdrock mat der Acquisitioun vun invasiveness a méi spezifesch entholl Etapp fir gastric Kriibs assoziéiert ass [38-40]. VerfÜgung ICAM-1 an VCAM-1 ganz wichteg Zell Haftung Molekülle zu der immunoglobulin gehéiert super Famill. D'ICAM-1 Funktiounen zu Zell-Zell an ECM Haftung, dorënner gestallt polymorphonuclear (PMN) knapper Haftung an Ziel endothelial Wanderung duerch d'lymphocyte leukocyte integrins functionassociated antigen-1 (LFA-1) (CD11a /CD18) an macrophage-1 antigen ( MAC-1) (CD11b /CD18) [41]. D'VCAM-ech mediates bewosst Haftung via integrin [42]. ICAM-1 spillt eng wichteg Roll an der Zell-Zell a Zell-ECM Interaktiounen, besonnesch entholl Invasioun an cytotoxicity vun lymphocytes. Ënnersich weisen, datt den positiven Ausdrock Taux vun ICAM-1 mat lymph Node Metastasen an Déift vun entholl Invasioun dinn huet, an der VCAM-1 Ausdrock positive gastric Cancers sech méi invasiv an sech mat méi lymph Node Investitiounen wéi VCAM-1 Ausdrock negativ assoziéiert mannste [43-45]. Cytokeratin schéngen op all epithelial Zellen, e puer Net-epithelial Zellen, an déi meescht entholl Zellen. D'cytokeratins, gehéiert zu den Zuelen Filament (WANN) FAQ Famill, sinn Primärschoul Komponente vun Horn Zellen an ënnerhält d'Organisatioun vun epithelial Stoffer. Etuden hu fonnt, dass d'cytokeratins si ganz héich conserved a wichteg fir Otemschwieregkeeten dat. Am Moment, méi wéi 20 verschidde cytokeratins hunn identifizéiert ginn [46], vun deem CK 8, 18, an 19 sinn der déi räich an einfach epithelial Zellen. Am Moment studéieren, Teamchef vum IHC an RT-Hinnen alleguer Resultat datt d'Expressioun vun E-cadherin negativ ass, an dat vun ICAM-1, VCAM-1, an CK8 /18 positiv sinn an der chirurgesch specimen fir ofgestouss ginn, konsequent mat Vergaangenheet Studien [38, 40, 43, 45]. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Resistenz vun rumen Bakterien fir Bovine gastric lysozyme murein
• Cancer-verbonne Här iwert mech selwer sinn positiv mat metastatic Potential vun mënschlech gastric Cancers soll