Anti-demagogesch, gastroprotective an Anti-ulcerogenic Auswierkunge vun rout Algen Gracilaria changii (Gracilariales, Rhodophyta) extract

Anti-demagogesch, gastroprotective an Anti-ulcerogenic Auswierkunge vun rout Algen Gracilaria changii VerfÜgung (Gracilariales, Rhodophyta) VerfÜgung méiglech ofzebauen
Background VerfÜgung Gracilaria changii VerfÜgung (Xia et Abbott) Abbott, Zhang et Xia, e roude Algen Toast am Gespréich vu Malaysia fonnt gëtt traditionell fir Liewensmëttel an fir den Traitement vun verschiddenen ailments dorënner inflammation an gastric ailments benotzt . D'Zil vun der Etude war anti-demagogesch ze ermëttelen, gastroprotective an Anti-ulcerogenic Aktivitéite vun enger Mass spectrometry methanolic Extrait vun Gracilaria changii VerfÜgung standardiséierte. VerfÜgung Method Methanolic Extrait vun Gracilaria changii VerfÜgung (MeOHGCM6 Extrait VerfÜgung ) war mat Mass spectrometry (MS) préparéiert an unerkannte. Anti-demagogesch Aktivitéite vun MeOHGCM6 Extrait sech duerch bestéet U937 Zellen während senger dat iwwerpréift mat 10 μg /ml MeOHGCM6 ofzebauen. Klinescher necrosis Faktoren-α (TNF-α) Äntwert Niveau an TNF-α an interleukin-6 (IL-6) Gentherapie Ausdrock goufen iwwerwaacht a Verglach zu datt behandelt vun 10 nm betamethasone, en Anti-demagogesch Drogenofhängeger. Gastroprotective an Anti-ulcerogenic Aktivitéite vun MeOHGCM6 Extrait sech vu 2,5 bis 500 mg /kg Kierpergewiicht (b.w.) folgenden Aféierungs- vun gastric lesions rangéiert vun erofzesetzen deër mat MeOHGCM6 Extrait iwwerpréift. Produktioun vun mucus an gastric Jus, pH vun der gastric Jus an Net-FAQ sulfhydryls (NP-néirens) Niveauen huet sech an am Verglach zu dass es vun 20 mg /kg b.w. omeprazole (OMP), e bekannte Anti-oppent Drogenofhängeger. VerfÜgung Resultater VerfÜgung MS /MS Analyse vun der MeOHGCM6 dovu réischt d'Präsenz vun Duerch 10-hydroxyphaeophorbide engem VerfÜgung a 10-hydroxypheophytin engem VerfÜgung, bekannt chlorophyll Proteinen an e puer onidentifizéierte Molekülle. Behandlung mat 10 μg /ml MeOHGCM6 Extrait während dat vun U937 Zellen vill inhibited TNF-α Äntwert Niveau an TNF-α an IL-6 Gentherapie Ausdrock. D'inhibitory Effekt war vergläichbar mat deem vun betamethasone. Nee cytotoxic Effekter sech fir Zellen mat der 10 μg /ml MeOHGCM6 Extrait behandelt opgeholl. Also mat MeOHGCM6 z'iesse Extrait um 500 mg /kg b.w. gastric lesion gesin absolute Ethanol-entschlof vun > zougedréckt reduzéiert; 99% (p VerfÜgung &Si besteet; 0,05). Dëst schützt Effekt war vergläichbar mat deem vun OMP conferred. D'pH vun der gastric mucus Verréngerung vun Portioun-ofhängeg Manéier vun 5,51 bis 3,82 an et gouf e groussen Zouhuele NP-néirens Konzentratioune. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Resultater vun der Etude weist, datt d'Mass spectrometry methanolic Extrait vun Gracillaria standardiséierte changii VerfÜgung leie anti-demagogesch, gastroprotective an Anti-ulcerogenic Eegeschaften. Weider Ënnersiche vun der aktiver integral vun den Extrait a seng Mechanismus vun Aktioun ass an der Zukunft hëllt. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Anti-demagogesch Anti-ulcerogenic Gastroprotective Gracilaria changii VerfÜgung Cytokines Betamethasone Omeprazole Seaweeds oppent Background VerfÜgung Inflammation ass eng grouss Neierung vun villen Krankheeten. Et ass vun engem Komplex vun orchestrated Interaktiounen tëschent mediators vun inflammation an demagogesch Zellen géintiwwer Stoppen irritants an Heelung vun Otemschwieregkeeten Verletzungen ausernee charakteriséiert [1, 2]. Inflammation ass eng wichteg Provider Ofwier Mechanismus. Inflammation datt an der mucosal vun gastrointestinal TRACT existeiert, awer bewierkt gastrointestinal oppent [3]. Gastrointestinal oppent ass eng gemeinsam groussen Duerchernee vun der digestive System Millioune Amerikaner a vill méi déi weltwäit [4]. De stäerkste gemeinsam Ursaach vun gastrointestinal oppent Krankheet ginn Wonn mat Helicobacter pylori VerfÜgung (H. pylori VerfÜgung) [5] a langfristeg Benotzung vun nonsteroidal anti-demagogesch Drogen (NSAIDs) wéi aspirin an ibuprofen [6]. D'Schafe vun Antibiotike Kontrollen géint H. pylori VerfÜgung huet bedeitend d'Zuel vun gastrointestinal oppent Fäll am entwéckelt Länner [7] reduzéiert. D'Krankheet ass awer, nach héich an aner Länner an der duerch d'Benotzung vun NSAIDs ëmmer Krankheet ass nach eng grouss gesondheetlech Bedenken am entwéckelt Länner [6, 7]. VerfÜgung Prefabrizéierten fir inflammation am allgemengen, bezitt sech op entweder der inhibiting Aktivitéit vun demagogesch Zellen oder d'Produktioun vun demagogesch mediators inhibiting [8]. Déi spéit kënnt mat Drogen erfëllt ginn wéi NSAIDs an corticosteroids [9]. Behandlung fir am Allgemengen gastrointestinal oppent, ass op fir entweder H. pylori VerfÜgung Wonn eliminéiert oder reduzéieren an de Niveau vun gastric Seier Produktioun responsabel fir d'Ofkéier vun gastrointestinal Schutzpatrounin futti inhibiting [10, 11]. Déi spéit kann dichteg mat Drogen gin wéi histamine (H 2) -blockers, Seier Pompel inhibitors an mucosal Schutzpatrounin Medikament [9]. Allerdéngs hu verschidde Säit Auswierkunge vun laangfristeg Benotzung vun dësen Drogen beschriwwe goufen [9]. Ausserdeem sinn Anti-inflammation an Anti-ulcerogenic Drogen gebraucht haaptsächlech d'Symptomer vun der Krankheet ze verréngeren ouni eigentlech bestéet oder der demagogesch an ulcerogenic Prozesser bedengt. VerfÜgung Entwécklung vun Anti-demagogesch an Anti-ulcerogenic Drogen huet sech viru kuerzem op entdecken der gudder Applikatioun vun herbal Planz-ofgeleet dovu dat mächtegst a méi sécher ze benotzen sinn. Algen fonnt am Iwwerfloss wuessen ugefaangen der betreffend Gebidder vun villen Deeler vun der Welt e grousse nach ongenotztent Potential fir nei Quell vun therapeutics vertrieden [12, 13]. De roude Algen zum Beispill gouf confirméiert aktiv awer ze enthalen datt inflammation vun der alimentary TRACT gewinnt hëllefen kann [14], verhënneren oder gastric ulcers an Cancers vun oxidative Stress ëmmer Freed [15, 16], demagogesch Aktivitéiten inhibit vun der Produktioun vun suppressing demagogesch mediators [17-19] a Kriibs Zell apoptosis am Mo. [20] an Colon [21] induce. Natural awer aus der iessen Algen ofgeleet konnt sécher benotzt ginn als anti-demagogesch an gastric anti-ulcerogenic therapeutics wéi se am traditionelle Medikamenter zënter Zäit als Liewensmëttel a benotzt immemorial geholl goufen [13]. VerfÜgung De roude Algen, Gracilaria changii VerfÜgung (Xia et Abbott) Abbott, Zhang et Xia fonnt déi betreffend Gebidder vun Malaysia wuessen ugefaangen e Potential lokal Quell vun dësem natierlech-ofgeleet therapeutics duerstellt. Weideres, sinn d'Algen kommerziell nëmme fir seng colloidal Agar Inhalt an den lokal Liewensmëttel Köstlechkeeten recoltéiert. Dës Algen sinn dagsiwwer wéi weisen Medezin fir d'Behandlung vun verschiddenen ailments dorënner inflammation an gastric ailments applizéiert. Déi heiteg Aarbecht strieft d'Potential anti-demagogesch, gastroprotective an Anti-ulcerogenic Aktivitéite vun dësen Hangar rout Algen, Gracilaria changii VerfÜgung ze diskutéieren. VerfÜgung Method VerfÜgung Algen Virbereedung Extrait VerfÜgung Gracilaria changii VerfÜgung (Xia et Abbott) Abbott, Zhang et Xia sech aus der betreffend Waasser vun Morib, Selangor, Malaysia (N2 ° 44 "908", E101 ° 26 "590") zu Enn Februar 2003 gesammelt [22-24]. D'Algen sech duerch Professer Dr. Phang Siew Moi, Direkter vum Institut vun Ocean an Äerd Sciences, Institut vun biologesch Sciences, Fakultéit vun Science, Universitéit vun Malaya identifizéiert, wou den Bong uplanzen haten sech (Herbarium keen. PSM 6320 an PSM 6321 ). D'Algen sech zu steril iwwerschwemmt mat engem Finale Computer- an steril destilléiert Waasser gewäsch wéi virdrun beschriwwen [22]. D'Algen sech dann zu engem Waasser Bad sonicator an huet bei -70 ° C sonicated. Methanolic Extrait vun Gracilaria changii VerfÜgung (MeOHGCM6 Extrait) huet op der Universitéit vu Malaysia Terengganu (UMT) konform zu de Methode beschriwwen [25] virbereet. D'MeOHGCM6 Extrait war bei -20 ° C virewech gehaalen ze benotzen. VerfÜgung MeOHGCM6 VerfÜgung Profil Analyse vun der MeOHGCM6 Extrait Extrait war mat photodiode vill violett (PDA UV equipéiert op engem Shimadzu ultra-fast flësseg chromatography (UFLC) System gesuergt ) heescht an ioun Fal Zäit vum Fluch (Ënnerportal) Mass Spektrometer (Shimadzu, Japan). Déi Trennung gouf bei 40 ° C op engem Waters Xbridge C18 Kolonne (50 mm × 2,1 mm, ëm Duerchmiesser vun 2,5 μm) (Waasser, USA) erreecht. Den Handy Phas ofgeschloss Waasser [0,1% formic Seier (BDH schafft Ëmgeréits, England)]: acetonitrile (BDH schafft Ëmgeréits, England) (0,1% formic Seier) op engem Flux Zënssaz vun 0,50 ml /min mat enger Sprëtz Volume vun 10 μl . Electrospray Eegeliichten (ESI) Modus mat positiv /negativ Ëmstellung an extern Referenzmaterial war fir Mass spectrometry (MS) benotzt. D 'Wierderbuch vun Natural Produkter (CRC Press) mat Héichopléisende MS Spektren an strukturell Informatiounen benotzt gouf positiv an negativ ioun Spektren ze analyséieren zesumme mat MS /MS Informatioune fir Identifikatioun vun ähnlechen Voleten. VerfÜgung Mënscherechter promonocytic Zell Linn (U937 Zellen) VerfÜgung U937 Zellen sech aus American Type Kultur Collection (ATTC, USA) kaaft an cultured zu Roswell Park Memorial Institut-1640 (RPMI-1640 mëttelfristeg) (Flowlab, Australien) [mat 1% vun 10 mm Net-essentiell Aminosaier nà (NEAA) (Flowlab, Australien) an 1% vun 10 mm L-glutamine (L-Glu) (Flowlab, Australien)] mat 10% Hëtzt-inactivated an et Bovine serum (FBS) (Flowlab, Australien). Zellen sech op 37 ° C an enger humidified incubator mat 5% CO 2 incubated. VerfÜgung dat vun U937 Zellen VerfÜgung U937 Zellen am 96-gutt Zell Kultur Placke (Falcon, USA) op enger Dicht rakommen sech vun 2 × 10 4 Zellen /gutt mat RPMI-1640 mëttelfristeg mat 2% FBS an huet op 37 ° C an enger humidified incubator mat 5% CO 2. Den Dag drop, mëttelgrouss mat bor 12-myristate 13-acetate (PMA) (Fläch-Aldrich, USA) op Konzentratioune vun 0-50 nm rangéiert sech un der U937 monocytic Zellen notéiert dat fir 24 a 48 Stonnen op induce. Mëttelfristeg nëmmen PMA diluents [Police sulfoxide (DMSO) Léisung (Fläch-Aldrich, USA)] waren an parallel derbäi a benotzt als Gefier Kontroll mat. Um Enn vun der uginn Zäit Punkt, sech fir dat-spezifesch macrophage Zell Uewerfläch bewäert Zellen Bewaacher Ausdrock an Zell Nuetsvolen. VerfÜgung Expression vun der CD11b, dat-spezifesch macrophage Zell Uewerfläch Lakonien war vun staining Zellen sech wéi virdrun beschriwwen [26 , 27]. Zell Nuetsvolen war mat der trypan blo Hoerfaarw (Fläch, USA) Exklusioun assay wéi virdru beschriwwen sech [28]. VerfÜgung Cytotoxicity assay VerfÜgung U937 Zellen sech op eng Dicht vun 2 op 96-Meter Zell Kultur Placke géint × 10 4 Zellen /gutt mat RPMI-1640 mëttelfristeg mat 2% FBS an huet op 37 ° C an enger humidified incubator mat 5% CO 2. Den Dag drop, mëttelgrouss mat MeOHGCM6 (um Konzentratioune vun 0-100 μg /ml rangéiert) an betamethasone (Fläch, USA) (op Konzentratioune vun 0-100 nm rangéiert) Extrait bäigebaut. haltege mëttelfristeg d'MeOHGCM6 nëmmen ofzebauen an betamethasone diluents [Ethanol (EtOH) (BDH schafft Ëmgeréits, England) an DMSO, bzw.] goufen am parallel a benotzt als Gefier Kontroll notéiert. A Dag Post-Behandlung, war d'U937 Zellen Prolifératioun Taux streng folgenden der recommandéiert Protokoll d'Produktioun mat der CellTiter 96® Non-radioaktiv Zell prolifération Kit (Promega, USA) sech. VerfÜgung MeOHGCM6 Behandlung vun U937 Zellen Extrait VerfÜgung U937 Zellen zu 24-gutt Zell Kultur Placke (Falcon, USA) op eng Dicht vun goufen 2 géint × 10 5 Zellen /gutt mat RPMI-1640 mëttelfristeg mat 2% FBS a bei 37 ° C an enger humidified incubator mat 5% incubated CO 2. Den Dag drop, huet den U937 Zellen entschlof fir 24 Stonnen mat 10 nm PMA differenzéiert. An dat, goufen d'U937 Zellen mat der MeOHGCM6 ofzebauen oder betamethasone um physiologic Konzentratioun behandelt. Op 0, 8, 16 an 24 Stonnen Post-Behandlung, supernatant an Zellen sech gesammelt an fir TNF-α Äntwert Niveau an TNF-α an IL-6 Gentherapie Ausdrock assayed. VerfÜgung TNF-α Äntwert Niveau VerfÜgung TNF- α Niveau war mat der BD OptEIA ™ Mënscherechter TNF (TNF-α) Elisa Kit laut II (BD Biosciences, USA) gemooss un de Protokoll d'Hiersteller. VerfÜgung TNF-α an IL-6 Gentherapie Ausdrock VerfÜgung Total RNS vun der Zell Kulturen sech mat der TRI Reagent® (cuisine Research Centre Galaxy, USA) a behandelt mat DNase (Promega, USA) isoléiert. RNS war ëmgedréint-ausserdeem (cDNA) mat der SuperScript ™ II Réckproduktioun Transcriptase (Invitrogen, USA). D'cDNA war dann benotzt grouss real-Zäit Hinnen alleguer mat SYBR® Green Hinnen alleguer Meeschtesch Mëschung (QIAGEN, Däitschland) op DNA Engine Opticon II® (MJ Fuerschung, Bio-Rad, USA) zu Leeschtunge wéi virdru beschriwwen [29]. D'oligonucleotide primers gebraucht goufen vir 5'AAGAGTTCCCCAGGGACCTC an ëmgedréint 5'GCTTGAGGGTTTGCTACAAC fir TNF-α; vir 5'GAAAGGAGACATGTAACAAG an ëmgedréint 5'CCAGGCAAGTCTCCTCATTG fir IL-6; an 5'GCGAGAAGATGACCCAGATC vir an ëmgedréint 5'GGATAGCACAGCCTGGATAG fir Beta-actin (β-actin) (intern Referenz). VerfÜgung Déieren VerfÜgung Erwuessene weiblech Sprague-Dawley deër tëscht 7 an 8 Wochen al a Persoun 160-200 g sech fir d'Etude benotzt. De Protokoll fir Déier Experimenter gouf duerch den institutionnelle Komitee fir Ethik an Déieren trotzdeem vun der Universitéit vun Malaya [: MP /08/06/2010 /Swatch (R) Ministär Number] abruecht. D'Déiere waren aus University Putra Malaysia (UPM) kritt. D'Déiere goufen individuell am Käfeg mat grousser-ech Drot un coprophagy ze verhënneren waren. Si huet zu enger Temperatur-kontrolléiert Sall huet dat gutt gelëfter war, mat Iessen a Waasser, op engem 12 Stonn Liicht /donkel Zyklus an der Etude. All deër sech fir 48 Stonnen vu Liewensmëttel huet, mä no gratis Zougang zu Drénkwaasser bis 2 Stonne virun hinnen op der ulcerogens subjecting. VerfÜgung EtOH-entschlof gastric lesions VerfÜgung D'deër zoufälleg mat all Grupp an 7 Gruppen ënnerdeelt goufen mat vun 6 deër. Group 1 gouf mat 10% Tween 20 (Extrait diluents) (BDH schafft Ëmgeréits, England) an fiert als negativ Kontroll Grupp verwalt. Group 2 Maxximum 500 mg /kg b.w. vun der MeOHGCM6 Extrait-gleichgestallt stinn Planz Extrait ähnlech zu parallel bereet als MeOHGCM6 als Net-spezifesch Planz Extrait (NSPE) Kontroll Grupp ze déngen ofzebauen. Group 3 war mat OMP (chemesche Company vu Malaysia, Malaysia) um 20 mg /kg b.w. behandelt a wéi de positive Behandlung Kontroll Grupp zerwéiert. Déi reschtlech Grupp 4, 5, 6 a 7 scho 4 verschiddene Konzentratioune vun der MeOHGCM6 Extrait rangéiert vun 2,5 - 500 mg /kg b.w., bzw.. No 30 Minutte vun Pre-Behandlung, waren all Déiere mat absolute EtOH duerch d'mëndlech Wee verwalt. Eng Stonn Post-Administratioun, goufen d'Déieren geaffert vun iwwer-Stärkungsmëttel hinnen mat diethyl ETHER (BDH Chemesch Ltd., England). D'beleidegt huet d'Grenzwäerter Leschten an der esophagus noosten der Cardia an der distended Mo op der pyloric sphincter war direkt zu engem Rocksängerin enger Kette mat Auslafe vum gastric Inhalter ze verhënneren. De Mo war séier geläscht an am Waasser. VerfÜgung Kilometréierung vun gastric secretion VerfÜgung der gastric Inhalt vun all Grenzwäerter Mo. aspirated war Beweegung an knappen verbannen engem spatula benotzt. De Mo Jus mat Liewensmëttel Deelercher war discarded. D'recoltéiert gastric mucus war mat elektronescher Gläichgewiicht (Mettler Toledo, Schwäiz) gewien. De Montant vun gastric-Jus war mat engem Moossen losen gemooss. D'pH vun der gastric stong enger digitaler pH Meter (Crison Instrumenter, SA, Spuenien) gemooss benotzt. VerfÜgung Evaluatioun vun consomméiert gastric lesions VerfÜgung der Recolte Nexten, war de Mo. direkt mat Salins Ofwaasser an ënner engem dissecting microscope iwwerpréift (1,8 ×) mat engem Feld Gitter Nasmyth. D'glandular Deel vun de Mo. war fir d'Équipe vun oppent évaluéieren. D'total ulcerating Géigend (ua) vun der haemorrhagic lesions fir all Mo. war vun plannimetry gemooss (mm 2) an de Prozentsaz vun inhibition war mat der folgender Formule berechent: Inhibition %
= VerfÜgung ua VerfÜgung Kontroll - VerfÜgung ua VerfÜgung behandelt /VerfÜgung ua VerfÜgung Kontroll × VerfÜgung 100
Entschlossenheet vun Produktioun vun Net-FAQ sulfhydryls (NP-néirens) VerfÜgung Gastric mucosal NP-néirens Niveau war wéi virdru beschriwwen gemooss [30] mat klengen Ännerungen. Kuerz, war d'glandular Mo. gewien an homogenized am Krunn Äis-kal 0,02 M ethylenediaminetetraacetic Seier (héich) (GibcoBRL Life Technologies, USA) (pH 8.9) mat. Aliquots vun der homogenates sech mat destilléiert Waasser a 50% trichloroacetic Seier (Fläch chemesche Co., USA) gemëscht. D'Mëschung war fir 10 Minutte bei 4 ° C mat konstanter Onroue incubated an dann op 3000 × g fir 15 Minutten centrifuged. Déi Mëschung ass dann fir NP-néirens Niveau assayed engem glutathione assay Kit (Fläch chemesche Co., USA) benotzt laut den Hiersteller d'Protokoll. Statistique Analyse
All Daten wéi heeschen ± normale deviation (Fils) ausgedréckt huet oder Steiren (25% an 75% quartile) aus zwee oder dräi onofhängeg Experiment fir anti-demagogesch Studien a siwen onofhängege Experiment fir gastroprotective an Anti-ulcerogenic Studien. ANOVA (eent-Manéier Analyse vun Varianz an zwee-Manéier Analyse vun Varianz) gouf fir de Verglach tëscht Gruppen a fir deemno statistesch Bedeitung "p VerfÜgung" mat Respekt un der Kontroll Grupp benotzt. De Wäert vun p VerfÜgung &Si besteet; 0,05 war statistesch relevant considéréiert. All Statistik analyséiert goufen mat der GraphPad Prism 4.0 Software (USA) an SPSS Versioun 16,0 Software (SPSS INC, Chicago) gemaach, respektiv. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Standardised MeOHGCM6 Profil VerfÜgung LC Extrait /MS Analysë vun de verschiddenen Terrainen vun MeOHGCM6 Extrait sech standing reproducibility an Konsequenz vun der Reduktioun Methoden ze garantéieren. Gefouert 1 an 2 vun MeOHGCM6 Extrait vun der Etude benotzt zougedréckt héich ähnlech Mass Spektralklass Profiler an Quantitéit vun de groussen Radius (Dorënner 1A-C). Analyse vun der Spektal a Verglach zu der Wierderbuch Dobäischreiwen vun Natural Produkter, identifizéiert CRC Press den ënnerscheed schwéier wéi 457,405, 645,280 an 887,579. D'identifizéiert Mass am positive ioun Spektrum vu m /Z 457,405 no Fragmenter vun 398.327 (huel Héichpunkt), 380,316 an 158,082. D'neutral Verloscht vun 59,077 Mass war méiglecherweis duerops vun trimethylamine verluer. Dëst deit drophin, datt de Massa engem trimethylammonium moiety enthalen. Déi héich Opléisung MS an MS /MS Daten konnt net definitiv all bekannt awer aus Wierderbuch vun Natural Produkter z'identifizéieren. D'Sonnemass vun m /Z 645 an 887, huet awer eng eegestänneg Veräin zwou bekannt chlorophylls, Duerch 10-hydroxyphaeophorbide engem VerfÜgung a 10-Hydroxypheophytin engem VerfÜgung mat passenden UV absorbances am PDA Analyse observéiert (Table 1 ). Figur 1 Profiling vun de verschiddenen Terrainen vun MeOHGCM6 ofzebauen. ESI Modus mat positiv /negativ Ëmstellung an extern Referenz ass fir d'MS mat engem Shimadzu UFLC System benotzt. Total positive ioun Spektren fir Identifikatioun vun ähnlechen Komponente vun der zwou verschidden Terrainen vun der MeOHGCM6 Extrait benotzt an der Etude analyséiert. (A) MeOHGCM6 Extrait (ëmfrot 1; M6-1). (B) MeOHGCM6 Extrait (ëmfrot 2; M6-2). (C) Verglach vun der Intensitéit vun der Équipe räich Radius vun den zwou MeOHGCM6 Extrait benotzt Terrainen an der Etude. VerfÜgung Table 1 Structure identifications vun der Tip Mass an MeOHGCM6 Extrait benotzt LC /MS VerfÜgung Mass (ioun)
zu gefouert fonnt
Méiglech ID VerfÜgung 417,298 VerfÜgung 1 VerfÜgung, 2 VerfÜgung meescht wahrscheinlech contaminant VerfÜgung 457,405 * VerfÜgung 1, 2 VerfÜgung onidentifizéierte VerfÜgung 461,326 VerfÜgung 1, 2 VerfÜgung meescht wahrscheinlech contaminant VerfÜgung 505,353 VerfÜgung 1, 2 VerfÜgung meescht wahrscheinlech contaminant VerfÜgung 573,256 VerfÜgung 1, 2 VerfÜgung onidentifizéierte VerfÜgung 645,280 VerfÜgung 1, 2 VerfÜgung Duerch 10-hydroxyphaeophorbide engem
743,636 VerfÜgung 1, 2 VerfÜgung onidentifizéierte VerfÜgung 887,579 VerfÜgung 1, 2 VerfÜgung 10-Hydroxypheophytin enger
fonnt vun Natural Produkter, CRC Press mat Héichopléisende MS Spektren benotzt goufen d'total positiv ioun Spektren fir d'Identifikatioun vun méiglech chemesch Atomer ze analyséieren. VerfÜgung * MS /MS (relativ intensities%) 457.405 → 398.327 ( 100%), 380.316 (50%), 158.082 (40%). VerfÜgung dat-spezifesch macrophage Zell Uewerfläch Bewaacher Ausdrock op U937 Zellen VerfÜgung ënnerscheet U937 Zellen vun den Ausdrock vun der monocyte /macrophages antike-spezifesch CD11b ënnerscheeden sinn , Uewerfläch Bewaacher FAQ [26]. An eiser Etude, war den Ausdrock vun der CD11b mat engem enorm getarnt blo Etikette op der Zell Uewerfläch markéiert [27]. Den Ausdrock vun der CD11b war immens grouss, wann d'U937 Zellen mat waarden Konzentratioun vun PMA (1, 10 an 50 nm) (Dorënner 2, Dorënner 3A) differenzéiert entschlof waren. Opklärung ugeholl datt Behandlung mat 10 oder 50 nm PMA fir 24 Stonn oder 1 nm PMA fir 48 Stonn, ënnerscheet U937 Zellen war gutt virun 50% vun der Zell Kultur. Figur 2 Expression vun de dat-spezifesch macrophage Zell Uewerfläch Lakonien op ënnerscheet U937 monocytic Zellen. U937 sech monocytic Zellen entschlof fir 24 Stonnen mat (A) 0 nm PMA differenzéiert; (B) 0 nm PMA fir 48 Stonnen; (C) 1 nm PMA fir 24 Stonnen; (D) 1 nm PMA fir 48 Stonnen; (E) 10 nm PMA fir 24 Stonnen; (F) 10 nm PMA fir 48 Stonnen; (G) 50 nm PMA fir 24 Stonnen an (H) 50 nm PMA fir 48 Stonnen. Zellen sech mat immunohistochemical staining Kierchefënster der Präsenz vun CD11b, engem macrophage Zell Uewerfläch Bewaacher z'identifizéieren. Ënnerscheet U937 monocytic Zellen sech duerch de staarken getarnt blo stain op der Zell Uewerfläch vun der ënnerscheet Zellen identifizéiert. Zellen sech op 20 × vergréissert ënner brightfield mat enger Faarf microscope an fotografeschen mat enger Nikon D70 Kamera (Nikon, Japan) klicken. One archetypal Set vu Fotoen aus dräi separat Experimenter si gewisen. VerfÜgung Dorënner 3 dat-spezifesch U937 monocytic Zellen macrophage Zell Uewerfläch Bewaacher Ausdrock an Zell Nuetsvolen Determinatioun. U937 sech monocytic Zellen entschlof mat verschiddenen Konzentratioune vun PMA fir 24 an 48 Stonnen ze differenzéieren. (A) D'Prozentzuelen vun ënnerscheet Zellen sech duerch d'Präsenz vun CD11b op der Zell Uewerfläch Faarwen. (B) D'Prozentzuelen vun liewensfäeg Zellen sech Faarwen trypan blo Exklusioun assay benotzt. De Prozentsaz vun ënnerscheet oder liewensfäeg Zellen pro total Zellen ass déi selwecht virun der Experimenter déi verschidden Konzentratioune vun PMA an incubation Period benotzt. Date sinn als mengen ± S.D. presentéiert aus dräi onofhängeg Experimenter mat '*', p VerfÜgung &Si besteet; 0,05 vertrieden Bedeitung Differenz par Rapport zu der Grupp, déi net entschlof waren ze differenzéieren. VerfÜgung Zell Nuetsvolen Determinatioun op ënnerscheet U937 Zellen VerfÜgung D'Statioune ënnerscheet U937 Zellen sech d'trypan blo Hoerfaarw Exklusioun assay Faarwen benotzt. U937 Zellen Nuetsvolen Schatzkummer e wesentleche Portioun-ofhängeg Reduktioun vun de Prozentsaz vun liewensfäeg Zellen wann entschlof mat 1, 10 an 50 nm PMA (Dorënner 3B) ze differenzéieren. Opklärung ugeholl, datt 90% vun de ënnerscheet U937 Zellen mat 1 oder 10 nm PMA fir 24 Stonn oder 1 nm PMA fir 48 Stonn folgenden Behandlung nach liewensfäeg waren. VerfÜgung Cytotoxicity vun MeOHGCM6 op U937 Zellen Extrait VerfÜgung der cytotoxic Auswierkunge vun der MeOHGCM6 ofzebauen an betamethasone op der U937 Zellen sech duerch Paien der Zell Prolifératioun Taux alles. Behandelt U937 Zellen mat der MeOHGCM6 bei 0,05 ofzebauen, 0,5, 1 a 5 μg /ml Schatzkummer proliferative Skiritai vun 117,39% (108.48%, 122,10%), 152,04% (149.36%, 154,72%) (p VerfÜgung &Si besteet; 0,05) , 145,60% (137.48%, 149,11%) (p VerfÜgung &Si besteet; 0,05) an 118,49% (112.01%, 133,28%), bzw. (Dorënner 4A). Behandlung mat MeOHGCM6 Extrait um 10 μg /ml der Zell Prolifératioun Taux zu 87,00% reduzéiert (82.43%, 89,62%). Behandelt U937 Zellen mat der betamethasone Schatzkummer bedeitendst Portioun-ofhängeg Reduktioun vun hirer Verbreedung Tarif (Dorënner 4B). Um ënneschten Konzentratioune vun betamethasone (0,1, 1, 5 an 10 nm), der Zell Prolifératioun Taux war 110,35% (92.20%, 115,83%), 113,75% (89.56%, 122,98%), 94,59% (85.56%, 101,93%) an 80,48% (77.78%, 110,48%), bzw.. Figur 4 Cytotoxicity Effekter vun de verschiddenen Konzentratioune vun MeOHGCM6 ofzebauen an betamethasone op U937 monocytic Zellen. Der Prolifératioun Taux vun U937 monocytic behandelt Zellen mat Konzentratioune vun (A) MeOHGCM6 ofzebauen a (B) betamethasone waarden war vun leeschtungsfäeg MTT assay iwwer eng Period vun 24 Stonnen alles. De Prozentsaz vun Zell Prolifératioun ass virun der Zuel vun Zellen rakommen famill déi verschidde Schrëtt vun MeOHGCM6 ofzebauen an betamethasone zu administrating. D'Konzentratioun vun MeOHGCM6 ofzebauen, datt 30% (G130) verursaacht, 50% (G150) an 70% (G170) vun Zell Prolifératioun inhibition sech aus dem Komplott (duerch eng Pfeil uginn) vermëttelt. Resultater goufen wéi d'Steiren (25% an 75% quartile) ausgedréckt aus zwee onofhängeg Experimenter. VerfÜgung Effects vun MeOHGCM6 Extrait Behandlung op der TNF-α Äntwert Niveau während dat vun der U937 Zellen VerfÜgung D'Auswierkunge vun MeOHGCM6 Extrait Behandlung op der Regulatioun vun TNF-α Äntwert Niveau während der dat U937 Zellen war mat Elisa propagéieren. D'TNF-α Äntwert Niveau erreecht eng maximal Niveau vun 43,28 ± 5,15 PG /ml um 8 Stonnen wou d'U937 Zellen (Dorënner 5A) differenzéiert entschlof waren. An der Presenz vun 10 μg /ml MeOHGCM6 Extrait während dat vun U937 Zellen, ofgeholl der TNF-α Äntwert Niveau bedeitend bis 8 Stonnen [0,14 ± 0,28 PG /ml (p VerfÜgung &Si besteet; 0.001)] a war ähnlecher zu datt observéiert an der Presenz vun betamethasone [0,28 ± 0,56 PG /ml (p VerfÜgung &Si besteet; 0.001)]. Figur 5 MeOHGCM6 Extrait Behandlung op TNF-α Äntwert Niveau an TNF-α an IL-6 Gentherapie Ausdrock während dat vun der U937 monocytic Zellen. D'U937 monocytic Zellen sech entschlof mat 10 nm PMA differenzéiert. An dat, goufen monocytic U937 Zellen mat MeOHGCM6 Extrait behandelt. (A) D'TNF-α Äntwert Niveau benotzt Elisa laachen. D'(B) TNF-α a (C) IL-6 Gentherapie Ausdrock Niveauen benotzt qRT-Hinnen alleguer laachen. Resultater goufen als déi mengen ± S.D. ausgedréckt aus quadruplicate assays. VerfÜgung Effects vun MeOHGCM6 Extrait Behandlung op der TNF-α an IL-6 Gentherapie Ausdrock während dat vun der U937 Zellen VerfÜgung D'Regulatioun vun TNF-α an IL-6 vun MeOHGCM6 Behandlung während der U937 Zellen Extrait dat war weider bei der Gentherapie Ausdrock Niveau benotzt qRT-Hinnen alleguer propagéieren. D'TNF-α Gentherapie Ausdrock Niveau erreecht no 6 Stonnen (3.16 ± 0,48 Exemplare /actin) vun der U937 Zellen dat (Dorënner 5B). TNF-α Gentherapie Ausdrock Niveau ofgeholl huet während den éischten 6 Stonnen [0,52 ± 0,28 Exemplare /actin (p VerfÜgung &Si besteet; 0.001)] vun U937 Zellen dat an der Presenz vun 10 μg /ml MeOHGCM6 ofzebauen. D'Verréngerung vun der TNF-α Gentherapie Ausdrock Niveau vun U937 Zellen während dat wann mat 10 μg /ml MeOHGCM6 behandelt war ähnlech oder besser wéi d'Conclusiounen aus der Behandlung mat 10 nm betamethasone [0,55 ± 0,42 Exemplare /actin (p VerfÜgung &Si besteet; 0.001)]. D'IL-6 Gentherapie Ausdrock Niveau awer e wesentleche Erhéijung an erreecht bei 0,68 ± 0,09 Exemplare /actin no 12 Stonnen vun der U937 Zellen dat (Dorënner 5C). Erof vun der IL-6 Gentherapie Ausdrock Niveau war observéiert 0.10 ± 0,01 Exemplare ginn /actin, 0,23 ± 0,02 Exemplare /actin (p VerfÜgung &Si besteet; 0,01), 0,37 ± 0,04 Exemplare /actin (p VerfÜgung &Si besteet; 0,001 ) an 0,45 ± 0,05 Exemplare /actin (p VerfÜgung &si besteet; 0.001) op 3, 6, 9 an 12 Stonnen, respektiv wann der U937 Zellen an dat mat 10 μg /ml MeOHGCM6 Extrait behandelt goufen. Inhibition vun der IL-6 Gentherapie Ausdrock Niveauen an der Präsenz vun der MeOHGCM6 Extrait war vergläichbar mat deem vun betamethasone. VerfÜgung Prophylactic Behandlung Auswierkunge vun MeOHGCM6 Extrait op der deër gastric Inhalter folgenden EtOH-entschlof Fouss gastric mucosal blesséiert VerfÜgung Gastric mucus secretion, goufen gastric Jus Volumen a gastric mucus pH vun der gastric Inhalt vun Grenzwäerter de Mo mat MeOHGCM6 Extrait folgenden EtOH erofzesetzen behandelt Pre-alles. 2,45 ± 0,25 GM vun gastric mucus an 1,75 ± 0,20 ml vun gastric Jus sech aus de Mo vun deër mat nëmmen den Extrait vun der Mindeststeier (Table 2) z'iesse erholl. 1,54 ± 0,31 GM vun gastric mucus an 0,96 ± 0,25 ml vun gastric Jus an 1,68 ± 0.19 GM vun gastric mucus an 0,96 ± 0,16 ml vun gastric Jus sech aus deër Pre-behandelt mat 250 an 500 mg /kg b.w. erholl vun MeOHGCM6 ofzebauen, bzw.. Am Verglach, 2,31 ± 0,42 GM vun gastric mucus an 1.15 ± 0,36 ml war gastric Jus aus deër wéint mat 20 mg /kg b.w OMP-viraus behandelt. 2.75 ± 0,49 GM vun gastric mucus an 1,75 ± 0,28 ml vun gastric Jus sech aus deër z'iesse mat ähnlech bereet stinn Planz Extrait wéint datt den NSPE Kontroll zerwéiert. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Neier Étude an gastric cytoprotective prostaglandins Eegeschafte vun Cássia sieberiana Wuerzelen Blat Extrait als eng anti-ulcerogenic Agent
• Genetesch Verännerlechkeet an CYP3A4 an CYP3A5in Primärschoul Liewer, gastric an colorectal Kriibs Patienten