Evaluatioun vun de Passage vun Lactobacillus gasseri K7 an bifidobacteria vun de Mo ze intestines enger eenzeger Atomreakter Modell benotzt

Evaluatioun vun de Passage vun Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 an bifidobacteria vun de Mo ze intestines enger eenzeger Atomreakter Modell VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Probiotic Bakterien benotzt ginn geduecht eng wichteg Roll an der digestive System ze spillen an dofir hunn de Passage aus Mo ze intestines ze iwerliewen. Kuerzem, e Roman Approche de Passage aus Mo ze intestines zu engem eenzege bioreactor entwéckelt gouf zu virstellen. De Virdeel vun dësem automatiséiert een Atomreakter System war d'Fähegkeet dem Afloss vun Seier ze testen, Bile Salzer a pancreatin. VerfÜgung Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 enger Deformatioun vum Keefer faeces mat Eegeschafte Mëtt spazéieren an de Klischee interessant fir Kéis produzéiert isoléiert ass. An dëser Etude, war eng eenzeg Atomreakter System benotzt d'Iwwerliewe vun L. gasseri VerfÜgung K7 a ausgewielt bifidobacteria aus dem Schaf duerch de Mo-Daarm Passage ze diskutéieren. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Ufanksniveau Duerchmusterung fir Seier Resistenz zu acidified Kultur Medien weisen eng héich Toleranz vun Bifidobacterium dentium VerfÜgung fir dës Konditioun besot niddereg Iwwerliewe vun de Passage. Ähnlech Resultater ware mat B. longum VerfÜgung subsp erreecht. infantis VerfÜgung hierkommen B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung eng héich Iwwerliewe haten. VerfÜgung Dës éischt Resultater goufen am bioreactor Modell vun der Mo-Daarm Trip confirméiert. B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung der héchster Iwwerliewe Tarif (10%) Austeritéitsmoossnamen haten ongeféier 5 × 10 6 cfu ml -1 Verglach zu den aneren bifidobacteria analyséieren getest déi vun engem Faktor vun bis zu 10 reduzéiert sech 6 . Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 war manner resistent wéi B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung mä erëmfonnt ongeféier 1000 mol méi héich wéi aner bifidobacteria um Zell Konzentratioune. VerfÜgung Conclusioun An dëser Etude VerfÜgung, mir konnten ze weisen, datt L. gasseri VerfÜgung K7 e héich Iwwerliewe Taux vun der stomach- Équipe Daarm Trip. Andeems een d'Resultater mat enger viregter studéieren an Gallerie konnt mir d'Zouverlässegkeet vun eiser Simulatioun confirméieren. Vun der bifidobacteria analyséieren getest, just subsp VerfÜgung B. animalis. lactis VerfÜgung fir eng erfollegräich Passage an der Simulatioun System. VerfÜgung Background VerfÜgung Probiotics, besonnesch lactic Seier Bakterien hunn positiv Auswierkungen op Konsumenten Gesondheet akzeptabel Iwwerliewe zougedréckt wéi an 1907 ugeholl [1]. Et gouf gegleeft, datt Bakterien haaptsächlech oprafen vun enteric pathogens a reglementéiert toxoaemia ëmmer kontrolléiert, doduerch Gesondheet ze verbesseren an ze beaflossen veruerteelt. Mëttlerweil ass et scho bekannt, datt e puer vun den positiven Effekter op Konsumenten Gesondheet d'Verbesserung vun der microflora Gläichgewiicht an der GUT sinn, d'Stimulatioun vun der immun System, an avancéiert de Gebeitechnik pathogenic microorganisms ze bekämpfen [2]. E groussen Deel vun Intressi war op de Gebrauch vun analyséieren vun der genera Lactobacillus VerfÜgung an Bifidobacterium VerfÜgung Konzentratioun, och wann do och aner Bakterien mat probiotic Effekter sinn, e.g. puer propionibacteria. VerfÜgung D'verwisen Eegeschafte sinn och d'Grondlag fir eng microorganism probiotic ausgezeechent ginn. Et gi verschidden Definitiounen weltwäit mee si sinn ähnlech an Inhalt. Ee vun de Critèrë fir eng probiotic Klischee ass seng Resistenz zu Aciditéit an gastric Léisungen vun der mënschlecher gastrointestinal TRACT [3]. Et ass also wichteg, d'Resistenz vun engem Potential probiotic Deformatioun zu der dono an gastric Ëmwelt am Daarm ze diskutéieren. VerfÜgung Duerch héich Käschten an ethesch souwéi Sécherheet Reglementer fir Medeziner Studien, Survival Duerchmusterung ass einfach ze kënschtlech virstellen VerfÜgung. Eng einfach Test ass de bakteriell Zellen an dono oder Bile Salz Léisunge fir eng definéiert Period an d 'Unzuel vun Eos Zellen ze incubate. An e weidere Schrëtt, ass d'Simulatioun vun opreegt Kréi duerchgefouert, kombinéiert Aciditéit an gastric duerch eng Estimatioun duerno Léisungen vun Zellen iwwer de ganze Simulatioun Eos. Dëst ass eng méi realistesch Gedächtnis vun de Konditioune vun der Daarm [4]. Anere System, der Simulatioun vun de Mënscherechter Intestinal Microbial Ecosystem (SHIME), besteet aus 5 bis 6 serially verbonne pH kontrolléiert bioreactors [5-7]. D'Opstellung ass zimlech komplex a verlaangt absolute selwescht Konditiounen. Doriwwer eraus, ass de Tellur vun metabolites a Waasser net surfen. Dëst war iwwerwonne vun dialysis Schläimhait benotzt wéi vun Marteau et al VerfÜgung beschriwwen. [8]. VerfÜgung Viru Kuerzem, e neie System enger eenzeger bioreactor benotzt gouf entwéckelt de Mo-Daarm Passage ze studéieren [9]. De System erlaabt de pH bannen enger eenzeger Atomreakter geännert gin a war an déi verschidde Regioune vun der Mo-Daarm Passage an der Aarbëcht Mol ugepasst. VerfÜgung Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 war kuerzem vom Keefer faeces [10]. Et entsteet eng bacteriocin déi géint Clostridium VerfÜgung sp aktiv ass. an hir Spore. L. gasseri VerfÜgung gehéiert zu de sougenannten "acidophilus" -group an e puer onofhängeg Studie dësen analyséieren als Awunner vun der Haut an Daarm identifizéiert [11-13]. Am fréiere Experimenter, huet et schonn eng kënschtlech VerfÜgung gewise ginn, datt L. gasseri VerfÜgung K7 an en dono Ëmwelt erëmfonnt a mat 0.3% Bile Salzer [10]. Dës Conclusiounen maachen d'Deformatioun interessant wéi eng méiglech probiotic. VerfÜgung An dëser Etude, eng eenzeg bioreactor System baséiert op der Aarbecht vum Sumeri et al VerfÜgung. [9] war benotzt d'Iwwerliewe vun Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 an aacht Bifidobacterium VerfÜgung analyséieren aus dem Schaf ze diskutéieren. Mir konnten d'Resultater fir L. gasseri VerfÜgung K7 mat enger Etude an Gallerie standing ze vergläichen [14] wat d'Evaluatioun vun engem Korrelatioun tëscht der am-kënschtlech VerfÜgung Etude mat Resultater aus an-VIVO VerfÜgung Experimenter op den . VerfÜgung d'Reklassement Mol an pH vun dëser Etude benotzt op Donnéeën aus der Literatur baséiert huet. Puer Methoden existéieren de pH am Daarm fir Moossen [15]. Table 1 weist de pH Wäerter vun de verschiddenen Deeler vun der Daarm wéi vun der Heidelberg zréckzekommen gemoossenen [16, 17]. Aarbëcht Mol kann entweder andeem Bewaacher Substanzen (chemesche) oder vum radio telemetry Kapselen wéi d'Heidelberg VerfÜgung zréckzekommen [18] berechent ginn. Allerdéngs hunn Kapselen normalerweis méi sophistikéiert mol wéi chemesch lues. Table 2 Lëschte puer vun de Reklassement Mol an der Literatur fonnt [4, 5, 19-24] .Table 1 pH Wäerter vun der mënschlecher intestinal TRACT, mat der Kapsel VerfÜgung Heidelberg gemooss. VerfÜgung zu Mo.
Ausléiser
Jejunum
Ileum
proximal VerfÜgung medial VerfÜgung Distal VerfÜgung pH VerfÜgung 1,4 ** VerfÜgung 6,22 * VerfÜgung 6.4 ** VerfÜgung 7.1 ** VerfÜgung 7.4 ** VerfÜgung * Fallingborg et al VerfÜgung. 1994 [16] zu ** Fallingborg et al VerfÜgung. 1998 [17] zu Table 2 Zeréckhalen Mol am Daarm kleng an Literatur zitéiert. VerfÜgung Zeréckhalen Zäit VerfÜgung Source
Wuertmeldung
VerfÜgung 1-4 h VerfÜgung Huang an Adams 2004 [21] zu 4,25 h VerfÜgung Van Den Driessche et al VerfÜgung. 2000 [24] zu Mo a kleng Daarm VerfÜgung 4 h VerfÜgung Mojaverian 1996 [22] zu 6 h VerfÜgung Picot a Lacroix 2004 [4] VerfÜgung Ausgewielten maximal Zäit vun der Simulatioun
7.5 h VerfÜgung Fallingborg et al VerfÜgung. 1990 [20] VerfÜgung Kanner VerfÜgung 8 h VerfÜgung Fallingborg et al VerfÜgung. 1989 [19] zu 8 h VerfÜgung Alander et al VerfÜgung. 1998 [5] VerfÜgung Simulatiouns an der SHIME Atomreakter VerfÜgung 6-10 h VerfÜgung Thews et al VerfÜgung. 1991 [23] bis op d'Donnéeë vun der Literatur an der Aarbecht vun Sumeri et al VerfÜgung fonnt Basis. [9] de Fermentatioun Prozess war ëmschriwwen am Material a Methoden Ariichten an ass zu kengem 1. Dorënner 1 Parameter vun der Mo-intestinal Trip Simulatioun iwwer 7 h. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Saier Resistenz VerfÜgung D'Duerchmusterung dës Zil vun enger éischter Rei vun Tester war een Iwwerbléck vun der Seier Resistenz vun aacht bifidobacteria analyséieren ze kréien. Zuelen 2, 3 a 4 weisen d'Iwwerliewe vun dësen contour Diagrammen huet mat Sigmaplot benotzt analyséieren. Bifidobacterium dentium VerfÜgung (Dorënner 3) huet d'mannst Seier Resistenz. Tëscht pH 4,0 an pH 2.0 do war keen Ënnerscheed zu Iwwerliewe an der Konzentratioun vu méi wéi 7 Logbuch bannent 40 Minutten nëmmen Zellen. Bifidobacterium animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung war méi resistent géint bis zu 40 min bei pH 2.0, mee dann vun ongeféier 3 Logbuch ofgeholl wou fir 120 Minutten (Dorënner 4) incubated. Bei engem pH tëscht 2,5 an 3.0 war de Verloscht manner wéi 1 Logbuch no 120 Minutten. Figur 2 Saier Resistenz vun dräi Bifidobacterium longum analyséieren. X-Achs: Zäit (min); Y-Achs: pH; Logbuch cfu sinn an Faarf (Skala op der rietser Säit vun der Grafike) gewisen. Zuel vun de bakteriell Nimm sinn déi Efforten, déi an der FAM-Datebank vu ALP. VerfÜgung 3 Saier Resistenz vun Bifidobacterium dentium, B. longum subsp Dorënner. infantis a B. adolescentis. X-Achs: Zäit (min); Y-Achs: pH; Logbuch cfu sinn an Faarf (Skala op der rietser Säit vun der Grafike) gewisen. Zuel vun de bakteriell Nimm sinn déi Efforten, déi an der FAM-Datebank vu ALP. VerfÜgung 4 Saier Resistenz vun Bifidobacterium breve a B. animalis subsp Dorënner. lactis. X-Achs: Zäit (min); Y-Achs: pH; Logbuch cfu sinn an Faarf (Skala op der rietser Säit vun der Grafike) gewisen. Zuel vun de bakteriell Nimm sinn déi Efforten, déi an der FAM-Datebank vu ALP. VerfÜgung de All anere getest Bifidobacterium VerfÜgung analyséieren (B. longum, B. breve, B. longum VerfÜgung subsp. Infantis a B. adolescentis VerfÜgung) huet eng ähnlech mee verschidden Muster aus B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung (Sauerdall 2, 3 a 4). Si haten eng kuerz Iwwerliewe Zäit ënnert pH 2,5 an hannerléisst zu héich Zuelen uewe pH 3.5. VerfÜgung No Zil eng Method vun den Entwécklungslänner déi gi vun der bioreactor zu virstellen, e weideren Test war mat engem Klischee gemaach. Fir den Afloss vun engem Liewensmëttel Matrixentgasung fest, bëndelt B. longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung war an z'iesse Mëllech resuspended ier an dono Léisungen inoculating. Wéi an der rietser Kolonn vun Dorënner 5 gewisen, déi Mëllech en direkten Effekt op d'Iwwerliewe vun de Klischee. Tëscht pH 3.0 a 3.5 d'Bakterien fir 120 min mat enger Reduktioun vun Logbuch 2. Hei pH 3.0 d'Iwwerliewe Tarif ze iwwert Logbuch ofgeholl erëmfonnt 5. De Verloscht vun Iwwerliewe ënnert pH 3.0 war rapid awer regelméisseg iwwer d'Zäit. Op pH 3,5 an uewen, war d'Efforten fir op d'mannst 120 Minutte méi resistent. Figur 5 Se Seier Resistenz vun Bifidobacterium longum subsp. infantis 14390 zu NaCl oder z'iesse Mëllech gespaart. Lénks: Bifidobacteria zu NaCl resuspended, Recht: Bifidobacteria zu Mëllech resuspended. X-Achs: Zäit (min); Y-Achs: pH; Logbuch cfu sinn an Faarf (Skala op der rietser Säit vun der Grafike) gewisen. Zuel vun de bakteriell Nimm sinn déi Efforten, déi an der FAM-Datebank vu ALP. VerfÜgung Déi lénks-Hand Kolonne vun Dorënner 5 der selwechter Deformatioun ouni dobäi z'iesse Mëllech weist. Bei engem pH virun 3,5, gouf et keen Afloss op d'Iwwerliewe vun de Bakterien. Allerdéngs, ënnert pH 3,5 ofgeholl d'Iwwerliewe je op d'Dauer vun incubation. Tëscht pH 3.0 a 3.5 haten d'Deformatioun ofgeholl scho vun iwwer 5 No 30 min incubation aloggen, war et bal eng linear Ofsenkung Iwwerliewe mat pH vun 3.0 bis 2.5 ofgeholl. VerfÜgung Simulatiouns an der bioreactor VerfÜgung meescht beschriwwen Systemer vun der Literatur aus verschiddene Reaktioun kritt, zB der SHIME [6]. Aner Studie Sommet Zellen mat dräi reactors benotzt [25] oder engem dialysis System [8]. Baséiert op der Aarbecht vum Sumeri et al VerfÜgung. [9] an de gesammelten Date vun de Bedingungen an de intestinal Trip mir konnten d'Simulatioun fir eng Zuchstreck ze limitéieren. Zesumme mat den Date vun de Seier Resistenz Kontroll, de Choix vun enger méiglech ab pH a Fleeschbritt läschen Zesummesetzung vun der Simulatioun gewielt ginn hätt. Déi doraus resultéierend Simulatioun Parameteren an Dorënner 1 a beschriwwen am Material a Methoden Rubrik gewisen. Während der experimentell Etapp vun dëser Etude, Sumeri et al VerfÜgung. [9] entwéckelt engem ähnleche System Lactobacillus VerfÜgung sp ze diskutéieren. zu enger Mo-Daarm Trip Simulatioun. VerfÜgung D'Software Package "Sandor" war zegutt de pH an de Prozess no der entwéckelt Simulatioun ze kontrolléieren. Wielt déi mëttel- an der bioreactor gouf vereinfacht duerch den entspriechende Wuesstem mëttelfristeg fir d'analyséieren ausgesicht, mat z'iesse Mëllech ergänzt, wéi eng surfen Liewensmëttel Matrixentgasung analyséieren. Uschléissend war et un de Start pH an ergänzt mat Aktivitéit Léisungen acidified wéi an spontan a Methode beschriwwen. D'Simulatioune sech serially duerchgefouert, ee pro Dag. D'Resultater sinn an Dorënner 6. der analyséieren fir d'Simulatioun fir dës Distanz an Dësch opgezielt sinn 3 (nëmmen Bifidobacterium dentium VerfÜgung war ausgeschloss) a sech un e bëss 650 vu 1,5 virun inoculation standardiséierte. Figur 6 Entwécklung vun 7 Bifidobacterium analyséieren während Mo-intestinal Trip Simulatioun fir 7 h. Stoung Linn weist der Zäit vun Zousätzlech vun Bile Salzer a pancreatic Jus. Zuel vun de bakteriell Nimm sinn déi Efforten, déi an der FAM-Datebank vu ALP. VerfÜgung Table 3 analyséieren an der Simulatioun getest. VerfÜgung Numm
Umeldung Zuel vun ALP Deformatioun Kollektioun
Bifidobacterium adolescentis
FAM-14377 VerfÜgung Bifidobacterium breve
FAM-14398 VerfÜgung Bifidobacterium longum VerfÜgung subsp. infantis
FAM-14390 VerfÜgung Bifidobacterium animalis VerfÜgung subsp. Lactis
FAM-14403 VerfÜgung Bifidobacterium dentium
FAM-14396 VerfÜgung Bifidobacterium longum
FAM-14382, -14383, -14406 VerfÜgung Lactobacillus gasseri
K7 VerfÜgung FAM-14459 VerfÜgung Bifidobacterium adolescentis VerfÜgung war uewen bei enger éischter Usammlung vu 10 ëmschriwwen inoculated 7 cfu ml -1 an erofgaangen bal linear zu ënnert 10 4 cfu ml -1 no 5 Stonnen. B. breve VerfÜgung a B. longum VerfÜgung analyséieren haten eng initial Konzentratioun tëscht 10 7 an 10 8 cfu ml -1 a manner ze ënnert 10 2 cfu ml -1 bannent den éischte 30 Minutten. B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung 14403 bis ongeféier 15% vun den initialen Duerchschnëtt cfu vun 5 × 10 erëmfonnt 8 cfu ml -1. Et war eng rapid Ofsenkung Iwwerliewe vun B. longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung iwwer déi éischt 30 min. Uschléissend gëtt d 'Iwwerliewe vun 10 nëmme lues ofgeholl 5 bis 10 4 cfu ml -1. VerfÜgung An enger spéider Phas, Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 war an der Etude och zanter e puer Projeten goufen Lafen bei dëser Zäit bei eisen Institut mat dësem Klischee. Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 war op 2,2 × 10 inoculated 7 cfu ml -1 an no 7 h Simulatioun eng Usammlung vun 10 5 cfu ml -1 Zellen lieft nach an der Kultur Medien (Dorënner 7, rop fir 250 ml Pre-Kultur). Den héchste Reduktioun vun Iwwerliewe war am éischten 2 Stonnen an ugefaang direkt no der Aféierung vun gastric Jus an Bile Salzer. An dëser Zäit, do eng Reduktioun vu liewege Zellen vun Logbuch 2. An de Rescht vun der Simulatioun Zäit war, war et nëmmen e Log 1 Reduktioun vu liewege Zellen. Figur 7 Verglach vun den Afloss vun 100 ml Pre-Kultur vun Lactobacillus gasseri K7 mat 250 ml Pre-Kultur. D'Pré-Kultur war vun centrifugation gesammelt an vun gestallt Natrium Mord Léisung resuspended fir eng OD600 vun 1,5 erreechen. De Mo-intestinal Trip Simulatioun war fir 7 h mat der Taktik Léisung an incubated incubated. D'stoung Linn weist den Zousätzlech vun Bile Salzer a pancreatic Jus. Kéiren der mëttlerer vun zweete Experimenter. VerfÜgung D'Virbereedung vun der inoculum vun L. gasseri VerfÜgung K7 an engem 100 ml Kultur Volumen war och bewäert. D'Resultater vun den Experimenter si zu kengem 7. Mat 250 ml Kultur de Verloscht vun lieweg Zelle iwwer Logbuch 2 huet dës Coursë vum erofgoen mat engem 100 ml Kultur nëmmen 1 iwwert de ganzen incubation Zäit Logbuch war. Allerdéngs, 2 h der Zousätzlech vun Bile Salzer a pancreatic Jus, d'Diminutioun vun Zell zielt war ähnlech fir zwee Bänn. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Wann eng Kultur no enger bestëmmter incubation Zäit Wäilies, kann de Wuesstem Phase vun all bakteriell Deformatioun ginn verschiddene well all hu verschidden Wuesstem Dynamik. Fir Zellen ongeféier op der selwechter Wuesstem Phas ze kréien, goufen virleefeg Experimenter gesuergt (Donnéeën net gewisen). An incubation Zäit vun 15 h fir d'Pré-Kultur war fir all getest analyséieren ausser Bifidobacterium longum VerfÜgung subsp gëeegent. infantis VerfÜgung wat fir nëmmen 12 h waren gin incubated. VerfÜgung D'Seier Toleranz Duerchmusterung (Sauerdall 2, 3 a 4) war standing den Effet vun pH onofhängeg vun anere Konditiounen ze diskutéieren. Bifidobacterium dentium VerfÜgung war héich sensiblen zu Seier an dofir wär eventuell net de Passage duerch de Moo iwwerlieft. D'Efforten war also net an der Simulatioun Experimenter mat abegraff. Den B. longum VerfÜgung analyséieren (Dorënner 2) gemaach nozeginn net vill besser Resultater wéi B. dentium VerfÜgung (Dorënner 3). Allerdéngs, no 4 pH goufen se méi resistent wéi B. dentium VerfÜgung. VerfÜgung B. longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung ass eent vun den éischte Arten de Mënsch Daarm kuerz no der Gebuert ze leiden [26]. Baséierend op d'Experiment an dëser Etude, awer de B. longum VerfÜgung subsp getest. infantis VerfÜgung Deformatioun hätt just gebass gin d'Régence Mo. zu héich Zuelen ze Ugrëff wann der Transitioun Zäit vun der dono Mo. ganz kuerz war. D 'Iwwerliewe vun der gewielter Efforten am getest Ëmwelt war ze héich fir erfollegräich Passage zu héich Zuelen. Wann de Klischee vun z'iesse Mëllech resuspended war, fräi Iwwerliewe (Dorënner 5). Dat kéint eng Indikatioun ginn, datt de Mënsch Mëllech B. longum VerfÜgung subsp hëlleft. infantis VerfÜgung analyséieren de Mo-Daarm Passage an Ugrëff mat op eng héich Iwwerliewe Tarif. VerfÜgung D'Schutz- Auswierkunge vun Mëllech Proteinen am digestive System schonn an der Literatur beschriwwe ginn [27]. Schutz mat Mëllech Proteinen huet och an dëser Etude (Dorënner 5) gewise gouf. Mat de passenden Matrixentgasung oder souguer e gouf, konnt probiotic Bakterien Ugrëff Fluchtweeër duerch de Mo op der intestines hirem Site vun der Aktioun ze erreechen. VerfÜgung B. adolescentis VerfÜgung analyséieren dass de Mënsch Daarm op eng spéider Alter leiden, déi méi héich Resistenz wéi B. longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung déi vläicht d'Reduktioun vun der Pai während dem Fortschrëtt vun der Mënschheet Keefer ze Nesset [26] erklärt. VerfÜgung De stäerkste interessant Deformatioun war B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung, déi d'mannst sensibel Klischee vun eiser Etude war. Dëst pH-resistent Deformatioun huet e groussen Potential fir Benotzung vun Fastfood als probiotic Zousaz zënter enger héijer Zuel vu bakteriell Zellen géif de Passage iwwerlieft. Mä, dësen Efforten als probiotic ze benotzen, méi Etuden an Uerdnung gesuergt gin hun der probiotic Statut no der Definitioun vum Klaenhammer [3]. VerfÜgung An eiser Etude, déi geféierlech vun engem Liewensmëttel Matrixentgasung ze erreechen war an enger éischter surfen Ëmwelt vun acidified Mëllech a Wuesstem mëttelfristeg. Den Zousatz surfen gastric Léisung a Sauerstoff am Mo. Phas ze iwwerdribblen fir de Stress. Während der surfen Passage an der klenger Daarm war de Sauerstoff duerch Stéckstoff an der mëttel- ersat gouf zu pH 6.3 neutraliséiert. Zousatz vun der pancreatic Léisung an Bile Salzer ofgeschloss de Passage an der klenger Daarm. Dëst am-kënschtlech VerfÜgung System krute keng Rechnung, datt an zu VIVO VerfÜgung unzereegen, sinn Enzymen ageschalt an inactivated an aner Substanzen, e.g. Bile Salzer sinn reabsorbed. Sumeri et al VerfÜgung. [9] fonnt enger deelweiser Léisung dësem Problem ze spillen. Si verdënntem den Inhalt vun den Atomreakter mat engem speziell dilution mëttelfristeg entworf. Aner Méiglechkeet wier d'Bile Salzer um Enn vun Simulatioun vun de klenge Daarm ze Manéier d'enterohepatic Circuit zu imitéiert. Dëst kéint mat Kalzium Protonen opgeféiert ginn [28-30]. der Bile Salzer besser d'Ëmwelt vun de Colon virstellen géif leeën a vläicht souguer bifidobacteria zu proliferate erlaben. An eiser Etude VerfÜgung, de Rescht Bile Salzer a pancreatic Jus an der Simulatioun fir eng zousätzlech Belaaschtung op Bakterien Nerve wéi wahrscheinlech de richtege Charakter verännert vun der analyséieren an VIVO VerfÜgung. de Start cfu an der Simulatioun bannent ee Logbuch cfu variéiert obwuel d'Upassung vun sel 650 vun der inoculum virdrun mat der Bifidobacterium animalis VerfÜgung subsp VerfÜgung getest gouf. lactis VerfÜgung an Bifidobacterium longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung analyséieren. D'bifidobacteria an dëser Etude benotzt weisen eng Tendenz Stärekéip ze Form datt zu reduzéiert cfu (net gewisen visuell Observatioun, Daten) Resultat kann. An anere studéieren, konnt d'Équipe vun Stärekéip ze falender pH während Wuesstem [31] Zesummenhang ginn. Dës Stärekéip sinn normalerweis als eng Kolonie op enger Plack gezielt. VerfÜgung Dorënner 6 weist d'Resultater vun de Mo-Daarm Trip Simulatioun iwwer 7 h vu siwen getest Bifidobacterium VerfÜgung analyséieren. D'Konzentratioun vun Zellen vun bifidobacteria liewege ofgeholl direkt no incubation wéinst der niddereg pH (pH 3.0). Allerdéngs B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung stabil. Dat confirméiert d'Resultater vun de leschte Experimenter diskutéiert uewen (Dorënner 4). Dëst Resistenz konnt vergréissert ginn Salzer a pancreatic Jus obwuel d'Zell zielt vun B. animalis VerfÜgung subsp zu Bile. lactis VerfÜgung vun iwwer 85% vun den initialen Wäert (Dorënner 6) ofgeholl. Am Verglach zu den aneren an dëser Etude benotzt analyséieren, allerdéngs gouf dëse Verloscht bal negligible. VerfÜgung All B. longum VerfÜgung a B. breve VerfÜgung analyséieren gestuerwen ganz séier am Ufank vun der Simulatioun an sech ënnert d'Detektioun Limite vun der di Method bannent e puer Stonnen (Dorënner 6), déi aus de Resultater vun der Duerchmusterung Experimenter uewen (Sauerdall 2 an 4). VerfÜgung Wéinst dem B. longum VerfÜgung subsp erwaart war gin. infantis VerfÜgung 14390 ofgeholl séier um Ufank vun Simulatioun awer no der Aféierung vun pancreatic Jus an Bile Salzer an enger Verännerung eng selwescht Ëmwelt, d'Reduktioun Quote ofgeholl. Eis Etude seet, datt dës Efforten och fir d'Konditioune vun der Daarm ugepasst ass awer brauch an héich Zuelen ingested ginn d'Konditiounen am Mo. (Sauerstoff, niddereg pH) ze iwerliewen. Als verwisen, B. longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung analyséieren gehéieren zu den éischte Grupp vun Bakterien populating Daarm vu Puppelcher [26]. VerfÜgung Am Géigesaz zu B. longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung, B. adolescentis VerfÜgung bal linear während der 7 h Simulatioun ofgeholl. Et gouf kee Magnéitfeld Ënnerbriechung wann d'Konditioune vun der fermenter geännert. Baséierend op d'Experiment fir d'Seier Toleranz Duerchmusterung, war dëst Resultat onerwaart. VerfÜgung Mä, kéint dat fir d'Testen Konditioune virgewise ginn, wou d'Bile Salz a gastric Jus Konzentratioune am initialen Niveau bleift an sech net verdënntem wéi se am wier VIVO VerfÜgung. An enger Zukunft Experimenter, soll et ob der dilution Method vun Sumeri et al VerfÜgung entwéckelt bewäert ginn. [9] géif d'Zell zielt stabiliséieren vun B. während de 6 h Simulatioun Period am Daarm adolescentis VerfÜgung. VerfÜgung An eiser Etude, mir évaluéiert och de Mo-Daarm Passage vun Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7. D'Efforten huet scho fir Iwwerliewe vun VIVO VerfÜgung an Gallerie [14] bewäert. Dofir, et ass méiglech fir eis am-kënschtlech VerfÜgung Resultater mat Daten aus an VIVO VerfÜgung Experimenter vergläichen. VerfÜgung Bogović et al VerfÜgung. [14] z'iesse Gallerie iwwer eng Period vu 14 Deeg mat 5 * 10 10 cfu Dag -1 vun L. gasseri VerfÜgung K7. Doduerch ca. an. 7 * 10 4 cfu g -1 an der faeces während de Mo. Period. Et ass ze berücksichtege sinn, datt d'Konzentratioun vun Bakterien verdënntem war éier et endlech um Mo-Daarm Trip ukomm. An engem haarde Upassung, multiplizéiert mat mir, datt ronn 1% bei de Passage ukomm. Dat erlaabt eis, mat um Enn vun eiser Simulatioun d'Resultater vun dëser piglet studéieren ze vergläichen. VerfÜgung Als zu Dorënner 5, L. dës gasseri VerfÜgung K7 haten eng Zell Usammlung vu ronn 5 * 10 4 cfu ml -1 no der 7 h Simulatioun Period (mat enger Pré-Kultur vun 250 ml), déi fir d'Konzentratioun vun der faeces vun der Gallerie ähnlech ass. Dëst deit drophin, datt d'Simulatioun Modell an dëser Etude benotzt hätt eng hëllefräich Outil ginn d'Auswierkunge vun de Passage vun enger zu-kënschtlech VerfÜgung Modell Devis virun benotzt deier zu VIVO VerfÜgung Modeller. De Modell weider duerch verwässeren der Bile Salzer a pancreatic Jus optimiséiert ginn hätt wéi déi vun Sumeri et al VerfÜgung beschriwwen. [9]. Fir d'Aktivatioun an aktivéiert vun Enzymen enger gëeegenter Method virstellen huet nach fonnt ginn. VerfÜgung Wann nëmmen 100 ml mëttelfristeg fir d'inoculum vun L. gasseri VerfÜgung K7 benotzt gouf, erëmfonnt der Kultur der Simulatioun besser (Dorënner 7). Béid Bänn haten eng ähnlech initial Zell zielen. Béid Bänn sech vun 1 ml inoculated. Dofir, war d'Kultur mat 250 ml Volume vun enger éischter Etapp vum Wuesstem wéi den 100 ml Kultur. Dës Resultater goufen eng Indikatioun vun der Wuesstem Phase Ofhängegkeet vun der Kultur fir während Stress. VerfÜgung Conclusioun An dëser Etude VerfÜgung, mir konnten ze weisen, datt de System vun de Mo-Daarm Trip duerch Sumeri et al entwéckelt zu virstellen
. [9] war fir de Bilan vun Iwwerliewe vun 8 Bifidobacterium VerfÜgung analyséieren an Lactobacillus gasseri gëeegent VerfÜgung K7 obwuel mir déi Prise vun gastric Jus an Bile Salzer net virstellen. mir konnten d'Resultater mat engem an-VIVO VerfÜgung Etude op Gallerie a kritt ähnleche Resultater fir L. gasseri VerfÜgung K7 ze vergläichen. Déi eenzeg Atomreakter System hei virgestallt VerfÜgung erlaabt e méi einfach Identifikatioun vun der ideal Wuesstem Phas fir all méiglech probiotic Efforten déi de Mo-Daarm Passage wéi bis laanscht néideg ass wann et mat aner Systemer mat engem schwéier charge opgeféiert ginn. VerfÜgung d'Etude awer och, datt all analyséieren Bifidobacterium VerfÜgung getest, ausser fir B. animalis VerfÜgung subsp. lactis VerfÜgung, géif Schutzpatrounin Agenten Chinesen de Passage duerch de Mo-Daarm an héich Zuelen ze iwerliewen. Dat kéint eng adäquat Liewensmëttel Matrixentgasung oder encapsulation vun den Zelle gemaach ginn benotzt. VerfÜgung Method VerfÜgung bakteriell analyséieren VerfÜgung All bifidobacteria analyséieren vun de Klischee Kollektioun vun Agroscope Liebefeld-Posieux ALP Research Station Schwäiz ausgewielt goufen, isoléiert vun ALP aus Mënsch Quellen. Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7 entstanen aus der Zim Collection vun Industriezon Microorganisms vun Universitéit vu Ljubljana, Biotechnical Fakultéit (Zim 105) [10] a war och an der ALP Deformatioun Sammelplaze. D'getest analyséieren an hier Identifikatioun Zuelen vum Klischee Kollektioun ALP zu Dësch 3. All bifidobacteria analyséieren sinn am Besëtz vun ALP opgezielt sinn. VerfÜgung Media a Wuesstem Konditiounen VerfÜgung Fir Pre-Kulturen, 1 ml gefruer conserves vun der analyséieren sech (; Biolife, Milano, Italien Méint jonk!) an 250 ml Wilkins-Chalgren läschen (WM CM0643, Oxoid, Hampshire, UK) ergänzt mat 9 GL -1 zousätzlech Delikatessen-monohydrate (Bifidobacteria) oder De Man-Rogosa-Sharpe inoculated mëttel- (Lactobacillus gasseri VerfÜgung K7) [32]. Fir L VerfÜgung. gasseri K7, e Prozess mat engem 100 ml Pre-Kultur ass och gesuergt. All analyséieren, ausser Bifidobacterium longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung, sech fir 15 Stonnen ënner selwescht Konditiounen bei 37 ° C incubated. Bifidobacterium longum VerfÜgung subsp. infantis VerfÜgung war fir 12 h incubated well et ganz sensibel bis verlängert incubation Perioden war. D'Pré-Kulturen sech fir 15 min bei 3500 Ziichter an der Pellets an 10 ml vun phosphate-gefiermt gestallt Natrium Mord Léisung (PBS). VerfÜgung Entschlossenheet vun Zell zielen zu der Zell Grof war déi 10-fantastesch sech resuspended centrifuged Serien dilution vun der Kultur an gestallt Salins Léisung. Déi zwou héichste dilutions sech dann plated Mme Agar (Biolife, Milano, Italien) mat engem Spiralrelief plater (IUL Instrumenter, Barcelona, ​​Spuenien) a bewäert duerch eng automatiséiert Kolonie Konter mat den entspriechende Software (IUL Instrumenter, Barcelona, ​​Spuenien).
legendären fir Seier Resistenz VerfÜgung fir d'Seier Resistenz der Konzentratioun Zell Ophiewe vun der Pré-Kultur Duerchmusterung war an 20 ml vun PBS bis e bëss pipetted 650 vun 1.0 erreecht gouf. 4 ml vun dëser Zell Ophiewe sech dann an 16 ml vun citrate-HCl gefiermt inoculated (Dräilännereck-Na-Citratex2 H 2O 7,35 g a 250 ml destilléiert H 2O, ugepasst un d'entspriechend pH mat 1 M HCl) um pHs vun 2.0, 2.5, 3.0, 3.5 an 4.0. D'incubation war bei 37 ° C gemaach an Echantillon waren all 30 min iwwer 120 min geholl. 1 ml vun Echantillon waren mat 9 ml 0,25 M phosphate gefiermt um pH 7.0 bei den éischte Schrëtt vun der dilution Serie gemëscht. Fir d'Seier Resistenz Test an engem Liewensmëttel Matrixentgasung, de selwechte Montant vun Pre-Kultur wéi virun benotzt (ugepasst fir eng sel 650 vun 1.0) war an 20 ml vun UHT z'iesse Mëllech pipetted. 4 ml vun dëser Zell Ophiewe vun Mëllech waren an 16 ml vun citrate-HCl gefiermt inoculated. All Chemikalien sech aus Merck (Darmstadt, Däitschland) kaaft. D'Daten vum Schädel Experiment war zu contour Diagramm mat der Software Sigmaplot 11,0 visualized (Systat Software Galaxy Chicago IL, USA). VerfÜgung Simulatiouns am bioreactor VerfÜgung All Léisungen frësch fir all Experimenter virbereet goufen. Surfen Mo. Léisung gouf vun 50 mg pepsin porcine gastric mucosa (Fläch-Aldrich P7012, Buchs, Schwäiz) an 20 ml vun 0,1 M HCl feieren. Fir d'surfen pancreatic Jus 2 g pancreatin (Fläch-Aldrich P7545) waren an 50 ml vun 0,02 M phosphate gefiermt op engem pH vun 7.5 opgeléist. Surfen Bile Salz Léisung gouf vun 7.5 g Bovine Bile (Fläch-Aldrich B3883) huet bis zu 50 ml mat destilléiert H 2O feieren. Déi läschen fir d'Simulatioun war entweder 1 l WM oder Méint jonk! Läschen mat 29,41 g Dräilännereck-Natrium citratex2 H 2O. Während Testen vum Iwwerliewe vun engem Liewensmëttel Matrixentgasung, 500 ml vun UHT sech z'iesse Mëllech kommen an de pH ugepasst fir 3.0 mat 5 M HCl kuerz virun der Simulatioun. 1 l mëttelfristeg war fir d'bioreactor (NewMBR Mini, NewMBR, Schwäiz) ugebaut, virdrun mat Waasser goen (121 ° C, 20 min), an ass gehëtzt bis 37 ° C. Während de Mo. Simulatioun, war Evil ëmgesat. D'Fermentatioun war kontrolléiert a mat integréierte Prozess Gestioun Software Sandor (Biospectra, Schlieren, Schwäiz) opgeholl. D'Konzentratioun Zell Ophiewe vun der Pré-Kultur war an 40 ml vun PBS fir eng sel 650 vun 1,5 pipetted. Kuerz virun der inoculation vun 40 ml Zell Ophiewe, 20 ml vun der surfen Mo. Léisung war bis mëttelfristeg (1 l) an der bioreactor notéiert. D'PH seng war mat 2 M NaOH. VerfÜgung siechzeg Minutt nom inoculation vun Zellen, war de Sauerstoff duerch Stéckstoff ersat eng selwescht Atmosphär ze kréien.

• Risiko Beurteelung vun gastric Kriibs mat Asbestose verbonne: e Fall report
• Bactericidal Aktivitéiten vun der cationic Arméi CSA-13 an d'cathelicidin peptide LL-37 géint Helicobacter pylori zu surfen gastric juice