Ënnersichung vun Chance glandular Mo. lesions fir Bakterien, dorënner Helicobacter niwweleg vun fluorescence zu situ hybridisation

Examen Chance glandular Mo. lesions fir Bakterien, dorënner Helicobacter niwweleg VerfÜgung vun fluorescence zu situ VerfÜgung hybridisation VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background
D'Chance glandular Mo ass allgemeng duerch Erosioun a ulceration betraff. D'Zil vun dëser Etude war ze evaluéieren, ob Bakterien, dorënner Helicobacter, hätt am aetiology vun gastric glandular lesions zu Päerd gesinn Équipe ginn. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Mo. lesions, souwéi normal Rostain mucosa sech aus Päerd geschluecht kritt fir mënschleche Konsum. All Echantillon waren fir urease Aktivitéit getest der Pyloritek ® assay benotzt, iwwerdeems mucosal bakteriell Inhalt bewäert war Fluorescence An Situ VerfÜgung Hybridisation benotzt. Am ausgewielten Ënner Echantillonen, war Bakterien characterization weider duerch Biologie an sequencing emgesat. Mucosal lesions sech zu 36/63 Mamm an och hyperplastic rugae, polypoid Strukturen an Brennwäit erosions fonnt. Keen vun den Echantillon waren positiv fir urease Aktivitéit oder fir FISH mat der Helicobacter Gattung spezifesch Studiebäihëllefe getest. Am Echantillon vun lesions, souwéi normal Echantillonen, clones mat 99% eraus ze Lactobacillus salivarius VerfÜgung an Sarcina ventriculi VerfÜgung goufen fonnt. Escherichia VerfÜgung wëll Bakterie clones an Enterococcus clones sech an eng Brennwäit Erosioun bewisen. Baséierend op engem phylogenetic Bam haten dës clones 100% Ähnlechkeet Escherichia fergusonii an Enterococcus faecium VerfÜgung. D'Enterococcus sech fonnt der mucosal Uewerfläch colonizing, iwwerdeems E. fergusonii VerfÜgung Organismen och intraepithelial bewisen huet. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung Gastric Helicobacter niwweleg. kéint net als Équipe an lesions vun der glandular Mo vun de Päerd Fra ginn. Zanter E. fergusonii VerfÜgung huet wéi eng aner pathogen souwuel Mënschen an Déieren, d'Opklärung vun dëser Bakterie zu gastric Erosioun misst weider Ännerung ze ob gastric Wonn mat dësem Typ Bakterie beschriwwe ginn fir Päerd wichteg ass. VerfÜgung Background
, vun lesions d'net-glandular Deel vun de Mo. sinn héichgradeg verwandelt a schéngen duerch exzessiv Seier aussetzt verursaacht ginn [1], mä wéineg iwwert lesions gouf an der glandular Deel beschriwwen. Lesions an der glandular Regioun etabléiert sech zu 58% vun 162 Klinik Päerd [2] an zu 47% vun 345 racehorses [3] an iwwerdeems d'Ursaach vun dësen hu vill Opmierksamkeet net scho bewisen, Seier aussetzt schéngs net d'Primärschoul Faktor ze ginn , wéi keng Korrelatioun tëscht lesions vun den zwou Regiounen vun de Mo ass fonnt ginn [3]. Gastric Bakterien wéi d'Ursaach fir glandular Mo. lesions gewiescht fir vill Déieren a Mënschen dës sécherlech eng grouss Fra Risk Faktor ugeholl VerfÜgung. Vun der gastric Organismen fonnt, Helicobacter pylori VerfÜgung huet déi wéinst hirer pathogenic Potential vun Pinguin chronescher gastritis, ulcers, adenocarcinomas an mucosa verbonne lymphoid Otemschwieregkeeten (Malz) lymphoma zu Mënschen [4-6] beschriwwe ginn. Bakterien vun dëser Gattung hunn och zu gastric Otemschwieregkeeten Echantillon vun Déieren dorënner Muppen, Schwäin, Schof a Ranner [7-10]. VerfÜgung An d'Päerd, widderspréchlech Beweiser exits wéi bis ob Bakterien déi gastric lesions geschéien fonnt gi speziell verursaache kann. E puer Studien hunn, datt gastric Helicobacter niwweleg VerfÜgung uginn. an normal Rostain mucosa präsent sinn duerch Hinnen alleguer an immunochemistry benotzt [11, 12], anerer keng Beweiser fir eng Verbindung tëscht der Präsenz vun lesions a Bakterien fonnt hunn [13]. Als gastric bakteriell Aarten hunn als Deel vun der pathogenesis vun verschidden Zorte vun gastric wirklech zu de Mënschen an aner Déierenaarten confirméiert oder ugeholl gouf, war d'Zil vun dëser Etude ze bewäerten, wa Bakterien am wirklech am Chance glandular Mo. observéiert Équipe ginn hätt. A Haaptfokus war méi Beweiser iwwer d'Präsenz a Lokalisatioun vun Bakterien am General op der mucosa Niveau vun der Chance glandular Mo ze bidden. Special Schwéierpunkt war op Ufro Informatiounen iwwert d'Präsenz an den Engagement vun all Helicobacter Arten am mucosal lesions VerfÜgung huet. D'Fluorescence An situ VerfÜgung hybridisation (FISH) Technik war fir dësen Zweck benotzt wéi fir d'Benotzung vun rRNA-geziilte Ämter erlaabt esouwuel de ganzen bakteriell Bevëlkerung an definéiert Gattung /Aarten. Dës Approche Genehmegungen der Determinatioun vun bakteriell Wirklechkeet, Iwwerfloss, Lag vun der Stoffer, an och Indikatiounen op Wuesstem Tariffer a Fro gestallt Aktivitéiten [14]. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Gross glandular lesions sech zu 36 vun den 63 Mamm iwwerpréift gesinn (57.1 %). D'Majoritéit vun lesions waren am antrum Regioun (91.7%) gesinn. An sechs Mamm, sech Weideren lesions oder exklusiv am Cardia oder lénken Regioun gesinn. Nee lesions an der Ausléiser fonnt goufen VerfÜgung D'lesions an dräi Gruppen wéi séiert huet:. Polypous (2 Mamm mat polypoid Sonnemassen am wellkomm souwuel d'Cardia an der antrum mat Gréissten tëschent 1 a 5 Zentimeter Duerchmiesser), II: Hyperplastic rugae lesions (13 Mamm) oder III:. Hyperaemic, erosive oder ulcerative lesions, déi zu 21 Mamm gesinn huet VerfÜgung d'hyperplastic rugae all waren an der antrum an gounge mat exudate aus dass enorm hyperemia gesinn mat normalerweis Rostain mucosal Uewerfläch bis rugae. Gross thickening vun der antrum rugae war virun allem duerch hyperplasia vun der gastric foveolae ëmmer am Verglach zu der jeweileger normal Echantillon. Déi reschtlech lesions waren all ze kleng eenzel lesions vun kee méi wéi ongeféier 1 × 2 cm zu Gréisst fonnt. Brennwäit Beräicher vun erosive gastritis war déi gemeinsam Conclusiounen vun dësen Typ lesions an zeechent vun der iwwerflächlech Zellen vun der luminal epithelium mat engem concurrent fibrinopurulent exudate, luminal bewosst Protokoll an enger Kannerbetreiung mononuclear Zell infiltrate vun der lamina propria sloughing. Déif an 9 Mamm fonnt erosions eroded souwuel der Regioun vun der gastric hëlt an Deeler vun der Glands, déi nëmme vun der direkter Stoffer mat gastritis observéiert gouf. Eng richteg oppent gouf fonnt déi voll deck vun der lamina propria verlängeren, si der lamina muscularis zu der lumen. E Maximum vun zwee lesions sech zu all vun dësen Mamm. VerfÜgung Helicobacter an Urease Aktivitéit Test VerfÜgung deems der Gattung Helicobacter spezifesch Studiebäihëllefe kee positive Signaler an all vun den 79 Otemschwieregkeeten Echantillon (36. vläit Echantillonen an 7 Kontrollen) fonnt goufen fonnt . Am Accord mat deene Resultater vun de FISH, keent vun den Echantillon getest entweder fir urease Aktivitéit positiv. Intern Kontrolle vun all urease Tester goufen positiv als Indikatioun vun engem funktionell Test Kit. VerfÜgung Bakterien am allgemengen VerfÜgung Am allgemengen fonnt, just puer Bakterien op der mucosal Uewerfläch Zesummenhang observéiert goufen souwuel d'blesséiert souwéi an der gesond Mo. Echantillon. Am Allgemengen, véier morphological verschidden Zorte vun bakteriell Zellen mat der Eubacteria Studiebäihëllefe visualized kéint: 1) kleng, kuerz (0.2-0.5 μm) coccoid Piston, 2) z'ënnerscheedde Piston (1 × 3 μm), 3) laang wonerschéi Piston (bis 60 μm) oder 4) grouss (2-3 μm Duerchmiesser) coccoid Bakterien Partitur kloer an opzefëllen. Typesch wann präsent, mat fidderen Deelercher oder Liez an Stärekéip Bakterien observéiert goufen Uewerfläch bis de mucosal verbonne VerfÜgung Biller vun bakteriell gastritis an eng Mo lesion fonnt gouf Réckbehalung als eenzel Erosioun charakteriséiert, 1 × 2 cm vun Gréisst, gëtt den Zentrum hyperaemic a vun engem proliferative epithelial Kraterrand (Figebam. 1) ëmginn. Microscopically, Brennwäit Ofkéier vun der mucosa mat léisst ee sech vun erythrocytes an leukocytes, haaptsächlech vun neutrophilic Urspronk, gesi war. D'exudates sech Weideren am gastric hëlt gesinn. A bewosst demagogesch Reaktioun mat mononuclear Zellen war wéi déif wéi an der lamina muscularis gesinn verlängeren. D'Surface vun der gestuerwe mucosa an der gastric hëlt sech kräfteg koloniséiert vun coccoid ze kuerz Piston Applikatioun vum Studiebäihëllefe fir allgemeng Bakterien (Figebam. 2) fonnt. Déi kuerz Piston sech besonnesch observéiert der Erosioun infiltrating. Si waren och intracellular zu epithelial Zellen observéiert, wéi och innerhalb neutrophilic granulocytes. D'bakteriell Kolonisatioun vun de Mo. war de lesion limitéiert wéi keng Bakterien am entspriechende gesond mucosa Prouf gesi waren. Figur 1 Brennwäit erosive lesion (wäisse Pfeil) bakteriell gastritis um histological Evaluatioun Musiktherapie-. Lesion war ongeféier 2 × 2 cm an der antrum bei der pyloric Entrée läit. VerfÜgung 2 Gastric mucosa mat erosive gastritis mat Bakterien verbonne Dorënner. D'mucosal Uewerfläch an bascht bewosst Protokoll ass streng vun Bakterien (rout) koloniséiert. E puer Bakterien sinn intracellular gesinn zu der intakt epithelium (arrowhead) wéi och innerhalb degenerated an necrotic epithelial Zellen (Pfeil). Ausserdeem sinn Bakterien am granulocytes fonnt. Unisse zu situ hybridisation mat de Studiebäihëllefe gezielt Bakterien, filter Formatioun 43, Bar = 25 μm. VerfÜgung Biologie an sequencing VerfÜgung Baséierend op der Wirklechkeet an d'Intensitéit vun Bakterien benotzt FISH bewisen, subsamples vun der C /c Echantillon waren ausgewielt fir Klonen an sequencing vun Echantillon dorënner de eent mat bakteriell gastritis vertrëtt. VerfÜgung of der gewielt subsamples vun Mamm diversen Bakterien morphologies, zwou verschidden Zorte vun clones Musiktherapie- sech zu normal Rostain mucosa Echantillon (c Echantillon) fonnt, déi eng Copie 99% Ähnlechkeet zu Lactobacillus salivarius VerfÜgung JCM 1231 (AB370881) an déi aner Zort vun clones zu Sarcina 99% Ähnlechkeet haten ventriculi VerfÜgung deem 316 (X76650). VerfÜgung vun der lesions (C Echantillon), waren clones och mat 99 fonnt % Ähnlechkeet Lactobacillus salivarius VerfÜgung JCM 1231 (AF182725). Vun der mucosa mat bakteriell gastritis, véier vun zéng clones stemmt 100% Enterococcus faecium VerfÜgung, während de Rescht sechs clones (kritt Haaptrei am GenBank verschéckt mat de Bäitrëtt keen. GQ423062) zu enger Escherichia wëll VerfÜgung Bakterie goung. A phylogenetic Bam mat de sechs Escherichia VerfÜgung wëll clones vum lesion an all déi 100% Ähnlechkeet mam Typ analyséieren souwuel E. fergusonii VerfÜgung an Shigella flexneri VerfÜgung (Figebam 3) gebaut. Kandidatur e gamma proteobacteria spezifesch Studiebäihëllefe der kuerzer Piston de epithelium infiltrating, souwéi fonnt intracellular bannent neutrophilic granulocytes, Fra waren och déi Escherichia VerfÜgung wëll Bakterie iwwerdeems Enterococcus faecium VerfÜgung Organismen identifizéiert sech duerch d'Enterococcus spezifesch Studiebäihëllefe der epithelial Uewerfläch colonizing (Lalumi 4 a 5). Figur 3 A phylogenetic Bam vun 16S rRNA Gentherapie Haaptrei Ähnlechkeet, weist d'Positioun vun de sechs clones zu Gammaproteobacteria gehéiert fonnt an Horse 50L an de meeschte streng wëssenschaftlech gehéiert Typ analyséieren an der Escherichia Gattung. Déi sechs clones (acc.no. GQ423062) hat 100% Ähnlechkeet Shigella flexneri VerfÜgung a E. fergusonii VerfÜgung. Enterobacter sakazakii (AB004746) war den sehbehënnert Leit benotzt. Haaptrei Bäitrëtt Zuelen presentéiert. VerfÜgung 4 Gastric mucosa vu Päerd 50L mat erosive gastritis Dorënner mat Bakterien assoziéiert. engem fluorescein Fortgeschratten Studiebäihëllefe fir Gammaproteobacteria an enger Cy3 Fortgeschratten Studiebäihëllefe fir Enterococcus opmaachen, eng Kolibakterie VerfÜgung wëll Gebeitechnik (gréng) (arrowhead) war intracellular bannent epithelial Zellen an op der epithelial Uewerfläch hierkommen E. faecium (rout) ( "fonnt wäisse Stär (nëmmen d'epithelial Uewerfläch koloniséiert. Filter Formatioun 43/38, Bar = 10 μm. VerfÜgung 5 Gastric mucosa vu Päerd 50L mat erosive gastritis mat Bakterien verbonne Dorënner. High Vergréisserung Musiktherapie- Kolibakterie VerfÜgung wëll Piston ( gréng) bannent extruded epithelial Zellen. d'zu situ hybridisation mat de Studiebäihëllefe Gammaproteobacteria gezielt, filter Formatioun 38, Bar = 10 μm. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung virdrun Studien d'Chance Mo. sensibiliséieren Hinnen alleguer zB hutt den 16S rRNA Gentherapie Reklamme vun allem Helicobacter VerfÜgung niwweleg. [12]. d'Nodeeler Hinnen alleguer benotzt ginn, datt d'Quantitéit an Lag vun der Bakterien net bekannt ass an et ass nach onsécher, ob d'Bakterien si lieweg oder souguer wann d'DNA ass plakeg. Dofir, et gouf decidéiert, datt de FISH Technik mat besser a méi Informatiounen hätt déi vun den am glandular Mo vun de Päerd fonnt Bakterien, wéi dës Problemer mat dëser Technik iwwerwonne ginn. Dës Technik ass virdrun ze beschreiwen déi raimlech Verdeelung vun Helicobacter VerfÜgung niwweleg benotzt. an der gastrointestinal TRACT Muppen an am Mo vun gesond Päerd der microbiota vun der normal Rostain squamous an glandular mucosa ze weisen [15, 16]. Fir de beschte vun eisem Wëssen ass dëst déi éischt Etude FISH benotzt lesions vun der glandular Mo. ënnersicht. VerfÜgung Am Moment studéieren ee Fall vun gastritis mat bakteriell Kolonisatioun verbonne opgedeckt gouf. Besonnesch proposéiert d'Verdeelung vun Bakterien eng Verbindung mat der wirklech observéiert. De Montant vun Bakterien Ofstand ronderëm d'lesion fräi a sech rigoréis dem epithelial Zellen Directioun respektéiert, mat der an der crypts verlängeren Bakterien a matzen intracellular. D'Klone gewisen, datt et eng duebel Wonn mat Enterococcus faecium VerfÜgung an eng Escherichia VerfÜgung wëll Bakterie war, mee et gouf ubelaangt der VerfÜgung hybridisation mat engem ESO proteobacteria zu situ benotzt Studiebäihëllefe dass et nëmmen d'Escherichia war
wëll Bakterie déi de iwwerflächlech ulcerations communal an huet intracellular zu epithelial Zellen a bannent neutrophilic granulocytes fonnt. Enterobacterial Wonn am Daarm ass eng gemeinsam Phänomen, mee et ass seelen dës Aids an de Mo ze fannen a se huet virun ni am Erwuessenen Päerd gemellt ginn. Dëst Resultat ass ganz spezielle awer weider Studien brauchen ze klären, wéi heefeg dëst Phänomen zu Päerd ass. Och, ob dës Zort vun Wonn vun der Primärschoul oder Lycée Hierkonft misste weider Ännerung. D'Escherichia VerfÜgung wëll clones all déi 100% 16S rRNA Gentherapie Ähnlechkeet souwuel E. fergusonii VerfÜgung an Shigella flexneri VerfÜgung. Sou, an dat studéieren, et kann net experimentally déi vun dësen zwee Organismen precised ginn, datt an dësem glandular lesion präsent waren. Allerdéngs goufen Mënschen gemellt der nëmmen natierlech Provider fir Shigella VerfÜgung ginn [17] hierkommen E. fergusonii VerfÜgung huet mat enger grousser Villfalt vu intestinal an extra-intestinal Aids an zwee Mënschen an Déieren dorënner Päerd assoziéiert gouf [18 , 19]. Et ass also Wahrscheinlechkeet, datt de Escherichia VerfÜgung wéi an dëser Etude fonnt Bakterie zu E. fergusonii VerfÜgung gehéiert. Ënnersich gemellt E. VerfÜgung als enstanen pathogen fergusonii an mat allem bacteraemia assoziéiert an enger Wonn mä seng genee Roll souwuel an Aids an de Mënschen an Déieren huet nach opgekläert ginn [20]. VerfÜgung Microbiology an der Echantillon
ass allgemeng ganz feindlech géintiwwer microbes [21]. Et ass gutt etabléiert dass, am Géigesaz zu de Mënschen an Hënn datt Iessen feeders sinn, Päerd kontinuéierlech Seier Produzenten sinn, wahrscheinlech wéinst engem permanente erofzesetzen Muster [22, 23]. D'pH am Friessfeinde Deel vun der Chance Mo ass stabil bei ronn pH 1-3 am ganze 24 Stonn Zäit [24], doduercher d'famill niddereg Diversitéit vun am mucosal Echantillon vun dëser Etude observéiert Bakterien war net onerwaart. VerfÜgung de charakteristesche morphological phenotype vu grousse COCCI regelméisseg tetrads wuessen war eng Copie ze gin mat enger 99% Ähnlechkeet Sarcina etabléierten ventriculi VerfÜgung. Dëst Gebeitechnik ass bekannt gebass gin am Mo. Inhalter ze wuessen an huet de charakteristesche Struktur tetrade wann aus pH 1- pH 3 [25] ugebaut. An der aktueller Etude, d'Opklärung vun dësen Organismen net etabléiert kéint en Deel vun all spezifesch wirklech ze ginn, wéi se an niddereg, déi an der vläit Echantillon (i.e. lesion an normal), wéi och an der Kontroll Echantillon fonnt goufen. och Sarcina-wëll Bakterien gewiescht an enger Rei vun Déierenarten fonnt, wou se hi goufen abomasal bloat, haemorrhage an ulcers zu Lämmercher an Geess Kanner ze féieren [26, 27] an eng méiglech Link zu gastric Dilatatiounswuesstem zu zwee Muppen a Päerd huet ugeholl [28]. Keng Beweiser vu Gas accumulations war macroscopically zu kenger vun dësen Päerd observéiert an domat schéngt et net, dass d'Präsenz vun Sarcina ventriculi VerfÜgung zu der wirklech am dës Päerd observéiert bäigedroen. VerfÜgung Et war net aussergewéinlech, dass Lactobacillus (Lactobacillus salivarius
) war an der studéiert Stoffer fonnt an et ass virdru matgedeelt ginn, datt e puer Lactobacillus VerfÜgung niwweleg., dorënner L. salivarius VerfÜgung, an gesond Päerd präsent sinn [16, 29]. D'proximal Chance Mo. Funktiounen als Späichere fir fidderen, wéi och e unzekräizen fir intragastric Fermentatioun. Den Ökosystem an dëser Regioun besteet aus zwee selwescht an lactate-schreiwen Bakterien am groussen Zuelen, déi fir d'Erhéijung vun liichtflüchtege fatty Saieren op Fermentatioun Gluciden responsabel sinn [30]. Besonnesch waren Lactobacilli fonnt an der proximal Deel vun der Chance Mo. zu der epithelium verflicht [31] an dës Bakterien wahrscheinlech un der glandular Mo als Deel vun den normalen Tour-iwwer Ugrëff gëtt. Mir hunn iwwerpréift nëmmen subsamples a méi bakteriell taxa gëtt am gesond Deel vun der glandular Mo. fonnt ginn, wann ee méi detailléiert microbiota Communautéit Etude gemaach gouf. VerfÜgung Validitéit vun de Conclusiounen vum Helicobacter VerfÜgung Keen vun der Otemschwieregkeeten Echantillon vun der antrum Regioun bewisen positiv Signaler aus der Helicobacter niwweleg VerfÜgung. Studiebäihëllefe an dëser Etude an keen Spiralgalaxien formt Bakterien sech mat der FISH Technik entweder fest. An enger rezenter Etude vum Venezuela, Spiralgalaxien formt Bakterien sech am biopsies vun der Fra Regioun vun der Chance Mo. Kierchefënster mat der Warthin-Stären stain [12] gemellt. Helicobacter niwweleg VerfÜgung. bekannt gebass gin de Mo. produzéiere grouss Quantitéiten vun cytoplasmic urease [32] D'rapid urease Test vun dëser Enquête, Pyloritek ®, bieden d'urease Aktivitéit vun der Otemschwieregkeeten Prouf vun der Produktioun vun ammonia benotzt fir colonize wann urea präsent ass. Et ass extensiv an mënschlechen Praxis benotzt fir gastritis déitlech Helicobacter niwweleg VerfÜgung z'entdecken. Déi positiv an negativ predictive Wäerter sech tëscht 98.1-100% an 95.8-100%, respektiv vun enger Etude Testen Mënsch Patiente virun an no Ausradéiere vun der Bakterie [33]. An dëser Etude, waren net positiv Tester fonnt, déi besot datt d'biopsies am Moment studéieren keng Bakterien mat der Fähegkeet urease ze produzéieren aus. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Gastric Helicobacter VerfÜgung niwweleg. gouf net fonnt an net fir de Mo lesions vun den 36 Päerd analyséiert an dëser Etude verbonne ginn hätt. D'wirklech an dëser Etude fonnt abegraff polypoid Strukturen, hyperplastic rugae a kleng erosions, mä bakteriell Engagement war an nëmmen ee Fall vun enger Ofkéier fonnt. An dëser lesion, eng Escherichia-wëll Klon, Wahrscheinlechkeet E. fergusonii VerfÜgung, war intracellular fonnt. Ob dat war eng Primärschoul oder Lycée Wonn net ofgeschloss ginn hätt. Ganz limitéiert Montanten vun Bakterien am Allgemengen goufen an den Chance glandular Regioun fonnt wéi erwaart. Sou, Detectioun vun engem moderaten ze héich Zommen vun all Bakterien am glandular mucosa Niveau, wéi och an der crypts soll Ursaach fir Suerg gin wéi dëst net eng normal fannen, an d'Chance glandular Mo gin schéngt. Weider Studien Bakterien an der Relatioun zu gastric lesions vu Päerd mat bestätegt Medeziner Unzeeche sensibiliséieren si hëllt, wéi dës Päerd net an déi aktuell Etude abegraff waren. VerfÜgung Method VerfÜgung Päerd a studéieren Design VerfÜgung D'Etude war wéi e gemaach Kräiz-verchiddenen Etude vun Mamm vun enger Populatioun vun 63 ABATTOIR Päerd an Dänemark. Päerd goufe vun der Veterinary Generaldirekter wéi gesond fir doutzemaachen guttgeheescht. Päerd goufe mat enger Gefaangen eben ëmmer méi schlëmm ginn an exsanguinated. De Mo, dorënner 5 - 10 cm vun der distal esophagus an 10 cm vun der proximal Ausléiser, gouf direkt no evisceration geläscht a laanscht de gréissere curvature opgemaach. Ingesta goufen ofgegruewen an wann néideg, war d'mucosa verbannen mat engem Minimum vun fléissendem Waasser virun Inspektioun rinsed. Nëmmen Mamm mat consomméiert lesions an der glandular mucosa sech abegraff, wéi och siwen Kontroll Mamm mat kee consomméiert Beweiser vun gastric lesions. VerfÜgung sech Glandular lesions wéi d'mucosa definéiert en Manque macroscopic krut dh hyperaemic, méi deck, erosions oder ulcers mussen . D'Präparaten Positioune vun der lesions sech feststellen wéi: D'Cardia, lénken oder antrum Regioun (. Lalumi 6). Figur 6 Präparaten Regioune vun de Mo. laanscht de gréissere curvature opgemaach. D'Net-glandular Regioun huet eng wäiss Rostain epithelium hierkommen, déi glandular Regioun Faarftéin vun rout ass. Si gi vun der Margo plicatus VerfÜgung getrennt. Déi dräi anerer Regioun gehéiert: Cardia als Beräich kleng Sträif just ënnen a laanscht de margo plicatus VerfÜgung, Corpus Regioun mat Seier, pepsinogen an mucus Glands (donkel rout) an der antrum Regioun mat primarly mucus an gastrin secreting Glands secreting. VerfÜgung probéieren Prozedur VerfÜgung vun all Mo mat glandular lesions, dräi Otemschwieregkeeten Echantillon wou vun de gréisste lesion (a, B, C) kritt souwéi dräi vläit normal Rostain Otemschwieregkeeten Echantillon (en, b, c) aus der selwechter Präparaten Regioun, mä op d'mannst op d'mannst 5 cm ewech. En /eng: eng kleng Fro Gréisst (0,5 × 0,5 cm) mucosa Prouf war fir direkt urease Fahrt mat der Pyloritek kritt ® assay no der fabrizéiert Uweisungen. Tester goufen no engem 60 Minutt Standard Zäit liesen a Resultater bemierken als positiv oder negativ. Echantillon B /b: eng 3 × 3 cm voll deck Otemschwieregkeeten Prouf dorënner mucosa an submucosa sech zu 10% gefiermt formalin fir FISH an fix kritt. . No 24 Stonnen zéien d'Echantillonen zu 70% Ethanol transferéiert huet, paraffin-Ënnerbewosstsinn, um 3 μm sectioned an Descher op SuperFrost /plus drënner (Menzel-Glaser, Braunschweig Däitschland) VerfÜgung Echantillon C /c: eng drëtt hien huet misse vum Otemschwieregkeeten Echantillon fir Biologie an sequencing war mat dréchen Äis kritt an virgezunnen gefruer (Wann Gréisst ass erlaabt lesion). mat kee macroscopic gastric lesions vun der siwen Kontroll Mamm VerfÜgung Echantillon engem, b an c aus der normal Rostain mucosa vun der geholl goufen antrum. Dräi vun deene Päerd goufen zousätzlech zu der Cardia, Corpus an Ausléiser och anerer. VerfÜgung D'probéieren Prozeduren stattfonnt vun August bis Oktober 2007 historesch Daten iwwert virdrun Gesondheet vun de Päerd net kritt kéint. VerfÜgung D'Am Situ Hybridisation fir Bakterien VerfÜgung fir microbial erkennen, déi Otemschwieregkeeten Rubriken zäitgläich mat verschiddene fluorophores Fortgeschratten mat zwee Ämter 16S rRNA hybridized goufen. D'oligonucleotide Studiebäihëllefe S-D-BACT-0338-eng-A-18 gezielt Bakterien (5'GCTGCCTCCCGTAGGAGT3 ") [34] war 5" mat der fluorescein isothiocyanate Fortgeschratten a mat isothiocyanate kuckt virdrun Cy3. D'oligonucleotide Studiebäihëllefe HEL717 der Helicobacter Gattung gezielt (5'AGGTCGCCTTCGCAATGAGTA3 ") [35] war 5" mat isothiocyanate kuckt virdrun Cy3 ausgezeechent. Fir d'Klone Resultater eng drëtt an véiert Studiebäihëllefe, LC-gProt-1027-AA-17 (5'GCCTTCCCACATCGTTT3 ') z'iwwerpréiwen gezielt 23S rRNA vun Gammaproteobacteria war 5 "ausgezeechent mat der fluorescein isothiocyanate an Studiebäihëllefe SG-Enteroco-184 (5'CAAATCAAAACCATGCGG3 ") war Cy3 Fortgeschratten 16S rRNA vun Enterococcus VerfÜgung niwweleg [36] gezielt. All Ämter goufen um DNA Technology, Instanz gouf, Dänemark Wierderbuch. D'drënner waren am xylene an transferéiert zu 100% Alkohol fir 30 min ier hybridisation deparaffinized. D'hybridisation war mat 40 ml vun hybridisation Prellbock (100 mm Tris [pH 7,2], 0,9 M NaCl, 0,1% Natrium dodecyl sulfate) an 200 NG vun all Studiebäihëllefe fir 16 Stonnen an engem Sequenza Slide Critère bei 45 ° C gemaach (Thermo Shandon Cheshire, UK). D'Echantillon waren Katakombe dann dräi Mol am prewarmed (45 ° C) hybridisation Prellbock fir 15 min an dono dräi Mol am prewarmed (45 ° C) wäschen Léisung (100 mm Tris [pH 7,2], 0,9 M NaCl). D'Echantillon waren am Waasser rinsed, Loft gedréchent a schéi zu Vectashield (Vecteure Laboratoiren Galaxy Burlingame, CA, USA) fir epifluorescence microscopy. An Axioimager M1 epifluorescence microscope fir epifluorescence mat engem Sonneluucht 100-W Affaire equipéiert a filter baut 43 a 38 waren benotzt Cy3 an fluorescein ze visualiséieren, bzw.. Biller waren mat enger AxioCam MRM Versioun 3 FireWiremonocrome Kamera an d'Software AxioVision Versioun 4.5 (Carl König, Oberkochen, Däitschland) kritt. VerfÜgung Evaluatioun vun der epifluorescence microscopy zur Beschreiwung vun der eleng Betrag opgeféiert ass, morphologic krut an Standuert vun fluorescing Zellen scheinbar zu all Otemschwieregkeeten Prouf. Ausserdeem huet all Otemschwieregkeeten Rubriken Kierchefënster vun H & E an histopathologically bewäert VerfÜgung 16S rDNA amplification a Klonen VerfÜgung No der Detektioun vun Bakterien benotzt FISH, sub Echantillon aus Päerd Bakterien vun verschiddenen morphologies sech dëse Match gaangen fir 16S rRNA Gentherapie Musiktherapie-. Biologie. Den DNA huet aus 4 Otemschwieregkeeten Echantillon isoléiert vun der Easy-DNA Kit benotzt (Invitrogen, Tåstrup, Dänemark) no den Instruktioune vum Produzent. D'16S rRNA Gentherapie war Kick mat primers Fils-Bact-0008-as-20 (5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3 ") [37] an S - * - Univ-1492-AA-19 (5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3) [38]. Hinnen alleguer gemiddlech aus enger éischter denaturation bei 94 ° C fir 6 min; fir 30 Spiller, annealing bei 55 ° C fir 45 s an Endung fir 2 min bei 72 ° C an 94 ° C vun 30 Zykle vun denaturation duerno; an eng final Extensioun bei 72 ° C fir 3 min. Implikatioune DNA war vun electrophoresis op agarose gels ubelaangt. D'Hinnen alleguer Produite goufen sidd der QIAquick Hinnen alleguer Offäll Kit Sailen benotzt (QIAGEN GmbH, Hilden, Däitschland). Ze schafen stompegen-opgehalen DNA de folgenden war an enger 0,5-ml microcentrifuge Rouer gemëscht, 4 μl vun 5 × T4 DNA polymerase Prellbock, 14,7 μl vun sidd Hinnen alleguer Produit 0,8 μl vun dNTP (2,5 mmol l -1 all) an 0,5 μl (1,2 u) vun T4 DNA polymerase (Invitrogen) a fir 15 min bei 12 ° C incubated. D'T4 DNA polymerase war Hëtzt-inactivated, an der stompegen-opgehalen DNA sidd war d'QIAquick Hinnen alleguer Offäll Kit Sailen benotzt (QIAGEN GmbH) an zu enger definitiver Volume vun 10 μl vun double-destilléiert Waasser eluted. No de Beschreiwunge vum Fabrikant war d'Klone andems e Zero stompegen anerer Sprooch Klone Kit (Invitrogen) gesuergt. Zéng Kolonien vun all Klone ofgeholl huet an Nepgen op eng automatesch Haaptrei Organer (Abi PRISM 373 DNA Sequencer; PE Biosystems, Foster City, CA, USA) vun de zwou Standard Vecteure primers benotzt (T3 an T7) abegraff an de Kit. D'Haaptrei huet an Bionumerics Versioun 4.0 (Obwuel Math, Sint-Martens-Latem, Belsch) an vergewësseren fir chimeras souwuel vun ni virdrun den eenzelne Message vun GenBank http zesummebruecht:.... //Www ncbi nlm nih Gov a vun der Software Pintail Versioun 1.1 http:... //www Cardiff AC UK /biosi /Fuerschung /biosoft /. D'phylogenetic Analyse vun der clones zu der Gattung VerfÜgung Escherichia Zougehéieregkeet war vun eroflueden 16S rRNA Gentherapie Message geschitt méi wéi 1200 BP vum RDP v.9 Datebank vum Typ Escherichia VerfÜgung analyséieren http:. //Rdp Keesen . msu. Goalkeeper opgepasst hat. De Message huet zu der selwechter Längt vun 1327 BP Trierweiler an bilden pairwise (UPGMA) duerch eng global Haaptrei Formatioun gefollegt. Eng final phylogenetic Bam andems der Ward sind gebaut gouf, wou Enterobacter sakazakii VerfÜgung (AB004746) als sehbehënnert Leit benotzt gouf. VerfÜgung Deklaratioune VerfÜgung Merci VerfÜgung D'Auteuren wënschen Hanne H. Møller, Katja Kristensen an Johanna Merci Z Amenuvor fir technesch Hëllef an d'Laboratoiren. Och merci fir Stina Vesterholm fir Sammelt Stoffer hëllefen. Dëst Wierk war vun Kongeriget Dental d'Horseinsurance g /s an hallef Europa gehéiert Dänemark ënnerstëtzt. Sponsore hu keen Engagement am prakteschen Deel oder Conclusioune vun dëser Etude. VerfÜgung Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen d'Linken op d'Auteuren' original deposéiert Fichieren fir Biller. 12866_2009_1040_MOESM1_ESM.tiff Auteuren 'original Datei fir Figur 1 12866_2009_1040_MOESM2_ESM.tiff Auteuren' original Datei fir Figur 2 12866_2009_1040_MOESM3_ESM.pdf Auteuren 'original Datei fir Figur 3 12866_2009_1040_MOESM4_ESM.tiff Auteuren' original Datei fir Figur 4 12866_2009_1040_MOESM5_ESM.tiff Auteuren 'original Datei fir Figur 5 12866_2009_1040_MOESM6_ESM.jpeg Auteuren 'original Datei fir Figur 6

• Grënnung an Identifikatioun vun enger Kanéngchen Modell vun peritoneal carcinomatosis aus gastric Kriibs
• NEE-entschlof motility Auswierkunge vun gastric fundus an pylorus vun sGCβ1his105phe Mann- Mais