Angiotensin II receptor Ausdrock a Relatioun zu Helicobacter pylori-Wonn am Mo vun den Persounen gerbil

Angiotensin II receptor Ausdrock a Relatioun zu Helicobacter pylori VerfÜgung -infection am Mo vun den Persounen gerbil VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung d'Roll vun der renin-angiotensin System vun gastric Physiologie an Krankheet huet wéi nach gouf fonnt lant. D'éischt Zil vun der Etude war d'baseline Präsenz an Standuert vun angiotensin II kenne (AT1R an AT2R) am Mo vun der Persounen gerbil ze ermëttelen. Eng zweet Zil war, fir ob der Präsenz vun H. pylori VerfÜgung Wonn mat Ännerungen an d'Expressioun vun dësen kenne verbonnen ass. VerfÜgung Method VerfÜgung H. pylori VerfÜgung -negative an H. pylori-
Krankheet (Deformatioun SS1 oder TN2GF4) waren männlech Persounen gerbils propagéieren. D'Mamm huet um sechs oder 12 Méint iwwerpréift der inoculation duerch d'Benotzung vun immunohistochemistry, westlech blot an microscopic morphometry. VerfÜgung Resultater VerfÜgung AT1R an AT2R sech an enger Rei vun Zellen am gerbil gastric Mauer läit, dorënner eng subpopulation vun endocrine Zellen am antral mucosa an demagogesch Zellen infiltrating H. pylori VerfÜgung -infected Mamm. Gerbils mat der SS1 Deformatioun Krankheet huet eng bedeitend antral AT1R FAQ Ausdrock an eng grouss Zuel vun infiltrating polymorphonuclear leucocytes fräi (PMNs) um 12 Méint. D'AT1R FAQ Ausdrock mat der Zuel vun PMNs an der antral Ausdrock vun myeloperoxidase soll. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Angiotensin II kenne sinn an enger Rei vun Zellen am gastric Mauer vun de Persounen gerbil. D'Resultater weg en Afloss ofhängeg op den H. pylori VerfÜgung Efforten op der gastric AT1R Ausdrock an eng Relatioun tëscht gastric AT1R Ausdrock an mucosal PMNs einfach. VerfÜgung Background VerfÜgung d'Roll vun der renin-angiotensin System (RAS) zu gastric Physiologie an Krankheet ass wéi nach fonnt lant. Verschidde Studie berichten iwwer Rapport Aktiounen vun angiotensin II (Ang II) op mucosal ugekuerbelt, Seier secretion a glat Muskel Kontraktioun [1-3]. Anerer déi Afloss vun RAS am Stress entschlof gastric Verletzungen an ischemia /reperfusion Schued vun der gastric mucosa agebonne [4, 5]. Déi klassesch endocrine Charakter vun RAS VerfÜgung gutt fir seng Auswierkungen op hemodynamic Regulatioun a Kierper Flesseggassystem homeostasis bekannt ass. Manner ass iwwert de reglementaresche Impakt vun Otemschwieregkeeten bekannt lokal RAS baséiert, datt zu enger Rei vun Organer bewisen ass, e.g. d'Gehir, Bauchspaicheldrüs, esophagus an Colon [6-8]. Interstitial Produktioun vun Ang II vun anere lokalen ausgedréckt Enzymen wéi cathepsin D an chymase Agt folgenden lokal Produktioun vun angiotensinogen (Agt), ACE an renin, oder duerch alternativ Weeër dorënner Rëss vun libre [9] geschéie kann. Ang II Wierker am Prinzip duerch zwee kenne, designéierte Ang II Typ 1 receptor (AT1R) an Ang II Typ 2 receptor (AT2R). Folgléch ass androën den Ausdrock an Standuert vun Ang II kenne vu grousser Wichtegkeet Potential Ang II sécher an aner Fro gestallt an agebousst Astellungen an lassleeën. An de leschte Joren zu verschidden agebousst Konditiounen wéi inflammation, gudde Meter Heelung a carcinogenesis [10, 11] RAS gouf gin Équipe gewisen. Epidemiological Etuden hunn och Associatiounen tëscht RAS Zesummenhang Gentherapie polymorphism (SNPs) an d'Entwécklung vun peptic oppent an gastric Kriibs bewisen [12, 13]. Allerdéngs hunn Associatiounen tëscht Otemschwieregkeeten Ausdrock vun Ang II kenne an Helicobacter pylori VerfÜgung Wonn net gemellt goufen. D'Potential vun RAS zu lokal demagogesch Reaktioune well et interessant mécht seng Relatioun zu de gutt-definéiert gastritis vum H. pylori VerfÜgung Album ze ermëttelen. Am Moment studéieren VerfÜgung, iwwerpréift mir den Ausdrock vun Ang II kenne am uninfected an -infected Persounen gerbil VerfÜgung H. pylori. Dëst Déier Modell ass interessant, well et einfach mat H. pylori VerfÜgung Krankheet kann, enger chronescher aktiv inflammation mat agebousst Ännerungen Féierung datt déi meescht vun de fonnt lesions zu Mënschen, dorënner gastric ulcers, gastric intestinal metaplasia an enger gastric Kriibs-wëll rescht eroplueden [14]. Ob H. pylori VerfÜgung Wonn dësen Ursaachen gastric Kriibs zu Persounen gerbils bleift ënnert Debatt [15]. Eng éischt Zil vun der Etude VerfÜgung war d'baseline Präsenz an de Standuert vun der AT1R an der AT2R am Mo vun der z'ënnersichen Persounen gerbil. Eng zweet Zil war, fir ob der Präsenz vun H. pylori VerfÜgung Wonn mat Ännerungen an d'Expressioun vun dësen kenne verbonnen ass. VerfÜgung Method Déieren
D'Experiment vun der Ethik Comité vun Experimenter guttgeheescht huet op Déieren, Universitéit vun Gothenburg. Drësseg spezifesch pathogen gratis (SPF) männlech Persounen gerbils (Charles River, Uppsala, Schweden), siwe Wochen vun Alter, gebraucht goufen. Si huet sech zoufälleg an dräi Gruppen vun selwecht Gréisst getrennt, a besteet aus engem Kontroll Grupp an zwou Gruppen, déi mat H. pylori VerfÜgung infizéiert gin waren. Fënnef Déieren sech zu all Cage an de Sall huet gereegelt mat Respekt ze Temperaturen (18-22 ° C), Fiichtegkeet (iwwer 55%) a Liicht /donkel Zyklus (12/12). D'gerbils haten gratis Zougang zu Liewensmëttel (2016F, Harlan Tek. Déngt, Blackthorn, England) an Drénkwaasser. Si waren eng Woch vun acclimatization virun der inoculation erlaabt. VerfÜgung bakteriell analyséieren an inoculation VerfÜgung zwee verschidde H. pylori VerfÜgung analyséieren fir inoculation benotzt huet, déi TN2GF4 Deformatioun [16] an der Sydney Deformatioun 1 (SS1) [ ,,,0],17]. Béid analyséieren sinn bekannt enger chronescher aktiv inflammation an der gerbil gastric antral a kierperlecher mucosa ze féieren. D'Bakterien sech op Columbia Placke ugebaut. Dës Kulturen sech dann zu inoculate 500 ml Brucella läschen mat 5% Jonker Kallef serum benotzt, 10 μg /ml vancomycin a 5 μg /ml trimetoprim. D'Kréi goufen fir 24 Stonnen ënner Mikro aerobic Konditiounen bei 37 ° C incubated. D'Bakterien sech duerch Phase Géigesaz microscopy iwwerpréift éier den Déieren verwaltet gëtt. D'gerbils sech mat 0,5 ml vun der bakteriell Ophiewe oder Brucella läschen Krankheet nëmmen (Kontrollen) e Blummen- Effekt benotzen. Liewensfäeg zielt sech an der Dispens huet den eigentleche ustiechend Schrëtt ze bestëmmen, wat huet 7 × 10 7 Unitéiten an 4 × 10 7 Unitéiten fir SS1 an TN2GF4, bzw.. VerfÜgung Time natierlech a geaffert VerfÜgung engem 24-HR fasting Period mat gratis Zougang zu Drénkwaasser, fënnef Déieren aus all Grupp folgenden sech sechs oder 12 Méint no inoculation geaffert. D'Déiere goufen duerch intraperitoneal Sprëtz vun medetomodin (0,5 mg /kg) a ketamin (75 mg /kg) Nodeel. A midline laparotomy war gesuergt an d'Mamm huet dann laanscht de groussen curvature ofgegruewen an opgemaach. Eng Halschent war fir Kultur benotzt, an uplanzen sech aus der aner Halschent fir histological analyséiert a westlech blot Analyse gesammelt. D'Déiere waren déi Fra Trauer geaffert. Histopathological Conclusiounen an bacteriological Zoustand gewiescht virdrun gemellt [14]. VerfÜgung Immunohistochemistry VerfÜgung D'voll Mauer uplanzen (antrum an lénken) sech direkt no der Ouverture vun der Mamm gesammelt, fixen an Histofix (Histolab Produiten AB, Gothenburg, Schweden ) bei Raumtemperatur (RT) Iwwernuechtung an dann fir 24 Stonnen am PBS rinsed. Uplanzen sech dono léif, an paraffin Ënnerbewosstsinn, Géigewier an 5-μ VerfÜgung décke Rubriken an Descher op Glas drënner. Ier immunohistocemical staining, Rubriken sech zu Zitrounesaier Prellbock (0.01 M, pH 6.0, 10 min) deparaffinized a gekacht. D'Immunocruz TM Staining System (Santa Cruz Déi, Santa Cruz, CA, USA) war fir d'immunohistochemistry Protokoll benotzt. No inhibition vun endogenous peroxidase Aktivitéit, war fir 30 min bei RT mat normal Geess serum Net spezifesch vun Secondaire antibodies bindend vun incubation gespaart. Déi folgend zwee polyclonal Primärschoul antibodies, dilutions an incubation Mol goufen dann benotzt: Kanéngchen anti-AT1R (N-10, Santa Cruz Biotech, 1: 100 vun PBS, 2 HR um RT) an Kanéngchen anti-AT2R (H-143, Santa Cruz Biotech, 1: 100 vun PBS, 2 HR um RT). No incubation mat Primärschoul antibodies, Rubriken huet dräi Mol am PBS gewäsch a mat engem biotinylated Secondaire antibody Komedie; Hëllef horseradish peroxidase (HRP) war de komplexe fonnt -streptavidin an der Faarf war mat entwéckelt 3,3'-diaminobenzidine (botzt). VerfÜgung Eng onerwaart, staark staining vun Zellen mat enger typescher Optrëtt vun endocrine Zellen war no immunohistochemical staining bemierken mat dësem peroxidase baséiert Method. Immunoflourescens Etikette war gemaach fir weider d'Méiglechkeet ausschléissen, datt dës staining e Resultat vun endogenous biotin, vun endogenous peroxidase Aktivitéit oder vun unspecific bindend vun der Première antibody war. Déi folgend Protokoll benotzt huet: no an Zitrounesaier Prellbock, Net spezifesch bindend vum Secondaire antibodies kache war fir 30 min bei RT vun incubation mat normal Geess serum (sc-2043, Santa Cruz Biotech) gespaart. Sektiounen sech mat der Primärschoul antibodies wéi virun incubated. D'drënner waren Katakombe dann dräi Mol am PBS a mat engem Lycée antibody vun Alexa Miel 488 conjugated Geess anti-Kanéngchen IgG (A-11034, cuisine Ämter INC, Eugene, OR, USA) Komedie, verdënntem 1: 400 vun PBS fir 1 HR um RT. D'drënner waren Katakombe nächst dräi Mol am PBS a schéi mat fluorescence Opriichte mëttelfristeg (DakoCytomation, Glostrup, Dänemark), no deenen Biller mat engem fluorescence microscope ageholl huet. Zu der Lag vun AT1R zu endocrine Zellen, duebel immunostaining confirméieren war standing der uewen beschriwwen peroxidase baséiert Protokoll fir AT1R benotzt an der uewen beschriwwen immunoflorescens Etikette Protokoll fir eng primär antibody ausernee géint Chromogranin A (C-20, Santa Cruz Biotech, 1: 100 vun PBS, 2 HR um RT). Net spezifesch vun de Secondaire antibody bindend (Alexa Miel 568-conjugated Esel anti-Geess IgG, E-11057, cuisine Ämter INC, 1: 800 vun PBS, 1 HR um RT) war vun incubation mat normal Esel serum (sc-2044 blockéiert , Santa Cruz Biotech). Preabsorpion mat enger iwwerschësseg (5 ×) erauszesichen peptide (sc-1173P, Santa Cruz Biotech) war als Kontrollorgan vun der Spezifizitéit vun der AT1R antibody geschloen, während der Primärschoul antibody fir d'AT2R ewech war. VerfÜgung D'gerbil AT1R an AT2R hunn > 90% Aminosaier homology Haaptrei Identitéit mam Mënsch, Grenzwäerter a Maus Ang II kenne [18, 19]. An gerbils, wéi an deër an Mais, ginn et zwou AT1R bestemmt (AT1aR an AT1bR) datt déi verschidden Genen encoded sinn awer mat 95% Aminosaier Haaptrei homology. Dës receptor bestemmt sinn bekannt differentially en der a reglementéiert gin mee eng ähnlech Affinitéit fir Ang II hunn. Duerch héich Aminosaier Haaptrei homology tëscht der gerbil AT1aR an AT1bR, gemengt mir gläich bindend Bezuch zu der AT1R bestemmt fir d'AT1R antibody am Moment Etude benotzt. Desweideren, benotzt d'antibodies fir staining Ang II kenne sinn vun den Hiersteller vun Mais, deër a Mënschen etabléiert. Dofir, goufen d'Spezifizitéit vun dësen antibodies zu gerbils, Sektiounen aus paraffin Ënnerbewosstsinn Bleck vun normal gerbil a mënschlech adrenal Glands ze confirméieren Kierchefënster wéi uewen (ausser dass primären antibodies sech 1:50 zu PBS verdënntem) an d'Verdeelung Musteren fir den Ang II receptor antibodies studéiert. D'adrenal Verdeelung Studie weisen, dass d'Anti-AT1R antibody Kannerbetreiung Kierchefënster adrenal cortical Zellen am zona glomerulosa zu zwee (staining vun der Kapsel der drüs Ëmfeld, wiere glat Muskel Zellen (VSMCs) an endothelial Zellen war och bemierken) gerbil a mënschlech Sektiounen. D'Anti-AT2R antibody Kierchefënster adrenal medulla Zellen an Zellen am zona glomerulosa zu gerbil a mënschlech adrenal drüs (staining vun VSMCs an endothelial Zellen war och bemierken anhand antibody). Dës Resultater averstane mat virdrun gemellt Studien [20], an déi staark Ähnlechkeet vun staining Musteren an der gerbil an de Mënsch adrenal drüs Ënnerstëtzung engem allgemenge Nëtzlechkeet vun der antibodies zu gerbil Stoffer. VerfÜgung Western blot VerfÜgung No der Mamm Ouverture, voll deck antral Mauer uplanzen sech direkt gesammelt, an flëssege Stéckstoff gefruer an bei -70 ° C gespäichert. D'uplanzen waren op Äis homogenized (Polytron, PT-MR 2100, Kinematica, Schwäiz) an gefiermt A (10% glycerol, 20 mm Tris-HCL pH 7.3, 100 mm NaCl, 2 mm phenylmethylsulfonyl fluoride, 2 mm héich, 2 nm EGTA , 10 mm Natrium orthovanadate, 10 μg /ml leupeptin an 10 μg /ml aprotinin) [21] an op 30.000 g fir 30 min bei 4 ° C centrifuged. D'Pellets sech zu gefiermt B (1% NP-40 [Fläch-Aldrich, Stockholm, Schweden] zu gefiermt A) an géinteneen bei 4 ° C fir 1 HR virun centrifugation bei 30.000 g fir 30 min bei 4 ° C resuspended. D'supernatants sech fir FAQ Inhalt vun der Method vun Bradford [21] an gespäichert bei -70 ° C bis weideren Analyse analyséiert. Echantillon sech virun op engem NuPage 10% BisTris gelies (Invitrogen, Karlsbad CA, USA) iwwerlaascht Wiesen fir 10 min an SDS gefiermt an dobäi op 70 ° C verdënntem. One Geschäftswelt war iwwerlaascht mat prestained molekulare Gewiicht Standarden (SeeBlue ™, Invitrogen AB, Lidingo, Schweden), an ganz Zell lysates vun PC-12 (fir AT1R; sc-2250, Santa Cruz Biotech), HEP G2 (fir AT2R; sc- 2227, Santa Cruz Biotech) an HL60 (fir myeloperoxidase (MPO); 12-354, Upstate Lake Placid, NY, USA) sech als positiv kontrolléiert ginn. Polyvinyldifluoride Schläimhait (Amersham, Buckinghamshire, UK) sech mat polyclonal Kanéngchen antibodies ausernee géint AT1R (N-10, Santa Cruz Biotech) incubated, AT2R (H-143, Santa Cruz Biotech) oder MPO (07-496, Upstate). An alkaline phosphatase conjugated Geess anti-Kanéngchen antibody (sc-2007, Santa Cruz Biotech fir d'AT1R an AT2R antibodies, an IgG 12-448, Upstate, fir d'MPO antibody) an CDP-Star Realitéiten (Tropix, Bedford, MA, USA ) waren benotzt immunoreactive Proteinen vun chemiluminescense z'identifizéieren. Biller waren déi eng gi si CCD Kamera ageholl (LAS-1000; Fujifilm, Tokyo, Japan). An semi quantification gouf gemaach vum demolege zu positive Kontrollen vergläichen d'Jauge 3,3 Software benotzen (Fujifilm, Tokyo, Japan) VerfÜgung Microscopic morphometry
Ray uplanzen aus der antral Mauer goufen zu Histofix (Histolab Produkter aB) an Ënnerbewosstsinn paraffin fest. Véier-μ VerfÜgung décke Rubriken sech op kodéiert Glas drënner schéi an Zäitche Kierchefënster mat haematoxylin /eosin (H & E). Den Ofschloss vun mucosal einfach vun mononuclear an polymorphonuclear leucocytes war an der Luucht microscope studéiert. D'lamina propria wäert éischter am Volumen wéi engem Resultat vun der staarker demagogesch Zellen ze erhéijen. Dofir, war d'famill Volume vun der lamina propria vun morphometry évaluéieren déi einfach souwuel mononuclear an polymorphonuclear leucocytes nozedenken. Dëst war déi H.F.H. duerchgefouert zu engem Liicht microscope, mat enger 10 × 10-eckegen Gitter an den Nasmyth hin an engem × 25 Objektiv. Benotzt de Punkt Zielen Method [22], war de Volume Dicht vun der lamina propria alles an Prozent vun der mucosa (an dësem Fall definéiert als d'Regioun tëscht der mucosal Uewerfläch an der leschter vun de Glands) ausgedréckt. Mucosal Volumen ass wéi epithelial futti + lamina propria hei definéiert. D'mucosal einfach vun polymorphonuclear leucocytes (PMNs) war vun P.H. évaluéieren zu engem Liicht microscope, mat enger 10 × 10-eckegen Gitter an den Nasmyth hin, eng × 50 Ueleg immersion Objektiv (N.A. 1,4) an eng Uelech- immersion erop Lëns vun der condenser (N.A. 1,4). PMNs sech als ongeféier Ronn Zellen zu lamina propria mat engem säi grousst multilobulated oder bilobulated ervirgaangen identifizéiert. D'Zuel vun PMNs an engem Feld Regioun vun der mucosa huet sech, wéi den Total vun Plaatzen iwwer d'lamina propria war; d'Zuel vun PMNs ass pro 1 mm 2 lamina propria ausgedréckt. D'Zielen vun ënnen vun der Glands ugefaangen an opgehalen der Beurteelung vun eent bis siwen voll swaths vun der mucosa geplatzt an e Minimum vun 0,077 mm 2lamina propria pro Sektioun ze analyséieren. Systematesch probéieren mat engem ënnerschiddleche Ufank war fir Auswiel vun de Beräicher benotzt zu souwuel Analysë studéiert ginn. Beräicher mat lymphoid follicles sech net abegraff. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung D'Kruskal-Wallis Test an de Mann-Whitney U-Test évaluéieren Bedeitung an d'Oneenegkeet vum FAQ Ausdrock tëscht der Kontroll, déi TN2GF4-Krankheet an der SS1-Krankheet Gruppen. De Mann-Whitney U-Test évaluéieren Bedeitung vun Differenzen an mucosal einfach vun demagogesch Zellen tëscht TN2GF4-Krankheet an SS1-Krankheet gerbils. A linear Relatioun tëscht AT1R-FAQ a PMNs, an eng linear Relatioun tëscht AT1R an Am (MPO) an der antral mucosa, sech mat Pearson Korrelatioun getest. All Tester goufen zwee-tailed, a statistesch Bedeitung war bei p &dra setzen; 0,05. All statistesch analyséiert goufen benotzt SPSS duerchgefouert, Versioun 15.0 (SPSS Galaxy Chicago, Illinois). VerfÜgung Resultater VerfÜgung Lokalisatioun vun AT1R an AT2R FAQ VerfÜgung Immunoreactivity zu der AT1R an der AT2R Proteinen an all gerbil observéiert gouf uplanzen studéiert, a kee staining war an der Kontroll Rubriken gesinn. D'AT1R antibody allgemeng eng méi Frae staining wéi d'AT2R antibody entschlof. VerfÜgung puer Otemschwieregkeeten compartments zu souwuel de Corpus an antrum, onofhängeg vun der Präsenz oder Feele vun H. pylori VerfÜgung Wonn, Schatzkummer immunoreactivity souwuel vun den Ang II receptor bestemmt (Table 1 fir eng Iwwersiicht vun de Resultater an Dorënner 1 fir Vertrieder Rubriken gesinn. kuckt och Weider Fichier 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 a 15 fir Héichopléisende Biller). Sou, bis immunoreactivity souwuel d'AT1R an der AT2R sech zu endothelial Zellen vun Offshore fonnt an der lamina propria etabléiert, d'submucosa (Dorënner 1B) an der muscularis propria, souwéi am Fonctionnéieren Muskel Zellen vun der muscularis mucosae an muscularis propria (Dorënner 1c an 1G) an an e puer mesenchymal Zellen am lamina propria an submucosa wellkomm. Schwaach staining vun zwee kenne sech och, haaptsächlech an der basal Deel vun stäerkste epithelial Zellen bemierken. Z'ënnerscheedde staining vun intramural Mä Strukturen war net observéiert. Immunoreactivity nëmmen zu AT1R war an der wiere glat Muskel Zellen vun CSV an der submucosa, déi muscularis propria an der serosa souwuel de lénken a antral Deeler vun de Mo. (Dorënner 1A an 1G) observéiert. Spannen, wossten eng staark immunostaining fir AT1R zu engem Ziel vun Zellen haaptsächlech an der Basis vun der antral Glands. Dës Zellen duerch eng typesch endocrine Zell krut, i.e. si relativ kleng, mat der Zell Kierper no de Keller Membran; eng schmuel Kette vun Zytoplasma war an e puer Fäll (Dorënner 1G, 1H an 1I) observéiert. Esou AT1R staining zu endocrine-wëll Zellen ginn hätt an der oxyntic mucosa net fonnt. Double immunostaining fir AT1R a fir d'Pan-endocrine Bewaacher Chromogranin A [23] confirméiert de Standuert vun AT1R zu engem subpopulation vun endocrine Zellen am gerbil antral mucosa (Dorënner 1 m an 1N) .Table 1 Lokalisatioun vun AT1R an AT2R FAQ am gastric Mauer vun de Persounen gerbil VerfÜgung Ray unzekräizen
zu Zell Typ
AT1R VerfÜgung
AT2R
Mucosa VerfÜgung Epithelium VerfÜgung meescht epithelial Zellen VerfÜgung + haaptsächlech zu basal Deeler VerfÜgung + haaptsächlech zu basal Deeler VerfÜgung klenger epithelial Zellen an der Basis vun Glands VerfÜgung +++ zu puer endocrine wéi Zellen zu antrum VerfÜgung kee VerfÜgung Lamina propria VerfÜgung Vasculature VerfÜgung + zu endothelium VerfÜgung + zu endothelium VerfÜgung aaner Strukturen kee VerfÜgung kee VerfÜgung
Mesenchymal Zellen VerfÜgung ++ an e puer Zellen; VerfÜgung ++ an leucocytes zu H. pylori VerfÜgung -infected VerfÜgung + an e puer Zellen; VerfÜgung ++ an leucocytes zu H. pylori VerfÜgung -infected VerfÜgung Muscularis mucosae VerfÜgung lafe Muskel Zellen VerfÜgung ++ VerfÜgung + VerfÜgung Submucosa VerfÜgung Vasculature VerfÜgung zu endothelium +; VerfÜgung ++ an VSMCs VerfÜgung + zu endothelium; VerfÜgung kee zu VSMCs VerfÜgung aaner Strukturen VerfÜgung kee VerfÜgung kee VerfÜgung Mesenchymal Zellen VerfÜgung ++ an e puer Zellen; VerfÜgung ++ an leucocytes zu H. pylori VerfÜgung -infected VerfÜgung + zu puer Zellen; VerfÜgung ++ an leucocytes zu H. pylori VerfÜgung -infected VerfÜgung Muscularis propria VerfÜgung lafe Muskel Zellen VerfÜgung ++ VerfÜgung + VerfÜgung Vasculature VerfÜgung + zu endothelium; VerfÜgung ++ an VSMCs VerfÜgung + zu endothelium; VerfÜgung kee zu VSMCs VerfÜgung aaner Strukturen VerfÜgung n.o. VerfÜgung n.o. VerfÜgung Serosa VerfÜgung Vasculature VerfÜgung n.o. zu endothelium; VerfÜgung ++ an VSMCs VerfÜgung kee VerfÜgung nee: net observéiert (oder unspecific) immunoreactivity VerfÜgung +: schwaach immunoreactivity mä mat z'ënnerscheedde Standuert VerfÜgung ++: einfach unerkannt immunoreactivity VerfÜgung + ++: staark immunoreactivity VerfÜgung VSMCs: wiere glat Muskel Zellen VerfÜgung 1 Musiktherapie- immunohistochemical Lag vun AT1R an AT2R am Mo vun den Persounen gerbil Dorënner. A-F weist Sektiounen aus der antral Regioun vun engem SS1-Krankheet gerbil, 12 Méint no inoculation. A) wiere glat Muskel Zellen (VSMC) an eng vun de serosa stain wellkomm verstoppten positiv fir d'AT1R FAQ (gréng Faarw). B) Endothelial Zellen (Enn) an onidentifizéierte mesenchymal Zellen (m) läit an der submucosa weist immunoreactivity fir d'AT2R FAQ. C) Smooth Muskel Zellen an der Hautfaarf Layer vun der muscularis propria stain positiv fir d'AT2R FAQ. D) A negativ Kontroll (hannerteneen zu der Sektioun vun A) preabsorbed mat der erauszesichen peptide fir d'AT1R antibody, weist Giel autofluorescence aus erythrocytes. E & F) Negativ Kontrollen fir den AT2R antibody, hannereneen op de Sektiounen am B & C, respektiv. G, weist H Sektiounen aus der antral Regioun vun enger Kontroll Déier 6 Méint no inoculation an der Rubrik an (ech) ass aus engem TN2GF4-Krankheet gerbil, 12 Méint no inoculation. Staark immunostaining fir AT1R war vun Zellen mat enger typescher Optrëtt vun endocrine Zellen (E) fonnt. Muscularis mucosae (mm), muscularis propria (MP) a wiere glat Muskel Zellen (VSMC) och positiv fir d'AT1R Kierchefënster. A peroxidase baséiert Method (brong Faarf) war fir staining vun AT1R zu G, H an immunofluorescence (gréng Faarf) benotzt gouf fir staining vun AT1R an (ech) benotzt. J, K an L) hannerteneen Sektiounen aus der antral Regioun vun engem TN2GF4-Krankheet gerbil, 6 Méint nom inoculation. J) Immunostaining fir AT1R (gréng Faarf) weist Bodrum vun leucocytes (Leu) ausdrécken der AT1R FAQ. K) Eng negativ Kontroll an d'Rubrik vun J, giel autofluorescence aus erythrocytes weist. L) D'Nuechten Rubrik fir d'Rubrik vun K, Zäitche Kierchefënster mat H & E confirméiert, datt de Bodrum leucocytes sinn. M an N weist duebel immunostaining fir AT1R (brong Faarf an M) a fir d'Pan-endocrine Bewaacher Chromogranin A (rout Faarf an N) vun en antral Rubrik vun enger Kontroll Déier. De wäisse Pfeil an M an N Punkten op enger Zell am durstellen vun engem antral drüs déi positiv Kierchefënster fir béid AT1R an Chromogranin A. puer vun de Chromogranin E positive Zellen net ze AT1R immunopositive goufen. Section O Sarkasmus neutrophils (PMNs) an der antral mucosa vun enger SS1-Krankheet gerbil, 12 Méint no inoculation. VerfÜgung D'Intensitéit an Verdeelung vun den uewe gemaach beschriwwen immunoreactivity net anescht ze sinn schéngt tëscht H. pylori VerfÜgung -negative an H. pylori VerfÜgung -infected Déieren oder tëschent de Déieren geaffert um sechs oder 12 Méint no inoculation. Allerdéngs war eent kloer Differenz feststellen tëscht H. pylori VerfÜgung -negative an H. pylori VerfÜgung -infected Déieren: am Géigesaatz zu de uninfected gerbils, de Rubriken vun souwuel der antrum an Corpus vun Krankheet Déieren zougedréckt en Iwwerfloss vun demagogesch Zellen an der lamina propria mat immunoreactivity souwuel d'AT1R an der AT2R. An ee vun de TN2GF4-Krankheet Déieren um sechs Méint geaffert, Bodrum vun demagogesch Zellen sech och am muscularis propria (Dorënner 1J, 1K an 1l) gesinn. Nee kloer Ënnerscheeder zu staining Musteren oder Intensitéit sech tëscht Déieren Krankheet mat der TN2GF4 Deformatioun oder der SS1 Deformatioun gesinn, oder tëschent Déieren geaffert um sechs oder 12 Méint no inoculation. VerfÜgung Quantification vun AT1R an AT2R FAQ a Relatioun zu demagogesch Zellen
duerch d'ähnlechen immunohistochemical Optrëtt vun angiotensin II kenne am lénken a antrum (mat der Ausnam vun der AT1R ernimmt subpopulation vun endocrine Zellen ausdrécken uewen) ze antral uplanzen um 12 Méint no inoculation souwuel sechs an 12 Méint, sech grouss Moosnamen limitéiert VerfÜgung. Béid AT1R an AT2R Proteinen sech duerch westlech blotting zu all Echantillon (Dorënner 2) identifizéiert. No 12 Méint vun Krankheet, huet de AT1R FAQ Ausdrock vill méi héich an SS1-Krankheet Déieren wéi an Kontrollen op déi Zäit (Dorënner 3). Keng Differenze zu AT2R FAQ Ausdrock tëscht de verschiddene Gruppe vun gerbils (net gewisen) fonnt goufen. Figur 2 exemplaresch Bild vun der westlecher blots. Top Rot: Immunoreactivity géint AT1R um 41 kDa am PC-12 Zell lysate (positiv Kontroll) an zu antral voll-Mauer Echantillon. Ënnen Rot: Immunoreactivity géint AT2R engem liichtschwaache Band um 44 kDa zu Hep G2 (positiv Kontroll) a Gruppen zu antral voll-Mauer Echantillon besot VerfÜgung Dorënner 3 Boxplot weist AT1R FAQ Ausdrock 12 Méint no inoculation zu gerbils mat H. pylori infizéiert. analyséieren TN2GF4 an SS1 an Kontrollen. Den Ausdrock AT1R FAQ war wiesentlech méi héich am SS1-Krankheet Déieren am Verglach mat de Kontrollen (Kruskal-Wallis Test a Mann-Whitney U Test). Protein Niveau sinn als optesch Dicht (sel) virgestallt. Paracetamol Wäerter sinn duerch d'Queeschformat Linn an der Këscht, déi interquartile Gamme vun den vertikalen Deel vun der Këscht an d'gesamt Palette vun de Schnurres uginn. VerfÜgung Tatsaach datt H. pylori VerfÜgung -infected Déieren en Iwwerfloss vun AT1R zougedréckt ausdrécken demagogesch Zellen an hir gastric mucosa an eng fräi antral AT1R Ausdrock, war eng grouss Analyse vun der demagogesch Zellen am mucosa ob déi weider-Regulatioun vun AT1R FAQ war zu SS1-Krankheet gerbils Zesummenhang ze bewäerten huet einfach vun demagogesch Zellen ze mucosal.
den Ofschloss vun mucosal einfach souwuel mononuclear an polymorphonuclear leucocytes (duerch de Volume Dicht vun der lamina propria spigelt) huet ënnerscheeden net tëscht SS1-Krankheet an TN2GF4-Krankheet gerbils. Allerdéngs war d'mucosal einfach vun polymorphonuclear leucocytes (PMNs) däitlech méi héich, an d'SS1-Krankheet Déieren wéi an TN2GF4-Krankheet Déieren 12 Méint no inoculation (Table 2). D'PMNs am H. pylori VerfÜgung -infected mucosa bestoung bal ausschliesslech vun neutrophils (Dorënner 1O); nëmmen e puer eosinophilic a kee basophilic Zellen konnt an der microscope.Table 2 Chemeschen Analyse vun demagogesch Zellen zu gerbil antral mucosa no 12 Méint vun Helicobacter pylori VerfÜgung Wonn VerfÜgung zu Control
TN2GF4
SS1
Mucosal einfach vun mononuclear an polymorphonuclear leucocytes (duerch de Volume Dicht (%) vun lamina propria spigelt)
26,7 ± 2,4 VerfÜgung 47,1 ± 2,2 VerfÜgung 41,3 ± 2,4 VerfÜgung Mucosal einfach vun polymorphonuclear leucocytes (PMNs /mm2 lamina propria) VerfÜgung 198 ± 37 VerfÜgung 1892 ± 169 VerfÜgung 4166 ± 275 * * VerfÜgung Werter sinn mengen ± normale Feeler vu menge VerfÜgung ** p &si besteet. 0,01, SS1 versus TN2GF4. Mann-Whitney U-Test VerfÜgung A linear Relatioun (r = 0,75, p &Si besteet; 0.01) war tëscht der AT1R FAQ Ausdrock vun der antrum an der Zuel vun polymorphonuclear leucocytes an der antral mucosa no 12 Méint vu H. pylori gesin
Wonn (Dorënner 4). Dës Relatioun war vun der Mooss Korrelatioun tëscht der antral Ausdrock vun AT1R an den Ausdrock vun myeloperoxidase ënnerstëtzt (r = 0,58, p &Si besteet; 0,05) (Dorënner 5). Myeloperoxidase (MPO) ass eng Aktivitéit, déi zu neutrophils an zu enger klenger Mooss zu monocytes a verschidden Zorte vu macrophages [24] Iwwerfloss ausgedréckt gëtt. Dofir, zerwéiert Otemschwieregkeeten Niveau vun MPO als FAQ lues vun neutrophil einfach an dëser Etude. Wann der sou vill Senn maan Wäert mat engem Dräieck zu Dorënner markéiert 5 vun der Analyse ausgeschloss ass (net vun engem eenzelnen Gestalt gewisen) d'Relatioun tëscht AT1R an MPO lo trotzdem staark (r = 0,86 a p &Si besteet; 0.01). Figur 4 Bezéiung tëscht AT1R Ausdrock vun der antrum an Zuel vun polymorphnuclear leucocytes (PMNs) an der antral mucosa no 12 Méint vu H. pylori Wonn. VerfÜgung Figur 5 Bezéiung tëscht AT1R Ausdrock an myeloperoxidase (MPO) Ausdrock vun der antral mucosa der 12 Méint vun H. pylori Wonn. Wann der sou vill Senn maan Wäert mat engem Dräieck markéiert vun der Analyse ausgeschloss ass (net gewisen) d'Relatioun tëscht AT1R an MPO lo trotzdem staark (r = 0,86 a p &Si besteet; 0.01). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Déi heiteg Etude lant de baseline Präsenz an Standuert vun angiotensin II kenne am antral a kierperlecher Mauer vun de Persounen gerbil a bewisen, dass AT1R an AT2R vun enger Rei vun Zellen ausgedréckt huet. Eng Opklärung vu besonnesch interessant war, datt e subpopulation vun endocrine Zellen am antral mucosa engem markéiert Ausdrock vun AT1R gewisen. D 'Validitéit vun der immunohistochemical Prozedur am Moment Etude benotzt gouf op verschidde Manéieren confirméiert. D'receptor antibodies Ang II sech mat zwee verschidden Techniken fonnt, an d'Spezifizitéit vun der Primärschoul antibodies fir béid westlech blotting an immunohistochemistry benotzt gouf, andeems der staining Musteren vun der gerbil mat deene vun der mënschlecher adrenal drüs a vun preabsorption vergewësseren mat peptide Spären ( AT1R). VerfÜgung de ganzen Verdeelung vun Ang II kenne am Mo. hei gemellt ass an concordance mat wat nach virdrun an de Colon gemellt goufen [7]. Autoradiography vun de Grenzwäerter Mo huet och dass AT1R uginn, an héich Zuelen vun AT2R, si präsent an alle Schichten vun der Mo [4]. Allerdéngs huet de genee Plaz vun AT1R an AT2R an de Mo wéi nach just fonnt lant ginn. Matsuo et al VerfÜgung. benotzt immunohistochemistry AT1R zu Mënsch antrum Geldautomat an fonnt et zu wiere glat Muskel Zellen (VSMCs), mesenchymal Zellen a glat Muskel Zellen an der Hautfaarf Schichten vun der mucosa an muscularis propria [25]. Weider, Bregonzio et al VerfÜgung.

• Helicobacter pylori Wonn gastric Kriibs entschlof; Viraus zu gastric Stammzellenfuerschung an de Rescht Erausfuerderungen
• Evaluatioun a Krankheete Bedeitung vun de Mo. Alter Modell fir Alterungsprozess vun der Mo-engem multicenter studéieren an China Evaluéieren