PLoS One: katepszin E markere Gyomorsav differenciálás és pecsétgyûrûsejtes karcinóma Gyomor: A Novel javaslat gasztrinsav tumorogenezisben

absztrakt katalógusa

A gyomorrák (GC) bemutatja a különböző szövettani jellemzői, bár a mechanizmus alapjául a sokféleség ritkán tisztázott. Ez elsősorban sorolni jól differenciált csöves adenocarcinoma (tub1), közepesen differenciált csöves adenokarcinóma (tub2), gyengén differenciált adenocarcinoma (por), pecsétgyűrű sejtes carcinoma (sig), mucinosus adenocarcinoma (FRA), és papilláris adenokarcinóma (pap). Szitálással, azt találtuk, katepszin E (CTSE) hotelben fejezi univerzálisan sig-típusú, esetenként por-típusú, és ritkán tub1 /tub2 típusú GC sejtvonalak. Sebészetileg eltávolított-példányai, CTSE immunfestjük a 50/51 sig-típusú (98,0%), 10/03 tub1 típusú (30,0%), 18/07 tub2 típusú (38,9%), 15/26 por-típusú ( 57,7%), 4/10 PAP-típusú (40,0%), és a 0/3 MUC-típusú (0.0%) GC. Ebben az endoszkópos-eltávolított példányok, 6/7 sig-típusú (85,7%), 7/52 tub1 típusú (13,7%), 12/05 tub2 típusú (41,7%), 07/02 pap-típusú (28,6%) GC és 0/6 adenoma (0,0%) fejezte CTSE. A nem rosszindulatú szövetben, CTSE általánosan kifejezve normál fundus, pylorus és a szív mirigyek a gyomor, de aligha más emésztőszervek. A rákmegelőző intestinalis metaplasia a gyomor, CTSE többnyire megfigyelhető vegyes gyomor-és bélrendszeri típusú és hiányos egyedül-bél típusú. CTSE kifejezés pozitív korrelációban áll a gyomor marker MUC5AC ( p katalógusa < 0,0001) és negatívan korrelált a bél marker MUC2 ( p katalógusa = 0,0019). Mert sig típusú GC, mind a daganatok és a háttér nyálkahártya, kifejezése MUC5AC és CTSE magas, míg az MUC2 alacsony, jelezve, hogy a sig-típusú GC tükrözi jellemzőit háttér nyálkahártyáját. Gyomor adenoma és tub1 /tub2 típusú GC, több differenciálatlan tumorok általában azt mutatják, a magasabb kifejezése CTSE a MUC5AC alsó és kifejezése MUC2 tumorokban, de inkább a közölt alacsonyabb kifejezése CTSE, MUC5AC és MUC2 a háttérben nyálkahártyát. Ezek arra utalnak, hogy több rosszindulatú gyomor adenokarcinóma erősebb gyomor- és bélrendszeri gyengébb tulajdonságok általában adódnak háttér nyálkahártya csökkent mind gyomor- és bélrendszeri funkciók. Összefoglalva, CTSE a marker a mind gyomor- differenciálás és pecsétgyűrű sejtes carcinoma, amely rávilágít a mechanizmus a gyomor tumorigenezis. Katalógusa

Citation: Konno-Shimizu M, Yamamichi N, Inada Ki, Kageyama- Yahara N, Shiogama K, Takahashi Y, et al. (2013) katepszin E markere Gyomorsav differenciálás és pecsétgyûrûsejtes karcinóma Gyomor: A Novel javaslat gasztrinsav tumorogenezisben. PLoS ONE 8 (2): e56766. doi: 10,1371 /journal.pone.0056766 katalógusa

Vágó: Anthony W. I. Lo, a kínai University of Hong Kong, Hong Kong katalógusa

Beérkezett: november 20, 2012; Elfogadva: január 14, 2013; Megjelent: február 22, 2013 katalógusa

Copyright: © 2013 Konno-Shimizu és mtsai. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka részben támogatta támogatásából Sato Memorial Rákkutatási Alapítvány, részben a kutatási támogatás Nakayama Rákkutató Intézet, részben kutatási támogatás Alapítvány támogatása Cancer Research, valamint részben a Grant-in- támogatás Fiatal tudósok (B) az Oktatási Minisztérium, Kulturális, Sport, Tudományos és Technológiai (MEXT). De az összes finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezetés katalógusa

a gyomorrák (GC) a negyedik leggyakoribb daganat a második oka a rák okozta halál világszerte, annak ellenére, hogy a fokozatos csökkenése annak előfordulási és halálozási [1], [2]. Köztudott, hogy a gyomorsav rosszindulatúság bemutatja különböző hisztológiai jellemzői [3]. A legelterjedtebb osztályozása gyomorrák Lauren besorolás, amely megkülönbözteti a bél (differenciált) típusú GC és diffúz (differenciálatlan) típusú GC [4]. Lauren gépelés egyszerű és könnyen érthető, bár a leegyszerűsítés gyakran vezet képtelensége tükröző pontos jellemzőit gyomor malignus [3]. A részletesebb japán besorolása gyomorrák [5], amely hasonlít a WHO osztályozás [6], gyomor adenokarcinóma sorolják hat kategóriában: jól differenciált csőszerű adenocarcinoma (tub1), közepesen differenciált csöves adenokarcinóma (tub2), gyengén differenciált adenokarcinóma (por), pecsétgyűrű sejtes carcinoma (sig), mucinouse adenokarcinóma (FRA), és papilláris adenokarcinóma (pap). Általánosságban elmondható, hogy Lauren diffúz (differenciálatlan) beletartoznak Por-, jelen-, és FRA-típusú GC, míg Lauren bél (differenciált) típus tartalmaz tub1-, tub2-, és pap-típusú GC [3]. Katalógusa

a különböző szövettani típusú GC összpontosítottunk pecsétgyűrű sejtes carcinoma (SRCC) gyomor (sig-típusú GC). SRCC egy mucin-szekretáló adenocarcinoma, amelyben intracitoplazmatikus mucin tömöríti a magok, hogy a sejtek jellegzetes "pecsétgyûrûsejtes" megjelenése [7]. Míg SRCC leírták, hogy származtatható különböző szövetekben, a gyomor a leggyakoribb szervi származási [7], [8]. Annak ellenére, hogy a gyakori előfordulása SRCC között gyomor rosszindulatú, klinikopatológiai jellemzői sig típusú GC még mindig ellentmondásos; Egyes korábbi vizsgálatok szerint a pecsétgyűrű sejtes szövettani bemutatja jobb prognózissal [9], [10], [11], míg más vizsgálatok szerint a szövettani SRCC annak a jele, inkább rosszabb prognózist [8], [12], [ ,,,0],13], [14]. Ilyen háttérrel, megpróbáltuk megtalálni az új speciális marker gének sig típusú GC. A legtöbb korábbi tanulmányok [15], [16], [17], sig típusú GC már együtt kell elemezni por típusú és FRA-típusú, mert ez a három típusú GC sorolható Lauren diffúz típusú. Azonban sok jelentések szerint a sig-típusú GC meglehetősen eltér Por- vagy FRA-típusú GC, abból a szempontból, molekuláris jellemzői vagy rosszindulatú potenciál [3], [13], [18]. Ezért megvizsgáltuk a sig-típusú GC függetlenül a részek és FRA-típusú GC. Katalógusa

Ezek a rengeteg gén, mi átvizsgáljuk több is, mint a cadherin katalógusa családi gének [19 ], [20], az emberi mucin katalógusa gének [21], vimentint katalógusa [22], katepszin katalógusa családi gének [23], [24], [25] stb, melynek kifejezések leírták, hogy eltérő lehet között Lauren intesztinális és diffúz típusú GC. A fő célja a tanulmány találni egy nyom megoldatlan karcinogenitási sig típusú GC segítségével azonosítja az adott marker gének. Azt vártuk, hogy a mi tárgyalás vezetne ismeretlen upstream szabályozó gének (mint például a specifikus transzkripciós faktorok) meghatározó tulajdonságainak SIG-típusú GC. Néhány transzkripciós faktorok kapcsolatos gasztrointesztinális tulajdonságait volna tisztázni, mint a CDX katalógusa családi gének [26], [27], gli katalógusa családi gének [28], és Sox2 katalógusa [29], de úgy gondoljuk, nem egy pár kulcsfontosságú gének gasztrointesztinális differenciálás és gyomorrák onkogenezissel még nem derül fény. Egy másik Tanulmányunk célja az, hogy elemezze a nagyon korai szakaszában gyomor tumorogenezisben alapján a kifejezés azonosított új marker géneket. Nem csak összpontosítva sig típusú GC-ben tovább támadott, hogy értékelje az összes típusú korai GC esetek elemzésével azonosították marker gén kifejeződik a tumor lézió és a szomszédos nyálkahártyát. Meg vagyunk győződve arról munkánk kulcsfontosságú szerepet kell, hogy közeledik az ellentmondásos jellemzőit sig típusú GC, és kell egy vezető, hogy kiderítsük a különböző szövettani tulajdonságait gyomor rosszindulatú. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

Cell Culture

húsz gyomor-, tíz kolorektális, és a két nem gasztrointesztinális rák sejtvonalakat tartottunk DMEM 10% magzati borjúszérummal (Gibco /invitrogen, Carlsbad, CA), 37 ° C-on [30], [31]. Az összes sejtvonalat az American Type Culture Collection, RIKEN Cell Bank, vagy Cella Resource Center for Biomedical Research Institute of Development, az öregedés és a rák, Tohoku Egyetem. Nevek és szövettani típusú használt rákos sejtvonalak le aprólékosan a támogató dokumentumban S1. A DNS-demetilezési reagens és hiszton-deacetiláz (HDAC) gátló, 5-aza-2'-dezoxicitidin (5-aza-dC, Sigma-Aldrich), 2 ng /ml-es vagy Trichostatin A (TSA, Sigma-Aldrich), 100 ng /ml adunk a táptalajhoz.

RT-PCR-

az összes celluláris RNS-ek alkalmazásával állítottuk elő a ISOGEN RNS izolálás reaent (Wako, Osaka, Japán) a korábban leírtak szerint [30]. Félig kvantitatív RT-PCR-t végeztünk keresztül Superscript One-Step reakció a platina Taq (Gibco /invitrogen). A primer párokat és RT-PCR alkalmazott eljárások kimutatására az expressziós szint a E-cadherin (CDH-1) hotelben, LI-cadherin (CDH-17) hotelben, MUC5AC katalógusa, MUC6 katalógusa, MUC2 katalógusa, CTSE (katepszin E) katalógusa, CTSD (katepszin D) hotelben, CTSB (katepszin B) hotelben, CTSL (katepszin L) hotelben, és a GAPDH katalógusa jelennek meg a táblázatban S1. katalógusa

Western blot katalógusa

a teljes sejt kivonatok (20 ug egyenként) lizáltuk, és a főtt 1x minta pufferrel [30] elválasztjuk elektroforézissel 12,5% -os SDS poliakrilamid gélen, átvittük nitro-cellulóz-membránra (Hybond-N, Amersham, Freiburg, Németország), és immunfestést anti-humán katepszin E antitesttel (AF1294, R &D Systems, Minneapolis, MN) vagy anti-humán β-aktin (C4) antitestet (# SC-47778, santa Cruz Biotechnology, santa Cruz, CA). A második antitestek, a torma-peroxidáz (HRP) konjugált anti-kecske IgG-t (H + L) szamár antitesttel (ˁ-035-003, Jackson, Baltimore, Pennsylvania) és a torma-peroxidáz (HRP) konjugált anti-egér IgG-t (H + L) kecske antitesttel (A90-216P, Bethyl, Montgomery, Texas) jutottunk használt. Konkrét sávokban detektáltuk Immunostar LD (Wako, Osaka, Japán) és LAS-4000 (Fuji Film, Tokió, Japán). Katalógusa

Az immunhisztokémiai katalógusa

Deparaffinization és endogén peroxidáz inaktiválása klinikai szövetek végeztünk a korábban leírtak szerint [3]. A CTSE az elsődleges immunfestés anti-humán CTSE kecske poliklonális antitesttel (# AF1294, R &D Systems) olyan 1:100 hígítás végeztünk 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A mosás után PBS-ben (foszfáttal pufferolt-sók) háromszor, a másodlagos immunfestést a Histofine Egyszerű Stain MAX-PO (G) (Nichirei, Tokió, Japán) végeztük 30 percig, szobahőmérsékleten. Mosás után PBS-sel háromszor, a reakciótermékeket tettük láthatóvá, 20 mg /dl-3,3'-diaminobenzidin-tetrahidroklorid tartalmazó oldatot egy csepp 30% -os H _{2 O 2, majd mosás PBS-sel. Nukleáris counterstaining végeztük Mayer-féle hematoxilin. A MUC5AC és MUC2, hidratált melegítéssel 1 mM EDTA-pufferben (pH = 8,0) 120 ° C hőmérsékleten először végre egy kukta (Delicio 6L; T-FAL, Rumily, Franciaország) 10 percen antigén visszakeresés. Az elsődleges immunfestést anti-MUC5AC antitest (NCL-MUC-5AC, Novocastra, Newcastle-upon-Tyne, Egyesült Királyság) egy 1:200 hígítás vagy anti-MUC2 antitest (NCL-NUC-2, Novocastra) egy 1:500 hígítás végeztük 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A mosás után PBS-ben háromszor, a másodlagos immunfestést a Histofine Egyszerű Stain MAX-PO (G) (Nichirei) végeztük 30 percig, szobahőmérsékleten. A következő lépés az volt, ugyanaz, mint a CTSE immunológiai festés. Minden immunfestett metszeteket külön értékelni a két patológusok együtt HE-festett és PAS-festett metszetek azonos elváltozásokat. Katalógusa}

tumormintákban katalógusa

Ezek a gyomorrák szövetek dönthető a Fujita Health University School of Medicine, kiválasztottunk 51 gyomor pecsétgyűrű sejtes carcinoma (sig) minta műtétileg eltávolított. Továbbá 67 gyomorrák műtéti mintából más ötféle gyomor adenokarcinóma (tub1, tub2, por, pap, és FRA) véletlenszerűen kiválasztott ugyanabban a bankban. Az endoszkópos úton eltávolított mintákat választottunk, 84 minta (78 gyomorrák esetek és 6 gyomor adenoma esetben), hogy kezeltek a University of Tokyo Kórház 2005-től 2011-Az összes klinikai minta, írásos hozzájárulást kaptunk a megfelelő betegek a nyilatkozat szerint a Helsinki. Ez a tanulmány által jóváhagyott intézményi etikai felülvizsgálati bizottság az emberi vizsgálatot Fujita Health University, és szintén jóváhagyta etikai bizottságok, a University of Tokyo. Katalógusa

retrovírus vektorok

A generál retrovírusvektorokat kifejező Cdx2 katalógusa, Gli1 katalógusa, Gli3 katalógusa, CTSE katalógusa, és Sox2 katalógusa, megfelelő cDNS-eket helyezünk pMXs-IRES -puro (Cell Biolabs Inc., San Diego, CA) a következők szerint. Mert Cdx2 katalógusa, pMXs-Cdx2-IRES-Puro keletkezett, mint arról korábban [26]. Gli1
cDNS-t kapunk, a PCR-XL-TOPO-Gli1 (Open Biosystems, Huntsville, AL) keresztül PCR-amplifikációs primerek felhasználásával 5'-agccagatctatgagcccatctctgggattc-3 'és 5'-agtagcggccgcccctactctttaggcactagagt-3'. Miután a kettős emésztés BglII és Not I, a kapott fragmentumot beiktatjuk a BamHI /NotI hely a pMXs-IRES-Puro (Cell Biolabs Inc., San Diego, CA), hogy létrehoz pMXs-Gli1-IRES-Puro. Gli3
cDNS-t kapunk, a PCR-XL-TOPO-Gli3 (Open Biosystems) keresztül PCR-amplifikációs primerek felhasználásával 5'-aatgcggccgctgatttccgttggt-3 'és 5'-tgcggatcctacgtgggcatttttg-3'. Miután a kettős emésztés BamHI és NotI, a kapott fragmentumot beiktatjuk a BamHI /Notl helyeire pMXs-IRES-Puro generálni pMXs-Gli3-IRES-Puro. CTSE
cDNS-t kapott pCMV-SPORT6-CTSE (Thermo Fisher Scientific, Madison, WI) segítségével PCR-amplifikációs primerek felhasználásával 5'-ccgagatctatgaaacgctccttcttttg-3 'és 5'-gggctcgagtaaaactgtcgaatgaaga-3'. Miután a kettős emésztés BglII és XhoI, a kapott fragmentumot beiktatjuk a BamHI /XhoI helyei pMXs-IRES-Puro generálni pMXs-CTSE-IRES-Puro. Sox2
cDNS-t kapott MKN-7 genomiális DNS keresztül PCR amplifikációt primerek felhasználásával 5'-atgtacaacatgatggagacggagct-3 'és 5'-tcacatgtgtgagaggggcagtgtg-3'. Az amplifikált fragmentumot beiktatjuk EcoR V helyei pT7Blue-T vektorba (Novagen, Darmstadt, Németország), hogy létrehoz pT7Blue-Sox2. Miután a kettős emésztés BamHI és Sall, a kapott fragmentumot beiktatjuk a BamHI /XhoI helyei pMXs-IRES-Puro generálni pMXs-Sox2-IRES-Puro. A kotranszfekciós Ezeket a plazmidokat a hólyagos szájgyulladás vírus burok G fehérje (VSV-G) expressziós plazmid PLAT-GP előrecsomagolatlan sejtvonal (Cell Biolabs Inc.) rendre VSV-G-pszeudotípusú MuLV alapú retrovírus vektorok expresszáló Cdx2
, Gli1 katalógusa, Gli3 katalógusa, CTSE katalógusa, és Sox2 katalógusa készítettünk. katalógusa

Eredmények katalógusa

kifejezése katepszin E (CTSE) hotelben szignifikáns összefüggést mutat Originated szövettani típusa a gyomorrák sejtvonalak

kereséséhez a marker gének sig típusú GC, mi átvizsgáljuk a kifejezés számos gén jelentett megjeleníthető megkülönböztető kifejezés között Lauren bél- és diffúz típusú GC. Kifejeződése E-cadherin katalógusa ( CDH-1 katalógusa) [19], LI-cadherin katalógusa ( CDH-17 katalógusa) [20], MUC5AC katalógusa [21], MUC6 katalógusa [21], MUC2 katalógusa [21], vimentint katalógusa [22], CTSD
( katepszin D katalógusa) [23], [24], CTSE katalógusa ( katepszin E katalógusa) [23], [24], CTSB
( katepszin B katalógusa) [25], CTSL katalógusa ( katepszin L katalógusa) [25], és GAPDH katalógusa (belső kontroll) gének értékeltük RT-PCR 20 GC vonalak együtt 12 rákos sejtvonalat származó más szervek (1a ábra). Ezután irányította a figyelmet, hogy a CTSE katalógusa, mert azt fejezi ki mind a Kato-III és NUGC-4 származó sig típusú GC, és azért is, mert nem fejezi ki MKN-7 és H-111-TC ismert, hogy származott jól differenciált csöves adenokarcinóma a gyomorrák (tub1 típusú GC, alátámasztó dokumentum S1). katalógusa

a többi vizsgált gének kifejeződését CDH-1 katalógusa ( E- cadherin katalógusa), számoltak be, hogy gyakran hiányos Lauren diffúz típusú GC [19], [32], [33], váratlanul kimutatni a két sig típusú GC-eredetű sejtek (1A). Azt is váratlan, hogy a CDH-17 katalógusa ( LI-cadherin katalógusa), úgy gondolták, hogy a bélben marker gén [20], [26], [27], amely megfogalmazza szinte minden gyomor rákos sejtvonalak, beleértve a sig-típusú (1A). Más katepszin család gének, CTSD
jelentették, hogy erősen expresszálódik a diffúz típusú GC és prognosztikai paraméter gyomor karcinóma betegeknél [23], [34], de az eredmények a RT-PCR során kiderült, hogy minden a vizsgált rákos sejtvonalak egyaránt kifejezett CTSD katalógusa (1A). CTSB katalógusa és CTSL katalógusa számoltak be, hogy megemelkedett gyomorrák [35], és korrelál a malignus tulajdonság [36], de a konkrét kifejezése sem CTSB katalógusa vagy CTSL
SIG-típusú GC-eredetű sejtvonalak lehetett kimutatni (1a ábra). Egészében véve a kifejezés profilja CTSE katalógusa tűnik, hogy egészen más a többi katepszin családi gének. Katalógusa

A következőkben értékelni viszonyának CTSE véleménynyilvánítás és a szövettani típus 20 GC sejtvonalak. Alapján részletes felügyeletét irodalmak leírt "szövettani típusa a gyomorrák sejtvonalak" Alátámasztó dokumentum S1, 19 GC sejtvonalak lehet válogatni Lauren és japán osztályozás [3], [4], [5] (1. táblázat) . Az Lauren besorolás, 7. 11 diffúz típusú GC-eredetű sejtek és 1 5 intesztinális típusú GC-eredetű sejtek kifejezni CTSE (1. táblázat): CTSE katalógusa gén hajlamos arra, hogy kifejezett diffúz típusú és hiányos intesztinális típusú GC. Közötti társulás CTSE kifejezés és szövettani jellemzője gyomor malignus lesz egyértelműbb, ha pontosabb japán osztályozást alkalmazzák. Között a sejtvonalak a diffúz típusú GC, érdemes megjegyezni, hogy NUGC-4 és Kato-III származott SIG-típusú GC erősen kifejezett CTSE, míg SH-10-TC és a KE-97 származott MUC-típusú GC hiányos CTSE kifejezés. Mert származó sejtek por típusú GC, a leggyakoribb szövettani típus a gyomor rosszindulatú daganat [3], CTSE kifejezés változatos: MKN-45, KE-39, HuG1-PI, HuG1-N, és AGS erősen kifejezni CTSE, míg GCIY és HGC-27 hiányos a CTSE kifejezést. Éppen ellenkezőleg, többek között a sejt-vonalak Lauren intesztinális típusú GC, nevezetesen tub1 és tub2 japán osztályozás, MKN-7, H-111-TC, MKN-74, és AZ521 hiányzik CTSE kifejezés, csak egy kivételével NCI-N87 mutató nyilvánvaló CTSE kifejezés. katalógusa

Ezekből eredményeként azt gondolták, hogy a kifejezés CTSE szignifikáns összefüggést mutat a szövettani típusú gyomorrák. Más ritka típusú GC sejtvonalak, MKN-1, az ECC-10, és az ECC-12 teljesen deficiens CTSE expresszió (1A ábra, 1. táblázat).

expressziója katepszin E (CTSE )
Gene szabályozza Majorly a transzkripció szintjén

a 13 gyomor-, 5 kolorektális, és 2 más rákos sejtvonalban, a CTSE protein termelési analizáltuk Western blottal (1B ábra). 7. 20 sejtvonalak is értékelték immunhisztokémiai (ábra S1). A mindkét elemzés CTSE katalógusa mRNS expresszió és CTSE fehérje termelése többnyire párosul, ami arra utal, CTSE katalógusa kifejezés elsősorban szabályozott transzkripciós szinten. Különben is, minden vagy semmi kifejezése CTSE bemutatott RT-PCR, Western blot és immunhisztokémiai azt javasolta, hogy a gyomorrák sejtek számára egyértelműen két kategóriába sorolhatók: CTSE-t kifejező típusú és CTSE-hiányos típusú. Katalógusa

Annak vizsgálatára, a szabályozás a CTSE
gén, két fő epigenetikus gyógyszerek, demetilező ügynök 5-aza-2'-dezoxicitidin és hiszton dezacetiláz inhibitor trichosztatin a [37], alkalmazták öt GC sejtvonalak (1C) . Három CTSE-t expresszáló és két CTSE-hiányos GC sejtvonalak kezelték, de nem tudtuk kimutatni változása CTSE katalógusa transzkripció (1C). Metilezésnél, mi is keresett CpG-szigetek szuggesztív promoter régió humán CTSE katalógusa gént két honlapon: "http://www.uscnorris.com/cpgislands2/cpg.aspx" bizonyító CpG sziget kereső és " http://www.ncbi.nlm.nih.gov "által támogatott National Center for Biotechnology Information (NCBI). Az eredmények mindkét keresések azt javasolta, hogy a promóter az emberi CTSE katalógusa gén jellemzi alacsonyabb százalékát CpG (55%), és nem CpG-sziget, amelyek összhangban vannak eredményeink (1C).

Emellett megvizsgáltuk a hatását négy transzkripciós faktorok számoltak szabályozására számos gasztrointesztinális gének: cdx2 katalógusa [26], [27], gli katalógusa családi gének ( gli1 katalógusa és gli3 katalógusa) [28], és Sox2 katalógusa [29]. Az istálló transzdukciója cdx2 katalógusa, gli1 katalógusa, gli3 katalógusa, és Sox2 katalógusa azonban nem tudtunk kimutatni nyilvánvaló változás CTSE katalógusa kifejezés (1D). Jelenleg nem tudtuk megvilágítani a szabályozási mechanizmust CTSE katalógusa gén, amelyet meg kell oldani a jövőben. Katalógusa

A katepszin E (CTSE) határozottan kifejezve pecsétgyûrûsejtes karcinóma Gyomor

érvényesítéséhez a spekuláció a GC sejtvonalak (1. táblázat, 1A), akkor a következő elemeztük CTSE expresszió klinikai mintákból. Eleinte 51 sig típusú GC mintát műtétileg eltávolított értékeltük. Meglepő, nyilvánvaló megfestése CTSE figyelték meg az összes a 51 mintákat vizsgált és 50. 51 esetben, CTSE-pozitív sejtek elfoglalt több mint 90% -a rákos sejtek a tumor (2. táblázat).

Ezután 67 sebészeti származó minták GC eltérő esetekben sig típusú elemezték, amely bemutatta a különböző minták CTSE kifejezés (2. táblázat). CTSE expresszió POR-típusú GC nyilvánvalóan magasabb, mint a többi négy típusú GC, bár ez sokkal kisebb volt, mint a SIG-típusú GC (2. táblázat). Prevalenciája CTSE pozitív sejtek tub1-, tub2-, pap- és MUC-típusú GC természetesen alacsonyabb, de ez nem olyan alacsony, mint a többi normál emésztőszervek (2. táblázat). Tipikus immunfestésével képek CTSE a hatféle GC 2. ábrán mutatjuk be (sig és tub1) ábra S2 (tub2, pap, por, és FRA). Katalógusa

Az eredmény alapján a sebészeti mintákban, akkor a további elemezte CTSE kifejezése 84 endoszkóposan eltávolított gyomor tumor mintákban. Összehasonlítva műtéti mintákat, a szövettani endoszkópos eltávolított szövet sokkal homogénebb; ez onnan várható, hogy összefüggés a CTSE kifejezése és szövettani gyomorrák elemezni lehet pontosabban. Ezek álló 78 esetben a korai stádiumban adenokarcinóma (7. SIG-típusú, 52 tub1-típusú, 12 tub2-típusú, és 7. PAP-típusú GC) és 6 esetben rákmegelőző adenoma (3. táblázat). CTSE kifejezése jelen-, tub1-, tub2-, és pap-típusú GC endoszkóposan kimetszett szövetben hasonlít műtétileg eltávolított egyek a megfelelő szövettani (2. és 3. táblázat). Számított CTSE kifejezés pontszámot (3. táblázat) világosan mutatják, ez a tendencia CTSE határozottan kifejezi sig típusú GC mivel általában a hiányos tub1- és tub2 típusú GC. Azt is meg kell jegyezni, hogy a gyomor adenoma, amely lehet tekinteni, mint a differenciáltabb szövettani jellemzője képest tub1 típusú GC, mutatta a legerősebb hiányossága CTSE (3. táblázat). Katalógusa

CTSE nemcsak mutató Signet -ring karcinóma gyomor, hanem a gyomor differenciálódási marker katalógusa

Annak vizsgálata forgalmazásával CTSE normális bél és rákmegelőző gyomor, immunfestésével CTSE tovább alkalmazni a nem rákos gyomor és egyéb emésztőrendszer szerveit. A gyomor nélkül atrófia és intestinalis metaplasia, kifejezése CTSE egyértelműen megfigyelhető a fundus és a pylorus mirigyek gyomor (ábra S3D /S3A és S3E /S3B). Szívbetegségek mirigyek gyomor is kifejezheti CTSE, bár ez inkább gyengébb expresszióját fundus vagy pylorus mirigyek (ábra S3F /S3C). Contrastively, CTSE ritkán kifejezve oesophagus, duodenum, vékonybél, és a vastagbél (ábra S4).

tovább értékeltük CTSE expresszió gyomornyálkahártya intestinalis metaplázia, egy jól ismert rákmegelőző állapot gyomor [26 ], [29], [38]. Amint az a 3a ábrát, a gyomor fundus mirigyek és bélrendszeri metaplasztikus mirigyek mutatnak kontrasztív festéssel CTSE. Jellemzően intestinalis metaplasia van két kategóriába sorolhatók: vegyes gyomor-és bélrendszeri típusú (nem teljes típus), és kizárólag a bél típusa (teljes típus) [29], [38]. Jól megalapozott, hogy az előbbi kifejezi MUC5AC (gyomor marker mucin) és MUC2 (bél marker mucin), míg az utóbbi egy hangot nem MUC5AC de MUC2 [29]. Mindkét típusú intestinalis metaplasia a gyomorban, azt megerősítette, hogy kifejeződése CTSE hasonló MUC5AC és ellentétes MUC2 (3B és 3C). Katalógusa

Annak megállapítására, az egyesület a CTSE kifejezést MUC5AC és MUC2 kifejezés, a immunfestést statisztikailag értékeltük az endoszkópos kimetszett 84 gyomor daganatos szövetek (táblázat S2). A korrelációs elemzések azt mutatták, hogy a CTSE kifejezés Pozitív összefüggés van a gyomor marker MUC5AC ( p katalógusa < 0,0001) és negatívan kapcsolódó bél marker MUC2 ( p katalógusa = 0,0019). Szintetikusan, arra a következtetésre jutottunk, hogy a CTSE, mint MUC5AC, egyike a gyomor differenciálódási markerek. Katalógusa

További differenciálatlan Csöves Adenocarcinoma Jellemzően adódnak Háttér nyálkahártyát egyaránt csökkent a "gyomor" és a "bél" Tulajdonságok katalógusa

Annak vizsgálatára megindítását lépése gyomor tumorigenezis, a háttérben nyálkahártyáján korai rák és adenoma tovább vizsgáltuk, a 84 endoszkópos úton eltávolított mintákat. CTSE expressziója nem rákos gyomornyálkahártya szomszédos tumoriézió értékeltük együtt MUC5AC és MUC2 (4. táblázat). A SIG-típusú GC, mind a tumor lézió és a háttér nyálkahártya többnyire mutatott erős expresszióját CTSE és MUC5AC, mivel expressziója MUC2 nagyon gyenge volt mindkettőben (4. táblázat). Hasonló expressziós mintázata három markerek tumor és a mellette lévő nyálkahártya szerint megindítása sig típusú GC tükrözi jellemzőit háttér nyálkahártya, a kilátás "gyomor" és a "bél" differenciálás. Azaz, a SIG-típusú GC a nem-bélrendszeri gyomor tulajdonságok kezdetben fordul elő a háttérből nyálkahártya nem-bél és gyomor jellemzői.

gyomor adenoma és cső alakú adenokarcinóma (tub1 /tub2-típusú GC), contrastively, expressziós profilok a három marker nagyon érdekes (4. táblázat). Több differenciálatlan gyomor tumorok hajlamosak növelni expresszióját CTSE és MUC5AC a tumor léziók (tub2 > tub1 > adenoma), de csökken expressziója ezeknek gyomor markerek a háttérben nyálkahártya (tub2 < tub1 < adenoma). Ezek arra utalnak, hogy több differenciálatlan (ezért több malignus) daganatok gyomor apt mutatni az erősebb gyomor tulajdonság, mivel hajlamosak abból a háttérben nyálkahártya csökkent gyomor funkciókat. Másrészt, differenciáltabb gyomor tumorok hajlamosak kifejezni MUC2 mind tumoros léziók és a háttér nyálkahártya (adenoma > tub1 > tub2). Ez arra utal, hogy a bél differenciálódása háttér gyomornyálkahártya vezet bélben differenciált (így kevésbé rosszindulatú) gyomor tumorok. Katalógusa

A pap-típusú GC, kifejezései CTSE, MUC5AC és MUC2 jóval erős mind a tumor lézió és a környező nyálkahártya, amely meglehetősen eltér az expressziós mintázata tub1 /tub2 típusú GC (4. táblázat). Pap-típusú GC sorolják Lauren intesztinális típusú együtt tub1 /tub2 típusú GC, de a jelenlegi elemzések azt javasolta, hogy pap-típusú és tub1 /tub2 típusú GC ne kezeljék azonos kategóriába, abból a szempontból gyomor- és bélrendszeri jellemzők. Korábbi vizsgálati jelentések Brm katalógusa [3], lehetséges kulcsfontosságú marker gén bél differenciálódás kifejezése Brm a gyomor adenokarcinóma papilláris (PAP) egészen más a csőszerű adenocarcinoma gyomor (tub1 és tub2). Jelenleg vagyunk győződve arról, hogy a szövettani különbség pap-típusú GC és tub1 /tub2 típusú GC szigorúan kell ismerni. Katalógusa

Vita katalógusa

szerepe és szabályozása katepszin E (CTSE) a emberi gyomor

katepszin E (CTSE), egy nem-lizoszómális intracelluláris aszparaginsav-proteáz, az egyik a katepszin család proteázok [39], [40]. Egy másik aszparaginsav-proteáz cathespin D (CTSD), egy homológja CTSE, igen jelentős proteolitikus aktivitást a lizoszomális komponens, de funkcionális szerepe CTSE még nem tisztázott [24], [39]. Megoszlása ​​mindkét proteinázok egészen más: CTSD általánosan létezett lizoszómái különböző szövetekben (konzisztens azzal az eredménnyel, az 1A ábra), míg a CTSE főleg kifejezve az immunrendszer sejtjeire rendszerek, mint a macropahges, limfociták, dendritikus sejtek stb [39 ]. Expressziója CTSE a gyomorban is leírták, [23], [24], bár fiziológiás és patológiás funkciója gyomor CTSE jelenleg ismeretlen [39], [40]. A jelen vizsgálat során, több mint 202 klinikai gyomor mintákat, világosan megmutatta CTSE mind a gyomor differenciálódási marker és a gyomor pecsétgyűrű sejtes carcinoma marker, de a jelentősége gyomor CTSE kifejezés továbbra is bizonytalan. Katalógusa

kapcsolat elemzése a CTSE kifejezés és onkogén potenciált, készítettünk az MuLV alapú retrovírus [26] könyv CTSE katalógusa gén transzdukált be a CTSE-hiányos gyomorrák sejtvonalakon: MKN-74, SH-10 -TC és MKN-1. Mi értékelte a lehetőséget megváltoztatásával gyomor mucin termelés (ábra S5), illetve morfológiai változások, de nincs változás volt megfigyelhető. Ezekkel létrehozott sejtvonalak, azt tovább végeztünk mind a kolónia képződését lágy agarban [30] és az apoptózis indukció kezelésére aktinomicin D, kamptotecin, és staurosporin [41]. Azonban tudtuk kimutatni a hatását CTSE expresszió sem a rögzítéstől független szaporodást, sem rezisztenciát gyógyszer által kiváltott apoptózist (adatokat nem mutatjuk).

A nemrégiben készült tanulmány, CTSE ben ismertették, hogy bizonyos anti-onkogén potenciál: Kawakubo et al.
kimutatták, hogy a CTSE specifikusan indukálja a növekedés és apoptózis humán prosztatarák sejtvonalak által katalizálja a proteolitikus felszabadulását oldható tumornekrózis-faktorral kapcsolatos apoptózis-indukáló ligandum (TRAIL) a sejt felszínén [42 ]. Azonban CTSE-hiányos egerek egyiket sem mutatnak a rák hajlamos fenotípus sem jelen nyilvánvaló gyomor betegségek [43], [44], [45]. Jelenleg ez a kérdés a sejtés, hogy a bejelentett tumorellenes aktivitását CTSE lehetne alkalmazni gyomorrák beleértve pecsétgyűrű sejtes carcinoma. Együtt unelucidated szabályozása és élettani funkciót, hatásai CTSE a gyomor differenciálás és tumorogenezisben alapvető problémák, amelyek meg kell oldani a jövőben. Katalógusa

Gyomor Canceration abból a szempontból "gyomor" és a "bél" tulajdona Háttér

• PLoS One: retinsav-aktivált Ndrg1a elfojtja Wnt /β-catenin jelátviteli Allow Xenopusban hasnyálmirigy, Nyelőcső, gyomor, és a nyombél Specification
• PLoS One: Műtét kemoradioterápiában kombinált epirubicin-alapú kemoterápia triplett lokálisan előrehaladott Adenocarcinoma a gyomor vagy gastrooesophagealis Junction