Jelenlétét és jelentőségét Helicobacter spp. A gyomornyálkahártya portugál dogs

jelenlét és jelentősége a Helicobacter spp.
gyomornyálkahártya portugál kutyák katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa nem Helicobacter pylori katalógusa Helicobacters (NHPh) is képesek betegséget okoznak az emberben. A kutyák természetes víztározó számos ilyen faj. Szoros és intenzív emberi kapcsolat állatokkal azonosították a kockázati tényező, ezért fontos a zoonózis jelentősége bízták NHPh. Katalógusa Módszerek
elterjedtségének megállapítása Helicobacter katalógusa fajok és a gyomor kórszövettani változások kapcsolatos , gyomornyálkahártya mintákat 69 kutyákat értékeltük. katalógusa Eredmények
Csak egy kutya elé egy normális kórszövettani nyálkahártyát hiányában spirál alakú élőlények. A normál gyomor nyálkahártyáját, és a jelenléte spirál alakú baktérium volt megfigyelhető két kutya. Az összes többi bemutatott állatok kórszövettani elváltozások képviselője gyomorhurut. Helicobacter
fajok detektáltunk 60 kutya (87,0%) legalább egy kimutatási módszerrel. Szövettani, hisztokémiai és immunhisztokémiai értékelések során kiderült, hogy a Helicobacter katalógusa spp. jelen voltak 45 (65,2%), 52 (75,4%) és 57 (82,6%) a kutyák, ill. Spirál alakú baktérium által érzékelt qPCR elemzés 33 (47,8%) a kutyák. H. heilmannii- katalógusa organizmusok azonosítottak 22 állat (66,7%), és főleg a antrális gyomor régióban. H. salomonis katalógusa volt a második leggyakrabban előforduló faj (51,5%) annak ellenére, hogy főképp az egyesület más Helicobacter katalógusa spp. és a szervezetben gyomor régióban. H. bizzozeronii és H. felis katalógusa ritkábban észlelt.
Következtetések katalógusa Arra a következtetésre jutottak, hogy annak ellenére, hogy a magas előfordulási és világszerte forgalmazása gyomor NHPh kutyák jelenléte sajátos Helicobacter katalógusa fajok között változik a földrajzi régiókban. NHPh fertőzések jelentősen kíséri enyhe vagy közepesen súlyos intraepithelialis lymphocyta infiltráció és enyhe vagy közepesen súlyos gyomornyálkahártya sérülés, de egyértelmű kapcsolatát gastritis és Helicobacter katalógusa fertőzés nem volt megállapítható. Katalógusa Kulcsszavak katalógusa Canine gyomornyálkahártya Kutyák Nem Helicobacter pylori
helicobacters (NHPh) Histochemistry immunhisztokémiai (IHC) polimeráz-láncreakció (PCR) Gyomor Bevezetés
A nemzetség Helicobacter
áll legalább 40 fajok [1]. Ezek közül H. pylori katalógusa tekintik fontos kórokozó, amelyek természetes gazda ember, de jelen van a kutya gyomor ritkán számoltak be [2-4].
Számos nem Helicobacter pylori Helicobacter
faj (NHPh) is elismert emberi és több állat. Korábban NHPh általában nevezik H. heilmannii sensu lato katalógusa (sl) és benne H. suis katalógusa, egy faj kolonizáló gyomor sertések és a csoport faj ismert megtelepedni a gyomornyálkahártya kutyák és macskák : H. felis katalógusa, H. bizzozeronii katalógusa, H. salomonis katalógusa, H. cynogastricus katalógusa, H. baculiformis
és H. heilmannii szigorú értelemben vett katalógusa (ss) [5] . A legtöbb ilyen gyomor NHPh is képesek betegséget okoznak az emberben [6,7]. Szoros és intenzív emberi kapcsolat állatokkal azonosították a kockázati tényező, ezért fontos a zoonózis jelentősége bízták NHPh [6,8,9].
Kedvtelésből tartott állatok, gyomor Helicobacter katalógusa spp. már gyakran le prevalenciája közötti 67-86% klinikailag egészséges kutyák és 61-100% -ban állatokból krónikus hányás [10-14]. Ezek a mikroorganizmusok detektáltunk a gyomorban körülbelül 100% -a laboratóriumi Beagle kutyák és a kutyák a helyi menedékhely [15-17]. Az uralkodó gyomor Helicobacter spp.
Macskák és kutyák H. felis katalógusa, H. bizzozeronii katalógusa és H. heilmannii szigorú értelemben vett katalógusa (ss katalógusa), míg a H. salomonis katalógusa ritkábban észlelt és prevalenciája H. cynogastricus katalógusa és H. baculiformis katalógusa még nem vizsgálták [9,18-20]. Kevert fertőzések különböző fajok is előfordulnak [3,19]. Katalógusa Bár sok tanulmány arról számolt be, hogy a fundus és a test nagyobb baktérium sűrűsége és nagyobb a valószínűsége a Helicobacter katalógusa spp. [17,21,22] mások nem találtak szignifikáns különbséget a sűrűsége NHPh fundusában, a test és antrumban [2,23-26] a kutya gyomra. Az eltérések ezek az eredmények is tulajdonítható, hogy a különböző laboratóriumi diagnosztikai módszerek által használt különböző kutatócsoportok.
A diagnosztikai módszerek Helicobacter katalógusa spp.
Lehet non-invazív és invazív [24]. A nem invazív módszerek, mint a szerológiai vagy felderítése bakteriális DNS és antigének széklet nem igényelnek gyomor biopszia vagy érzéstelenítés. Az invazív módszerek, mint például a baktériumtenyészetek, kórszövettani, kenetek, elektronmikroszkópia vagy polimeráz-láncreakciós (PCR) lehet szükség gyomor biopszia, amely gyakran révén nyert endoszkópia altatásban vagy boncoláskor. Jellemzően Helicobacter
organizmusok nem könnyen láthatóvá a hematoxilin-eozin (HE) folt és így, közvetlen megfigyelés biopsziát példányok van kiemelve a használata speciális festékek, mint például a módosított Giemsa (MG) foltot. Bonyolultabb és érzékeny Helicobacter katalógusa -detection módszerekkel, például immunhisztokémiai (IHC) vagy polimeráz láncreakció (PCR) a kutatási eszközök ritkán használják a diagnosztikai beállítást.
Számos vizsgálat megbeszélték az előfordulása Helicobacter spp. Katalógusa kutyában [2,10,11,14,16], de csak kevés tanulmány a konkrét faj jelen van a kutya gyomrában határoztuk [4,19,27,28]. A pontos azonosítását a gyomor helicobacters a fajok szintjén elengedhetetlen annak érdekében, hogy meghatározzák a prevalenciája és klinikai jelentősége a taxonok. A vizsgálat célja az volt, hogy meghatározzuk a prevalenciája különböző gyomor Helicobacter katalógusa fajt külön gyomor régióiban a kutya gyomor (test és antrum) szövettani, hisztokémiai, immunhisztokémiai és molekuláris diagnosztikai technikák. A mértéke kolonizáció jellemezzük és korrelál a megfelelő kórszövettani változások a kutya gyomor nyálkahártyáját.
Módszerek
Mintagyűjtés
Gyomor szöveteket kaptuk 69 kutya (45 férfi és 24 nő, koruk 3 hónap és 15 év közötti). A mintákat véletlenszerűen kiválasztott levéltárában Laboratory of Veterinary Pathology, ICBAS-UP (Portugália), ahol fogadta őket 2010 és 2013 között vettünk 20 kutya alatt endoszkópos, öt műtét közben, és a 44 kutyáknál a boncoláskor vizsgálatok. Minden eljárások (sebészi eltávolítás és a boncolási vizsgálat) végeztek klinikai összefüggésben kísérlik meg a kezelést az állatok alapján a legjobb klinikai megítélésére, hogy részt szakemberek. Használata a kimetszett szövetben kutatási magyarázták a tulajdonosok és tájékozott beleegyezését adta minden esetben. Egyik intézkedéseket hoztak kizárólag kutatási célokra, és a nyomozók nem volt hatással a kiválasztási és végrehajtási ilyen eljárások. Csak gyomor mintákat jó állapotban tartósítás vontunk be a vizsgálatba.
Szöveteket rögzítettük 10% -os semleges, pufferolt formalin és paraffinba ágyaztuk. Három egymást követő szakaszai 3 um készítettünk, az egyik, hogy megfestettük HE, a másik egy MG folt és a harmadik pedig használjuk immunhisztokémiai festésre.
Minta értékelés
A gyomor mintákat értékeltük függetlenül két megfigyelő (IA és FG ). Kórszövettani paraméterek, mint a változások sejtes fibrózis a lamina propria katalógusa és mirigy atrófia szerint elemeztük a World Small Animal Veterinary Association (WSAVA) iránymutatások [29]. A mértéke a morfológiai jegyek és gyulladásos elváltozások sorolták, mint a normál, enyhe, közepes vagy jelölni a rendelkezésre álló WSAVA gasztrointesztinális szabványosítás vizuális analóg [29].
A mikroszkópos értékelést végeztünk elemzésével a teljes szakasz a gyomor szöveteit. A jelenléte a Helicobacter katalógusa spp.
Értékelték HE és MG foltok és IHC. Egy kutya besorolt ​​Helicobacter katalógusa pozitív, ha az alábbi módszerek bármelyikével adott pozitív eredményt. Továbbá, a bakteriális kolonizáció sűrűség mennyiségileg: +, kevés szervezetek (< 10 organizmus /400x); ++, Mérsékelt organizmusok számát (10-50 organizmus /400x); +++, Nagyszámú organizmusok (> 50 organizmus /400x) [24].
Immunhisztokémia
Az immunhisztokémiai vizsgálatban metszeteket deparaffinised, hidratált és antigén-visszanyerés végeztük egy kukta 10 mmol /L nátrium-citrát puffer, pH = 6,0, 2 percig (perc). A lemezeket lehűtjük, 10 percen át szobahőmérsékleten, majd kétszer átmossuk trifoszfát pufferolt sóoldattal (TBS) 5 percig. A NovolinkTM Max-Polimer érzékelő rendszer (Novocastra, Newcastle, UK) alkalmaztunk, a megjelenítéshez, a gyártó utasításai szerint. Blokkolás után az endogén peroxidáz 3% hidrogén-peroxiddal metanolban 10 percig, metszeteket egy éjszakán át inkubáltuk 4 ° C, a poliklonális antiszérummal H. pylori ellen katalógusa (RBK012; Zytomed, német), amely azt mutatja immunreaktivitás széles körű tartozó baktériumok a Helicobacter
nemzetség. A metszeteket öblítjük TBS között minden egyes lépés az eljárás. Szín fejlesztették akár 7 percig szobahőmérsékleten 3,3'-diamino-benzidin (DAB) (Sigma, St. Louis, MO), és metszeteket ezután enyhén ellenfestettük hematoxilinnel, dehidratált és szerelve. Pozitív immunreaktivitást feljegyeztük mint különálló aranybarna címkézése a baktériumok található nyálkahártya felszínén, a gyomor gödrök vagy mirigyek és a parietális sejtekben.
Elszívás, PCR-amplifikáció és DNS-szekvenálásra katalógusa DNS-t extraháltunk, 5 egymást követő szelet 20 jim, egy DNeasy vér és a szövet kit (Qiagen), a gyártó utasításai szerint. Helicobacter
fajspecifikus qPCRs alapuló rövid töredéke a ureáz A és B géneket fejlesztettünk azonosításához H. heilmannii SS katalógusa, H. felis katalógusa, H. bizzozeronii
és H. salomonis katalógusa. Mert generációs szabványok egyes qPCR, nagy részét a ureAB géncsoport H. heilmannii katalógusa ASB1 (1224 bp), H. felis katalógusa CS1 (1228 bp), H. salomonis katalógusa R1053 (1224 bp) és H. bizzozeronii
R1051 (1230 bp) amplifikáltuk olyan primerek használatával, U430F és U1735R, a korábban leírtak szerint [30]. A szabványos állt 10-szeres-hígítások kezdődően 10 8 PCR amplikonok mindegyik 10 ul reakcióelegyben. Egy ul kivont DNS templát szuszpendáljuk 10 | il reakcióelegyet készítünk, amely 0,25 ul forward és reverz primerek (1. táblázat), 3,5 | il HPLC víz és 5 | il SensiMix ™ SYBR No-ROX (Bioline Reagensek Ltd, UK). Mindkét szabvány, és a mintákat két párhuzamosban egy CFX96 ™ RT-PCR System egy C1000 Thermal Cycler (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). A Bio-Rad CFX menedzser (version 1.6) szoftver kiszámításához használt küszöb ciklus (Ct) -értékei és olvadási görbe analízis amplifikált DNS-t. Az átlagos értékek az ismétlődések használtuk a mennyiségi Helicobacter katalógusa DNS-t a mintákból. Hogy kizárja a hamis pozitív mintát, a fragmentumok Minden pozitív mintából voltak sequenced.Table 1 listája alkalmazott primerek qPCR katalógusa Primer név Matton nukleotid szekvencia Matton sajátosságai Matton Hfel_F2
GCT GGT GGC ATC GAT ACG CAT katalógusa H. felis Matton Hfel_R2 katalógusa TTT TTA GAT TAG CGC GTC CGG GA
H. felis Matton HH_FQ katalógusa GGC TCT GCG TAG GAC CTG CTA CAG AAG CTC TC katalógusa H. heilmannii ss Matton HH_RQ katalógusa GGC TGT AGG GAT TTG TTG AGG AGA AAT G katalógusa H. heilmannii ss katalógusa
Hsal_FQ katalógusa CTC TTA TGA GTT GGA CTT GGT GTC CAC CAA T
H. salomonis Matton Hsal_RQ katalógusa TTT GCC ATC TTT AAT TCC AAT GTC GGC
H. salomonis katalógusa
Hbizz_FQ katalógusa AAT CTT TGC GTG GGC CCT GTC ACT GAG katalógusa H. bizzozeronnii Matton Hbizz_RQ katalógusa CTG GCA AAT GTC GTG GGG ATT TGT TGG
H. bizzozeronnii katalógusa
Statisztikai analízis katalógusa Pearson-féle chi-négyzet próba és Fisher-féle egzakt tesztet meghatározásához használt függőség két kategóriába. p értékek < 0,05 tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. A statisztikai elemzést végeztünk statisztikai SPSS 16.0 (SPSS Inc., Produtos e Serviços de Estatística Lda, Lisszabon, Portugália). Katalógusa Eredmények
Összesen 117 gyomor minták (66 a test régió és 51- antrumból régió) elemeztük.
közül 69 az állatok, mind gyomor- régiók álltak rendelkezésre az értékeléshez 48 kutyáknál mivel csak a test vagy antrumból régiókat kapható 18 és három kutya volt. Vélemények a 69. kutyák, csak egy bemutatott egy normális kórszövettani nyálkahártyát hiányában spirál alakú élőlények. A normál gyomor nyálkahártyáját, és a jelenléte spirál alakú baktérium volt megfigyelhető két kutya (2,9%). A megmaradt állatok, bemutatva kórszövettani elváltozások képviselője gastritis (66/69 vagy 95,7%) (2. táblázat). Alapján a kórszövettani változások a gyomor nyálkahártya, diagnosztizáltunk egy enyhe és közepesen súlyos krónikus gastritis 88,4% (61/69) érintő gyomor test 51,5% (34/66), és az antrális régió 92,2% (47/51 ) a animals.Table 2 táblázat összefoglalja a kórszövettani elváltozások és kolonizációs sűrűséget megfigyelhető a kutya gyomor szerint a pozitív NHPh fajspecifikus PCR eredményeket, pozitív nemzetség eredmények és negatív eredmények Matton PCR-pozitív eredményeket adott faj azonosítás, függetlenül gyomor helye (százalék & szám) (n = 33) Matton Pozitív eredmények a Helicobacter spp. (Százalék & szám) (n = 27) Matton Negatív eredmény (százalékos & szám) (n = 9) Matton p
Hh katalógusa
Hf Matton Hb Matton Hs Matton Hf + Hb Matton Hh + Hs
Hh + Hf Matton Hb + Hs Matton Hf + Hb + Hs Matton Kórszövettani osztályozási katalógusa (Day et al., 2008) hotelben Normál katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 0
0 katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 7.4 (27/02) hotelben 11,1 (09/01 ) hotelben NS katalógusa Mild gastritis katalógusa 15.2 (5/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 0
18.2 (6/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 44,4 (12/27) hotelben 33.3 ( 3/9) hotelben Mérsékelt gastritis katalógusa 12.1 (4/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 3.0 (1/33)
9,1 (3/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 48,1 (13/27) hotelben 44,4 (4/9) hotelben Jelzett gyomorhurut katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 6.1 (2/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 11,1 (1/9) hotelben A hámsejtek sérülés katalógusa enyhe katalógusa 27.3 (9/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 9.1 (3/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 30.3 (10/33) hotelben 0 katalógusa 3.0 1/3 (3) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 77,8 (21/27) hotelben 33,3 (3/9) hotelben 0,003
Mérsékelt katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 3.0 (1 /33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 14,8 (27/04) hotelben 11,1 (1/9) hotelben fibrózis /nyálkahártya sorvadás katalógusa enyhe katalógusa 18.2 (6/33)
6,1 (2/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 0 katalógusa 18.2 (6/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 55,6 (15/27) hotelben 33,3 (3/9) hotelben NS katalógusa Mérsékelt katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 0
0 katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 3.7 (1/27) hotelben 11,1 (1/9) hotelben Intraepithelialis limfociták
enyhe katalógusa 15.2 (5/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 0 katalógusa 15,2 (5 /33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 6.1 (2/33) hotelben 29,6 (27/08) hotelben 11,1 (1/9) hotelben 0,016 katalógusa Mérsékelt katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 9,1 (3/33) hotelben 0 katalógusa 0
0 katalógusa 14,8 (27/04) hotelben 0 katalógusa Lymphofollicular hyperplasia katalógusa enyhe katalógusa 6.1 (2/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 3.0 ( 1/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 29,6 (27/08) hotelben 11,1 (1/9) hotelben NS katalógusa Bakteriális sűrűség (alapján az IHC eredmények) hotelben NA katalógusa + katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 0
14,8 (27/04) hotelben ++ katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 3.0 (1/33) hotelben 0 katalógusa 0
0
0 katalógusa 25,9 (27/07) hotelben +++ katalógusa 24.2 (8/33) hotelben 6,1 (2/33) hotelben 6,1 (2/33)
9,1 (3/33) hotelben 0 katalógusa 33,3 (11/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 3,0 (1/33) hotelben 6,1 (2/33)
51,9 (14/27) hotelben Jelmagyarázat: Hh katalógusa, H. heilmannii-szerű katalógusa; Hf katalógusa, H.felis
; Hb katalógusa, H. bizzozeronnii katalógusa; Hs
, H. salomonis.
Bakteriális sűrűség: +, kevés szervezetek; ++, Mérsékelt organizmusok számát; +++, Nagyszámú szervezetekre. NA, nem alkalmazható. NS, nem szignifikáns (p > 0,05). Katalógusa Mindkét enyhe vagy közepesen súlyos hámsérülések és enyhe vagy közepesen súlyos intraepithelialis lymphocyta infiltráció találtak 88,4% (61/69).
Gyomor nyálkahártya sorvadás, mirigyes fészkelő vagy fibrosis volt jelenleg 44,9% kutyák (31/69). 18,2% -a az állatoknak ez a változás volt megfigyelhető a test régió (12/66), és 47,1% az antrumban régió (24/51), a kutya gyomor.
Rendellenes neutrophil infiltráció csak kimutatni a gyomorban antrum a két állat: az egyik, ez a változás enyhe volt, és a másik, meg volt jelölve, és társult gyomorfekély. Más gyulladásos sejtek, abból enyhe beszűrődés hízósejtek, figyeltünk a szervezetben régióban négy állatból és az antrumban a két állat.
Közül valamennyi állat, 87,0% volt pozitív (60/69) (1a ábra), és 13,0% volt negatív Helicobacter katalógusa spp. (9/69), függetlenül attól a vizsgálati kimutatására használják a baktériumokat. Függetlenül attól, hogy a gyomorban található, a Helicobacter
spp. észleltek a HE, MG és IMC 65,2% (45/69), 75,4% (52/69) és 82,6% (57/69) a kutyáknál. A HE festés, spirál alakú baktérium volt kimutatható 62,1% -a test minta (41/66), és 70,6% -a antrális minták (36/51). Kihasználva a MG folt, ez 68,2% volt a szervezet mintákat (45/66) és 78,4% az antrális mintát (40/51). Helicobacter
antigén volt kimutatható immunhisztokémiai a 84,9% (56/66), a test minták és a 80,4% (41/51) az antrális minták (3. táblázat). 1. ábra Helicobacter katalógusa spp. kutya gyomrában. A) Számos spirál alakú baktérium telepei felszíni hám a gyomor gödör. Ő. Bár = 10 um; B) Megjegyzés a intraepithelialis lymphocyta infiltráció a mélyebb gyomor mirigyek a antrális nyálkahártya egy NHPh-pozitív kutya. Ő. Bár = 20 um. C) jelenléte NHPh belül parietális sejtekben a kutya gyomor test régió (fekete nyíl). MG. Bár = 10 um; D) A nagy összegű Helicobacter katalógusa antigén belül felületes gyomor nyálka és a lumen a gyomor mirigyek a szervezet régióban kutya gyomra. Immunperoxidáz-diamino foltot Mayer haematoxylin Counterstain. Bár = 50 um. Kis ábra Helicobacter katalógusa antigén belül parietális sejtekben néha kimutatható valamint konzervált spirál alakú organizmusok vagy barna kerek foltokkal. Immunperoxidáz-diamino foltot Mayer haematoxylin Counterstain. Bár = 10 nm. Katalógusa 3. táblázat kimutatása Helicobacter spp. a különböző gyomor rekeszeiben kutya gyomor estében különböző diagnosztikai módszereket
Gyomor régió
kimutatási módszerek
Pozitív (százalék & szám) Matton HE

MG Matton IHC * Matton PCR Matton Body (n = 66) hotelben 62,1 (41/66) hotelben 68,2 (45/66)
84,8 (56/66) hotelben 37,9 (25/66) hotelben Antrum (n = 51) hotelben 70,6 (36/51) hotelben 78,4 (40/51) hotelben 80,4 (41 /51) hotelben 51,0 (41/51) hotelben Jelmagyarázat: HE: haematoxylin-eosin; MG: módosított Giemsa festés; IHC: immunhisztokémia; PCR: polimeráz láncreakció. Katalógusa * A pozitív eredmények az IHC nem különbözik szignifikánsan az egymást gyomor régióban (p > 0,05).
További azonosítása fajok szintjén végeztük Helicobacter katalógusa fajspecifikus qPCRs . Helicobacter katalógusa spp. mutattunk 47,8% az állatok (33/69) (3. táblázat). A többség a minta volt pozitív a H. heilmannii
specifikus qPCR. Azonban az amplikonok mutatta csak mintegy 92% -ban homológ H. heilmanni S. S. katalógusa. Ezért ezekben az esetekben átcsoportosítása H. heilmannii-
tetszik. Matton A 51,5% (17/33), a pozitív mintát, csak egy Helicobacter katalógusa fajt azonosítottak, míg kevert fertőzések mutattunk 48,5% (16/33) (2. táblázat). H. heilmannii- katalógusa organizmusok voltak a leggyakrabban előforduló (22/33 vagy 66,7%), azonosított tíz kutyákat, mint egy fertőzés, és a 12 kutya, mint kevert fertőzések. H. salomonis
volt a második leggyakrabban előforduló fajok (17/33 vagy 51,5%), bár főként talált együtt más NHPh (42%), nem pedig önmagában (9,1%). Egyenlő arányban a H. felis katalógusa és H. bizzozeronnii
detektáltunk (6/33 vagy 18,2%), akár egyetlen (6,3%) vagy kevert fertőzések (12,1%). Kevert fertőzések H. heilmannii
-mint és H. salomonis katalógusa leggyakrabban előforduló (33,3%) (2. táblázat). A test területén, amely a leggyakrabban azonosított faj volt H. salomonis katalógusa (44,0%), míg az antrumban a legelterjedtebb faj H. heilmannii- katalógusa hasonló (57,7%) (4. táblázat) .table 4 Specific Helicobacter fajok a PCR a különböző gyomor rekeszeiben kutya gyomor katalógusa specifikus PCR Helicobacter spp. pozitív eredménye |
Gyomor régió (százalék & szám) Matton Body Matton Antrum Matton (n = 25) Matton (n = 26) Matton H. heilmannii-szerű Matton 24,0 (25/06) hotelben 57,7 (15/26) hotelben H. salomonis Matton 44,0 (11 /25) hotelben 7,7 (2/26) hotelben H. felis Matton 8,0 (2/25) hotelben 3,8 (1/26) hotelben H. bizzozeronnii Matton 4,0 (1/25) hotelben 11,5 (26/03) hotelben H. felis + H. bizzozeronnii Matton 4,0 (1/25) hotelben 3,8 (1/26) hotelben H . heilmannii-szerű + H. salomonis Matton 8,0 (2/25) hotelben 11,5 (26/03) hotelben H. heilmannii-szerű + H. felis Matton 4.0 (1 /25) hotelben 3,8 (1/26) hotelben H. felis + H. salomonis Matton 4,0 (1/25) hotelben 0
szignifikáns korreláció jelenléte Helicobacter katalógusa spp. és mindkettő enyhe vagy közepesen súlyos sérülést epithelialis és enyhe vagy közepesen súlyos intraepithelialis lymphocyta infiltráció (1B) a kutya gyomor (p < 0,05). Nem volt statisztikailag szignifikáns összefüggést találtunk a Helicobacter katalógusa fertőzés és a gyomor nyálkahártya sorvadás vagy fibrózis, lamina propria katalógusa limfoplazmacitikus beszűrődés vagy lymphofollicular megnagyobbodás. Nem volt szignifikáns különbség kimutatható kapcsolatban bakteriális kolonizáció sűrűsége a két gyomor régióban (p > 0,05).
Száma Helicobacter katalógusa-pozitív esetek kimutatni a különböző módszerek különbözött szignifikánsan (p < 0,05). Pozitív IHC eredménye nem különbözik szignifikánsan az egymást gyomor régióban (p > 0,05), míg a kapott számok HE, a GM és qPCR jelentősen különbözött a test és a antrum (p < 0,05). Katalógusa Vita katalógusa Ebben a vizsgálatban a magas prevalenciája gastritis volt megfigyelhető (95,7%). Ezek az eredmények összhangban vannak a más tanulmány vizsgálatai előfordulása gyomorhurut, mint egy gyakori jelenség a kutyák [14,31,32]. Ezzel szemben, a gyomor eróziók vagy fekélyek ritkán találhatók ezekben az állatokban.
NHPh fertőzés határoztuk meg négy módszer (HE, MG, IHC és qPCR), és egy prevalenciája 87,0% kutyákban észlelt. Ezek az eredmények összhangban vannak a szakirodalomban, amely dokumentált magas előfordulási NHPh a kutya gyomornyálkahártya [12,19,33-35]. Tanulmányunkban kutya NHPh fertőzés jelentősen kíséri enyhe-közepes intraepiteliális limfociták infiltrációja és enyhe-mérsékelt gyomornyálkahártya sérülése, függetlenül attól, hogy a gyomorban helyen. A világos kapcsolata kutya gastritis és Helicobacter katalógusa fertőzés volt, azonban nem alakítanak ki, amely összhangban van a mások eredményei [11,14,15,34].
Egy korábbi vizsgálatban az aránya, Helicobacter
-pozitív esetek észlelése után HE festés kutya gyomor minták 17,5% [24]. A jelenlegi vizsgálat során, az összes mintát vizsgáltunk két patológusok nagy tapasztalattal kimutatására Helicobacter katalógusa spp.
Élőlények után rutin festés. Lehet, hogy ez is szerepet játszott a magasabb felderítési arány (65,2%) számolt be itt.
Egyetértésben a korábbi vizsgálatokkal, NHPh gyakran megfigyelhető nemcsak a felületes nyálka és a gyomor mirigyek, hanem a sejten belül, citoplazmájában parietális sejtekben [31,33,36] (1C és D). Spirál alakú jelenlévő élőlények az adott sejten belüli elhelyezkedés volt nehéz felismerni, miután és MG festés miatt a citoplazmában granulálás a parietális sejtekben. A mi kezünkben, IHC tűnt, hogy egy nagyon értékes technika azonosítani NHPh belül ezek a sejtek (1D). Összességében IHC-festéssel mutatták a legmagasabb Helicobacter katalógusa-pozitív értéket (82,6%). Ez az eredmény összhangban van azzal egyéb eredmények azt mutatják, hogy a kereskedelmi forgalomban kapható antitesteket H. pylori ellen
hasznosak a kimutatására Helicobacter katalógusa spp. paraffinba ágyazott minták kutya gyomor [24,26,36].
Korábbi vizsgálatok jelentette, hogy nem volt statisztikailag szignifikáns különbség kimutatására Helicobacter katalógusa organizmusok által IHC és PCR technikák (p 0,05) [24]. Chung et al. Katalógusa (2014) számolt be, hogy a PCR-assay magasabb volt érzékenysége és a specificitása, mint a többi módszer [4]. Azonban a mi tanulmány az előfordulási arány a Helicobacter katalógusa spp.
Kapott a qPCR volt a legalacsonyabb (47,8%). Korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a formalin fixálás és paraffin beágyazás akadályozzák PCR analízis [37,38]. Sjödin et al. Katalógusa (2011), szemben a hatékonyságot a DNS amplifikáció friss (n = 28), és paraffinba ágyaztuk (n = 28) a mintákat azonosításához Helicobacte katalógusa R spp.
Különböző szervekben ( macskaféle gyomor, duodenum, a máj és a hasnyálmirigy), és arra a következtetésre jutott, hogy az átlagos értéke a DNS-koncentráció érhető el magasabb volt, amikor nyert friss szövetekből [39]. DNS-elemzés a paraffinba ágyazott szöveti mintákon PCR /qPCR veszélybe kerülhet miatt a DNS-fragmentáció, gátló anyagok, vagy a kettő kombinációja. A formalinos fixálás valóban okozhat a DNS-fragmentáció, valamint részleges megsemmisülése DNS [38,40], és a PCR-reakciók is gátolható formalin maradékot [37]. A negatív hatások a formalin közvetlenül kapcsolódnak időtartama az fixálás [40]. Bár a minták ebben a vizsgálatban résztvevő összes feldolgozott, ugyanabban a laboratóriumban, és így végezni ugyanazt a standard protokollok, időtartama rögzítés között változhat minták miatt változása közötti időintervallum mintavétel és a laboratóriumba érkezéséig.
Különböző molekuláris megközelítések azonosításához NHPh fajok már foglalkoztak [4,14,24,28]. Technikák kimutatásán alapuló vagy szekvenálása 16S vagy 23S rRNS-t kódoló gének azonban nem tesz különbséget a különböző kutya és macska gyomor Helicobacter katalógusa faj, míg a tesztek alapján felderítése vagy szekvenálása a hsp60 gén katalógusa, az ureáz az a és B gének vagy gyrB katalógusa gén azonosítását lehetővé teszik ezek a baktériumok a faj szinten [9].
Tanulmányunkban amplikonokhoz kapott H. heilmannii
konkrét qPCR csak azt mutatta, mintegy 92% -ban homológ H . heilmannii, katalógusa, amely eddig csak tenyésztjük a gyomornyálkahártya macskák. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Molekuláris mechanizmusok gyomornyálkahártya sejtadhézió és injektálása CagA Helicobacter pylori által
• Előfordulása és túlélését nyelőcső- és gyomorrák Angliában 1998 és 2007 között, a populáció-alapú vizsgálat