Case Report Familiaalisilla mahasyövän sekä kordooma esittäminen samassa Family

Case Report Familiaalisilla mahasyövän sekä kordooma Samaan perheeseen
Abstract
syöpien ovat toiseksi yleisin maligniteetti maailmassa ja ne ovat merkittävä taakka kaikissa yhteiskunnissa vaikka esiintyvyys tauti vähenee teollisuusmaissa. Etiologiassa tauti on monimutkainen ja sen uskotaan olevan pääasiassa johtuu ympäristötekijöistä mutta pieni osa tapauksista kirjataan, koska ne liittyvät geneettiset tekijät. Kaksi perinyt muotoja mahasyöpä on tunnistettu, joka liittyy familiaalinen clusterings mahasyövän ja toinen on alaryhmä perheitä, jotka kuuluvat perinnöllinen ei polyposis peräsuolen syöpä (tai Lynch oireyhtymä). Tässä raportissa esitetään pienen ydinperhe, joka on epätavallinen, että on olemassa klusterointi maligniteetin joka sisältää mahasyöpä, peräsuolen syöpä ja kordooma. Geneettinen analyysi ei paljastanut mitään kausaalisiin mutaatio geeneissä, jotka liittyvät HNPCC tai E-kadheriinin. Yhdessä kliinistä kuvaa tämän perheen voi osoittaa, että muut geneettiset tekijät ovat taustalla perheen ryhmittely maligniteetin.
Avainsanat
mahasyöpä HNPCC E-kadheriinin kordooma Johdanto
mahasyövistä edustavat toiseksi yleisin maligniteetti maailmanlaajuisesti vaikka esiintyvyys tauti näyttää vähenevän teollistuneessa maailmassa. Syöpien ovat morfologisesti heterogeenisia kolmentyyppisten; diffuusi mahasyöpä, rauhas (tai suoliston) tyyppi ja sekoitus hajanainen ja suolistosairaus.
syitä mahasyöpä ovat sekä ympäristö- ja geneettisten tai molempia. Suhteellisen äskettäin lopullisen geneettinen syy mahasyöpä (mutaatiot E-kadheriinin geeni) on tunnistettu, ensimmäinen suuri New Zealand maori sukua [1] ja myöhemmin muut mahalaukun perheiden [2]. Potilaat mutaatioita E-kadheriinin geeni on taipumus esiintyä diffuusi sairaus taas mitään geneettiset tekijät ovat sekaantuneet familiaalinen aggregoinneista suoliston mahasyövän.
Vaihtoehtoinen geneettinen syy mahasyövän yhteydessä useita muita epiteelisyövissä on perinnöllinen ei polyposis peräsuolen syöpä (HNPCC). Tämä kokonaisuus on ominaista alkava peräsuolen syövän ja useita muita epiteelin pahanlaatuisten kasvainten kuten kohdun limakalvon syöpä ja mahasyöpä. Geneettisen perustan tämä ehto on erittely DNA mismatch korjaus johtuu mutaatioista geeneissä valvoa tätä prosessia. Tällä hetkellä neljä geenejä on eristetty ja liittynyt HNPCC, hMLH1, hMSH2, hMSH6 ja hPMS2. Sekä hMSH2 ja hMSH6 oleskella kromosomissa 2, hMLH1 on kromosomissa 3 ja hPMS2 on kromosomissa 7 (katsausta varten katso Niessen ym 2004 [3]).
Chordomas ovat harvinaisia ​​hitaasti kasvavia luukasvaimet, joiden uskotaan johtuvan muista notochord jäänteet [3]. Heillä on taipumus esiintyä kallonpohjan ja on suhteellisen hyvänlaatuinen histologinen ulkonäkö. Huolimatta hyvänlaatuinen ulkonäkö chordomas on infiltratiivinen ominaisuuksia, jotka ovat vaikeasti hallittavissa. On hieman voittopuolisesti urokset vaikuttaa kokonaispituudeltaan miesten ja naisten suhde on noin 1,7: 1. Voittopuolisesti miehillä tulee selvemmin, jos potilaalla on sakraali chordomas jossa miesten ja naisten suhde lähestyy 3: 1. Tiedetään vain vähän molekyylitason perusteella chordomas, sillä ei näytä olevan mitään brutto- kromosomipoikkeavuuden tai muita erillisiä erottava piirre. Kaksi geenipaikkojen on tunnistettu. Ensimmäinen osoitus geneettinen perusta kordooma tuli sidoksen tutkimuksista joka paljasti geenin lokukseen kromosomissa 1 [4]. Toinen lokus todettiin pieninä perheiden kytkeytynyt kromosomiin 7q33, joka on paljastanut useita mahdollisia kandidaattigeenejä [5].
Tässä raportissa olemme tunnistaneet pieni perhe, joka on ominaista mahasyöpä ja läsnäoloa of kordooma yhdessä kolme sisarusta ja kaikilla on sortunut maligniteetti.
Potilaat ja menetelmät
suvussa tauti on seuraava: proband esitteli iässä 56 vuotta ja huonosti eriytetty adenokarsinooma umpisuoli ilman läsnäoloa adenomatoottisten polyypit. Tuolloin poiston kasvain oli metastasoitunut kolme imusolmukkeisiin. Potilas havaittiin laajaa etäpesäkkeitä iässä 60 vuotta ja kuoli vuotta myöhemmin. Ainoa muu merkittävä havainto suhteessa tälle potilaalle oli synnynnäinen aplasia vasemman reiden. Perheen historia proband paljasti ruuansulatuskanavan syövän (ks. 1). Kuva 1 suku perheen. St = mahasyöpä; Ch = kordooma; CRC = peräsuolen syöpä. Neliöt edustavat urokset, ympyröitä naaraat
isä proband todettiin mahasyöpä iässä 67 vuotta. Kasvain oli diagnosoitu erilaistumattomaan mucinous karsinooma kanssa sinettisormus soluja, jotka oli tuolloin leikkauksen jo levinnyt maksaan.
Vanhin veli potilaan diagnosoitiin iässä 7 1/2 vuotta pahanlaatuinen kordooma juuressa hänen kallo ja kuoli pian sen jälkeen. Kasvain sijaitsee välillä Clivus ja Pons johtaneessa tyypillisiä neurologisia oireita. Kasvain oli haittasivat näköhermon aiheuttaen vaikean surkastuminen, erityisesti oikealla puolella. Lisäksi oli useita maksametastaaseihin.
Toinen veli oli diagnosoitu adenokarsinooma mahan peräisin cardia. Kasvain oli erilaistumaton mucinous tyyppiä lomassa sinettisormus soluja, samanlainen kuin isä. Tuolloin diagnoosi taudin havaittiin ovat yleistyneet metastaasit nikama, maksassa, lisämunuaisissa ja keuhkoissa.
DHPLC analyysi
koko koodaussekvenssit hMSH2, hMLH1: n ja E-kadheriinin, mukaan lukien introni /eksoni rajoja seulottiin mutaatioita DHPLC analyysi. Epätavallisia konformeerit olivat edelleen arvioitiin suoralla DNA-sekvensoinnilla.
Polymeraasiketjureaktion (PCR) varten DHPLC analyysi suoritettiin käyttäen alukkeita, jotka ovat spesifisiä hMSH2 ja hMLH1: n, kuten on kuvattu aiemmin (Holinski-Feder et al 2001). Reaktio koostui 1,0 uM kutakin aluketta, 1 U Platinum Taq (Gibco-BRL), 2-5 mM MgCl 2 ja 200 μ
M kutakin dNTP: tä.
PCR-monistus saavutetaan alkudenaturaatio 94 ° C: ssa 5 min, jota seurasi 14 sykliä 94 ° C 1 min, 7 ° C kosketuskohta alue 1,5 min ja 72 ° C 2 min, sitten 20 sykliä käyttäen hehkutus lämpötila 0,5 ° C alhaisempi kuin pohjan touchdown alue. Hehkutus vaihe suoritettiin touchdown protokollan 7 ° C välillä, pienenee 0,5 ° C /sykli yli 14 sykliä. Tätä seurasi lopullinen pidennys 72 ° C ° C: ssa 10 min, lopullinen denaturaatiovaiheen 95 ° C: ssa 5 minuutin ajan ja hidas jäähdytys vaiheessa 95 ° C: sta 65 ° C: ssa 30 min edistää heterodupleksi muodostumista. PCR suoritettiin PCR express (Hybaid) väline on varustettu lämmitetty kansi käytön välttämiseksi mineraaliöljyä.
DHPLC-analyysi suoritettiin käyttäen Varian Helix-järjestelmä (Varian Inc., Walnut Creek, CA). PCR-tuotteet (2-5 μ
l) injektoitiin suoraan DNA Eclipse (Hewlett Packard) tai Helix (Varian) ja eluoitiin kolonnista käyttäen yhä asetonitriiligradientilla ja sarake uunin lämpötila sopii kunkin eksonin hMSH2 , hMLH1 ja E-kadheriinin (todelliset lämpötilat käytettävissä pyynnöstä). Heterodupleksit aikana muodostuneet PCR heterotsygootin näytteen havaittiin ylimääräisenä eluoitui ennen homodupleksi huippu. Havaitseminen heterodupleksit tehtiin yksinkertaisempi käyttämällä DHPLC tarkastelun ohjelmiston syötetään Varian. Ennustettu sulamislämpötiloihin kaksijuosteisen DNA tuotteet saatiin käyttämällä DHPLC-MELT ohjelma saatavilla http: //www. Lisäys. Stanford. Edu /sulaa. Html (lisätietoja taulukoissa 1a ja 1b ).
kunkin segmentin negatiivinen kontrolli fragmentti (monistettu DNA, joka on eristetty normaalien terveiden luovuttajien, joilla ei ollut suvussa tauti) ajettiin läpi denaturoinnin kolonnin denaturoimattomissa lämpötilassa 50 ° C. 50 ° C: ssa huippu profiili verrattiin sitten Stanford sulamislämpötila profiilia vastaava fragmentti sekä kolme 1 ° C: n välein kummallakin puolella ennustetun sulamislämpötilan. Osittain denaturoitu olosuhteita perustettiin kun siirtymä retentioaika on vähintään tai yhtä suuri kuin 30 sekuntia yli 1 ° C lisäyksen välillä tehtiin. Optimaalinen sulamislämpötila oli aina otetaan korkeammassa lämpötilassa, alle osittain denaturoivissa olosuhteissa, jotka eivät osoittaneet profiilin hajoamisen.
DNA sekvensointi
Kaikki heterodupleksit sovellettiin DNA sekvensointi määrittää tarkasti geneettinen muutos puoliautomaattisella sekventointiyksikköön ( malli 310, Perkin-Elmer Applied Biosystems Division, Foster City, CA) käyttäen dideoksi. Sekvensointi PCR-tuotteiden suoritettiin käyttäen versiota 1 BigDye dideoksisekvensoimalla Ready Rxn (Perkin-Elmer, Foster City, CA).
Tulokset
perhe on kuvattu kuviossa. 1 täyttää Amsterdam II perusteita, jos muut epiteelin pahanlaatuisten kasvainten voi korvata peräsuolen syöpä. Läsnäolo kaksi mahasyövistä on epätavallinen ja voi olla viittaava familiaalinen mahasyövän vuoksi mutaatioita E-kadheriinin.
Ei ollut tarjolla olevan immunohistokemiallisella tai Mikrosatelliittimarkkerien epävakautta testaus. DNA-näyte oli saatavilla proband joka alistettiin mutaation analyysi. Koska perhe kiinni Amsterdamin II kriteerit aluksi hMSH2 ja hMLH1 mutaation analyysi tehtiin. Mutaatioita tunnistettiin koodaavan sekvenssin joko hMSH2 tai hMLH1 mukaan lukien introni /eksoni-rajat.
Koska kaksi yksilöiden diagnosoitu mahalaukun syöpä lisäksi mutaation näytön tehtiin E-kadheriinin geenin, mutta ei ole haitallista muutoksia havaittu .
keskustelu
epäonnistuminen mutaatioiden tunnistamiseksi hMLH1, hMSH2 tai E-kadheriinin viittaa siihen, että on olemassa todennäköisesti muita geneettisiä tekijöitä taudin tässä perheessä. On kuitenkin mahdollista, että mutaatio oli jäänyt jossakin näistä kolmesta geeneistä lähtien poisto analyysiä ei toteutettu eikä ollut mahdollista tehdä niin ei ollut riittävästi geneettistä materiaalia, jotta näin tapahtuisi. Lisäksi, koska potilaat sortunut niiden tautien useita vuosikymmeniä sitten on epätodennäköistä, että immunohistokemiallisella tai mikrosatelliittien epävakautta testaus saattaa arvioida todennäköisyys tämän perheen kuuluvan kokonaisuus HNPCC. E-kadheriinin oli todennäköinen ehdokas nojalla läsnäolon sinettisormuksella solujen kaksi mahasyöpä.
Jäljellä useita mahdollisuuksia suhteen, mitä on voinut tapahtua tässä pieni perhe. Ensinnäkin, se on edelleen mahdollista, että tämä on todellakin HNPCC perhe ei ainoastaan ​​siksi saattaa olla mutaatioita joko hMLH1 tai hMSH2 mutta myös emme tutkia hMSH6 tai hPMS2. HPMS2 geeni on edelleen todennäköinen ehdokas, koska se on liittynyt peittyvästi periytyviä tapauksia Turcot oireyhtymän [9]. Lisäksi hPMS2 asuu kromosomissa 7 ja sitä ympäröi pseudogeenien, joista osa on ilmaistu vaikkakin paljon alhaisempi kuin villityypin hPMS2. Koska uusi lokuksen kordooma on myös todettu kromosomissa 7 on mahdollista, että tässä perheessä nämä kaksi havainnot ovat yhteydessä toisiinsa. Valitettavasti emme ehkä koskaan saa tietää vastaus tähän, koska ei ole riittävästi jäljellä materiaalia opiskeluoikeutta proband ja kasvaimen otettujen näytteiden muut perheenjäsenet eivät ole enää käytettävissä. Mitä tulee isä proband emme tiedä, jos synnynnäinen aplasia vasemman reiden liittyi taudin tässä perheessä.
Yhteenvetona, tämä perhe on paitsi haaste suhteen tunnistamisen geneettinen taipumus mutta myös, jos perheenjäsenet olivat elossa tänään, geneettisen neuvonnan.

• Mahahuuhtelua akuutissa Orgaaniset Torjunta myrkytys (GLAOP) - satunnaistetussa kontrolloidussa tutkimuksessa useiden vs. yhden mahahuuhtelu valikoimattomissa akuutti orgaaninen fosforiyhdiste torjunt…
• Rintaonteloon tyhjene rei'itetyn prepyloric mahahaava, jossa on tyypin II paraoesophageal tyrä