Fallbericht: Familial Magenkrebs und Chordom in der gleichen Familie

Fallbericht: Familial Magenkrebs und Chordom in der gleichen Familie
Zusammenfassung
Magenkrebs sind die zweithäufigste Krebserkrankung in der Welt und stellen eine große Belastung für alle Gesellschaften, obwohl die Häufigkeit der Krankheit ist in der industrialisierten Welt abnimmt . Die Ätiologie der Krankheit ist komplex und wird angenommen, dass in erster Linie aufgrund von Umweltfaktoren zu sein, aber ein kleiner Teil der Fälle werden als im Zusammenhang mit genetischen Faktoren erfasst. Zwei erblichen Formen von Magenkrebs identifiziert worden, eine, die mit familiärer Clusterungen von Magenkrebs assoziiert ist und der andere eine Untergruppe von Familien zu sein, die nicht kolorektales Karzinom zu erblich gehören (oder Lynch-Syndrom). In diesem Bericht stellen wir eine kleine Kernfamilie, die ungewöhnlich ist, dass es eine Häufung von malignen Erkrankungen ist, die Magenkrebs, Darmkrebs und Chordom umfasst. Die genetische Analyse konnte keine ursächliche Mutation in Genen, die mit HNPCC oder in E-Cadherin assoziiert zu offenbaren. Zusammen können das klinische Bild in dieser Familie zeigen, dass andere genetische Faktoren für diese Familie Häufung von malignen Erkrankungen sind.
Schlüsselwörter Magenkrebs HNPCC E-Cadherin Chordom Einführung
Magenkrebs die zweithäufigste Krebserkrankung weltweit vertreten, obwohl die Häufigkeit der Krankheit scheint in der industrialisierten Welt zu verringern. Magenkrebs sind morphologisch heterogen mit drei Typen; Magenkrebs diffundieren, ein Drüsen (oder Darm) Typ und eine Mischung aus diffuser und Darmerkrankungen.
Die Ursachen von Magenkrebs sind sowohl ökologische als auch genetische oder eine Mischung aus beidem. Vor relativ kurzer Zeit eine definitive genetische Ursache für Magenkrebs (Mutationen im E-Cadherin-Gen) identifiziert wurde, zunächst in einem großen New Zealand Maori verwandte [1] und anschließend in anderen Magen-Familien [2]. Die Patienten Mutationen im E-Cadherin-Gen beherbergen, sind in der Regel mit einer diffusen Erkrankung zu präsentieren, während keine genetischen Faktoren bei familiärer Aggregationen der intestinalen Magenkrebs.
Eine alternative genetische Ursache für Magenkrebs in Verbindung mit einer Vielzahl von anderen epithelialen Tumoren in Verbindung gebracht ist hereditären nicht kolorektales Karzinom (HNPCC). Diese Einheit wird durch früh einsetzende Darmkrebs und einer Vielzahl von anderen epithelialen malignen Erkrankungen einschließlich Endometriumkarzinom und Magenkrebs aus. Die genetische Basis dieser Bedingung ist eine Aufschlüsselung der Reparatur DNA-Mismatch aufgrund von Mutationen in Genen, diesen Prozess zu steuern. Derzeit vier Gene wurden mit HNPCC, hMLH1, hMSH2, hMSH6 und hPMS2 isoliert und verbunden. Sowohl hMSH2 und hMSH6 befinden sich auf Chromosom 2, ist hMLH1 auf Chromosom 3 und hPMS2 ist auf dem Chromosom 7 (für eine Übersicht siehe Niessen et al 2004 [3]). Chordome seltene Tumore langsam wachsenden Knochen sind
, die entstehen aus geglaubt werden, notochord Reste [3]. Sie neigen dazu, einen relativ gutartigen histologischen Erscheinungsbild an der Basis des Schädels und müssen auftreten. Trotz ihrer gutartigen Aussehen chordomas haben infiltrativen Eigenschaften, die schwer zu kontrollieren sind. Es ist eine leichte Übergewicht bei Männern mit einer Gesamt Verhältnis Männer zu Frauen von etwa 1,7 betroffen zu sein: 1. Das Übergewicht der Männchen wird auffallender bei Patienten mit sakralen chordomas, wo das Verhältnis Männer zu Frauen nähert sich 3: 1. Wenig ist über die molekulare Basis von chordomas bekannt ist, wie es scheint keine grobe Chromosomenanomalie oder eine andere eindeutige Unterscheidungsmerkmal zu sein. Zwei genetische Loci wurden identifiziert. Der erste Hinweis auf eine genetische Grundlage für Chordom kam von Kopplungsstudien, die einen Genort auf Chromosom 1 [4] offenbart. Ein zweiter Locus wurde in einer Kleinserie von Familien auf Chromosom 7q33, verknüpft identifiziert, die eine Reihe von möglichen Kandidatengenen [5] offenbart hat. Identifiziert
In diesem Bericht wir eine kleine Familie, die von Magenkrebs und die Gegenwart auszeichnet . von Chordom in einem der drei Geschwister von denen alle zur Malignität erlegen
Patienten und Methoden
die Familiengeschichte der Krankheit ist wie folgt: die Probanden im Alter von 56 Jahren mit einem schlecht differenzierten Adenokarzinom des Blinddarms vorgestellt ohne die Anwesenheit von adenomatösen Polypen. Zum Zeitpunkt der Exzision war der Tumor auf drei Lymphknoten metastasierte. Der Patient wurde gefunden im Alter von 60 Jahren weit verbreitet Metastasen zu haben und starb ein Jahr später. Die einzige andere bemerkenswerte Befund in Bezug auf diesen Patienten war die angeborene Aplasie des linken Oberschenkels. Die Familiengeschichte der Probanden zeigten eine Geschichte von Magen-Darm-Krebs (siehe Abb. 1). Abbildung 1 Stamm der Familie. St = Magenkrebs; Ch = Chordom; CRC = Darmkrebs. Quadrate stellen Männer, Kreise Frauen
Der Vater des Probanden mit Magenkrebs im Alter von 67 Jahren diagnostiziert wurde. Der Tumor wurde als undifferenzierte muzinöse Karzinom mit Siegelring-Zellen diagnostiziert, die bereits auf die Leber ausgebreitet zum Zeitpunkt der Operation hatte. Der älteste Bruder des Patienten
wurde mit einem bösartigen Chordom von 7 1/2 Jahren im Alter diagnostiziert an der Basis seines Schädels und starb bald darauf. Der Tumor wurde zwischen dem clivus und Pons liegt, die zu typischen neurologischen Anzeichen gab. Der Tumor hatte auf den Sehnerv aufgetroffen in schweren Atrophie führt, vor allem auf der rechten Seite. Darüber hinaus gab es mehrere Lebermetastasen.
Der zweite Bruder wurde mit einem Adenokarzinom des Magens diagnostiziert im Cardia Ursprung. Der Tumor war ein undifferenziertes muzinöse Typ durchsetzt mit Siegelring-Zellen, ähnlich wie die des Vaters. Zum Zeitpunkt der Diagnose wurde die Krankheit haben sich weit verbreitet mit Metastasen in den Wirbel, der Leber, Nebennieren und Lungen.
DHPLC Analyse
die gesamte codierende Sequenzen von hMSH2, hMLH1 und E-Cadherin, einschließlich der Intron /Exon gefunden Grenzen wurden für Mutationen von DHPLC Analyse gescreent. Ungewöhnliche Konformeren wurden durch direkte DNA-Sequenzierung überprüft.
Polymerase-Kettenreaktion (PCR) Amplifikation für DHPLC-Analyse wurde durchgeführt unter Verwendung von Primern, die spezifisch für hMSH2 und hMLH1 wie zuvor beschrieben (Holinski-Feder et al 2001). Die Reaktion bestand aus 1,0 uM von jedem Primer, 1 U Platinum Taq (Gibco-BRL), 2-5 mM MgCl 2 und 200 μ
M jedes dNTP.
PCR-Amplifikation durch eine anfängliche Denaturierung erreicht wurde 94 ° C für 5 min, gefolgt von 14 Zyklen von 94 ° C für 1 min, 7 ° C Aufsetzen Bereich für 1,5 min und 72 ° C für 2 min, dann 20 Zyklen unter Verwendung einer Annealing-Temperatur 0,5 ° C niedriger als der Boden des Aufsetzen Bereich. Der Temperschritt wurde als Aufsetzen Protokoll mit einem 7 ° C-Bereich durchgeführt wird, 0,5 ° C /Zyklus über 14 Zyklen abnimmt. Dies wurde für 10 min bei 72 ° C mit einem abschließenden Verlängerungsschritt folgt, einer abschließenden Denaturierungsschritt bei 95 ° C für 5 min und einem langsamen Glühschritt von 95 ° C bis 65 ° C über 30 min Heteroduplexbildung zu fördern. Die PCR wurde auf einem PCR-Express (Hybaid) Instrument durchgeführt mit einem beheizten Deckel ausgestattet, um die Verwendung von Mineralöl zu vermeiden.
DHPLC Analyse wurde unter Verwendung eines Varian Helix-System (Varian Inc., Walnut Creek, CA). PCR-Produkte (2-5 μ
l) wurden direkt in eine DNA Eklipse (Hewlett Packard) oder Helix (Varian) -Säule und eluiert von der Säule mit einem steigenden Acetonitrilgradienten und einen Säulenofen geeignete Temperatur für jedes Exon von hMSH2 injizierten , hMLH1 und E-Cadherin (Ist-Temperaturen auf Anfrage erhältlich). Heteroduplexe während PCR einer heterozygote Probe gebildet wurden, als zusätzlicher Peak eluierenden vor der Homoduplex peak detektiert. Der Nachweis von Heteroduplexen wurde mit der Verwendung von DHPLC Bewertung Software von Varian geliefert einfacher gemacht. Die vorhergesagten Temperaturen der doppelsträngigen DNA-Produkte Schmelzen wurden unter Verwendung des DHPLC-MELT-Programm zur Verfügung unter http:... //Www Insertion stanford edu /schmelzen html (für Details Tabellen 1a und 1b zu sehen. ). Für jedes Segment
ein negatives Kontrollfragment (von DNA verstärkt von einem normalen gesunden Spender isoliert, die keine Familiengeschichte der Krankheit hatte) wurde bei der nicht-denaturierenden Temperatur von 50 ° C durch die Denaturierung Säule laufen. Die 50 ° C Peakprofil wurde dann auf die Schmelztemperaturprofil des jeweiligen Fragments Stanford verglichen sowie drei 1 ° C-Schritten auf beiden Seiten der vorhergesagte Schmelztemperatur. Teilweise wurden denaturiert Bedingungen in einer 1 ° C-Inkrement Bereich durchgeführt wurde, wenn eine Verschiebung der Retentionszeit von mindestens oder gleich 30 Sekunden hergestellt. Die optimale Schmelztemperatur wurde immer als die höhere Temperatur genommen, unter teilweise denaturierenden Bedingungen, die nicht Profil Abbau zeigten.
DNA-Sequenzierung
Alle Heteroduplices zu DNA-Sequenzierung unterworfen waren, die genaue genetische Veränderung auf automatisierter Sequenzierungseinheit zu bestimmen ( Modell 310, Perkin-Elmer Applied Biosystems Division, Foster City, CA) unter Verwendung von Didesoxy. Die Sequenzierung der PCR-Produkte wurde mit der Version 1 BigDye Didesoxysequenzieren Bereit Rxn Kit (Perkin-Elmer, Foster City, CA) durchgeführt.
Ergebnisse

• Magenspülung in Akute Organophosphorus Vergiftungen durch Pestizide (GLAOP) - eine randomisierte kontrollierte Studie von mehreren gegen einzelne Magenspülung in nicht ausgewählten akuten Organopho…
• Intrathorakalen Drainage eines perforierten präpylorischen Magengeschwür mit einem Typ II paraoesophageal hernia