EINGEFAHREN ARTIKEL: Gemeinsame Detektion von ERCC1, TUBB3 und TYMS Führung Auswahl von Docetaxel, 5-Fluorouracil und Cisplatin (DDP) individuelle Chemotherapie bei fortgeschrittenem Magenkrebs-Patienten

EINGEFAHREN ARTIKEL: Gemeinsame Nachweis von ERCC1
, TUBB3
und TYMS
Führung Auswahl von Docetaxel, 5-Fluorouracil und Cisplatin (DDP) individuelle Chemotherapie bei fortgeschrittenem Magenkrebs-Patienten
Zusammenfassung
Hintergrund
Um die Führung Auswahl von Docetaxel (D), Cisplatin (DDP) (C) und 5-Fluorouracil (5-FU) (F) als einzelne Chemotherapien über gemeinsame Detektion von ERCC1
, TUBB3
untersuchen und Gene bei Patienten mit fortgeschrittenem Magenkrebs
TYMS (AGC).
wurden analysiert Methode
Klinische Daten von 120 Patienten mit AGC, die in unserer Klinik zwischen Mai 2009 und Mai 2012 eingeschrieben. Diese Patienten wurden randomisiert Versuchs- und Kontrollgruppen zugeordnet. Die mRNA-Expression von ERCC1
, TUBB3
und TYMS
wurde durch DNA-Chip-Technologie in der Versuchsgruppe gemessen. Verschiedene Chemotherapien wurden nach den mRNA-Expressionsniveaus der drei Gene verabreicht, während DCF Chemotherapie direkt an der Kontrollgruppe aufgebracht. Korrelation zwischen der mRNA-Spiegel "drei Gene, Wirkungsgrad, die mediane Zeit bis zur Progression (MTP), mediane Überlebenszeit (MST) und Nebenwirkungen bewertet.
Ergebnis einschränken Als Ergebnis gab es eine signifikante Korrelation zwischen ERCC1
und TUBB3
mRNA-Expression (P
= 0,005), aber keine offensichtliche Korrelation zwischen TUBB3
und TYMS
oder ERCC1
und TYMS
. Es gab auch keinen signifikanten Unterschied in der Effizienz von Chemotherapie (50% versus 55%; P
= 0,357) und dem MTP (10 Monate gegenüber 7 Monate, P
= 0,091) zwischen den beiden Gruppen. Allerdings gab es offensichtliche Bedeutung in der MST (13,7 Monate gegenüber 11,6 Monate; P
= 0,004). Darüber hinaus bot die experimentelle Gruppe uns mit einer effektiveren Weg zur Bekämpfung von unerwünschten Reaktionen auf die Chemotherapie.
Fazit
Kombinationstherapie von D, C und F in AGC-Patienten nach ihrer ERCC1
, TUBB3
kann, und TYMS
mRNA Expressionsniveau Nebenwirkungen reduzieren und verbessern MST.
Schlüsselwörter Magenkrebs ERCC1 TUBB3 TYMS Chemotherapie 1 Hintergrund
Magenkrebs, die mit der zweithöchsten Sterblichkeitsrate als Krebs zählt, Gesamt bösartiger Tumor ist die vierthäufigste [1]. Die Inzidenz und Mortalität von Magenkrebs ist hoch in China, vor allem in der Provinz Qinghai. Allerdings sind die meisten neu diagnostizierten Patienten neigen dazu, in den späten Stadien zu sein [2] - [4]. Derzeit ist eine systemische Chemotherapie die Hauptbehandlungsoption für diese Patienten [5] - [7]. Allerdings ist die Wirksamkeit der Chemotherapie bei fortgeschrittenem Magenkrebs (AGC) ist weniger als 50%, und diese Patienten haben eine mediane Überlebenszeit (MST) von sechs bis neun Monate, selten ein Jahr betragen [8]. Obwohl viele Chemotherapien in randomisierten Studien untersucht worden sind, gibt es keinen internationalen Standard für Magenkrebs Behandlung [5], [9]. Frühere Berichte haben, dass die Therapie mit Docetaxel und Cisplatin (DPP) und Fluorouracil (5-FU) verbessert das Überleben von Patienten mit Krebs im fortgeschrittenen Stadium gezeigt, aber die klinische Anwendung wurde aufgrund der Toxizität begrenzt [10].
Die Entwicklung der Humangenomforschung , Pharmakogenomik und Tumor Molekularbiologie zeigt eine einzigartige Genkarte [11]. Die genetischen Unterschiede in Bezug auf Arzneimittelempfindlichkeit und Resistenz in Patienten durch Nachweis genetischer Veränderungen bei Patienten, die Pharmakogenomik [12] gefunden wurden. Anschließend wird die Auswahl geeigneter chemotherapeutischen Medikamenten profitiert werden, was zu Wirksamkeit Verbesserung, Nebenwirkungen zu reduzieren und unwirksame Behandlung vermieden werden. Chemotherapeutische Toleranz und Medikamentenresistenz sind die Hauptursachen für Chemotherapie Versagen bei Magenkrebs [13].
Eine Reihe von drogenbedingten genetischen Faktoren zählen 5-FU Stoffwechsel-assoziierte Gene (zum Beispiel Thymidylat-Synthase (TYMS
) , deoxythymidylate kinase (DTYMK
)) [14], Taxol-verwandten Gene (Klasse III β-Tubulin (TUBB3
)) [15] und Platin-Genen (beispielsweise Exzisionsreparatur Quer Komplementationsgruppe (ERCC1
) und Brustkrebs 1, früh einsetzende (BRCA1
)) [16]. ERCC1
Gruppe beteiligt sich an Medikamentenresistenz in der Antwort auf Platin-basierten Chemotherapie [17]. Die mRNA-Expression Ebene hat eine negative Korrelation mit einer platinbasierten gezeigt Krebs-Chemotherapie und das Überleben [18]. Die Empfindlichkeit gegenüber Platin-basierten Chemotherapie wurde bei Patienten mit niedrigen ERCC1
Expression beobachtet, während der Widerstand hat, in dessen mit hohen Expressionsniveau [19], [20] festgestellt worden. Die Patienten mit Tumoren mit hoher TUBB3
mRNA-Expression vorhanden mit schlechteren Behandlungsergebnissen mit kürzeren MST auf Chemotherapie mit anti-Mikrotubuli Drogen und umgekehrt
[21], [22]. TYMS
codiert den geschwindigkeitsbegrenzenden Enzym Thymidylat-Synthase (TS), die für Pyrimidin-Nukleotid-Synthese und das Tumorwachstum verantwortlich ist [23]. TS ist auch das Zielenzym für 5-FU seine zytotoxische Wirkung [24] ausübt. Die Tumorpatienten mit niedrigen TYMS
mRNA-Spiegel zeigten eine bessere Reaktion mit mehr MST auf Fluor-basierte Chemotherapie. Durch Meta-Analyse, Hu et al
. [25] haben darauf hingewiesen, dass TYMS
eine der nützlichen prädiktive und prognostische genetische Faktoren.
Tumor Arzneimittel-Resistenz wird durch ein komplexes Netz von Gen-Netzwerken gesteuert. Es wurde beobachtet, dass es offensichtliche Einschränkungen ein einzelnes Zielgen testen. Prädikation der klinischen Wirksamkeit von Medikamenten für die Patienten durch Erfassen der Expressionsmuster eines einzelnen Gens oder Marker [26] erreicht werden. Daher ist es wichtig, Arzneimittel für Patienten mittels Screening Zielgene zu detektieren. . Mit der Entwicklung der individualisierten Behandlung und der molekularen Erkennung, ist es nun möglich, für die parallele Bestimmung von Zielgenen
In den letzten Jahren haben einige Studien durchgeführt worden, Biomarker zu identifizieren, zusammen mit klinischen Ergebnissen als die individuelle Chemotherapie für AGC; Dies kann die Wirksamkeit der Behandlung und vermeiden unnötige Nebenwirkungen zu verbessern. Allerdings haben nur wenige Studien die Effizienz der einzelnen Chemotherapie für AGC, die durch die mRNA Expression von Genen Erfassung der Auswahl bestimmter Drogen zu führen. Um weitere Einblicke in einzelne Chemotherapie für AGC erläutern wir die Führung Auswahl von Docetaxel (D) untersucht, DDP (C) und 5-FU (F) als individuelle Chemotherapie über gemeinsame Detektion von ERCC1
, TUBB3
, und TYMS
Gene. Die Ergebnisse dieser Untersuchung könnte zu führen Therapie für die Chemotherapie Auswahl bei Patienten mit AGC beitragen.
2 Methoden 2.1 Patientenauswahl
Patienten mit AGC nach Histopathologie von der Abteilung für Tumor ausgewählt wurden, Innere Medizin Affiliated Hospital Qinghai-Universität zwischen Mai 2009 und Mai 2012 Einhundertzwanzig zwanzig~~POS=HEADCOMP Patienten im Alter von 21 bis 70 Jahre alt (28 Patienten in der ≤ 35-jährige Gruppe, 92 Patienten in der 36- bis 70-jährige Altersgruppe; Median Alter war 59 Jahre alt), die 85 Männer und 35 Frauen, wurden für weitere Untersuchungen ausgewählt. Die Ausgangs klinischen Charakteristika sind in Tabelle 1 basierend auf American Joint Committee on Cancer (AJCC) TNM (2010) [27] gezeigt. Die Einschlusskriterien waren wie folgt: Patienten mit AGC eine messbare Primärläsion präsentiert, Durchmesser ≥ 20 mm, Röntgen-Thorax zeigt ≥ 20 mm, Magnetresonanztomographie (MRT) (3,0 T) mit einer ≥ 10 mm oder Computertomographie (CT) (256 -slice) zeigte, ≥ 10 mm; Überleben Schätzungen der Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) ≤ 2, die eine mediane Überlebenszeit von mehr als 3 Monaten; Patienten mit normalen peripheren Blutbild, ohne größere Organschäden, normales EKG, keine nicht heilenden Wunden. Patientenbeteiligung war freiwillig und erforderlich informiert unterzeichnet consent.Table geschrieben 1 Baseline klinischen Eigenschaften der beiden fortgeschrittenem Magenkrebs Patientengruppen vor der Chemotherapie
Artikel

Anzahl der Patienten
Versuchsgruppe

Kontrollgruppe
P
Geschlecht
120
60
60
männlich
85
42
43

1 Frauen 35
18
17
Alter
≤ 35
28
13
15
0.829
36-70

47
45
Phase
III C
42
22
20
0.848
IV
78
38
40
Tumor Lage
28
proximale Magen
15
13 seite 1 von 40
18
22
Distal Magen
Magenkörper
52
27
25
ECOG Score
von 0 bis 1
46
24
22
0.851
2 74
36
38
Pathologische Typ
gut differenziert
16
7
9
0.8
Mäßig
28
15
13
differenziert Unzureichend
76 differenziert
38
38
Patientenausschlusskriterien waren wie folgt: Schwangerschaft, Stillen und weiblichen Patienten im gebärfähigen Alter nicht Empfängnisverhütung; unkontrollierte akute Infektion; Vereiterung, chronische Wundinfektion und verzögerte Wundheilung; Patienten mit schweren Herzkrankheit; neurologische Erkrankung und psychischen Erkrankungen; undifferenziertes Karzinom und Plattenepithelkarzinom, Die Ausgangskriterien waren wie folgt:. Fälle von schweren arzneimittelbedingten Toxizität; Unfähigkeit, Nebenwirkungen zu tolerieren; Patienten aus der Studie abgezogen wird; . Der experimentellen Gruppe und der Kontrollgruppe: Patienten, die Forscher glauben, zurückgezogen werden sollte die teilnehmenden Patienten mit AGC in unserer Studie in zwei Gruppen randomisiert wurden
. Die mRNA-Expression von ERCC1
, TUBB3
und TYMS und Videos DNA-Chip-Technologie in der Versuchsgruppe gemessen. Dann wurde die experimentelle Gruppe in vier Untergruppen unterteilt nach der mRNA-Expression der drei Gene: niedrige Expression eines einzelnen Gens Untergruppe, niedrige Expression von Doppel Gen Subgruppe, niedrige Expression von Triple-Gen-Untergruppe, und nicht geringe Expression Untergruppe von triple-Gen.
2.2 Genexpression Erkennung
Technologie DNA-Chip verwendet wurde, um die Expressionsmuster von Genen auf der Hybridisierung von markierten RNA-Sonden [28] auf Basis zu untersuchen. Um die mRNA-Spiegel von ERCC1
, TUBB3
und TYMS
im Magenkrebsgewebe aufzuklären, wurde die DNA-Chip-Technologie, wie beschrieben eingesetzt von Liu et al
. [29]. Zunächst wurde die Gesamt-RNA aus Magenkarzinom in Formalin fixierten Paraffin eingebettetem Gewebe freigesetzt. Die gezielte mRNA-Sonde wurde an die Mikrokügelchen gebunden. Ziel und Signalverstärkung wurde dann durch Hybridisierungsreaktion durchgeführt. Schließlich wurden die verarbeiteten mRNA-Sonde in Kombination mit Streptavidin-Phycoerythrin (SA-PE) und von einem Luminex 100 Durchflusszytometer (Luminex Corp., Austin, TX, USA) analysiert. p2-Mikroglobulin, Transferrin-Rezeptor und TATA-Box bindende Protein wurden als Kontrollen für den Haushalt Genexpression verwendet. Die mittlere Fluoreszenzintensität (MFI) -Werte der Hintergrund wurden aus den MFI-Werte der Probe abgezogen, um die Netto MFI zu bestimmen, die die relativen mRNA Ausdrücke ERCC1
, TUBB3
und TYMS
darstellt.
Um diese drei Genexpressionsmuster bei Patienten über die gesamte Verteilung abschätzen zu können, wurde das Quartil-Methode verwendet. Bei diesem Verfahren bezeichnet einen Prozentsatz von weniger als 37,5% niedriger Ausdruck; von 37,5% auf 62,5% der mittleren Ebene Ausdruck bezeichnet, während mehr als 62,5% höhere Expression bezeichnet. 2.3 Chemotherapien
Die Chemotherapie, die D, C und F zu niedrig (oder der mittleren Ebene) verabreicht wurde
Ausdruck von ERCC1
, TUBB3
und TYMS
Patienten jeweils in der Experimentalgruppe. D, C und F Kombinations-Chemotherapie wurde für vierzehn Fällen (niedrig (oder der mittleren Ebene) Expression von ERCC1
, TUBB3
und TUBB3
) verwendet wird; in paarweisen Art und Weise, D plus C wurde in siebzehn Fällen (niedrig (oder der mittleren Ebene) Expression von ERCC1
und TUBB3
) verwaltet; D plus F wurde in zehn Fällen (niedrig (oder der mittleren Ebene) Expression von TUBB3
und TYMS
) verwaltet; C mit F-Therapie kombiniert wurde für acht Fälle (niedrig (oder der mittleren Ebene) Expression von ERCC1
und TYMS
) verwendet wird; isoliert D, C und F wurden auf sechs, da drei und zwei Fälle beobachtet. Die Dosen von D, C, und F in den Chemotherapien waren 75 mg /m 2, 75 mg /m 2 und 750 mg /m 2. Die Kontrollgruppe Patienten wurden die Kombinationschemotherapie von D, C, und F (bei gleichen Dosierungen wie die Versuchsgruppen) gegeben. Die Wirksamkeit wurde für zwei Perioden von 21 Tagen getestet.
2.4 Bewertung der Wirksamkeit und Indikator bei Patienten
Kurzfristige klinische Wirkungen bei Patienten mit soliden Tumoren wurden in vollständige Antwort klassifiziert (CR), ein partielles Ansprechen (PR), eine stabile Erkrankung und progressive Krankheit (PD) nach Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST) 1.1. CR und PR stellen den effektiven Einfluss auf die Patienten, während PD die unwirksame Auswirkungen auf die Patienten darstellt. Nebenwirkungen wurden in Klassen 0 bis IV eingeteilt basierend auf National Cancer Institute Common Toxicity Criteria, Version 3.0 (NCI-CTC 3.0). Die Indizes für die Patienten "Überleben im Zusammenhang wurden als Zeit identifiziert bis zur Progression und Gesamtüberlebenszeit. Patienten-Follow-up war einmal alle zwei Monate über Telefongespräche nach Beendigung der Behandlung bis zum Tod.
2.5 Statistische Verfahren
Daten analysiert wurden mit SPSS-Software Version 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Die χ 2 und des exakten Fisher-Tests wurden für Zähldaten durchgeführt. Exakte Berechnung der R × C-Tabelle verwendet Monte Carlo. Der Rangkorrelationstest wurde dann berechnet, um die Korrelation zwischen den Gruppen zu offenbaren. Die Kaplan-Meier-Analyse zur Verfügung gestellt Schätzungen Überleben und die Log-Rank-Test wurde verwendet, Überlebenskurven für Patienten zwischen den Gruppen zu vergleichen. Cox-Regressionsmodell Analyse von Faktoren, die möglicherweise auf das Überleben im Zusammenhang wurde verwendet, um die unabhängigen Faktoren zu identifizieren, die signifikant das Überleben beeinflussen können. Ein zweiseitiger Test (α = 0,05) wurde für alle statistischen Tests durchgeführt.
3 Ergebnisse

• [18F] Fluorodeoxyglucose Akkumulation als biologische Marker von hypoxischen Status aber nicht Transportfähigkeit im Magen cancer
• Verordnung des Aktin-Zytoskelett in Helicobacter pylori-induzierten Migration und invasive Wachstum von Magenepithelzellen