Høj ekspression af DEK forudsiger dårlig prognose af gastrisk adenocarcinoma

høj ekspression af DEK forudsiger dårlig prognose af gastrisk adenocarcinom
Abstract
Baggrund
DEK, som onkoprotein, spiller en vigtig rolle i cancerudvikling og progression. Denne undersøgelse havde til formål at undersøge den klinisk-patologisk betydning af DEK overekspression i patienter med mavekræft.
Materialer og metoder
udtryk for DEK protein blev evalueret ved immunhistokemiske (IHC) farvning af 172 gastriske prøver kræft med komplet klinisk-patologiske træk, og sammenhængen mellem DEK udtryk og klinisk-patologiske træk blev undersøgt. Overlevelsesrater blev også beregnet ved hjælp af Kaplan-Meier-metoden i mavecancerpatienter med komplette overlevelsesdata.
Resultater
DEK protein viste en strengt nuklear farvning mønster i gastrisk kræft med IHC og immunofluorescens. Den stærkt positiv sats på DEK protein var 60,5% (104/172) i gastrisk kræft, hvilket var betydeligt højere end i enten gastrisk dysplasi (19,4%, 7/36), eller tilstødende normal slimhinde (0%, 0/27). DEK udtryk i mavekræft korreleret til tumorstørrelse, differentiering, klinisk stadie, sygdomsfri overlevelse, og den samlede overlevelse. Yderligere analyse viste, at patienter med tidlige fase mavekræft og høj DEK udtryk havde kortere sygdomsfri overlevelse og samlet overlevelse varighed end dem med lav DEK udtryk.
Konklusion
Højt DEK proteinekspression forudsiger dårlig prognose for patienter med gastrisk cancer. DEK udtryk kan potentielt bruges som en uafhængig effektiv biomarkør for prognostisk vurdering af gastrisk kræft
virtuelle slides
virtuelle slide (er) for denne artikel kan findes her:. Http:. //Www diagnosticpathol logi. diagnomx. eu /vs /5050145571193097
Nøgleord
gastrisk adenocarcinom DEK Immunhistokemi Survival analyse Introduktion
mavekræft er en af ​​de mest almindelige kræftformer i verden, og det er den anden mest almindelige årsag af kræft død [1]. I de senere år har udviklingen af ​​molekylære medicin og traditionel kinesisk medicin rettet mod onkogene veje førte til en forbedring af resultatet behandling gastrisk cancer [2]. Desuden blev de biomarkører for prognostisk evaluering af patienter med gastrisk cancere også undersøgt bredt. For eksempel, Gao et al.
Rapporteret, at ekspressionen af ​​E-cadherin og claudin var korreleret med lymfatisk metastase [3]. Geng et al.
Viste, at udtryk for Pgp, GST-π og Topo II var relateret med mavekræft kemosensitivitet [4]. Endvidere
Canzonieri et al. Også demonstreret, at endokrine differentiering, modent exokrine og endokrine gastriske fænotyper forbundet med dårlig [5] prognose. Imidlertid har prognosen for mavecancer ikke signifikant forbedret. Derfor er opdagelsen af ​​nye biomarkører for mavekræft kræves for tidlig diagnose og til at bidrage til at give nye terapeutiske mål
Humant DEK blev oprindeligt påvist at være mål for en tilbagevendende t. (6; 9) translokation, der genererer fusion med CAN i en undergruppe af akut myeloid leukæmi (AML) patienter [6]. Det blev identificeret som en oncoprotein og har en molekylvægt på 42 kDa stort. DEK spiller en vigtig rolle i celle-processer og deltager i en række cellulære metaboliske funktioner, såsom global heterochromatin integritet [7], transkriptionel kontrol [8], mRNA splejsning [9], DNA-replikation [10], DNA beskadigelse reparation og modtagelighed [11].
roller arkitektur proteiner af kromatin i en række cellulære mekanismer dysreguleret i tumorceller, såsom ændret ekspressionsniveauer og ændret affinitet til DNA, og resultere i belægning af promotorer og forstærkere af andre gener [12 ]. For eksempel, Sanchez-Carbayo et al.
Rapporterede, at DEK differentielt blev udtrykt mellem den tidlige fase og invasive klynger af blærekræft ved hjælp cDNA microarrays [13]. Casas et al.
Detekteret DEK ekspressionsniveauer i 41 voksne patienter med AML ved brug af kvantitativ real-time PCR, og observeret, at DEK blev overudtrykt i 98% af tilfældene [14]. Vi har også tidligere fundet, at DEK var signifikant overudtrykt i tyktarms- og endetarmskræft og at udtrykket korreleret til fattige prognostiske faktorer med tarmkræft [15]. Disse resultater antyder, ændret ekspression af DEK er forbundet med adskillige humane maligniteter. Men forholdet mellem DEK ekspression og gastrisk cancer, er ikke klart.
I den foreliggende undersøgelse fandt vi, at ekspressionen af ​​DEK blev opreguleret i gastrisk cancer væv, og DEK kan være en uafhængig biomarkør til forudsigelse af gastrisk cancer prognose , hvilket tyder på, at DEK spiller en vigtig rolle i udviklingen og progressionen af ​​mavekræft.
Materialer og metoder
etik erklæring
Denne undersøgelse overholdt principperne i Helsinki-deklarationen og blev godkendt af de menneskelige etik og forskning etiske komitéer i Yanbian University Medical College i Kina. Patienterne blev informeret om, at deres resekterede prøver blev opbevaret ved vores hospital og potentielt anvendes til forskningsformål, og at deres privatliv ville blive opretholdt. Opfølgende overlevelsesdata blev indsamlet retrospektivt via medicinsk-rekord analyser.
Kliniske prøver
Rutinemæssigt diagnosticerede primære mavekræft væv (172 tilfælde) med kliniske funktioner blev indsamlet fra patienter, som gennemgik kirurgi mellem februar 2002 og maj 2004 af Shanghai overgå Biotech Co. Ltd. (overgå Biotech) og tumorvæv Bank of Yanbian University Medical College. Af de 172 sager blev 67 godt differentieret, 82 var moderat differentieret, og 23 var dårligt differentierede kræftformer. En patologisk stadium for hver tumor blev tildelt ved hjælp af Union for International Cancer Control (7. udgave) kriterier og World Health Organization klassifikationer (Patologi og Genetik Tumorer i fordøjelsessystemet) [16]. Total prøver bestod 92 sager med stadie 0-II og 80 tilfælde med stadium III-IV. Før operationen havde ingen patienter modtaget kemoterapi eller havde fjernmetastaser. Opfølgningen tidspunktet for den primære gastrisk kræft kohorte var i intervallet 5-8 år. I december 2012 havde 98 patienter døde og 64 patienter forblev i live.
Immunofluorescens (IF) farvning for DEK i MKN-1 mavekræft cellelinje
MKN-1 mavekræft celler dyrket på dækglas blev fikseret med 4% paraformaldehyd i PBS i 10 minutter ved stuetemperatur og permeabiliseret med 0,5% Triton X-100 i 10 min. Derefter vasket igen med PBS og blokering blev udført med 3% Albumin Bovine V (A8020, Solarbio, Beijing, Kina) i en time ved stuetemperatur (RT). Primære antistoffer mod DEK (1:50; BD Biosciences, USA) og β-tubulin (1:50; Santa Cruz Biotechnology, USA) blev inkuberet med celler ved 4 ° C natten over. Efter flere vaske blev celler inkuberet med Alexa Fluor® 488 gede-anti-kanin IgG (H + C) (A11008, 1: 1000, Invitrogen, USA) og Alexa Fluor® 568 ged anti-mus IgG (H + L) (A11004 , 1: 1000, Invitrogen, USA) i 1 time. Efterfølgende blev cellerne vasket igen med PBS og modfarvet med 2- (4-amidinophenyl) -6-indolecarbamidine dihydrochlorid (C1006, Beyotime, Kina). Dækglas blev monteret med antifade Mounting Medium (P0126, Beyotime, Kina) [17]. Endelig blev immunofluorescens signaler visualiseres og registreres af Leica SP5II konfokalt mikroskop.
Immunhistokemi (IHC) for DEK i paraffinindlejrede væv
Som tidligere beskrevet [15], en Dako LSAB kit (Dako A /S, Glostrup , Danmark) blev anvendt til at udføre immunhistokemisk analyse. Fire mikrometer tykke vævssnit blev deparaffineret, rehydreret, og inkuberet med 3% H 2O 2 i methanol. Efterfølgende blev antigenet hentet, efterfulgt af inkubation med 1% bovint serumalbumin. Objektglas blev derefter inkuberet med en DEK antistof (1:50; BD Biosciences Pharmingen, San Jose, USA) ved 4 ° C natten over. Normalt gedeserum blev anvendt som negativ kontrol. Efter inkubering med et sekundært antistof ved stuetemperatur i 30 minutter blev objektglas inkuberet med streptavidin-peroxidase-kompleks. Den peroxidase reaktionen blev fremkaldt med 3,3'-diaminobenzidin og modfarvet med Mayers hematoxylin. Kanin IgG isotop blev anvendt som en negativ kontrol og positive vævssnit blev forarbejdet udelade det primære antistof som et yderligere negativ kontrol.
Evaluering af IHC-farvning
Alle objektglas blev bedømt uafhængigt ved to patologer uden forudgående kendskab til kliniske resultater. Vi først observeret farvning i hele gastrisk læsion, og derefter kvantificeret 50 repræsentative felter. Kun det mønster nuklear farvning blev betragtet som positive. Den immunfarvning blev scoret som '-' (negativ, ingen eller mindre end 5% positive celler), '+' (5-25% positive celler), "++" (26-50% positive celler) og "+++ "(mere end 50% positive celler). Den stærkt positiv deskriptor (DEK overekspression) blev tildelt "++" og "+++" scorede celler. For overlevelse analyse blev DEK udtryk niveau betegnes som høj ekspression ( "++" og "+++") og lav udtryk. ( '-' Og '+') [15]
statistiske analyser
Statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS 17.0. Associering mellem DEK ekspression og klinisk-patologiske træk blev evalueret ved Chi-square test og Fishers eksakte test. Kaplan-Meier-metoden blev anvendt til analyse af overlevelseskurver, og statistisk signifikans blev vurderet ved anvendelse af log-rank test. Multivariat overlevelse analyse blev udført på alle væsentlige egenskaber målt ved univariat overlevelse analyse (køn, alder, tumorstørrelse, differentiering, lymfeknudemetastase, serøse invasion, tumor stadium, og DEK ekspression) gennem Cox proportional hazard regression. AP Drømmeholdet værdi. ≪
0,05 blev betragtet som statistisk signifikant
Resultater
DEK protein blev overudtrykt i mavekræft
DEK protein viste en strengt nuklear farvning mønster i gastrisk kræft med IF (figur 1) og IHC (figur 2). Den positive sats på DEK-proteinekspression var 70,3% (121/172) i gastrisk cancer væv, hvilket var betydeligt højere end i enten gastrisk dysplasi (41,7%, 15/36) eller normal tilstødende slimhinder (18,5%, 5/27) . Tilsvarende stærkt positiv sats på DEK protein (60,5%, 104/172) var også signifikant højere end både gastrisk dysplasi (19,4%, 7/36), eller tilstødende normale maveslimhinden (0%, 0/27) (P
< 0,01, henholdsvis) (tabel 1). Figur 1 Immunofluorescens-farvning for DEK og β-tubulin-proteiner i MKN-1 gastriske cancerceller. DEK-proteinet er strengt placeret i kernen af ​​MKN-1 gastriske cancerceller. (Rød for DEK, Green for β-tubulin, og Blue for DAPI).
Figur 2 immunhistokemisk farvning af DEK protein i mavekræft og normal slimhinde. A: DEK er negativ i normal gastrisk mucosa. B: DEK-protein er stærkt positiv i kernen af ​​gastriske cancerceller med lymfeknudemetastaser. C: DEK-protein viste spredte farvningsmønster i gastrisk adenocarcinom uden metastaser. D: DEK er positiv i invasive kræftceller omkring nerven (pil
) i serøse lag (Original forstørrelse, × 200)
Tabel 1 DEK proteinekspression i gastrisk kræft
Diagnose
Ingen. af tilfældene
DEK udtryk
Positiv sats (%)
Stærkt positiv rate (%) Vejviser - + ++ + ++ Vejviser Gastric kræftformer
172
51 17 67 37
70,3% **
60,5% **
Dysplasi
36
21 8 7 0
41,7% **
19,4% **
Normal
27
22 5 0 0
18,5%
0
** P
< 0,01, sammenlignet med normal slimhinde og dysplasi af gastrisk. Dysplasi: gastrisk dysplasi; Kræft: mavekræft; Positiv rate: procentdelen af ​​positive tilfælde med '+', '++', og '+++ "farvning score; Stærkt positiv rate:. Procentdel af positive tilfælde med "++" og "+++" farvning score
Sammenhæng mellem klinisk-patologiske funktioner og DEK overekspression
Vi analyserede forholdet mellem DEK overekspression og klinisk-patologiske træk af gastrisk kræft. Den stærkt positiv sats på DEK udtryk var signifikant højere i gastrisk kræft med ≥5 cm tumorstørrelse (55/73, 75,3%) end i tilfælde med < 5 cm tumorstørrelse (49/99 49,5%) (P
<0,05). Tilsvarende DEK udtryk var signifikant højere i dårligt differentierede gastrisk kræft (32/44, 72,7%) end i moderat (26/47, 55,3%) eller godt differentierede gastrisk kræft (46/81, 56,8%) (P
<. 0,05)
for TNM klinisk iscenesættelse, fandt vi en stærkt positiv sats på DEK udtryk for 71,3% (57/80) i avanceret-stadie (III-IV) gastrisk kræft, og kun 51,1% (47/92) i den tidlige fase (0-II) tilfælde (P
< 0,01). Ikke desto mindre blev DEK overekspression i gastrisk kræft ikke er relateret til alder, køn, Lauren typer og serøse invasion (tabel 2) .table 2 Forholdet mellem DEK protein overekspression og klinisk-patologiske træk af mavekræft
Kliniske funktioner
Nej . af tilfældene
Stærkt positive tilfælde (%)
χ
2
P Drømmeholdet værdi
Age
0,915
0,340
< 56
96
55 (57,3%)
≥56
76
49 (64,5%)
Køn
0,011
0,918
Mand
102
62 (60,8%)
Female
70
42 (60,0%)
Tumor størrelse
10,501
0.001 **
≥5 cm
73
55 (75,3%)
< 5 cm
99
49 (49,5%)
serøse invasion
0,283
0,596
Ja
81
46 (56,8%)
Ingen
91
48 (52,7%)
Lauren typer
5,581
0,118
Intestinal typen
89
47 (52,8%)
Diffuse typen
72
51 (70,8%)
blandet type
11
6 (54,5%)
Differentiering
19,732
0,000 **
Nå
67
27 (40,3%)
Moderat
82
58 (70,7%)
Dårligt
23
19 (82,6%)
LN Metastase
1,417
0,235
Negativ
89
50 (56,2%)
Positiv
83
54 (65,1% )
Klinisk fase
7,277
0,007 **
0-II
92
47 (51,1%)
III-IV
80
57 (71,3 %)
** P
< 0.01.
Sammenhæng mellem DEK overekspression og overlevelse af patienter med mavekræft
A Total 172 patienter med mavekræft blev identificeret til analyse af prognostisk evaluering. Både sygdomsfri overlevelse og samlet overlevelse satser var signifikant højere i mavecancerpatienter med lav DEK udtryk end i dem med høj DEK udtryk (figur 3). Af de 172 mavecancerpatienter, 92 var tidligt stadium og 80 blev fremskredent stadium. For patienter med tidlig fase (I-II) mavekræft, overlevelse analyse viste, at et DEK niveau var forbundet med lavere sygdomsfrie og samlet overlevelse (P
= 0,003 og P
= 0,002 henholdsvis log -rank) (figur 4). Men udtrykket status DEK protein ikke korrelerer til overlevelse hos patienter med fremskreden (III-IV) gastrisk cancer (P
= 0,255 og P
= 0,137, henholdsvis, log-rank). Figur 3 Kaplan-Meier analyse af sygdomsfri og samlet overlevelse i 172 mavecancerpatienter i forhold til DEK proteinekspression. Mavekræft patienter med DEK-positivt udtryk havde lavere sygdomsfrie (A) og samlet overlevelse (B) satser end dem med DEK-negative udtryk, som bestemt ved hjælp af Kaplan-Meier-metoden. (+, Positiv - negativ).
Figur 4 Kaplan-Meier analyse af sygdomsfri overlevelse og samlet overlevelse i 172 patienter med eller uden DEK udtrykte mavekræft i forhold til klinisk fase. A-B: I den tidlige fase, DEK udtryk negativt korreleret til sygdomsfri overlevelse og samlet overlevelse hhv. CD:. I sene, overlevelsesprocenten ikke korreleret til DEK udtryk
DEK overekspression er en uafhængig prognostisk faktor i gastrisk kræft af Cox proportional hazard regressionsmodel
Brug univariat analyse, fandt vi, at gastrisk kræftpatienter med høj DEK udtryk havde signifikant lavere sygdomsfrie og samlede overlevelsesrater end dem med lave DEK udtryk tumorer. Derudover blev serosale invasion, lymfeknudemetastase, og tumor stadium også forbundet med sygdomsfri og samlet overlevelse satser, hvilket antyder, at DEK kunne være et værdifuldt prognostisk faktor i gastrisk cancer. Derfor blev multivariat analyse udført ved hjælp af Cox proportional hazard model for alle væsentlige variable undersøgt i univariate analyser. Vi fandt, at tilstedeværelsen af ​​lymfeknude metastaser (hazard ratio (HR): 1,490, 95% konfidensinterval (CI): 0,091-2,036, P
= 0,012) og sent (HR: 1,837, 95% CI: 1,323 -2,551, P
= 0,000) viste sig at være uafhængige dårlige prognostiske faktorer for overlevelse i mavekræft. Vigtigere, høj DEK udtryk også vist sig som en betydelig selvstændig dårlig prognostisk faktor i mavekræft (HR: 1,422, 95% CI: 1,033-1,956, P
= 0,031) (tabel 3) .table 3 Cox regressionsmodellen analyse af forskellige faktorer i 172 patienter med mavekræft
Karakteristik
B
SE
Wald
HR
95% CI

P Drømmeholdet værdi Vejviser
Lavere
Øvre
univariat
Age
0.308
0.158
3.808
1.360
0.999
1.853
0.051
Gender
0.135
0.155
0.750
1.144
0.844
1.551
0.386
Tumor størrelse
0,306
0,159
3,688
1,358
0,994
1,856
0,055
serøse invasion
0,397
0,157
6,343
1,487
1,092
2,024
0,012 *
Lauren types
0.135
0.118
1.318
1.145
0.909
1.442
0.251
Differentiation
0.219
0.116
3.584
1.245
0.992
1.561
0.058
LN metastase
0,556
0,156
12,712
1,744
1,285
2,368
0,000 **
Klinisk stage
0.810
0.160
25.619
2.247
1.642
3.074
0.000**
DEK
0.455
0.160
8.111
1.576
1.152
2.155
0.004**
Multivariat
serøse invasion
0,224
0,162
1,904
1,251
0,910
1,718
0,168
Klinisk fase
0,608
0,167
13,187
1,837
1,323
2,551
0,000 **
LN metastasis
0.399
0.159
6.272
1.490
1.091
2.036
0.012*
DEK
0.352
0.163
4.671
1.422
1.033
1.956
0.031*
B: koefficient; SE: standard fejl; Wald: wald statistik; HR: hazard ratio;
CI: konfidensinterval
* P
< 0,05, ** P
< 0,01.
Diskussion
humane DEK gen anses generelt en proto-onkogen på grund af sin deltagelse i kromosomal translokation i AML og dens opregulering i en række humane maligniteter [6, 18]. Til dato, akkumulering dokumentation fra undersøgelser tyder på en korrelation mellem DEK og flere typer af humane maligniteter, såsom melanom [19], glioblastoma [20], brystcancer [21] og blærecancer [22], men lidt er kendt om gastriske cancere . Dette er den første undersøgelse, så vidt vi ved, at korrelere DEK niveauer i GAC med histologiske prognostiske faktorer for at forstå den rolle, DEK opregulering i gastrisk cancer progression. Her udførte vi IF og IHC farvning af DEK protein og overlevelse dataanalyse ved hjælp 36 af gastrisk dysplasi og 172 GAC og deres tilstødende normale væv modstykker. Vi fandt, at høje niveauer af DEK ekspression var forbundet med dårlig prognose i mavecancerpatienter. Vi har også observeret, at ændrede ekspressionsniveauer af DEK protein i gastrisk kræft væv, som var betydeligt højere end både tilstødende noncancerous væv og normale mave væv. Vore resultater tyder den vigtige rolle, DEK protein i prognosen for patienter med gastrisk cancer.
Som DEK kan være til stede ved højere niveauer i umodne celler end i differentierede modparter [11], kan det også hjælpe i måle differentieringen potentiale tumorceller. Vores tidligere data [15] viste, at DEK-protein var stærkt positiv i kolorektale cancere og dysplastiske adenom i tyktarmen, men negativ i det tilstødende normale slimhinde, hvilket viser, at DEK proteinekspressionsniveauer kan anvendes som biomarkør til tidlig diagnose af kolorektale cancere. Khodadoust et al.
Rapporterede, at DEK ekspressionsniveauer kan skelne benigne nevi fra maligne melanomer, hvilket indikerer, at dette protein kan vise sig at være yderst nyttig til at skelne diagnose [19]. Derudover Kappes et al.
Undersøgt lokaliseringen af ​​DEK hele cellecyklus og fandt det var altid på kromatin og som en komponent af mitotiske kromosomer [23]. Her fandt vi, at DEK-protein er strengt placeret i kernen af ​​mavekræft celler under anvendelse IF og IHC-farvning, og ekspressionsniveauet af DEK signifikant opreguleret i gastrisk cancer og dysplasi end i det tilstødende normale maveslimhinden, hvilket viser, at DEK opregulering er en tidlig begivenhed i udviklingen af ​​mavekræft.
trods den stærke association mellem DEK ekspression og kræft, rapporter om DEK ekspression-baserede resultat i tumor patienter er begrænset. Vores tidligere undersøgelse [15] rapporterede, at høj DEK ekspression er forbundet med serøse invasion, lymfeknudemetastase, tumorstørrelse og differentiering, som er afgørende histologiske træk forbundet med dårlig prognose i colorektal cancer. Også DEK overekspression samtidig med nogen af ​​disse funktioner korreleret med betydeligt lavere 5-årige overlevelsesrater end dem uden DEK udtryk. I overensstemmelse med denne rapport, i 2013 Wang et al
. afslørede, at akut myeloid leukæmi patienter med lav DEK udtryk havde højere samlede overlevelsesrater sammenlignet med patienter med høj DEK udtryk [24]. Tilsvarende Liu et al
. rapporterede, at DEK protein viste højere ekspressionsniveauer i < 3- årige sygdomsfri overlevelse brystcancer patienter end i ≥3-års sygdomsfri overlevelse patienter [21]. Her fandt vi også, at DEK udtryk var stærkt forbundet med overlevelsesrater i den tidlige fase tumorer, og var signifikant højere i DEK lavt udtrykt patienter end i DEK høje udtrykt patienter. Således kunne IHC undersøgelse af DEK anvendes som et yderligere middel til at identificere mavekræft patienter med risiko for malign progression, og DEK ekspressionsanalyse kan også være anvendelige til at optimere individuel gastrisk cancer terapi forvaltning, der fremmer en mere aggressiv regime i tumorer med høj DEK udtryk.
Især har mange undersøgelser rapporteret, at DEK impliceret i flere signalveje i tumorceller og spillede vigtig rolle i udviklingen af ​​kræft. Wise-Draper et al
. rapporterede, at DEK forsinkelse differentiering af keratinocyt i en p53-uafhængig måde [25]. Wise-Draper et al
. også rapporteret DEK at virke som en negativ regulator af p53 aktiviteter på en måde, påvirket cellulær overlevelse [26]. Sandén et al
. rapporterede, at DEK-NUP214 fusionsgenet øget proliferation af myloid celleproliferation gennem opregulering af mTOR [27]. Disse data antydede, at ændrede DEK ekspressionsmønstre kunne regulere en bestemt signalvej til at spille en onkogen rolle i cancer udvikling og progression. Måske kan de veje, der reguleres af DEK repræsenterer en ny strategi for kræftbehandlinger og yderligere undersøgelse er også nødvendig for at finde ud af den nøjagtige signalvej reguleret af ændret DEK i mavekræft progression.
Afslutningsvis synes DEK overekspression at være forbundet med mavekræft progression, og DEK kan potentielt anvendes som biomarkør for prognostisk evaluering og som et terapeutisk mål i mavekræft.
Notes
Junjie Piao, Yongjun Shang bidraget ligeligt til dette arbejde.
erklæringer
Tak
Denne undersøgelse blev støttet af tilskud fra National Natural Science Funds i Kina (61371067) og projekter af Research & Innovation af Jilin Youth Leader og Team (20130521017JH).
Forfattere 'originale indsendte filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 13000_2014_960_MOESM1_ESM.tif Forfatternes oprindelige fil til figur 1 13000_2014_960_MOESM2_ESM.tif Forfatternes oprindelige fil til figur 2 13000_2014_960_MOESM3_ESM.tif Forfatternes oprindelige fil til figur 3 13000_2014_960_MOESM4_ESM.tif Forfatternes oprindelige fil til figur 4 konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer, at de har ingen konkurrerende interesser.
Forfattere bidrag
PJ, SY og LS deltog i undersøgelsen undfangelse, design og tilfælde udvælgelse. LY, CX og PY gennemført tilfælde kollektion. PJ, LY, og LZ udførte eksperimenter og skrev manuskriptet. Alle forfatterne læst og godkendt den endelige manuskript.

• Sent debuterende peritoneal gentagelse af fremskreden mavekræft 20 år efter primær resektion
• Ezrin overekspression forudsiger dårlig prognose af gastrisk adenocarcinom