Højere frekvens af CagA EPIYA-C fosforylering steder i H. pylori stammer fra førstegradsslægtninge af gastrisk kræftpatienter

Højere frekvens af CagA EPIYA-C fosforylering steder i H. pylori
stammer fra førstegradsslægtninge af mavecancerpatienter
Abstract
Baggrund
at evaluere forekomsten af ​​mere virulent H. pylori
genotyper i pårørende til mavecancerpatienter og i patienter uden slægtshistorie af mavekræft.
Metoder
Vi evaluerede fremadrettet udbredelsen af ​​infektionen med mere virulente H. pylori
stammer i 60 pårørende til patienter gastrisk cancer sammenligner resultaterne med dem, der opnås fra 49 patienter uden slægtshistorie af mavekræft. H. pylor
i status blev bestemt af urease test, histologi og tilstedeværelsen af ​​H. pylori ure
A. Den cytotoksin associeret gen (CAG
A), KAG
A-EPIYA og vakuolerende cytotoksin gen (vac
A) blev indtastet ved PCR og KAG
En EPIYA maskinskrivning blev bekræftet ved sekventering.
Resultater
Den mavekræft pårørende var signifikante og uafhængigt oftere koloniseret af H. pylori
stammer med højere antal CagA-EPIYA-C segmenter (OR = 4,23, 95% CI = 1,53-11,69) og med de mest virulente s1m1 vac
En genotype (OR = 2,80, 95% CI = 1,04-7,51). Højere antal EPIYA-C segmenter blev forbundet med øget gastrisk corpus inflammation, foveolar hyperplasi og atrofi. Infektion med s1m1 vac
En genotype var forbundet med øget antral og corpus gastritis.
Konklusioner
Vi påviste, at pårørende til mavecancerpatienter hyppigere koloniseret af de mest virulente H. pylori CAG
A og vac
en genotyper, som kan bidrage til at øge risikoen for mavekræft.
Nøgleord
Helicobacter pylori
mavekræft H. pylori
CagA-EPIYA H. pylori /vac
A baggrund
Helicobacter pylori
, en Gram-negativ bakterie, der inficerer maven omtrent halvdelen af ​​verdens befolkning, er forbundet med udviklingen af ​​gastroduodenale sygdomme, herunder gastriske og duodenale mavesår, distal gastrisk adenocarcinom og mucosa-associeret lymfoidt væv lymfom [1]. Det anslås, at personer inficeret med H. pylori
har mere end to gange øget risiko for at udvikle mavekræft sammenlignet med ikke-inficerede dem [2] selvom Japanstudier kunne antyde, at næsten alle mavekræft er relateret til Helicobacter
[3]. Hvorfor kun 1 til 5% af H. pylori
smittede udvikler mavekræft er fortsat ukendt, og det synes at afhænge af forholdet mellem miljømæssige, host genetik og bakterielle virulensfaktorer.
Flere undersøgelser har vist en øget risiko for udvikle gastrisk cancer hos slægtninge til patienter med sygdommen [2, 4]. Tilsvarende har en øget forekomst af forstadier gastriske læsioner blevet observeret i pårørende til mavecancerpatienter [5]. Men molekylære mekanismer, hvormed H. pylori
udløser proces, der fører til gastrisk karcinom stort set ukendt.
Mest undersøgte H. pylor
jeg virulensdeterminant, den cag-
PAI (cytotoksin associeret gen patogenicitet island), koder for et type IV secerneringssystem (T4SS), som er ansvarlig for indgangen af ​​en effektor-protein, CagA, ind i værtsceller gastriske epitelceller [6, 7]. Når omplantes, CagA lokaliseres til den indre overflade af plasmamembranen, hvor den phosphoryleres på tryrosine rester inden phosphoryleringsmotiver i carboxyterminale variable region af proteinet ved flere medlemmer af src-familien tyrosinkinaser. Når phosphoryleret, CagA danner et fysisk kompleks med SHP-2 phosphatase og udløser unormale cellulære signaler, som forøger risikoen for beskadigede celler erhverver forstadier genetiske ændringer [8, 9].
Den phosphoryleringsmotiver, der defineres som en sekvens af fem amino syrer (Glu-Pro-Ile-Tyr-Ala), klassificeres som EPIYA-A, EPIYA-B, EPIYA-C og EPIYA-D, ifølge aminosyresekvenser flankerer motiver. CagA proteiner næsten altid besidder EPIYA-A og -B segmenter, der er efterfulgt af ingen, en, to eller tre C segmenter i stammer cirkulerer i de vestlige lande, eller en D-segment, i East Asia stammer [10, 11]. Det er også blevet vist, at infektion med CagA stammer med store antal EPIYA-C segmenter bibringer en større risiko for præcancerøse gastriske læsioner og cancer [12-15].
Anden virulensfaktor af H. pylori
er et protein kendt som vakuolerende cytotoksin A (VacA), som forårsager cytoplasmatisk vakuolisering i gastriske epitelceller, øger plasma-celle og membranpermeabilitet mitokondrie fører til apoptose. Produktionen af ​​cytotoksin er forbundet med CAG-PAI, men afhænger af vac
En genotype [16-18]. Den vac
A er en polymorf gen med to primære signal region genotyper s1 og s2, og to forskellige alleler i midten region af genet opkaldt m1 og m2. Infektion med stammer besidder den s1m1 genotypen er blevet forbundet med præcancerøse gastrisk hypochlorhydria [17] og gastrisk karcinom [19].
I en nylig undersøgelse foretaget i Fortaleza, Nordøstlige, Brasilien, i et område med høj forekomst af mavekræft og H . pylori
infektion, har vores gruppe vist en høj forekomst af enten pangastritis eller forstadier til kræft i pårørende til mavekræft patienter inficeret med H. pylori
[20].
Desuden Argent et al
. (2008) observerede en sammenhæng mellem vac
en s1m1 genotype af H. pylori
stammer og lav mavesyre sekretion i første grad slægtninge til mavecancerpatienter fra Skotland [21]. Ellers har forfatterne ikke finde sammenhænge mellem CagA positiv status og eller antal Tyrosinphosphorylerede motiver og gastriske læsioner i denne population.
Siden geografiske forskelle er observeret blandt studier, der evaluerede sammenhæng mellem H. pylori
virulensfaktorer og sygdomme, formålet med denne tværsnit prospektiv undersøgelse var at evaluere de CagA EPIYA motiver af H. pylori
stammer i førstegradsslægtninge af gastrisk kræftpatienter sammenligne resultaterne med dem opnået fra en kontrolgruppe bestående af individer med ingen familie historie mavekræft. Fordi s1m1 genotype af vac
En H. pylori
blev set til at blive observeret hyppigere i stammer af mavecancerpatienter, vi evalueret også vac
En mosaicisme i stammer.
Metoder
undersøgelsen blev godkendt af Etisk Komité Forskning fra University of Ceará, og informeret samtykke blev opnået fra hvert emne.
Patienter
Sixty H. pylori
-positive førstegradsslægtninge [42 kvinde; gennemsnitsalder 40.42 ± 11,80; (4 brødre og 13 søstre; gennemsnitsalder 56,24 ± 11,80 år, 14 sønner og 29 døtre; gennemsnitsalder 34,51 ± 7,66)] af gastrisk kræftpatienter fra ambulant opfølgning på Walter Cantídio Hospital blev inviteret til at deltage. Kontrolgruppen bestod af 49 (32 kvinder, gennemsnitsalder 43,20 ± 12,59) H. pylori
-positive patienter, der samtidig gennemgik øvre gastrointestinal endoskopi til undersøgelse af dyspepsi på samme hospital. De havde ikke familie historie af mavekræft, og var social klasse matchet med studiegruppen. Patienter med historie af gastrisk kirurgi, aktiv gastrointestinal blødning, brug af steroider, immunosuppressive lægemidler, NSAID'er, protonpumpehæmmere eller som blev behandlet i H. pylori
udryddelse blev udelukket fra undersøgelsen. Pårørende og kontroller blev ikke inkluderet, hvis de var under 18 eller over 81 år.
Biopsi fragment indsamling
gastriske fragmenter blev opnået under endoskopi fra fem forskellige steder som anbefalet af Opdateret Sydney System for klassificering af gastritis [22] . Derudover blev to fragmenter opsamlet fra antrale slimhinde for hurtig ureaseprøve og for DNA til at undersøge tilstedeværelsen af ​​H. pylori
gener. H. pylori
infektion blev bekræftet af positive resultater i mindst to test, herunder en hurtig urease test, histologisk analyse og tilstedeværelse af ure
Et gen af ​​H. pylori
.
Histologi
Endoskopisk biopsiprøver af maveslimhinden blev fikseret i 10% formalin og indlejret i paraffin, og 4-um-sektioner blev farvet med hæmatoxylin-eosin for rutinemæssig histologi. Gastritis blev klassificeret i henhold til opdateret Sydney systemet. Prøverne af maveslimhinden blev også farvet med Giemsa til påvisning af H. pylori.
DNA-ekstraktion
antral gastrisk DNA blev ekstraheret under anvendelse af Qiamp (QIAGEN, Hilden, Tyskland) kit ifølge producentens anbefalinger med mindre modifikationer [23]. DNA-koncentrationen blev bestemt ved spektrofotometri ved anvendelse NanoDrop 2000 (Thermo Scientific, Wilmington, NC) og opbevaret ved -20 ° C indtil anvendelse.
Tilstedeværelsen af ​​H. pylori
specifik ure
Et gen blev evalueret i henhold metodologi beskrevet af Clayton et al.
, [24].
standard Tx30a H. pylori
stamme blev anvendt som en positiv kontrol, og en Escherichia coli
stamme og destilleret vand blev begge anvendt som negative kontroller.
thermocycler GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems, Foster City, CA) blev anvendt til alle reaktioner. De amplificerede produkter blev elektroforeret i 2% agarosegel, farvet med ethidiumbromid og analyseret i et ultraviolet lys transilluminator.
VAC
A og CAG
Detektionssystem
PCR-amplifikation af vac
En signalsekvens og mid region blev udført ved anvendelse af oligonukleotidprimerne beskrevet af Atherton et al
., [15]. Stammerne blev oprindeligt klassificeret som type s1 eller s2 og type m1 eller m2. Alle H. pylori
stammer med s1 blev yderligere karakteriseret i S1A, S1b eller S1c [25, 26].
Cag
En genet blev amplificeret ved hjælp af to tidligere beskrevne sæt af primerpar [27, 28]. En H. pylori
stamme fra vores samling (1010-1095), kendt for at være vac
En s1m1 og KAG
A-positiv, blev anvendt som en positiv kontrol, og den s2m2 vac
A genotype, cag
A-negativ standard Tx30a H. pylori
stamme og destilleret vand blev begge brugt som negative kontroller. H. pylori Salg stammer blev anset for at være CAG
A-positiv, når mindst en af ​​de to reaktioner var positiv.
Amplifikation af 3'variable region af cag
En Hus Til PCR-amplifikation af 3'variable region af det cag
En genet (der indeholder EPIYA sekvenser), 20 til 100 ng DNA blev tilsat til 1% Taq DNA polymerase pufferopløsning (KCl 50 mM og Tris-HCI 10 mM, pH, 8,0), 1,5 mM MgC 2, 100 uM af hvert deoxynukleotid, 1,0 U Platinum Taq DNA-polymerase (Invitrogen Sao Paulo, Brasilien), og 10 pmol af hver primer, til et samlet opløsningsvolumen på 20 uL. De anvendte primere blev tidligere beskrevet af Yamaoka et al
. [29]. Reaktionsbetingelserne var: 95 ° C i 5 minutter, efterfulgt af 35 cykler ved 95 ° C i 1 minut, 50 ° C i 1 minut og 72 ° C i 1 minut, sluttende med 72 ° C i 7 minutter. Reaktionen gav produkter af 500-850 bp som følger: EPIYA-AB: 500 bp; EPIYA-ABC: 640 bp; EPIYA-ABCC: 740 bp og EPIYA-ABCCC: 850 bp (figur 1). Figur 1 Elektroforese af repræsentative prøver med forskellige CagA EPIYA mønstre ses i slægtninge til gastriske kræftpatienter og kontroller. Kolonner 2, 3 E 5: EPIYA-ABCC (740 bp); kolonne 4: EPIYA-ABCCC (850 bp); kolonne 6: EPIYA-ABC (640 bp) og kolonne 7: EPIYA-AB (500 bp). Øvre:. Delvis tilpasning af aminosyre sekventering af de carboxyterminale CagA stammer og en reference stamme (H. pylori
26.695)
Vi brugte også den metode beskrevet af Argent et al
. [30] til PCR-amplifikation af 3'variable region af det cag
Et gen, der indeholder EPIYA sekvenser for at forbedre nøjagtigheden af ​​vores resultater.
Sekventering af 3'variable region af CAG
A
En delmængde af prøver blev tilfældigt udvalgt til sekventering for at bekræfte PCR-resultater. PCR-produkterne blev renset med guiden SV Gel og PCR Clean-up system (Promega, Madison, MI) i henhold til producentens anbefalinger. Oprensede produkter blev sekventeret under anvendelse af en BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit i en ABI 3130 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA). De opnåede sekvenser blev justeret ved hjælp af CAP3 Sequence Assembly Program (tilgængelig fra: http:... //Pbil univ-lyon1 fr /CAP3 php). Efter justering blev nukleotidsekvenser omdannet til aminosyresekvenser ved hjælp af BLASTX programmet (tilgængelig fra: http: //blast NCBI NLM NIH gov /Blast cgi.....), Og sammenlignet med sekvenser deponeret i GenBank (http: //www NCBI NLM NIH gov /Genbank /....)
Statistisk analyse
data blev analyseret med SPSS (Inc. Chicago, IL), version. 17.0. Risikoen for pårørende til gastrisk karcinom at være inficeret med mere virulente stammer, med øget antal EPIYA-C motiver og s1m1 vac
en genotype, blev oprindeligt evalueret i univariat analyse. Til det blev CAG
A stammer stratificeret i dem, der har mindst én EPIYA-C-segmentet og dem med mere end én EPIYA-C-segmentet og den mest virulente vac
En s1m1 genotype blev sammenlignet med s1m2 plus s2m2. Variabler med en p
-værdien mindre end eller lig med 0,25, blev medtaget i den endelige model af logistisk regression, kontrol for påvirkninger af alder og køn. Odds ratio (OR) og 95% konfidensintervaller (CI) blev beregnet. Den logistiske model fitness blev evalueret med Hosmer-Lemeshow test [31]. Sammenslutningen af ​​antallet af EPIYA-C segmenter og tilstedeværelsen af ​​vac
en virulent genotyper med graden af ​​gastrisk inflammation, atrofi og intestinal metaplasi blev gjort ved den tosidede Mann-Whitney test. Niveauet af signifikans blev sat til ap Drømmeholdet værdi ≤0.05.
Resultater
Tilstedeværelsen af ​​H. pylori
specifikke ure
Et gen blev påvist i maveslimhinden af ​​alle 109 undersøgte emner.
cag
En status af patienterne
cag
en positivitet blev observeret i mavens fragmenter fra 51 (85,00%) af 60 gastrisk kræft pårørende og dem fra 43 (87,76%) af 49 kontroller uden forskel mellem grupperne (p
= 0,68, OR = 1,26, 95% CI = 0,37-4,40)
antallet af EPIYA-C segmenter
EPIYA mønster af alle KAG
A. -positive stammer fra begge slægtninge til gastriske kræftpatienter og kontroller lykkedes indtastet. Den Yamaoka metode gjorde påvisning af blandet stamme infektion. Den overensstemmelse mellem de anvendte metoder var næsten 100%. Resultaterne blev bekræftet ved sekventering af den 3 'variable region af cag
A i 30 tilfældigt udvalgte PCR-produkter
Fire mønstre af EPIYA Motiverne fundet:. AB, ABC, ABCC, og ABCCC. Ingen Asian EPIYA-D motiv blev observeret. Fordelingen af ​​EPIYA genotyper er vist i tabellen 1.Table 1 Fordeling af EPIYA genotyper i mavens kræft pårørende (n = 51) og kontroller (n = 43), koloniseret af en CAG A-positive stammer
EPIYA Genotype

Kontrolgruppe n (%)
mavekræft pårørende
Søskende n (%)
afkom n (%)
EPIYA- AB
03 (7,0)
0
0
EPIYA-ABC
32 (74,4)
09 (60,0)
20 (55,5)
EPIYA-ABCC
07 (16,3)
04 (26,7)
12 (33,2)
EPIYA-ABCCC
01 (2.3)
01 (6.7)
02 (5.6)
EPIYA-ABC + ABCC
0
01 (6.7)
02 (5.6)
Total
43 (100,0)
15 (100,0)
36 (100,0)
vac
En mosaicisme fordeling
fordelingen af ​​vac
A genotyper er vist i tabel 2. i 59 tilfælde (54,13%) af vac
En genotype var s1m1, i 35 (32,11%) det var s1m2 og 6 (5,50%) s2m2. I tre (2,75%) tilfælde to vac
en genotyper blev observeret og seks (5,50%) blev opdaget kun signalet sekvensen (s1). DNA var ikke nok til at genotype m allel i fire blandt disse tilfælde og i to, m ikke var typebestemmelig. I alle tilfælde med S1 stammer blev de med genotype S1b, undtagen i det ene tilfælde, der blev koloniseret af S1A og S1b strains.Table 2 Fordeling af vac A alleler af H. pylori stammer af pårørende til mavecancerpatienter (n = 55) og kontrol (n = 48)
vac
En Genotypes1
Kontrolgruppe n (%)
mavekræft pårørende
Søskende n (%)

Offspring n (%)
s1m1
23 (47,92)
10 (66,67)
26 (65.00)
s1m2
21 (43,75)
04 (26,67)
10 (25.00)
s2m2
03 (6,25)
01 (6,67)
02 (5,00)
Mixed2
01 (2,08)
0
02 (5,00)
alt 48 (100)
15 (100)
40 (100)
1Gælder vac
En s1 genotype blev identificeret i 6 tilfælde ( 1 kontrol, 2 søskende og 3 afkom af mavekræft pårørende); 2Mixed infektion med s1m1 og s2m2 eller s1m1 og s1m2 (to tilfælde).
Infektion med den mest toksigene vac
En genotype (s1m1) blev observeret hyppigere i mavens kræft pårørende (65,45%) end i kontrolgruppen ( 47.92%). Når s og m alleler blev individuelt vurderet, sås ingen forskel i hyppigheden af ​​s1 allel mellem grupperne, men m1 allel blev observeret hyppigere i de mavekræft pårørende.
Association blandt antallet af EPIYA-C-motiver og vac
En s1m1 genotype og familie historie af mavekræft
den pårørende til mavecancerpatienter var signifikant og uafhængigt oftere koloniseret af H. pylori
stammer med øget antal CagA-EPIYA-C segmenter, og med den mest virulent s1m1 vac
En genotype, selv efter justering for alder og køn (tabel 3) .table 3 Covariables forbundet med mavekræft i første grad slægtninge til mavecancerpatienter sammenlignet med emner uden familie historie af gastrisk kræft
Variabler
univariat analyse
Multivariate analyse
p
OR
95% CI
p
Køn
0,27 -
- -
Age
0,30 -
- -
> 1 EPIYA-C motiv
0,01
4,23
1,53-11,69
0,006
s1m1 vac
En allel
0,17
2,80
1,04-7,51
0,04
Hosmer-Lemeshow test var egnet (8 frihedsgrader, p > 0,20, med 10 trin)
Ingen forskel blev observeret mellem søskende og afkom i forhold til infektion med stammer, der indeholder et øget antal EPIYA. -C motiver (p
= 0,98, OR = 1,20, 95% CI = 0,30-4,86) og vac
A genotyper s1m1 vs. s1m2 og s2m2 (p
= 0,84, OR = 0,92, 95 % CI = 0,22-3,97), som vist i tabel 1 og 2.
Foreninger blandt antallet af EPIYA-C segmenter og vac
A genotyper og gastrisk histologiske forandringer Salg The grader af corpus gastritis (p
= 0,04), antrum aktivitet (p
= 0,01) og corpus aktivitet var signifikant højere i forhold til gastrisk kræftpatienter end i kontrolgruppen.
En højere antal EPIYA-C segmenter var forbundet med gastrisk corpus inflammation (p
= 0,04), gastrisk korpus foveolar hyperplasi (p
= 0,05) og gastrisk corpus atrofi (p
= 0,05) i de pårørende til mavecancerpatienter.
Infektion med den mest virulent vac
En s1m1 genotype var forbundet med mere markant antral (p
= 0,03) og korpus (p
= 0,05) gastritis, da begge grupper blev evalueret sammen.
diskussion
H. pylori
infektion er anerkendt som den vigtigste risikofaktor for distal mavekræft. Endvidere at de forhøjede satser af sygdommen i pårørende til mavekræft point vært genetik og /eller andel af de mest H. pylori
virulens stammer som risikofaktorer.
I denne undersøgelse viste vi, at pårørende til mavekræft patienter oftere koloniseret af H. pylori
stammer med den mest virulente vac
en genotype, s1m1, og ved CagA-positive stammer besidder et højere antal EPIYA-C segmenter end H. pylori
stammer af patienterne uden en familie historie af sygdommen.
Selv om der ikke tidligere undersøgelse har vist, at mavekræft pårørende oftere koloniseret af mere virulente H. pylori
stammer, infektion med vac
en s1m1 var forbundet med lav mavesyresekretion, en præcancerøse tilstand i førstegradsslægtninge af Scottish mavecancerpatienter [21]. Ellers blev ingen sammenhæng mellem det mavesyresekretion og antallet af CagA EPIYA-C segmenter observeret af forfatterne [21].
CagA er den første bakteriel onkoprotein at identificere [32]. Proteinet afgives til gastriske epitelceller gennem en bakteriel T4SS og lokaliserer til indersiden af ​​cellemembranen, hvor den phosphoryleres af værtscellelinier kinaser. Efter phosphorylering, den EPIYA-C-segment interagerer med SHP-2 phosphatase, en bona fide onkoprotein der er forbundet med en række humane cancere. Jo højere antallet af EPIYA-C segmenter, jo højere affinitet for SHP-2, som er nødvendig for en fuld aktivering af ERK /MAPK-vejen.
Infektion med CagA stammer med højere antal EPIYA-C-segmenter er blevet forbundet med forstadier gastriske læsioner og mavekræft i kaukasisk [11-13, 30] og brasilianske befolkning [15].
det er velkendt, at H. pylori
infektion overvejende er erhvervet i barndommen, og at infektionen ofte varer ved livet medmindre behandles. Epidemiologiske data og genetisk analyse af H. pylori
stammer har vist, at stammerne normalt erhverves i familien. Faktisk inficerede mor og inficerede søskende er de vigtigste risikofaktorer for erhvervelse af infektionen [33, 34] og genetiske fingeraftryk metoder har vist genetisk homogenitet i H. pylori
stammer af familierne. Baseret på disse resultater og resultaterne af den foreliggende undersøgelse, kan vi hypotesen, at første slægtninge af gastrisk kræftpatienter kan dele mere virulente H. pylori
stammer, der kan øge risikoen for mavekræft.
Som nævnt ovenfor, førstegradsslægtninge af mavecancerpatienter også dele den samme eller tilsvarende genetisk baggrund, der kan øge risikoen for mavekræft. Polymorfier i gener, der koder proinflammatoriske cytokiner, såsom interleukin 1 beta (IL-1β), interleukin-1-receptorantagonist (IL1Ra) og tumornekrosefaktor-alfa (TNF-α) accepteres som risikofaktorer for mavekræft, afhængigt af det geografiske område [35-39]. Det er også blevet påvist, at der stadig flere proinflammatoriske genotyper [36, 37], samt en ledsagende infektion med mere virulente H. pylori Salg stammer gradvis øger risikoen for gastriske præcancerøse læsioner og cancer [39].
konklusioner
Afslutningsvis vi demonstreret, at slægtninge til mavecancerpatienter hyppigere koloniseret af den mest virulente H. pylori CAG
A og vac
en genotyper, der, ud over menneskets genetiske prædisposition, yderligere øge deres risiko for mavekræft, hvilket giver yderligere grunde til bedre at forstå disse infektioner og måske deres målrettede eradicative behandling.
erklæringer
Tak
Dette arbejde blev støttet af Instituto Nacional de Ciencias e Tecnologia em biomedicin gøre Semiárido Brasileiro (INCT) og CNPq, Brasilien. Vi er taknemmelige for professor Barry J Marshall til kritisk læsning af manuskriptet.
Resultaterne af undersøgelsen blev præsenteret som abstrakt på Digestive Disease Week, DDW 2011, Chicago USA.
Forfattere 'oprindelige indsendt filer til Images of nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 12876_2012_780_MOESM1_ESM.jpeg Forfatternes oprindelige fil til figur 1 Konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer no-confllict af interesse.
Forfattere bidrag
DMMQ overvågede laboratoriearbejde og analyserede data kritiske skriftligt og gennemgang manuskript., SAB udført dna-ekstraktion, PCR og sekventering og statistisk analyse, GAR og AMCR, deltog i gennemførelsen af ​​undersøgelsen og skrev manuskriptet, CISMS og MHB udført dna-ekstraktion, PCR og styring af databaser, MBN, ABF og AMN deltog i gennemførelsen af ​​undersøgelsen , dataindsamling, database management og statistiske analyser. RLG og AAML udførte kritisk analyse af data og gennemgang af manuskriptet. LLBCB deltaget i undfangelsen, design, implementering, koordinering af undersøgelsen og bidrog til manuskript skrive kritisk skrivning og gennemgang. Alle forfattere har læst og godkendt den endelige version af manuskriptet.

• Genomisk profil analyse af diffus type gastrisk cancers
• Påvirkninger af laparoskopisk-assisteret gastrektomi og åben gastrektomi på serum interleukin-6 niveauer hos patienter med mavekræft blandt asiatiske populationer: en systematisk review