CD44 /CD24 ekspression i tilbagevendende gastrisk cancer: en retrospektiv analysis

CD44 /CD24 ekspression i tilbagevendende gastrisk cancer: en retrospektiv analyse
Abstract
Baggrund
Til korrelere CD44 /CD24 udtryk med mavekræft tilbagefald og prognose. Gastrisk kræft er den anden hyppigste dødsårsag kræft på grund af den høje recidivraten, hvoraf den molekylære signatur er endnu ikke blevet identificeret.
Metoder
Vi retrospektivt anmeldt hospitalet registreringer af patienter med mavekræft. Blandt 500 patienter, der fik helbredende resektion, 95 patienter havde tilbagefald. Tyve patienter fra gentagelse gruppen (95 patienter) og 20 patienter fra den ikke-recidiv gruppe (405 patienter) blev tilfældigt udvalgt og identificeret som "undersøgelse" og "kontrol" grupper, hhv. Vi revideret patienternes histologisk undersøgelse af CD44 /CD24-ekspression ved at udføre immunhistokemi og gentagelse sats.
Resultater
Study gruppe havde højere TNM stadie (III-IV) end kontrolgruppen (80% vs. 25%, p
= 0,001). Andel af lymfeknude metastaser var signifikant højere i studiegruppen end i kontrolgruppen (90% vs. 45%, P
= 0,002), og andelen af ​​patienter med 5 eller flere metastatiske lymfeknuder var også signifikant højere i studiegruppen end i kontrolgruppen (45% vs. 15%, P
= 0,007). Univariate analyse viste ingen forskel i risiko for mavekræft tilbagefald mellem CD44 + og CD44- patienter (OR = 1,00, 95% CI: 0,29-3,45, P
= 1,000). CD24 + patienter viste ingen større betydning for mavekræft tilbagefald end CD24- patienter (OR = 1,86, 95% CI: 0,52-6,61, P
= 0,339). Efter justering for andre risikofaktorer, sammenslutningen af ​​CD44-ekspression (AOR = 0,66, 95% CI: 0,10-4,26, P
= 0,658), CD24-ekspression (AOR = 0,09, 95% CI: 0,01-1,35, P
= 0,081) eller kombineret (CD44 /CD24) med gastrisk kræft tilbagefald var ikke signifikant.
Konklusion
Hverken individuelle udtryk af CD24 eller CD44, eller kombineret udtryk for CD44 /CD24 var forbundet med gentagelse af gastrisk karcinom.
Nøgleord
CD44 CD24 Prognose Tilbagevendende mavekræft Baggrund
mavekræft (GC) er den femte hyppigste årsag til kræft død i Taiwan, selv om dens forekomst og dødelighed har været faldende i de seneste fem årtier. Globalt, GC er fjerde mest almindelige blandt alle typer af kræft diagnoser, og er den næststørste årsag til kræft dødelighed [1], på trods af forbedringer i kirurgiske teknikker og udvikling af nye kemoterapeutiske regimer. Årlige dødsfald har nået 700.000 på verdensplan og 42% er rapporteret i Kina alene [1]. Selv efter kurativ resektion, 40% af patienter med fremskreden mavekræft dør af tilbagefald [2]. Prognosen for patienter efter kurativ kirurgi er stadig dårlig på grund af den høje gentagelse sats. Den samlede 5-års overlevelse for patienter, der gennemgår helbredende kirurgisk resektion for gastrisk karcinom varierer fra 47% til 60,4%, og gentagelse sats varierer fra 15,4% til 37% [3].
Genetisk modtagelighed varianter og molekylære forandringer relaterede miljømæssige og livsstil faktorer er kendt for at bidrage til udviklingen af ​​GC, men selv om mange undersøgelser har man undersøgt molekylære markører for sygdommen, de sande mekanismer GC carcinogenese forbliver uklar [3]. Gentagelse mekanismer mangler også endelig forklaring [4]. Selv om vi ved gastrisk karcinom er tilbøjelige til at gentage sig selv helbredende resektion, ingen molekylær biomarkør er i øjeblikket tilgængelig til at forudsige gastrisk karcinom tilbagefald efter resektion. Mens kliniske prædiktive faktorer, såsom tumor iscenesættelse, kan forudsige gentagelse af fremskreden mavekræft og er godt anerkendt som væsentlige prædiktorer for prognose, er der nogen molekylær-baserede biomarkør, der kan tjene som en nyttig indikator for tilbagefald af fremskreden mavekræft efter kurativ resektion (R0 resektion)?
Både CD44 og CD24 er kendt for at bidrage til cellulær signalering og celleadhæsion, og deres rolle i cancer tilbagefald er blevet undersøgt. I en gennemgang af eksisterende litteratur om rollen som CD44 /CD24 ved tilbagevendende menneskelig cancer, viste efterforskerne positive associationer mellem CD44 + /CD24- og prognose, især i brystkræft; og CD44 + /CD24- fænotype af brystcancerceller var også forbundet med invasive egenskaber. [5] CD44 og CD24 er blevet vist at regulere invasion og metastase af brystcancerceller enten positivt eller negativt. Tumorgene brystkræftceller, der udtrykker høje niveauer af CD44 og lave eller ikke-detekterbare niveauer af CD24 (CD44 + /CD24 - /lav), kan være resistente over for kemoterapi og derfor ansvarlig for cancer tilbagefald [6]. CD44 blev også højt udtrykt i gastrisk adenocarcinom og dets ekspression korrelerede med dårlig prognose hos patienter med intestinal type gastrisk adenocarcinom [7]. Baseret på konsekvenserne af disse tidligere undersøgelser, vi hypotese, at CD44 + /CD24- udtryk kan være korreleret med mavekræft tilbagefald.
Til vores viden, rapporterer igangværende undersøgelser ingen gyldig adhæsionsmolekyle at forudsige recidiv efter patienter gennemgå helbredende resektion for gastrisk carcinom. Fordi betydningen af ​​CD44 + /CD24- er sandsynligvis ikke enestående for brystkræft, og CD44 er blevet stærkt udtrykt i gastrisk cancer, kan vi spekulere, at lignende eller andre molekyler også kan regulere processen for fornyet til gastrisk cancer. Derfor besluttede vi at undersøge ekspressionen af ​​adhæsion molekyle CD44 /CD24 i tilbagevendende gastrisk cancer og dens mulige prædiktiv relevans i fremtiden klinisk praksis. Formålet med denne undersøgelse var at vurdere korrelationen af ​​CD44 /CD24 udtryk med tilbagevendende gastrisk kræft og for at bestemme dens prognostisk betydning.
Metoder
Patient udvalg
Protokollen for denne undersøgelse blev gennemgået og godkendt af den interne gennemgang bestyrelse Shin Kong Memorial Hospital. Data blev indhentet fra en efterfølgende vedligeholdt database bestående af patienter evalueret for mavekræft fra 1993 til 2007. Tumorer blev iscenesat i henhold til kriterierne i det amerikanske Joint Commission for Cancer (AJCC 6 th edition) for mavekræft og blev klassificeret histologisk i henhold til WHO-kriterierne; Laurens klassifikation blev også anvendt (tarm typen GC svarer til godt-eller moderat differentierede tumorer, diffuse typen svarer med dårligt differentierede tumorer). En retrospektiv gennemgang af patienternes journaler blev også afsluttet, og data blev indsamlet for alder, køn, og sidste patologisk diagnose.
I perioden fra januar 1993 til december 2007, 500 patienter fik helbredende resektion for mavekræft på Institut for Kirurgi af Shin-Kong Wu Ho-Su Memorial Hospital. Blandt disse, 95 patienter (19%) udviklede en gentagelse under langvarig opfølgning.
Fyrre patienter med mavekræft blev tilfældigt udvalgt som fag i vores undersøgelse. Vi analyserede retrospektivt CD44 /CD24-ekspression i patienternes postoperative patologiske prøver. Patienterne blev inddelt i to grupper; 20 patienter med tilbagevendende mavekræft blev defineret som studiegruppen og de øvrige 20 patienter uden tilbagevendende mavekræft blev kategoriseret som kontrolgruppen. Blandt patienter i den ikke-recidiv kontrolgruppe, den minimale sygdomsfri overlevelse var 4 år (2002-2006) og den maksimale sygdomsfri overlevelse var 18 år (1994-2012). I alt 14 patienter fra 20 ikke-recidiv gruppe lever stadig i dag. Alle inkluderede patienter forudsat underskrevet informeret samtykke til at deltage i undersøgelsen.
Tissue forberedelse
Immunhistokemi pletter for CD44 og CD24 blev udført for alle prøver. De kræft væv blev fikseret med formalin og indstøbt i paraffin. Efter paraffin fjernelse og rehydrering, blev antigen-genvinding udføres ved at placere sektioner i et bægerglas indeholdende tilstrækkelige mængder af citratbuffer (pH 6,0), derefter opvarmning i trykkoger i 10 minutter og afkøling til stuetemperatur. Efter 10 minutter blev 3% H2O2 tilsat. Primært antistof og sekundært antistof (Envision Detection Kit, Wonderful Life Science Co. Ltd, Taiwan) blev tilsat efter 60 minues og 90 minutter, henholdsvis koblet med PBS vask i mellem tilsætning af antistoffer. DAB substratopløsning blev efterfølgende tilsat og vaskes med rindende vand før modfarvning med hæmatoxylin. Endelig blev vævene vasket med destilleret vand, dehydreret og monteret til mikroskopisk bedømmelse. Intensiteten (0, 1+, 2+, 3+) i tumorceller farvning blev uafhængigt evalueret af to patologer, og afvigende resultater blev løst ved at gennemgå de sager sammen og blive enige om de scores. En fuldstændig negativ farvning blev scoret som negativ (0). En svag farvning (1+) blev defineret som minimale, men utvetydig farvning i mindre end 10% af tumorcelle. Kraftigere eller mere omfattende farvning blev bedømt som moderat /stærkt positiv (2 + /3 +) (figur 1). Tumorer med svage og moderate /stærk farvning blev defineret som havende positiv ekspression, mens dem med negativ farvning kun blev defineret som negativ ekspression. Figur 1 Immunohistokemisk farvning af C44 /CD24-proteinekspression i tilbagevendende gastrisk cancer væv (400x). A: CD44 2+, B: CD24 -, C: CD44 -, D:. CD24 3+
Statistisk analyse
Data blev præsenteret som gennemsnit ± SD for kontinuerlige variabler, og frekvenser med procentdele for kategoriske variable. Forskelle mellem studiegruppen (recidiv) og kontrolgruppen (ikke-recidiv) blev analyseret ved hjælp af uafhængige t
-test test for kontinuerte variable, og Chi-square test eller Fishers eksakte test for kategoriske variabler som passende. At undersøge sammenslutning af CD44 og CD24-ekspression samt andre risikofaktorer med mavekræft tilbagefald, de punktestimater og 95% konfidensintervaller (CIS) af odds ratio (OR) blev beregnet ved univariate og multivariate logistiske regressionsmodeller. Multivariat logistisk regression med baglæns selektion blev anvendt, hvor variable, der ikke forbedrer model fit på P
< 0,05 blev kasseret; dog CD44 og CD24 ekspression samt alder var altid tvinges ind i modellen. To multivariate modeller blev anvendt til at vurdere sammenslutning af CD44 og CD24 udtryk med mavekræft tilbagefald: Model 1 betragtes CD44 og CD 24 som to variable, mens model 2 betragtes den kombinerede CD44 /CD24 udtryk som en variabel. Alle statistiske analyser blev udført med SAS-software-version 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA). En to-tailed P. ≪ 0,05 angivet statistisk signifikans
Resultater
I alt 40 patienter blev inkluderet i denne undersøgelse, herunder 19 mænd og 21 kvinder med gennemsnitsalder på 68,4 ± 11,4 år gammel (spænder fra 44 til 88 år gammel). Sammenligning af demografiske og kliniske karakteristika mellem studiegruppen og kontrolgruppen er vist i tabel 1. Undersøgelse gruppe forsøgspersoner var mere tilbøjelige til at blive klassificeret som højere TNM stadie (III-IV) end kontrolgruppen fag (80% vs. 25%, P
= 0,001). Desuden er andelen af ​​lymfeknudemetastase var signifikant højere i studiegruppen end i kontrolgruppen (90% vs. 45%, p
= 0,002). Desuden var andelen af ​​patienter med fem eller flere metastatiske lymfeknuder var også signifikant højere i undersøgelsen gruppen end i kontrolgruppen (45% vs. 15%, p
= 0,007). Ingen signifikante forskelle blev fundet i andre egenskaber mellem studiegruppen og kontrolgruppen. (Tabel 1) .table 1 Sammenligning af demografiske og kliniske karakteristika mellem patienter med /uden mavekræft gentagelse
Kendetegn
Study Group
kontrolgruppe
P-værdi
(n = 20)
(n = 20) Vejviser gentagelse
Ikke-gentagelse

Køn, n (%)
Male
12 (60,0)
7 (35,0)
0,113 †
Female
8 (40,0)
13 (65,0)
Alder (år)
gennemsnit ± SD
71,2 ± 10,6
65,7 ± 11,7
0,128 ‡
Aldersgruppe, n (%)
≤65
6 (30,0)
10 (50,0)
0,197 †
> 65
14 (70,0)
10 (50,0)
Histologi, n (%)
Moderat differentieret (tarm type)
9 (45,0)
6 (30,0)
0,327 †
Dårligt differentierede (diffus type)
11 (55,0)
14 (70,0)
Tumor placering, n (%)
Øvre tredjedel af maven
5 (25,0)
10 (50,0)
0.191¶
Mellemøsten tredjedel af maven
1 (5,0)
0 (0.0)
nederste tredjedel af mave
14 (70,0)
10 (50,0)
TNM Stage, n (%)
i-IIa
4 (20,0)
15 (75,0)
0,001 * †
III-IV
16 (80,0)
5 (25,0)
lymfeknudemetastase, n (%)
Ingen
2 (10,0)
11 (55,0)
0,002 * †
Ja
18 (90,0)
9 (45,0)
Antal lymfeknude metastaser, n (%)
0
2 (10,0)
11 (55,0)
0,007 * †
1-4 s
9 (45,0)
6 (30,0)
≥5
9 (45,0)
3 (15,0)
CD44 udtryk, n (%)
CD44-
10 (50,0)
10 (50,0)
1,000 †
CD44 +
10 (50,0)
10 (50,0)
CD24 udtryk, n (%)
CD24-
10 (50,0)
13 (65,0)
0,337 †
CD24 +
10 (50,0)
7 (35,0)
CD44 /CD24-ekspression, n (%)
CD44- /CD24-
5 (25,0)
8 (40,0)
0.622¶
CD44- /CD24 +
5 (25,0)
2 (10,0)
CD44 + /CD24-
5 (25,0)
5 (25,0)
CD44 + /CD24 +
5 (25,0)
5 (25,0)
en To patienter kontrol med TNM Stage 0 blev grupperet i fase i-II
* P
. <. 0,05
† Chi-square test; ‡ uafhængig t
-test; ¶Fisher eksakte test.
Univariate og multivariate regressionsanalyse Salg The univariate og multivariate sammenslutninger af CD44 og CD24 ekspression, såvel som andre risikofaktorer med gastrisk cancer tilbagefald, er vist i tabel 2. I univariat analyse, patienter med CD44 + viste ingen forskel i risiko for mavekræft tilbagefald i forhold til dem, der var CD44- (OR = 1,00, 95% CI: 0,29-3,45, P
= 1,000). Sammenlignet med patienter, der var CD24-, dem med CD24 + havde højere sandsynlighed for at have mavekræft tilbagefald, men uden betydning (OR = 1,86, 95% CI: 0,52-6,61, P
= 0,339). Sammenlignet med patienter med kombineret udtryk for CD44- /CD24-, de ujusterede yderste periferi for CD44- /CD24 +, CD44 + /CD24- og CD44 + /CD24 + var 4,00 (95% CI: 0,55-29,10), 1,60 (95% CI: 0,30 -8,49), og 1,60 (95% CI: 0,30-8,49), hhv. Nr signifikans blev vist i den rå sammenslutning af CD44 /CD24-ekspression med gastrisk cancer tilbagefald. Også højere TNM stadie (III-IV), lymfeknude metastaser og højere antal metastaser lymfeknuder, blev alle signifikant associeret med mavekræft recurrence.Table 2 univariate og multivariate sammenslutninger af CD44 /CD24-ekspression og andre risikofaktorer med mavekræft tilbagefald
Kendetegn
Gentagelse sats
univariate
P-værdi
Model 1 †
P -værdi

Model 2 ‡
P -værdi Vejviser OR (95% CI)
AOR (95% CI)

AOR (95% CI)
CD44 udtryk
CD44-
50,0% (10/20)
1,00 (reference)
-
1,00 (reference) -
CD44 +
50,0% (10/20)
1,00 (0,29-3,45)
1,000
0,66 (0,10-4,26)
0,658
CD24 udtryk
CD24-
43,5% (10/23)
1,00 (reference) -
1,00 (reference) -
CD24 +
58,8% (10/17)
1,86 (0,52-6,61)
0,339
0,09 (0,01-1,35)
0,081
CD44 /CD24-ekspression
CD44- /CD24 -
38,5% (5/13)
1,00 (reference) -
1,00 (reference) -
CD44- /CD24 +
71,4% (5 /7)
4,00 (0,55-29,10)
0,171
0,60 (0,03-10,67)
0,731
CD44 + /CD24-
50,0% (5/10)
1,60 ( 0,30-8,49)
0,581
1,61 (0,15-17,36)
0,695
CD44 + /CD24 +
50,0% (5/10)
1,60 (0,30-8,49)
0,581
0,06 (0,002 til 2,31)
0,131
Køn
Mand
63,2% (12/19)
2,79 (0,77-10,04)
0,117
39,64 (1,85 -848,44)
0,019 *
21,59 (1,24 til 377,26)
0,035 *
Female
38,1% (8/21)
1,00 (reference)
-
1,00 (reference) -
1,00 (reference) -
Alder (år)
≤65
37,5% (6/16)
1,00 (henvisning ) -
1,00 (reference) -
1,00 (reference) -
> 65
58,3% (14/24)
2,33 (0,64-8,54)
0,201
7,77 (0,89-67,99)
0,064
4,07 (0,49-34,16)
0,196
Histologi
Moderat differentieret (intestinal type)
60,0% (9/15)
1,91 (0,52-7,01)
0,330
Dårligt differentierede (diffus type)
44,0% (11/25)
1,00 (reference)
-
Tumor placering
øverste tredjedel + Mellemøsten tredje
37,5% (6/16)
1,00 (reference) -
Lavere tredje
58,3% (14 /24)
2,33 (0,64-8,54)
0,201
TNM Stage
I-IIa
21,1% (4/19)
1,00 (reference)
-
1,00 (reference) -
1,00 (reference) -
III-IV
76,2% (16/21)
12,0 (2,70 til 53,3)
0,001 *
9,63 (1,05-88,76)
0,046 *
41,01 (3,62 til 464,91)
0,003 *
lymfeknudemetastase
Ingen
15,4% (2/13)
1,00 (reference) -
1,00 (reference) -
Ja
66,7% (18/27)
11,0 (2,00 til 60,5)
0,006 *
20,92 (1,20 til 365,55)
0,037 *
Antal lymfeknude metastaser
0
15,4% (2/13)
1,00 (reference)
-
1-4 s
60,0% (9/15)
8,25 (1,33 til 51,2)
0,024 *
≥5
75,0% (9/12)
16,5 (2,25 til 121,2)
0,006 *
† I multivariat model 1, blev CD44 og CD24-ekspression betragtes som to variable.
‡ I multivariat model 2 blev CD44 og CD24 udtryk kombineret som en variabel for at vise forskellige . kombinationer
en To kontrolpatienter med TNM Stage 0 blev grupperet i fase i-II
Bemærk: OR, odds ratio;. AOR, justeret odds ratio
* P
. <. 0,05 Salg In multivariat model 1, da CD44 og CD24-ekspression og alder blev tvunget ind i modellen, kun køn (mand vs. kvinde, Aor = 39,64 , 95% CI: 1,85 til 848,44, P
= 0,019), TNM stadie (Stage III-IV vs I-II, AOR = 9,63, 95% CI: 1,05-88,76, P
= 0,046), og lymfeknude metastaser (ja vs. nej, AOR = 20,92, 95% CI: 1,20 til 365,55, P
= 0,037) opnåede et signifikansniveau at tillade dem at blive tilbageholdt i multivariat logistisk regressionsmodel. Men efter justering for andre risikofaktorer, sammenslutningen af ​​CD44-ekspression (AOR = 0,66, 95% CI: 0,10-4,26, P
= 0,658) og CD24-ekspression (AOR = 0,09, 95% CI: 0,01-1,35, P
= 0,081) med gastrisk kræft tilbagefald var stadig ikke signifikant.
i multivariat model 2, når de kombineres CD44 /CD24-ekspression og alder blev tvunget ind i modellen, kun køn (mand vs. kvinde, AOR = 21,59, 95% CI: 1,24 til 377,26, P
= 0,035) og TNM stadie (fase III-IV vs I-II, AOR = 41,01, 95% CI: 3,62 til 464,91, P
= 0,003) opnåede en signifikansniveau at tillade dem at blive tilbageholdt i multivariat logistisk regressionsmodel. Sammenlignet med patienter med kombineret udtryk for CD44- /CD24-, de justerede yderste periferi for CD44- /CD24 +, CD44 + /CD24- og CD44 + /CD24 + var 0,60 (95% CI: 0,03-10,67), 1,61 (95% CI: 0,15 -17,36), og 0,06 (95% CI: 0,002 til 2,31), hhv. Efter justering for andre risikofaktorer, sammenslutningen af ​​CD44 /CD24 udtryk med mavekræft tilbagefald var stadig ikke signifikant.
Diskussion
Evaluering af korrelationen af ​​CD44 /CD24 udtryk med tilbagevendende mavekræft viste ingen forskelle i risikoen for gastrisk cancertilbagefald mellem CD44 + patienter og CD44- patienter. Selvom CD24 + patienter havde en højere sandsynlighed for mavekræft tilbagefald end CD24- patienter blev signifikans ikke påvist. Vores undersøgelse resultater antyder, at disse molekyler ikke synes at være klinisk nyttige til forudsigelse af gastrisk karcinom tilbagefald efter kurativ resektion.
Rolle CD44 og CD24-ekspression i gastrisk karcinom blevet undersøgt i næsten tredive år. Talrige undersøgelser har fokuseret på den diagnostiske og prognostiske betydning af CD44-ekspression i humane tumorer, især gastrisk cancer. I 1982 blev CD44 identificeret som en overflade glycoprotein og en lymfocyt homing receptor, der findes på lymfoide og epitelceller [8]; dens vigtigste funktion på lymfocytter er mediere interaktion med endotelet, men dens funktion på epitelceller er ikke helt forstået [9]. CD44-proteiner tilhører en familie af type I transmembrane glycoproteiner, der er kodet af et enkelt, stærkt konserveret gen lokaliseret på den korte arm af kromosom 11 hos mennesker; to molekylære størrelser er blevet identificeret: lav M
r CD44 (80-90 x 10 3) udtrykkes i lymfevæv og høj M
r CD44 (130-160 x 10 3) udtrykkes i tumorceller og keratinocytter [10]. Nogle aggressive tumorer rapporteres at være forbundet med ekspressionen af ​​CD44. Overekspression af CD44, defineret ved tilsyneladende forøget ekspression af CD44-protein, er blevet forbundet med dårlig prognose med tumorprogression og metastatisk potentiale i flere humane maligniteter, herunder gastrisk cancer [7], colorektal cancer, brystcancer [5, 6], livmoderkræft , ovariecancer, blærecancer, lungecancer, hæmatopoietiske maligniteter, og gliomer [11]. En retrospektiv undersøgelse af 100 patienter med mavekræft evaluerede udtryk for CD44 og dets prognostisk betydning, at konkludere, at dette celleadhæsionsmolekyle er stærkt udtrykt i gastrisk adenocarcinom [7]. I den undersøgelse ekspression af CD44 korreleret med en dårlig prognose hos patienter med intestinal type gastrisk adenocarcinom. Disse forskere foreslog, at CD44 kan anvendes som en prognostisk markør for denne gruppe patienter. I denne undersøgelse er andelen af ​​lymfeknudemetastase var signifikant højere i GC studiegruppe end i kontrolgruppen og andelen af ​​patienter med 5 eller flere metastatiske lymfeknuder var også signifikant højere i undersøgelsen gruppen end i kontrolgruppen. Men mens CD44 var absolut forbundet med GC i vores undersøgelse og prognostisk til en vis grad, vi ikke kunne kontrollere dets prognosemuligheder i form af GC tilbagefald efter tumor resektion.
CD24, en mucin-typen GPI-linked celle overflade molekyle på humane neutrofiler og præ-B-lymfocytter, spiller en vigtig rolle i marginering og adhæsion af celler under forskydningskraft blodgennemstrømning [11]. Positive CD24-ekspression sig at forekomme i en delmængde af GC og at korrelere med lymfatisk invasion, invasion blodkar og ringe overlevelse. Den klinisk-patologisk betydning af CD24-ekspression i human gastrisk adenocarcinom blev evalueret af Chou og kolleger, som konkluderede, at cytoplasmatisk ekspression af CD24 var forbundet med invasivitet og dårligere prognose og kan tjene som en ny mål for prognostisk forudsigelse og adjuverende behandling af patienter med diffus-typen gastrisk adenocarcinom efter tumorresektion [12]. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at undersøge andre kombinationer af adhæsionsmolekyler.
I den foreliggende undersøgelse, CD44 og CD24 ekspression, uafhængigt og i kombination, var ikke associeret med GC gentagelse. Carcinoma af tarmens type er oftere CD44s og CD44v6 positive end carcinomer i diffuse type, og det er vigtigt at subclassifying tumortyper i undersøgelser af CD44 i human cancer er påvist [13]. Når cytoplasmatisk CD24-ekspression blev undersøgt i diffust-typen gastrisk adenocarcinom blev det vist at være associeret med invasivitet, lymfeknudemetastase og dårligere prognose, men ikke specifikt forbundet med tilbagefald efter tumorresektion; blev imidlertid ingen signifikante forskelle ses i tumor stadium eller lymfeknudemetastase mellem blandet type GC med eller uden CD24-ekspression [12]. Selv om der ikke er nogen ideel cross-sammenligning mellem forskellige histologiske klassificering systemer, vi klassificere GC ifølge den histologiske WHO klassificering og Lauren indplacering i den foreliggende undersøgelse. Vi havde ingen tilfælde af lymphoepithelial-lignende carcinom eller slimhinde-associerede lymfoide væv (MALT) lymfom.
Anden mulig forklaring på manglende signifikante sammenhænge mellem CD44 og CD24 og tilbagefald kan være den særlige isoform af CD44 identificeret i vores undersøgelse. Op til syv molekylære former har forskellige funktionelle roller in vivo såsom at have forskellige evner til at binde hyaluronat, mens deres vigtigste fællestræk er deres udtryk på tumorceller og korrelation med metastaser [10]. Disse formularer kan identificeres lettere ved sekventering mRNA og kun få er identificeret ved protein-analyse. Fordelingen af ​​CD44 og CD24 kan også variere og cellulære steder i normalt væv er kun blevet identificeret i dyremodeller, og er ikke bekræftet i normalt humant væv. Dog er større former findes som mindre komponenter i normalt væv og lav M
r former er forbundet med lymfoide celletyper i væv [14]. Funktionen af ​​CD44 /CD24 er kompleks og ændringer i CD44, navnlig er blevet bemærket i carcinogenese, herunder genekspression modulation, splejsning af RNA og ændret glycosylering [13]. Enhver af de ovennævnte faktorer kan forklare den tilsyneladende mangel på samarbejde med tilbagefald i vores undersøgelse. Det er klart, der er behov for mere forskning.
Molekylære involverede veje i GC er blevet identificeret i løbet af de sidste tyve år [15]. Aktuelle undersøgelser af molekylære markører for gastrisk stamceller og gastriske stamceller kan holde lovende for at lære mere om GC, dens progression og tilbøjelighed til tilbagefald, og i sidste ende for behandling applikationer. Denne mulighed er primært fordi gastrisk væv, samt tarmvæv undergår konstant epitelcelle udskiftning og fordi stamceller og progenitorceller spiller vigtige roller i fornyelse af gastriske kirtler og i epitelvæv reparation efter vævsskade [16]. Zhang et al. [17] undersøgte CD44 og CD24 i gastrisk cellelinier, AGS og mavekræft væv og identificeret den tumorigene egenskaber, selv-fornyelse og differentieret afkom i CD44 + CD24 + og CD44-CD24- cellepopulationer. Så få som 200 i den positive kombination af celler injiceret i mus genererede tumorer i 50%, mens mange tusinde flere negative kombinerede celler var nødvendige for at danne en tumor i en anden gruppe mus, hvilket antyder, at subpopulationen af ​​CD44 + CD24 + gastriske cellelinier (AGS tumorcellelinier) er GC stamceller [17]. I proteinstudier, CD24, som er forbundet med tumor metastase, og galectin-1-ekspression, som er forbundet med immunrespons og tumor progression, blev undersøgt i GC patienter, med særlig vægt på farvning intensitet og clinicopathologic variabler; Forskerne konkluderede, at disse proteiner var uafhængige prognostiske indikatorer for ringe overlevelse (selvom ikke specifikt er forbundet med gentagelse) og kunne være nyttige som terapeutiske mål [18]. Da vi endnu ikke studerer den unikke stamfader og stamceller populationer i menneskelige modeller, skal vi fortsætte med at udforske tumor-specifikt protein udtryk, der kan være forbundet med GC og tilbagevendende GC, der søger at finde en molekylær basis for denne globalt udbredt sygdom og nye veje til diagnose, prognose og behandling.
begrænsninger
Denne undersøgelse har flere begrænsninger, med den største begrænsning er dets retrospektiv karakter og begrænset stikprøvestørrelse. Desuden den funktionelle betydning af CD44 + /CD24- celler er stadig uklar. Deres betydning i metastase, og dermed i sygdomstilbagefald og gastrisk kræft dødelighed, er endnu ikke godt forstået. Denne lille retrospektive serier tjente som en indledende undersøgelse for at undersøge potentialet association mellem CD44 og CD24 og gastrisk kræft tilbagefald, men der er behov for en undersøgelse med en større prøve at bekræfte vores foreløbige resultater. Vi må også erkende, at vi ikke kunne bekræfte intra- heterogenitet fordi der var kun et begrænset antal kirurgisk resektion eksemplarer af recidiverende eller metastaserende tumorer for gentage CD44 /CD24 farvning, som kan anses for i fremtidige studier.
Konklusion
Afslutningsvis hverken individuelle udtryk af CD24 og CD44 eller kombineret udtryk for CD44 /CD24 var forbundet med gentagelse af gastrisk karcinom. Da adhæsionsmolekyler CD44 og CD24 ikke synes at være klinisk anvendelig til forudsigelse af gastrisk karcinom tilbagefald efter kurativ resektion, er fremtidig forskning berettiget til begge bekræfte disse resultater og til at undersøge andre mulige biomarkører.
Erklæringer
Tak
forfatterne vil gerne takke Dr. Cecile Logan for at gennemgå Immunofarvningen resultater og Ms. Chin Yu-Chun for hendes teknisk bistand.
forfattere 'originale indsendte filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 12876_2012_757_MOESM1_ESM.tiff Forfatternes oprindelige fil til figur 1 Konkurrerende interesser
Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende interesser
Forfattere. Bidrag
CSY, CMOY, og CWL udførte størstedelen af ​​forsøgene; CMOY og YHC indsamlet al menneskelig materiale; CCL revideret patologier; CSL analyserede data; CSY og CMOY designet undersøgelsen og skrev manuskriptet. Alle forfattere læst og godkendt den endelige manuskript.

• Ekspression af serum miR-20a-5p, lad-7a, og miR-320a og deres sammenhænge med pepsinogen i atrofisk gastritis og gastrisk cancer: en case-kontrol undersøgelse
• Inhibering af gastrisk H, K-ATPase-aktivitet og gastrisk epitelcelle IL-8 sekretion af pyrrolizin derivat ML 3000