Abstrakt
Gastric tarm metaplasi (IM) är en mycket utbredd preneoplastisk skada; emellertid de molekylära mekanismer som reglerar dess utveckling fortfarande oklara. Vi har tidigare visat att en population av celler som uttrycker tarm stamceller (ISC) markör LGR5 Citation. Jang BG, Lee BL, Kim WH (2015) Intestinal markörer stamceller i tarm Metaplasi av magen och Barretts esofagus. PLoS ONE 10 (5): e0127300. doi: 10.1371 /journal.pone.0127300 Academic Redaktör: Anthony W.I. Lo, Queen Mary Hospital, HONGKONG Mottagna: 8 januari 2015, Accepteras: 13 april 2015, Publicerad: 21 maj, 2015 Copyright: © 2015 Jang et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit datatillgänglighet: Alla relevanta uppgifter är inom pappers- och dess stödjande information filer Finansiering: Denna forskning stöddes av ett bidrag på Korea Health Technology R &D Project via Korea Health Industry Development Institute (KHIDI), finansierat av ministeriet för. hälsa & Välfärd, Sydkorea (licensnummer: HI14C1277). Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns Introduktion preneoplastiska intestinal metaplasi (IM) är associerat med en ökad risk för magsäckscancer och presenterar i ungefär en fjärdedel av personer över hela världen. [1] IM resulterar ofta från kronisk atrofisk gastrit efter infektion med Helicobacter pylori Eftersom IM är en kritisk föregångare i gastric cancer, möjligheten att vända dessa lesioner är av stort intresse. [5] Tidigare undersökningar har rapporterat att utrota H upptäckten av normala magslemhinnan stamceller sammanföll med identifiering av Wnt målgenen LGR5 Barretts esofagus (BE) är en metaplastisk omvandling till tarmkolonn epitel och är associerad med en ökad risk för adenocarcinom, liknande den som observerats med gastric IM. [12] i synnerhet människa BE lesioner uppvisar en uppreglering av LGR5 Flera molekylära ISC markörer har identifierats utöver LGR5 Material och metoder ämnen Formalin. -Fast och paraffininbäddade (FFPE) mag prover med eller utan intestinal metaplasi (IM) samlades från fem patienter som genomgick endoskopiska submukosala dissektion vid Seoul National University Hospital (SNUH) från 2008 till 2010. IM lesioner kategoriseras i gastric-och -intestinal blandade (GI) och uteslutande intestinala (i) subtyper (även känd som ofullständiga och fullständiga typer, respektive). [19] Prover av Barretts esofagus isolerades från två patienter med adenokarcinom i matstrupsövergången, och en normal tunntarms provet var erhållet från en patient med koloncancer. Färska frysta icke-tumör gastric vävnader fanns tillgängliga från 28 gastric cancerpatienter som genomgått kirurgisk gastrektomi 2001-2005 vid SNUH. Alla prover från människa erhölls genom kurativ kirurgisk resektion . Denna retrospektiva studie utfördes med användning av lagrade prover efter patologisk diagnos. Prover anonymiseras före studien, vilket skriftligt samtycke inte behövdes. Studiens utformning godkändes av Institutional Review Board vid Seoul National University Hospital under förutsättning av anonymisering (referens: H-1209-037-424). In situ hybridisering för LGR5 Totalt RNA extraherades från paraffininbäddade vävnadssnitt med en RNeasy FFPE Kit (Qiagen, Valencia, CA, USA) såsom tidigare beskrivits. [20] Reverse-transkriberade cDNA framställdes från 1-2μg av totalt RNA med slumpmässiga hexamer-primers och den GoScript omvänd transkriptionssystemet (Promega, Madison , WI, USA). Kvantitativ realtids-PCR (QRT-PCR) reaktioner utfördes med hjälp av förblandning EX Taq (Takara Bio, Shiga, Japan) enligt tillverkarens rekommendationer, och data analyseras med Sequence Detection System (version 1.4, Applied Biosystems). Följande TaqMan genuttryck analyser användes: Hs00173664_m1 ( LGR5 CDX2 cDNA (pCMV6-CDX2) köptes från OriGene (Rockville, MD, USA). Gastric cancerceller såddes vid 1 x 10 6 celler /brunn i 6-brunnar och transfekterades med 2,5 | ig av cDNA eller tom kontrollvektor med hjälp av Lipofectamine 2000 transfektion reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) enligt tillverkarens instruktioner. Cellerna utsattes för QRT-PCR-analys ca 24 h efter transfektion. Statistiska analyser utfördes i Prism 5 (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA). Samband mellan uttrycken av tarmstamcellsmarkörer och CDX2 1. ISC markörer korrelerar med CDX2 nivåer i magslemhinnan Vi har tidigare rapporterat om den relativa ökningen av LGR5 För att bekräfta den positiva sammanslutning av OLFM4 Mössor och EPHB2 hotell med IM, valde vi fyra histologiskt-distinkt gastriska vävnadstyper; normal antral mucosa utan IM (n = 4), kronisk aktiv gastrit utan IM (n = 3), gastrisk och intestinal blandad typ (GI-typ) IM (n = 6) och dessutom bara intestinal typ (I-typ) IM (n = 5) (fig 2A). Claudin-18 är den mest högt uttryckt tight junction protein i magen. Som väntat visade våra analyser att claudin-18 uttryck minskade med ökande grad av IM ( p Hotel < 0,0001) (Figur 2B), medan CDX2 3. LGR5 För att avgöra om en direkt relation förelåg mellan LGR5 Köpa och ISC markörer i IM, undersökte vi om deras samexpression av RNA in situ hybridisering. Uttrycket av LGR5 4. ISC markörer uttrycks i Barretts esofagus lesioner Vi sökte bredvid avgöra om ISC markörer också uttrycktes i Barretts esofagus (BE). För detta har två exemplar av adenocarcinom uppstår i bakgrunden av bedömas för expression av CDX2 Diskussion näs /halsregionen av den gastriska enheten tidigare trott att omfatta stamceller nisch där IM inträffar och det har föreslagits att metaplasic progression från en enda gastric klonal enhet sker genom klonal expansion och krypta fission. [8], eftersom LGR5 Olika försök har försökt att klassificera IM magen lesionstyper. Matuskura et al. föreslog ett klassificeringssystem baseras på närvaron av tunntarmen matsmältningsenzymer; definieras som fullständig och ofullständig typ IM, [26], medan Jass och Filipe infört tre kvaliteter av IM på grundval av morfologin och histokemisk mucin färgning. [27] På senare tid har en ny klassificering har föreslagits av Tatematu et al., Där IM kan delas in i gastric-och-tarm blandad (GI) och enbart intestinala (I) typer. [19] I GI-typ IM , mag- och tarm fenotypiska markörer visas på både körtel och cellulära nivåer, så det har föreslagits att IM kan orsakas av den gradvisa intestinalization av stamceller från Gi- till i-typ. [28] Här vi observerade en gradvis ökning av ISC markörerna OLFM4 Köpa och EPHB2 hotell med ytterligare intestinalization av magslemhinnan. Tillsammans med den ökande CDX2 H Barretts esofagus (BE) är en precancerös lesion som delar flera morfologiska och molekylära egenskaper med gastric IM, främst eftersom det är en metaplastisk omvandling till tarmkolonn epitel till följd av kronisk inflammation. Vi tror att denna studie karaktäriserar en annan likhet mellan dessa två lesioner i närvaro av LGR5 CDX2 är en master transkriptionsfaktor för expression av intestinala differentieringsmarkörer, och tros ligga bakom utvecklingen av BE. Medan normal magslemhinna inte uttrycker CDX2 Sammanfattningsvis har vi bestämt att LGR5
ökar anmärkningsvärt i IM. I denna studie undersökte vi ytterligare de molekylära egenskaperna hos dessa LGR5
+ celler i IM genom att undersöka uttrycksprofilen för flera ISC markörer. Anmärkningsvärt, fann vi att ISC markörer-inklusive OLFM4 Köpa och -är EPHB2
positivt i samband med CDX2
uttryck i icke-tumör gastric vävnader. Denna slutsats bekräftades i magen lesioner med eller utan metaplasi, som visade att OLFM4 och EPHB2 uttryck ökade gradvis med metaplastisk progression. Dessutom RNA in situ-hybridisering visade att LGR5
+ celler samuttrycka flera ISC markörer och förblev begränsat till basen av metaplastiska körtlar, som påminner den hos normala tarm kryptor, medan de i normala antral körtlar uttryckta none av dessa markörer. Dessutom har ett stort antal ISC markör-uttryckande celler diffust fördelade i gastriska adenom, vilket tyder på att dessa markörer kan underlätta gastrisk tumörgenes. Dessutom Barretts esofagus (BE) -som är histologiskt liknar intestinal metaplasi-uppvisade en liknande fördelning av ISC markörer, vilket indikerar närvaron av en stamcellspopulation med intestinal differentiering potential. Sammanfattningsvis identifierade vi att LGR5
+ celler i magsäcken IM och BE samuttrycker ISC markörer, och uppvisar samma uttrycksprofilen som de som finns i normala tarm kryptor. Sammantaget ger dessa resultat implicerar en intestinal liknande stamcellspopulation i patogenesen av IM, och utgör en viktig grund för att förstå utvecklingen och upprätthållandet av denna sjukdom
, som sedan kan gå vidare till gastric epitelial dysplasi eller cancer. [2] En mängd olika genetiska och epigenetiska förändringar har varit inblandade i patogenesen av humant IM. [3] Dessutom långsiktig IM inducerad av CDX2 uttryck har varit visat sig leda till magcancer i transgena möss, vilket tyder på att IM själv spelar en viktig roll i uppkomsten av magsäckscancer. [4]
. pylori
är tillräcklig för att vända IM, men andra har funnit att en betydande andel av patienterna fortfarande närvarande med IM även efter effektiv utrotning. [5] IM tros vara den "point of no return" i histologiska kaskad av kronisk gastrit till adenokarcinom, [6] således, försök att förstå de molekylära mekanismer som reglerar inrättande och underhåll av IM är avgörande för att utveckla strategier för att avbryta gastrisk cancer. Till exempel är CDX2 auto föreslås att ha en stor inverkan på stabiliteten i IM skador. [7] Medan IM kryptor i den mänskliga magen är klonala och innehåller multipotenta stamceller, [8] det fortfarande dåligt förstådd om infödda gastric stamceller den ursprungliga källan till metaplasi eller om de bara tjänar till att upprätthålla etablerade lesioner.
som stamcells markör i tarmepitelet. [9] En härstamning-spårning studien visade senare att LGR5
+ celler är multipotenta stamceller som ansvarar för förnyelse av mag epitel i mössen. [10] Vår grupp tidigare visat att ett litet antal LGR5
+ celler också bor i botten av mänskliga antral körtlar och öka dramatiskt i IM skador. [11] Dessa resultat ledde oss att spekulera i att LGR5
kan vara en markör för tarm stamceller (ISCs) som arbetar med underhåll av IM.
uttryck jämfört med normal skivepitel, och tyder på förekomsten av en LGR5
+ stamceller i BE. [13]
, inklusive PROM1
[14], BMI1
[15], LRIG1
[16], och ASCL2
, som identifierades som en transkriptionsfaktor för att kontrollera intestinal stamcells öde. [17] Dessutom OLFM4
[17] och EPHB2
[18] är också högt uttryckt i ISCs. I denna studie, som syftar vi att upptäcka ytterligare ISC markörer som är inblandade i uppkomsten och upprätthållandet av gastrisk IM och BE, och undersöka deras samlokalisering med LGR5
+ celler genom RNA in situ hybridisering till ytterligare avslöja molekylära egenskaper LGR5
+ celler i IM med avseende på tarmliknande stamcells fenotyp
Etiska riktlinjer
RNA in situ hybridisering
, ASCL2
, OLFM4
och EPHB2
genomfördes med RNAscope FFPE analyskitet (Advanced Cell Diagnostics, Inc. , Hayward, CA, USA) såsom beskrivits tidigare [11]. Positiv färgning definierades som närvaro av bruna punktuell prickar i kärnan och /eller cytoplasma. Ubiquitin C och bakterie DapB
gener tjänade som positiva och negativa kontroller, respektive.
RNA-extraktion och kvantitativ realtids-PCR
), Hs00362096_m1 ( EPHB2
), Hs00270888_s1 ( ASCL2
), Hs00197437_m1 ( OLFM4
), Hs01009250_m1 ( PROM1
), Hs00394267_m1 ( LRIG1
), Hs00995536_m1 ( BMI1
), Hs00178027_m1 ( DCLK1
), Hs010780810_m1 ( CDX2
), Hs00212584_m1 ( CLDN18
), och Hs0275899_g1 ( GAPDH
). GAPDH
fungerade som den endogena kontrollen.
Transfektion av CDX2
Statistisk analys
bedömdes genom linjär regressionsanalys. Genomsnittliga skillnaderna mellan de grupper av FFPE gastriska prover bedömdes av en envägs ANOVA. Mellan-grupp jämförelser efter transfektion av CDX2
i magcancer cellinjer utfördes med användning av Student t
-tests. Resultaten ansågs signifikanta när p Hotel < 0.05.
Resultat
+ celler i IM skador i människans mage. [11] Detta fick oss att hypotes är att dessa LGR5
+ celler kan fungera som självförnyande stamceller för att hjälpa till att upprätthålla och fortplantningen av metaplastiskt epitel i magslemhinnan. Således, syftar vi att identifiera ytterligare ISC markörer som korrelerade med CDX2
uttryck i IM. För detta, mätt vi uttrycksnivåer av CDX2 Mössor och åtta ISC markers- LGR5
, ASCL2
, OLFM4
, EPHB2
, PROM1
, DCLK1
, LRIG1
och BMI1
-in normal gastrisk vävnad. De undersökta vävnaderna visade ett brett utbud av CDX2
nivåer, som representerar de olika graderna av IM, eftersom CDX2
uttryck är positivt korrelerad med IM progression (Fig 1A). Tre ISC markörer befanns korrelera med CDX2
uttryck: OLFM4
, EPHB2
och BMI1
. I synnerhet OLFM4
( p Hotel < 0,0001, r 2 = 0,56) (Fig 1B) och EPHB2
( p
< 0,0001, r 2 = 0,52) (Fig 1C) uppvisade en stark positiv korrelation med CDX2
, medan BMI1
var omvänt korrelerade ( p
= 0,0002, r 2 = 0,42) (Fig 1D). Ingen signifikant samband med CDX2
uttryck identifierades med de övriga fem ISC markörer (S1 FIG).
2. ISC markör uttryck korrelerar med IM progression
uttryck ökade ( p Hotel < 0,0001) (figur 2C). Vi fann också att OLFM4 Köpa och EPHB2
nivåerna ökade konsekvent med varje efterföljande skada, bekräftar att dessa markörer är nära besläktade med IM progression ( p
= 0,008 och 0,001, respektive; Fig 2D och 2E). Däremot BMI1 Mössor och LRIG1
uttryck visade en tendens att minska med IM progression. ( p
= 0,002 och 0,0006, respektive, Fig 2F och 2G)
+ celler i tarm metaplasi colocalize med andra ISC markörer
, ASCL2
, EPHB2
och OLFM4
först undersöktes i en normal människans tunntarm avsnitt för att validera den här tekniken, och befanns lokalisera specifikt till celler i stamcellsnischen av intestinala kryptor som förväntat (S2 fig). Eftersom LGR5
+ celler i normala tarm kryptor uttrycker också ISC markörer, teoretiserade vi att LGR5
+ celler i IM kan också uppvisa en liknande uttrycksmönster. Således upprepas vi proceduren på varandra följande sektioner av endoskopiska submukosala dissektion prover (n = 5), som var och en innehöll multipla härdar av Gi- eller I-typ IM bland icke-tumörvävnad. Ett litet antal av LGR5
+ celler vid basen av normala antral körtlar saknade ISC markör uttryck (figur 3A), medan de i I-typ IM visade uttryckte alla tre markörer (Fig 3B) . Dessutom GI-typ IM lesioner visade samma uttryck profil övergripande utom att ISC markör uttryck var belägen ovanför de återstående mag körtlar, snarare än begränsad till de basala områden (S3 FIG). Detta uttrycksmönster observerades genomgående i alla prover. Dessa fynd tyder på att LGR5
+ celler i IM skiljer sig från dem i normal antrum i uttrycket av ISC markörer som vanligtvis är begränsade till celler i tarm kryptor. Intressant, IM härrör från fundic körtlar, där LGR5
+ celler normalt inte är närvarande, gav samma resultat (S4 FIG). Således verkar det troligt att befolkningen i LGR5
+ celler i IM inte beror på spridningen av redan existerande LGR5
+ celler, utan snarare en framväxten av LGR5
+ celler med förvärvad differentieringspotential, vilket tyder på att en tarmliknande stamcellspopulation är etablerad i IM. Dessutom gastric adenom (n = 5) uttrycktes också höga nivåer av ISC markörer igenom lesioner, snarare än begränsad till de glandulära kryptorna (fig 3C). Som visas i figur 3, är denna ansamling av ISC marköruttryckande celler över metaplasi till dysplasi sekvens implicative av deltagande tarm typ stamceller i gastric tumörbildning och ytterligare studier för att undersöka sambandet mellan tarmstamcellsmarkörer och gastric tumörutveckling är säkert motiverat.
, OLFM4
, EPHB2
och PROM1
vid QRT-PCR-analys (Fig 4A). Betecknande nog både BE och adenokarcinom uttryckte högre nivåer av alla fyra ISC markörer jämfört med den hos normala skivepitelet (fig 4B, 4C, 4D och 4E). Medan LGR5 Köpa och ASCL2
visade inga signifikanta förändringar från RT-PCR-analys, sannolikt på grund av lågt antal kopior av transkript, RNA in situ hybridisering visade en tydlig cellpopulation med LGR5
, ASCL2
och OLFM4
uttryck vid korsningen av mag- och metaplastiska körtlar, som påminner om GI-typ IM (Fig 4F, 4G, 4H, 4I och 4J).
+ celler identifieras som multitarmliknande stamceller hos möss [10] och förekommer i den mänskliga gastric antrum [11], är det rimligt att tro att IM kan utvecklas från denna cellpopulation. Emellertid kvarstår en möjlighet att en annan stamcellspopulation kunde ligga bakom denna process. Till exempel, Sox2
+ celler har också identifierats som olika gastric stamceller och etikett cellpopulation exklusivt för dem med LGR5
uttryck. [21] transdifferentiering kan också ge upphov till metaplastiska celler. Spasmolyitc polypeptid-uttryck metaplasi-där pyloric typ körtlar visas i oxyntic mucosa-härrör från mogna främsta celler, [22] snarare än LGR5
uttryckande celler. [23] I själva verket transgena CDX1
eller CDX2
uttryck resulterar i parietalcellerna härledda IM utveckling i transgena möss. [24] Därför är det fortfarande svårfångade huruvida IM är en följd av intestinal stamcells omprogrammering eller transdifferentiering av celler med förvärvad ISC-liknande egenskaper. [12, 25]
nivåer som inducerar intestinal differentiering och fenotyp dessa uttrycksmönster tyder på en omvandling av den totala stamcellspopulation mot en mer tarmliknande stamcells fenotyp. Dessutom oväntade omvänd korrelation av BMI1 Mössor och LRIG1 hotell med IM behöver ytterligare studier för att bekräfta detta resultat och att klargöra dess kliniska konsekvenser.
. pylori
utrotning har potential att förhindra gastric cancer, [29] och kan dämpa utvecklingen av precancerous magsår, såsom IM. [30, 31] Men när detta upprättats, verkar det som H
. pylori
utrotning kan inte helt förhindra magcancer. [6] I själva verket, ungefär 80% av patienter med IM visade ingen förändring eller progression av IM efter behandling med antibiotika. [31] Dessutom konstaterade en metaanalys att H
. pylori
utrotning har ingen effekt på gastrisk IM. [32] Denna oåterkallelig IM kan delvis förklaras av att upprätthålla CDX2
uttryck genom en auto slinga som är oberoende av första trigger, upprätthålla tarm fenotypen. [33] Vi visade vidare att LGR5
+ celler vid basen av metaplastiska körtlar konsekvent uttrycka andra ISC markörer, som tyder på en intestinal liknande stamcells fenotyp. Vi tror att denna stabila stamcellspopulation kan ge en ytterligare förklaring till den långvariga natur IM. Dessutom terapeutiska strategier är tillräckliga för att specifikt rikta LGR5
+ cellpopulation kombinerad med H
. pylori
utrotning skulle kunna undergräva stabiliteten i IM, därmed påskynda återupprättande av normal magslemhinna.
+ celler med ISC markör uttryck. Detta resultat överensstämmer med en tidigare rapport som visar att LGR5
uttryck var signifikant förhöjd i BE, och att befolkningen är den sannolika cell om ursprungsland för metaplasi. [13] På senare tid, LGR5
+ celler identifierades i mitten av Barrett körtlar genom in situ hybridisering och föreslås att fungera som stamceller, eftersom de uppvisar både mag- och tarm differentiering. [34] Vi fann också LGR5
+ celler vid områdena mellan mag- och metaplastiska körtlar i BE, som motsvarar mitten av Barrett körtlar. Dessutom, närvaron av ISC markörer i LGR5
+ cellpopulation ytterligare stöder deras potential för intestinal differentiering. Således, baserat på dessa resultat, verkar det rimligt att föreslå att LGR5
+ celler i sannolikt fungera som stamceller som upprätthåller tarm fenotypen av BE, liknande den som ses i IM.
, starkt uttryck detekteras i IM. [35, 36] Dessutom transgena möss har visat att enbart CDX2
uttryck är tillräcklig för att inducera IM [37 , 38], vilket tyder på att CDX2
kan också underlätta utvecklingen av stamcellspopulation med en tarm fenotyp. Därför undersökte vi om CDX2
är direkt involverad i uttrycket av ISC markörer: LGR5
, ASCL2
, OLFM4
och EPHB2
(S5 fig). Men visade transfektionsexperiment att bara EPHB2
var marginellt påverkats av CDX2
uttryck. Visst bör dessa uppgifter tolkas med försiktighet eftersom erhölls i GC-cellinjer med olika biologiska egenskaper från den icke-tumör gastric epithelial eller tarm stamceller. Ändå verkar det troligt att ytterligare signaleringsfaktorer tillsammans med CDX2
är nödvändiga för att inducera ISC markör uttryck.
+ celler i gastrisk IM och BE samuttrycker ISC markörer, som är indikativ för en intestinal liknande stamcellspopulation som ersätter de redan existerande gastriska stamceller. Denna upptäckt verkar ge en viktig ledtråd för att förstå mekanismen bakom den ihållande IM efter H
. pylori
utrotning. Dessutom föreslår våra resultat LGR5
+ celler är ett lovande mål för att vända IM, och potentiellt förhindra deras progression i gastric cancer.
Bakgrundsinformation
S1 Fig. Korrelation av tarmstamcells (ISC) markörer med CDX2
nivåer i icke-tumörgastriska vävnader.
Ingen korrelation hittades mellan CDX2
uttryck och några ISC markörer som LGR5
(r 2 = 0,01, p
= 0,59), ASCL2
(r 2 = 0,01, p
= 0,59) , PROM1
(r 2 = 0,11, p
= 0,08), LRIG1
(r 2 = 0,06, p
= 0,21) och DCLK1
(r 2 = 0,09, p
= 0,11) katalog doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s001
( PPTX) Review S2 Fig. Visualisering av intestinala stamcellsmarkörer av RNA in situ hybridisering (ISH).
RNA ISH utfördes på en formalinfixerade och paraffininbäddade prov av tunntarmen. (A, B) En grupp av LGR5
+ stamceller identifieras längst ner på alla kryptor, blandade med panethceller. Andra tarm markörer stamceller som ASCL2
(C, D), EPHB2
(E, F), och OLFM4
(G, H) finns också till begränsas till kryptan baser. Förstoring: A, C, E, G × 100; B, D, F, H × 400
doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s002
(PPTX) Review S3 Fig. Uttryck av tarmstamcellsmarkörer i GI typ IM.
Återstående mag körtlar återfinns ofta på de basala områden GI typ IM (A och B). RNA ISH visar att LGR5
(C) och EPHB2
(D) uttryck är lokaliserade ovanför mag körtlar. Intressant, OLFM4
(E) uttryck observeras i magsäckens körtlar samt även dess intensitet är mycket svagare än i de metaplastiska körtlar. När de gastriska körtlar försvinna som IM utvecklas (A och F), fördelningen av alla LGR5
(G), EPHB2
(H) och OLFM4
(I) är strikt begränsad till de basala områden. Pilarna indikerar de återstående gastriska körtlar. Förstoring: A × 40; B, C, D, E, F, G, H, I × 200
doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s003
(PPTX) Review S4 Fig. Tarmstamcellsmarkörer i intestinal metaplasi (IM) av mag corpus.
(A och B) En liten fokus IM i mitten av fundic körtlar, indikerade med pilar visar samma uttrycksmönster av LGR5
(C), ASCL2
(D), och OLFM4
(E) som IM i antrum. Förstoringar: A × 100; B, C, D, E × 200
doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s004
(PPTX) Review S5 Fig. Effekt av CDX2
på expressionen av intestinal stamcell (ISC) markörer i magcancer (GC) cellinjer Transfektion av CDX2
i fyra GC cellinjer, MKN74 (A.
), ökar markant MKN28 (B) SNU484 (C) och SNU668 (D) mängden av mRNA av CDX2
(** p Hotel < 0,01; *** p Hotel < 0,005). EPHB2
uttryck endast marginellt förbättras genom uttrycket av CDX2
i tre av fyra GC cellinjer (*** p Hotel < 0,005). Ingen skillnad finns i nivåerna av LGR5
, ASCL2
och OLFM4
på CDX2
uttryck (ns, ej signifikant).
doi: 10.1371 /journal.pone.0127300.s005
(pptx) Review