Želučani intestinalne metaplazije (IM) je vrlo rasprostranjen preneoplastic lezija; Međutim, molekularni mehanizmi koji reguliraju njegov razvoj ostaje nejasan. Mi smo ranije pokazali da je populacija stanica koje eksprimiraju crijevna matičnih stanica (ISC) marker LGR5 pregled povećava značajno u IM. U ovoj studiji smo dodatno istražiti molekularna svojstva tih LGR5 pregled + stanica u IM uvidom u profile ekspresije nekoliko NDH oznaka. Naime, otkrili smo da ISC markeri-uključujući i OLFM4 pregled i EPHB2 pregled -je pozitivno povezan s CdX2 pregled izraz u ne-tumorskih želučanog tkiva. To otkriće je potvrđeno u želucu lezije sa ili bez metaplazije, koji je pokazao da OLFM4 i EPHB2 izraz postupno povećava s metaplastičnim napredovanje. Štoviše, RNA hibridizacija in situ pokazala je da LGR5 pregled + stanica coexpress nekoliko ISC markere i ostala ograničena na bazi metaplastičnim žlijezda, nalik onoj normalne crijevne kripti, dok su one u normalnim antralnim žlijezde izraženim ništa od tih markera. Osim toga, veliki broj stanica ISC markera koje eksprimiraju difuzno raspoređene u želučanim adenoma, sugerira da su ove oznake može olakšati želučane tumorogenezom. Osim toga, Barrett je jednjak (BE) -što je histološki slična intestinalne metaplazije-izlagao sličnu raspodjelu ISC markera, što upućuje na prisutnost populacije matičnih stanica s crijevnom diferencijacije potencijala. U zaključku, utvrdili smo da je LGR5 pregled + stanica u želučanoj IM i biti coexpress ISC markeri, i pokazuju isti izraz profil kao one u normalnim crijevnim kriptama. Uzeti zajedno, ovi rezultati ukazuju na populacije matičnih stanica crijeva, kao što su u patogenezu IM, te osigurati važnu osnovu za razumijevanje razvoj i održavanje ove bolesti pregled Izvor:. Jang BG, Lee BL, Kim WH (2015) crijevna Kljun Stanica biljega u intestinalne metaplazije želuca i Barrett je jednjak. PLoS ONE 10 (5): e0127300. doi: 10,1371 /journal.pone.0127300 pregled Akademska Urednik: Anthony W.I. Eto, Queen Mary Hospital, Hong Kong pregled Primljeno: 8 siječnja 2015; Prihvaćeno: 13. travnja 2015; Objavljeno: 21. svibnja 2015 pregled Copyright: © 2015 Jang i sur. Ovo je otvoreno pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled Podaci Dostupnost: sve relevantne podatke su u radu i njegove popratne podatke datoteka pregled Financiranje: Ovo istraživanje je podržan od strane priznanje Koreji Health Technology R &D projekata kroz Koreji zavoda za zdravstveno Industry Development (KHIDI), financiran od strane Ministarstva. Zdravlje & Skrbi, Republika Koreja (broj dozvole: HI14C1277). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled Uvod pregled Preneoplastic intestinalne metaplazije (IM) je povezana s povećanim rizikom od želučanog karcinoma i predstavlja u približno jedna četvrtina pojedinaca u svijetu. [1] IM često posljedica kroničnog atrofični gastritis sljedećem infekcije s Helicobacter pylori pregled, koji onda može napredovati do želučanog epitela displazije ili karcinoma. [2] razne genetskih i epigenetičkim promjene su uključeni u patogenezu ljudske IM. [3] Osim toga, dugoročno IM izazvana CdX2 izraza je pokazalo se da dovesti do raka želuca kod miševa transgenih, što znači da sama IM igra značajnu ulogu u nastanku želučanog karcinoma. [4] pregled jer im je kritična prethodnik u želučanom karcinogeneze, potencijal da preokrenu ove lezije je od velikog interesa. [5] Prethodna istraživanja su izvijestili da je iskorjenjivanje H Netlogu. pylori pregled dovoljno je da preokrenu IM, ali drugi su otkrili da je značajan udio bolesnika još uvijek prisutna s IM, čak i nakon učinkovito iskorjenjivanje. [5] IM Vjeruje se da je 'točka bez povratka' u histološkom kaskada od kroničnog gastritisa do adenokarcinoma, [6] a time i nastojanja da se razumiju molekularne mehanizme koji reguliraju uspostavu i održavanje IM su od ključne važnosti za razvoj strategije za prekid želučane karcinogeneze. Na primjer, CdX2 autoregulacija je sugerirao da imaju veliki utjecaj na stabilnost IM lezija. [7], dok im grobnice u ljudskom želucu su Klonska i sadrže multipotentnih matičnih stanica, [8] on ostaje slabo razumio da li su izvorni želučane matične stanice početna izvor metaplazije ili ako oni samo služe za održavanje utvrđene ozljede. pregled otkriće normalnih želučane sluznice matičnih stanica podudara s identifikacijom ciljnog gena Wnt LGR5 pregled kao matičnih stanica markera u crijevni epitel. [9] loze-traganje za istraživanje kasnije otkrila da LGR5 pregled + stanice su multipotentnih matične stanice odgovorne za obnavljanje želučane epitel kod miševa [10]. Naša grupa je prethodno pokazano da mali broj LGR5 pregled + stanice također se nalaze na dnu ljudskih antralnim žlijezda i dramatično povećanje u IM lezija. [11] Ova otkrića nas je dovelo do nagađati da je LGR5 pregled može oznakom za crijevne matičnih stanica (ISCs) koji su uključeni u održavanju IM. pregled ovog jednjaka (BE) je metaplastičnim konverzija u intestinalnu cilindričnim epitelom i povezana je s povećanim rizikom od adenokarcinoma, slično onome što je opažano sa želučanom IM. [12] Naime, ljudsko BE lezije pokazuju doreguliranje LGR5 pregled izraz u odnosu na normalnu pločastog epitela, a ukazuje na prisustvo LGR5 Netlogu + matične stanice u biti. [13] pregled Nekoliko molekularne ISC markeri su identificirani kao dodatak LGR5 Netlogu, uključujući i PROM1 pregled [14], BMI1 Materijali i metode pregled tema pregled Formalin -fixed i parafin uklopljenih (FFPE) želučani uzorcima sa ili bez intestinalne metaplazije (IM) prikupljeni su od pet pacijenata koji su se podvrgnuli endoskopskom submukozalnim seciranje na Seoul National University Hospital (SNUH) od 2008. do 2010. godine IM lezije su kategorizirani u želučanom i -intestinal mješovito (GI) i to isključivo u crijevima (i) podtipovi (također poznat kao nepotpune i potpune vrsta, respektivno). [19] Uzorci Barrett je jednjak izolirane su iz dva bolesnika s karcinomom gastroezofagealnog spoja, i normalna tankog crijeva primjerak bio je dobiven iz pacijenta s rakom debelog crijeva. Svježe smrznuti ne-tumorskih želučani tkiva su dostupni od 28 pacijenata s rakom želuca koji su bili podvrgnuti kirurškom gastrektomije od 2001. do 2005. godine na SNUH. Pregled Etički izjava pregled Svi ljudskih jedinki su dobivene ljekovito kirurške resekcije , Ova retrospektivna studija provedena je pomoću pohranjene uzorke nakon patološkog dijagnoze. Uzorci su anonimni jer prije studije, dakle pisani pristanak nije potreban. Dizajn Istraživanje je odobreno od strane Institutional Review Board na Seoul National University Hospital pod uvjetom skrivanja (referenca: H-1209-037-424). Pregled RNA in situ hibridizacije Netlogu U situ hibridizacija za LGR5 pregled, ASCL2 ekstrakcija RNA i kvantitativne real-time PCR pregled Ukupna RNA se ekstrahira iz parafin uklopljenih Rezovi tkiva s RNeasy FFPE Kit (Qiagen, Valencia, CA, USA) kao što je prethodno opisano. [20] obrnute transkribirane cDNA je pripremljena iz 1-2μg ukupne RNA sa slučajnim heksamernih primera i GoScript sustava reverzne transkripcije (Promega, Madison , WI, USA). Kvantitativne real-time PCR (QRT-PCR) reakcije su izvedene korištenjem premiks EX Taq (Takara bio, Shiga, Japan) u skladu s preporukama proizvođača, a podaci analizirani pomoću softvera sustava Sequence Detection (verzija 1.4, Applied Biosystems). Korišteni su sljedeći izraz testovi TaqMan gena: Hs00173664_m1 ( LGR5 Transformacija CdX2 Netlogu CdX2 cDNA (pCMV6-CdX2) se nabavlja od OriGene (Rockville, MD, USA). Želučani kancerozne stanice su nasađene na 1 × 10 6 stanica /jažici u ploču s 6 jažica i transfektirane s 2.5 ug cDNA ili praznog kontrolnim vektorom pomoću Lipofectamine 2000 transfekcijski reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) prema proizvođačeve upute. Stanice su podvrgnuti QRT-PCR analize otprilike 24 sata nakon ubacivanja. Pregled Statistička analiza pregled Statističke analize su provedene u Prizma 5 (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, USA). Korelacije između izraza crijevne matičnih stanica markera i CdX2 pregled je procijenjena linearnom regresijom. Srednje razlike između skupina FFPE želučane uzoraka ispitana s jednosmjernim ANOVA. Između skupina usporedbe nakon transfekcije CdX2 Netlogu u želučanom staničnim linijama karcinoma su provedena pomoću Student t pregled -tests. Rezultati su smatrana značajnom kada je p izvoznici < 0.05. Pregled Rezultati pregled 1. ISC markeri koreliraju s razinama CdX2 u sluznici želuca pregled Mi smo ranije izvijestili o relativnoj povećanju LGR5 pregled + stanice u IM oštećenja ljudskog želuca. [11] To nas traži da pretpostavljamo da se radi o LGR5 pregled + stanica može djelovati kao samostalno obnavlja matičnih stanica kako bi se pomoglo u održavanju i širenju metaplastičnim epitela u sluznici želuca. Dakle, željeli smo utvrditi dodatne ISC markera koji korelira s CdX2 pregled izraz u IM. Za to, mjerili smo razinu ekspresije CdX2 Netlogu i osam ISC markers- LGR5 2. ISC izraz marker korelira s IM progresije Netlogu Kako bi potvrditi pozitivnu povezanost OLFM4 pregled i EPHB2 pregled pomoću IM, odabrali smo četiri histološki-različita vrsta želučanog tkiva; normalno sekundarnom sluznica bez IM (n = 4), kroničnog aktivnog gastritisa bez IM (n = 3), želudac i crijeva mješovitog tipa (tipa GI) IM (n = 6), a samo crijevna tip (tipkam) IM (n = 5) (slika 2). Claudin-18 je većina visoko izražen čvrsti spoj proteina u želucu. Kao što se očekivalo, naše analize pokazale da claudin-18 ekspresija smanjena s povećanjem stupnja IM ( p izvoznici < 0.0001) (slika 2B), dok je CdX2 pregled izraz povećana ( p pregled i 0.0001) (Slika 2C). Također smo otkrili da OLFM4 pregled i EPHB2 3. LGR5 pregled + stanica u intestinalne metaplazije colocalize s drugim ISC markeri Kako bi se utvrdilo je li izravna veza postoji između LGR5 4. ISC markeri su izraženi u ovog jednjaka lezija pregled Sljedeći traži kako bi se utvrdilo je li ISC markeri su također izraženi u Barrett je jednjak (BE). Za to, dva primjerci adenokarcinoma koji se pojave u pozadini BE ocijenjeni su za izražavanje CdX2 pregled, OLFM4 pregled, EPHB2 pregled i PROM1 Rasprava pregled prevlaka /vrat područje želuca jedinice ranije mislio da obuhvati matičnih stanica nišu u kojoj se pojavljuje IM, te je predložio da se javlja metaplasic napredak od jednog želučanog klonskom jedinici putem klonske ekspanzije i kripte fisije. [8], jer LGR5 pregled + stanice su identificirani kao multipotentnih crijevnih nalik matičnih stanica kod miševa [10], a postoje u antruma ljudskog želuca [11], to je vjerojatnim da mislim da je IM mogao razviti iz ove populacije stanica. Međutim, i dalje postoji mogućnost da još jedna populacija matičnih stanica može biti temelj taj proces. Na primjer, SOX2 pregled + stanice također su identificirani kao zasebna želuca matičnih stanica, a oznaka populacije stanica ekskluzivnim onima s LGR5 pregled izražavanja. [21] transdiferencijacija može također dovesti da metaplastičnim stanica. Spasmolyitc polipeptid-izražavanje Metaplazija-u koji pilorusa Tip žlijezde pojaviti u oxyntic sluznici-proizaći iz zrelih glavnih stanica, [22], a ne LGR5 pregled -eksprimirajući stanice. [23] Zapravo, transgena CDX1 Razne napori su nastojali klasificirati IM tipova želuca lezije. Matuskura et al. predložio klasifikacijski sustav koji se temelji na prisutnosti tankog crijeva probavnih enzima; definirana kao potpuni i nepotpuni tipa IM, [26] dok je Jass Filipe uvodi tri stupnja IM na temelju morfologije i histokemijskim mucin bojenja. [27] U novije vrijeme, nova podjela je predložio Tatematu et al., U kojima IM može se podijeliti na želučane i-crijevni pomiješa (GI) i samo crijevnih (I) vrsta. [19] U GI tipa IM , želučani i crijevni fenotipskih biljega na oba žljezdane i stanične razine, tako da je predloženo da IM mogu biti uzrokovana postupnim intestinalization matičnih stanica iz Gj u i-tipa. [28] Ovdje smo opazili postupno povećanje NDH markeri OLFM4 pregled i EPHB2 pregled s daljnjim intestinalization želučane sluznice. Uz povećanje CdX2 H ovog jednjaka (BE) je prekancerozne lezije koje dijeli nekoliko morfološke i molekularne karakteristike s želuca IM, uglavnom jer je metaplastičnim konverzija u intestinalnu cilindričnim epitelom uslijed kronične upale. Vjerujemo da je ova studija obilježava još jednu sličnost između ove dvije lezije u prisustvu LGR5 pregled + stanica s ISC izraza markera. Ovaj nalaz je u skladu s prethodno izvješće koje pokazuje da LGR5 pregled, izraz je značajno povišena u biti, i ta populacija je vjerojatno stanica-of-podrijetla za ovu metaplazije. [13] U novije vrijeme, LGR5 CdX2 je majstor transkripcijski faktor za izražavanje crijevnih diferencijaciju markera, i smatra se da temelj razvoja biti. A normalna sluznica želuca ne iznosi CdX2 pregled, jaka ekspresija je otkrivena u IM. [35, 36] Nadalje, transgenski miševi su pokazali da CdX2 pregled sama ekspresija je dovoljna za indukciju IM [37 , 38], sugerirajući da je CdX2 pregled također može olakšati razvoj populacije matičnih stanica u crijevnom fenotipa. Dakle, ispitali smo i ako CdX2 pregled izravno uključena u izražavanju NDH oznaka: LGR5 pregled, ASCL2 pregled, OLFM4 pregled i EPHB2 pregled (S5 sl). Međutim, eksperimenata transfekcije otkrila je da je samo EPHB2 pregled neznatno je utjecalo CdX2 pregled izražavanja. Dakako, ovi podaci treba tumačiti s oprezom jer su dobivena u GC staničnim linijama s različitim biološkim svojstvima iz koje se ne tumorskih želučanog epitela ili crijevne matičnih stanica. Ipak, čini se vjerojatnim da dodatne signalizacije čimbenici, zajedno s CdX2 pregled neophodni su za indukciju ISC izraz marker. Pregled U sažetku, utvrdili smo da LGR5 pregled + stanica u želučanom IM i BE coexpress ISC markeri, što je indikativno je populacije matičnih stanica crijevne nalik koji zamjenjuje ranije postojećih želučanih matičnih stanica. Ovo otkriće čini se da daju važan trag za razumijevanje mehanizma podlozi upornost IM nakon H Netlogu. pylori pregled iskorjenjivanje. Nadalje, naši rezultati ukazuju na LGR5 pregled + stanice su obećavajuća meta preokrenuti IM, i potencijalno spriječiti njihovo napredovanje u želučanog karcinoma. Pregled popratne podatke
[15], LRIG1 pregled [16], i ASCL2 pregled, koji je identificiran kao faktor transkripcije za kontrolu crijeva sudbinu matičnih stanica. [17] Osim toga, OLFM4
[17] i EPHB2 pregled [18] su također vrlo izražen u ISCs. U ovoj studiji željeli smo otkriti dodatne ISC markere koji su uključeni u nastanak i održavanje želuca IM i biti, i ispitati njihovo ko-lokaliziranje s LGR5 pregled + stanica po RNA hibridizacija in situ za daljnje otkriti molekularne karakteristike LGR5 pregled + stanice u IM s obzirom na crijevne nalik matičnih stanica fenotipa. pregled
, OLFM4 pregled i EPHB2 pregled je provedeno s RNAscope FFPE testnom kit (Advanced Cell Diagnostics, Inc. , Hayward, CA, USA) kao što je prethodno opisano [11]. Pozitivna mrlja definirana kao prisutnost smeđe točkaste točaka u jezgri i /ili citoplazmi. Ubikvitina C i bakterijske DapB pregled geni služio kao pozitivne i negativne kontrole, respektivno. Pregled
), Hs00362096_m1 ( EPHB2 pregled), Hs00270888_s1 ( ASCL2 pregled), Hs00197437_m1 ( OLFM4
), Hs01009250_m1 ( PROM1 pregled), Hs00394267_m1 ( LRIG1 pregled), Hs00995536_m1 ( BMI1 pregled), Hs00178027_m1 ( DCLK1 pregled), Hs010780810_m1 ( CdX2 pregled), Hs00212584_m1 ( CLDN18 pregled), a Hs0275899_g1 ( GAPDH pregled). GAPDH pregled služio kao endogeni kontrolom. Pregled
, ASCL2 Netlogu, OLFM4 pregled,
. Konkretno, OLFM4 pregled ( p izvoznici < 0.0001, r 2 = 0,56) (Slika 1B) i EPHB2 pregled ( p pregled < 0.0001, r 2 = 0,52) (slika 1C) prikazana jaku pozitivnu korelaciju s CdX2 pregled, dok su BMI1 pregled je obrnuto koreliraju ( p pregled = 0,0002, r 2 = 0,42) (Slika 1D). Nema značajne povezanost s CdX2 pregled izraz bio identificiran s ostalih pet ISC markera (S1 sl). Pregled
razine kontinuirano raste sa svakim sljedećim lezija, što potvrđuje da su ti markeri su usko povezani s IM progresije ( p pregled = 0.008 i 0.001, odnosno, Slika 2D i 2E). Za razliku od toga, BMI1 pregled i LRIG1 pregled izraz pokazao je tendenciju pada s IM napredovanje. ( p pregled = 0,002 i 0,0006, odnosno, Sl 2F i 2G)
i ISC biljega u IM, ispitali smo je li njihova koekspresiji RNA hibridizacije in situ. Izraz LGR5 pregled, ASCL2 pregled, EPHB2 pregled i OLFM4 pregled prvo su pregledane u normalnom ljudskom dijelu tankog crijeva potvrditi ovu tehniku, i nađeno je da se lokalizira posebno stanica u matičnim stanicama niši crijevnih kripti kao što je očekivano (S2 sl). Budući da LGR5 pregled + stanica u normalnim crijevnih kripti izraziti ISC markere, teoretizirao smo da LGR5 pregled + stanica u IM možda također pokazuju sličan izraz uzorak. Dakle, ponavlja se postupak na uzastopnih dijelova endoskopske submukozna sekcionog uzoraka (n = 5), od kojih je svaka sadržavala više žarišta Gj ili sam tipa IM među ne-tumorskog tkiva. Mali broj LGR5 pregled + stanice u podnožju normalnim antralnim žlijezda bili lišeni ISC izraza markera (slika 3A), dok su one u I-tipa IM pokazala izražena sva tri oznake (slika 3B) , Štoviše, GI tipa IM lezije prikazan isti profil izlučivanja ukupni osim da je marker ISC izraz bio smješten iznad ostalih želučanih žlijezda, a ne ograničeno na bazalnih područja (S3 sl). To ekspresije dosljedno je u svim uzorcima. Ovi rezultati ukazuju na to da LGR5 pregled + stanica u IM razlikuju od onih u normalnom antruma u izražavanju NDH markera koji su obično ograničena na stanicama unutar crijevne kripte. Zanimljivo, IM izvedeni iz fundusnih žlijezda, gdje LGR5 pregled + stanice se normalno ne nalazi, u produkciji iste rezultate (S4 Sl). Dakle, čini se vjerojatnim da je broj stanovnika LGR5 pregled + stanice u IM ne proizlazi iz proliferacijom prethodno postojećih LGR5 pregled + stanica, već je radije pojava LGR5 pregled + stanice sa stečenim diferencijacije potencijala, što sugerira da je matična stanica populacija crijevna nalik je osnovana u IM. Osim toga, želučanih adenomi (n = 5) također izražava visoke nivoe ISC markera tijekom lezije, a nije ograničena na žljezdane grobnice (Slika 3C). Kao što je prikazano na slici 3, ovakva akumulacija ISC stanica markera koje eksprimiraju preko metaplazije displaziji sekvenci implikativnu sudjelovanja crijevne tipa matičnih stanica u želučanom tumorogeneze i dodatne studije istražiti vezu između crijevne matičnih stanica markera i razvoj želučanog tumora su sigurno zajamčen. pregled
po QRT-PCR analize (Slika 4A). Značajno, i biti i adenokarcinomi izražava visoke razine sva četiri ISC markera u usporedbi s onom od normalnog pločastog epitela (Slika 4B, 4C, 4D i 4E). Dok LGR5 pregled i ASCL2 pregled ne pokazuje značajne promjene od RT-PCR analize, vjerojatno zbog malog broja kopija transkripata, RNA hibridizacija in situ pokazuje jasnu populacije stanica s
ili CdX2 pregled ekspresija rezultira parijetalne stanice izvedene iz razvoja IM u transgeničnim miševima. [24] Stoga, ostaje upitan li IM je posljedica intestinalne matičnih stanica reprogramiranje ili transdiferencijacija stanica uz stečene ISC nalik svojstva. [12, 25] pregled
razine koje uzrokuju crijevne diferencijaciju i fenotip, te izraz obrasci ukazuju na pretvorbu cjelokupne populacije matičnih stanica prema više crijevni poput matičnih stanica fenotipa. Štoviše, neočekivano inverzna korelacija BMI1 Netlogu i LRIG1 pregled pomoću IM treba daljnja istraživanja kako bi potvrdili ovaj rezultat i razjasniti njezine kliničke implikacije. Pregled
. pylori pregled iskorjenjivanje ima potencijal da spriječi želučanog raka, [29] i mogu stanjiti napredovanje prekanceroznih lezija želuca, kao što je IM. [30, 31] Međutim, jednom uspostavljena, čini se da je H pregled. pylori pregled iskorjenjivanje ne može u potpunosti spriječiti rak želuca. [6] U stvari, oko 80% ispitanika s IM pokazali nikakve promjene ili razvoja IM nakon liječenja antibioticima. [31] Osim toga, meta-analiza zaključeno da H pregled. pylori pregled iskorjenjivanje nema nikakvog utjecaja na želučanu IM. [32] Ova ireverzibilnosti IM može se djelomično objasniti održavanje CdX2 pregled izraz kroz autoregulacija petlje koja je neovisna o početnom okidač, održavanje crijevni fenotip. [33] nadalje otkrio da LGR5 pregled + stanice u podnožju metaplastičnim žlijezda dosljedno izrazi druge ISC markere, što ukazuje da se od matičnih stanica fenotipa crijevne nalik. Vjerujemo da je to stabilna populacije matičnih stanica može pružiti dodatno objašnjenje za dugotrajne prirode IM. Osim toga, terapijske strategije dovoljno da se posebno ciljati na LGR5 populaciju pregled + stanica u kombinaciji s H Netlogu. pylori pregled iskorjenjivanje potencijalno mogu ugroziti stabilnost IM, na taj način ubrzati ponovnu uspostavu normalnog želučane sluznice. Pregled
+ stanice identificirane su u sredini Barrett je žlijezda in situ hibridizacije i predložio da djeluju kao matične stanice, dok oni pokazuju kako želučanih i crijevnih diferencijaciju. [34] također smo otkrili LGR5 pregled + stanicama u području između želuca i metaplastičnim žlijezda u biti, što odgovara sredini Barrett-ov žlijezde. Osim toga, prisutnost ISC markera u LGR5 pregled + populacija stanica daljnje podržava njihov potencijal za crijevne diferencijacije. Dakle, na temelju tih rezultata, čini se razumnim da sugeriše da je LGR5 pregled + stanica u vjerojatno djeluju kao matične stanice koje potpomažu crijevna fenotip BE, sličnu onoj u IM. Pregled
S1 Sl. Korelacija crijevna matičnih stanica (ISC) markera s razina CdX2
u ne-tumorskih želučanog tkiva.
Korelacija je nađena između CdX2 pregled izraz, a neki ISC markeri kao što su LGR5 pregled (r 2 = 0,01, p pregled = 0.59), ASCL2 pregled (r 2 = 0,01, p pregled = 0,59) PROM1 pregled (r 2 = 0,11, p pregled = 0,08), LRIG1 pregled (r 2 = 0,06, p
= 0,21) i DCLK1 pregled (r 2 = 0,09, p pregled = 0,11) pregled, doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s001 pregled ( PPTX)
S2 Sl. Vizualizacija crijevnih matičnih stanica markera RNA hibridizacija in situ (ish).
RNK ISH izvedena na formalinom fiksne i parafin uklopljenih primjerka tankog crijeva. (A, B) Grupa LGR5 pregled + matične stanice su identificirani na dnu svih grobnica, pomiješani s Paneth stanica. Ostale crijevne matičnih stanica markeri kao što su ASCL2
(c, d), EPHB2 pregled (E, F), i OLFM4 pregled (G, H) su također otkrili da biti ograničena na kripti baze. Povećanje: A, C, E, G × 100; B, D, F, H × 400 pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s002 pregled (PPTX) pregled S3 Sl. Iskazi crijevne matičnih stanica markera u tipa GI IM.
Preostali želučane žlijezde često se mogu naći u bazalnim dijelovima tipa GI IM (A i B). RNA ISH pokazuje da je LGR5 pregled (C) i EPHB2 pregled (D) izrazi su lokalizirani iznad želučanim žlijezdama. Zanimljivo, OLFM4 pregled (E) izraz je promatrana u želučanim žlijezdama, kao i iako je njegov intenzitet je mnogo slabiji nego što se u metaplastičnim žlijezde. Kad ti želučane žlijezde nestati kao IM razvija (A i F), raspodjela sve LGR5 pregled (G), EPHB2 pregled (H) i OLFM4 pregled (I) strogo ograničena na bazalnim područjima. Strelice pokazuju preostale želučane žlijezde. Povećanje: A × 40; B, C, D, E, F, G, H, I × 200
doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s003 pregled (PPTX)
S4 Sl. Crijevna matičnih stanica markera u intestinalne metaplazije (IM) želučanog korpusa. Pregled (A i B) Mali fokus IM u sredini fundusnih žlijezde, označeno strelicama, pokazuje isti izraz obrazaca