Povzetek
želodca intestinalno metaplazijo (IM) je zelo razširjena preneoplastičnih lezija; Vendar, molekularne mehanizme, ki urejajo njegov razvoj, še vedno nejasna. Prej smo pokazali, da populacija celic, ki izražajo črevesne matičnih celic (ISC) oznako LGR5 Navedba. Jang BG, Lee BL, Kim WH (2015) Črevesna Stem Cell Markers na intestinalno metaplazijo za želodec in Barrett požiralnik. PLoS ONE 10 (5): e0127300. doi: 10,1371 /journal.pone.0127300 Akademska Urednik: Anthony W.I. Lo, Mary Hospital Queen, HONGKONG Prejeto: 8. januar 2015; Sprejeto: 13. april 2015; Objavljeno: 21. maj 2015 Copyright: © 2015 Jang et al. To je prost dostop članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo Razpoložljivost podatkov: Vsi pomembni podatki so v papir in njene dodatne informacije datotek Financiranje: raziskava je bila podprta s subvencijo v Koreji zdravstvene Technology R & D projekta prek inštituta Korea zdravje Industry Development (KHIDI), ki ga je ministrstvo za financira. Zdravje & Dobro počutje, Republika Koreja (število nepovratnih sredstev: HI14C1277). Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa nasprotujočimi si interesi.. Avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi Uvod preneoplastično črevesnih metaplazijo (IM), ki je povezana s povečanim tveganjem za raka želodca in predstavlja v približno eno četrtino posameznikov po vsem svetu. [1] IM pogosto posledica kronične atrofični gastritis naslednji okužbi s Helicobacter pylori Ker IM je pomemben predhodnik želodčnega rakotvornosti potencial, da se obrne teh lezij je velikega pomena. [5] Prejšnje raziskave so poročali, da je izkoreninjenje H odkritje normalnih želodčne sluznice matičnih celic je sovpadalo z identifikacijo ciljnega gena NT LGR5 Barrett je požiralnik (BE) je metaplastic pretvorba črevesnih columnar epitelija in je povezana s povečanim tveganjem za adenokarcinom, podobno tistim, ki jih z želodčno UI. [12] Predvsem ljudi se lezije kažejo z uravnavanjem LGR5 Več molekularni ISC markerji so bile ugotovljene poleg LGR5 materiali in metode Predmeti formalina -fixed in parafin vgrajeni (FFPE) želodčne vzorci z ali brez intestinalno metaplazijo (IM), so bili zbrani iz petih bolnikih, ki so endoskopske Submukozno disekcijo na nacionalni bolnišnici v Seulu University (SNUH), od leta 2008 do 2010. lezij IM so bile razvrščene v želodčni in -intestinal mešano (GI) in izključno črevesne (I) podtipi (znan tudi kot nepopolne in popolne vrste, oziroma). [19] Vzorci požiralnika Barrett so bili izolirani iz dveh bolnikih z adenokarcinomom na gastroezofagealnem prehodu, in normalni tankega črevesa vzorec je bil dobljeni od pacienta z rakom na debelem črevesu. Sveže zmrznjene non-tumorskih želodca tkiva so bili na voljo od 28 bolnikov želodca z rakom, ki so opravili kirurški odstranitvi želodca od leta 2001 do 2005 na SNUH. Vsi ljudje so bili osebki pridobljeni z kurativno kirurški odstranitvi . V retrospektivno raziskavo smo izvedli s pomočjo shranjenih vzorcev po patološko diagnozo. Vzorci so bili anonimizirani pred študijo, tako pisno soglasje ni potrebno. Načrt študije je odobril Institutional Review Board na National University Hospital v Seulu pod pogojem anonimizacijo (referenca: H-1209-037-424). In situ hibridizacija za LGR5 Total RNA je bila vzeta iz parafina-vgrajeni odseki tkiva, ki imajo RNeasy FFPE Kit (Qiagen, Valencia, CA, ZDA), kot je predhodno opisano. [20] obrnjene prepisana cDNK smo pripravili iz 1-2μg celotne RNA z naključnimi heksamerni primerjev in GoScript reverzne transkripcije sistem (Promega, Madison , WI, ZDA). Kvantitativni PCR v realnem času (QRT-PCR) reakcije so bile izvedene z uporabo premiks EX Taq (Takara Bio, Šiga, Japonska), v skladu s priporočili proizvajalca, in analizirati podatke s programsko opremo za sistem za zaznavanje Sequence (Version 1.4, Applied Biosystems). Uporabljene so bile naslednje TaqMan genske ekspresije testi: Hs00173664_m1 ( LGR5 CDX2 cDNA (pCMV6-CDX2) je bila kupljena od OriGene (Rockville, MD, ZDA). Želodčne rakave celice so zasejali z 1 x 10 6 celic /vdolbinico v 6 vdolbinicami in transfekciji s 2,5 ig cDNA ali prazne nadzorni vektor z uporabo Lipofectamine 2000 transfekcijske reagenta (Invitrogen, Carlsbad, CA, ZDA), v skladu s proizvajalčevim navodila za uporabo. Celice so podvrženi analizi QRT-PCR približno 24 ur po transfekciji. Statistične analize so bile izvedene v Prism 5 (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, ZDA). Korelacije med prijavo črevesne označevalcev matičnih celic in CDX2 1. ISC markerji v korelaciji s stopnjami CDX2 v želodčni sluznici smo že poročali o relativno povečanje LGR5 Da bi potrdili pozitivno povezanost s OLFM4 3. LGR5 Da bi ugotovili, ali obstaja neposredna povezava med LGR5 4. ISC markerji so izražene v požiralniku lezij Barrett je smo poleg skušali ugotoviti, ali so bili ISC markerji izrazil tudi v Barrett požiralniku (BE). Za to so bili ocenjeni dve primerki adenokarcinoma, ki nastanejo v ozadju BE za izražanje CDX2 Pogovor regija ožine /vratu želodca enote je že mislil, da zajema izvornih celic nišo, v katerem se pojavi IM, in je bilo predlagano, da se pojavi metaplasic napredovanje iz enega želodca klonsko enote prek klonske širitve in kripta cepitve. [8], ker LGR5 Različni napori so skušali uvrstiti IM vrst želodec lezij. Matuskura sod. predlagal klasifikacijskega sistema, ki temelji na prisotnosti tankega črevesa prebavnih encimov; opredeljena kot popolna in nepopolna vrste IM, [26] medtem Jass Filipe predstavil tri vrste IM na podlagi morfologije in istocasnem mucin barvanje. [27] Bolj nedavno nova klasifikacija je predlagal Tatematu et al., V katerih je IM lahko razdelimo na želodčno-in-črevesnega mešano (GI) in izključno črevesnih (I) vrste. [19] V GI tipa IM , želodca in črevesja fenotipskih označevalcev pojavijo na obeh žleznega in celičnem nivoju, kar je bilo predlagano, da bi se IM s postopnim intestinalization matičnih celic iz GI- na I-tip povzročil. [28] Tu smo opazili postopno povečevanje ISC označevalci OLFM4 H Barrett je požiralnik (BE) je predrakavo poškodba, ki si deli več morfološke in molekularne značilnosti z želodca IM, predvsem ker je metaplastic prehod na črevesnih columnar epitelija, ki je posledica kroničnega vnetja. Menimo, da je ta študija označuje eno podobnost med tema dvema lezij v prisotnosti LGR5 CDX2 je mojster transkripcijski faktor za izražanje črevesnih diferenciacije označevalcev, in je mislil, da so osnova za razvoj BE. Medtem ko je normalna sluznica želodca ne izraža CDX2 Če povzamemo, smo ugotovili, da so LGR5
povečanje izredno v UI. V tej študiji smo dodatno raziskati molekularne značilnosti te LGR5
+ celic v IM s preučevanjem profila izraz več ISC označevalcev. Predvsem smo ugotovili, da ISC označevalci, vključno s OLFM4
in EphB2
-Ali pozitivno povezana s CDX2
izraz v ne-tumorskih želodčnega tkiva. Ta ugotovitev je bila potrjena v želodcu poškodb z ali brez metaplazijo, ki je dokazano, da OLFM4 in EphB2 izraz postopoma povečuje z metaplastic napredovanje. Poleg tega, RNA in situ hibridizacija je pokazala, da je LGR5
+ celice coexpress več ISC označevalcev in ostala omejena na dnu metaplastic žlez, ki spominjajo na to normalnih črevesnih grobnicah, medtem ko so v normalnih antralnih žleze, izražena nobena teh označevalcev. Poleg tega so bili številni ISC celic marker izražanje površinsko porazdeli v želodčnih adenomov, kar kaže, da lahko te označevalci olajša želodčne tumorigeneze. Poleg tega, Barrettovega ezofagusa (BE) -which je histološko podoben intestinalno metaplazijo-razstavljene podobno razporeditev ISC označevalcev, kar kaže na prisotnost populacije v matičnih celic s črevesno diferenciacije potencialom. Na koncu smo ugotovili, da je LGR5
+ celice želodca UI in BE coexpress ISC markerji in pokažejo enako izraz profil kot tisti, ki so v normalnih črevesnih grobnicah. Če povzamemo, ti rezultati implicirajo tudi v črevesju, kot matičnih celic prebivalstvo v patogenezo UI, in zagotavljajo pomembno podlago za razumevanje razvoja in vzdrževanja te bolezni
, ki lahko nato napreduje želodca epitelnega displazije ali karcinoma. [2] različne genetskih in epigenetskih sprememb so vpleteni v patogenezo človeškega UI. [3] Poleg tega dolgotrajno IM induciran z CDX2 izražanja je bila izkazalo, da vodi do raka želodca v transgenih miših, kar kaže, da ima IM sama pomembno vlogo pri nastanku raka želodca. [4]
. pylori
je dovolj, da se obrne IM, spet drugi so ugotovili, da velik delež bolnikov še vedno prisotne IM tudi po učinkovito izkoreninjenje. [5] IM verjel, da je "točko brez vrnitve" v histoloških kaskadni zaradi kroničnega gastritisa do adenokarcinom [6] tako, prizadevanja za razumevanje molekularne mehanizme, ki urejajo vzpostavitev in vzdrževanje infrastrukture so ključnega pomena za razvoj strategij za prekinitev želodca rakotvornost. Na primer, CDX2 avtoregulacijo predlagal, da imajo velik vpliv na stabilnost IM poškodb. [7] Čeprav so IM grobnica v človeškem želodcu klonske in vsebuje multipotentne matične celice, [8] je še vedno slabo razumljen, ali so naravni želodčnih matične celice začetna vir metaplazijo ali če služijo samo za ohranitev uveljavljene lezij.
kot označevalec na matičnih celic v črevesnega epitela. [9] študija-rod sledenje kasneje pokazala, da je LGR5
+ celice so multipotentne matične celice, ki so odgovorni za podaljšanje želodčnega epitela v miši. [10] Naša skupina je že dokazal, da majhno število LGR5
+ celice bivajo tudi na dnu človeških antralnih žlez in dramatično povečanje v IM lezij. [11] Te ugotovitve nas je pripeljala do špekulirajo, da je LGR5
lahko je marker za črevesne matičnih celic (medslužbenih posvetovanj), ki sodelujejo pri vzdrževanju infrastrukture.
izraz v primerjavi z običajnim skvamoznega epitelija, in ki kažejo na prisotnost LGR5
+ matičnih celic v BE. [13]
, vključno s PROM1
[14], BMI1
[15] LRIG1
[16], in ASCL2
, ki je bila opredeljena kot dejavnik transkripcijski za nadzor črevesne matičnih celic usodo. [17] Poleg tega, OLFM4
[17] in EphB2
[18], so tudi zelo izražene v medslužbenih posvetovanj. V tej študiji smo želeli odkriti dodatne ISC označevalcev, ki sodelujejo pri nastanku in vzdrževanju želodca IM in BE, in preučiti njihovo colocalization s LGR5
+ celic z RNA v situ hibridizacija nadalje razkrije molekulska značilnosti LGR5
+ celice v UI z ozirom na črevesno podobnih matičnih celic fenotipa.
Etični kodeks
RNA v situ hibridizacije
, ASCL2
, OLFM4
in EphB2
bilo opravljenih s testnim kompletom RNAscope FFPE (napredno diagnostiko Cell, Inc. , Hayward, CA, ZDA), kot je opisano zgoraj. [11] Pozitivna madež je bil definiran kot prisotnost rjavega pikčasti pik v jedru in /ali citoplazmo. Ubikvitina C in bakterijske DapB
geni služil kot pozitivne in negativne kontrole oz.
ekstrakcijo RNA in kvantitativni PCR v realnem času
), Hs00362096_m1 ( EphB2
), Hs00270888_s1 ( ASCL2
), Hs00197437_m1 ( OLFM4
), Hs01009250_m1 ( PROM1
), Hs00394267_m1 ( LRIG1
), Hs00995536_m1 ( BMI1
), Hs00178027_m1 ( DCLK1
), Hs010780810_m1 ( CDX2
), Hs00212584_m1 ( CLDN18
), in Hs0275899_g1 ( GAPDH
). GAPDH
služil kot endogeno kontrolo.
Transfekcija CDX2
Statistična analiza
je bila ocenjena z linearno regresijsko analizo. Povprečne razlike med skupinami FFPE želodca osebkov ocenil enosmerno ANOVA. Med skupinami primerjave po transfekciji CDX2
v želodcu raka celičnih linijah smo izvedli s pomočjo Student t
-tests. Rezultati so bili štejejo za pomembne pri p
< 0.05.
Rezultati
+ celice v IM poškodb človeškega želodca. [11] To nas je spodbudilo, da hipotezo, da ti LGR5
+ celice lahko delujejo kot samostojni obnavljanju izvornih celic za pomoč pri vzdrževanju in širjenju metaplastic epitela v želodčni sluznici. Tako smo želeli opredeliti dodatne ISC označevalcev, ki se ujemajo s CDX2
izražanja v IM. Za to smo merili raven izražanja CDX2
in osem ISC markers- LGR5
, ASCL2
, OLFM4
, EphB2
, PROM1
, DCLK1
, LRIG1
in BMI1
-in normalno tkivo želodca. Obravnavane tkiva je pokazala široko paleto CDX2
ravni , ki predstavljajo različne stopnje UI, ker CDX2
izraz je v pozitivni korelaciji z napredovanjem UI (slika 1A). Tri ISC markerji bilo ugotovljeno, da v korelaciji z CDX2
izraz: OLFM4
, EphB2
in BMI1
. Še posebej, OLFM4
( p
< 0,0001, r 2 = 0,56) (slika 1B) in EphB2
( p
< 0,0001, r 2 = 0,52) (slika 1C) prikaže močno pozitivno korelacijo s CDX2
, ker BMI1
je obratno korelirana ( p
= 0,0002, r 2 = 0,42) (slika 1D). Ni pomembna povezava s CDX2
izraz je opredeljen z ostalimi petimi ISC označevalcev (S1 Sl).
2. ISC dvojno podajo izraz povezana z IM napredovanja
in EphB2
z IM, smo izbrali štiri histološko-ločen želodčne tipov tkiv; normalna antralnih sluznica brez IM (n = 4), kroničnim aktivnim gastritisom brez IM (n = 3), želodca in črevesa mešanega tipa (tip GI) IM (n = 6) in le črevesna tipa (I tip) IM (n = 5) (slika 2A). Claudin-18 je najbolj izražena tesen spoj proteina v želodcu. Kot je bilo pričakovati, naša analiza pokazala, da claudin-18 izraz zmanjšala s povečanjem stopnje UI ( p
< 0,0001) (slika 2B), medtem ko je CDX2
izraz povečala ( p
< 0,0001) (slika 2C). tudi Ugotovili smo, da OLFM4
in Ravni EphB2
stalno naraščalo z vsako naslednjo lezijo, ki potrjuje, da so ti markerji tesno povezana z napredovanjem IM ( p
= 0,008 in 0,001, vsakokrat, sl 2D in 2E). V nasprotju s tem, BMI1
in LRIG1
izraz pokazala vedno manj z napredovanjem IM. ( p
= 0,002 in 0,0006, oziroma, slika 2F in 2G)
+ celice v intestinalno metaplazijo colocalize z drugimi ISC označevalci
in ISC označevalcev v IM, smo pregledali, ali njihova soizražanjem z RNA in situ hibridizacijo. Izraz LGR5
, ASCL2
, EphB2
in OLFM4
bili najprej preučiti v normalni človeški odseka tankega črevesa potrditi to tehniko, in ugotovljeno je bilo posebej lokalizirajo na celice v niši matičnih celic črevesnih grobnicah kot je bilo pričakovano (S2 sl). Ker LGR5
+ celice v normalnih črevesnih grobnicah izražajo tudi ISC označevalcev, smo teorijo, da LGR5
+ celice v UI lahko tudi kažejo podoben izraz vzorec. Tako smo ponovili postopek v zaporednih oddelkih endoskopskih osebkov Submukozno razkosanjem (n = 5), od katerih vsaka vsebuje večkratne žarišča GI- ali I tipa IM med non-tumorskega tkiva. Manjše število LGR5
+ celic pri osnovi običajnih antralnih žlez bili brez ISC marker izražanja (slika 3A), medtem ko so v I-vrste IM pokazala izražene vse tri markerje (slika 3B) . Poleg tega, GI-tip lezije IM prikazan isti izraz profil na splošno, razen da ISC dvojno podajo izraz se je nahajal nad preostalimi želodčnih žlez in ne omejeno na temeljnic (S3 Sl). Ta izraz vzorec dosledno opazili pri vseh vzorcih. Te ugotovitve kažejo, da je LGR5
+ celice v UI razlikujejo od tistih v normalnem antruma v izražanju ISC markerjev, ki so običajno omejene na celice v črevesni grobnica. Zanimivo je, da IM izhaja iz fundic žlez, kjer LGR5
+ celic običajno ni prisoten, proizvajajo enake rezultate (S4 sl). Tako se zdi verjetno, da je populacija LGR5
+ celice v UI ni posledica širjenja preexisting LGR5
+ celic, temveč je prej pojav LGR5
+ celice, pridobljene diferenciacije potencialom, kar kaže, da se črevesna podobnih matičnih celic prebivalstva s sedežem v IM. Poleg tega, želodčni adenomov (n = 5) izrazila tudi visoko stopnjo ISC markerjev skozi lezij, namesto omejeni na žleznega grobnicah (slika 3c). Kot je prikazano na sliki 3, je to kopičenje ISC celic pozicijske izražajo preko metaplazijo na displazijo zaporedju je implicative udeležbe črevesnih vrsta matičnih celic v želodcu tumorigeneze in dodatnih študij za preiskovanje povezavo med črevesnih označevalcev matičnih celic in razvoj tumorja želodca so vsekakor upravičena.
, OLFM4
, EphB2
in PROM1
z analizo QRT-PCR (slika 4A). Pomembno je, da sta BE in adenokarcinomov izrazil višje ravni vseh štirih ISC markerji pri primerjavi z normalno skvamoznega epitelija (slika 4B, 4C, 4D in 4E). Medtem ko je LGR5
in ASCL2
ni pokazala bistvenih sprememb pri analizi RT-PCR, verjetno zaradi majhnega števila kopijo transkriptov, RNA in situ hibridizacija je pokazala jasno populacijo celic s LGR5
, ASCL2
in OLFM4
izraz na stičišču želodcu in metaplastic žlez, ki spominja na GI-vrste IM (slika 4F, 4G, 4H, 4I in 4J).
+ celice so opredeljene kot multipotentne črevesne podobnih matičnih celic pri miših [10] in na voljo v želodčni antruma prehrano [11], da je verjetno, da mislim, da bi IM razvije iz te celične populacije. Vendar ostaja možnost, da bi druga celična populacija matičnih osnova tega procesa. Na primer, SOX2
+ celice so bile opredeljene tudi različne želodčne matičnih celic, in oznaka celične populacije ekskluzivno za tiste z LGR5
izražanja. [21] Transdifferentiation lahko povzročijo tudi da metaplastic celice. Spasmolyitc polipeptid-izražanje metaplazija, v katerih nastopajo pilorično žleze tipa v oxyntic sluznice, izhajajo iz zrelih glavnih celic, [22] namesto LGR5
-izražanje celice. [23] Dejansko transgene CDX1
ali CDX2
izraz rezultati v razvoju IM parietalnih celic pridobljeni na transgenih miših. [24] Zato še vedno ni dosežena, ali je IM posledica črevesne matičnih celic reprogramiranje ali transdifferentiation celic s pridobljeno ISC podobnih lastnosti. [12, 25]
in EphB2
z nadaljnjim intestinalization želodčne sluznice. Skupaj z naraščajočimi ravneh CDX2
ki povzročijo črevesno diferenciacijo in fenotip, ta izraz vzorci kažejo pretvorbo celotne populacije matičnih celic v smeri bolj črevesnih podobnih matičnih celic fenotip. Poleg tega je nepričakovano inverzna korelacija BMI1
in LRIG1
z IM potrebuje dodatne študije, da ta rezultat potrditi in razjasniti njene klinične posledice.
. pylori
izkoreninjenje ima potencial, da se prepreči želodčne raka, [29] in lahko zmanjšajo napredovanje predrakavih želodčnih lezij, kot je UI. [30, 31] Vendar pa je enkrat določena, se zdi, da je H
. pylori
izkoreninjenje ni mogoče popolnoma preprečiti raka na želodcu. [6] Dejstvo je, približno 80% oseb z UI pokazala nobenih sprememb ali napredovanja IM po zdravljenju z antibiotiki. [31] Poleg tega je meta-analiza sklenjene ki H
. pylori
izkoreninjenje nima vpliva na želodčno UI. [32] bi to nepovratnost IM mogoče delno razložiti z vzdrževanjem CDX2
izražanje skozi avtoregulacija zanko, ki je neodvisna od prvotnega sprožilcu, ohranjanje črevesno fenotip. [33] nadalje je pokazala, da je LGR5
+ celic na dnu metaplastic žlez dosledno izražajo druge ISC oznake, ki kažejo na matičnih celic fenotipa črevesne podobno. Prepričani smo, da lahko ta stabilna populacija matičnih celic zagotavljajo dodatno pojasnilo za dolgotrajno naravo UI. Poleg tega, terapevtske strategije zadostuje za natančno usmerjanje LGR5
+ celične populacije v kombinaciji z H
. pylori
izkoreninjenje bi lahko ogrozila stabilnost IM, torej pospeši ponovno vzpostavitev normalnega želodčne sluznice.
+ celic z ISC marker izražanja. Ta ugotovitev je v skladu s prejšnjim poročilom, ki prikazuje, da je LGR5
izraz je precej povišano BE, in da je populacija je verjetno celica-of-izvor tega metaplazijo. [13] V zadnjem času, LGR5
+ celice so bile ugotovljene v sredini žlez Barrett je s hibridizacija in situ, in so predlagali, da delujejo kot matičnih celic, saj kažejo tako v želodcu in črevesju diferenciacijo. [34] prav tako je pokazala, LGR5
+ celic na področjih, med želodcu in metaplastic žlez v BE, ki ustrezajo sredi žlez Barrett je. Poleg tega prisotnost ISC označevalcev v LGR5
+ populacija celic nadaljnje podpira njihov potencial za črevesno diferenciacije. Tako je na podlagi teh rezultatov, se zdi smiselno, da kažejo, da LGR5
+ celic v BE verjetno delujejo kot matične celice, ki vzdržujejo črevesno fenotip BE, podobno kot pri IM.
, močan izraz našli v UI. [35, 36] Poleg tega transgenih miših so pokazali, da CDX2
izraz sam po sebi dovolj, da povzroči IM [37 38], kar kaže, da je CDX2
lahko tudi olajša razvoj matičnih celic prebivalstva s črevesno fenotipa. Tako smo pregledali, če CDX2
je neposredno vključena v izražanje označevalcev ISC: LGR5
, ASCL2
, OLFM4
in EphB2
(S5 sl). Vendar transfekciji poskusi so pokazali, da le EphB2
je malo s CDX2
izražanja vpliva. Gotovo je, da je treba te podatke razlagati previdno, saj so bili pridobljeni v vrsticah GC celic z različnimi biološkimi lastnostmi iz da ne-tumorskih želodca epitelijskih ali črevesne matičnih celic. Kljub temu pa se zdi verjetno, da dodatna signalizacija dejavniki skupaj s CDX2
so bistvenega pomena za sprožanje ISC marker izraz.
+ celice želodčnega IM in BE coexpress ISC markerji, kar je kaže na črevesne podobnih izvornih celic populacijo, ki nadomešča že obstoječe želodčne matičnih celic. Ta ugotovitev se zdi, da se zagotovi pomemben namig za razumevanje mehanizma, ki je podlaga vztrajnost IM po H
. pylori
izkoreninjenje. Poleg tega so naše ugotovitve kažejo, LGR5
+ celice so obetavni cilj, da se obrne IM, in lahko prepreči njihovo napredovanje v želodcu raka.
Podpora Informacije
S1 Sl. Korelacija črevesne matičnih celic (ISC) označevalce s Ravni CDX2
v ne-tumorskih želodčnega tkiva.
Št korelacijo najdemo med CDX2
izraz in nekateri ISC označevalci, kot so LGR5
(r 2 = 0,01, p
= 0,59), ASCL2
(r 2 = 0,01, p
= 0,59) PROM1
(r 2 = 0,11, p
= 0,08), LRIG1
(r 2 = 0,06, p
= 0,21) in DCLK1
(r 2 = 0,09, p
= 0,11)
doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s001
( PPTX)
S2 sl. Vizualizacija črevesnih označevalcev matičnih celic, ki jih RNA v situ hibridizacija (ISH).
RNA ISH opravljen na-formalin fiksno in parafinskih vgrajeni osebka tankem črevesju. (A, B) Skupina LGR5
+ matične celice so označene na dnu vseh grobnicah, pomešana z Panethova Celica. Druge črevesne označevalcev matičnih celic, kot so ASCL2
(C, D), EphB2
(E, F) in OLFM4
(G, H) so tudi ugotovili, da omejiti na grobnico baz. Povečava: A, C, E, G x 100; B, D, F, H × 400
doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s002
(PPTX)
S3 Sl. Izrazi črevesne označevalcev matičnih celic v tipa GI IM.
Preostale želodčne žleze pogosto najdemo na temeljnic tipa GI IM (A in B). RNA ISH kaže, da je LGR5
(C) in EphB2
(D) izrazi lokalizirana nad želodčnih žlez. Zanimivo je, OLFM4
(E) izraz je opaziti v želodčnih žlez, pa čeprav je njena intenzivnost veliko šibkejši od tistega, v metaplastic žleze. Ko ti želodčne žleze izgine razvija IM (A in F), porazdelitev vseh LGR5
(G), EphB2
(H) in OLFM4
(I) je strogo omejena na temeljnic. Puščice kažejo preostalih želodčne žleze. Povečava: a × 40; B, C, D, E, F, G, H, I x 200
doi. 10,1371 /journal.pone.0127300.s003
(PPTX)
S4 Sl. Črevesna označevalcev matičnih celic v intestinalno metaplazijo (IM) v želodcu korpusa.
(A in B) Majhen poudarek UI sredi fundic žlez, označeno s puščicami, kaže isti izraz vzorce LGR5
(C), ASCL2
(D) in OLFM4
(E) in UI za antruma. Povečave: a × 100; B, C, D, E × 200
doi:. 10,1371 /journal.pone.0127300.s004
(PPTX)
S5 Sl. Učinek CDX2
na izražanje črevesne izvornih celic (ISC) označevalcev pri raku želodca (GC) celičnih linijah.
Transfekciji CDX2
na štiri celične linije GC, MKN74 (A ), MKN28 (B), SNU484 (C) in SNU668 (D) bistveno poveča količino mRNA za CDX2
(**, p
< 0,01; ***, p
< 0,005). EphB2
izraz je le malo poveča z izražanjem CDX2
v treh od štirih GC celičnih linijah (***, p
< 0,005). Nobene razlike najdemo v ravneh LGR5
, ASCL2
in OLFM4
na CDX2
čezmerno (ns, ni pomembno).
doi: 10,1371 /journal.pone.0127300.s005
(PPTX)