DNA polymeraseη proteinuttryck förutser behandlingssvar och överlevnad av magsäcks patienter adenokarcinom behandlades med oxaliplatinbaserad chemotherapy

DNA polymeraseη proteinuttryck förutser behandlingssvar och överlevnad av magsäcks patienter adenokarcinom behandlades med oxaliplatin baserad kemoterapi Bild Sammanfattning
Bakgrund
DNA-polymeras η (pol η) är kapabel att kringgå DNA-addukter framställda genom cisplatin eller oxaliplatin och förknippas med cell tolerans mot platina. Tidigare studier har visat att defekt pol η resulterade i ökad cisplatin eller oxaliplatin känslighet i vissa cellinjer. Syftet med denna studie var att undersöka vilken roll pol η proteinuttryck i magsäcks adenocarcinom.
Metoder
Fyra adenocarcinom cellinjer valdes för att undersöka sambandet mellan pol η proteinuttryck och oxaliplatin känslighet genom western blotting och MTT-analys. Åttio magsäcks patienter adenokarcinom behandlades med FOLFOX eller XELOX regim som första linjens behandling analyserades, motsvarande förbehandlingsformalinfixerade paraffininbäddade tumörvävnad användes för att detektera pol η proteinuttryck genom immunhistokemi. Förhållande mellan pol η proteinuttryck och kliniska funktioner och resultatet av dessa patienter analyserades.
Resultat
Ett positivt linjärt samband mellan pol η proteinuttryck och 48 timmar IC50 värden av oxaliplatin i fyra gastric cancercellinjer observerades. Positivitet av pol η proteinuttryck var starkt förknippad med dålig behandlingssvar, liksom kortare överlevnad både univariata (8 kontra 14 månader, P < 0,001) och multivariat (hazard ratio, 4,555; 95% konfidensintervall, 2,461-8,429; P <. 0,001) analys i åttio magsäckscancerpatienter
slutsatser
Vår studie visar att polη är en prediktiv faktor för behandlingssvar och överlevnad av magsäcks patienter adenokarcinom behandlades med FOLFOX eller XELOX som första linjens kemoterapi. Därför bekräftar värdet av polη i studier med prospektiv design är obligatorisk.
Bakgrund
Stomachcancer är den fjärde vanligaste cancerformen i världen, med 603,003 nya fall bland män och 330,290 nya fall bland kvinnor per år [1]. Det är den näst vanligaste orsaken till cancerrelaterad död (700.000 dödsfall årligen), med nästan två tredjedelar av fallen förekommer i utvecklingsländer och 42% enbart i Kina [2]. Kirurgi är fortfarande en stor potential metod för att bota sjukdomen; dock kommer cirka 84% av gastric cancerpatienter utvecklar vara en avancerad sjukdom, med 30% av lokalt avancerad fall, 30% metastatiska sjukdomar vid diagnos, och 24% återfall sjukdomar [3]. Litteraturer visade att medianöverlevnaden var bara 3-4 månader bland avancerad magsäckscancer patienter utan kemoterapi. Den nya generationen av kemoterapeutiska medel, såsom Oxaliplatin kan förlänga överlevnaden i avancerad magsäckscancer att vara 10 till 12 månader; dessutom kan kemoterapi också förbättra livskvaliteten [4-12]. Terapeutisk effekt beror främst på svaret av läkemedel till tumör under första linjens behandling, eftersom det hittills bara en liten fas III-studie med 120 fall visade en blygsam överlevnadsfördel av irinotekan monoterapi över stödjande vård ensam [13]. Tyvärr, på grund läkemedelsresistens, kan uppnås endast 30-50% svarsfrekvens trots att administrera en ny generation läkemedel såsom docetaxel, oxaliplatin, capecitabin, irinotekan, S1, etc till patienter med avancerad magsäckscancer som första linjens behandling [3]. Det innebär minst 50% av patienterna måste genomgå ineffektiv behandling, vilket inte bara kan minska patienternas livskvalitet, men också öka den ekonomiska bördan. Så hur att förutsäga svaret av kemoterapimedel i magcancer är en mycket viktig vetenskaplig fråga.
Oxaliplatin är den tredje generationen platina, spelar en viktig roll vid kemoterapi för mag-tarmcancer. Oxaliplatinbaserad kombinationsbehandling såsom oxaliplatin plus 5-FU eller 5-FU-liknande läkemedel har visat sig vara aktiv i ca 40-50% av avancerad magsäcks cancerpatienter [14-16]. Oxaliplatin och cisplatin dela liknande mekanism, och orsaka mono-addukter och intra-sträng eller inter-strängtvärbindningar i den dubbla DNA-spiralen som allvarligt blockera DNA-syntes [17-19]. När detta händer, kan vissa vägar av DNA-skador reparation slå på, inklusive nukleotid excision reparation (NER), mismatch reparation (MR), homolog rekombination (HR), translesion DNA-syntes (TLS) [20]. Dessa additions reparationer ske främst genom NER [21]. TLS är ett alternativt sätt att reparera dessa skador, som huvudsakligen sker genom DNA-polymeraser η [22]. Polymeraseη (Polη), en av lesion-replikerande enzymer, inkorporerar den korrekta nukleotiden över lesioner såsom en platina addukt av TLS och fortsätter kedjeförlängning, medan klassiska pols kan inte [23]. Polη har den högsta effektiviteten hos förbi Pt-GG inom sträng diadducts orsakade av platina bland dessa lesion replikerande enzymer, med begränsad trohet [23, 24]. Nyligen gjorda experiment har visat att avsaknaden av polη resulterar i en statistiskt signifikant förbättring i cisplatin känslighet när man jämför polη-null xeroderma pigmentosum-variant humana fibroblaster med polη-uttryckande dem [25]. Den här förbättringen observeras också när cellerna behandlades med karboplatin och oxaliplatin [25]. Nya data visar att polη mRNA-nivå negativt korrelerad med cisplatin känsligheten hos icke småcellig lungcancer (NSCLC) cellinjer [26].
I den aktuella studien, rapporterar vi för första gången förhållandet mellan polη proteinuttryck och oxaliplatin känslighet av gastric cancercellinjer och betydelsen av att förutsäga behandlingsrespons och överlevnad patienter med metastaserande magcancer behandlades med oxaliplatin baserad kemoterapi.
Material och metoder
cellinjer sälja The gastric cancercellinjer, inklusive SGC7901 , AGS, MKN45, och MGC803, donerades av professor Libing Song från staten Key Laboratory of Oncology i södra Kina (Cancer Center of Sun ännu-sen University). Alla cellinjer hölls i RPMI 1640 (Gibco) kompletterat med 10% fetalt bovint serum (Gibco), förutom MKN 45 med 20% fetalt bovint serum.
Patienter och prover
Patienter i vår kliniska databasen med kemoterapi naiva ades histologiskt verifierad metastaserad avancerad magsäckscancer inskrivna för studien. Alla patienter fick ta emot FOLFOX (fluorouracil, leukovorin och oxaliplatin) eller XELOX (capecitabin och oxaliplatin) regim som första linjens behandling vid cancercentrat av Sun Yat-sen University, och formalinfixerade paraffininbäddade förbehandlings prover enligt gastro biopsier eller palliativ operation erhölls. Histopatologiska egenskaper bekräftades genom förblindade av de ursprungliga patologi bilder. TNM klassificering användes för patologisk staging, och Världshälsoorganisationen klassificering användes för patologisk betygssättning. Andra inklusionskriterier ingår ålder mellan 18-80, Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) performance status av två eller mindre, andra linjens kemoterapi eller inte, ingen strålbehandling. Alla patienter lämnade skriftliga informerat samtycke; vi fick separat tillstånd för användning av prover. Studie godkännande erhölls från oberoende etiska kommittéer vid Cancer Center i Sun Yat-Sen universitetet. Studien genomfördes i enlighet med de etiska normerna i World Medical Association Helsingforsdeklarationen.
Uppföljning och utvärdering
Patienterna följdes upp per telefon eller brev kommunikation en gång varje år för totalt 4 år. Total överlevnad definierades som tiden från och med dagen för bekräftad diagnos till döds och censurerad vid tidpunkten för sista kontakten för en överlevande patient. Sjukdom svar utvärderades enligt Response Evaluation Criteria in Solid Tumors (RECIST kriterier) [27].
Cytotoxicitetsanalyser
Cell tillväxthämning bestämdes genom 3- (4,5-dimetyltiazol-2-yl) -2 , 5-difenyltetrazoliumbromid analys (MTT-analys). I korthet ympades celler i 96-brunnsplattor och fick fästa över natten. Efter 48 timmars drog inkubation vid olika koncentrationer (37 ° C), MTT-reagens (5 mg /ml, 20 | il /brunn) sattes till varje brunn och inkuberades under ytterligare 4 timmar. Plattorna centrifugerades sedan (1500 g, 5 minuter) och supernatanten avlägsnades. Cellpellets upplöstes i 200 uL DMSO. Absorbansen bestämdes med användning av Model 550 Microplate Reader (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) vid en våglängd av 570 nm, med bakgrundssubtraktion vid en våglängd av 630 nm. Alla experiment utfördes i triplikat. Den koncentration som krävs för att inhibera celltillväxt med 50% (IC50) beräknades från överlevnadskurvor med användning av Bliss-metoden [28].
Western blotting
Cellerna tvättades med iskall fosfatbuffrad koksaltlösning och skördades i provtagningsbuffert [ ,,,0],62,5 mmol /L Tris-HCl (pH 6,8), 2% SDS, 10% glycerol och 5% 2-h-merkaptoetanol]. Proteinkoncentrationen bestämdes genom Bradford-analys (Bio-Rad Laboratories). Lika stora mängder av proteiner applicerades på 7,5% polyakrylamid SDS-geler (SDS-PAGE), åtskilda elektroforetiskt, och överfördes på polyvinylidenfluorid-membran. Efter blockerades i 5% fettfri mjölk i TBST-buffert (10 mmol /L Tris-HCL, 150 mmol /l NaCl och 0,1% Tween 20, pH 8,0) under 1 h vid rumstemperatur, membranet inkuberades med anti-polη kanin-antikropp (1: 400, Abcam). Polη uttryck detekterades med pepparrotsperoxidas-konjugerad get-anti-kanin-IgG och förstärkt kemiluminescens. Anti-α-tubulin antikropp användes som laddningskontroll.
ImageJ programvara från National Institutes of Health (NIH) användes för att kvantifiera protein.
Immunohistokemi
Immunhistokemisk (IHC) analys gjordes för att upptäcka polηprotein uttryck i 80 humana gastriska cancervävnader. I korthet innebar detta vävnadssnitt avparaffinerades i xylen vid 37 ° C under 20 minuter och rehydreras. Endogen peroxid blockerades genom inkubering av sektionerna med 3% väteperoxid i metanol under 20 minuter vid 37 ° C. Då sektionerna nedsänktes i 10 mM citratbuffert (pH 6,0) och microwaved för antigen hämtning, följt av inkubering med kanin-anti- polη (1: 100; Abcam) över natten vid 4 ° C. Efter tvättning vävnadssnitt behandlades med pepparrotsperoxidas-märkt sekundär antikropp i 30 minuter. Sektionerna har utvecklats med diaminobensidintetrahydroklorid (DAB) och motfärgades med analys av immunohistokemi hematoxylin.
I vår studie genomfördes av två oberoende observatörer baserat på andelen positivt färgade tumörceller. Om det finns skillnader mellan dessa två observatörer, har dessa slides en förnyad undersökning av båda utredarna med hjälp av en multiheaded mikroskop. Tumörer med mer än 5% av POLη-positiva cancerceller betraktades som positiv (nukleär färgning), annars negativt.
Statistisk analys
Receiver Operating Characteristic (ROC) kurvan analys och Fishers exakta test utfördes för att välja IHC Pol -positivt värde med högsta precision. 2 × 2 bord konstruerades givande känslighet, specificitet, positiva och negativa prediktiva värdet, och noggrannhet beräknades som andel av sant positiva och sant negativa patienter av hela patienter. Alla statistiska analyser genomfördes av SPSS 15,0 statistiskt programpaket (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). P-värde < 0,05 ansågs vara statistiskt signifikant. Kaplan-Meier-analys med log-rank test användes för univariata analyser. Variabler som visar en trend för association med överlevnad (P < 0,05) valdes ut för att ingå i den slutliga multivariat Cox proportional hazards modell. Förhållandet mellan polη uttryck och clinicopathologic egenskaper undersöktes av en chitvåtest och Fishers exakta test.
Resultat
Polη uttryck korrelerar med oxaliplatin känslighet för magcancer cellinjer
oxaliplatin känslighet fyra gastric cellinjer ( SGC7901, AGS, MKN45, och MGC803) detekterades genom MTT-analys som beskrivits ovan. Endogent polη proteinuttryck av fyra cellinjer jämfördes med varandra med hjälp av western blotting och halv maximal inhiberande koncentration (IC50) värden av oxaliplatin för celler visas i Figur 1. Signifikant och positiv korrelation observerades, såsom visas i fig 2 i jämförelse polη proteinuttryck med IC50-värden av oxaliplatin. Figur 1 Expression analys av POL η protein i magcancer cellinjer genom western blotting och 48 timmar IC50 värden av oxaliplatin för gastric cancerceller (umol /L).
Figur 2 Samband mellan POL η uttryck och IC50 av oxaliplatin för gastric celler .
patientkarakteristika
Åttio patienter från januari 2005 och juli 2009 har i efterhand analyseras. Patienterna hade en medianålder på 54 (intervall, 26,0 till 79,0), med 49 hanar och 31 honor. Andra kliniska egenskaper sammanfattades i Tabell 1. Svarsfrekvensen (CR + PR) med första linjens XELOX eller FOLFOX kemoterapi var 47,5%, klinisk nytta (CR + PR + SD) var 77,5%. En del av dessa patienter (23/80) hade andrahands chemotherapy.Table 1 Patient egenskaper (N = 80) katalog karakteristiska
Nej av patienterna
%
Ålder (år) katalog Median
54,0
Range
26,0-79,0
Sex
Man
49
61,3
Kvinna
31 38,7
ECOG performance status
0
36
45,0 1
42
52,5
2
2 Review 2,5
Primära platser
Cardia
21
26,3
Body
18
22,5
antrum /pylorus
41
51,2
metastaslokalisationer
Lever
26
32,5
Lung
21
26,3
bukhinna
19 23,8
övriga
14
17,4
Patologisk differentiering N0
G1 2
2,5
G2
26
32,5
G3
52
65,0
behandlingssvar (1: a raden) katalog CR 2
2,5
PR
36
45,0
SD
24 30,0
PD
18
22,5
2.-line chemotherary regim
BSC
57 71,3
FOLFIRI
6
7,5
XELIRI
8
10,0
DX
6
7,5
TP
3
3,7
CR, fullständigt svar; PR, partiell respons; SD, stabil sjukdom; PD, sjukdomsprogression,
BSC, bästa understödjande behandling; FOLFIRI, 5-fluracil plus leukovorin plus irinotekan; XELIRI, capecitabin plus irinotekan; DX, docitaxel plus capecitabin; TP, paklitaxel plus cisplatin.
De kriterier som tumörvävnad med mer än 5% av Polη-positiva cancerceller definierades som IHC-positiv har högsta noggrannhet förutsäga klinisk nytta av första linjens kemoterapi
Tumör vävnader åttio metastaserad patienter magsäckscancer som behandlades med FOLFOX eller XELOX regim användes för att detektera polη proteinuttryck genom immunohistokemi (Figur 3). Eftersom andelen nucleus-färgning tumörceller i samtliga fall var inte mer än 10%, försökte vi att välja IHC Polη-positivt värde med högsta precision för att förutsäga klinisk nytta av första linjens kemoterapi. Vi definierade nio IHC-positivt värde: ≥ 1%, ≥ 2%, ≥ 3%, ≥ 4%, ≥ 5%, ≥ 6%, ≥ 7%, ≥ 8%, ≥ 9%, och konstruerade nio 2 x 2 tabell. Tabell 2 är visade som ett exempel. Känslighet, specificitet, positiva och negativa prediktiva värdet, och noggrannhet beräknades och användes för att rita ROC kurva. Som visade i tabell 3 och figur 4 avskurna värde ≥ 5%, har högsta noggrannhet (88,8%). Så tumörer med mer än 5% av POLη-positiva cancerceller betraktades som positiv (nukleär färgning), annars negativt. Figur 3 Uttrycket av POLη protein i avancerad magsäckscancer som undersöktes genom immunhistokemi. A. negativ uttryck bild i tumörvävnad (× 400). B. POLη protein kunde påvisas i kärnan av gastric cancercell (× 400).
Tabell 2 DNA-polymeras η proteinuttryck och klinisk behandlingssvar

klinisk misslyckande
klinisk nytta
Totalt fall
Pol η (+) katalog 16
7
23
Pol η ( -) 2
55
57
Totalt fall
18
62
80
≥ 5% Polη uttryck i tumörceller som definieras som positiv
tabell. 3 Noggrannhet, sensitivitet, specificitet, positivt prediktivt värde, och negativa prediktiva värdet enligt Polη IHC räkna procent i att förutsäga kemoterapi svar på FOLFOX eller XELOX regim
Tumörcell cell~~POS=HEADCOMP positiv procent, skär off

Specificity

Sensitivity

PPV

NPV

Accuracy

1%
0.419
0.889
0.308
0.929
0.525
2%
0.500
0.889
0.340
0.940
0.588
3%
0.645
0.889
0.421
0.952
0.700
4%
0.823
0.889
0.593
0.962
0.838
5%
0.887
0.889
0.696
0.965
0.888
6%
0.887
0.778
0.667
0.932
0.863
7%
0.978
0.667
0.705
0.904
0.863
8%
0
0.389
1.000
0.849
0.863
9%
0
0.111
1.000
0.795
0.800
PPV, positiva prediktiva värdet; NPV, negativa prediktiva värdet.
Figur 4 Mottagare kurvan för Polη IHC räknar förutsäga kemoterapi svar på FOLFOX eller XELOX regim.
Förhållandet mellan polη uttryck med de kliniska egenskaperna hos magsäckscancer
Som framgår av tabell 4 endast 23 av 80 fall (28,75%) hade polη protein positivt uttryck (≥ 5% Polη-positiva cancerceller), 16 av de 23 positiva fall (69,56%) misslyckades med att behandlingen däremot endast två av de 57 negativa fall (3,51%) hade utvecklats sjukdom efter FOLFOX eller XELOX kemoterapi. Polη uttryck starkt korrelerade med behandlingssvar på oxaliplatinbaserad kemoterapi av magsäckscancer (P < 0,001), medan den inte är förknippad med ålder, kön, primära platser, metastaser eller patologisk differentiering levels.Table 4 Samband mellan POL η uttryck och clinicopathologic egenskaper hos patienter med ventrikelcancer
karakteristiska
POLη
χ2 prov
P-värde

Fishers test
P-värde
vid Positiv
(n = 23)
Negativ
(n = 57) katalog

vid Age (y) Hotel < 60
16
37
0,690
0,797
≥ 60
7
20
Kön
Man
14
35
0,695
1,000
Kvinna
9 22
Primära platser
Cardia
10
11
0,084
0,102
Body
4
14
Antrum /pylorus
9
32
metastaslokalisationer
Lever
11
15
0,247
0,269
Lung
5
16
bukhinna
3 16
övriga
4 10
Patologisk differentiering
G1 2
0
0,068
0,107
G2
6
20
G3
15
37
behandlingssvar
CR + PR + SD
7
55
< 0,001 Hotel < 0,001
PD
16 2
CR, fullständigt svar; PR, partiell respons; SD, stabil sjukdom; PD, sjukdomsprogression.
Spearman korrelationsanalys ytterligare göras för att bekräfta sambandet mellan polη uttryck och clinicopathologic funktioner. Pearson beredskapskoefficient visat att polηexpression nivåer var signifikant relaterade till behandlingssvar (P < 0,001). Likaledes var inga signifikanta korrelationer med andra faktorerna (data visas ej) Review Förhållande mellan polη uttryck och överlevnad av magsäckscancer
Kaplan-Meier univariata överlevnadsanalys visade att positivt uttryck för polη i tumörceller och dålig behandlingssvar var signifikant associerade med kortare överlevnad. Medianöverlevnadstiden för polη positiva och negativa fall var 8 och 14 månader respektive, såsom visas i figur 5 (log rank, P < 0,001). Multivariat överlevnadsanalys (Cox regressionsmodell) avslöjade att uttrycket av polη var oberoende prognostiska faktorer. Den 95,0% konfidensintervall (CI) för relativa risken var 2,461-8,429 (Tabell 5). Dessa resultat indikerade att uttrycket av polη i tumörvävnad förutsagda kortare överlevnad. Inget samband sågs mellan överlevnad och resten kliniskt patologiska parametrar såsom ålder, kön, primära tumörställen, patologisk differentiering och metastatisk sites.Table 5 multivariat analys av total överlevnad i magcancer
Faktorer
egenskaper
Hazard ratio
95% CI
P-värde
vid Ogynnsamma
God
vid vid vid Age
≥ 60 Hotel < 60
0,956
0,570-1,602
0,863
Histologisk betygs
Dåligt
Tja /måttligt
1,428
0,861-2,369
0,168
POL η
positiv
negativ
4,555
2,461-8,429 Hotel < 0,001
CI, konfidensintervall.
Figur 5 Kaplan-Meier kurvor med univariat analys (log-rank test) för patienter med negativ POLη uttryck kontra positiv POLη uttryck tumörer.
Diskussion
aktuella studien delvis avslöjade roll DNA polymeraseη som en DNA-reparationsproteinet i magcancer genom att detektera dess uttryck i fyra gastric cancercellinjer och 80 patienter med metastaserande adenocarcinom i ventrikeln som hade fått FOLFOX eller XELOX som första linjens kemoterapi. Resultaten visade att expressionsnivån av polη i tumörcellinjer var korrelerad med känsligheten hos oxaliplatin (Figur 2). För tumörvävnaden, endast den positiva expressionen inträffade i 28.75% fall (23 av 80), och uttrycket var blygsam. Dock stark korrelation mellan polη uttryck och behandlingsrespons samt överlevnad. Alla resultat visade att polη positivitet var en indikator för dålig behandlingssvar och kortare överlevnaden hos patienter med ovanstående inställningar.
DNA polymeraseη är kodad genom POLH gen som är en av de 150 humana DNA-reparationsgener, vars avhopp resulterar i xeroderma pigmentosum variant (XP-V) syndrom, manifesterar mycket känslighet för UV-strålning och en tendens att utveckla hudcancer [29-31]. Polη är en viktig skada replikerande enzym som kopierar över pyrimidin dimerer som införts av UV-strålning, undvika höga genmutation [32]. Förutom pyrimidin-dimerer har polη visats replikera över cisplatintvärbundna intrastrand GG ställen [33]. Vissa undersökningar visar att polη uttryck korrelerade med känslighet för cisplatin eller oxaliplatin i XP-V humana fibroblaster cell- och lungcellinjer, och polη verkade vara en behandlingssvar prediktiv markör i NSCLC patienter med cisplatinbaserad kemoterapi [26, 27] Mindre.
är känt om den roll polη i magcancer. Det är den första studien att detektera känsligheten hos oxaliplatin i dessa fyra gastric carcinoma cellinjer (SGC7901, AGS, MKN45 och MGC803) av MTT-analys och proteinuttryck genom Western blotting. Vi fann en signifikant linjärt förhållande mellan dem. Vår studie var i viss mån överensstämmer med observationen i lungcancer cellinjer genom Paolo Ceppi et al, men vad de upptäckt var polη mRNA-nivå och cisplatin känslighet [27].
Sedan vi restrospectively analyserat uttryck av polη protein i åttio metastaserande patienter med avancerad magsäckscancer som fick FOLFOX eller XELOX som kemoterapi. Vi observerade först att andelen polη-färgningstumörceller i alla 80 fall var inte mer än 10%, så vi definierat ≥5% som IHC positiva enligt riktigheten i att förutsäga klinisk nytta med XELOX eller FOLFOX kemoterapi. Med denna standard, hade endast 23 patienter positivt uttryck, med 7 av 62 kliniska fall förmåns (CR + PR + SD) från kemoterapi och 16 av 18 PD fall. Uttrycket hastighet mellan kliniska nyttan gruppen (7/62, 11,3%) och PD-gruppen (16/18, 88,9%) var signifikant olika (P < 0,001). Detta visade att Polη positivitet kan förutsäga ineffektiva kemoterapi med XELOX eller FOLFOX regim. Resultatet överensstämde med vår studie i celler som Polη uttryck korrelerar negativt med oxaliplatin känslighet för magcancer cellinjer.
Vi fann en signifikant överlevnadsfördel i polη negativa patienter. Denna förmån kom troligen från effektiv terapi av oxaliplatin, med tanke på att polη starkt korrelerad med behandlingsrespons. Det är väl känt att effektiv kemoterapi skulle förbättra livskvaliteten för patienter med ventrikelcancer och förbättra överlevnaden; vår undersökning kan hjälpa till att förutsäga behandlingssvar av oxaliplatinbaserad kemoterapi och överlevnad, på så sätt undvika onödig behandling i början.
Det finns flera begränsningar för vår studie. För det första är detta en retrospektiv studie med ett litet antal patienter. I den förinställda studien ingen signifikant samband mellan polη uttryck och ålder, kön, primära tumörställen, metastaser eller patologisk differentiering erhållits på grundval av ett sådant fall nummer. Det är möjligt att få betydande resultat i vissa clinicopathologic egenskaper såsom primära platser eller patologisk differentiering (P-värde nära 0,05), om tillräckligt med patienter. Därför enlargeing ärendenummer och utför prospektiva studier är obligatorisk. För det andra, eftersom testet noggrannhet beräknades med hjälp av de kriterier som fastställdes av ROC kurva analys, våra resultat behövs validering i en oberoende kohort. För det tredje, är relativt låg i magcancer, på grund av subjektivitet uttrycket av polη kan felet i IHC räkna vara större, vilket kan påverka sensitivitet och specificitet när förutsäga behandlingssvar, så mer exakt metod behövs. Forth, är det väl känt att platina motstånd är mycket komplicerad, så polη, som en enda parameter, är svårt att förutsäga terapisvar på ett exakt sätt.
Trots begränsningar, är vår studie en av de få försök att definiera kriterier för in vivo chemosensitivity av oxaliplatininnehållande regimen använder kliniskt svar som referensstandard. Det kan vara ett effektivt och kostnadsbesparande sätt att förutsäga behandlingsrespons.
Slutsats
Sammanfattningsvis visade denna studie att polη är en viktig prediktor för behandlingssvar hos patienter med magsäckscancer får kemoterapi av Folfox eller Xelox . En sådan markör kan hjälpa läkare att välja den optimala kliniska strategin för patienter med avancerad magsäckscancer. Dessutom visade multivariata överlevnadsanalys att uttrycket av polη var oberoende prognostiska faktorer. Resultaten måste bekräftas i en större prospektiv studie före applicering i klinisk praxis.
Notes
Kai-yuan Teng, Miao-Zhen Qiu bidragit lika för detta arbete.
Förkortningar
GG
guanin-guanin
CR:
fullständigt svar
DNA:
deoxiribonukleinsyra


FOLFOX
fluorouracil, leukovorin och oxaliplatin
HR:
homolog rekombination
mRNA:
budbärare ribonukleinsyra
IC50:
halv hämmande koncentrationen
IHC:
immunohistokemi


MMR:
mismatch reparation
WB:
western blotting
MTT-analysen:
3- (4,5-dimetyltiazol-2-yl) -2,5-difenyltetrazoliumbromid analys
NER:
nucleotide excision repair

OS:
överlevnad
PD:
sjukdomsprogression
Pol η:
polymeras eta
PR:
partiell respons
SD:
stabil sjukdom
pt:
platina
ROC:
receiver Operating Characteristic
TLS:
translesion syntes


XELOX:
capecitabin och oxaliplatin

XPV.
xeroderma pigmentosum variant

förklaringar
Tack
Vi tackar anställda vid institutionen för medicinsk onkologi vid Sun Yat-sen universitetet Cancer Center för deras förslag och hjälp
bevilja stöd. National Natural Science Foundation i Kina bidrag 30672408, Guangzhou Bureau of Science and Technology bidrag 2006Z3-E0041 och Sun Yat-sen universitetet 985 Program Inledande Fund (Kina).
Authors 'ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan finns länkar till författarnas ursprungliga inlämnade filer för bilder.

• Utvärdera en dator stöd för bedömning av magen symptom (ECASS): studieprotokollet för en randomiserad kontrollerad studie
• Detektering av karcinoembryonalt antigen messenger RNA i blod med användning av kvantitativ realtids-omvänt transkriptas-polymeraskedjereaktion för att förutsäga återfall av gastrisk adenokarcin…