DNA polymeraseη proteiinin ilmentyminen ennustaa hoitovasteen ja eloonjäämisen mahalaukun metastasoivaa adenokarsinoomaa hoidetuilla potilailla oksaliplatiinipohjaisen kemoterapiaa

DNA polymeraseη proteiinin ilmentyminen ennustaa hoitovasteen ja eloonjäämisen mahalaukun metastasoivaa adenokarsinoomaa hoidetuilla potilailla oksaliplatiinipohjaisen kemoterapiaa
tiivistelmä
tausta
DNA-polymeraasia η (pol η) pystyy ohittaminen DNA additiotuotteiden tuottama sisplatiinin tai oksaliplatiinia liittyy solujen toleranssin platinaa. Aiemmat tutkimukset osoittivat, että viallisia pol η aikaan voimakkaampaa sisplatiinin tai oksaliplatiini herkkyys joissakin solulinjoissa. Tarkoituksena Esillä oli tutkia roolia pol η proteiinin ilmentymistä mahalaukun metastasoivaa adenokarsinoomaa. Tool Menetelmät
Neljä mahalaukun adenokarsinooman solulinjoja valittiin tutkia suhdetta pol η proteiinin ilmentymistä ja oksaliplatiinin herkkyyttä western blottauksella ja MTT-analyysi. Kahdeksankymmentä mahalaukun metastasoivaa adenokarsinoomaa saaneilla potilailla FOLFOX tai XELOX hoito ensilinjan kemoterapiaa analysoitiin, vastaava esikäsittely formaliinilla kiinnitetyt parafinoidut kasvainkudoksista käytettiin havaitsemaan pol η proteiinin ilmentymistä immunohistokemiallisesti. Suhde pol η proteiinin ilmentymisen ja kliinisiä piirteitä ja tulokset näistä potilaista analysoitiin.
Tulokset
Positiivinen lineaarinen suhde pol η proteiinin ilmentymisen ja 48 h IC50-arvot oksaliplatiinille neljän mahasyövässä solulinjoissa havaittiin. Positiivisuus pol η -proteiiniekspressio vahvasti yhteydessä huonoon hoitovasteeseen sekä lyhyemmät selviytymistä sekä yhden muuttujan (8 vs. 14 kuukautta; P < 0,001) ja monimuuttuja (riskisuhde 4,555; 95%: n luottamusväli, 2,461-8,429; P < 0,001) analyysi kahdeksankymmentä mahalaukun metastasoivaa adenokarsinoomaa potilailla.
Johtopäätökset
Tutkimuksemme osoittaa, että polη on ennustava tekijä hoitovasteen ja eloonjäämisen mahalaukun metastasoivaa adenokarsinoomaa saaneilla potilailla FOLFOX tai XELOX ensilinjan kemoterapiaa. Siksi vahvistaa arvo polη tutkimuksissa mahdollisille muotoilu on pakollista.
Tausta
Mahasyöpä on neljänneksi yleisin syöpä maailmassa, jossa 603003 uutta tapausta miehillä ja 330290 uutta tapausta naisten vuodessa [1]. Se on toiseksi yleisin syy syöpään liittyvän kuoleman (700000 kuolemaa vuosittain), lähes kaksi kolmasosaa tapauksista tapahtuu kehitysmaissa ja 42% yksin Kiinassa [2]. Leikkaus on edelleen suuria mahdollisuuksia menetelmän paranna sairautta; kuitenkin noin 84% mahasyöpäpotilaista kehittyy olla kehittynyt sairaus, jossa 30% paikallisesti edennyt tapauksissa 30% metastasoitunut tautien diagnoosi, ja 24% toistumisen sairauksista [3]. Kirjallisuudessa osoitti, että mediaanielossaolosta oli vain 3-4 kuukautta joukossa edennyt mahasyöpä potilaita ilman kemoterapiaa. Uuden sukupolven kemoterapeuttisten aineiden, kuten Oksaliplatiini, voi pidentää elinaikaa kehittyneissä mahasyövän olla 10-12 kuukausi; Lisäksi kemoterapia voi myös parantaa elämänlaatua [4-12]. Terapeuttinen vaikutus riippuu pääasiassa reaktio huumeiden kasvaimen aikana ensilinjan kemoterapiaa, koska toistaiseksi vain yksi pieni vaiheen III tutkimuksessa 120 tapausta osoitti vaatimaton selviytymisen hyötyvät irinotekaani monoterapian yli oireenmukaista hoitoa yksin [13]. Valitettavasti, koska lääkeresistenssi, vain 30-50% vaste voidaan saavuttaa vaikka annettaessa uuden sukupolven lääkkeiden, kuten doketakselin, oksaliplatiini, kapesitabiinin, irinotekaanin, S1, jne edennyt mahasyöpä potilaita ensilinjan hoitoon [3]. Tämä tarkoittaa vähintään 50%: lla potilaista on tehtävä hoidon tehottomuus, joka voi paitsi vähentää potilaiden elämänlaatua, mutta myös lisätä taloudellista taakkaa. Joten miten ennustaa vastetta kemoterapian aineiden mahasyövän on erittäin tärkeä tieteellinen asia.
Oksaliplatiini on kolmannen sukupolven platina, on keskeinen rooli kemoterapiassa ruoansulatuskanavan syöpään. Oksaliplatiinipohjaisen yhdistelmä hoito kuten oksaliplatiinin ja 5-FU tai 5-FU-kaltainen lääke on osoittautunut aktiivisesti noin 40-50% edennyt mahasyöpä potilaita [14-16]. Oksaliplatiini ja sisplatiini jakavat samaa mekanismia, ja aiheuttaa mono-addukteja ja sisäisten lohkon välisten ja lohkon rajat lenkkejä kaksinkertainen DNA helix että vakavasti estävät DNA-synteesiä [17-19]. Kun näin tapahtuu, jotkut polkuja DNA-vaurion korjaamiseen voi kytkeä päälle, mukaan lukien nukleotidin Leikkauskorjauksessa (NER), mismatch korjaus (MR), homologisen rekombinaation (HR), translesion DNA-synteesin (TLS) [20]. Nämä addukti korjaukset tapahtuvat ensisijaisesti NER [21]. TLS on toinen vaihtoehtoinen tapa korjata näitä vaurioita, mikä tapahtuu pääasiassa DNA-polymeraasien η [22]. Polymeraseη (Polη), yksi vaurio-jäljittelevän entsyymejä, sisältää oikean nukleotidisekvenssin yli vaurioita kuten platina additiotuotteen TLS ja jatkuu ketjun pidentymisen, kun taas klassinen Pols voi [23]. Polη on korkein tehoa ohittaminen Pt-GG sisäistä lohkon diadducts aiheuttama platina Näistä vaurion replikoituvat entsyymejä, rajoitettu uskollisuus [23, 24]. Viimeaikaiset kokemukset ovat osoittaneet, että puuttuminen polη johtaa tilastollisesti merkitsevä parannusta sisplatiinin herkkyys verrattaessa polη-null Xeroderma pigmentosum-variantti ihmisen fibroblastien polη ilmentävien ne [25]. Tämä parannus on myös havaittu, kun soluja käsiteltiin karboplatiinin ja oksaliplatiinin [25]. Viimeaikaiset tiedot osoittavat, että polη mRNA-tasolla korreloi negatiivisesti sisplatiinin herkkyys ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) solulinjat [26].
Tässä tutkimuksessa raportoimme ensimmäistä kertaa suhde polη proteiinin ilmentymisen ja oksaliplatiini herkkyys mahalaukun syövän solulinjoista ja merkityksen, joka ennustaa hoitovasteen ja eloonjäämisen metastasoituneen mahasyövän hoidetuilla potilailla oksaliplatiinipohjaisen kemoterapiaa.
Materiaalit ja menetelmät
solulinjat
mahasyöpä solulinjat, mukaan lukien SGC7901 , AGS, MKN45, ja MGC803, lahjoitti professori Libing Song valtion Key Laboratory of Oncology Etelä-Kiinassa (Cancer Center Sun vielä-sen University). Kaikkia solulinjoja pidettiin yllä RPMI 1640: ssä (Gibco), jota oli täydennetty 10% naudan sikiön seerumia (Gibco), lukuun ottamatta MKN 45 20% naudan sikiön seerumia.
Potilaat ja näytteet
potilaat kliinisen tietokannan kemoterapiaa aiemmin saaneet , histologisesti todistettu metastaattisen edennyt mahasyöpä otettiin tutkimukseen. Kaikilla potilailla oli saada FOLFOX (fluorourasiili, leukovoriinin ja oksaliplatiinin) tai XELOX (kapesitabiini ja oksaliplatiinia) hoito ensilinjan kemoterapiaa Cancer Center of Sun Yat-sen University, ja formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut esikäsittely näytteet alle gastroscope koepaloja tai lievittävää toiminta saatiin. Histopatologisten ominaisuudet vahvistettiin sokaissut tarkistaa alkuperäisen patologian dioja. TNM luokittelu käytettiin patologisen lavastus, ja Maailman terveysjärjestön luokitusta käytettiin patologista luokittelua. Muita sisällyttämiskriteerit sisältyvät ikä välillä 18-80, Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) tehokkuustilana 2 tai vähemmän, toinen rivi kemoterapiaa tai ei, ei sädehoitoa. Kaikki potilaat kunhan kirjallinen lupa; saimme erillinen suostumus yksilöiden käyttämistä. Tutkimus hyväksyntä on saatu riippumattomien eettisten toimikuntien Cancer Center of Sun Yat-Senin yliopistossa. Tutkimus tehtiin mukaisesti eettisiä Maailman lääkäriliiton Helsingin julistuksen.
Seuranta ja arvioinnit
Potilaita seurattiin puhelimitse tai kirjeitse viestintä kerran vuodessa yhteensä 4 vuotta. Kokonaiselossaoloaika määriteltiin aika alkaen diagnosoitu kuolemaan ja sensuroitu ajankohdan viimeinen kontakti varten elossa potilaalle. Tauti vaste arvioitiin mukaisesti Response arviointiperusteet Solid Kasvaimet (RECIST kriteerit) [27].
Sytotoksisuusmääritykset
Solujen kasvun estäminen määritettiin 3- (4,5-dimetyyli- tiatsol-2-yyli) -2 , 5-difenyylitetratsoliumbromidi-määrityksellä (MTT-määritys). Lyhyesti, solut siirrostettiin 96-kuoppalevyille ja annettiin kiinnittyä yön yli. 48 tunnin kuluttua lääkkeen inkuboinnin eri pitoisuuksina (37 ° C), MTT-reagenssi (5 mg /ml, 20 ul /kuoppa) lisättiin jokaiseen kuoppaan, ja inkuboitiin vielä 4 tuntia. Sitten levyjä sentrifugoitiin (1500 g, 5 minuuttia) ja supernatantti poistettiin. Solupelletit liuotettiin 200 ul DMSO. Absorbanssi määritettiin käyttäen Model 550 Microplate Reader (BIO-RAD, Hercules, CA, USA) aallonpituudella 570 nm, jossa taustan vähentäminen aallonpituudella 630 nm. Kaikki kokeet suoritettiin kolmena rinnakkaisena. Pitoisuus, joka tarvitaan inhiboimaan solujen kasvua 50%: lla (IC50) laskettiin eloonjäämiskäyristä käyttäen Bliss menetelmällä [28].
Western blotting
Solut pestiin jääkylmällä fosfaattipuskurilla suolaliuoksella ja korjatut näytteet puskuriin [ ,,,0],62,5 mmol /L Tris-HCI (pH 6,8), 2% SDS: ää, 10% glyserolia, ja 5% 2-h-merkaptoetanolia]. Proteiinipitoisuus määritettiin Bradford-määrityksellä (Bio-Rad Laboratories). Yhtä suuret määrät proteiineja pantiin 7,5% polyakryyliamidi-SDS-geeleissä (SDS-PAGE), erotettiin elektroforeettisesti ja siirrettiin polyvinylideenifluoridi kalvoja. Sen jälkeen estetty 5% rasvatonta maitoa TBST-puskurissa (10 mmol /L Tris-HCI, 150 mmol /l NaCl: a ja 0,1% Tween 20: tä, pH 8,0) 1 h huoneen lämpötilassa, kaivoa inkuboitiin anti-polη kanin vasta-ainetta (1: 400; Abcam). Polη ekspressio havaittiin piparjuuriperoksidaasiin konjugoitua vuohen anti-kani-IgG: tä ja tehostetun kemiluminesenssin. Anti-α-tubuliinin vasta-ainetta käytettiin lastaus ohjaus.
ImageJ ohjelmisto National Institutes of Health (NIH) käytettiin määrittämään proteiinin.
Immunohistokemia
immunohistokemiallinen (IHC) analyysi tehtiin havaitsemiseksi polηprotein ilmentymisen 80 ihmisen mahasyövän kudoksiin. Lyhyesti, kudoksen osat poistettiin parafiini ksyleenillä 37 ° C: ssa 20 minuuttia ja uudelleenhydratoitu. Endogeeninen peroksidi esti inkuboimalla kohdissa 3% vetyperoksidilla metanolissa 20 minuutin ajan 37 ° C: ssa. Sitten leikkeet upotettiin 10 mM sitraattipuskurilla (pH 6,0) ja mikroaalloilla antigeenisiä haku, jonka jälkeen inkuboitiin kanin anti polη (1: 100; Abcam) yön yli 4 ° C: ssa. Pesun jälkeen kudosleikkeiden käsiteltiin piparjuuriperoksidaasilla merkityllä toissijaisella vasta-aineella 30 minuutin ajan. Leikkeitä kehitettiin diaminobentsidiinitetrahydrokloridilla (DAB) ja vasta- värjättiin hematoksyliinillä.
Analyysi Immunohistokemian tutkimuksessamme toteutettiin kaksi riippumatonta tarkkailijaa perustuu osuus positiivisesti värjättyä syöpäsoluja. Jos on ero näiden kahden tarkkailijaa, nämä levyt ovat uusia tutkimuksia sekä tutkijat käyttämällä Monipäisen mikroskoopilla. Kasvaimia, joissa on enemmän kuin 5% POLη-positiivisten syöpäsolujen pidettiin positiivisina (nucleus värjäys), toisin negatiivinen.
Tilastollinen analyysi
Receiver operating (ROC) käyrä analyysi ja Fisherin testiä suoritettiin valita IHC Pol -positiivinen arvoa erittäin tarkasti. 2 x 2 taulukon rakennettiin myötääminen herkkyys, spesifisyys, positiivinen ja negatiivinen ennustearvo, ja tarkkuus laskettiin suhteessa oikeita positiivisia ja tosi negatiivinen potilasta koko potilaalla. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin SPSS 15.0 tilastollinen ohjelmistopaketti (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). P-arvo < 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä. Kaplan-Meier-analyysi log-rank testaus käytettiin yksiulotteista analyyseihin. Muuttujat osoittaa suuntaus yhdessä selviytymisen (P < 0,05) on valittu mukaan lopullisessa monimuuttuja Coxin suhteellisen vaarat malli. Suhde polη ilmaisun ja ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia tutkittiin chi-neliö testi ja Fisherin tarkka testejä.
Tulokset
Polη ilmaisu korreloi oksaliplatiinin herkkyys mahasyövän solulinjojen
Oksaliplatiini herkkyys neljä mahalaukun solulinjojen ( SGC7901, AGS, MKN45, ja MGC803) havaittiin MTT: llä edellä kuvatulla tavalla. Endogeeninen polη proteiinin ekspression neljän solulinjoja vertailtiin keskenään western-blottauksella ja puoli maksimaalinen estävä pitoisuus (IC50) arvot oksaliplatiinin soluja esitetään kuviossa 1. Merkittäviä ja positiivinen korrelaatio havaittiin, kuten on esitetty kuviossa 2, kun verrattiin polη proteiinin ilmentyminen IC 50-arvot oksaliplatiinia. Kuva 1 Expression analyysin POL η proteiinin mahasyövässä solulinjojen western blottauksella ja 48 h IC50-arvojen oksaliplatiinin mahasyövän soluja (umol /l).
Kuvassa 2 välinen korrelaatio POL η ilmaisun ja IC50 oksaliplatiinia mahalaukun solujen .
Potilaan ominaisuudet
Kahdeksankymmentä potilasta tammikuusta 2005 alkaen ja heinäkuussa 2009 on takautuvasti analysoitiin. Potilaiden mediaani-ikä oli 54 (vaihteluväli 26,0-79,0), jossa on 49 urosta ja 31 naarasta. Muut kliiniset ominaisuudet on esitetty yhteenvetona taulukossa 1. vaste (CR + PR) kanssa ensilinjan XELOX tai FOLFOX kemoterapia oli 47,5%, kliinistä hyötyä korko (CR + PR + SD) oli 77,5%. Osa näistä potilaista (23/80) oli toisen linjan chemotherapy.Table 1 Potilaan ominaisuudet (N = 80) B ominainen
No. potilaista
%
Ikä (v) B Mediaani
54,0
Range
26,0-79,0
Sukupuoli
Mies
49
61.3
Female
31
38,7
ECOG-toimintakykyluokka
0
36
45,0
1
42
52,5
2
2
2.5
Ensisijainen sivustot
Cardia
21
26,3
Body
18
22,5
antrum /pylorus
41
51,2
metastaasien
Maksa
26
32,5
Lung
21
26,3
peritoneum
19
23,8
Toiset
14
17.4
Patologinen erilaistuminen N0
G1
2
2,5
G2
26
32,5
G3
52
65,0
hoitovaste (1. rivi) B CR
2
2,5
PR
36
45,0
SD
24
30,0
PD
18
22.5
2.-line chemotherary hoito
BSC
57
71,3
FOLFIRI
6
7,5
XELIRI
8
10,0
DX
6
7,5
TP
3
3,7
CR, täydellinen vaste; PR, osittainen vaste; SD, stabiili tauti; PD, etenemisen sairauden,
BSC, oireenmukaista hoitoa; FOLFIRI, 5-fluracil plus leukovoriiniin plus irinotekaani; XELIRI, kapesitabiinin plus irinotekaani; DX, docitaxel plus kapesitabiinin; TP, paklitakselin ja sisplatiinin.
Kriteerit että kasvainkudoksen enemmän kuin 5% Polη-positiivisten syöpäsolujen määriteltiin IHC-positiivisia on erittäin tarkasti ennustamaan kliinistä hyötyä ensilinjan kemoterapiaa
Kasvain kudoksissa kahdeksankymmentä metastaattisen mahasyövän saaneilla potilailla FOLFOX tai XELOX hoito käytettiin havaitsemaan polη proteiinin ilmentymisen immunohistokemia (kuvio 3). Koska prosenttiosuus tuman värjäytymisen kasvainsoluja oli kaikissa tapauksissa enintään 10%, yritimme valita IHC Polη-positiivinen arvo erittäin tarkasti ennustaa kliinistä hyötyä ensilinjan kemoterapiaa. Me määritelty yhdeksän IHC-positiivinen arvo: ≥ 1%, ≥ 2%, ≥ 3%, ≥ 4%, ≥ 5%, ≥ 6%, ≥ 7%, ≥ 8%, ≥ 9%, ja rakennettu yhdeksän 2 x 2 taulukko. Taulukossa 2 on osoitti esimerkkinä. Herkkyys, spesifisyys, positiivinen ja negatiivinen ennustearvo, ja tarkkuus laskettiin ja käytettiin piirtää ROC käyrä. Kuten osoitti taulukossa 3 ja kuva 4 raja-arvo ≥ 5%, on korkein tarkkuus (88,8%). Niin kasvaimia, joissa on enemmän kuin 5% POLη-positiivisten syöpäsolujen pidettiin positiivisina (nucleus värjäys), toisin negatiivinen. Kuva 3 ilmentyminen POLη proteiinin edennyt mahasyöpä tutkittuna immunohistokemiallisesti. A. negatiivinen ilmaus kuvaa kasvainkudoksessa (x 400). B. POLη proteiini oli havaittavissa tumassa mahalaukun syöpäsolun (x 400).
Taulukko 2 DNA-polymeraasia η proteiinin ilmentymisen ja kliinisen hoitovasteen

Clinical epäonnistuminen
Kliininen hyöty
Yhteensä tapauksia
Pol η (+) B-16
7
23
Pol η ( -) B 2
55
57
Yhteensä tapauksia
18
62
80
≥ 5% Polη ilmentymistä kasvainsoluissa määritelty positiivinen.
Taulukko 3 Tarkkuus, herkkyys, spesifisyys, positiivinen ennustearvo ja negatiivinen ennustearvo mukaan Polη IHC laskemisen prosenttia ennustamisessa kemoterapiaa vastauksena FOLFOX tai XELOX kuuri
Kasvainsolulinja positiivinen prosenttia, leikata off

Specificity

Sensitivity

PPV

NPV

Accuracy

1%
0.419
0.889
0.308
0.929
0.525
2%
0.500
0.889
0.340
0.940
0.588
3%
0.645
0.889
0.421
0.952
0.700
4%
0.823
0.889
0.593
0.962
0.838
5%
0.887
0.889
0.696
0.965
0.888
6%
0.887
0.778
0.667
0.932
0.863
7%
0.978
0.667
0.705
0.904
0.863
8%
0
0.389
1.000
0.849
0.863
9%
0
0.111
1.000
0.795
0.800
PPV, positiivinen ennustearvo; NPV, negatiivinen ennustearvo.
Kuva 4 Receiver operating ominaiskäyrää Polη IHC laskemisen ennustamisessa kemoterapiaa vastauksena FOLFOX tai XELOX kuuri.
Suhde polη ilmaisun kanssa kliinisiä piirteitä metastasoituneen mahalaukun syövän
Kuten esitetään Taulukko 4 vain 23 80 tapausta (28.75%) oli polη proteiinin positiivinen ilme (≥ 5% polη-positiivisten syöpäsolujen), 16 23 positiivisia tapauksia (69,56%) ei hoitoa, sen sijaan vain 2 57 negatiivinen tapauksissa (3,51%) oli edennyt sairaus jälkeen FOLFOX tai XELOX kemoterapiaa. Polη ilme korreloivat voimakkaasti hoitovaste oksaliplatiinipohjaisen kemoterapiaa metastasoituneen mahasyövän (P < 0,001), kun taas se ei liity ikään, sukupuoleen, ensisijainen sivustoja, metastaasien tai patologisen erilaistuminen levels.Table 4 Korrelaatio POL η ilme ja ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia mahasyöpäpotilaista
ominainen
POLη
χ2 testi
P-arvo

Fisherin testi
P-arvo

Positiivinen
(n = 23)
Negatiivinen
(n = 57) B


Ikä (y) B < 60
16
37
0,690
0,797
≥ 60
7
20
Sukupuoli
Mies
14
35
0,695
1.000
Female
9
22
Ensisijainen sivustot
Cardia
10
11
0,084
0,102
Body
4
14
antrum /pylorus
9
32
metastaasien
Maksa
11
15
0,247
0,269
Lung
5
16
peritoneum
3
16
Muut
4
10
Patologinen erilaistuminen
G1
2
0
0,068
0,107
G2
6
20
G3
15
37
hoitovasteen
CR + PR + SD
7
55
< 0,001
< 0,001
PD
16
2
CR, täydellinen vaste; PR, osittainen vaste; SD, stabiili tauti; PD, etenemisen sairauden.
Spearmanin korrelaatio analyysi edelleen tehty vahvistaa korrelaatio polη ilmaisun ja viittaavia tekijöitä. Pearson ennakoimattomia kerrointa, että polηexpression tasot merkitsevästi liittyvät hoitovaste (P < 0,001), samoin ei ole merkittävää korrelaatiot muiden tekijöiden saatiin (tuloksia ei ole esitetty).
Suhde polη ilmaisun ja selviytymisen metastaattisen mahasyövän
Kaplan-Meierin univariate eloonjääminen analyysi paljasti, että positiivinen ilmaus polη kasvainsoluissa ja huono hoitovaste liittyi merkittävästi lyhyempi selviytymistä. Keskimääräinen elinaika aika polη positiiviset ja negatiiviset tapaukset olivat 8 ja 14 kuukautta, kuten kuvassa 5 (log rank, P < 0,001). Monimuuttuja selviytyminen analyysi (Coxin regressiomallin) paljasti, että ilmaus polη oli riippumaton ennustavat tekijät. 95,0% luottamusväli (CI) suhteellinen riski oli 2,461-8,429 (taulukko 5). Nämä tulokset osoittivat, että ilmentyminen polη tuumorikudoksessa ennustettu lyhyempi selviytymistä. Ei suhde havaittiin selviytymisen ja loput kliinispatologiset parametrit, kuten ikä, sukupuoli, primäärikasvain sivustoja, patologisen erilaistumista ja metastasoituneen sites.Table 5 Monimuuttuja-analyysi kokonaiselinaika mahalaukun karsinooma
Factors
Ominaisuudet
Riskisuhde
95% CI
P-arvo

epäedullinen
Myönteinen



Ikä
≥ 60
< 60
0,956
0,570-1,602
0,863
histologinen luokka
Huonosti
No /kohtalaisen
1,428
0,861-2,369
0,168
POL η
positiivinen
negatiivinen
4,555
2,461-8,429
< 0,001
CI, luottamusväli.
Kuva 5 Kaplan-Meier-käyrät yhden muuttujan analyysi (log-rank testi) potilaille, joilla on negatiivinen POLη ilme versus positiivinen POLη ilme kasvaimia.
Keskustelu
Tässä tutkimuksessa osittain paljasti rooli DNA polymeraseη kuin DNA korjaus proteiini mahasyövässä havaitsemalla sen ilmentymistä neljässä mahasyövässä solulinjojen ja 80 potilasta mahalaukun metastasoivaa adenokarsinoomaa, jotka olivat saaneet FOLFOX tai XELOX kuin ensimmäinen rivi kemoterapiaa. Tulokset osoittivat, että ekspressiotaso polη kasvainsolulinjoissa korreloi herkkyys oksaliplatiinin (kuvio 2). Sillä kasvainkudoksen, positiivinen ilmaisu ainoa esiintyi 28.75% tapauksista (23 ulos 80), ja ilmaisu oli vaatimaton. Kuitenkin vahva korrelaatio löytyi polη ilmaisun ja hoitovasteen sekä selviytymistä. Kaikki tulokset osoittivat, että polη positiivisuus oli osoitus huonosta hoitovasteen ja lyhyempi eloonjääntiä potilailla edellä asetuksia.
DNA polymeraseη on koodattu POLH geenin, joka on yksi 150 ihmisen DNA korjaavien geenien, joiden defection tulokset Xeroderma pigmentosum Variant (XP-V) oireyhtymä, joka ilmenee erittäin herkkyys UV-säteilylle ja suuntaus kehittää ihosyöpä [29-31]. Polη on merkittävä vaurio jäljittelevästä entsyymi, joka jäljittelee poikki tymiinidimeeri käyttöön UV-säteilyllä, välttäen korkea geenimutaatio [32]. Lisäksi tymiinidimeeri, polη on osoitettu jäljitellä yli sisplatiinin silloitettu juosteensisäiseen GG sivustoilta [33]. Jotkut tutkimukset osoittivat, että polη ilmentyminen korreloi herkkyys sisplatiinin tai oksaliplatiinille XP-V ihmisen fibroblastien solu- ja keuhkojen solu- linjat, ja polη tuntui olevan hoito-vasteen ennustava markkeri pienisoluista keuhkosyöpää sisplatiinin kemoterapian [26, 27] .
Vähemmän tiedetään roolista polη mahasyövän. Se on ensimmäinen tutkimus havaita herkkyyden oksaliplatiinin näissä neljässä mahalaukun sinoomasolulinjoja (SGC7901, AGS, MKN45, ja MGC803) MTT: llä ja proteiinin ilmentyminen western-blottauksella. Löysimme merkittävä lineaarinen suhde toisiinsa. Tutkimuksemme oli jossain määrin yhdenmukainen havainto keuhkosyövän solulinjoissa Paolo Ceppi et ai, vaikka mitä he havaitut polη mRNA-tasolla ja sisplatiinin herkkyys [27].
Sitten restrospectively analysoineet ilmentymistä polη proteiinin kahdeksankymmentä metastaattinen edennyt mahasyöpä potilailla, jotka saivat FOLFOX tai XELOX kemoterapiaa. Olemme ensinnäkin todettava, että prosenttiosuus polη-värjäytymisen kasvainsoluja kaikissa 80 tapauksissa ollut korkeintaan 10%, joten määrittelimme ≥5% kun IHC positiivista mukaan tarkkuutta ennakoinnissa kliinistä hyötyä XELOX- tai FOLFOX kemoterapiaa. Tämän standardin, vain 23 potilaalla oli positiivinen ilmaisu, 7 ulos 62 kliinistä hyötyä tapauksissa (CR + PR + SD) kemoterapiaa ja 16 ulos 18 PD tapauksista. Ilmaisu välinen kurssi kliinistä hyötyä ryhmä (7/62, 11,3%) ja PD ryhmä (16/18, 88,9%) oli merkitsevästi erilainen (P < 0,001). Tämä osoitti, että Polη positiivisuus voisi ennustaa tehoton kemoterapian kanssa XELOX tai FOLFOX kuuri. Tulos oli yhdenmukainen Tutkimuksemme soluissa, jotka Polη ilmaisua negatiivisesti korreloi oksaliplatiinin herkkyys mahasyövän solulinjoissa.
Löysimme merkittävän selviytymisen hyötyä polη negatiivisilla potilailla. Tämä etu todennäköisesti peräisin tehokas hoito oksaliplatiinia, koska polη oli vahvasti korreloi hoitovastetta. On tunnettua, että tehokas kemoterapia parantaisi elämän laatua mahasyöpäpotilaista ja parantaa selviytymistä; tutkimuksessamme voi auttaa ennustamaan hoitoon vastetta oksaliplatiinipohjaisen kemoterapiaa ja selviytyminen siten välttämään tarpeetonta hoitoa alussa.
olemassa useita rajoituksia tutkimuksemme. Ensinnäkin, tämä on retrospektiivinen tutkimus, jossa on pieni määrä potilaita. Vuonna ennalta tutkimuksessa ei merkitsevästi yhteydessä polη ilmaisun ja ikä, sukupuoli, primäärikasvain sivustoja, metastaasien tai patologisen erilaistuminen saatiin perusteella tällaisia ​​tapauksia numeron. On mahdollista saada merkittäviä tuloksia joissakin ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia kuten ensisijaisena sivustojen tai patologisten erilaistumiseen (P-arvon lähellä 0,05), jos tarpeeksi potilaita. Siksi enlargeing asian numero ja suorittamalla mahdollisille tutkimuksissa on pakollista. Toiseksi, koska testin tarkkuutta laskettiin käyttäen määriteltyjen kriteerien ROC käyrä analyysi, tuloksemme tarvitaan validointi itsenäisessä kohortin. Kolmanneksi ilmaus polη on suhteellisen alhainen mahalaukun syövän, koska subjektiivisuus, virhe IHC laskemisen voisi olla suurempi, mikä voi vaikuttaa herkkyys ja tarkkuus ennustettaessa hoitovaste, joten tarkempi menetelmä tarvitaan. Edelleen, se on hyvin tunnettua, että platinaa vastus on hyvin monimutkainen, joten polη, kuten yksi parametri, on vaikea ennustaa hoidon vasteen tarkka tavalla.
Huolimatta rajoituksista, meidän tutkimus on yksi harvoista yrittää määritellä kriteerit in vivo kemosensitiivisyys oksaliplatiinia sisältävässä hoidossa käytetään kliinisen vasteen vertailustandardina. Se voi olla tehokas ja kustannuksia säästävä tapa ennustaa hoitovastetta.
Päätelmä
Yhteenvetona esillä oleva tutkimus osoitti, että polη on merkittävä ennustaja hoitovaste metastasoituneen mahalaukun syövän kemoterapiaa saavilla on FOLFOX tai XELOX . Tällainen merkki voi auttaa lääkärit valitsemaan optimaalisen kliinisen strategiaa potilailla, joilla on edennyt mahasyöpä. Lisäksi monimuuttuja selviytyminen analyysi paljasti, että ekspressio polη oli riippumaton ennustavia tekijöitä. Havainnot on vahvistettava laajemmassa mahdollinen oikeudenkäynnin soveltaminen kliinisissä käytännöissä.
Notes
Kai-Yuan Teng, Miao Zhen Qiu vaikuttanut yhtä tähän työhön.
Lyhenteet
GG :
guaniini-guaniini
CR:
täydellinen hoitovaste
DNA:
deoksiribonukleiinihappo


FOLFOX:
fluorourasiilin, leukovoriinin ja oksaliplatiini
HR:
homologinen rekombinaatio
mRNA:
messenger ribonukleiinihappo
IC50:
puoli estävä pitoisuus
IHC:
immunohistokemia


MMR:
täsmää korjaus
WB:
western blotting
MTT-analyysi:
3- (4,5-dimetyyli- tiatsol-2-yyli) -2,5-difenyylitetratsoliumbromidi määritys
NER:
nukleotidin Excision korjaus

OS:
kokonaiselossaoloaika
PD:
etenemiseen tauti
Pol η:
polymeraasi eta
PR:
osittainen vaste
SD:
stabiili tauti
Pt:
platina
ROC:
vastaanotin toimii ominainen
TLS:
translesion synteesi


XELOX:
kapesitabiinin ja oksaliplatiinin
XPV:
xeroderma pigmentosum variantti.
julistukset
Kiitokset
Kiitämme henkilökunnan jäsenten Lääketieteellisen onkologian Sun Yat-sen University Cancer Center heidän ehdotus ja apua.
Grant tuki: National Natural Science Foundation of China avustuksen 30672408, Guangzhou Bureau of Science and Technology avustus 2006Z3-E0041 ja Sun Yat-sen University 985 Program aloittaminen Fund (Kiina).
kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. Ei hyötyä missään muodossa on vastaanotettu tai tullaan saamaan kaupallisesta osapuolen liittyvän suoraan tai välillisesti aihe meidän artikkeli.

• Arvioiminen tietokoneen tuen arvioimiseksi vatsaoireita (ECASS): tutkimus protokolla satunnaistettu kontrolloitu trial
• Detection karsinoembryonista antigeenin lähetti-RNA veren kvantitatiivisen reaaliaikaisen käänteistranskriptaasi-polymeraasiketjureaktio ennustaa toistumisen mahalaukun adenokarsinoomaa