NKKD polymeraseη baltymo ekspresija prognozuoja atsako į gydymą ir išlikimą metastazavusiu skrandžio adenokarcinoma sirgusių pacientų, vartojusių oksaliplatinos pagrindu chemoterapijos

DNR polymeraseη baltymo ekspresija prognozuoja atsako į gydymą ir išlikimą metastazavusiu skrandžio adenokarcinoma sirgusių pacientų, vartojusių oksaliplatinos pagrindu chemoterapijos
Anotacija
fone
DNR polimerazė η (pol η) yra pajėgi aplenkiant DNR aduktus gaminami cisplatina arba oksaliplatinos ir yra susijęs su ląstelių toleranciją platinos. Ankstesni tyrimai parodė, kad su defektais POL η lėmė padidintu cisplatina arba oksaliplatinos jautrumas kai kurių ląstelių linijų. Šio tyrimo tikslas buvo ištirti POL η baltymų raiškos vaidmenį metastazavusiu skrandžio adenokarcinoma.
Metodai
Keturi skrandžio adenokarcinoma ląstelių linijos buvo pasirinkta ištirti tarp POL η baltymų ekspresijos ir oksaliplatinos jautrumas iki Imunoblotingo santykius ir MTT. Aštuoniasdešimt metastaziniai skrandžio adenokarcinoma sirgusių pacientų, gydytų FOLFOX arba XELOX režimas, kaip pirmos eilės chemoterapijos buvo analizuojami, atitinkantis išankstinis apdorojimas formalinu fiksuotų parafino įterptųjų navikų audiniuose buvo naudojamas siekiant aptikti POL η baltymo ekspresija imunohistocheminiu. buvo analizuojami santykiai tarp POL η baltymų ekspresijos ir klinikiniais požymiais ir rezultatus šiems pacientams.
rezultatai
teigiamas tiesinis ryšys tarp POL η baltymų raiškos ir 48 val IC50 vertybių oksaliplatinos į keturias skrandžio vėžio ląstelių linijų buvo pastebėta. Pozityvumas POL η baltymų ekspresijos buvo stipriai susijęs su prasta reakciją į gydymą, taip pat trumpesnį išlikimo abiejuose Vienaveiksnės (8 versus 14 mėnesių; P <0,001) ir daugiamatis (rizikos santykis, 4,555; 95% pasikliautinasis intervalas, 2,461-8,429; P. < 0,001) analizė aštuoniasdešimt metastazavusiu skrandžio adenokarcinoma sirgusių pacientų
Išvados
Mūsų tyrimas rodo, kad polη yra prognozinis veiksnys atsako į gydymą ir išlikimo metastazavusiu skrandžio adenokarcinoma sirgusių pacientų, gydytų FOLFOX ar XELOX kaip pirmos eilės chemoterapijos. Todėl, patvirtinantis polη vertę tyrimų su potencialiais dizainas yra privalomi.
Faktai
Skrandžio vėžys yra ketvirtoji dažniausia vėžio visame pasaulyje, su 603,003 naujų atvejų tarp vyrų ir 330,290 naujų atvejų tarp moterų per metus [1]. Tai yra antra labiausiai paplitusi priežastis, dėl vėžio, susijusio mirties (700.000 mirčių per metus), su beveik du trečdaliai atvejų pasitaiko besivystančiose šalyse ir 42% vien Kinijoje [2]. Chirurgija išlieka pagrindine potencialas būdas išgydyti ligą; Tačiau maždaug 84% skrandžio vėžiu sergantiems pacientams bus sukurti, kad būtų pažangi liga, su 30% lokaliai progresavusiam atvejais, 30% metastazavusiu ligų diagnozės, o 24% jų pasikartojimo ligos [3]. Į literatūros parodė, kad išgyvenamumo mediana buvo tik 3-4 mėnesius tarp išplitusiu skrandžio vėžiu sergantiems pacientams be chemoterapijos. Naujos kartos chemoterapiniais preparatais, pavyzdžiui, oksaliplatina gali pratęsti išlikimą išplitusiu skrandžio vėžiu, būtų nuo 10 iki 12 mėnesių; Be to, chemoterapija taip pat gali pagerinti gyvenimo [4-12] kokybę. Gydomasis poveikis daugiausia priklauso nuo narkotikų atsakas į naviko per pirmos eilės chemoterapijos, nes iki šiol tik vienas mažas III fazės tyrimo su 120 atvejais parodė kuklų išgyvenimo naudos iš irinotekano vien per vien palaikomojo gydymo [13]. Deja, dėl atsparumo vaistams, tik 30-50% atsako dažnis gali būti pasiektas, nors administravimo naujos kartos narkotikų, tokių kaip docetakselio, oksaliplatina, kapecitabinu, irinotekano, S1, ir tt, kad išplitusiu skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kaip pirmos eilės gydymo [3]. Tai reiškia, kad mažiausiai 50% pacientų turi praeiti neefektyvų gydymą, kuris gali ne tik sumažinti pacientų gyvenimo kokybę, bet ir padidinti ekonominę naštą. Taigi, kaip prognozuoti atsaką chemoterapiniais preparatais skrandžio vėžys yra labai svarbi mokslinė problema.
Oksaliplatina yra trečiosios kartos platinos, žaisti svarbų vaidmenį chemoterapija, virškinimo vėžio. Gydyta oksaliplatinos turinčiais deriniu, pavyzdžiui, oksaliplatinos bei 5-FU arba 5-FU, kaip narkotikas buvo įrodyta, kad būti aktyvus maždaug 40-50% išplitusiu skrandžio vėžiu pacientams [14-16]. Oksaliplatina ir cisplatina pasidalinti panašų mechanizmą, ir sukelti mono-aduktus ir viduje kryptis arba tarp kryptis kryžmines nuorodas į dvigubą DNR spiralės, kad stipriai blokuoti DNR sintezę [17-19]. Kai tai atsitinka, kai DNR žalos atlyginimo būdai gali įjungti, įskaitant nukleotidų iškirpimas remontas (NER), neatitikimas Remontas (MR), homologiczne rekombinacijos (HR), translesion DNR sintezės (TLS) [20]. Šie aduktu remontas atsirasti visų pirma per NER [21]. TLS yra kita alternatyva būdas remontas šiuos pakitimus, kuri daugiausia atliekama DNR polimerazės η [22]. Polymeraseη (Polη), vienas su įvairių tipų pakenkimais atkartojantys fermentų, apima teisingą nukleotidų per pakitimų, pavyzdžiui, platinos aduktu TLS ir toliau grandinės ilgėjimas, o klasikiniai Pols negali [23]. Polη turi didžiausią veiksmingumą aplenkiant Pt-GG viduje kryptis diadducts sukelia platinos tarp šių Pakitęs atkartojantis fermentų, su ribota ištikimybės [23, 24]. Naujausi eksperimentai įrodė, kad polη rezultatų nebuvimas statistiškai reikšmingas stiprinimo cisplatina jautrumo lyginant polη null xeroderma pigmentinės variantas žmogaus fibroblastus su polη ekspresija tie [25]. Šis priedas yra taip pat pastebėjo, kai ląstelės buvo gydomi karboplatina ir oksaliplatinos [25]. Naujausi duomenys rodo, kad polη iRNR lygis neigiamai koreliuoja su cisplatina jautrumo nesmulkiųjų ląstelių plaučių vėžys (NSLPV) ląstelių linijos [26].
Šiame tyrime mes pranešti pirmą kartą tarp polη baltymų ekspresijos ir oksaliplatinos jautrumo santykiai skrandžio vėžio ląstelių linijų ir tos reikšmės prognozuojant atsako į gydymą ir išlikimą skrandžio vėžiui gydytų pacientų gydyta oksaliplatinos turinčiais chemoterapija.
medžiagos ir metodai
Mobilaus ryšio linijos Viesbutis The skrandžio vėžio ląstelių linijas, įskaitant SGC7901 , AGS, MKN45 ir MGC803, buvo paaukoti profesorius Libing dainą iš valstybės Key laboratorija Onkologijos Pietų Kinijoje (Cancer Center Saulės dar-Sen universitetas). Visi mobilieji linijos buvo prižiūrimi RPMI 1640 (Gibco) papildytas 10% vaisiaus galvijų serumo (Gibco), išskyrus MKN 45 su 20% vaisiaus galvijų kraujo serume.
Pacientų ir mėginių
Pacientai mūsų klinikinių duomenų bazę, su chemoterapija negydytiems , histologiškai patvirtintas metastazavusiu Išplėstinė skrandžio vėžys buvo įtraukti į tyrimą. Visi pacientai turėjo gauti FOLFOX (fluorouracilu, leukovirino ir oksaliplatinos) arba Xelox (kapecitabino ir oksaliplatinos) režimas, kaip pirmos eilės chemoterapijos metu Cancer Center Sun Yat-sen Universiteto ir formalinu fiksuotos parafino įterptųjų paruošiamųjų mėginius pagal gastroscope biopsijos ar paliatyvios operacija buvo gauti. Histopatologinis charakteristikos buvo patvirtinta aklu peržiūros originalių patologijos skaidres. TNM klasifikacija buvo naudojama patologinis sustojimo ir Pasaulio sveikatos organizacija klasifikacija buvo naudojama patologinis rūšiavimo. Kitos įtraukimo kriterijai įtraukti amžius tarp 18-80, Rytų kooperatinės onkologijos grupės (ECOG) veiklos statusas 2 arba mažiau, antra linija chemoterapija, ar ne, ne radiacija gydymas. Visi pacientai jei parašyta informuoto sutikimo; gavome atskirą sutikimą naudoti egzempliorių. Tyrimas patvirtinimas buvo gautas iš nepriklausomų etikos komitetuose Cancer Center Sun Yat-Sen universitete. Tyrimas buvo vykdomas laikantis etinių standartų Pasaulio medikų asociacijos deklaracijos Helsinkyje.
Tolesni veiksmai ir vertinimai
pacientams kartą per metus buvo stebimi telefonu ar laišku komunikacijos 4 metų iš viso. Bendras išgyvenamumas buvo apibrėžiama kaip laikas nuo diagnozuota iki mirties datą ir cenzūruojamas praėjusių Susisiekite dėl išlikusių paciento dienos. Ligos atsakas buvo vertinamas pagal atsaką vertinimo kriterijai kietu navikais (RECIST kriterijus) [27].
Citotoksiškumo tyrimus, atliekamus
Mobilusis augimo slopinimas nulėmė 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2 , 5-diphenyltetrazolium bromidas analizė (MTT). Trumpai, ląstelės buvo pasėjamos 96-duobučių lėkštelėse ir leidžiama pridėti per naktį. Po to, kai 48 valandas nuo narkotikų inkubuojant įvairios koncentracijos (37 ° C), MTT reagentu (5 mg /ml, 20 pL /duobutėje) buvo įtraukta į kiekvieną šulinėlį ir inkubuojami dar 4 valandas. tada plokštelės buvo centrifuguojamas (1500 g, 5 minutes) ir viršutinis sluoksnis buvo pašalintas. Ląstelių granulės buvo ištirpinta 200 ul DMSO. Optinių buvo nustatoma naudojant Modelis 550 microplate skaitytuvas (Bio-Rad, Hercules, CA, JAV), esant 570 nm bangos ilgiui, su fono atimties esant 630 nm bangos ilgiui. Visi eksperimentai buvo pakartotas tris kartus. Koncentracija, kurios reikia nuslopinti ląstelių augimą 50% (IC50) buvo apskaičiuotas pagal išgyvenimo kreivių naudojant Bliss metodas [28].
Imunoblotingo
Ląstelės buvo išplauti su ledinio fosfatinio buferinio fiziologiniu tirpalu ir nuimamas ėmimo neutralizatoriaus [ ,,,0],62,5 mmol /l Tris-HCl (pH = 6,8), 2% SDS, 10% glicerolis, ir 5% 2-h-merkaptoetanolio]. Baltymo koncentracija buvo nustatomas pagal Bradford tyrimo (Bio-Rad Laboratories). Lygios kiekiai baltymų buvo taikomi 7,5% poliakrilamido SDS geliai (SDS-PAGE), išskirti elektroforezės ir perkeliamas ant polivinilidenfluorido membranas. Po to, kai užblokuotas 5% ne-riebumo pieno TBST buferio (10 mmol /l Tris-HCl, 150 mmol /l NaCl, ir 0,1% Tween20, pH 8,0) 1 val kambario temperatūroje, membrana buvo inkubuojami su anti-polη triušis antikūnas (1: 400; Abcam). Polη išraiška buvo aptiktas su krienų peroksidazės konjuguoto ožkos anti-triušio IgG ir glaudesnio cheminės liuminescencijos. Anti-α-tubulino antikūnų buvo naudojamas kaip pakrovimo kontrolę.
ImageJ programinė įranga National Institutes of Health (NIH) dirbo kiekybiškai baltymų.
Imunohistocheminis
Imunohistocheminis (IHC) analizė buvo atlikta siekiant nustatyti polηprotein išraiška 80 žmogaus skrandžio vėžio audiniuose. Trumpai tariant, audinio dalys buvo deparaffinized ksilene 37 ° C temperatūroje 20 minučių ir rehidrataciją. Endogeninės peroksidas buvo užblokuotas inkubavimą skyrius su 3% vandenilio peroksido tirpalą metanolyje 20 minučių 37 ° C temperatūroje. Tada skyriai buvo panardintas į 10 mM citrato buferio (pH 6,0) ir microwaved už antigeno gavimą, po to inkubacijos su triušio anti polη (1: 100; Abcam) per naktį 4 ° C temperatūroje. Po plovimo, audinio skyriai buvo gydomi krienų peroksidazės žymėto antriniais antikūnais 30 minučių. Skyriai buvo sukurta su diaminobenzidinas tetrahidrochlorido (DAB) ir counterstained hematoksilinu.
Analizė imunohistocheminiu mūsų tyrimas buvo atliktas dviejų nepriklausomų stebėtojų remiantis teigiamai tamsintas vėžinių ląstelių proporciją. Jei yra skirtumas tarp šių dviejų stebėtojų, šie skaidres buvo pakartotas abiejų tyrėjų naudojant multiheaded mikroskopu. Navikai, turintys daugiau kaip 5% POLη teigiamų vėžinių ląstelių buvo laikomas teigiamu (branduolys dėmių atsiradimas), kitaip neigiamas.
Statistinė analizė
ROC kreivė (ROC) kreivės analizę ir miesto Fišerio testas buvo atliktas pasirinkti IHC Pol -positive vertė su didžiausiu tikslumu. 2 × 2 lentelėje buvo pastatytas duodančius jautrumas, specifiškumas, teigiama ir neigiama prognostinė vertė ir tikslumas buvo apskaičiuota kaip proporcingai tiesa teigiamų ir neigiamų tiesa pacientams iš visos pacientams. Visi statistinės analizės buvo atlikta naudojant "SPSS 15.0 statistinės programinės įrangos paketu (SPSS Inc., Chicago, IL, JAV). P-vertė < 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas. Kaplan-Meier analizė su prisijungimo rangas bandymai buvo naudojamas Vienaveiksnės analizės. Kintamieji, rodantys tendenciją kartu su išlikimo (p < 0,05) buvo atrinkti dėl įtraukimo į galutinį daugiamatis Cox proporciniai pavojų modelį. Tarp polη saviraiškos ir clinicopathologic savybių santykiai buvo nagrinėjama pagal chi-square testą ir Fisher'io bandymus.
Rezultatai
Polη išraiškos koreliuoja su oksaliplatinos jautrumo skrandžio vėžio ląstelių linijų
oksaliplatinos jautrumą keturias skrandžio ląstelių linijas ( SGC7901, AGS, MKN45 ir MGC803) buvo aptikta anksčiau aprašyto MTT. Endogeninės polη baltymo ekspresija iš keturių ląstelių linijų buvo palyginti su viena su kita Imunoblotingo ir pusę maksimalaus slopinančio koncentraciją (IC50) verčių oksaliplatinos ląstelių buvo parodyta 1 pav didelė ir buvo stebima teigiama koreliacija, kaip parodyta 2 paveiksle, kai palyginti polη baltymo ekspresija su IC50 vertybių oksaliplatinos. 1 pav išraiška analizė POL η baltymų skrandžio vėžio ląstelių linijų Imunoblotingo ir 48 val IC50 vertybių oksaliplatinos skrandžio vėžio ląstelių (umol /l).
2 paveikslas Koreliacija tarp POL η saviraiškos ir IC50 oksaliplatinos skrandžio ląstelių .
pacientų charakteristikos
aštuoniasdešimt pirmoji sesija Ženeva pacientų iš 2005 metų sausio iki 2009 liepos retrospektyviai išanalizuoti. Pacientai turėjo vidutinis amžius 54 (diapazonas, 26.0-79.0), su 49 vyrų ir 31 moterų. Kiti klinikiniai ypatumai buvo apibendrinti 1 lentelėje atsako dažnis (CR + PR) su pirmos eilės XELOX ar FOLFOX chemoterapijos buvo 47,5%, klinikinės naudos dažnis (CR + PR + Sd) buvo 77,5%. Dalis šių pacientų (23/80) turėjo antros linijos chemotherapy.Table 1 pacientui savybes (n = 80)
būdinga
Nr pacientų
%
Amžius (metų)
mediana
54,0
klasės
26,0-79,0
Sex
Vyras
49
61,3
Moteris
31
38,7
ECOG veiklos statusas
0
36
45,0
1
42
52,5
2
2
2,5
Pirminės svetainės
Cardia
21
26,3
Kūno
18
22.5
Ertmė /fazė prievartyje
41
51,2
metastazavusiu svetainės
kepenų
26
32,5
Plaučių
21
26,3
Pilvaplėvė
19
23,8
Kiti
14
17,4
patologinė diferenciacija N0
G1
2
2,5 pervežimas G2
26
32,5 pervežimas G3
52
65,0 pervežimas reakciją į gydymą (1 eilutė)
CR
2
2,5
PR
36
45,0
SD
24 30,0
PD
18
22,5
2. linija chemotherary režimas
BPK
57
71,3
FOLFIRI
6
7.5
XELIRI
8
10,0
DX
6
7,5
TP
3
3,7
CR pilnas atsakas; PR, dalinis atsakas; SD stabili liga; PD progresavimo liga;
BPK geriausias palaikomasis gydymas; FOLFIRI, 5-fluracil plius leukovorino plius irinotekano; XELIRI kapecitabinas plius irinotekano; Dx, docitaxel kartu su kapecitabinu; TP, paklitakselio ir cisplatinos deriniu.
Kriterijus, kad naviko audinio su daugiau nei 5% Polη teigiamų vėžinių ląstelių buvo nustatytos IHC teigiamas turi aukščiausią tikslumą prognozuojant klinikinę naudą pirmos eilės chemoterapijos pervežimas navikų audiniuose aštuoniasdešimt metastazavusiu skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, gydomiems FOLFOX ar XELOX režimas buvo naudojamas siekiant aptikti polη baltymų ekspresiją imunohistocheminis (3 pav.) Kadangi branduolio dažymo vėžinių ląstelių visais atvejais procentas buvo ne daugiau kaip 10%, mes bandėme pasirinkti IHC Polη-teigiamą vertę su didžiausiu tikslumu prognozuoti klinikinę naudą pirmos eilės chemoterapijos. Mes nustatėme, devyni IHC-teigiamą reikšmę: ≥ 1%, ≥ 2%, ≥ 3%, ≥ 4%, ≥ 5%, ≥ 6%, ≥ 7%, ≥ 8%, ≥ 9%, o pastatyti devyni 2 × 2 stalo. 2 lentelė parodė, kaip pavyzdys. Jautrumas, specifiškumas, teigiama ir neigiama prognostinė vertė ir tikslumas buvo apskaičiuojamas ir naudojamas atkreipti ROC kreivė. Kaip parodė 3 lentelėje ir 4 pav sumažinti ribinę vertę ≥ 5%, turi aukščiausią tikslumą (88,8%). Taigi navikų, kuriuose yra daugiau kaip 5% POLη teigiamų vėžinių ląstelių buvo laikomas teigiamu (branduolys dažymo), kitaip neigiamas. 3 paveikslas iš POLη baltymų ekspresija išplitusiu skrandžio vėžiu, nes išnagrinėjo imunohistocheminiu. A. neigiamas išraiška vaizdas naviko audinyje (× 400). B. POLη baltymas aptinkamas skrandžio vėžio ląstelės branduolys (× 400).
2 lentelė DNR polimerazė η baltymo ekspresija ir klinikinė reakcija į gydymą

Klinikinė nepakankamumas

klinikinės naudos
Iš viso atvejų
Pol η (+)
16
7
23
Pol η ( -)
2
55
57
viso Pažeidimai
18
62
80
≥ 5% Polη išraišką vėžinių ląstelių, kurios apibrėžiamos kaip teigiamas
lentelę. 3 tikslumas, jautrumas, specifiškumas, teigiama prognostinė vertė ir neigiama prognostinė vertė pagal Polη IHC skaičiavimo proc prognozuojant chemoterapijos atsakymą FOLFOX arba XELOX režimas
naviko ląstelių teigiamas procentų, sumažinti off

Specificity

Sensitivity

PPV

NPV

Accuracy

1%
0.419
0.889
0.308
0.929
0.525
2%
0.500
0.889
0.340
0.940
0.588
3%
0.645
0.889
0.421
0.952
0.700
4%
0.823
0.889
0.593
0.962
0.838
5%
0.887
0.889
0.696
0.965
0.888
6%
0.887
0.778
0.667
0.932
0.863
7%
0.978
0.667
0.705
0.904
0.863
8%
0
0.389
1.000
0.849
0.863
9%
0
0.111
1.000
0.795
0.800
PPV, teigiama prognostinė vertė; GDV, neigiama prognostinė vertė.
4 pav ROC kreivė kreivė Polη IHC skaičiuoti prognozuojant chemoterapijos atsakymą FOLFOX arba XELOX režimas.
Santykius polη išraiškos su klinikiniais požymiais skrandžio vėžiui
Kaip parodyta 4 lentelė tik 23 80 atvejais (28,75%) buvo polη baltymų teigiamą išraišką (≥ 5% Polη teigiami vėžines ląsteles), 16 iš 23 teigiamų atvejų (69,56%) nepavyko gydymo, priešingai, tik 2 iš 57 neigiami atvejai (3,51%) progresavo liga po FOLFOX arba XELOX chemoterapija. Polη išraiška stipriai koreliuoja su atsaku į gydymą oksaliplatina chemoterapijos skrandžio vėžiui (P <0,001), o jis nėra susijęs su amžiumi, lytimi, pirminių svetainių, metastazių vietose ar patologinis diferenciacijos levels.Table 4 Koreliacija tarp POL η išraiškos ir clinicopathologic charakteristikos skrandžio vėžiu sergantiems pacientams
būdinga
POLη
χ2 testas
P vertę

Fišerio testas
P vertę

Teigiamas
(n = 23)
Neigiama
(n = 57)



amžius (y)
< 60
16
37
0.690
0,797
≥ 60
7
20
Lytis
Vyras
14
35
0,695
1,000
Panelių
9
22
Pirminės svetainės
Cardia
10
11 0,084
0,102
Kūno
4
14
Ertmė /fazė prievartyje
9
32
metastazavusiu svetainės
kepenų
11
15
0,247
0,269
Plaučių
5
16
Pilvaplėvė
3
16
Kiti
4
10
patologinis diferenciaciją
G1
2
0
0,068
0,107
G2
6
20
G3
15
37
reakciją į gydymą
CR + PR + Sd
7
55
< 0.001
< 0.001
PD
16
2
CR, visišką atsaką; PR, dalinis atsakas; SD stabili liga; PD progresavimo liga.
Ietininkas koreliacinė analizė buvo toliau atliekami siekiant patvirtinti tarp polη saviraiškos ir clinicopathologic funkcijų koreliaciją. Pearsono nenumatytiems koeficientas parodė, kad polηexpression lygių reikšmingai susiję su gydymo atsakas (p < 0,001)., Taip pat, jokių reikšmingų koreliacijų su kitais veiksniais buvo gautos (duomenys nerodomas)
Sąryšis tarp polη saviraiškos ir išlikimo skrandžio vėžiui
Kaplan-Meier metodu vienmatės išgyvenamumo analizė parodė, kad teigiamas išraiška polη naviko ląstelėse ir vargšų reakciją į gydymą buvo reikšmingai susijęs su trumpesniu išlikimui. Išgyvenamumo mediana laikas polη teigiamų ir neigiamų atvejų buvo 8 ir 14 mėnesių atitinkamai, kaip parodyta 5 paveiksle (log rangas P < 0,001). Daugiamatė išgyvenamumo analizė (Cox regresijos modelis) parodė, kad polη išraiška buvo nepriklausomi prognostiniai veiksniai. 95,0% pasikliautinasis intervalas (PI) santykinė rizika buvo 2,461-8,429 (5 lentelė). Šie rezultatai parodė, kad polη išraiška vėžinių audinių prognozuojama trumpesnį išgyvenamumą. Ne santykiams buvo pastebėtas tarp išlikimo ir poilsio klinikos parametrus, tokius kaip amžius, lytis, pirminio naviko svetainių, patologinė diferenciacijos ir metastazavusiu sites.Table 5 Dispersinės analizės bendrojo išgyvenamumo skrandžio karcinoma
veiksniai

Charakteristikos
rizikos santykis
95% PI
p reikšmė

Nepalanki
Palankios



Amžius
≥ 60
< 60
0,956
0,570-1,602
0,863
histologinis laipsnio
Prastai
Na /vidutiniškai
1,428
0,861-2,369
0.168
POL η
teigiamas
neigiamas
4.555 pervežimas 2.461-8.429 pervežimas < 0.001
PI, pasikliautinasis intervalas.
5 paveikslas Kaplan-Meier kreivėmis su pagal vieną požymį analizė (log-rank testas) pacienčių, kurių neigiamas POLη išraiška, lyginant su teigiamu POLη raiškos navikų.
Diskusijos
Šio tyrimo dalies atskleidė DNR polymeraseη kaip DNR remonto baltymų skrandžio vėžio vaidmenį aptinkant savo išraišką į keturias skrandžio vėžio ląstelių linijų ir 80 pacientams, sergantiems metastazavusiu skrandžio adenokarcinoma, kuris buvo gavęs FOLFOX arba Xelox kaip pirmos eilės chemoterapijos. Rezultatai parodė, kad pasakymas lygis polη vėžinių ląstelių linijų koreliavo su oksaliplatina jautrumas (2 paveikslas). Dėl auglio audinio, teigiama išraiška įvyko tik 28.75% atvejų (23 iš 80), o raiška buvo kuklus. Tačiau stipri koreliacija buvo nustatyta tarp polη saviraiškos ir reakciją į gydymą, taip pat išlikimo. Visi rezultatai parodė, kad polη pozityvumo buvo prastos atsako į gydymą ir trumpesnį išlikimo pacientams minėtų parametrų rodiklis.
DNR polymeraseη koduojamas POLH geno, kuris yra vienas iš 150 žmonių DNR remonto genų, kurių praradimu rezultatai yra xeroderma Pigmentosum variantas (XP-V) sindromas, pasireiškiantis itin aukštai jautrumą UV spinduliams ir tendenciją vystytis odos vėžį [29-31]. Polη yra svarbus pažeidimas atkartojantys fermentas, kuris atkartoja visoje pirimidino dimerų įvestų UV spindulių, išvengti aukštos genų mutacija [32]. Be pirimidino dimerų, polη buvo įrodyta, kad atkartoti visoje cisplatinos tinklinės intrastrand GG svetaines [33]. Kai kurie tyrimai parodė, kad polη išraiška koreliavo su jautrumu cisplatina arba oksaliplatinos XP-V žmogaus fibroblastų ląstelių ir plaučių ląstelių linijų ir polη atrodė gydymo ir atsako prognozuojantys žymeklį NSLPV sergantiems pacientams gydant cisplatinos turinčiais chemoterapijos [26, 27] .
mažiau yra žinoma apie polη vaidmenį skrandžio vėžio. Tai pirmasis tyrimas, siekiant nustatyti oksaliplatinos jautrumą šių keturių skrandžio karcinoma ląstelių linijas (SGC7901, AGS, MKN45 ir MGC803) pagal MTT ir baltymų ekspresiją Imunoblotingo. Mes nustatėme reikšmingą tiesinė priklausomybė tarp jų. Mūsų tyrimas buvo tam tikru mastu suderinamas su plaučių vėžio ląstelių linijų Paolo Ceppi et al stebėjimo, nors tai, ką jie aptiko buvo polη iRNR lygį ir cisplatinos jautrumą [27].
Tada mes restrospectively analizavo polη baltymų ekspresiją aštuoniasdešimt metastaziniai išplitusiu skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kurie gavo FOLFOX arba Xelox kaip chemoterapija. Mes pirmiausia pastebėjo, kad polη-dažymo vėžinių ląstelių visose 80 atvejų procentas buvo ne daugiau nei 10%, todėl apibrėžta ≥ 5%, kaip IHC teigiamas atsižvelgiant į prognozuojant klinikinę naudą su XELOX ar FOLFOX chemoterapijos tikslumą. Su šio standarto, tik 23 pacientai turėjo teigiamą išraišką, su 7 iš 62 klinikinės naudos atvejais (CR + PR + SD) nuo chemoterapijos ir 16 iš 18 NA atvejais. Sąvoka norma tarp klinikinės naudos grupės (7/62, 11,3%) ir PD grupės (16/18, 88,9%) buvo reikšmingai skiriasi (p < 0,001). Tai rodo, kad Polη pozityvumo gali prognozuoti neveiksminga chemoterapija su XELOX ar FOLFOX režimas. Rezultatas buvo suderinta su mūsų tyrimo ląstelių, kurios Polη išraiška neigiamai koreliuoja su oksaliplatinos jautrumo skrandžio vėžio ląstelių linijų.
Mes nustatėme reikšmingą išgyvenimo išmoką polη neigiamiems pacientams. Ši pašalpa tikriausiai atėjo iš veiksmingos terapijos oksaliplatinos, nes polη buvo stipriai koreliuoja su reakciją į gydymą. Jis yra gerai žinoma, kad veiksminga chemoterapija padidintų gyvenimo kokybę skrandžio vėžiu sergantiems pacientams ir pagerinti išlikimą; Mūsų tyrimas gali padėti nuspėti gydymo atsaką oksaliplatinos pagrindu chemoterapijos ir išlikimui, todėl išvengti nereikalingo gydymą pradžioje.
Yra keletas apribojimų mūsų tyrime. Pirma, tai yra retrospektyvinė studija su nedideliu skaičiumi pacientų. Per nustatytą tyrimo metu reikšmingos sąsajos tarp polη saviraiškos ir amžių, lytį, pirminio naviko svetainių, metastazių vietose ar patologinis diferenciacijos buvo gautas remiantis tokiais atvejais skaičių. Tai galima gauti reikšmingų rezultatų kai kuriose clinicopathologic savybių, pavyzdžiui, pirminių svetainėse ar patologinis diferenciacijos (p reikšmė artima 0,05), jei su pakankamai pacientų. Todėl enlargeing bylos numerį ir atlikti perspektyviųjų tyrimų yra privalomas. Antra, kadangi bandymas tikslumas buvo apskaičiuojamas naudojant apibrėžtus ROC kreivės analizės kriterijus, mūsų rezultatai reikalingi patvirtinimo nepriklausomai kohortos. Trečia, polη išraiška yra gana mažas skrandžio vėžio, dėl subjektyvumo, kad IHC skaičiavimo klaida gali būti didesni, kurie gali turėti įtakos jautrumas ir specifiškumas, kai prognozuoti gydymo atsaką, reikia, kad tikslesnis metodas. Pirmyn, Jis yra gerai žinoma, kad atsparumas platinos yra labai sudėtinga, todėl polη, kaip vienu parametru, yra sunku prognozuoti terapijos atsakymą tiksliai būdu.
Nepaisant apribojimų, mūsų tyrimas yra vienas iš keleto bandymų, apibrėžiančių kriterijai in vivo chemosensitivity iš oksaliplatinos turinčia režimą naudojant klinikinį atsaką etalonas. Tai gali būti veiksminga ir ekonomiškai taupyti metodas prognozuoti gydymo atsaką.
Išvada
Apibendrinant, šis tyrimas parodė, kad polη yra reikšmingai prognozuoti reakciją į gydymą pacientams, sergantiems metastazavusiu skrandžio vėžys, kuriems taikoma chemoterapija dėl FOLFOX ar XELOX , Toks žymeklis gali padėti gydytojams pasirinkti optimalų klinikinį strategiją pacientams, sergantiems išplitusiu skrandžio vėžiu. Be to, daugiamatis išgyvenamumo analizė parodė, kad polη išraiška buvo nepriklausomi prognostiniai veiksniai. Išvados turi būti patvirtinta didesniu perspektyvinį tyrimą prieš taikymas klinikinėje praktikoje.
Pastabos
KA juanis Teng, Miao-Zhen Qiu prisidėjo vienodai prie šio darbo.
Santrumpos
VS : Rīga, guaninas-guaninas
JJ: Rīga, visiškas atsakas
DNR: Rīga, Deoksiribonukleorūgštis


FOLFOX: Rīga, fluorouracilu, leukovorino ir oksaliplatina
HR:
homologiczne rekombinacija
iRNR:
pasiuntinys ribonukleino rūgštis
IC50: Viesbutis The pusę slopinančio koncentracijos
IHC: Rīga, imunohistocheminis


MMR vakcina: Rīga, neatitikimas remontas
PB:
Imunoblotingo
MTT:
3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-diphenyltetrazolium bromidas tyrimas
NER: Rīga, nukleotidų iškirpimas remontas

OS: Rīga, bendro išgyvenamumo
NA: Rīga, progresavimo liga
Pol η: Rīga, polimerazės ETA
PR: Rīga, dalinio atsako
SD
stabili liga
pt: Rīga, platinos
ROC: Rīga, ROC kreivė
TLS: Rīga, translesion sintezė


Xelox: Rīga, kapecitabino ir oksaliplatinos Žanrai XPV:.
xeroderma pigmentinės variantas Žanrai deklaracijų
Padėka
dėkojame darbuotojų medicininio Onkologijos departamento Sun Yat-sen universiteto Cancer Center jų pasiūlymą ir pagalba
suteikti paramą. Nacionalinis gamtos mokslo fondas Kinijos dotacijos 30672408, Guangdžou biuras mokslo ir technologijų suteikimo 2006Z3-E0041 ir Sun Yat-sen universiteto 985 programos pradžia fondas (Kinija).
Autoriai "originalas pateiktas failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalus pateiktų failų vaizdų.

• Vertinant pagalbą kompiuteris įvertinti skrandžio simptomus (ECaSS):.? Studijų protokolą atsitiktinių imčių kontroliuojamas trial
• Aptikta karcinoembrioninius antigenas RNR kraujyje, naudojant kiekybinius realaus laiko atvirkštinės transkriptazės polimerazės grandininę reakciją prognozuoti pasikartojimo skrandžio adenocarc…