expression de la protéine polymeraseη d'ADN prédit la réponse au traitement et à la survie des patients atteints d'un adénocarcinome gastrique métastatique traités avec la protéine polymeraseη ADN chemotherapy

expression à base d'oxaliplatine prédit la réponse au traitement et à la survie des patients atteints d'un adénocarcinome gastrique métastatique traités avec une chimiothérapie à base d'oxaliplatine
Résumé de l'arrière-plan
ADN polymérase η (η pol) est capable de passer par des adduits d'ADN produites par le cisplatine ou l'oxaliplatine, et est associée à la tolérance cellulaire au platine. Des études antérieures ont montré que défectueux pol η a entraîné le cisplatine ou une sensibilité accrue à l'oxaliplatine dans certaines lignées cellulaires. Le but de la présente étude était d'étudier le rôle de l'expression pol de protéine η dans l'adénocarcinome gastrique métastatique.
Méthodes
Quatre lignées de cellules d'adénocarcinome gastrique ont été choisis pour explorer la relation entre l'expression de la protéine pol η et la sensibilité à l'oxaliplatine par western blot et le dosage MTT. Quatre-vingts patients métastatiques d'adénocarcinome gastrique traités par FOLFOX ou XELOX régime comme chimiothérapie de première ligne ont été analysés, les tissus tumoraux de paraffine prétraitement formaline fixes correspondants ont été utilisés pour détecter pol η expression de la protéine par immunohistochimie. Résultats de la relation entre pol η expression de la protéine et cliniques caractéristiques et les résultats de ces patients a été analysée.
une relation linéaire positive entre pol η expression de protéines et 48 valeurs h CI50 de l'oxaliplatine dans quatre lignées cellulaires de cancer gastrique a été observée. Positivity de pol η expression de la protéine a été fortement associée à la mauvaise réponse au traitement, ainsi que la survie plus courte à la fois univariée (8 contre 14 mois; P < 0,001) et multivariée (hazard ratio, 4.555; intervalle de confiance de 95%, 2,461 à 8,429; P <. Conclusions 0,001) analyse en quatre-vingts métastatiques patients d'adénocarcinome gastrique de
Notre étude indique que polη est un facteur prédictif de la réponse au traitement et à la survie des patients atteints d'adénocarcinome gastrique métastatique traités avec FOLFOX ou XELOX comme chimiothérapie de première ligne. Par conséquent, confirmant la valeur de polη dans les études avec la conception prospective est obligatoire.
Contexte
cancer de l'estomac est le quatrième cancer le plus répandu dans le monde entier, avec 603,003 nouveaux cas chez les hommes et 330,290 nouveaux cas chez les femmes par an [1]. Il est la deuxième cause la plus fréquente de cancer décès lié (700.000 décès par an), avec près des deux tiers des cas se produisent dans les pays en développement et 42% en Chine à elle seule [2]. La chirurgie reste la principale méthode potentielle pour guérir la maladie; Cependant, environ 84% des patients atteints de cancer gastrique se développera comme une maladie avancée, avec 30% des cas localement avancés, 30% des maladies métastatiques au moment du diagnostic, et les maladies 24% de récidive [3]. Les littératures ont montré que la survie médiane était seulement 3-4 mois chez les patients atteints de cancer gastrique avancé sans chimiothérapie. La nouvelle génération d'agents chimiothérapeutiques, tels que l'oxaliplatine, peut prolonger la survie dans le cancer gastrique avancé pour être de 10 à 12 mois; En outre, la chimiothérapie peut également améliorer la qualité de vie [4-12]. L'effet thérapeutique dépend principalement de la réponse des médicaments à la tumeur au cours de la chimiothérapie de première ligne, parce que jusqu'à présent seulement une petite étude de phase III avec 120 cas a montré un bénéfice de survie modeste de la monothérapie irinotecan sur les soins de soutien seuls [13]. Malheureusement, en raison de la résistance aux médicaments, les taux de réponse que 30-50% peuvent être atteints même si l'administration de nouveaux médicaments de production tels que le docétaxel, l'oxaliplatine, la capécitabine, irinotécan, S1, etc pour les patients atteints de cancer gastrique avancé comme traitement de première ligne [3]. Cela signifie au moins 50% des patients doivent subir un traitement inefficace, qui peut non seulement diminuer la qualité de vie des patients, mais aussi d'augmenter le fardeau économique. Alors, comment prédire la réponse des agents de chimiothérapie dans le cancer gastrique est une question scientifique très important. Le plus oxaliplatine est le platine de troisième génération, en jouant un rôle vital dans la chimiothérapie pour le cancer gastro-intestinal. régime de combinaison à base d'oxaliplatine tels que oxaliplatine + 5-FU ou d'un médicament 5-FU-like a été prouvé pour être actif dans environ 40-50% des patients atteints de cancer gastrique avancé [14-16]. Oxaliplatine et du cisplatine partagent le même mécanisme, et provoquent des mono-produits d'addition et de reticulations intra-brins ou inter-brins de l'hélice d'ADN double qui bloquent fortement la synthèse d'ADN [17-19]. Lorsque cela se produit, certaines voies d'ADN de réparation des dommages peuvent activer, y compris la réparation par excision de nucléotides (NER), mismatch repair (MR), la recombinaison homologue (RH), la synthèse d'ADN de translésionnelles (TLS) [20]. Ces réparations de produits d'addition se produisent principalement par NER [21]. TLS est une autre alternative pour réparer ces lésions, qui est principalement fait par les ADN polymérases η [22]. Polymeraseη (Polη), l'une des enzymes de la lésion se répliquant, intègre la séquence nucléotidique correcte sur des lésions tel qu'un produit d'addition de platine par TLS et poursuit l'allongement de chaîne, alors que pols classiques ne peuvent pas [23]. Polη a la plus haute efficacité de contourner Pt-GG diadducts intra-brins causés par le platine parmi ces enzymes de lésion répliquant, avec une fidélité limitée [23, 24]. Des expériences récentes ont montré que l'absence de résultats polη une amélioration statistiquement significative de la sensibilité cisplatine lorsque l'on compare les fibroblastes humains xeroderma pigmentosum variant polη nul avec ones polη exprimant [25]. Cette amélioration est également observée lorsque les cellules ont été traitées avec du carboplatine et l'oxaliplatine [25]. Des données récentes montrent que le niveau d'ARNm polη négativement corrélé avec la sensibilité cisplatine du cancer pulmonaire non à petites cellules (CPNPC) de lignées cellulaires [26].
Dans la présente étude, nous rapportons pour la première fois la relation entre l'expression de la protéine polη et la sensibilité à l'oxaliplatine des lignées cellulaires de cancer gastrique et la signification de ce dans la prédiction de la réponse au traitement et la survie des patients atteints de cancer gastrique métastatique traités avec une chimiothérapie à base d'oxaliplatine. Matériaux et méthodes
lignées cellulaires
les lignées cellulaires de cancer gastrique, y compris SGC7901 , AGS, MKN45 et MGC803, ont été donnés par le professeur Libing Song from State Key Laboratory of Oncology dans le sud de la Chine (Cancer Center de Sun encore-sen University). Toutes les lignées cellulaires ont été maintenues dans RPMI 1640 (Gibco) additionné de 10% de sérum de veau fœtal (Gibco), sauf MKN 45 avec 20% de sérum fœtal bovin.
Patients et échantillons de patients dans notre base de données cliniques avec chimiothérapie naïve , le cancer gastrique avancé métastatique histologiquement prouvé ont été recrutés pour l'étude. Tous les patients devaient recevoir FOLFOX (fluorouracile, leucovorine et oxaliplatine) ou XELOX (capécitabine et oxaliplatine) régime comme chimiothérapie de première ligne au Cancer Center de l'Université Sun Yat-sen, et des échantillons de prétraitement fixés au formol paraffine dans des biopsies GASTROSCOPE ou palliatifs le fonctionnement ont été obtenues. caractéristiques histopathologiques ont été confirmées par un examen aveugle des lames de pathologie d'origine. La classification TNM a été utilisé pour la mise en scène pathologique, et de la classification de l'Organisation mondiale de la santé a été utilisé pour le classement pathologique. D'autres critères d'inclusion comprenaient l'âge entre 18-80, Eastern Cooperative Oncology Group statut (ECOG) de performance de 2 ou moins, la deuxième ligne de chimiothérapie ou non, aucun traitement de rayonnement. Tous les patients ont donné leur consentement éclairé écrit; nous avons obtenu un consentement distinct pour l'utilisation de spécimens. l'approbation de l'étude a été obtenue à partir de comités d'éthique indépendants au Cancer Center de l'Université Sun Yat-Sen. L'étude a été réalisée en conformité avec les normes éthiques de la Déclaration de l'Association médicale d'Helsinki mondiale.
Suivi et évaluation
Les patients ont été suivis par téléphone ou par lettre de communication une fois par an pour un total de 4 ans. La survie globale a été définie comme le temps écoulé entre la date de diagnostic confirmé à mort et censuré à la date du dernier contact pour un patient survivant. Réponse de la maladie a été évaluée selon les critères d'évaluation de réponse dans une tumeur solide (critères RECIST) [27].
cytotoxicité tests
croissance cellulaire inhibition a été déterminée par la 3- (4,5-diméthylthiazol-2-yl) -2 , le dosage du bromure de 5-diphényltétrazolium (MTT). En bref, les cellules ont été ensemencées dans des plaques à 96 puits et on les a laissées se fixer pendant une nuit. Après 48 heures d'incubation d'un médicament à différentes concentrations (37 ° C), le réactif MTT (5 mg /ml, 20 ul /puits) a été ajouté à chaque puits et mis en incubation pendant un temps supplémentaire de 4 heures. Les plaques ont ensuite été centrifugés (1500 g, 5 minutes) et le surnageant a été éliminé. Les culots cellulaires ont été dissous dans 200 ul de DMSO. L'absorbance a été déterminée en utilisant le modèle 550 microplaques Reader (BIO-RAD, Hercules, CA, USA) à une longueur d'onde de 570 nm, avec soustraction de fond à une longueur d'onde de 630 nm. Toutes les expériences ont été réalisées en triple. La concentration nécessaire pour inhiber la croissance cellulaire de 50% (IC50) a été calculée à partir des courbes de survie selon la méthode de Bliss [28].
Western
blot Les cellules ont été lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate glacée et récoltées dans un échantillonnage tampon [ ,,,0],62,5 mmol /L de Tris-HCl (pH 6,8), 2% de SDS, 10% de glycerol et 5% de 2-mercaptoéthanol h]. La concentration en protéine a été déterminée par dosage de Bradford (Bio-Rad Laboratories). Des quantités égales de protéines ont été appliqués à des gels à 7,5% de Polyacrylamide SDS (SDS-PAGE), séparés par électrophorèse et transférés sur des membranes de fluorure de polyvinylidène. Après avoir bloqué dans 5% de lait non gras dans du tampon TBST (10 mmol /L de Tris-HCl, 150 mmol /L de NaCl et 0,1% de Tween 20, pH 8,0) pendant 1 h à température ambiante, la membrane a été incubée avec un anticorps anti-polη anticorps de lapin (1: 400; Abcam). Polη expression a été détectée avec la peroxydase de raifort conjuguée à une IgG de chèvre anti-lapin et la chimioluminescence renforcée. L'anticorps anti-α-tubuline a été utilisé comme témoin de chargement. logiciel
ImageJ du National Institutes of Health (NIH) a été utilisé pour quantifier la protéine.
immunohistochimie
immunohistochimique (IHC) analyse a été effectuée pour détecter l'expression de polηprotein 80 dans les tissus du cancer de l'estomac humain. En bref, les coupes tissulaires ont été déparaffinées dans du xylène à 37 ° C pendant 20 minutes et réhydratées. le peroxyde endogène a été bloquée par incubation des sections avec 3% de peroxyde d'hydrogène dans du methanol pendant 20 minutes à 37 ° C. Ensuite, les coupes ont été immergées dans un tampon citrate à 10 mM (pH 6,0) et aux micro-ondes pour la récupération antigénique, suivie d'une incubation avec du lapin anti polη (1: 100; Abcam) pendant une nuit à 4 ° C. Après lavage, les coupes de tissu ont été traitées avec un anticorps secondaire marqué à la peroxydase de raifort pendant 30 minutes. Les sections ont été développées avec diaminobenzidine (DAB) et de contraste avec l'analyse de l'hématoxyline. De l'immunohistochimie dans notre étude a été réalisée par deux observateurs indépendants sur la base de la proportion de cellules tumorales colorées positivement. S'il y a une différence entre ces deux observateurs, ces lames ont été une nouvelle enquête par les deux chercheurs utilisant un microscope multi-écrans. Tumeurs avec plus de 5% des cellules cancéreuses POLη-positifs ont été considérés comme positifs (noyau coloration), sinon négative.
Analyse statistique
Receiver operating characteristic (ROC) analyse de la courbe et le test exact de Fisher ont été réalisées pour sélectionner IHC Pol valeur -positif avec la plus haute précision. 2 × 2 table a été construite sensibilité rendement, la spécificité, la valeur prédictive positive et négative, et la précision a été calculée comme proportion de vrais patients positifs et négatifs vrais sur des patients entiers. Toutes les analyses statistiques ont été réalisées par SPSS 15.0 progiciel statistique (SPSS Inc, Chicago, IL, USA). P valeur < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative. L'analyse de Kaplan-Meier avec les tests du log-rank a été utilisé pour des analyses unidimensionnelles. Variables montrant une tendance pour l'association avec la survie (P < 0,05) ont été choisis pour l'inclusion dans la multivariée finale Cox modèle des risques proportionnels. Résultats de la relation entre l'expression polη et les caractéristiques clinicopathologiques a été examiné par un test de chi-carré et test exact de Fisher.
expression Polη en corrélation avec la sensibilité à l'oxaliplatine des lignées cellulaires de cancer gastrique
sensibilité oxaliplatine de quatre lignées de cellules gastriques ( SGC7901, AGS, MKN45 et MGC803) ont été détectés par un test MTT décrit ci-dessus. expression de la protéine polη endogène de quatre lignées cellulaires ont été comparés les uns aux autres par transfert de Western, et la moitié concentration d'inhibition maximale (CI50) des valeurs d'oxaliplatine pour les cellules ont été montrées sur la figure 1. significative et une corrélation positive a été observée, comme le montre la figure 2, par rapport expression de la protéine polη avec des valeurs IC50 de l'oxaliplatine. Figure analyse 1 expression de la protéine POL η dans l'estomac des lignées cellulaires de cancer par western blot et 48 valeurs h CI50 de oxaliplatine pour les cellules de cancer gastrique (pmol /L).
Figure 2 Corrélation entre l'expression POL η et IC50 de l'oxaliplatine pour les cellules gastriques Les caractéristiques des patients de.
Quatre-vingts patients de Janvier 2005 et Juillet 2009 ont été analysés rétrospectivement. Les patients avaient un âge médian de 54 (plage, 26,0 à 79,0), avec 49 hommes et 31 femmes. D'autres caractéristiques cliniques ont été résumées dans le tableau 1. Le taux de réponse (CR + PR) avec la première ligne XELOX ou la chimiothérapie FOLFOX était de 47,5%, le taux de bénéfice clinique (CR + PR + SD) était de 77,5%. Une partie de ces patients (23/80) ont eu de deuxième ligne chemotherapy.Table 1 Caractéristiques des patients (N = 80)
caractéristique
No. des patients
%
âge (ans)
médian
54,0
Range
26,0 à 79,0
Sex
Homme
49
61,3
Femme
31
38,7
statut de performance ECOG
0
36
45,0 1
42
52,5
2
2
2,5
Les sites principaux
Cardia
21
26,3
Body
18
22,5
antrum /pylore
41
51.2 Sites
métastatiques
26
32,5
poumon de foie
21
26,3
péritoine
19
23,8
Autres
14 <17,4
différenciation histopathologique br> N0
G1 2
2.5
26
32,5
G3
52
65,0
traitement Réponse
G2 (1ère ligne)
CR 2
2.5
PR
36
45,0
SD
24
30,0
PD
18
22,5
2e ligne régime chemotherary
BSC
57
71,3
FOLFIRI
6
7,5
XELIRI 8
10,0
DX
6
7,5
TP 3
3.7
CR, réponse complète; PR, réponse partielle; SD, maladie stable; PD, la maladie de progression;
BSC, meilleurs soins de soutien; FOLFIRI, 5-fluracil ainsi leucovorine et irinotécan; XELIRI, capécitabine plus irinotecan; DX, docitaxel capécitabine; TP, paclitaxel plus cisplatine.
Les critères que le tissu tumoral avec plus de 5% des cellules cancéreuses Polη-positifs a été défini comme IHC positif a la plus grande précision dans la prédiction de bénéfice clinique de la chimiothérapie de première ligne
tumeur tissus de quatre-vingt-métastatique les patients atteints de cancer gastrique traités par FOLFOX ou XELOX schéma ont été utilisés pour détecter l'expression de la protéine polη par immunohistochimie (figure 3). Étant donné que le pourcentage de cellules tumorales noyau-coloration dans tous les cas était pas plus de 10%, nous avons essayé de sélectionner la valeur Polη positive IHC avec la plus haute précision pour prédire le bénéfice clinique de chimiothérapie de première ligne. Nous avons défini une valeur de neuf IHC positif: ≥ 1%, 2% ≥, ≥ 3%, ≥ 4%, ≥ 5%, ≥ 6%, ≥ 7%, ≥ 8%, ≥ 9%, et construit neuf 2 × 2 table. Le tableau 2 montre à titre d'exemple. Sensibilité, spécificité, valeur prédictive positive et négative, et la précision ont été calculées et utilisées pour tracer la courbe ROC. Comme montré dans le tableau 3 et la figure 4 coupée valeur ≥ 5%, a la plus grande précision (88,8%). Donc, les tumeurs de plus de 5% des cellules cancéreuses POLη-positifs ont été considérés comme positifs (noyau coloration), sinon négatif. Figure 3 L'expression de la protéine POLη dans le cancer gastrique avancé comme examiné par immunohistochimie. A. image négative expression dans le tissu tumoral (× 400). protéine B. POLη était détectable dans le noyau des cellules de cancer de l'estomac (× 400). expression
Tableau 2 ADN de la protéine polymérase η et la réponse clinique de traitement

échec clinique
bénéfice clinique
total des cas
Pol η (+)
16
7
23
Pol η ( -)
18
62
80
≥ 5% expression Polη de 2
55
57
total des cas dans les cellules tumorales définies comme positives
Table. 3 Précision, la sensibilité, la spécificité, la valeur prédictive positive et la valeur prédictive négative selon Polη IHC comptant pour cent dans la prédiction de la réponse à la chimiothérapie FOLFOX ou XELOX régime
cellules tumorales pour cent positif, coupé off

Specificity

Sensitivity

PPV

NPV

Accuracy

1%
0.419
0.889
0.308
0.929
0.525
2%
0.500
0.889
0.340
0.940
0.588
3%
0.645
0.889
0.421
0.952
0.700
4%
0.823
0.889
0.593
0.962
0.838
5%
0.887
0.889
0.696
0.965
0.888
6%
0.887
0.778
0.667
0.932
0.863
7%
0.978
0.667
0.705
0.904
0.863
8%
0
0.389
1.000
0.849
0.863
9%
0
0.111
1.000
0.795
0.800
PPV, valeur prédictive positive; VAN, valeur prédictive négative.
Figure 4 Récepteur d'exploitation courbe caractéristique de Polη IHC comptant pour prédire la réponse à la chimiothérapie FOLFOX ou XELOX régime.
Relation d'expression polη avec les caractéristiques cliniques de cancer gastrique métastatique
Comme le montre la Tableau 4 seulement 23 des 80 cas (28,75%) avaient une expression positive de la protéine polη (≥ 5% des cellules cancéreuses polη-positives), 16 des 23 cas positifs (69,56%) ont échoué au traitement, en revanche, seulement 2 des 57 cas négatifs (3.51%) avaient une maladie progressé après FOLFOX ou XELOX chimiothérapie. expression Polη fortement corrélée avec la réponse au traitement à la chimiothérapie à base d'oxaliplatine du cancer gastrique métastatique (P < 0,001), alors qu'il n'a pas été associée à l'âge, le sexe, les sites primaires, les sites métastatiques ou pathologique différenciation levels.Table 4 Corrélation entre POL η expression et les caractéristiques clinico-pathologiques des patients atteints de cancer gastrique
caractéristique
POLη
χ2 Test
valeur P

Test
P valeur de Fisher

positif (n = 23)
négatif (n = 57)



âge (y)
< 60
16
37
0,690
0,797
≥ 60
7
20
Sexe Homme
14
35
0,695
1.000
9
22
Les sites principaux
Femme
Cardia
10
11
0,084
0,102
Body
4
14
Antrum /de
pylore 9
32
sites métastatiques
11
15
0,247
0,269
Lung
foie
5
16
péritoine 3
16
Autres 4
10
différenciation histopathologique
G1 2
0
0,068
0,107
G2
6
20
15
37
réponse au traitement
CR + PR + SD
G3
7
55
< 0,001
< 0,001
PD
16 2
CR, réponse complète; PR, réponse partielle; SD, maladie stable; Corrélation de Spearman analyse de PD, progression de la maladie. A en outre été fait pour confirmer la corrélation entre l'expression de polη et les caractéristiques clinicopathologiques. Pearson coefficient de contingence montré que les niveaux de polηexpression était significativement liée avec la réponse au traitement (P < 0,001)., De même, aucune corrélation significative avec d'autres facteurs ont été obtenus (données non présentées)
relation entre l'expression polη et la survie du cancer gastrique métastatique
Kaplan-Meier analyse de survie univariée a révélé que l'expression positive de polη dans les cellules tumorales et mauvaise réponse de traitement étaient significativement associés à une survie plus courte. La durée médiane de survie pour polη cas positifs et négatifs étaient 8 et 14 mois, respectivement, comme le montre la Figure 5 (log rank, P < 0,001). Multivariée analyse de survie (modèle de régression de Cox) a révélé que l'expression de polη était des facteurs pronostiques indépendants. L'intervalle de confiance de 95,0% (IC) pour le risque relatif était de 2,461 à 8,429 (tableau 5). Ces résultats indiquent que l'expression de polη dans le tissu tumoral prédit une survie plus courte. Aucune relation n'a été observée entre la survie et les paramètres clinicopathologiques repos tels que l'âge, le sexe, les sites tumoraux primaires, la différenciation pathologique et métastatique sites.Table 5 analyse multivariée de la survie globale dans le cancer gastrique
Facteurs

Caractéristiques
rapport de danger
95% CI
valeur
P

défavorable
favorable



Âge
≥ 60
< 60
0,956
0,570 à 1,602
0,863
Le grade histologique
mal
Bien /modérément
1.428
0,861 à 2,369
0,168
POL η
positif
négatif
4.555
2,461 à 8,429
< Rapport 0,001
CI, intervalle de confiance.
Figure 5 courbes de Kaplan-Meier avec analyse univariée (log-rank test) pour les patients avec une expression de POLη négative contre les tumeurs d'expression POLη positive.
La présente étude partiellement a révélé le rôle de l'ADN polymeraseη en tant que protéine de réparation d'ADN dans le cancer gastrique en détectant son expression dans les quatre lignées cellulaires de cancer gastrique et 80 patients atteints d'un adénocarcinome gastrique métastatique qui avaient reçu FOLFOX ou XELOX comme la chimiothérapie de première ligne. Les résultats ont montré que le niveau de polη dans des lignées cellulaires tumorales d'expression est en corrélation avec la sensibilité de l'oxaliplatine (Figure 2). Pour le tissu tumoral, l'expression positive ne se produisait dans 28,75% des cas (23 sur 80), et l'expression était modeste. Cependant, une forte corrélation a été trouvée entre l'expression de polη et la réponse au traitement, ainsi que la survie. Tous les résultats ont montré que la positivité polη était un indicateur de mauvaise réponse au traitement et à la survie plus courte chez les patients de paramètres ci-dessus.
ADN polymeraseη est codée par le gène polh qui est l'un des 150 gènes de réparation d'ADN humains, dont les résultats défection Xeroderma pigmentosum Variant (XP-V) syndrome, manifestant hautement sensibilité au rayonnement UV et une tendance à développer un cancer de la peau [29-31]. Polη est une enzyme importante de la lésion se répliquant qui se réplique dans dimères de pyrimidine introduites par un rayonnement UV, ce qui évite la mutation génétique élevée [32]. En plus des dimères de pyrimidine, polη a été montré pour répliquer l'ensemble des sites cisplatine réticulés intrabrin GG [33]. Certaines recherches ont montré que l'expression polη était corrélée à la sensibilité à la cisplatine ou l'oxaliplatine dans XP-V lignes des fibroblastes humains de cellules et de cellules pulmonaires et polη semblaient être un marqueur prédictif de traitement-réponse chez les patients atteints de CPNPC avec une chimiothérapie à base de cisplatine [26, 27] de. on en sait moins sur le rôle de polη dans le cancer gastrique. Elle est la première étude pour détecter la sensibilité de l'oxaliplatine dans ces quatre lignées cellulaires gastriques de carcinome (SGC7901, AGS, MKN45 et MGC803) par test MTT et l'expression protéique par Western Blot. Nous avons constaté une relation linéaire significative entre eux. Notre étude a été dans une certaine mesure compatible avec l'observation dans des lignées cellulaires de cancer du poumon par Paolo Ceppi et al, si ce qu'ils détectés étaient le niveau d'ARNm polη et de la sensibilité du cisplatine [27].
Ensuite, nous avons analysé restrospectively l'expression de la protéine polη dans quatre-vingt patients avancés métastatiques de cancer gastrique qui ont reçu FOLFOX ou XELOX comme la chimiothérapie. Nous avons observé tout d'abord que le pourcentage de cellules tumorales polη-coloration dans tous les 80 cas avait pas plus de 10%, de sorte que nous avons défini ≥5% en IHC positive selon la précision dans la prédiction de bénéfice clinique avec XELOX ou chimiothérapie FOLFOX. Avec cette norme, seuls 23 patients ont eu une expression positive avec 7 cas sur 62 cliniques de prestations (CR + PR + SD) de la chimiothérapie et 16 sur 18 PD cas. Le taux d'expression entre le groupe clinique de prestations (7/62, 11,3%) et le groupe de PD (16/18, 88,9%) était significativement différent (P < 0,001). Ceci indique que Polη positivité pourrait prédire la chimiothérapie inefficace avec XELOX ou FOLFOX régime. Le résultat était conforme à notre étude dans les cellules qui Polη expression est corrélée négativement avec la sensibilité à l'oxaliplatine des lignées cellulaires de cancer gastrique.
Nous avons trouvé un avantage de survie significative polη patients négatifs. Cet avantage est probablement venu de la thérapie efficace de l'oxaliplatine, étant donné que polη était fortement corrélée avec la réponse au traitement. Il est bien connu que la chimiothérapie efficace serait d'améliorer la qualité des patients atteints de cancer gastrique de vie et d'améliorer la survie; notre enquête peut aider à prédire la réponse au traitement de la chimiothérapie et de la survie à base d'oxaliplatine, donc d'éviter un traitement inutile au début.
Il existe plusieurs limites à notre étude. Tout d'abord, Ceci est une étude rétrospective avec un petit nombre de patients. Dans l'étude de présélection, aucune association significative entre l'expression polη et l'âge, le sexe, les sites tumoraux primaires, les sites métastatiques ou la différenciation pathologique a été obtenu sur la base d'un tel nombre de cas. Il est possible d'obtenir des résultats significatifs dans certaines caractéristiques clinicopathologiques tels que les sites primaires ou la différenciation pathologique (P valeur proche de 0,05), si, avec suffisamment de patients. Par conséquent enlargeing le nombre de cas et d'effectuer des études prospectives est obligatoire. Deuxièmement, parce que la précision d'essai a été calculée en utilisant les critères définis par ROC analyse de la courbe, nos résultats nécessaires validation dans une cohorte indépendante. Troisièmement, l'expression de polη est relativement faible dans le cancer gastrique, en raison de la subjectivité, l'erreur de comptage IHC pourrait être plus grand, ce qui peut influencer la sensibilité et la spécificité pour prédire la réponse au traitement, la méthode de façon plus précise est nécessaire. Forth, Il est bien connu que la résistance de platine est très compliqué, donc polη, comme un seul paramètre, est difficile de prédire la réponse thérapeutique d'une manière exacte.
En dépit de limitations, notre étude est l'une des rares tentatives de définir critères de chimiosensibilité in vivo du traitement à base d'oxaliplatine en utilisant la réponse clinique en tant que norme de référence. Il peut être une méthode efficace et économique pour prédire la réponse au traitement.
Conclusion
En conclusion, la présente étude a démontré que polη est un prédicteur important de la réponse au traitement chez les patients atteints de chimiothérapie du cancer gastrique métastatique recevant du FOLFOX ou XELOX . Un tel marqueur peut aider les cliniciens à choisir la stratégie clinique optimale pour les patients atteints de cancer gastrique avancé. En outre, l'analyse de survie multivariée a révélé que l'expression de facteurs pronostiques est polη indépendants. Les résultats doivent être confirmés dans une étude prospective plus grande avant l'application dans la pratique clinique.
Remarques
Kai-yuan Teng, Miao-zhen Qiu a contribué également à ce travail.
Abréviations
GG :
guanine-guanine
CR:
réponse complète
ADN: acide désoxyribonucléique


FOLFOX:
fluorouracile, leucovorine et oxaliplatine
HR:
recombinaison homologue
ARNm: acide ribonucléique messager

IC50:
la concentration inhibitrice de la moitié
IHC:
immunohistochimie


MMR:
mismatch réparation
WB:
western blot
test MTT:
3- (4,5-diméthylthiazol-2-yl) -2,5-diphényltétrazolium dosage
NER:
nucléotide excision Repair

OS:
survie globale
PD:
maladie de progression
Pol η:
polymérase êta
PR:
réponse partielle
SD:
maladie stable
Pt:
platine
ROC:
récepteur caractéristique de fonctionnement
TLS:
translésionnelles synthèse


XELOX:
capécitabine et oxaliplatine

XPV:.
variante xeroderma pigmentosum

Déclarations
Remerciements
Nous remercions les membres du personnel du Département d'oncologie médicale au Centre de cancérologie Université Sun Yat-sen pour leur suggestion et de l'assistance
Octroyer un soutien:. national Natural science Foundation de la subvention Chine 30672408, Guangzhou Bureau de la science et de la technologie subvention 2006Z3-E0041 et Sun Yat-sen University 985 Fonds Initiation Programme (Chine).
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