DNA polymeraseη protein izraz napoveduje odziv na zdravljenje in preživetje bolnikih z metastatskim adenokarcinomom želodca, zdravljenih s kemoterapijo na podlagi oksaliplatina

DNA polymeraseη protein izraz napoveduje odziv na zdravljenje in preživetje bolnikih z metastatskim adenokarcinomom želodca, zdravljenih s kemoterapijo na podlagi oksaliplatina
abstraktnih
ozadju
DNA polimerazo H (pol H) je sposoben mimo molekule DNK, proizvedene s cisplatinom ali oksaliplatinom in je povezana z celično toleranco platine. Prejšnje študije so pokazale, da je v okvari pol η povzročilo povečano cisplatinom ali občutljivost oksaliplatinske v nekaterih celičnih linijah. Namen te študije je bil raziskati vlogo izražanja pol η beljakovin v metastatskim adenokarcinomom želodca.
Metode
Štiri adenokarcinomom želodca celične linije so bile izbrane za raziskovanje odnosa med pol η beljakovin izražanja in občutljivosti oksaliplatinske ga zahodni blot in MTT test. smo analizirali osemdeset bolnikih z metastatskim adenokarcinomom želodca, zdravljenih s FOLFOX ali XELOX režim kot prvi liniji kemoterapije, ki ustreza predobdelava formalin-fiksno-parafinske vgrajeni tumorske tkiva so bili uporabljeni za ugotavljanje izražanja pol H proteinov z imunohistokemijo. Opazili smo analizirali odnos med pol H beljakovin izražanja in klinične značilnosti in rezultatov teh bolnikov.
Rezultati
pozitivna linearna razmerja med pol H beljakovin izražanja in 48 vrednot h IC50 oksaliplatina v štirih želodčnega raka celičnih linijah. Pozitivnost izražanja pol H beljakovin je bilo močno povezano s slabim odzivom na zdravljenje, kakor tudi krajše preživetje pri obeh univariatne (8 v primerjavi z 14 mesecev; P < 0,001) in multivariatna (razmerje ogroženosti 4,555; 95% interval zaupanja 2,461-8,429; p. < Sklepi 0,001) analiza v osemdesetih bolnikih z metastatskim adenokarcinomom želodca
Naša študija kaže, da je polη napovedni dejavnik odziva na zdravljenje in preživetje bolnikih z metastatskim adenokarcinomom želodca, zdravljenih s FOLFOX ali XELOX kot prvi liniji kemoterapije. Kar potrjuje vrednost polη v študijah z bodočega načrtovanja je obvezna.
Ozadje
rak želodca je četrti najpogostejši rak na svetu, z 603,003 novih primerov med moškimi in 330,290 novih primerov med ženskami na leto [1]. To je drugi najpogostejši vzrok smrti, povezanih z rakom (700.000 smrti letno), pri skoraj dveh tretjinah primerov, ki se pojavljajo v državah v razvoju, in 42% na Kitajskem, samo [2]. Kirurgija ostaja velik potencial metoda za zdravljenje bolezni; Vendar pa bo približno 84% bolnikov z rakom želodca razvije biti napredna bolezen, s 30% lokalno premika primerih 30% metastatskih bolezni pri diagnozi in 24% ponovitve bolezni [3]. V literature je pokazala, da je bila mediana preživetja le 3-4 mesecev pri bolnikih z napredovalim želodca raka brez kemoterapije. Nova generacija kemoterapevtiki, kot oksaliplatinske, lahko podaljša preživetje v napredovalim rakom želodca, bi bila od 10 do 12 mesecev; poleg tega lahko kemoterapija tudi izboljšanje kakovosti življenja [4-12]. Terapevtski učinek v glavnem odvisna od odziva zdravil na tumorja med kemoterapijo v prvi liniji, ker je doslej samo en majhen študija faze III s 120 primeri pokazala skromno korist preživetje od irinotekan monoterapiji več kot samo podporno zdravljenje [13]. Na žalost, zaradi odpornosti na zdravilo, mogoče doseči delež odziva samo 30-50%, čeprav upravljajo nove generacije zdravil, kot so docetaksel, oksaliplatin, kapecitabin, irinotekan, S1, itd do bolnikih z napredovalim rakom želodca kot prvo linijo zdravljenja [3]. To pomeni, da vsaj 50% bolnikov, ki morajo opraviti neučinkovito zdravljenje, ki lahko ne le zmanjša kakovost pacientov življenja, ampak tudi povečati gospodarsko breme. Torej, kako napovedati odziv kemoterapevtiki pri bolnikih z rakom želodca je zelo pomembno znanstveno vprašanje.
Oksaliplatin je tretja generacija platine, ki igrajo ključno vlogo pri kemoterapiji raka prebavil. Na podlagi oksaliplatina kombinirani režim kot oksaliplatina ter 5-FU in 5-FU, kot so droge je bilo dokazano, da je aktivna v približno 40-50% naprednih bolnikov želodca z rakom [14-16]. Oksaliplatin in cisplatina delijo podoben mehanizem, in povzroči mono-aduktov in znotraj pramenov ali med pramenov navzkrižnih povezav v dvojne vijačnice DNK, ki močno blokira sintezo DNA [17-19]. Ko se to zgodi, lahko nekatere poti za DNK škode popravila vklopiti, vključno nukleotidov ekscizijski popravila motornih vozil (NER), popravila neusklajeno (MR), homologne rekombinacije (HR), translesion DNA sinteze (TLS) [20]. Te adukt popravila pojavijo predvsem z NER [21]. TLS je še en alternativni način za popravilo teh poškodb, ki ga večinoma opravijo DNK-polimerazo H [22]. Polymeraseη (Polη), eden-lezij posnema encimov, vsebuje pravilno nukleotidov nad poškodb, kot so platine adukta ga TLS in nadaljuje verige raztezek, medtem ko klasični polov ne more [23]. Polη ima največjo učinkovitost mimo Pt-GG znotraj pramenov diadducts s ​​platino povzroča med temi-lezij posnema encimov, z omejeno natančnostjo [23, 24]. Nedavni poskusi so pokazali, da odsotnost polη rezultatov statistično značilno izboljšanje v cisplatinom občutljivosti pri primerjavi pigmentne kseroderme-variantne človeških fibroblastov polη-null s-polη izražanje tistih [25]. To povečanje je opaziti tudi, ko so celice zdravijo z karboplatinom in oksaliplatinom [25]. Najnovejši podatki kažejo, da polη raven mRNA v negativni korelaciji s cisplatinom občutljivosti ne drobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC) celičnih linij [26].
V tej študiji smo poročilo prvič razmerje med polη beljakovin izražanja in občutljivosti oksaliplatinske želodcu raka celičnih linij in pomen, ki pri napovedovanju odziva na zdravljenje in preživetje bolnikih z metastatskim želodca z rakom, zdravljenih s kemoterapijo na podlagi oksaliplatina.
materiale in metode
celične linije
želodčni rak celičnih linij, vključno SGC7901 , AGS, MKN45 in MGC803, so prispevali prof Libing Song od državne Key laboratorij za onkologijo v južnem Kitajskem (Cancer Center sonca še-sen University). Vse celične linije
Bolniki in vzorcev
Bolniki vzdržujejo v RPMI 1640 (Gibco) z dodatkom 10% fetalni goveji serum (Gipco), razen MKN 45 s 20% fetalnega govejega seruma. V naši klinični bazi podatkov s kemoterapijo, ki še niso bili smo histološko dokazano metastatskega napredovalega raka želodca vključenih v študijo. Vsi bolniki so imeli prejeti FOLFOX (fluorouracil, levkovorinu in oksaliplatin) ali XELOX (kapecitabina in oksaliplatinom) režim kot kemoterapiji prvega izbora na Cancer Center Sun Yat-sen University, in formalinu fiksni parafinske vgrajeni vzorci predhodno zdravljenje pod gastroskop biopsije ali blažilno operacija Dobimo. Histopatološka lastnosti so bile potrjene s slepo pregled prvotnih patologije diapozitive. Klasifikacija TNM je bila uporabljena za patološke uprizoritev, in klasifikacija Svetovna zdravstvena organizacija je bila uporabljena za patološko razvrščanje. Druga merila vključevanja vključeni starosti med 18-80 let, Eastern Cooperative Oncology Group status (ECOG) izvedba 2 ali manj, druga linija kemoterapijo ali ne, ne obravnava sevanja. Vsi bolniki so se o tem pisno privolitev; smo pridobili posebno dovoljenje za uporabo vzorcev. Odobritev je bila študija pridobijo iz neodvisnih odborov za etiko na Cancer Center Sun Yat-Sen University. Študija je bila izvedena v skladu z etičnimi standardi Svetovnega zdravniškega združenja Helsinški deklaraciji.
Spremljanje in vrednotenje
Bolniki enkrat na leto so sledili telefonski ali črko komunikacije za skupaj 4 leta. Celokupno preživetje je bil opredeljen kot čas od datuma potrjene diagnoze do smrti in cenzurirani na dan zadnjega stika za preživele bolnika. Odgovor bolezni je bil ocenjen po merilih za ocenjevanje odziva na trdnih Tumorji (merila kriterijih RECIST) [27].
citotoksičnosti teste
rast celic inhibicije je bila določena z 3- (4,5-Dimetiltiazol-2-il) -2 , 5-difeniltetrazolijevega bromida testom (MTT test). Na kratko smo celice zasejali v 96 vdolbinami in pustimo, da se veže preko noči. Po 48 urah inkubacije drog v različnih koncentracijah (37 ° C), reagentom MTT (5 mg /ml, 20 ml /jamico) smo dodali v vsako jamico in inkubiramo dodatne 4 ure. Plošče smo potem centrifugirali (1500 g, 5 minut) in supernatant odstranili. Pelete celic smo raztopili v 200 ul DMSO. Absorbcija je bila določena s pomočjo Model 550 mikroplošča Reader (Bio-Rad, Hercules, CA, ZDA) pri valovni dolžini 570 nm, z osnovnimi odvzemanjem pri valovni dolžini 630 nm. Vse eksperimente smo izvedli v treh izvodih. Koncentracija potrebna za zaviranje rasti celic za 50% (IC50), smo izračunali iz krivulj preživetja po metodi Bliss [28].
Western blotting
celice speremo z ledeno hladnim fosfatni pufer slanice in pridelani v vzorčenju varovalnem [ ,,,0],62,5 mmol /L Tris-HCl (pH 6,8), 2% SDS, 10% glicerola, in 5% 2-h-merkaptoetanola]. Koncentracija proteina smo določili s testom Bradfordu (Bio-Rad Laboratories). Enaka količina beljakovin so bili uporabljeni za 7,5% poliakrilamidnih SDS geli (SDS-PAGE), ločenih elektroforetsko in prenese na poliviniliden fluorida membran. Po blokiran v 5% nemastnega mleka v TBST pufru (10 mmol /L Tris-HCL, 150 mmol /L NaCI in 0,1% Tween20, pH 8,0), 1 uro pri sobni temperaturi, membrana je bila inkubirana z anti-polη kunec protitelo (1: 400; Abcam). Polη ekspresijo detektiramo z hrenovo peroksidazo konjugiranega kozjega anti-kunčjega IgG in izboljšano kemiluminescence. Anti-α-tubulin protitelesa smo uporabili kot kontrolo obremenitve.
ImageJ programsko opremo iz National Institutes of Health (NIH) je bila uporabljena za kvantifikacijo beljakovin.
Imunohistokemija
Imunohistokemijsko bila analiza (IHK) naredili za odkrivanje polηprotein izraz v 80. človeške želodčne tkiva raka. Na kratko, so odseki tkiva deparaffinized v ksilenu pri 37 ° C 20 minut in hidracijo. Endogeni peroksid smo blokirali z inkubacijo odseke s 3% vodikovega peroksida v metanolu za 20 minut pri 37 ° C. Nato so bili odseki potopljena v 10 mM citratnem pufru (pH 6,0) in microwaved za antigenski pridobivanje, čemur sledi inkubacija s kunčjim anti polη (1: 100; Abcam) preko noči pri 4 ° C. Po izpiranju smo sekcije tkiva obdelamo s hrenovo peroksidazo označenega sekundarnega protitelesa za 30 minut. Oddelki so bili razviti z diaminobenzidine tetrahidroklorid (DAB) in jih nasprotno s hematoksilin.
Analiza imunohistokemiji leta je bila naša raziskava izvedena z dvema neodvisni opazovalci, ki temelji na deležu pozitivno obarvanih tumorskih celic. Če je razlika med tema dvema opazovalca, so bili ti drsi ponovno pregleda obeh raziskovalci uporabljajo Večglavi mikroskopom. Tumorji, ki imajo več kot 5% POLη pozitivnih rakavih celic so obravnavajo kot pozitivne (nucleus madeži), sicer negativen.
Statistična analiza
sprejemnik deluje značilnosti (ROC) analizo krivulje in Fisherjev natančni test smo izvedli za izbiro IHC Pol -positive vrednost z največjo natančnostjo. 2 x 2 miza je bila zgrajena PRIDELEK občutljivost, specifičnost, pozitivno in negativno napovedno vrednost in natančnost je bila izračunana kot delež resničnih pozitivnih in res negativnih bolnikih ven celih bolnikov. Vse statistične analize smo izvedli s SPSS 15.0 statistični programski paket (SPSS Inc., Chicago, IL, ZDA). P vrednost < 0.05 je štelo, da je statistično značilna. Kaplan-Meier analiza s testiranjem log-rank smo uporabili univariatne analize. Spremenljivke, ki kažejo trend povezavi s preživetjem (P < 0,05) so bili izbrani za vključitev v končno multivariatno Cox sorazmernih tveganj modela. Razmerje med polη izražanja in clinicopathologic značilnosti so pregledane s hi-kvadrat test in Fisherjev testov.
Rezultati
Polη izražanja povezana z občutljivostjo oksaliplatinske celičnih linij raka želodca
oksaliplatinu občutljivost štirih želodčnih celičnih linij ( SGC7901, AGS, MKN45 in MGC803) so odkrile MTT testom zgoraj opisano. Endogeni polη protein izražanje štirih celičnih linij smo primerjali med seboj z Western blotting-om in pol maksimalni inhibitorno koncentracijo (IC50) vrednosti za oksaliplatina za celice so bili prikazani na sliki 1. Pomemben je opaziti pozitivna korelacija, kot je prikazano na sliki 2 v primerjavi polη protein izraz z IC50 vrednostmi oksaliplatina. Slika analiza 1 Izražanje POL H beljakovin v želodcu linij rakavih celic po zahodnem s sušenjem in 48 vrednot h IC50 oksaliplatina za želodčne rakavih celic (umol /L).
Slika 2 Korelacija med POL H izražanja in IC50 oksaliplatinom želodčnih celic .
bolnikov značilnosti
osemdeset bolnikov, od januarja 2005 do julija 2009, so bile naknadno analizirali. Bolniki, je bila mediana starost 54 (razpon: od 26.0-79.0), pri 49 moških in 31 žensk. Druge klinične značilnosti so povzete v tabeli 1. stopnja odziva (CR + PR) v prvi liniji XELOX ali FOLFOX kemoterapijo je bila 47,5%, stopnja klinične koristi (CR + PR + SD) je bila 77,5%. Del teh bolnikov (23/80) je imela druge izbire chemotherapy.Table 1 značilnosti bolnika (N = 80)
značilno
No. bolnikov
%
Starost (let)
Mediana
54,0
Območje
26,0-79,0
seks
Moški
49
61,3
ženska
31
38,7
stanje zmogljivosti ECOG
0
36
45,0
1
42
52,5
2
2
2.5
primarni strani
Cardia
21
26,3
organa
18
22,5
antruma /pilorus
41
51,2
metastatskih mest
jetra
26
32,5
Lung
21
26,3
potrebušnice
19
23,8
drugi
14
17,4
Patološka razlikovanje n0
G1
2
2,5
G2
32,5
G3
52
65,0
odziva 26 Zdravljenje (1. vrstica)
CR
2
2,5
PR
36
45,0
SD
24
30,0
PD
18
22,5
2. črta chemotherary režim
BSC
57
71,3
FOLFIRI
6
7,5
XELIRI
8
10,0
DX
6
7,5
TP
3
3.7
CR, popoln odziv; PR, delni odgovor; SD, stabilna bolezen; PD, napredovanje bolezni;
BSC, najboljše podporne oskrbe; FOLFIRI, 5-fluracil plus levkovorina plus irinotekana; XELIRI, kapecitabin plus irinotekan; DX, docitaxel in kapecitabin; TP, paclitaxel in cisplatina.
Kriteriji, ki tumorsko tkivo z več kot 5% Polη-pozitivnih celic raka je bila opredeljena kot IHC pozitivni ima največjo natančnost pri napovedovanju klinično korist prve kemoterapije linije
Tumor tkiva osemdeset metastatskim bolniki želodca z rakom, zdravljenih s FOLFOX ali XELOX režimu so bile uporabljene za odkrivanje polη ekspresijo proteinov z imunohistokemijo (slika 3). Ker je bil odstotek jedru obarvanje tumorskih celic v vseh primerih ne več kot 10%, smo poskušali izbrati IHC Polη-pozitivno vrednost z največjo natančnostjo napovedati klinično korist prve kemoterapije linije. Opredelili smo devet IHC-pozitivno vrednost: ≥ 1%, ≥ 2%, ≥ 3%, ≥ 4%, ≥ 5%, ≥ 6%, ≥ 7%, ≥ 8%, ≥ 9%, in izdelani devet 2 × 2 miza. Miza 2 je pokazala kot npr. Občutljivost, specifičnost, pozitivna in negativna napovedna vrednost, in natančnost je bila izračunana in se uporablja za pripravo ROC krivuljo. Kot je razvidno iz tabele 3 in slika 4 odrezani vrednost ≥ 5%, ima največjo natančnost (88,8%). Torej tumorjev z več kot 5% POLη pozitivnih rakavih celic so bili šteti kot pozitiven (jedra barvanjem), sicer negativen. Slika 3 Izraz POLη beljakovin v napredovalem raku želodca, ki ga imunohistokemijo preučiti. A. negativen izraz sliko v tumorskem tkivu (x 400). B. POLη protein bilo zaznati v jedru želodčne celice raka (x 400).
Tabela 2 DNA polimeraza η protein izražanja in odziv klinično zdravljenje

Klinični neuspeh
klinične koristi
Skupaj primeri
Pol η (+)
16
7
23
Pol η ( -)
2
55
57
Skupaj primerih
18
62
80
≥ 5% Polη izraz v tumorskih celicah opredeljena kot pozitivna
tabelo. 3 natančnost, občutljivost, specifičnost, pozitivna napovedna vrednost, in negativna napovedna vrednost po Polη IHC štetje odstotkov pri napovedovanju odziva kemoterapijo na FOLFOX ali XELOX režimu
tumorske celice pozitivne odstotkov, zmanjšanje off

Specificity

Sensitivity

PPV

NPV

Accuracy

1%
0.419
0.889
0.308
0.929
0.525
2%
0.500
0.889
0.340
0.940
0.588
3%
0.645
0.889
0.421
0.952
0.700
4%
0.823
0.889
0.593
0.962
0.838
5%
0.887
0.889
0.696
0.965
0.888
6%
0.887
0.778
0.667
0.932
0.863
7%
0.978
0.667
0.705
0.904
0.863
8%
0
0.389
1.000
0.849
0.863
9%
0
0.111
1.000
0.795
0.800
PPV, pozitivna napovedna vrednost; NPV, negativna napovedna vrednost.
Slika 4 sprejemnik značilne delovne krivulje Polη IHC štetja pri napovedovanju odziva kemoterapijo na FOLFOX ali XELOX režimu.
Odnos polη izražanja s kliničnimi znaki metastatskega želodčnega raka
Kot je prikazano v Tabela 4 le 23 od 80 primerov (28,75%) je imela polη beljakovin pozitivno izražanje (≥ 5% Polη pozitivni rakave celice), 16 od 23 pozitivnih primerov (69,56%) ni zdravljenje, v nasprotju s tem, samo 2 od 57 negativnih primerov (3,51%) napredovala bolezen po FOLFOX ali XELOX kemoterapijo. Polη izraz močno povezane z odzivom na zdravljenje na podlagi oksaliplatina kemoterapijo metastatskega raka želodca (P < 0,001), medtem ko je ni povezana s starostjo, spolom, primarnih mestih, metastatskih mest ali patološko razlikovanja levels.Table 4 Korelacija med POL H izražanja in clinicopathologic značilnosti bolnikov z rakom želodca
značilno
POLη
χ2 preizkus
P vrednost

Test
P vrednost Fisherjev

Pozitivni
(n = 23)
Negativni
(n = 57)



dobe (y)
< 60
16
37
0,690
0,797
≥ 60
7
20
Spol
Moški
14
35
0,695
1.000
Moški z
9
22
primarni strani
Cardia
10
11
0,084
0,102
Body
4
14
antruma /pilorus
9
32
metastatskih mest
jetra
11
15
0,247
0,269
Lung
5
16
potrebušnice
3
16
drugi
4
10
patoloških diferenciacijo
G1
2
0
0,068
0,107
G2
6
20
G3
15
37
Odgovor Zdravljenje
CR + PR + SD
7
55
< 0,001
< 0,001
PD
16
2
CR, popoln odgovor; PR, delni odgovor; SD, stabilna bolezen; PD, napredovanja bolezni.
Spearman primerjalno analizo smo nadalje storiti, da bi potrdili povezavo med polη izražanja in clinicopathologic funkcije. Pearson v nepredvidljivih koeficient pokazala, da so ravni polηexpression je bistveno povezana z odzivom na zdravljenje (P < 0,001)., Prav tako je ni večjih korelacije z drugimi dejavniki, pridobljeni (podatki niso prikazani)
Povezava med polη izražanja in preživetje metastatskega raka želodca
Kaplan-Meier univariatne analize preživetja je pokazala, da so bili pozitivni izraz polη v tumorskih celicah in odzivom slabo zdravljenje bistveno povezana s krajšim preživetjem. Srednji čas preživetja polη pozitivnih in negativnih primerov je bilo 8 in 14 mesecev zaporedju, kot je prikazano na sliki 5 (log rang, P < 0,001). Multivariatna analiza preživetja (Cox regresijski model) je pokazala, da je bil izraz polη neodvisni napovedni dejavniki. interval 95,0% zaupanja (CI) za relativno tveganje je 2,461-8,429 (tabela 5). Ti rezultati so pokazali, da izraz polη v tumorskem tkivu napovedal krajšo preživetje. Nobene povezave opazili med preživetjem in počitek clinicopathological parametrov, kot so starost, spol, primarnih tumorjev mestih, patološko diferenciacije in metastatskega sites.Table 5 multivariatne analize celokupnega preživetja v raka želodca
Dejavniki
Značilnosti
razmerje ogroženosti
95% CI
vrednost
P

Neugodno
ugodna



Age
≥ 60
< 60
0,956
0,570-1,602
0,863
histološki razred
Slabo
No /zmerno
1.428
0,861-2,369
0,168
POL η
pozitivni
negativni
4555
2.461-8.429
< 0,001
CI, interval zaupanja.
Slika 5 Kaplan-Meier krivulje z univariatno analizo (log-rang test) pri bolnikih z negativno POLη izražanja v primerjavi s pozitivno POLη izražanja tumorjev.
Razprava
te študije delno razkrila vlogo polymeraseη DNK kot beljakovine za popravilo DNA pri raku želodca z odkrivanjem izraža v štirih želodčnih raka celičnih linij in 80 bolnikov z metastatskim adenokarcinomom želodca, ki so prejeli FOLFOX ali XELOX kot prvo kemoterapijo linije. Rezultati so pokazali, da je stopnja izraz polη v celičnih linijah tumorskih korelaciji z občutljivostjo oksaliplatina (slika 2). Za tumorsko tkivo, pozitivni izraz pojavila samo v 28.75% primerih (23 od 80), in izraz je skromen. Vendar pa je bila močna povezava ugotovljeno med polη izražanja in odziva na zdravljenje, kot tudi preživetje. Vsi rezultati pokazali, da je bila polη pozitivnost indikator za slabo odziva na zdravljenje in krajše preživetje pri bolnikih z zgornjimi nastavitvami.
DNA polymeraseη je kodirana s Polh gena, ki je eden od 150 človeških genov popravljanja DNA, katerega Odpadanje rezultati v pigmentne kseroderme varianta (XP-v) sindrom, manifestira visoko občutljivost na UV sevanje in gibanje za razvoj kožnega raka [29-31]. Polη je pomemben lezija posnema encim, ki posnema po pirimidinovih dimeri z UV sevanjem uvedene, izogibanje visokim genske mutacije [32]. Poleg pirimidinovih dimeri, je polη pokazala, da posnemajo po cisplatina zamreženih GG straneh intrastrand [33]. Nekatere raziskave so pokazale, da je bila polη izraz povezana z občutljivostjo do cisplatinom in oksaliplatina v XP-V človeški fibroblasti celic in pljuč celičnih linij in polη je zdelo, da je zdravljenje odziva predvidevanjem dvojno podajo pri bolnikih z nedrobnoceličnim rakom pljuč s temelji na cisplatinom kemoterapijo [26, 27] .
Manj je znanega o vlogi polη raka želodca. To je prva študija za odkrivanje občutljivost oksaliplatina v teh štirih želodčnega raka celičnih linijah (SGC7901, AGS, MKN45 in MGC803) z MTT testa in beljakovin izražanja po zahodni blot. Našli smo veliko linearnega razmerja med njimi. Naša raziskava je bila do neke mere skladen z opazovanjem v vrsticah pljučni rak celic Paolo Ceppi et al, čeprav, kar so zaznali bili polη raven mRNA in cisplatin občutljivost [27].
Potem smo restrospectively analizirali izražanje polη beljakovin v osemdeset metastatskim napredne bolniki z rakom na želodcu, ki so prejeli FOLFOX ali XELOX kot kemoterapije. Smo najprej opazili, da je bil odstotek polη-obarvanje tumorskih celic v vseh 80 primerih ne več kot 10%, tako da smo kot IHC pozitivno opredeljeno ≥ 5% po natančnosti pri napovedovanju klinično korist s XELOX ali FOLFOX kemoterapijo. S tem standardu, so imeli le 23 bolnikov pozitiven izraz, s 7 od 62 primerov kliničnih koristi (CR + PR + SD) od kemoterapije in 16 od 18 PD primerih. Stopnja izraz med skupino klinične koristi (7/62, 11,3%) in PD skupina (16/18, 88,9%) je bila bistveno drugačna (P < 0,001). To kaže, da bi lahko Polη pozitivnost napovedujejo neučinkovito kemoterapijo s XELOX ali FOLFOX režimu. Rezultat je bil v skladu z našo raziskavo v celicah, ki Polη izraz negativno korelira z občutljivostjo oksaliplatinske želodca raka celičnih linij.
Našli smo veliko korist preživetja pri polη negativnih bolnikih. Ta ugodnost je verjetno prišla iz učinkovite terapije oksaliplatina, saj je bil polη močno povezane z odzivom na zdravljenje. Znano je, da bi bila učinkovita kemoterapija izboljšati kakovost življenja bolnikov z rakom želodca in izboljša preživetje; naša preiskava lahko pomaga napovedati odziva na zdravljenje z na podlagi oksaliplatina kemoterapijo in preživetje, s tem bi se izognili nepotrebnim zdravljenja na začetku.
Obstaja nekaj omejitev v naši raziskavi. Najprej To je retrospektivna študija majhnem številu pacientov. V prednastavljeni študiji ni bila pomembna povezava med polη izražanja in starost, spol, primarnih tumorjev mestih, metastatskih mest ali patološko diferenciacije pridobljeni na podlagi takih primerov več. Možno je, da bi dobili pomembne rezultate v nekaterih clinicopathologic značilnosti kot primarne mestih ali patološko diferenciacije (P vrednosti blizu 0,05), če je z dovolj pacientov. Zato enlargeing številko zadeve in opravlja bodoči poskusov je obvezna. Drugič, ker je bil test natančnost izračuna na podlagi meril, ki jih analizo ROC krivulje, naši rezultati potrebna potrditev v neodvisni kohorti. Tretjič, izraz polη je rak želodca razmeroma nizka, zaradi subjektivnosti, lahko napaka IHC štetja biti večji, ki pri napovedovanju odziva na zdravljenje, lahko vplivajo na občutljivost in specifičnost, zato je potrebno tudi bolj natančna metoda. Naprej, Znano je, da je odpornost platina zelo zapleten, tako polη, kot en sam parameter, je težko napovedati odziva zdravljenje na točno določen način.
Kljub omejitvam, naši raziskavi je eden izmed redkih poskusov opredeljujejo merila za in vivo chemosensitivity režima, ki vključuje oksaliplatin uporabljajo klinični odziv kot referenčni standard. To je lahko učinkovit in cenovno ugodno metodo za napovedovanje odziva na zdravljenje.
Zaključek
Skratka, ta študija je pokazala, da je polη pomemben napovednik odziva na zdravljenje pri bolnikih z metastatskim rakom želodca prejema kemoterapijo FOLFOX ali XELOX . Takšno dvojno podajo lahko pomagajo zdravnikom izbrati optimalno klinično strategijo za bolnike z napredovalim rakom želodca. Poleg tega je multivariatna analiza preživetja je pokazala, da je bil izraz polη neodvisni napovedni dejavniki. je treba ugotovitve je treba potrditi v večjem bodoči sojenja pred uporabo v klinični praksi.
ugotavlja
Kai-juanov Teng, Miao-Zhen Qiu prav tako prispevali k temu delu.
Kratice
GG :
gvanin-gvanin
CR:
popoln odgovor
DNK:
deoksiribonukleinska kislina


FOLFOX:
fluorouracil, levkovorina in oksaliplatina
HR:
homologna rekombinacija
mRNA:
sel ribonukleinska kislina
IC50:
pol inhibitorno koncentracijo
IHC:
imunohistokemija


MMR:
neusklajenost Repair
WB:
zahodni blot
MTT test:
3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolijev bromid test
NER:
nukleotidov Ekscizija Repair

OS:
celokupno preživetje
PD:
napredovanja bolezni
Pol η:
eta polimerazo
PR:
delni odgovor
SD:
stabilna bolezen
pt:
platinum
ROC:
sprejemnik deluje značilnost
TLS:
translesion sinteza


XELOX:
kapecitabin in oksaliplatina

XPV.
pigmentne kseroderme varianta

IZJAVE
Zahvale
zahvaljujemo se članom osebja v oddelku za onkologijo v Sun Yat-sen University Cancer Center za njihov predlog in pomoč
Grant podporo:. National Natural Science Foundation nepovratnih Kitajske 30672408, Guangzhou urad za znanost in tehnologijo nepovratnih sredstev 2006Z3-E0041 in Sun Yat-sen University 985 Program Začetek sklad (Kitajska).
Avtorji "prvotna predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev prvotna predloženih spisov za slike.

• Ocenjevanju pomoči računalnika za ocenjevanje simptomov v trebuhu (ECASS): protokol študije za randomizirani nadzorovani študiji
• Odkrivanje karcinoembrionski antigen RNA v krvi z uporabo kvantitativne realnem času povratne transkriptaze-verižna reakcija s polimerazo napovedati ponovitve želodčne odkrivanje adenocarcinoma