DNA polymeraseη protein uttrykk spår behandlingsrespons og overlevelse av metastatisk adenokarsinom i pasienter behandlet med oksaliplatin kjemoterapi

DNA polymeraseη protein uttrykk spår behandlingsrespons og overlevelse av metastatisk adenokarsinom i pasienter behandlet med oksaliplatin kjemoterapi
Abstract
Bakgrunn
DNA polymerase η (pol η) er i stand til å omgå DNA-addukter produsert av cisplatin eller oksaliplatin og er assosiert med celletoleranse til platina. Tidligere studier har vist at defekte pol η resulterte i forbedret cisplatin, oksaliplatin eller følsomhet i noen cellelinjer. Hensikten med denne studien var å undersøke hvilken rolle pol η protein uttrykk i metastatisk adenokarsinom i ventrikkel.
Metoder
Fire mage adenokarsinom cellelinjer ble valgt til å utforske forholdet mellom pol η protein uttrykk og oksaliplatin følsomhet ved western blotting og MTT analyse. Åtti metastatisk adenokarsinom i pasienter behandlet med FOLFOX eller XELOX regime som førstelinje kjemoterapi ble analysert, tilsvarende forbehandling formalinfiksert parafin-embedded tumorvev ble brukt for å oppdage pol η protein uttrykk ved immunhistokjemi. Forholdet mellom pol η protein uttrykk og kliniske funksjoner og utfallet av disse pasientene ble analysert.
Resultater
En positiv lineær sammenheng mellom pol η protein uttrykk og 48 h IC50 verdier av oksaliplatin i fire mage kreft cellelinjer ble observert. Positivitet fra pol η protein uttrykk var sterkt assosiert med dårlig behandlingsrespons, samt kortere overlevelse ved begge univariate (8 versus 14 måneder; P < 0,001) og multivariate (hazard ratio, 4,555, 95% konfidensintervall, 2,461 til 8,429; P <. 0.001) analyse i åtti metastatisk adenokarsinom i ventrikkelen
Konklusjoner
Vår studie viser at polη er en prediktiv faktor av behandlingsrespons og overlevelse av metastatisk adenokarsinom i pasienter behandlet med FOLFOX eller XELOX som førstelinje kjemoterapi. Derfor bekrefter verdien av polη i studier med prospektive design er obligatorisk.
Bakgrunn
Magekreft er den fjerde vanligste kreft hele verden, med 603,003 nye tilfeller blant menn og 330,290 nye tilfeller blant kvinner per år [1]. Det er den nest vanligste årsaken til kreftrelaterte dødsfall (700.000 dødsfall årlig), med nesten to tredjedeler av tilfellene forekommer i utviklingsland og 42% i Kina alene [2]. Kirurgi er fortsatt den viktigste potensielle metode for å kurere sykdommen; men vil ca 84% av magekreftpasienter utvikle seg til å bli en avansert sykdom, med 30% av lokalavansert tilfeller, 30% metastatisk sykdom ved diagnose, og 24% tilbakefall sykdommer [3]. De litteratur viste at median overlevelse var bare 3-4 måneder blant avanserte magekreftpasienter uten kjemoterapi. Den nye generasjon av kjemoterapeutiske midler, så som Oksaliplatin kan forlenge overlevelsen i avansert magekreft til å være 10 til 12 måneder; dessuten kan kjemoterapi også forbedre livskvaliteten [4-12]. Terapeutisk effekt avhenger i hovedsak av responsen av legemidler til svulst i førstelinje kjemoterapi, fordi så langt bare en liten fase III studie med 120 tilfeller viste en beskjeden overlevelsesgevinst fra irinotecan monoterapi i løpet av støttebehandling alene [13]. Dessverre, på grunn av resistens, bare 30-50% responsrater kan oppnås selv om forvalta ny generasjon stoffer som docetaxel, oksaliplatin, kapecitabin, irinotecan, S1, etc til avansert mage kreftpasienter som førstelinjebehandling [3]. Det betyr at minst 50% av pasientene må gjennomgå ineffektiv behandling, noe som ikke bare redusere pasientenes livskvalitet, men også øke den økonomiske byrde. Så hvordan å forutsi respons på kjemoterapi agenter i magekreft er en svært viktig vitenskapelig problem.
Oxaliplatin er tredje generasjon platina, spiller en viktig rolle i kjemoterapi for gastrointestinal kreft. Oksaliplatinbasert kombinasjonsregime som oksaliplatin pluss 5-FU eller 5-FU-lignende stoffet har vist seg å være aktiv i ca 40-50% av avansert mage kreftpasienter [14-16]. Oksaliplatin og cisplatin dele lignende mekanisme, og føre til mono-addukter og intra-strand eller inter-strand kryssbindinger i dobbel DNA-spiralen som alvorlig blokkere DNA syntese [17-19]. Når dette skjer, kan noen veier av DNA-skade reparasjon slå på, inkludert nucleotide excision reparasjon (NER), mismatch reparasjon (MR), homolog rekombinasjon (HR), syntese translesion DNA (TLS) [20]. Disse adduktpartiklene reparasjoner oppstår primært gjennom NER [21]. TLS er en annen alternativ måte å reparere disse lesjoner, som hovedsakelig utføres av DNA-polymerase η [22]. Polymeraseη (Polη), en av lesjon reproduserende enzymer, inneholder den korrekte nukleotidsekvens i løpet av lesjoner slik som et platina addukt av TLS og fortsetter kjedeforlengelse, mens klassiske pols kan ikke [23]. Polη har den høyeste effekten av omgåelsen Pt-GG intra-strand diadducts forårsaket av platina blant disse lesjon reproduserende enzymer, med begrenset troskap [23, 24]. Nyere forsøk har vist at fravær av polη resultater i en statistisk signifikant forbedring i cisplatin følsomhet når man sammenligner polη-null Xeroderma pigmentosum-variant humane fibroblaster med polη-uttrykke seg [25]. Denne forbedringen er også observert når cellene ble behandlet med carboplatin og oksaliplatin [25]. Nyere data viser at polη mRNA nivå negativt korrelert med cisplatin følsomhet av ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) cellelinjer [26].
I denne studien, vi rapporterer for første gang forholdet mellom polη protein uttrykk og oksaliplatin følsomhet av magekreft cellelinjer og betydningen av at forutsi behandlingsrespons og overlevelse av magekreft med pasienter behandlet med oksaliplatin kjemoterapi.
Materiale og metode
celle~~POS=TRUNC linjer~~POS=HEADCOMP
ventrikkelkreftstudien cellelinjer, inkludert SGC7901 , AGS, MKN45, og MGC803, ble donert av professor Libing Song fra State Key Laboratory of Oncology i Sør-Kina (Cancer Center of Sun ennå-sen-universitetet). Alle cellelinjer ble holdt i RPMI 1640 (Gibco) supplementert med 10% føtalt bovint serum (Gibco), med unntak av MKN 45 med 20% føtalt bovint serum.
Pasienter og prøver
Pasienter i den kliniske database med kjemoterapi naive , histologisk påvist metastatisk avansert magekreft ble inkludert i studien. Alle pasientene måtte motta FOLFOX (fluorouracil, folinsyre og oksaliplatin) eller XELOX (kapecitabin og oksaliplatin) regime som førstelinje kjemoterapi ved Cancer Center of Sun Yat-sen-universitetet, og formalinfiksert parafin-embedded forbehandling prøvene under gastroscope biopsier eller palliativ operasjon ble oppnådd. Histopatologiske egenskaper ble bekreftet ved blindet gjennomgang av de opprinnelige patologi lysbilder. Den TNM-klassifikasjon ble brukt for patologisk staging, og Verdens helseorganisasjon klassifiseringen ble brukt for patologiske gradering. Andre inklusjonskriteriene inkluderte alder mellom 18-80, Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) funksjonsstatus på 2 eller mindre, andre linje kjemoterapi eller ikke, ingen strålebehandling. Alle pasienter forutsatt skriftlig informert samtykke; vi innhentet separat samtykke til bruk av prøver. Studier godkjenning er innhentet fra uavhengige etiske komiteer på Cancer Center of Sun Yat-Sen University. Studien ble gjennomført i henhold til de etiske standardene i World Medical Association Helsinkideklarasjonen.
Oppfølging og evaluering
Pasientene ble fulgt opp per telefon eller brev kommunikasjon gang hvert år for totalt 4 år. Total overlevelse ble definert som tiden fra dato for bekreftet diagnose til død og sensurert på datoen for siste kontakt for en gjenlevende pasient. Sykdom respons ble evaluert i henhold til de Response evalueringskriterier i solide svulster (RECIST kriterier) [27].
Cytotoksisitetsassayer
Cell veksthemming ble bestemt av 3- (4,5-2-yl) -2 , 5-difenyltetrazoliumbromid assay (MTT analyse). I korthet ble cellene sådd ut i 96-brønners plater og tillatt å feste over natten. Etter 48 timers medikament inkubering ved forskjellige konsentrasjoner (37 ° C), MTT-reagens (5 mg /ml, 20 ul /brønn) ble tilsatt til hver brønn og inkubert i ytterligere 4 timer. Platene ble deretter sentrifugert (1500 g, 5 minutter), og supernatanten ble fjernet. Cellepelletene ble oppløst i 200 pl DMSO. Absorbansen ble bestemt ved anvendelse Modell 550 Microplate Reader (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) ved en bølgelengde på 570 nm, med bakgrunn subtraksjon ved en bølgelengde på 630 nm. Alle forsøk ble utført in triplo. Den konsentrasjon som er nødvendig for å inhibere cellevekst med 50% (IC50) ble beregnet fra overlevelseskurver ved hjelp av Bliss metoden [28].
Western-blotting
Cellene ble vasket med is-kald fosfatbuffer saltvann og høstet i prøvetakings buffer [ ,,,0],62,5 mmol /L Tris-HCl (pH 6,8), 2% SDS, 10% glycerol og 5% 2-h-merkaptoetanol]. Proteinkonsentrasjonen ble bestemt ved Bradford-analyse (Bio-Rad Laboratories). Like mengder av proteiner ble påført på 7,5% polyakrylamid SDS-geler (SDS-PAGE), separert elektroforetisk og overført på polyvinyliden-fluorid-membraner. Etter blokkert i 5% ikke-fettholdig melk i TBST-buffer (10 mmol /liter Tris-HCl, 150 mmol /l NaCl og 0,1% Tween 20, pH 8,0) i 1 time ved romtemperatur, ble membranen inkubert med anti-polη kanin-antistoff (1: 400; Abcam). Polη ekspresjon ble påvist med pepperrot-peroksidase-konjugert geite-anti-kanin-IgG og forsterket kjemiluminescens. Anti-α-tubulin antistoff ble brukt som lasting kontroll.
ImageJ programvare fra National Institutes of Health (NIH) ble benyttet for å kvantifisere protein.
Immunohistochemistry
Immunhistokjemisk (IHC) analyse ble gjort for å påvise polηprotein uttrykk i 80 menneskelige mage kreft vev. Kort sagt ble vevssnittene deparaffinized i xylen ved 37 ° C i 20 minutter og rehydrert. Endogen peroksyd ble blokkert ved inkubering av seksjoner med 3% hydrogenperoksid i metanol i 20 minutter ved 37 ° C. Deretter ble seksjonene senkes ned i 10 mM citratbuffer (pH 6,0) og mikrobølgebehandlet i antigen-henting, etterfulgt av inkubasjon med kanin anti- polη (1: 100; Abcam) over natten ved 4 ° C. Etter vasking, ble vevssnitt behandlet med pepperrot peroksidase-merket sekundært antistoff i 30 minutter. Seksjonene ble utviklet med diaminobenzidintetrahydroklorid (DAB) og kontra med hematoksylin.
Analyse av immunhistokjemi i vår studie ble utført av to uavhengige observatører basert på hvor stor andel av positivt fargede tumorceller. Dersom det er forskjell mellom disse to observatører ble disse slides reinvestigated av begge undersøkere ved hjelp av en mangehodet mikroskop. Tumorer med mer enn 5% av POLη-positive cancerceller ble betraktet som positive (nucleus farging), også negative.
Statistisk analyse
mottaker som opererer karakteristikk (ROC) kurve analyse og Fishers eksakte test ble utført for å velge IHC Pol -positivt verdi med høyeste nøyaktighet. 2 × 2 bord ble konstruert givende sensitivitet, spesifisitet, positiv og negativ prediktiv verdi, og nøyaktighet ble beregnet som andel av sanne positive og sanne negative pasienter ut av hele pasienter. Alle statistiske analyser ble utført av SPSS 15.0 statistisk programpakke (SPSS Inc, Chicago, IL, USA). P-verdi < 0,05 ble ansett for å være statistisk signifikant. Kaplan-Meier analyse med log-rank test ble brukt for univariate analyser. Variabler som viser en trend for tilknytning til overlevelse (P < 0,05) ble valgt for inkludering i den endelige multivariate Cox modell. Forholdet mellom polη uttrykk og clinicopathologic egenskaper ble undersøkt av en kji-kvadrat test og Fishers eksakte tester.
Resultater
Polη uttrykk korrelerer med oksaliplatin følsomhet av magekreft cellelinjer
Oxaliplatin følsomheten fire mage cellelinjer ( SGC7901, AGS, MKN45, og MGC803) ble påvist ved MTT-analysen beskrevet ovenfor. Endogen polη protein ekspresjon av fire cellelinjer ble sammenlignet med hverandre ved western blotting og halvparten av maksimal hemmende konsentrasjon (IC50) verdier av oxaliplatin-celler ble vist i figur 1. Betydelig og positiv korrelasjon ble observert, som vist i figur 2 sammenlignet polη protein uttrykk med IC50 verdier av oksaliplatin. Figur 1 Ekspresjon analyse av POL η protein i magecancercellelinjer ved western blotting og 48 h IC50-verdier av oksaliplatin til mage kreftceller (pmol /L).
Figur 2 Korrelasjon mellom POL η ekspresjon og IC50 av oxaliplatin for mage-cellene .
Pasient egenskaper
Åtti pasienter fra januar 2005 og i juli 2009 ble retrospektivt analysert. Pasientene hadde en median alder av 54 (range, 26,0 til 79,0), med 49 hanner og 31 hunner. Andre kliniske kjennetegn ble oppsummert i tabell 1. responsrate (CR + PR) med førstelinje XELOX eller FOLFOX kjemoterapi var 47,5%, klinisk nytterate (CR + PR + SD) var 77,5%. En del av disse pasientene (23/80) hadde andrelinje chemotherapy.Table 1 Pasientkarakteristika (N = 80)
karakteristisk
No. av pasientene
%
Alder (år)
Median
54,0
Range
26,0 til 79,0
Sex
Mann fra 49
61,3
Kvinne
31
38,7
ECOG funksjonsstatus
0
36
45,0
1 42
52,5
2
2
2,5
Primære nettsider
Cardia
21
26,3
Body
18
22,5
antrum /pylorus
41
51.2
metastaser
Liver
26
32,5
Lung
21
26,3
peritoneum
19
23,8
Andre
14
17,4
Pathologic differensiering N0
G1
2
2,5
G2
26
32,5
G3
52
65,0
behandlingsrespons (første linje)
CR
2
2,5
PR
36
45,0
SD
24
30,0
PD
18
22,5
andre nett chemotherary diett
BSC
57
71,3
FOLFIRI
6
7,5
XELIRI
8
10,0
DX
6
7,5
TP
3
3,7
CR, komplett respons; PR, delvis respons; SD, stabil sykdom; PD, progresjon sykdom,
BSC, best supportive care; FOLFIRI, 5-fluracil pluss folinsyre pluss irinotecan; XELIRI, kapecitabin pluss irinotecan; DX, docitaxel + kapecitabin; TP, paclitaxel pluss cisplatin.
Kriteriene som svulstvev med mer enn 5% av Polη-positive kreftceller ble definert som IHC-positive har høyest nøyaktighet i å forutsi klinisk nytte av første linje kjemoterapi
Tumor vev av åtti metastatisk magekreftpasienter behandlet med FOLFOX eller XELOX diett ble anvendt for å detektere polη proteinekspresjon ved Immunhistokjemi (figur 3). På grunn av at andelen av nucleus-farging tumorceller i alle tilfeller var ikke mer enn 10%, prøvde vi å velge IHC Polη-positiv verdi med høyest mulig nøyaktighet for å forutsi klinisk nytte av første linje kjemoterapi. Vi definerte ni IHC-positiv verdi: ≥ 1%, ≥ 2%, ≥ 3%, ≥ 4%, ≥ 5%, ≥ 6%, ≥ 7%, ≥ 8%, ≥ 9%, og bygget ni 2 × 2 bord. Tabell 2 er vist som et eksempel. Følsomhet, spesifisitet, positiv og negativ prediktiv verdi, og nøyaktighet ble beregnet og brukt til å trekke ROC kurve. Som vist i tabell 3 og figur 4 avskåret verdi ≥ 5%, har de høyeste nøyaktighet (88,8%). Slik at tumorer med mer enn 5% av POLη-positive cancerceller ble betraktet som positive (nucleus farging), også negative. Figur 3 Uttrykket av POLη protein i avansert magekreft som undersøkes av immunhistokjemi. A. negativt bilde ekspresjon i tumorvevet (x 400). B. POLη protein påvises i kjernen av magekreft celle (× 400).
Tabell 2 DNA polymerase η protein uttrykk og klinisk behandlingsrespons

klinisk svikt
klinisk nytte
Totalt tilfeller
Pol η (+)
16
7
23
Pol η ( -)
2
55
57
Totalt tilfeller
18
62
80
≥ 5% Polη uttrykk i tumorceller definert som positiv
Table. 3 Nøyaktighet, sensitivitet, spesifisitet, positiv prediktiv verdi og negativ prediktiv verdi i henhold til Polη IHC telle prosent i å forutsi kjemoterapi respons til FOLFOX eller XELOX regime
Tumor celle positiv prosent, kutte off

Specificity

Sensitivity

PPV

NPV

Accuracy

1%
0.419
0.889
0.308
0.929
0.525
2%
0.500
0.889
0.340
0.940
0.588
3%
0.645
0.889
0.421
0.952
0.700
4%
0.823
0.889
0.593
0.962
0.838
5%
0.887
0.889
0.696
0.965
0.888
6%
0.887
0.778
0.667
0.932
0.863
7%
0.978
0.667
0.705
0.904
0.863
8%
0
0.389
1.000
0.849
0.863
9%
0
0.111
1.000
0.795
0.800
PPV, positiv prediktiv verdi; NPV, negativ prediktiv verdi.
Figur 4 Receiver opererer karakteristikk av Polη IHC telle forutsi kjemoterapi respons til FOLFOX eller XELOX regime.
Forholdet mellom polη uttrykk med kliniske kjennetegn magekreft med spredning
Som vist i Tabell 4 bare 23 av 80 tilfeller (28,75%) hadde polη protein positivt uttrykk (≥ 5% polη-positive kreftceller), 16 av de 23 positive tilfeller (69,56%) ikke klarte å behandling, i motsetning til bare 2 av 57 negative tilfeller (3,51%) hadde kommet sykdom etter FOLFOX eller XELOX kjemoterapi. Polη uttrykk sterkt korrelert med behandlingsrespons til oksaliplatinbasert kjemoterapi av magekreft med spredning (P < 0,001), mens det ikke er forbundet med alder, kjønn, primære områder, metastaser eller patologisk differensiering levels.Table 4 Sammenheng mellom POL η uttrykk og clinicopathologic karakteristikker av magekreftpasienter
karakteristisk
POLη
χ2 test
P-verdi

Fishers test
P-verdi

Positiv product: (n = 23)
Negativ product: (n = 57)



Age (y)
< 60
16
37
0,690
0,797
≥ 60
7
20
Kjønn
Mann fra 14
35
0,695
1,000
Kvinnelige
9
22
Primære nettsider
Cardia
10
11
0,084
0,102
Body
4
14
antrum /pylorus
9
32
metastaser
Liver
11
15
0,247
0,269
Lung
5
16
peritoneum
3
16
Andre
4
10
Pathologic differensiering
G1
2
0
0,068
0,107
G2
6
20
G3
15
37
behandlingsrespons
CR + PR + SD
7
55
< 0.001
< 0.001
PD
16
2
CR, komplett respons; PR, delvis respons; SD, stabil sykdom; Spearman korrelasjonsanalyse PD, progresjon sykdom.
Ble videre gjort for å bekrefte sammenhengen mellom polη uttrykk og clinicopathologic funksjoner. Pearson beredskap koeffisient vist at polηexpression nivåene var signifikant relatert til behandlingsrespons (P < 0,001)., På samme måte, ble ingen signifikante sammenhenger med andre faktorer som oppnås (data ikke vist)
Forholdet mellom polη uttrykk og overlevelse av magekreft med spredning
Kaplan-Meier univariate overlevelsesanalyse viste at den positive uttrykk for polη i tumorceller og dårlig behandlingsrespons var signifikant assosiert med kortere overlevelse. Median overlevelsestid for polη positive og negative tilfeller var henholdsvis 8 og 14 måneder, som vist i figur 5 (log rank, P < 0,001). Multivariat overlevelsesanalyse (Cox regresjonsmodellen) avslørte at ekspresjonen av polη var uavhengige prognostiske faktorer. Den 95,0% konfidensintervall (KI) for relativ risiko var 2,461 til 8,429 (tabell 5). Disse resultatene indikerte at ekspresjonen av polη i tumorvev forutsagte kortere overlevelse. Ingen sammenheng ble observert mellom overlevelse og resten clinicopathological parametere som alder, kjønn, primære svulst nettsteder, patologisk differensiering og metastatisk sites.Table 5 multivariat analyse av total overlevelse i gastrisk karsinom
Faktorer Book Kjennetegn
Hazard ratio
95% KI
P-verdi

Ugunstig
Gunstige



Age
≥ 60
< 60
0,956
0,570 til 1,602
0,863
Histologisk klasse
Dårlig
Vel /moderat
1,428
0,861 til 2,369
0,168
POL η
positiv
negative
4,555
2,461 til 8,429
< 0.001
CI, konfidensintervall.
Figur 5 Kaplan-Meier-kurver med univariat analyse (log-rank test) for pasienter med negativ POLη uttrykk versus positiv POLη uttrykk svulster.
Diskusjon
studien delvis avslørte rollen DNA polymeraseη som en DNA-reparasjon protein i magekreft ved å registrere sitt uttrykk i fire mage kreft cellelinjer og 80 pasienter med metastatisk adenokarsinom i ventrikkel som hadde fått FOLFOX eller XELOX som første linje kjemoterapi. Resultatene viste at ekspresjonsnivået av polη i tumorcellelinjer var korrelert med følsomheten av oxaliplatin (figur 2). For svulstvevet, den positive uttrykk bare skjedde i 28.75% tilfeller (23 av 80), og uttrykket var beskjeden. Men sterk korrelasjon ble funnet mellom polη uttrykk og behandlingsrespons samt overlevelse. Alle resultatene viste at polη positivitet var en indikator for dårlig behandlingsrespons og kortere overlevelse hos pasienter med innstillingene ovenfor.
DNA polymeraseη er kodet av POLH genet som er en av de 150 menneskelige DNA reparasjonsgener, som frafall resultater i Xeroderma pigmentosum variant (XP-V) syndrom, som åpenbarer svært følsomhet for UV-stråling, og en trend å utvikle hudkreft [29-31]. Polη er en viktig lesjon reproduserende enzym som reproduserer over pyrimidin dimer introdusert av UV-stråling, unngå høy genmutasjon [32]. I tillegg til å pyrimidin-dimerer, og polη vist seg å replikere på tvers av cisplatin tverrbundne intrakjede GG sider [33]. Noen forskere viste at polη uttrykk var korrelert med følsomhet for cisplatin eller oksaliplatin i XP-V humane fibroblaster celle og lungecellelinjer, og polη syntes å være et behandlingsrespons prediktiv markør i NSCLC pasienter med cisplatin-basert kjemoterapi [26, 27] .
Mindre er kjent om rollen polη i magekreft. Det er den første studien som oppdager sensitiviteten av oksaliplatin i disse fire mage carcinom cellelinjer (SGC7901, AGS, MKN45, og MGC803) ved MTT-analyse og protein uttrykk ved western blotting. Vi har funnet en vesentlig lineært forhold mellom dem. Vår studie var til en viss grad i samsvar med observasjon i lungekreft cellelinjer av Paolo Ceppi et al, men hva de oppdaget var polη mRNA nivå og cisplatin følsomhet [27].
Da vi restrospectively analysert uttrykket av polη protein i åtti metastatisk avanserte magekreftpasienter som fikk FOLFOX eller XELOX som kjemoterapi. Vi først observert at andelen av polη-flekker tumorceller i alle 80 tilfeller var ikke mer enn 10%, så vi definert ≥5% som IHC positiv i henhold til den nøyaktighet å forutsi klinisk nytte med XELOX eller FOLFOX kjemoterapi. Med denne standarden, bare 23 pasienter hadde positive uttrykk, med 7 av 62 kliniske stønadssaker (CR + PR + SD) fra cellegift og 16 av 18 PD tilfeller. Uttrykket forholdet mellom klinisk nytte gruppe (7/62, 11,3%) og PD-gruppen (16/18, 88,9%) var signifikant forskjellig (P < 0,001). Dette indikerte at Polη positivitet kan forutsi ineffektiv kjemoterapi med XELOX eller FOLFOX regime. Resultatet var i samsvar med vår studie i celler som Polη uttrykk negativt korrelert med oksaliplatin følsomhet av mage kreft cellelinjer.
Vi fant en signifikant overlevelsesgevinst i polη negative pasienter. Denne fordelen trolig kom fra effektiv behandling av oksaliplatin, gitt at polη var sterkt korrelert med behandlingsrespons. Det er velkjent at effektiv kjemoterapi vil forbedre livskvaliteten til mage kreftpasienter og bedre overlevelse; vår undersøkelse kan bidra til å forutsi behandlingsrespons av oksaliplatinbasert kjemoterapi og overlevelse, og dermed unngå unødvendig behandling i begynnelsen.
Det er flere begrensninger for vår studie. For det første er dette en retrospektiv studie med et lite antall pasienter. I den forhåndsinnstilte studien, ble ingen signifikant sammenheng mellom polη uttrykk og alder, kjønn, primære svulst nettsteder, metastaser eller patologisk differensiering innhentet på grunnlag av slike tilfeller nummer. Det er mulig å få signifikante resultater i noen clinicopathologic karakteristikker som primære områder eller patologisk differensiering (P-verdi nær 0,05), hvis med nok pasienter. Derfor enlargeing saksnummer og utføre prospektive studier er obligatorisk. For det andre, fordi testen nøyaktighet ble beregnet ved hjelp av kriteriene som er definert av ROC kurve analyse, våre resultater nødvendig validering i en uavhengig kohort. For det tredje uttrykk for polη er forholdsvis lav i magekreft, på grunn av subjektivitet, kan feil av IHC telling bli større, noe som kan påvirke følsomhet og spesifisitet når forutsi behandlingsrespons, slik at mer nøyaktig metode er nødvendig. Forth, er det velkjent at platina motstand er veldig komplisert, så polη, som en enkelt parameter, er vanskelig å forutsi behandlingsrespons hos en nøyaktig måte.
Til tross for begrensninger, er vår studie en av de få forsøk på å definere kriterier for in vivo kjemosensitivitet av oksaliplatin regime som inneholder bruker klinisk respons som referansestandard. Det kan være en effektiv og kostnadsbesparende metode for å forutsi behandlingsrespons.
Konklusjon
Konklusjonen denne studien viste at polη er en signifikant prediktor av behandlingsrespons hos pasienter med magekreft med spredning får kjemoterapi av FOLFOX eller XELOX . En slik markør kan hjelpe klinikere til å velge den optimale klinisk strategi for pasienter med avansert magekreft. Videre er den multivariate overlevelsesanalyse avslørte at ekspresjonen av polη var uavhengige prognostiske faktorer. Funnene må bekreftes i en større prospektiv studie før programmet i klinisk praksis.
Merknader
Kai-yuan Teng, Miao-Zhen Qiu bidratt likt til dette arbeidet.
Forkortelser
GG :
guanin-guanin
CR:
fullstendig respons
DNA:
deoksyribonukleinsyre


FOLFOX:
fluorouracil, folinsyre og oksaliplatin
HR:
homolog rekombinasjon
mRNA:
messenger ribonukleinsyre
IC50:
halv hemmende konsentrasjon
IHC:
immunhistokjemi


MMR:
mismatch reparasjon
WB:
western blotting
MTT analysen:
3- (4,5-2-yl) -2,5-difenyltetrazoliumbromid analysen
NER:
nucleotide Eksisjon Repair

OS:
total overlevelse
PD:
progresjon sykdom
Pol η:
polymerase eta
PR:
delvis respons
SD:
stabil sykdom
Pt:
platina
ROC:
mottaker drift karakteristikk
TLS:
translesion syntese


XELOX:
kapecitabin og oksaliplatin
bilder XPV.
xeroderma pigmentosum variant
bilder Erklæringer
Takk
Vi takker de ansatte ved Institutt for medisinsk onkologi ved Sun Yat-sen-universitetet Cancer Center for deres forslag og hjelp
Gi støtte. Foundation of China stipend National Natural Science 30672408, Guangzhou Bureau of Science and Technology stipend 2006Z3-E0041 og Sun Yat-sen-universitetet 985 Program Initiation Fund (Kina).
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder.

• Vurderer en datamaskin hjelpemiddel for å vurdere magesymptomer (ECASS):.? Studieprotokoll for en randomisert kontrollert trial
• Påvisning av carcinoembryonic antigen messenger RNA i blodet ved hjelp av kvantitativ real-time revers transkriptase-polymerase chain reaction å forutsi tilbakefall av mage adenocarcinoma