DNS polymeraseη fehérje expresszió jósolja terápiás válasz és a túlélés metasztatikus gyomor adenokarcinóma kezelt betegek oxaliplatinalapú chemotherapy

DNS polymeraseη fehérje expresszió jósolja terápiás válasz és a túlélés metasztatikus gyomor adenokarcinóma kezelt betegek oxaliplatin-alapú kemoterápiával katalógusa Abstract Background katalógusa
DNS polimeráz η (POL η) képes megkerülve DNS adduktok által termelt ciszplatinnal vagy oxaliplatin, és a kapcsolódó celluláris tolerancia platina. Korábbi tanulmányok azt mutatták, hogy a hibás pol η fokozta a ciszplatin vagy oxaliplatin érzékenység bizonyos sejtvonalakban. A cél a jelenlegi vizsgálata volt a szerepe a pol η protein expresszió metasztatikus gyomor adenokarcinóma. Katalógusa módszerek katalógusa Négy gyomor adenokarcinóma sejtvonalak választottunk, hogy vizsgálja meg a kapcsolat a pol η fehérje expresszióját és oxaliplatin érzékenységről Western blot és MTT assay. Nyolcvan metasztatikus gyomor adenokarcinóma kezelt betegek FOLFOX vagy XELOX rend elsővonalbeli kemoterápia elemezték, megfelelő előkezelés formalin-fixált, paraffinba ágyazott tumor szöveteket kimutatására használták pol η fehérje expresszióját immunhisztokémiai. Közötti kapcsolat pol η fehérje expresszió és a klinikai jellemzők és eredményét ezen betegek elemezték. Katalógusa Eredmények katalógusa pozitív lineáris kapcsolat közötti pol η fehérje expressziója és 48 óra IC50 értékei oxaliplatin négy gyomor rákos sejtvonalak volt megfigyelhető. Pozitivitása pol η fehérje expresszió szoros összefüggést mutatott a rossz terápiás válasz, valamint rövidebb túlélési mind egyváltozós (8 vs. 14 hónap; < 0,001) és többváltozós (kockázati arány, 4,555; 95% konfidencia intervallum, 2,461-8,429; P < 0,001) elemzés nyolcvan metasztatikus gyomor adenokarcinóma betegek. katalógusa Következtetések katalógusa Vizsgálatunk azt mutatja, hogy polη prediktív tényező a terápiás válasz és a túlélés metasztatikus gyomor adenokarcinóma FOLFOX kezelést kapott betegek vagy XELOX elsővonalbeli kemoterápiát. Ezért megerősíti az értéke polη a vizsgálatok leendő design kötelező. Katalógusa Háttér katalógusa Gyomorrák a negyedik leggyakoribb daganat világszerte, 603.003 új esetet és a férfiak körében 330.290 új esetet a nők körében évente [1]. Ez a második leggyakoribb oka a rák okozta halál (700.000 ember halálát okozza évente), közel kétharmada az esetek elsősorban a fejlődő országokban, és 42% -ban egyedül Kínában [2]. Sebészet továbbra is a lehetséges legnagyobb módszerrel gyógyítani a betegséget; azonban mintegy 84% -a gyomorrákos betegek fog fejlődni, hogy egy előrehaladott betegség, 30% -a, lokálisan előrehaladott esetekben 30% metasztatikus betegségek diagnosztizálására, és 24% kiújulás betegségek [3]. Az irodalmak azt mutatta, hogy az átlagos túlélés csak 3-4 hónap között előrehaladott gyomorrákban szenvedő betegek kemoterápia nélkül. Az új generációs kemoterápiás szerek, mint például a oxaliplatin meghosszabbítja a túlélést az előrehaladott gyomorrák, hogy 10 és 12 hónap; Sőt, kemoterápia is javítja az életminőséget [4-12]. Terápiás hatása nagyban függ a válasz a kábítószerek tumor első vonalbeli kemoterápia, mert eddig csak egy kis fázis III vizsgálat 120 esetben mutatott mérsékelt túlélési előny irinotekán monoterápiával át támogató kezelés önmagában [13]. Sajnos, mivel a gyógyszer-rezisztencia, csak 30-50% -os választ sebességet lehet elérni annak ellenére, adminisztrációjában új generációs gyógyszerek, mint a docetaxel, oxaliplatin, a kapecitabin, irinotekán, S1, stb, hogy előrehaladott gyomorrákos betegek elsővonalbeli kezelésére [3]. Ez azt jelenti, legalább 50% a betegek kell átesniük hatástalan kezelés, ami nem csak csökkenti a betegek életminőségét, hanem növeli a gazdasági terheket. Tehát hogyan megjósolni válasz kemoterápiás szerek gyomorrák nagyon fontos tudományos kérdés.
Oxaliplatin a harmadik generációs platina, alapvető szerepet játszanak a kemoterápiában emésztőrendszeri rák. Az oxaliplatin-alapú kombinációs kezelés, mint oxaliplatin + 5-FU vagy 5-FU-szerű gyógyszer bebizonyosodott, hogy aktívak mintegy 40-50% -a előrehaladott gyomorrákban szenvedő betegek [14-16]. Az oxaliplatin és ciszplatin megosztani a hasonló mechanizmust, és okoz mono-adduktumok és intra-szál vagy inter-szál keresztkötések a kettős DNS-spirál, amely súlyosan blokkolja a DNS szintézist [17-19]. Amikor ez megtörténik, néhány utak DNS sérülés javítására lehet bekapcsolni, beleértve nukleotid kimetszés javítás (NER), mismatch repair (MR), homológ rekombináció (HR), translesion DNS-szintézis (TLS) [20]. Ezek addukt javítások fordul elő elsősorban NER [21]. TLS egy másik alternatív út lehet javítani ezeket a sérüléseket, amelyek főként történik DNS-polimeráz η [22]. Polymeraseη (Polη), az egyik elváltozás másoló enzimek, magában foglalja a megfelelő nukleotid felett sérülések, mint például a platina adduktum TLS és továbbra lánc nyúlása, míg a klasszikus POLS nem [23]. Polη rendelkezik a legmagasabb hatékonyságát megkerülve Pt-GG-n belüli szál diadducts által okozott platina Ezek közül a lézió-replikálódó enzimek, korlátozott hűség [23, 24]. A legújabb kísérletek kimutatták, hogy a hiánya polη eredmények statisztikailag szignifikáns fokozását ciszplatin érzékenység összehasonlításakor polη-null Xeroderma Pigmentosum-variáns humán fibroblasztok polη expresszáló is [25]. Ez a fejlesztés is megfigyelhető, amikor a sejteket kezeltük a karboplatin és az oxaliplatin [25]. A legfrissebb adatok azt mutatják, hogy polη mRNS szint negatívan korrelál a ciszplatinnal érzékenysége nem kissejtes tüdőrák (NSCLC) sejtvonalak [26].
A jelen tanulmányban azt jelenti először a kapcsolatát polη fehérje expresszióját és oxaliplatin érzékenység a gyomorrák sejtvonalak és a jelentősége, hogy az előre terápiás válasz és a túlélés metasztatikus gyomor kezelt daganatos betegekben az oxaliplatin-alapú kemoterápiával. katalógusa anyagok és módszerek katalógusa sejtvonalak
gyomor rákos sejtvonalak, beleértve SGC7901 , AGS, MKN45 és MGC803, adományozott professzor Libing Song állam legfontosabb Laboratórium Onkológia Dél-Kínában (Cancer Center of Sun mégis-szen Egyetem). Az összes sejtvonalat RPMI 1640-ben (Gibco), kiegészítve 10% magzati borjúszérummal (Gibco), kivéve MKN 45 20% magzati szarvasmarha szérumot.
Páciensek és minták
betegeket a mi klinikai adatbázis kemoterápiával naív szövettanilag igazolt áttétes előrehaladott gyomorrák vontunk a vizsgálatba. Minden beteg kap FOLFOX (fluorouracil, leucovorin és oxaliplatin) vagy XELOX (kapecitabin és oxaliplatin) rend elsővonalbeli kemoterápia Cancer Center Szun Jat-szen Egyetemen, és a formalin-fixált, paraffinba ágyazott előkezelés minták alapján gastroszkóppal biopszia vagy palliatív művelet kapunk. Kórszövettani jellemzőit is megerősítette vak vizsgálatát az eredeti patológia diák. A TNM osztályozás használták patológiai staging, és az Egészségügyi Világszervezet besorolása használták patológiai osztályozás. Bevonás további kritériumai az életkor között 18-80, Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) teljesítmény státusz 2 vagy annál kevesebb, a második vonalbeli kemoterápia, akár nem, sugárkezelés. Minden beteg írásos beleegyezését adta; kaptunk külön hozzájárulás felhasználása példányok. Tanulmányi jóváhagyást nyert független etikai bizottságok Cancer Center Szun Jat-szen Egyetemen. A tanulmány szerint vállalt etikai normák a World Medical Association a Helsinki Nyilatkozat. Katalógusa nyomon követése és értékelése katalógusa betegek követése telefonon vagy levélben kommunikációs évente összesen 4 év. A teljes túlélés definíció az idő napjától igazolt diagnózis halálra, és cenzúrázzák időpontjában utolsó kapcsolatot a túlélő betegek. Betegség válasz szerint értékeltük a Response Evaluation Criteria in Solid tumorok (RECIST kritériumok) [27].
Citotoxicitási vizsgálatokat
sejtszaporodás gátlását úgy határoztuk meg, 3- (4,5-dimetil-tiazol-2-il) -2 , 5-difenil-bromid assay (MTT vizsgálat). Röviden, a sejteket szélesztettünk 96 mérőhelyes lemezeken, és éjszakán át hagytuk letapadni. 48 óra elteltével a hatóanyag inkubálás különböző koncentrációkban (37 ° C), az MTT reagenst (5 mg /ml, 20 ul /lyuk) adunk az egyes lyukakhoz, és inkubáljuk további 4 órán át. A lemezeket ezután centrifugáljuk (1500 g, 5 perc), és a felülúszót eltávolítottuk. A sejtüledéket feloldjuk 200 uL DMSO-ban. Az abszorbancia segítségével határoztuk meg a Model 550 Microplate Reader (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) egy 570 nm hullámhosszon, és a háttér levonása hullámhosszon 630 nm-nél. Minden kísérletet három párhuzamosban végeztük. A gátlásához szükséges koncentráció a sejtek növekedését 50% -kal (IC50) kiszámítjuk a túlélési görbék alkalmazásával Bliss módszer [28].
Western blot
sejteket mostuk jéghideg foszfát-puffer sóoldat és betakarított mintavevő puffer [ ,,,0],62,5 mmol /l Tris-HCl (pH = 6,8), 2% SDS, 10% glicerin, 5% 2-H-merkapto-etanol]. A protein koncentrációt határoztuk meg Bradford-vizsgálattal (Bio-Rad Laboratories). Egyenlő mennyiségű fehérjét vittünk fel 7,5% -os poliakrilamid SDS gélen (SDS-PAGE), elektroforetikusan elválasztható, és vittük át polivinilidén fluorid membrán. Miután blokkoltuk 5% zsírmentes tej TBST-pufferben (10 mmol /l Tris-HCI, 150 mmol /l nátrium-klorid és 0,1% Tween-20, pH 8,0) 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a membránt anti-polη nyúl antitesttel (1: 400; ABCAM). Polη expresszió torma peroxidázzal konjugált kecske anti-nyúl IgG-t és a fokozott kemilumineszcencia. Anti-α-tubulin antitestet használtunk a terhelési kontrollként.
ImageJ szoftver a National Institutes of Health (NIH) alkalmaztunk számszerűsíteni fehérje.
Immunhisztokémia
immunhisztokémiai (IHC) elemzést végeztünk kimutatására polηprotein kifejezés 80 humán gyomorrák szöveteket. Röviden, a szöveti metszeteket paraffint xilolban 37 ° C-on 20 percig, és rehidratált. Endogén peroxid által blokkolt inkubálva a metszeteket 3% -os hidrogén-peroxiddal metanolban 20 percen át 37 ° C-on. Ezután a metszeteket merülő 10 mM citrát pufferrel (pH = 6,0), és mikrohullámú térben antigén visszakeresés, majd inkubáltuk nyúl anti polη (1: 100; ABCAM) egy éjszakán át 4 ° C-on. Mosás után, a szöveti metszeteket kezeltük torma-peroxidázzal jelzett szekunder antitest 30 percig. A metszeteket kifejlesztett diaminobenzidin-tetrahidroklorid (DAB) és hematoxilinnel ellenfestettük.
Elemzése immunhisztokémiai mi vizsgálatot végzett két független megfigyelők alapuló aránya a pozitívan festődő tumorsejtek. Ha van különbség a két megfigyelő, ezek metszeteket reinvestigated mindkét nyomozók egy többfejes mikroszkóp. A tumorokat több mint 5% -a POLη-pozitív rákos sejteket pozitívnak tekinthetők (nucleus festés), különben negatív.
Statisztikai analízis
receiver operating characteristic (ROC) görbe analízis és Fisher-féle egzakt tesztet végeztünk, hogy kiválassza IHC Pol -pozitív érték a legnagyobb pontossággal. 2 × 2 asztal került kialakításra hozamú érzékenységét, specificitását, pozitív és negatív prediktív értéke és pontossága számítottuk aránya valódi pozitív és valódi negatív beteg közül egész betegeknél. Minden statisztikai analíziseket az SPSS 15.0 statisztikai programcsomag (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). P érték < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Kaplan-Meier analízis log-rank tesztelés használt egyváltozós elemzések. Változók trend társulhatnak túlélést (p < 0,05) választottak felvétele a végső többváltozós Cox modellben. A kapcsolat a polη a klinikopatológiai jellemzők vizsgáltuk a chi-négyzet próba és a Fisher-tesztet. Katalógusa Eredmények katalógusa Polη expressziója korrelál az oxaliplatin érzékenység a gyomor rákos sejtvonalak
oxaliplatin érzékenységét négy gyomor sejtvonalak ( SGC7901, AGS, MKN45, és MGC803) detektáltunk MTT assay fent leírtak szerint. Endogén polη fehérje expresszióját négy sejtvonalat összehasonlítva egymással Western-blottal, valamint a fél maximális gátló koncentráció (IC50) értékei oxaliplatin sejteket az 1. ábrán látható szignifikáns és pozitív korreláció volt megfigyelhető, amint a 2. ábrán látható, ha összehasonlítjuk polη fehérje expresszió IC50 értékek az oxaliplatin. Ábra 1-expresszió elemzése POL η fehérje gyomor rákos sejtvonalak Western-blottal és 48 óra IC50 értékek az oxaliplatin gyomorrák-sejtek (umol /l).
2. ábra közötti korreláció POL η expressziója és IC50 az oxaliplatin gyomor sejtek .
Betegjellemzők katalógusa nyolcvan beteget 2005 januárjától és 2009 júliusa visszamenőleg elemeztük. A betegek átlagos életkora 54 (tartomány 26,0-79,0), a 49 férfi és 31 nő. Egyéb klinikai jellemzőit az 1. táblázat tartalmazza a válaszadási arány (CR + PR) és az első sorban XELOX- vagy FOLFOX kemoterápia 47,5%, a klinikai haszon (CR + PR + SD) 77,5%. Ezek egy része a betegek (23/80) volt második vonalbeli chemotherapy.Table 1 Betegjellemzők (N = 80) hotelben jellegzetes Matton No. A betegek Matton% Matton Életkor (év) hotelben Medián katalógusa 54,0 katalógusa tartomány katalógusa 26,0-79,0 katalógusa szex katalógusa Férfi katalógusa 49
61,3 fiatal női katalógusa 31 katalógusa 38,7 katalógusa ECOG teljesítmény státusz katalógusa 0 katalógusa 36 katalógusa 45,0 katalógusa 1 katalógusa 42 katalógusa 52,5 katalógusa 2
2 | 2,5 katalógusa Elsődleges oldalak
Cardia
21 katalógusa 26,3 katalógusa Body
18 katalógusa 22,5 katalógusa Antrum /pylorus katalógusa 41 katalógusa 51.2
metasztázisok
Liver katalógusa 26 katalógusa 32,5 katalógusa Lung katalógusa 21 katalógusa 26,3 katalógusa hashártya katalógusa 19 katalógusa 23,8 katalógusa Egyéb
14
17,4 katalógusa kóros differenciálás N0 katalógusa G1 katalógusa 2 | 2,5 katalógusa G2 katalógusa 26 katalógusa 32,5 katalógusa G3 katalógusa 52 katalógusa 65,0 katalógusa terápiás válasz (1. sor) hotelben CR katalógusa 2 | 2,5 katalógusa PR katalógusa 36 katalógusa 45,0 katalógusa SD katalógusa 24 katalógusa 30,0 katalógusa PD katalógusa 18
22,5 katalógusa 2.-line chemotherary rend katalógusa BSC
57 katalógusa 71,3 katalógusa FOLFIRI katalógusa 6 katalógusa 7.5 katalógusa XELIRI
8 katalógusa 10,0 katalógusa DX
6
7,5 katalógusa TP katalógusa 3 katalógusa 3.7 katalógusa CR, teljes válasz; PR, részleges választ; SD, stabil betegség; PD progresszióját betegség
BSC, legjobb támogató kezelés; FOLFIRI, 5-fluracil plusz leukovorinnal irinotekán; XELIRI kapecitabin plusz irinotekán; DX, docitaxel plusz kapecitabin; TP, paclitaxel + cisplatin.
A kritériumok, hogy a daganatos szövet több mint 5% -át Polη-pozitív rákos sejteket úgy definiáljuk, mint IHC pozitív lesz a legmagasabb pontosságot előrejelzésében klinikai előnye első vonalbeli kemoterápia katalógusa daganatszöveteken nyolcvan metasztatikus gyomorrák kezelt betegek FOLFOX vagy XELOX séma kimutatására használták polη fehérje expresszióját Immunhisztokémia (3. ábra). Mivel a százalékos sejtmag-festést tumorsejtek minden esetben nem volt több, mint 10%, megpróbáltuk válassza IHC Polη-pozitív érték a legnagyobb pontossággal megjósolni klinikai előnye első vonalbeli kemoterápia. Meghatároztuk kilenc IHC-pozitív érték: ≥ 1%, ≥ 2%, ≥ 3%, ≥ 4%, ≥ 5%, ≥ 6%, ≥ 7%, ≥ 8%, ≥ 9%, és kialakítani kilenc 2 × 2 táblázat. A 2. táblázat azt mutatta, példaként. Érzékenységét, specificitását, pozitív és negatív prediktív értéke és pontossága kiszámítottuk, és amely felhívja a ROC görbe. Amint azt mutatta, a 3. táblázat és 4. ábra levágta érték ≥ 5% van a legnagyobb pontosságot (88,8%). Tehát daganatok több mint 5% -a POLη-pozitív rákos sejteket pozitívnak tekinthetők (nucleus festés), egyébként negatív. 3. ábra A kifejezés a POLη protein előrehaladott gyomorrákban a vizsgált immunohisztokémiával. A. negatív kifejezés kép a tumor szövetben (× 400). B. POLη protein volt kimutatható a sejtmagban gyomorrák sejt (× 400).
2. táblázat a DNS-polimeráz η fehérje expressziója és a klinikai kezelésre adott válasz

Klinikai hiba
klinikai haszon Matton Összesen esetben Matton Pol η (+) hotelben 16 katalógusa 7 katalógusa 23 katalógusa Pol η ( -) hotelben 2 | 55 katalógusa 57 katalógusa Összesen esetben katalógusa 18 katalógusa 62 katalógusa 80 katalógusa ≥ 5% Polη expressziót a tumorsejtek definiált pozitív. katalógusa táblázat 3. Pontosság, érzékenységét, specificitását, pozitív prediktív értéke, és negatív prediktív érték szerint Polη IHC számlálás százalékos előrejelzésében kemoterápia válaszként FOLFOX vagy XELOX rend katalógusa A tumor sejt pozitív százalék, vágott off

Specificity

Sensitivity

PPV

NPV

Accuracy

1%
0.419
0.889
0.308
0.929
0.525
2%
0.500
0.889
0.340
0.940
0.588
3%
0.645
0.889
0.421
0.952
0.700
4%
0.823
0.889
0.593
0.962
0.838
5%
0.887
0.889
0.696
0.965
0.888
6%
0.887
0.778
0.667
0.932
0.863
7%
0.978
0.667
0.705
0.904
0.863
8%
0
0.389
1.000
0.849
0.863
9%
0
0.111
1.000
0.795
0.800
PPV, pozitív prediktív értéke; NPV, negatív prediktív értéke.
4. ábra Receiver műveleti karakterisztika görbe Polη IHC számolás előrejelzésében kemoterápia válaszként FOLFOX vagy XELOX rend. Katalógusa viszony polη expresszió klinikai jellemzői az áttétes gyomorrák katalógusa Amint az 4. táblázat csak 23 80 esetben (28,75%) volt polη fehérje pozitív expresszió (≥ 5% polη-pozitív rákos sejtek), 16, a 23-pozitív esetek (69,56%) nem a kezelés, ezzel szemben csak 2 az 57 negatív eset (3,51%) volt előrehaladott betegség után FOLFOX vagy XELOX kombinált kemoterápia. Polη kifejezés erősen korrelált a kezelésre adott válasz, hogy az oxaliplatin alapú kemoterápia az áttétes gyomorrák (P < 0,001), mivel nem jár a kor, a nem, az elsődleges helyek, metasztázisok vagy kóros differenciálás levels.Table 4 közötti korreláció POL η kifejezés klinikopatológiai jellemzői gyomorrákos betegek katalógusa jellegzetes Matton POLη Matton χ2 teszt katalógusa P érték katalógusa
Fisher-tesztet katalógusa P érték Matton katalógusa Pozitív katalógusa (n = 23) Matton Negatív katalógusa (n = 57) hotelben
katalógusa katalógusa Életkor (y) hotelben < 60 katalógusa 16 katalógusa 37 katalógusa 0.690 katalógusa 0,797 katalógusa ≥ 60 katalógusa 7 katalógusa 20 katalógusa Gender katalógusa Férfi katalógusa 14 katalógusa 35 katalógusa 0,695
1.000 fiatal női katalógusa 9 katalógusa 22 katalógusa Elsődleges oldalak
Cardia
10 katalógusa 11
0,084 katalógusa 0,102 katalógusa Body katalógusa 4
14 katalógusa Antrum /pylorus katalógusa 9 katalógusa 32 katalógusa metasztázisok
Liver katalógusa 11 katalógusa 15 katalógusa 0.247 katalógusa 0,269 katalógusa Lung katalógusa 5 katalógusa 16
hashártya katalógusa 3 katalógusa 16 katalógusa Egyéb
4 katalógusa 10 katalógusa kóros differenciálás katalógusa G1 katalógusa 2 | 0 katalógusa 0,068
0,107 katalógusa G2 katalógusa 6 katalógusa 20 katalógusa G3 katalógusa 15 katalógusa 37 katalógusa terápiás válasz katalógusa CR + PR + SD katalógusa 7 katalógusa 55
< 0.001 katalógusa < 0.001 katalógusa PD
16 katalógusa 2 | CR, teljes válasz; PR, részleges választ; SD, stabil betegség; PD progresszióját betegség. Katalógusa Spearman korrelációs analízist tovább, hogy igazoljuk az összefüggést polη a klinikopatológiai jellemzők. Pearson vészhelyzeti együttható kimutatták, hogy polηexpression szintek szignifikánsan összefüggött a kezeléssel Reakció (P < 0,001), Hasonlóképpen, nincs szignifikáns korrelációk egyéb tényezőkkel kaptunk (az adatokat nem mutatjuk).
Közötti kapcsolat polη expresszió és a túlélés a metasztatikus gyomorrák
Kaplan-Meier túlélési egyváltozós elemzés kimutatta, hogy a pozitív kifejeződése polη a tumorsejtek és a rossz bánásmód válasz szignifikáns összefüggést mutattak a túlélés szempontjából. A medián túlélési idő a polη pozitív és negatív esetek 8. és 14. hónap, amint az 5. ábrán látható (log-rang, a P < 0,001). Többváltozós túlélési analízis (Cox-féle regressziós modell) kiderült, hogy ez a kifejezés polη független prognosztikai tényezők. A 95,0% -os megbízhatósági intervallum (CI) a relatív kockázat 2,461-8,429 (5. táblázat). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a kifejezés a polη tumorszövetben megjósolt rövidebb túlélést. Nem találtak összefüggést a túlélés és a többi klinikopatológiai paraméterek, mint az életkor, a nem, a primer tumor, a kóros differenciálás és metasztatikus sites.Table 5 többváltozós elemzése a teljes túlélés tekintetében gyomorrák katalógusa tényezők
jellemzői
hazárd
95% CI Matton P érték Matton katalógusa Kedvezőtlen Matton Kedvező Matton katalógusa katalógusa katalógusa Kor
≥ 60 katalógusa < 60 katalógusa 0,956 katalógusa 0,570-1,602 katalógusa 0,863 katalógusa szövettani grade katalógusa rosszul katalógusa Nos /közepesen katalógusa 1,428 katalógusa 0,861-2,369 katalógusa 0,168 katalógusa POL η
pozitív katalógusa negatív katalógusa 4.555 katalógusa 2,461-8,429 katalógusa < 0.001 katalógusa CI, konfidencia intervallum.
5. ábra Kaplan-Meier görbék egyváltozós elemzés (log-rank teszt) negatív betegeknél POLη kifejezés versus pozitív POLη kifejezés daganatok. Katalógusa Megbeszélés katalógusa A jelen tanulmány részben kiderült, a szerepe a DNS polymeraseη a DNS-javító fehérje gyomorrák kimutatásával expresszióját négy gyomorrák sejtvonalakon és 80 beteg, metasztatikus gyomor adenokarcinóma, akik kaptak FOLFOX vagy XELOX, mint az első vonalbeli kemoterápia. Az eredmények azt mutatták, hogy az expressziós szintet polη a tumor sejtvonalak korrelált érzékenysége oxaliplatin (2. ábra). A daganat szövet, a pozitív expressziót csak akkor került sor 28.75% esetben (23-ből 80), és a kifejezés mérsékelt volt. Ugyanakkor az erős korrelációt találtunk polη véleménynyilvánítás és a kezelésre adott válasz, valamint a túlélést. Az összes eredményt igazolták, hogy polη pozitivitás volt egy indikátor szegény terápiás válasz és a rövidebb túlélés a fenti beállítások.
DNS polymeraseη van kódolva POLH gén, amely egyike a 150 emberi DNS-javító gének, melynek disszidálás eredményez Xeroderma Pigmentosum variáns (XP-V) szindróma, megnyilvánuló nagyon érzékenység az UV sugárzásnak és egy tendencia, hogy dolgozzon bőrrák [29-31]. Polη fontos lézió-replikálódó enzim, amely replikálja fölött pirimidin dimerek által bevezetett UV-sugárzás, elkerülve a magas génmutáció [32]. Amellett, hogy a pirimidin dimerek, polη kimutatták, hogy szaporodik szerte ciszplatin térhálósított szálon belüli GG oldalak [33]. Egyes kutatások azt mutatták, hogy polη expresszió korrelált érzékenység ciszplatinnal vagy oxaliplatin XP-V humán fibroblasztok sejt és a tüdő sejtvonalak és polη tűnt kezeléssel válasz prediktív marker NSCLC betegek cisplatin-alapú kemoterápia [26, 27] .
kevésbé ismert a szerepe polη gyomorrákban. Ez az első tanulmány, hogy észleli a érzékenysége oxaliplatin e négy gyomor karcinóma sejtvonal (SGC7901, AGS, MKN45, és MGC803) MTT assay és a fehérje expresszióját Western-blottal. Találtunk egy szignifikáns lineáris kapcsolat közöttük. A tanulmány bizonyos mértékig összhangban van azzal a megfigyeléssel tüdőrák sejtvonalak Paolo Ceppi munkatársai, bár amit észlelt voltak polη mRNS szint és ciszplatin érzékenység [27].
Aztán restrospectively elemeztük expresszióját polη fehérje nyolcvan metasztatikus előrehaladott gyomorrákban szenvedő betegek, akik FOLFOX vagy XELOX a kemoterápia. Elsőként megfigyelhető, hogy a százalékos polη-festés tumorsejtek minden 80 esetben nem volt több, mint 10%, így definiált ≥5% -os IHC pozitív szerint a pontosság előrejelzésére klinikai előnyt, XELOX- vagy FOLFOX kemoterápiát. E szabvány csak 23 betegnél pozitív kifejeződése, 7 62-ből klinikai haszon esetben (CR + PR + SD) a kemoterápia és a 16 a 18 PD esetben. Az expressziós arány közötti klinikai haszon Group (7/62, 11,3%) és Pd-csoport (16/18, 88,9%) szignifikánsan eltérő (P < 0,001). Ez azt jelzi, hogy Polη pozitivitás lehet megjósolni hatástalan kemoterápiás XELOX- vagy FOLFOX séma. Az eredmény összhangban van a tanulmány sejtekben Polη kifejezés negatívan korrelál oxaliplatin érzékenység a gyomor rákos sejtvonalak.
Találtunk szignifikáns túlélési előnyt polη negatív betegekben. Ez az előny valószínűleg származott hatékony terápiát oxaliplatin, tekintettel arra, hogy polη erősen korrelál a terápiás hatás. Köztudott, hogy a hatékony kemoterápia növelné életminősége gyomorrák betegek és javítja a túlélést; Vizsgálatunk segíthet megjósolni a kezelésre adott válasz oxaliplatin alapú kemoterápia és a túlélés, így elkerülhető a felesleges kezelés elején. katalógusa számos korlátozások a vizsgálatba. Először is, ez egy retrospektív vizsgálat egy kis számú beteg. A beállított vizsgálatban nem volt szignifikáns összefüggést polη kifejezés és az életkor, a nem, a primer tumor, metasztázisok vagy kóros különbségtétel alapján szerzett az ilyen esetek száma. Ez lehetséges, hogy jelentős eredményeket néhány klinikopatológiai jellemzők, mint az elsődleges helyekről vagy kóros differenciálódás (P érték közel 0,05), ha elegendő betegeknél. Ezért enlargeing az ügyszám és a teljesítő prospektív vizsgálatok kötelező. Másodszor, mert a teszt pontosságát alkalmazásával számítottuk által meghatározott kritériumok ROC görbe analízis, a szükséges eredmények validálása független kohorsz. Harmadszor, a kifejezés polη viszonylag alacsony a gyomorrák miatt szubjektivitás, a hiba IHC számlálás lehetne nagyobb, ami befolyásolhatja az érzékenység és specificitás előrejelzése során a kezelésre adott válasz, így pontosabb módszerre van szükség. Forth, Köztudott, hogy a platina ellenállás nagyon bonyolult, ezért polη, mint egyetlen paraméter, nehéz megjósolni terápia válasz egzakt módon.
Korlátozások ellenére, a tanulmány egyik a néhány próbálkozás, hogy meghatározza kritériumai in vivo kemoszenzitivitás oxaliplatin tartalmazó kezelés, klinikai válasz, mint referencia standard. Ez lehet hatékony és költségtakarékos módszer megjósolni kezelésre reagáltak. Katalógusa Következtetés
Összefoglalva, a jelen vizsgálat igazolta, hogy polη jelentős előrejelzője terápiás válasz volt áttétes betegek gyomorrák kemoterápiában részesülő FOLFOX vagy XELOX . Egy ilyen marker segíthet klinikusok kiválasztani az optimális klinikai stratégia betegek előrehaladott gyomorrák. Sőt, a többváltozós túlélési analízis kimutatta, hogy ez a kifejezés polη független prognosztikai tényezők. Az eredményeket meg kell erősíteni egy nagyobb prospektív vizsgálat előtt alkalmazásuk a klinikai gyakorlatban. Katalógusa megjegyzi katalógusa Kai-yuan Teng, Miao-Zhen Qiu hozzájárult egyaránt ezt a munkát. Katalógusa rövidítések katalógusa GG
guanin-guanin
CR:
teljes válasz
DNS katalógusa dezoxiribonukleinsav katalógusa
katalógusa FOLFOX: katalógusa fluorouracil, leucovorin és oxaliplatin
HR: katalógusa homológ rekombináció
mRNS:
messenger ribonukleinsav
IC 50: katalógusa fél gátló koncentráció
IHC: katalógusa immunhisztokémia katalógusa
katalógusa MMR: katalógusa mismatch repair
WB: katalógusa western blot
MTT assay:
3- (4,5-dimetil-2-il) -2,5-assay
NER: katalógusa nukleotid kimetszése javítása Matton
OS: teljes túlélés katalógusa
PD: katalógusa progresszió betegség
Pol η: katalógusa polimeráz éta
PR: katalógusa részleges választ
SD: katalógusa stabil betegség
Pt:
platina
ROC: katalógusa vevő működési karakterisztika
TLS: katalógusa translesion szintézis katalógusa
katalógusa XELOX: katalógusa kapecitabin és oxaliplatin
XPv: katalógusa xeroderma pigmentózumot változata.
nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás
köszönjük a személyzet tagjai a Department of Medical Oncology a Szun Jat-szen Egyetemen Cancer Center for a javaslatot és segítséget. katalógusa Grant támogatás: Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína támogatás 30672408, Guangzhou Bureau of Science and Technology támogatás 2006Z3-E0041 és Szun Jat-szen Egyetemen 985 Program megindítása Alap (Kína). katalógusa a szerzők eredeti beküldötteknek képeket
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket.

• Kiértékelése a számítógépes támogatás értékelésére gyomorpanaszok (ECASS): vizsgálati protokoll egy randomizált, kontrollált vizsgálatban
• Kimutatása karcinoembrionális antigén hírvivő RNS vérben kvantitatív, valós idejű reverz transzkriptáz polimeráz-láncreakció megjósolni kiújulásának gyomor adenokarcinóma