HER2 uttryck och relevanta kliniskt patologiska funktioner i mag- och matstrupsövergången adenokarcinom i en kinesisk befolkning

HER2 uttryck och relevanta kliniskt patologiska funktioner i mag- och matstrupsövergången adenokarcinom i en kinesisk befolkning Bild Sammanfattning
Bakgrund hotell med varierande immunohistokemi Kriterierna och patientkohorter, HER2-positivitet vid ventrikelcancer (GC) och matstrupsövergången ( GEJ) adenokarcinom har rapporterats med ett brett utbud. Nyligen standardiserade bedömningskriterier för GC och GEJ cancer har etablerats och rekommenderas. I denna studie var frekvensen av HER2 uttryck och förhållandet mellan HER2 uttryck och kliniskt patologiska egenskaper undersöktes i en stor kohort av kinesisk GC och cancerpatienter ġej.
Metoder Review, en totalt 1463 patienter, varav 929 primära GC och 534 primär GEJ adenokarcinom ades efterhand analyseras för HER2 överuttryck av immunohistokemi (IHC). Fluorescens in situ
hybridisering (FISH) analys användes i 308 GCS och gej adenokarcinom fall för att bedöma HER2
genförstärkning.
Resultat
HER2 överuttryck (3+) detekterades i 9,8% av karcinom och mer frekvent hos gej cancerfall i tarm typ, och i brunnen eller måttligt differentierad typ (P
= 0,003, 0,000, och 0,000 respektive). HER2 osäkra (2+) detekterades i 14,4% av fallen. När det gäller de 308 fall som analyserats av FISH, 39 (40, 97,5%) IHC 3+ fall, 11 (av 38, 28,9%) IHC 2+ fall, och tre (230, 1,3%) IHC 1 + /0 fall visade HER2
genamplifiering. En hög överensstämmelse hastighet (98,5%) mellan IHC och FISH visades.
Slutsatser
Cirka 10% av kinesiska patienter med primär GC och GEJ adenokarcinom var HER2-positiva på IHC. HER2 överuttryck var associerad med GEJ plats, tarmcancer subtyp, och väl eller måttligt differentierade karcinom Review, Virtual diabilder
virtuella slide (s) för den här artikeln hittar du här:. Http: //www. Diagnosticpathol nik. diagnomx. eu /vs /1935951199941072.
Nyckelord
HER2 Magcancer matstrupsövergången adenokarcinom Chineses kliniskt patologiska funktioner bakgrund
Magcancer (GC) är den fjärde vanligaste diagnosen cancer och näst vanligaste orsaken till cancerrelaterade dödsfall i världen [1]. Det har föreslagits att incidensen av gastroesofageal korsning (GEJ) adenokarcinom har ökat under de senaste åren [2, 3]. Trots vissa framsteg inom förebyggande och behandling av magcancer, förblir 5-års överlevnad omkring 20% ​​i de flesta delar av världen. HER2 är nu väl erkänt som en nyckelfaktor i utvecklingen av vissa fasta humana tumörer, framför allt i bröstcancer. HER2
genförstärkning och proteinuttryck, som förekommer i 20% till 25% av bröstcancerpatienter, har erkänts som prognostiska och prediktiva markörer för behandling [4]. Flera detektionsmetoder har inrättats för att undersöka HER2
genstatus och proteinuttryck [5-8]. Trastuzumab, en rekombinant monoklonal antikropp inriktning HER2 protein, nu tillämpas inte bara i metastaserande bröstcancerfall utan också för lokala fall som adjuvant terapi [9, 10]. En nyligen genomförd fas III randomiserad studie (ToGA) visade att kombinationsbehandling med trastuzumab och kemoterapi avsevärt förbättrat överlevnaden hos patienter med avancerad GC eller GEJ cancer med HER2 överuttryck [11]. Således, trastuzumab har nyligen godkänts för behandling av metastaserande adenokarcinom i magen och GEJ i många länder [12-17].
Även om många studier har tidigare utvärderat HER2-status i GC, har patientkohorter och bedömningskriterier varierat, vilket resulterar i skillnader i HER2-positivitet som varierar från omkring 4% till 53%, med en median på 18% [18]. Toga studien utvecklat en ny uppsättning av IHC scoring kriterier som grundar sig på studier av Hofmann et al. [19] och fann HER2-positiv (definierad som IHC 3+ eller IHC 2 + /FISH +) tumörer i 16% av metastaserande GC fall. Effekten av trastuzumab för behandling av metastaserande GC med HER2 överuttryck visats i ToGA studien också lovande för resectable HER2-positiv magsäckscancer. Emellertid har få studier utförts för att undersöka frekvensen av HER2-positiva tumörer som bestäms av de nya kriterierna i resektabelt magcancer [20, 21], särskilt i en stor kinesisk kohort. I denna studie var IHC analys enligt standardiserade bedömningskriterier som används för att bedöma förekomsten av HER2-positivitet i primär opererande GC och gej cancerprover i en C9pt >? Förhållandet mellan HER2 överuttryck och genamplifiering undersöktes också i GC och GEJ . adenokarcinom
metoder
Prover Review, en totalt 1,463 patienter med primär GC eller GEJ adenokarcinom, som fick kurativ kirurgi (ingen historia av neoadjuvant kemoterapi) i Cancer Institute & Sjukhus, Kinesiska akademin för medicinska vetenskaper (CICAMS), Beijing, Kina, mellan augusti 2009 och februari 2012, ingick i denna retrospektiva studie. Alla tumörprover fixerades i 10% neutralt buffrat formalin för 24-48 timmar och bäddas in i paraffin, och rutinmässigt diagnostiseras i Department of Pathology, CICAMS, Beijing. Studieprotokollet godkändes av Institutional Review Board (IRB). Patienternas journaler granskades för att få patienternas kliniskt patologiska parametrar, bland annat ålder vid diagnos, kön, tumörplacering, histologiska klassificering och patologisk TNM stadium. Histologisk klassificering bestämdes enligt Världshälsoorganisationen (WHO) klassificering och Lauren klassificering.
Immunohistokemi
Automated IHC utfördes på 4-um tjocka sektioner med hjälp av en automatiserad glid Stainer, Ventana Benchmark XT (Ventana Medical Systems , Tucson, AZ, USA), enligt tillverkarens instruktioner, för Ventana CONFIRM ™ HER2 /neu (4B5) Rabbit monoklonal primär antikropp. HER2 IHC poängsattes med hjälp av scoring system som föreslagits av Hofmann et al. [19] i ToGA kohort av magcancer (ToGA score) och Ruschoff et al. [22] enligt följande: 0, ingen färgning eller membran reaktivitet i < 10% av tumörceller; 1+, svag /knappt märkbar membran reaktivitet i ≥10% av tumörceller (celler är reaktiva endast i en del av deras membran); 2+, svag till måttlig, komplett, basolateral eller lateral membran reaktivitet i ≥10% av tumörceller; och 3+, komplett, basolateral eller lateral membran reaktivitet av stark intensitet i ≥10% av tumörcellerna.
Prover scoring IHC 0 eller IHC 1+ ansågs negativa för HER2 överuttryck, medan prover scoring IHC 3+ ansågs positiva för HER2 överuttryck. Prover scoring IHC 2+ ansågs osäker för HER2-överexpression.
Fluorescens in situ
hybridisering
Fluorescens in situ
hybridisering (FISH) analys genomfördes med PathVysion HER2 DNA-prob kit och förfaranden (Vysis /Abbott, Abbott Park, IL, USA). Kitet innehåller två fluorokrommärkta DNA-sonder, LSI HER2 (märkt med SpectrumOrange) och CEP17 (kromosom 17 uppräkning sond, märkt med SpectrumGreen). Förbehandling utfördes med Paraffin förbehandling Kit (VysisAbbott). HER2 signaler och CEP17 signaler från 20 kärnor av invasiva tumörceller i två olika områden räknades med hjälp av en Zeiss AxioImager M2 epifluorescensmikroskop (Carl Zeiss, Oberkochen, Tyskland) utrustad med ett x 100 oljeimmersionsobjektiv och 4 ', 6'-diamidino -2-fenylindol (DAPI) /Spectrum grön /orange enkla och tredubbla bandpassfilter. HER2 /kromosom 17-förhållanden tolkades enligt följande: a HER2 /CEP17-förhållande högre än 2,2 definierades som amplifiering av HER2
genen, medan ett förhållande < 1,8 definierades som ingen amplifiering av HER2
genen. När förhållandet var mellan 1,8 och 2,2, signaler i ytterligare 20 kärnor räknades och HER2 /CEP17 förhållandet i totalt 40 kärnor bestämdes. När förhållandet var ≥2.0, var det definierat som amplifiering av HER2
genen; annars definierades som ingen amplifiering av HER2
genen.
Statistisk analys
Statistisk analys utfördes med hjälp av chi-två test för att analysera samband mellan HER2-status och kliniskt patologiska parametrar. Ett P
värde mindre än 0,05 ansågs signifikant. Data analyserades med hjälp av SPSS-programmet statistisk programvara för Microsoft Windows (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).
Resultat
HER2 överuttryck och kliniskt patologiska egenskaper Review, en totalt 1,463 patienter utvärderades av IHC analys. Patienternas kliniskt patologiska egenskaper anges i tabell 1. Deras medianålder var 58 år (intervall, 20 till 82 år), med en manlig dominans (75,5%). Av alla patienter, fanns 650 fall (44,4%) av intestinal typ av Lauren klassificering, 564 fall (38,6%) av diffust typ, och 249 fall (17%) av blandad typ. I fråga om tumör plats, cirka två tredjedelar av tumörer var primära gastric cancer (63,5%), och en tredjedel var primär GEJ adenokarcinom (36,5%). Tumörerna var dåligt differentierade i 73,1%, måttligt differentierad i 25,2%, och väl differentierade i 1,7%. Sammantaget de flesta patienter var vid patologiskt stadium T3 (73,4%), med 14,1%, 10%, och 2,5% vid steg T1, T2 och T4, respektive. När det patologiska N scenen, det var en ungefär lika fördelning av patienter N0, N1, N2 eller N3 stadier (28,1%, 16,1%, 20,9%, 34,9%, respektive). Majoriteten av patienterna (97,7%) hade ingen avlägsen metastases.Table en Korrelationen mellan HER2 uttryck status och kliniskt patologiska parametrar
Totalt
HER2
HER2-

HER2-

Uttryck
Equivocal
Negativ
P-värde
Patologisk funktion
n = 1463
n = 143 (%) Review n = 211 (%) Review n = 1109 (%) Review Ålder vid diagnos
0,102
≥60 år
683
80 (11,7) Review 108 (15,8) Review 495 (72,5) Hotel < 60 år
780
63 (8,1) Review 103 (13,2)
614 (78,7) Review Sex
0,344
Man
1104
109 (9,9) Review 171 (15,5) Review 824 (74,6) katalog Kvinna
359
34 (9,5) Review 40 (11,1) Review 285 (79,4) Review tumörlokalisation
0,003
GC
929
65 (7,0) Review 121 (13,0) Review 743 (80,0) katalog GEJ
534
78 (14,6) Review 90 (16,9) Review 366 (68,5) Review Tumör subtyp
(Lauren klassificering ) katalog 0.000
Intestinal
650
109 (16,8) Review 111 (17,1) Review 430 (66,2) Review Diffusa
564
13 (2,3)
63 (11,2) Review 488 (86,5) Review Mixed
249
21 (8,4) Review 37 (14,9) Review 191 (76,7) Review Tumördifferentiering
0.000
Väl
25
4 (16) Review 9 (36) Review 12 (48) Review Måttligt
369
74 (20,1) Review 70 ( 19,0) Review 225 (61,0) katalog Dåligt
1069
65 (6,1) Review 132 (12,3) Review 872 (81,6) Review pT status
0,053
PT1
206
16 (7,8) Review 33 (16,0) Review 157 (76,2) Review pT2
147
23 (15,6) Review 28 (19,0)
96 (65,3) Review pT3
1074
102 (9,5) Review 145 (13,5) Review 827 (77,0) Review pT4
36
2 (5,6)
5 (13,9) Review 29 (80,6) Review pN status
0,074
PN0
411
39 (9,5) Review 66 (16,1) Review 306 (74,5 ) Review PN1
235
27 (11,5) Review 42 (17,9) Review 166 (70,6) Review pN2
306
20 (6,5) Review 42 ( 13,7) Review 244 (79,7) Review PN3
511
57 (11,2) Review 61 (11,9) Review 393 (76,9) Review pM status
0,571
PM0
1429
140 (9,8) Review 119 (8,3) Review 1080 (75,6) Review PM1
34
3 (8,8) Review 2 (5,9)
29 (85,3)
pTNM steg
0,327
IA
162
14 (8,6) Review 29 (17,9) Review 119 (73,5) katalog IB
93
8 (8,6) Review 17 (18,3) Review 68 (73,1) katalog IIA
201
25 (12,4) Review 33 (16,4) Review 143 (71,1 ) Review IIB
230
25 (10,9) Review 34 (14,8) Review 171 (74,3) katalog IIIA
264
15 (5,7) Review 37 ( 14,8) Review 212 (80,3) Review IIIB
455
51 (11,2) Review 56 (12,3) Review 348 (76,5) Review IIIC
24
2 (8,3) Review 3 (12,5) Review 19 (79,2) Review IV
34
3 (8,8) Review 2 (5,9) Review 29 (85,3) Review Of de 1463 patienter, var 143 (9,8%) patienter gjorde som HER2 överuttryck (3+), medan 211 (14,4%) och 1109 (1463, 75,8%) var tvetydiga och negativa, respektive. Tabell 1 sammanfattar HER2 uttryck status grupp. HER2 överuttrycktes (poäng 3+) i 7,0% (65/929) av GC fall och 14,6% (78/534) av gej adenokarcinom fall (Figur 1A). Tvetydig uttryck (2+) av HER2-protein observerades i 13,0% (121/929) av GC fall och 16,9% (90/534) av gej adenokarcinom fall (Figur 1B). HER2 var negativ (1 + /0) i 80,0% (743/929) av GC fall och 68,5% (366/534) av gej adenokarcinom prov (Figur 1C och D). En signifikant skillnad i HER2 överuttryck påträffades mellan GC och ġej adenokarcinom (7,0% jämfört med 14,6%, P Hotel < 0,05). HER2 överuttryck var förknippad med intestinal-typ karcinom från Lauren klassificering (P Hotel < 0,001): 16,8% i tarm vs 2,3 /8,4% i diffuse- /blandad typ cancer. HER2 överuttryck var också korrelerad med väl eller måttligt differentierade karcinom enligt WHO klassificering. Ingen korrelation observerades mellan HER2 överuttryckt och inte överuttryckt fall i fråga om ålder, kön, PT, N, M faktorer, eller patologiskt TNM stadium. Figur 1 Representativa fall av IHC färgning och FISH-analys i GC och GEJ adenokarcinom. A. HER2 IHC färgning visar komplett, basolateral eller lateral membran reaktivitet av stark intensitet (3+) i tumörceller (ursprunglig förstoring, × 40). B. HER2 IHC färgning visar svag till måttlig, komplett, basolateral eller lateral membran reaktivitet (2+) i tumörceller (ursprunglig förstoring, × 100). C. svag /knappt märkbar membran reaktivitet (1+) i tumörceller (ursprunglig förstoring, × 200). D. ingen färgning (0) i tumörceller (ursprunglig förstoring, × 200). E. en GC fallet med HER2-förstärkning med hjälp av FISH-analys. Gröna signaler hänvisar till referenssonden av Chr. 17 centromer, medan röda signaler målsonden för HER2
. F. En GC fall utan HER2-förstärkning med hjälp av FISH-analys.
Concordance av HER2 IHC och FISH
FISH-analys utfördes i 308 slumpvis utvalda GC och GEJ adenokarcinom fall, varav 40 fall med HER2 överuttryck (IHC 3+), 38 fall med tvetydig (IHC 2+), och 230 fall med negativt (IHC 1 + /0) HER2 uttryck. HER2
förstärkning observerades i 97,5% (39/40) av HER2 IHC 3+ fall (11/38) 28,9% av HER2 IHC 2+ fall och 1,3% (3/230) av HER2-negativa (1 + /0) fall, visar en jämförelsehastighet på 98,5% mellan IHC och FISH (tabell 2) (Figur 1E och F) .table 2 Samband mellan HER2 överuttryck och genamplifiering i GC och GEJ adenokarcinom
FISK


IHC
Totalt
3+
2+
1 + /0

förstärkning
39 (97,5%) Review 11 (28,9%) Review 3 (1,3%) katalog 53
Ingen förstärkning
en (2,5%) Review 27 (71,1% ) Review 227 (98,7%) katalog 255
Totalt
40
38
230
308
Diskussion
i denna studie 143 av 1463 (9,8% ) GC och gej adenokarcinom fall var HER2-positiva (3+) med IHC i en av de största kinesiska studier hittills. I ToGA studien andelen HER2-positiv (IHC 3+ eller IHC 2 + /FISH positiv) GC eller cancerpatienter ġej var 22,1% totalt och omkring 10,4% av IHC 3+ i utskurna prover [23], liknande den nuvarande resultat. Nyligen genomförda studier rapporterade också en rad 8,5% till 10,3% för HER2 överuttryck i GC [20, 21, 24]. Nyligen tre studier i kinesiska GC fall tillämpat samma FDA-godkända reagenser och bedömningskriterier och rapporterade HER2 IHC 3+ priser på 9,0% (77/860) [25], 6,9% (10/145) [26], och 5,8 % (4/69) [27], respektive, alla något lägre än den nuvarande resultat. Denna variation kan delvis förklaras av olika provuppsättningar. Dessutom, HER2-positivitet varieras genom tumörstället, med högre frekvens av HER2-positivitet i GEJ adenokarcinom än i magcancer i denna studie (14,6% jämfört med 7,0% respektive; P Hotel < 0,01), vilket överensstämmer med resultaten av andra studier [11, 20]. I ToGA rättegång, de länder som har den högsta andelen av GEJ: var magcancer visade sig ha över genomsnittet HER2-positivitet priser, oavsett provstorleken [23]. En annan förklaring är de olika förhållandet mellan tarm: diffus /blandad cancer bland studierna. Ett positivt samband mellan HER2-positivitet och tarm-typ cancer identifierades i denna och andra studier [28-33]. I ToGA rättegång, till exempel länder med högre förhållanden av tarm:. Diffus /blandad cancer hade ökat HER2-positivitet priser [23]
Ingen korrelation mellan HER2 överuttryck och PT, N eller M faktorer, eller TNM stadier, i den aktuella studien. Tidigare studier inklusive alla patologiska stadier har också rapporterat ingen korrelation mellan patologisk skede och överuttryck [20, 21, 24]. En korrelation av HER2-positivitet med väl eller måttligt differentierade karcinom hittades i denna studie (P Hotel < 0,01). Men andra studier visat både en förening och inget samband mellan HER2 överuttryck och tumördifferentiering [25, 32, 34, 35]. Dessa motstridiga uppgifter kan bero på olika provstorlekar och den låga förekomsten av HER2 i GC och GEJ adenokarcinom. Dessutom har olika metoder för utvärdering och scoring system med olika cut-points används före upprättandet av en standard riktlinje för bedömning av HER2 uttryck. Kanske med de nuvarande enhetliga riktlinjer för HER2 bedömning i denna sjukdom, kommer framtida studier ger mer klarhet i denna fråga.
Aktuella studien visade en hög överensstämmelse hastighet, 98,5%, mellan IHC och fisk, som liknar en annan studie av kirurgiska resektioner från 145 kinesiska GC fall, med en jämförelsehastighet på 94,5% [26]. Däremot i den ToGA studien konkordans hastigheten för IHC och FISH var 87,2%, såsom 7,5% av IHC en + /0 prover och 54,6% av IHC 2+ fall befanns vara FISH-positiva [23]. En av de möjliga förklaringar till denna diskrepans kan vara olika provtyper och reagens. I ToGA studien både biopsier och kirurgiskt utskurna prover ingår; HER2-positivitet var högre i biopsier än i kirurgiskt utskurna prover (23,1% jämfört med 19,9%, P = 0,03), och biopsiprov var också mer benägna att vara HER2-förstärkt än kirurgiska prover vid analys av fisk (P = 0,01) än med IHC [23]. Majoriteten av aktuella studier med en vanlig riktlinje för HER2 uttryck bedömning används biopsier och vävnads microarrays (TMAS), som testades analogt med biopsier, att förhöra hennes status i GC. Den konkordans hastighet av IHC och FISH i dessa studier varierade från 88,6% till 97,7% [20, 32, 36]. En särskild studie som utvärderar HER2 proteinuttryck på hel-vävnadssnitt och TMA genomfördes, vilket tyder på en avvikelse i HER2 uttryck på hel-vävnadssnitt från TMA. Till exempel var andelen IHC 2+ var 4,7% i hel-vävnadssnitt, medan det var 8,6% i TMA, som kan delvis förklaras av heterogena HER2 uttryck [33]. En annan möjlighet, som avslöjades av en studie som syftar till att validera riktlinje för HER2-uttryck bedömning GC, var olika tolkningar av färgning av TMA bland observatörer, även om en enhetlig riktlinje bedömning följdes [22]. Därför kan tillförlitlig separation av IHC 1 + /0 och IHC 2+ vara svårt i biopsiprover, och FISH-analys bör användas för definitiv klassificering.
Sammanfattningsvis en grundlig analys av 1463 kinesiska GC /gej cancerfall använder FDA -godkänd reagens visade HER2 överuttryck i 9,8% av karcinom, med en stark preferens för GEJ plats, tarmcancer subtyp, och väl eller måttligt differentierade karcinom. Cirka 29% av IHC 2+ fall visade HER2
genamplifiering, och det fanns en hög konkordans frekvens (98,5%) mellan IHC och FISH i GC och GEJ adenokarcinom.
Förklaringar
Tack
Denna studie stöddes av bidrag från Peking Hope Run särskild fond (LC2012A08) och National Natural Science Foundation i Kina (30.801.344).
författarnas ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan finns länkar till författarnas ursprungliga lämnat filer för bilder. 13000_2013_758_MOESM1_ESM.tiff Författaroriginalfilen för figur 1 13000_2013_758_MOESM2_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 2 13000_2013_758_MOESM3_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 3 13000_2013_758_MOESM4_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 4 13000_2013_758_MOESM5_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 5 13000_2013_758_MOESM6_ESM.pdf författar~~POS=TRUNC för figur 6 13000_2013_758_MOESM7_ESM.pdf författar~~POS=TRUNC för figur 7 Konkurrerande intressen
ingen av författarna har en tillhörighet eller intressekonflikt.
författarnas bidrag
Studie koncept och design : JY, NL. Analys och tolkning av data: LS, JY. Utarbetandet av manuskriptet: LS, JY. Alla författare läst och godkänt den slutliga manuskriptet.

• Hög intensitet fokuserat ultraljud ger lindring för levermetastaser orsakar gastric utlopp obstruktion: case report
• Oxytocin /vasopressin-receptorantagonist atosiban fördröjer magtömningen av en halvfast måltid jämfört med koksaltlösning i human