Ett medvetet musmodell av gastric tarmvred med hjälp av kliniskt relevant endpoints

Ett medvetet musmodell av gastric tarmvred med hjälp av kliniskt relevanta effektmått Bild Sammanfattning
Bakgrund
Gastric ileus är ett olöst kliniskt problem och nuvarande behandling är begränsad till stödåtgärder. Modeller av ileus använder bedövade djur, muskelremsor eller isolerade glatta muskelceller inte adekvat återge den kliniska situationen. Således har tidigare studier med hjälp av dessa tekniker inte lett till en tydlig förståelse av patofysiologin av tarmvred. Möjligheten att använda födointag och fekal produktion som enkla, kliniskt relevanta effektmått för övervakning ileus på ett medvetet musmodell utvärderades genom att bedöma svårighetsgraden och tidsförloppet av olika förolämpningar kända för att orsaka ileus.
Metoder
Fördröjd födointag och fekal produktion i samband med tarmvred övervakades efter intraperitoneal injektion av endotoxin, laparotomi med tarm manipulation, termisk skada eller cerulein inducerad akut pankreatit. Korrelationen mellan minskat födointag efter endotoxin injektion med gastric ileus validerades genom att mäta gastrisk tömning. Effekten av endotoxin på allmän aktivitetsnivå och ätbeteende bestämdes också. Tunntarmen transit mättes med hjälp av en fenol röd markör.
Resultat
Varje förolämpning resulterade i en övergående och jämförbar minskning av födointag och fekal produktion överensstämmer med den kliniska bilden av tarmvred. Ändpunkterna var mycket känsliga för små förändringar i låga doser av endotoxin, omfattningen av tarm manipulation, och cerulein dos. Förseningen i födointag direkt korrelerad med fördröjd magtömning. Förändringar i allmänna verksamhet och ätbeteende var otillräckliga för att förklara minskat födointag. Tarmen var oförändrad vid de tidpunkter som mäts.
Slutsats
Födointag och fekal produktion är känsliga markörer för gastric dysfunktion i fyra experimentella modeller av tarmvred. I musen visas fördröjd magtömning att vara den största orsaken till anorektisk effekt i samband med tarmvred. Gastric dysfunktion är viktigare än tunntarmen dysfunktion i denna modell. Återvinning av magen funktion tycks vara samtidigt med kolon återhämtning.
Bakgrund
Ileus är en vanlig postoperativ händelse som kännetecknas av övergående försämring av mag-tarmfunktion. Förutom bukkirurgi, sepsis, trauma, pankreatit, anestesimedel, och opioidanalgetika är också förknippade med tarmvred. Mekanismerna för ileus involverar neurala hämmande signaler och humorala faktorer, inklusive parakrina agenter och tarmhormoner [1-3]. Ingen enskild händelse eller faktor har klart inblandad som ansvarig; det är mer troligt att flera mediatorer agera vid olika tidpunkter under hela tillståndet. Dessa mediatorer kommunicerar hela mag-tarmkanalen. Till exempel, kan kirurgisk manipulation av den distala tarmen inducera gastrisk dysfunktion [4-8]. När etablerade, är ileus tänkt att lösa på olika hastigheter hos människor med funktions hämning varar några timmar i tunntarmen, 1-2 dagar i magen och 2-3 dagar inom kolon [9, 10].
Många senare studier av ileus har riktat uppmärksamheten på tunntarmen glatt muskulatur dysfunktion i isolerade muskelremsor [11-14]. Svagheten i muskel remsmetoden är dock oförmågan att undersöka komplexa interaktioner inklusive hjärn gut interaktioner eller organspecifika neurala reflexer. På samma sätt, in vitro
preparat kräver vävnad skörd för att analysera tillståndet och tillåter inte ett systemtänkande på problemet med tarmvred. Tillgången till fullständiga genomsekvensen information i mus har blivit svårt att tillämpa ett systemtänkande möjligt att använda globala genuttryck analys. Men fenotypiska karakteriseringar av tarmvred i djurmodeller som ger hela systemet information som saknas. Utveckling av en sådan modell i mus skulle vara användbar.
I den kliniska inställningen, är upplösningen av ileus bestäms av ett återupptagande av normal ätbeteende och passagen av flatus eller avföring. Trots att födointag och fekal produktion är enkla mätningar av mag-tarmfunktion de har inte rigoröst analyserats i djurmodeller av ileus. Här beskriver vi en medveten musmodell som använder födointag och fekal produktion för att övervaka tidsförloppet för ileus, vilket möjliggör mätning av både storleken och varaktigheten av det tillstånd i samma djur. Detta integrerad strategi för att definiera fenotypen av tarmvred kan underlätta utredningar av potentiella kliniskt relevanta åtgärder eller förebyggande strategier. Dessutom erbjuder denna medvetna musmodell möjlighet att studera molekylära händelser i samband med tarmvred.
Metoder
Djur
Man C3H-möss, 8-12 veckor gamla, användes under hela studien. Möss hölls på en 12 timmars ljus /mörkercykel och fick fri tillgång till standard gnagare chow och vatten. För den kontinuerliga födointag övervakningsstudie gavs mössen 20 mg dammfri matpellets (Bio-Serv, Frenchtown, NJ). Alla förfaranden godkänns och övervakas av University of Utah Institutional Animal Care och användning kommittén.
Födointag och fekal produktion mätning
Möss separerades i individuella burar med fri tillgång till vatten och en tarerad mängd mat. Mat, var fekal och mus massan mättes var 12 timmar vid början av varje scotophase och photophase (07:00 och 19:00). Mängden mat som konsumeras under 12-timmarsperioden beräknades som skillnaden mellan massan av mat i slutet av perioden och mängden mat i början av perioden. Fekal produktion bestämdes från massan av fekal pellets samlas in och mäts i slutet av 12-timmarsperiod. Den potentiella effekten av fekal pellets uttorkning under 12-timmarsperioden togs upp i pilotstudier där ileus framkallades med användning av antingen 0,1 mg /kg LPS eller laparotomi följt av 4 minuters tarm manipulation samt motsvarande kontroller. Fekala pellets samlades var 12: e timme och fekal produktion bestämdes på tre sätt: 1) massbestämning omedelbart efter samlingen (som rapporterats i denna studie), 2) massbestämning efter ytterligare 24 timmars uttorkning period, och 3) genom att räkna fekala pellets . Minskningen av fekal produktion jämfört med kontroller efter ileus induktion var liknande och inte signifikant bland de tre mätmetoderna (data visas ej). Vi drog slutsatsen att den potentiella effekten av uttorkning var oviktiga. Efter en tre-dagars acklimatiseringsperiod mössen slumpmässigt in i experimentgrupper och en sham-grupp. Datainsamlingen startade 24 timmar före induktion av tarmvred och fortsatte efter induktion tills en normal (baslinje) dygnsrytm mönster av utfodring och fekal produktion tillbaka. För kontinuerlig övervakning födointag, möss placerades i individuella metaboliska kammare med fri tillgång till vatten. Enstaka 20 mg dammfri mat pellets levereras på begäran med hjälp av en Coulbourn Instruments Habitest systemet (Allentown, PA) utrustad med en pelletsskruven och livsmedelstråg. Närvaron av ett livsmedel pellet inuti tråget blockerat ljus som emitteras från en Ijusemitterande diod når en fotodetektor. När musen bort pelleten, var en ny pellets levereras. Detta utbyte var övervakas automatiskt och registreras av den grafiska staten Notation 2 program (Coulbourn Instruments, Allentown, PA). Möss acklimatiserade till buren under 4 dagar före datainsamling.
Induktion av ileus
Efter Acklimatisering och insamling utgångsdata perioder var ileus inducerad 30 minuter innan scotophase om inget annat anges. Att efterlikna sepsis, lipopolysackarid (E. coli
O111: B4, List Biological Laboratories, Campbell, CA) administrerades genom intraperitoneal injektion. Den dosberoende förhållande av endotoxin på födointag och fekal produktion undersöktes genom att bestämma tidsförloppet för varje endpoint efter administrering av 0,005, 0,01, 0,02, 0,04, 0,1, 0,2, och 0,4 mg /kg mus massa av endotoxin. Kontrollmöss fick en liknande volym saltlösning bärare. Post-kirurgisk ileus inducerades i möss sövda med isofluran antingen genom laparotomi följt av manipulering av cekum i 1 minut eller laparotomi, urtagning på en saltlösning fuktad svamp och manipulation av tunntarmen, blindtarmen och tjocktarmen för en total manipulation tid av 4 minuter . Manipulation genomfördes med användning av bomull tippas kompresser. Efter stängning av snittet med suturer, var musen avlägsnades från anestesi och fick återhämta under ett uppvärmningslampa i 30 minuter innan insamling av data återupptas. För att bedöma effekterna av termisk skada, var en 20% total kroppsyta (TBSA) skålla bränna induceras på möss som truncal hår togs bort. Den skålla brännskada inducerades genom nedsänkning av den exponerade rygghuden i 70 ° C vatten under 7 sekunder. Omedelbart efter brännskada mössen administrerades 1 ml intraperitoneal (IP) lakterad Ringers lösning. Möss gavs 0,5 ml av LR IP varje 12 timmar under 72 timmar efter brännskada. Kontrolldjuren hade truncal hår bort och fick en liknande tidsförloppet för anestesi och återupplivning med LR. Akut pankreatit inducerades i möss efter en arton timmars fasteperiod med användning av 3 eller 7 timme IP injektioner av cerulein (50 | ig /kg /dos). Skenbehandlade kontrollmöss fick liknande volymer av bärare (0,1% BSA i PBS). Tidpunkten för injektionerna samordnades så att den sista injektionen skedde i början av scotophase.
Gastric tömning och tarmen
Efter en två timmars fasta på tom mage innehåll, möss gavs 200 pl av en 1,5% (vikt /volym) metylcellulosa, 0,5% (vikt /volym) fenol röd lösning i normal saltlösning genom sondmatning. Trettio minuter efter sondmatning, avlivades mössen genom cervikal dislokation, en laparotomi utföras och magen isolerades genom fastklämning av tolvfingertarmen nära pylorus och matstrupen vid den övre magmunnen. Hela proceduren från offer till kläm utfördes på mindre än en minut. GIT avlägsnades, separera magsäcken från tarmen. Tunntarmen dissekerades från blindtarmen /kolon och delas in i fyra lika långa segment av sekventiell TUDELNING. Mängden fenolrött i magen och tarmsegment bestämdes spektrofotometriskt efter homogenisering enligt beskrivning [15]. Gastrisk tömning utvärderades som den procentuella andelen av färgämnet som finns kvar i magsäcken relativt den totala mängden färgämne utvinnes i en standardiseringsgruppen av möss som offrades omedelbart efter sondmatning. Tarmen bestämdes genom att mäta uppdelningen av färgämnet i tunntarmen segmenten och kolon numrerade 1-5, proximalt till distalt. Det geometriska centrumet av färgämne transit beräknades för varje djur som (Σ (% färgämne per segment X segmentnummer) /100) såsom beskrivits [16].
Genomsnittliga artärblodtrycket
Mössen bedövades med isofluran och placerades på en 37 ° C värmedyna. En polyetenkanyl (PE 10), som är ansluten till en tryckomvandlare, infördes cirka 5 mm i lårbensartären. Det genomsnittliga arteriella trycket och andningsfrekvensen (räknade över en minut) registrerades var femte minut. Efter 10 minuters övervakning för att säkerställa stabiliteten av tryck och andningsfrekvens, LPS (25 pg /ml, i doser på 0,1 och 0,4 mg /kg) eller bärare injicerades IP. Blodtryck och andningsfrekvens registrerades var femte minut under totalt en timme.
Aktivitet övervakning Review, Digital videobilder registrerades med hjälp av en persondator baserat system bestående av en webbkamera (PC-Cam 300, Creative Labs, Milpitas , CA) och webCam Control Center version 5.6 programvara http:.. //www webbkamera-control-center com. Kameran placerades över fyra standard mus burar med tråd toppar. I stället för skräp, var en enda strimlad pappershandduk placeras i varje bur för sängkläder. En mörkrum ljus utrustad med en enda 15-watts glödlampa och en Kodak GBX-2 skyddsljus filter (Eastman Kodak, Rochester, NY) under förutsättning belysning. Individuella möss placerades i varje bur med fri tillgång till vatten och en tarerad mängd mat. För att upprätthålla en fri sikt, tillsattes vatten tillhandahålls i en glasflaska och mat var begränsad till 4 standard rodent chow pellets (ca 5 g vardera). Möss acklimatiserade till burarna under 5 dagar före datainsamling. Möss administrerades saltlösning, 0,1 mg /kg LPS eller 2 mg /kg LPS på ett blint sätt 30 minuter före scotophase. Bilder registrerades vid en bild per sekund i 10 sekunder var 10 minut under 36 timmar. Utredare förblindade till behandlingen gjorde de inspelade bilder för musaktivitet och mus inducerad rörelse av mat pellets. Aktivitet bedömdes om grov rörelse av musen kroppen var tydlig inom någon av de 10-sekunders bilder. Likaså var mat pellets rörelse gjorde om läget för någon av mat pellets var annorlunda när 10 bilder jämfördes. Nya livsmedels pellets placerades och mat massa registrerades vid 12-timmars intervall motsvarande scotophase och statistik photophase.
Analyserar
Statistiska jämförelser gjordes med hjälp av faktor ANOVA eller upprepade mätningar ANOVA (för tidsförloppet analyser) och Fishers skyddade minsta signifikanta skillnad (PLSD) efter hoc-tester. Jämförelser ansågs statistiskt signifikant vid P Hotel < 0,05 nivå. Värden uttrycks som medelvärde ± SEM om data från individuella möss visas.
För att bestämma medianeffekt dos av LPS på födointag och fekal produktion, var data 12-timmars (första natten) monterad på en dos och respons kurva. Modellen hade en omvänd proportionalitet form med förskjutningar:
Födointag
= A
+ (BA) * D
m
/(dos
+ D
m
) Review + error
där dos
är den dos av läkemedlet, är A
den minsta födointaget vid godtyckliga stora doser (horisontell asymptot), B
är baslinjen födointag (när dos
= 0) och D
m
är medianen-effekt dosnivå, som är den dos vid vilken födointag är halvvägs mellan baslinjen B Mössor och minst en
. Felet
term speglar mellan-variabilitet av födointag, antas ha normalfördelning med medelvärdet 0 och varians i proportion till svar: error ~ N (0, s
2 (födointag )) Review. Justeringen av variationen beroende på responsen var nödvändigt eftersom mellan-variabilitet minskade födointaget minskat. Eftersom varje datapunkt motsvarar en annan mus, observationerna är oberoende. Ovanstående modellen utvidgas till alla tidpunkter genom att modellera medianeffektdosen D
m
som en funktion av tiden:
D
m
(T) = D
m
(1) c
T
, där T
tiden i "nätter"
det är för varje natt den dos som krävs för att producera en median effekt ökas c
faldigt. Vi har också lagt till två slumpmässig effekt villkor: mellan-mus variation av medianeffektdosen D
m
(1) Review (på log-skala) och baslinjen födointag B
. Dessa mus-specifika villkor tillåter oss att rymma beroendet av observationerna inom-mus.
Resultat
Endotoxin minskade tillfälligt födointag och fekal produktion på ett dosberoende sätt
Obehandlad (baslinje) och bärare behandlade möss visade en dygnsrytm mönster av födointag. Möss tog en stor måltid under tidig scotophase och en mindre måltid i slutet av scotophase eller början av photophase. Även födointaget var lägre under den ljusa perioden mössen tydligen väntat på i avvaktan på mörka fasen som matintag ökade i slutet av photophase. Administration av endotoxin vid tiden 0 resulterade i en omedelbar och iögonfallande minskning av födointaget (Figur 1). Ätbeteende började återhämta sig under den efterföljande photophase och scotophase med en återgång till ett normalt mönster av tredje scotophase efter injektion. Figur 1 Circadian mönster av födointag och effekten av endotoxin administration. Födointag övervakades kontinuerligt. Endotoxin (0,1 mg /kg, heldragen linje) eller bärare (streckad linje) administrerades IP vid tiden 0. Svarta barer längs abskissan indikerar scotophase. Datapunkter representerar genomsnittsvärdena av sex möss i tre timmars tidsfickor.
Med tanke på den dygns ätbeteende av mössen med majoriteten av livsmedel som konsumeras under den mörka fasen, var efterföljande experiment utföras genom en analys födointaget under varje 12-timmars fotoperiod. Denna procedur tillät för samtidig återvinning av fekala pelletar. LPS-administrering resulterade i en statistiskt signifikant minskning av nattlig födointaget under den första (17% av kontrollen), andra (60% av kontrollen), och tredje (83% av kontrollen) scotophases (Figur 2A). Födointag återhämtat sig till nära normala nivåer av tredje scotophase med fullständig återhämtning av dygns mönstret genom den fjärde scotophase. Dessa data överensstämde med de första resultaten med hjälp av kontinuerlig övervakning mat. Även om den mängd mat som förbrukas under den första photophase var ingen signifikant skillnad mellan kontrollmöss och LPS-behandlade möss, var det en signifikant ökning av födointaget under den andra photophase anger att det, under återhämtning från insult, vågmönstret av cirkadiska födointag förblev dämpad. Mönstret av fekal produktion liknade mönstret av födointag med inhiberade signifikant fekal produktion i den första (26% av kontrollen), andra (51% av kontrollen), och tredje (86% av kontrollen) scotophases (Figur 2B). Till skillnad från data födointag, var fekal produktion ökade signifikant jämfört med kontrollerna under den fjärde dagen efter injektionen (116% av kontroll). Figur 2 Induktion av tarmvred efter endotoxin administrering. Mätningar gjordes varje 12 timmar så att varje datapunkt representerar födointag (A) eller fekal produktion (B) som motsvarar den föregående scotophase eller photophase. Barer längs abskissan indikerar scotophase. Endotoxin (0,1 mg /kg, heldragen linje) eller bärare (streckad linje) administrerades genom intraperitoneal injektion vid tiden 0 (pil). Datapunkter presenteras som medelvärde ± SEM (n = 9 möss per grupp). * P
= 0,02 jämfört med kontroll vid motsvarande tidpunkt genom upprepade mätningar ANOVA och Fisher PLSD.
Dosberoende förhållandet mellan endotoxin på födointag och fekal produktion undersöktes genom att bestämma tidsförloppet för varje endpoint efter administrering av olika doser av endotoxin. Varje dos resulterade i en statistiskt signifikant minskning i födointag och fekal produktion under den första scotophase således tröskeldosen av endotoxin var mindre än 0,005 mg /kg IP. De beräknade parametrarna och deras 95% konfidensintervall anges i tabell 1 och handlingen i de observerade data med de monterade dos-responskurvor visas i figur 3. Båda passar resulterar i liknande slutsatser: medianeffektdosen D
m
var ca 0,01 mg /kg och det verkade vara en icke-noll minimi födointag /fekal produktion även vid höga doses.Table 1 Parametrar för 12-timmars endotoxin dos-responskurva. Resultat från den anpassade modell undersöka effekten av olika doser av endotoxin på födointag och fekal produktion under första scotophase visas.
Parameter
Estimate

95% konfidensintervall
födointag Review, en
- minimum, gram
0,16
(0,08, 0,24) katalog B Omdömen - baslinjen, g
3,27
(2,90, 3,64) katalog D
m Omdömen - median effekt dos mg /kg
0,011
(0,007, 0,015) katalog s
- standard avvikelse gram
0,33
(0,28, 0,41) katalog fekal produktion Review, en
- minimum, gram
0,11
(0,08, 0,14) katalog B
- baslinjen gram
1,00
(0,88, 1,12) katalog D
m Omdömen - median effekt dos mg /kg
0,010
(0,006, 0,015) katalog s Omdömen - standardavvikelse,
gram
0,13
(0,11, 0,16) Figur 3 Effekt av endotoxin dos födointag och fekal produktion. Tolv timmars födointag och fekal produktion övervakades under en fyra dagars period efter injektion av bärare eller olika doser av endotoxin. De monterade dos-responskurvor för födointag (A) och fekal produktion (B) för de första 12 timmarna efter endotoxin injektion visas (n = 6 möss per dos). Sälja The koefficienterna monterade övergripande modell som undersökte data över de första fyra nätter ges i tabell 2. Figur 4A visar den anpassade modell som dos-responskurvor för en "genomsnittlig" mus, medan figur 4B plottar de tidsberoende kurvor för varje mus för sig. Modellen fångar de flesta av de observerade fenomenen utom "överskridande" på den fjärde natten (84 timmar). En mer komplicerade formen skulle behövas för att fånga detta syfte. Den resulterande c-multiplikator indikerar att, eftersom mössen återhämtade, ökade medianeffektdosen 11-faldigt vardera night.Table 2 Parametrar för de endotoxin dosresponskurvor för matintag över tiden. Resultat från den anpassade modell undersöka effekten av olika doser av endotoxin på nattlig födointag utvidgas till att omfatta de fyra nätter efter LPS-injektionen.
Parameter
Estimate

95% konfidensintervall
A
- minimum, gram
0,13
(0,05, 0,21) katalog B Omdömen - baslinjen gram
3,50
(3,61, 3,72) katalog D
m
(1) Review - median effekt dosen för den första natten, mg /kg
0,010
(0,007, 0,012) katalog c
- multiplikator av medianeffektdosen för varje extra natt
11,00
(8,62, 14,04) katalog s
B Omdömen - standardavvikelse B, g

0,27
(0,18, 0,39) katalog s
D
- standardavvikelse logD
m
(1) Review, g
0,47
(0,33 , 0,66) katalog s
- resterande standardavvikelse, gram
0,23
(0,20, 0,26) katalog Figur 4 Effekt av endotoxin dos över time.A. De monterade dos-responskurvor för födointag visas för de fyra nätter efter injektion som illustrerar ökningen i effektiva mediandosen varje natt. B. Tidsberoende kurvor födointag visas för individuella möss vid varje dos. (N = 6 möss per dos) Review Minskad födointag och fekal produktion effekter var gemensamma för andra förolämpningar
Övriga kliniskt relevanta förolämpningar som resulterar i ileus undersöktes med användning av medvetna musmodellen. En övergående minskning av födointag och fekal produktion identifierades efter laparotomi /tarm manipulation (Figur 5), värmeskada (Figur 6), och cerulein inducerad akut pankreatit (Figur 7). Alla tre förolämpningar orsakade en signifikant minskning av födointag (52%, 21% och 54% av kontrollen respektive) och fekal produktion (50%, 25% och 67% av kontrollen respektive) inom de första 12 timmarna. Effekterna av cerulein inducerad akut pankreatit induktion på nattlig matintag och fekal produktion nådde inte sin nadir tills den andra scotophase (37% av kontroll för födointag, 36% av kontrollen för fekal produktion) efter cerulein injektion anger att det, jämfört med den andra förolämpningar, var mer tid krävs för att utveckla den fulla effekten (Figur 7). Figur 5 Induktion av postoperativ ileus. Tolv timmars mätningar plottas som beskrivs i förklaringen till fig 2. Möss bedövades, en laparotomi utföras och blindtarmen manipuleras med bomulls tippas kloak i 1 minut vid tiden 0 (heldragen linje). Kontrollmöss fick anestesi för en liknande tid (streckad linje). N = 10 möss per grupp. * P
= 0,008 jämfört med kontroll vid motsvarande tidpunkt.
Figur 6 Induktion av tarmvred efter värmeskada. Tolv timmars mätningar gjordes är avsatta som beskrivs i förklaringen till fig 2. En 20% totala kroppsytan skålla brännskada inducerades vid tiden 0 (heldragen linje). Kontrollmöss fick anestesi endast (streckad linje). N = 3 möss per grupp. * P
= 0,05 jämfört med kontroll vid motsvarande tidpunkt.
Figur 7 Effekt av cerulein inducerad akut pankreatit på födointag och fekal produktion. Tolv timmars mätningar avsattes såsom beskrivits i förklaringen till figur 2. Sju timme injektioner av cerulein (50 ug /kg per dos) administrerades efter en 12-timmars fasteperiod slutar vid tiden 0 (heldragen linje) och jämfördes med kontrollmöss som fick bärare enbart (prickad linje). N = 6 möss per grupp. * P
= 0,009 jämfört med kontroll vid motsvarande tidpunkt.
Specificitet cerulein och laparotomi /tarm manipulation för att orsaka övergående minskning av födointag och fekal produktion bedömdes genom att ändra svårighetsgraden av förolämpningar. Som med endotoxin behandling fanns en direkt korrelation mellan svårighetsgraden och omfattningen av effekterna (Figur 8). Akut pankreatit framkallades i möss med användning av en serie av tre eller sju timme injektioner av cerulein. Figur 8A visar effekten av varje serie om nattlig födointag under de följande tre nätter. Tre cerulein injektioner ledde till minskat födointag för de två första nattliga måltider (P
≤ 0,013 vs. motsvarande kontroller) och återgick till normala nivåer genom den tredje natten. En mer uttalad reaktion sågs efter sju cerulein injektioner, med minskad födointag uppenbart för alla tre nätter (P Hotel < 0,0001 jämfört med motsvarande kontroll). Statistisk jämförelse av de två förolämpningar avslöjade en signifikant skillnad (P
= 0,0018) vid varje tidpunkt som indikerar att storleken på svaret var direkt relaterad till svårighetsgraden av insult. Ett liknande resultat sågs när laparotomi /tarm manipulation användes för att inducera ileus (Figur 8B). Både laparotomi följt av antingen en minut blindtarmen manipulation eller 4 minuters manipulation av tunntarmen, blindtarmen och tjocktarmen resulterade i en minskning för vart och ett av de efterföljande tre nattetid måltider (P
= 0,04 jämfört med motsvarande kontroll). Skillnader mellan de två förolämpningar var inte lika uttalad som effekten av cerulein doser, men resulterade i en signifikant skillnad för den första natten (P
= 0,0024). Figur 8 Korrelation av förolämpning svårighetsgrad och storleken på ileus.Nocturnal födointag för tre nätter efter förolämpning avsattes för A. efter tre (blå) eller 7 (röd) timme injektioner av cerulein och B. efter laparotomi och antingen en minuters blindtarmen manipulation (blå) eller en 4 minuters manipulation av GIT (röd). Motsvarande styrdata visas för varje tomt (streckad linje). Statistiska jämförelser diskuteras i texten. Värdena är medelvärde ± SEM.
Minskad födointag korrelerade med fördröjd magtömning
att kontrollera användningen av dessa enkla åtgärder som markörer av ileus har vi granskat magtömning och tarmen i denna modell. Magtömning av en metylcellulosa /fenolrött färgämne måltid mättes i möss som hade administrerats 0,1 mg /kg IP LPS en timme före sondmatning (figur 9A). En period av snabb tömning sågs i både kontrollmöss och möss administrerade endotoxin under de första 15 minuterna efter sondmatning. Mängden färgämne tömts från magen av kontrollmöss fortsatte att öka mellan 15 och 45 minuter efter sondmatning medan tömning från möss administrerade endotoxin var statisk under samma period. Totalt magtömning en timme efter LPS-administrering minskade dramatiskt jämfört med kontroller (P Hotel < 0,0001 jämfört med motsvarande kontroll för 15, 30 och 45 minuters tidpunkter). Den 30-minuters hastighet av gastrisk tömning var också signifikant reducerad jämfört med kontroll 12 timmar efter LPS-administrering (P
= 0,0053), men återhämtade sig till kontrollnivåer av 36 timmar efter LPS-administrering (Figur 9B). Återhämtningen av magtömning tydligen föregick återvinning av födointag som normala nivåer av födointaget var inte självklart förrän tredje eller fjärde natten efter LPS-administrering (se figur 1 och 2A). Grafiskt utvärdera korrelationen mellan de två återvinningsgrad, var nattlig födointag avsattes mot gastrisk tömning uppmättes 12 timmar före motsvarande nattlig måltid (figur 9C). I huvudsak, frågade vi om nattliga uppgifter födointag kan "förutspådde" av det föregående magtömning mätning. Båda datauppsättningarna plottades som procent av kontrollmätningar. Den resulterande lutningen av en indikerar ett positivt samband mellan födointag och gastrisk tömning. Figur 9 Effekt av endotoxin på magtömningen. A. Gastrisk tömning kurva genererad en timme efter endotoxin (0,1 mg /kg, heldragen linje) eller bärare (streckad linje) injektion. En metylcellulosa /fenol röd färg måltid gavs till olika grupper av möss genom intragastrisk sondmatning. Mängden kvarvarande i magen efter en transitperiod 1, 15, 30 eller 45 minuters färgämne mättes. Den procent av färgämnet töms beräknades relativt den totala mängden färgämne sondmatades. Varje datapunkt representerar mätningar från 3 - 7 möss. B. Återhämtningen av gastrisk funktion övervakades genom mätning av 30 minuters tömning vid olika tidpunkter efter administrering av endotoxin (0,1 mg /kg, heldragen linje) eller bärare (streckad linje). N = 3-12 möss per grupp. C. Korrelation tomt jämföra återvinning av födointag och gastrisk tömning.

• Lung lymphangitic karcinomatos som en primär manifestation av magcancer i en ung vuxen: en fallrapport och översyn av litteraturen
• Gastric transit och små tarmen tid och motilitet bedömas av en magnet spårningssystem