Сознательное мышиную модель желудка непроходимости с использованием клинически значимых конечных точек

Сознательное мышиную модель желудка непроходимости с использованием клинически значимых конечных точек
Аннотация
Справочная информация
желудочной непроходимости является нерешенная клинической проблемой и текущее лечение ограничивается вспомогательными мерами. Модели непроходимости с использованием анестезированных животных, мышечные полоски или отдельные гладкие мышечные клетки не позволяют адекватно воспроизвести клиническую ситуацию. Таким образом, предыдущие исследования с использованием этих методов не привели к ясному пониманию патофизиологии непроходимости. Возможность использования приема пищи и выхода фекалий, как простые, клинически значимых конечных точек для мониторинга непроходимости в сознательном мышиной модели оценивали по оценке тяжести и временной ход различных оскорблений как известно, вызывают непроходимость кишечника.
Методы
Задержка приема пищи и фекальные выход, связанный с непроходимости контролировали после внутрибрюшинного введения эндотоксина, лапаротомии с манипуляциями кишечника, термическим повреждением или церулеина индуцированного острого панкреатита. Соотношение снижению потребления пищи после инъекции эндотоксина с желудочной непроходимости была подтверждена путем измерения опорожнение желудка. Влияние эндотоксина на общем уровне активности и пищевого поведения была также определена. Малый транзит кишечника измеряли с использованием фенола красный маркер.
Результаты
Каждый оскорбление привело к транзиторной и сопоставимое снижение потребления пищи и выхода фекалий в соответствии с клинической картиной непроходимости. Конечные точки были очень чувствительны к небольшим изменениям в низких дозах эндотоксина, степень манипуляции кишечника и церулеина дозы. Задержка приема пищи непосредственно коррелируют с замедленным опорожнением желудка. Изменения в общей активности и пищевого поведения оказались недостаточными для объяснения снижению потребления пищи. Кишечный транзит осталась неизменной на время измерений.
Заключение
Потребление пищи и фекальные выход являются чувствительными маркерами дисфункции желудка в четырех экспериментальных моделях непроходимости. У мышей с задержкой опорожнение желудка, как представляется, основной причиной анорексии эффекта, связанного с непроходимости. Желудочный дисфункция является более важным, чем небольшой дисфункции кишечника в этой модели. Восстановление функции желудка, как представляется одновременно с ободочной восстановления.
Фона
илеус является общей послеоперационной возникновение характеризуется транзиторной нарушениями функции желудочно-кишечного. В дополнение к абдоминальной хирургии, сепсис, травма, панкреатит, анестетиками, и опиоидных анальгетиков, также связаны с кишечная непроходимость. Механизмы непроходимости включают нейронные ингибирующие сигналы и гуморальные факторы, включая паракриновых агентов и кишечника гормонов [1-3]. Ни одно событие или фактор не был явно замешан в качестве ответственных; более вероятно, что многочисленные посредники действуют в разное время в течение всего курса состояния. Эти медиаторы связываются в желудочно-кишечном тракте. Например, хирургическое манипулирование дистальной кишки может вызывать дисфункцию желудка [4-8]. После того, как установлено, кишечная непроходимость, как полагают, чтобы решить с разной скоростью у людей с функциональной ингибирования продолжительностью в несколько часов, в тонкой кишке, 1-2 дней в желудке и через 2-3 дня в пределах толстой кишки [9, 10].
Многие недавние исследования непроходимости сосредоточили внимание на тонкой кишки гладкой мышечной дисфункции в изолированных полос мышц [11-14]. Слабость метода мышц полосы, однако, является невозможность изучить сложные взаимодействия, включая мозг-кишки взаимодействий или органа специфических нервных рефлексов. Аналогичным образом, в пробирке
препараты требуют урожая ткани для анализа состояния и не позволяют системный подход к проблеме непроходимости. Наличие полной информации геномной последовательности у мыши сделало применение системного подхода представляется возможным использованием глобального анализа экспрессии генов. Тем не менее, фенотипические характеризации непроходимости на животных моделях, которые обеспечивают системную широкую информацию отсутствуют. Разработка такой модели у мышей было бы полезно.
В клинических условиях, разрешение непроходимости определяется возобновлением нормального пищевого поведения и при прохождении вздутие или стула. Несмотря на то, что потребление пищи и фекальные выход являются простыми измерения функции желудочно-кишечного тракта они не были тщательно проанализированы в животных моделях непроходимости. Здесь мы опишем сознательную модель мыши, которая использует потребление пищи и фекальные выход контролировать временной ход непроходимости, что позволяет измерять как по величине и длительности состояния в том же животном. Этот комплексный подход к определению фенотипа непроходимости может облегчить исследования потенциальных клинически значимых мероприятий или превентивных стратегий. Кроме того, эта сознательная модель мыши дает возможность изучить молекулярные события, связанные с непроходимости.
Методов
животных
Самцов мышей С3Н, 8-12 недель, были использованы на протяжении всего исследования. Мышей содержали в 12-часовой цикла свет /темнота и свободный доступ к стандартному корму для грызуна и воды. Для непрерывного исследования мониторинга питания, мыши получали 20 мг беспылевыми пищевые гранулы (Bio-Serv, Френчтаун, штат Нью-Джерси). Все процедуры были одобрены и контролируются в Университете штата Юта Institutional уходу и использованию животных комитета.
Приема пищи и измерения фекально выход
Мыши были разделены на отдельные клетки со свободным доступом к воде и тарированного количества пищи. Продукты питания, фекальные и мышь масса измеряли каждые 12 часов в начале каждого scotophase и фотофазы (7 утра до 7 вечера). Количество пищи, потребляемой в течение 12-часового периода была рассчитана как разница между массой пищи в конце периода и количества пищи в начале периода. Фекальные выход определяли из массы фекальных шариков, собранных и измеренных в конце 12-часового периода. Потенциальный эффект от фекальных гранул обезвоживания в течение 12-часового периода был рассмотрен в экспериментальных исследованиях, в которых илеус индуцировали с использованием либо 0,1 мг /кг LPS или лапаротомии, а затем 4 минут манипуляций кишечника, а также соответствующие элементы управления. Каловые шарики собирают через каждые 12 часов и выхода фекалий определяли тремя способами: 1) определение массы сразу же после сбора (как сообщалось в данном исследовании), 2) определение массы после того, как еще в течение 24-часового периода обезвоживания, и 3) путем подсчета фекальных гранул , Снижение выхода фекалий по сравнению с контрольной группой после индукции непроходимость была похожа и не сильно отличается среди трех методов измерения (данные не показаны). Мы пришли к выводу, что потенциальный эффект обезвоживания был несущественным. После периода акклиматизации трехдневного мышей были рандомизированы на экспериментальные группы и фиктивный группы. Сбор данных начался за 24 часа до индукции непроходимости и продолжались после индукции до нормального (базовый уровень) циркадные структура питания и выхода фекалий не возвращается. Для непрерывного контроля приема пищи, мышей помещали в индивидуальные метаболические камеры со свободным доступом к воде. Одиночные 20 мг беспыльные пищевые гранулы были доставлены по требованию с использованием системы Coulbourn Instruments Habitest (Allentown, PA), снабженном пытателя и пищевой корыта. Наличие пищевых окатышей в корыто блокировали свет, излучаемый из светоизлучающего диода, достигающего фотоэлемента. Когда мышь удаляется осадок, новый осадок был доставлен. Этот обмен был автоматически контролируется и регистрируется Graphic Государственной программы обозначения программного обеспечения 2 (Coulbourn Instruments, Allentown, PA). Мыши акклиматизировались в клетке в течение 4-х дней до начала сбора данных.
Индукция непроходимости
После акклиматизации и сбора базовых данных периодов, непроходимость была наведенной за 30 минут до scotophase если не указано иное. Для имитации сепсис, липополисахарида (E.coli O111
: B4, Список биологические лаборатории, Campbell, CA) вводили путем внутрибрюшинной инъекции. Дозозависимое соотношение эндотоксина на потребление пищи и выхода фекалий исследовали путем определения времени курсов для каждой конечной точки после введения 0,005, 0,01, 0,02, 0,04, 0,1, 0,2, и 0,4 мг /кг массы мыши эндотоксина. Контрольные мыши получили аналогичный объем физиологического раствора носителя. Послеоперационный илеус индуцировали у мышей под наркозом с изофлуран либо путем лапаротомии с последующим манипулированием слепой кишки в течение 1 минуты или лапаротомии, потрошения на смоченных в физрастворе, губки и манипулирования тонкой кишки, слепой кишки и ободочной кишки в течение всего времени манипуляции 4 минуты , Манипуляции проводили с использованием хлопка тампоны. После закрытия разреза швами, мышь была удалена из анестезии и дают восстановиться под согревающей лампой в течение 30 минут до сбора данных возобновляется. Для того, чтобы оценить влияние термической травмы, 20% от общей площади поверхности тела (TBSA) ошпаривают ожог был вызван на мышах, из которого была удалена стволовая волос. Ошпаривают ожог индуцировали погружением экспонированной кожи спины в 70 ° C воде в течение 7 секунд. Сразу после ожоговой травмы, мышам вводили 1 мл внутрибрюшинно (IP) лактат раствор Рингера. Мыши получали 0,5 мл LR IP каждые 12 часов в течение 72 часов после ожогов. Контрольные животные были стволовая волосы удалены, и получил такое же время курс анестезии и реанимации с LR. Острый панкреатит индуцировали у мышей после восемнадцати часов голодания с использованием 3 или 7 почасовой IP инъекции церулеина (50 мкг /кг /доза). Sham лечение Контрольные мыши получали аналогичные объемы носителя (0,1% BSA в PBS). Сроки проведения инъекций была скоординирована таким образом, что последняя инъекция произошла в начале scotophase.
Опорожнение желудка и кишечного транзита
После 2-часового голодания до пустого содержимого желудка, мыши получали 200 мкл 1,5% (вес /объем) метилцеллюлоза, 0,5% (вес /объем) фенол красный раствор в физиологическом растворе с помощью желудочного зонда. Через тридцать минут после того, как через желудочный зонд, мышей забивали путем цервикальной дислокации, лапаротомии, выполняемой и желудком отделенном зажима двенадцатиперстной кишки вблизи привратника и пищевода у кардии. Вся процедура от жертвы до зажима была выполнена менее чем за одну минуту. ГИТ была удалена, отделение желудка от кишечника. Тонкой кишки рассекают из слепой кишки /толстой кишки и разделены на четыре равные отрезки длины путем последовательного деления пополам. Количество фенола красного в желудке и кишечных сегментов определяли спектрофотометрически после гомогенизации, как описано [15]. Опорожнение желудка оценивали как процентное содержание красителя, оставшегося в желудке по отношению к общему количеству красителя в извлеченного стандартизацией группе мышей, которые были умерщвленных немедленно после зондировани. Кишечный транзит определяли путем измерения разделение красителя в небольших сегментов кишки и ободочной кишки пронумерованных 1-5, проксимально по отношению к дистальному. Геометрический центр транзита красителя рассчитывали для каждого животного, как (Е (% красителя на номер сегмента X сегмент) /100), как описано [16].
Среднее артериальное давление
Мышей анестезировали изофлуран и размещены на 37 ° C грелку. Полиэтиленовая канюля (РЕ 10), подключенный к датчику давления, был вставлен приблизительно 5 мм в бедренную артерию. Среднее артериальное давление и частота дыхания (подсчитываются в течение 1 мин) регистрировали каждые пять минут. После 10 минут мониторинга для обеспечения стабильности давления и частоты дыхания, LPS (25 мкг /мл, в дозах 0,1 и 0,4 мг /кг) или носитель вводили IP. Артериальное давление и частота дыхания регистрировали каждые пять минут в общей сложности 1 час. Мониторинг
активность
видеоизображений Цифровые были записаны с помощью персонального компьютера на основе системы, состоящей из веб-камеру (PC-CAM 300, Creative Labs, Milpitas , CA) и WebCam Center Control версии 5.6 программного обеспечения HTTP:.. //WWW веб-камера-центр управления ком. Камера была помещена выше четырех стандартных клетках мыши с проволочным вершинами. Вместо подстилки, одно полотенце измельченные бумагу помещали в каждую клетку для постельного белья. Фотолаборатории свет оснащен одной 15-ваттной лампочки и Kodak GBX-2 Safelight фильтр (Eastman Kodak, Рочестер, штат Нью-Йорк) при условии, освещение. Индивидуальные мыши были помещены в каждую клетку со свободным доступом к воде и тарированного количества пищи. Для того чтобы поддерживать беспрепятственный вид, вода была представлена ​​в стеклянной бутылке и пища была ограничена 4 стандартных рацион грызунов гранулы (приблизительно 5 г каждого). Мыши акклиматизировались в клетках в течение 5 дней до начала сбора данных. Мышам вводили физиологический раствор, 0,1 мг /кг LPS или 2 мг /кг LPS слепым методом за 30 минут до scotophase. Изображения были записаны на 1 изображения каждую секунду в течение 10 секунд каждые 10 минут в течение 36 часов. Исследователи ослепленные к обработке набрал записанных изображений для активности мыши и мыши индуцированное движение пищевых гранул. Активность был забит, если грубое движение тела мыши было видно в любой из 10-ти второго изображений. Кроме того, движение пищи осадок был забит, если позиция любого из пищевых гранул отличались при сравнении 10 изображений. Новые пищевые гранулы были помещены и пищевые массы регистрируются с интервалом 12 часов, соответствующий scotophase и
фотофазы. Статистический анализ были сделаны
Статистические сравнения с использованием факторного ANOVA или повторных измерений ANOVA (за время хода анализа) и Фишера защищены наименее значимый разница (PLSD) после специальных испытаний. Сравнения считались статистически значимыми при P &
ЛТ; 0,05 уровень. Значения выражены в виде среднего значения ± SEM, если данные из отдельных мышей не показаны.
Для определения медианного эффекта дозы LPS на потребление корма и выхода фекалий, данные 12-часовой (первая ночь) была установлена ​​на дозе -ответ кривой. Модель имела обратную форму соразмерности со смещением:
потребление пищи
= A +
(BA) * D
<суб> м
/(доза
+ D
<суб> м
)
+ ошибка

где доза
является доза препарата, A
минимальное потребление пищи при произвольных больших дозах (горизонтальная асимптота), B
это исходное потребление пищи (когда доза
= 0) и D
<суб> м
является доза медиана-эффект, то есть доза, при которой потребление пищи находится на полпути между базовым B
и минимума
. Ошибка
термин отражает изменчивость между-животного потребления пищи, предполагается иметь нормальное распределение со средним 0 и дисперсией, пропорциональной реакции: ошибка ~ N (0, s
2 (Food Intake ))
. Регулирование изменчивости в зависимости от реакции было необходимо, поскольку изменчивость между-животного уменьшилось как потребление пищи уменьшилось. Так как каждая точка данных соответствует различному мыши, наблюдения независимы. Вышеописанная модель была распространена на все моменты времени путем моделирования доза Медиана-эффект D
<суб> M
как функция времени:
D
<суб> м
(Т) = D
<суб> м
(1) с
T
, где Т
время в "ночи"
что за каждую ночь доза, необходимая для производят средний эффект увеличивается с
-кратно. Мы также добавили два члена случайного эффекта: между мышиного вариабельность дозы Медиана-эффект D
<подразделам> м
(1)
(по логарифмической шкале) и базового приема пищи B <бр>. Эти мыши особые условия позволяют нам разместить в пределах мышиного зависимости наблюдений.
Результаты
эндотоксина скоротечно уменьшилось потребление пищи и фекальные выход в зависимости от дозы
необработанными (исходный уровень) и носителей мышей, обработанных продемонстрировали циркадный картина приема пищи. Мыши взяли большую еду во время раннего scotophase и меньшего еды ближе к концу scotophase или начале фотофазы. Хотя потребление пищи была ниже, в течение светового периода, мыши, по-видимому ожидали ожидающий темновой фазы, как потребление пищи увеличилось ближе к концу фотофазы. Администрация эндотоксина в момент времени 0 приводило к немедленному и заметным снижением потребления пищи (Рисунок 1). Пищевое поведение начала восстанавливаться в течение последующего фотофазы и scotophase с возвращением к нормальным рисунком по третьей scotophase после инъекции. Рисунок 1 циркадных картину приема пищи и эффект введения эндотоксина. Потребление пищи непрерывно контролировали. Эндотоксина (0,1 мг /кг, сплошная линия) или носитель (пунктирная линия) вводили IP во время 0. Черные полосы вдоль оси абсцисс указывают на scotophase. Точки данных представляют средние измерения шести мышей в течение 3 часов времени бункерах.
С учетом суточного пищевого поведения у мышей с большинством пищи, потребляемой в течение темной фазы, последующие эксперименты проводились путем анализа потребления пищи в течение каждого 12-часового фотопериод. Эта процедура позволила для одновременного извлечения фекальных шариков. введение ЛПС приводит к статистически значимому снижению ночному приема пищи в течение первого (17% от контроля), второй (60% от контроля), а третий (83% от контроля) scotophases (фиг.2А). Прием пищи восстановился почти до нормального уровня в третьем scotophase с полным восстановлением циркадного паттерна на четвертом scotophase. Эти данные согласуются с первоначальными выводами с использованием непрерывного мониторинга качества продуктов питания. Хотя количество потребляемой пищи в течение первого фотофазы существенно не отличалась от контрольных мышей и LPS обработанных мышей, наблюдалось значительное увеличение потребления пищи во время второго фотофазы о том, что, во время восстановления после инсульта, волновой картины циркадного приема пищи остались увлажненную. Картина выхода фекалий была аналогична структуре приема пищи с существенно тормозится выхода фекалий в первом (26% от контроля), второй (51% от контроля), и третий (86% от контроля) scotophases (рис 2В). В отличие от данных потребления пищи, фекальные выход был значительно увеличен по сравнению с контрольной в течение четвертого дня после инъекции (116% от контроля). Рисунок 2 Индукция непроходимости после введения эндотоксина. Измерения проводились через каждые 12 часов, так что каждая точка данных представляет собой потребление пищи (А) или выхода фекалий (В), соответствующий предыдущему scotophase или фотофазы. Бары вдоль оси абсцисс указывают на scotophase. Эндотоксина (0,1 мг /кг, сплошная линия) или носитель (пунктирная линия) вводили путем внутрибрюшинной инъекции во время 0 (стрелка). Точки данных представлены в виде среднего значения ± SEM (n = 9 мышей на группу). * P
= 0,02 по сравнению с контролем в соответствующий момент времени с помощью повторных измерений ANOVA и PLSD Фишера.
Дозозависимое отношения эндотоксина на потребление пищи и выхода фекалий исследовали путем определения времени курсов для каждой конечной точки после введения различных доз эндотоксина. Каждая доза приводит к статистически достоверному снижению потребления пищи и выхода фекалий в течение первого scotophase, таким образом, порог дозы эндотоксина менее чем 0,005 мг /кг, внутрибрюшинно. Расчетные параметры и их 95% доверительные интервалы приведены в таблице 1 и график наблюдаемых данных с кривыми подогнанных доза-реакция показаны на рисунке 3. Оба припадки приводят к аналогичным выводам: медиана-эффект доза D
<суб> м
составляла около 0,01 мг /кг и, как представляется, ненулевая минимальное потребление пищи /фекальные выход даже при высоких doses.Table 1 параметры кривой эндотоксина доза-реакция 12-часовой. Результаты подобранной модели изучения влияния различных доз эндотоксина на потребление пищи и выхода фекалий в течение первого scotophase показаны.
Параметр

Эстимейт

95% доверительный интервал

Food Intake
A
- минимальное, граммов
0,16
(0,08, 0,24)
B
- базовый уровень, г <бр> 3,27
(2.90, 3.64)
D
м
- средняя доза эффект, мг /кг
0,011
(0,007, 0,015)
s
- стандартный отклонение, граммов
0,33
(0,28, 0,41)
Фекальные Выход
A
- минимальное, граммов
0,11
(0,08, 0,14)
B
- базовый уровень, г
1,00
(0.88, 1.12)
D
м
- средняя доза эффект, мг /кг
0,010
(0,006, 0,015)
s
- стандартное отклонение, 0,13 граммов

(0,11, 0,16) Рисунок 3
Влияние дозы эндотоксина на потребление пищи и выхода фекалий. Двенадцать часов приема пищи и фекальные выход контролировали в течение периода 4 дня после инъекции носителя или различных доз эндотоксина. Подобранные кривые доза-реакция для приема пищи (А) и выхода фекалий (B) в течение первых 12 часов после инъекции эндотоксина показаны (п = 6 мышей на дозу).
Коэффициенты подобранной общей модели на котором были рассмотрены данные за первые четыре ночи приведены в таблице 2. на рисунке 4а показаны подобранной модели как кривые доза-реакция для "среднего" мыши, в то время как 4Б участки зависящие от времени кривые для каждой мыши по отдельности. Модель захватывает большую часть наблюдаемых явлений, за исключением "перепадами" на четвертую ночь (84 часов). Более сложная форма будет необходимо, чтобы захватить этот эффект. Полученная C-мультипликатор указывает на то, что, как выздоровел мышей, доза медиана-эффект увеличился в 11 раз каждый night.Table 2 Параметры кривых доза-ответ в отношении эндотоксинов для приема пищи в течение долгого времени. Результаты подобранной модели изучения влияния различных доз эндотоксина на ночной прием пищи расширена, чтобы включить четыре ночи после LPS инъекции.
Параметр

Эстимейт

95% доверительный интервал

В
- минимальная, 0,13 граммов

(0,05, 0,21)
B
- базовый уровень, граммов
3.50 <бр> (3.61, 3.72)
D
м
(1)
- средний эффект дозы для первой ночи, мг /кг
0,010
(0,007, 0,012)
с
- мультипликатор средней дозы эффекта для каждой дополнительной ночи
11.00
(8.62, 14.04)
s
B
- стандартное отклонение B, г
<бр> 0,27
(0,18, 0,39)
s
D
- стандартное отклонение logD
м
(1)
, г
0,47
(0,33 , 0.66)
s
- остаточное стандартное отклонение, 0,23 граммов

(0,20, 0,26) Рисунок 4
Влияние эндотоксина дозы над time.A. Подобранные кривые доза-реакция для приема пищи приведены в течение четырех суток после инъекции, иллюстрирующих увеличение медианного эффективной дозы каждую ночь. B. зависящие от времени приема пищи кривые показаны для отдельных мышей в каждой дозе. (П = 6 мышей на дозу)
Снижение потребления пищи и фекальные эффекты вывода были общими для других оскорблений
Другие клинически значимых оскорблений, которые приводят к непроходимости были изучены с помощью сознательного модель мыши. Переходное уменьшение потребления пищи и выхода фекалий был идентифицирован после манипуляции лапаротомию /кишечника (рисунок 5), термическое повреждение (рисунок 6), и церулеина индуцированных острый панкреатит (рисунок 7). Все три инсульты вызвали значительное снижение приема пищи (52%, 21% и 54% от контроля соответственно) и выхода фекалий (50%, 25% и 67% от контроля, соответственно) в течение первых 12 часов. Эффекты церулеина индуцированного острого панкреатита индукцию по ночному приема пищи и выхода фекалий не достигли своей низшей точки до второй scotophase (37% от контроля за приемом пищи, 36% от контроля за выхода фекалий) после инъекции церулеина указывает, что, по сравнению с другие оскорбления, требуется больше времени для разработки полного эффекта (рисунок 7). Рисунок 5 Induction послеоперационной непроходимости. Двенадцать часов измерения показаны, как описано в легенде на рисунке наркотизировали 2. Мыши, лапаротомии выполнена, и слепая кишка манипулируют с хлопковыми тампоны в течение 1 мин в момент времени 0 (сплошная линия). Контрольные животные получали анестезию в течение аналогичного времени (пунктирная линия). N = 10 мышей в каждой группе. * P
= 0,008 по сравнению с контролем в соответствующий момент времени.
Рисунок 6 Индукция непроходимости после термической травмы. Двенадцать часов измерения были построены, как описано в легенде на рисунке 2. 20% от общей площади поверхности тела ошпаривают ожог индуцировали в момент времени 0 (сплошная линия). Контрольные мыши получали анестезию только (пунктирная линия). N = 3 мыши в группе. * P
= 0,05 по сравнению с контролем в соответствующий момент времени. Рисунок 7
Влияние церулеина индуцированного острого панкреатита на потребление пищи и выхода фекалий. Двенадцать часов измерений были построены, как описано в легенде на рисунке 2. Семь почасовые инъекции церулеина (50 мкг /кг на дозу) вводили после 12-часового голодания период, заканчивающийся в момент времени 0 (сплошная линия) и по сравнению с контрольными мышами, получающие носитель одна (пунктирная линия). N = 6 мышей в группе. * P
= 0,009 управление по сравнению с в соответствующих момент времени.
Специфика церулеина и лапаротомии /манипуляции кишечника для вызывая кратковременное снижение потребления пищи и выхода фекалий оценивали путем изменения степени тяжести оскорбления. Как и при лечении эндотоксина, существует прямая корреляция между тяжестью и величины эффектов (рисунок 8). Острый панкреатит индуцировали у мышей с помощью серии трех или семи почасовой инъекции церулеина. На фиг.8А показан эффект каждой серии по ночному приема пищи в течение последующих трех ночей. Три церулеина инъекции привело к снижению потребления пищи в течение первых двух ночных приемов пищи (P
≤ 0,013 в сравнении с соответствующими контрольными) и возвращается к нормальному уровню на третью ночь. Более выраженный ответ был замечен после семи церулеина инъекций, с уменьшением потребления пищи очевидна для всех трех ночей (P &
л; 0,0001 по сравнению с соответствующим контрольным). Статистическое сравнение двух инсультов выявлено существенное различие (P = 0,0018
) в каждый момент времени, указывающий, что величина ответа была непосредственно связана с тяжестью инсульта. Аналогичный результат был замечен, когда манипулирование лапаротомию /кишечника использовали для индукции илеус (фиг.8В). Оба лапаротомию за которым следует либо 1 минуту манипуляции слепой кишки или 4-х минутными манипуляции тонкой кишки, слепой кишки и толстой кишки привело к сокращению для каждой из последующих трех ночных приемов пищи (Р = 0,04
по сравнению с соответствующей контрольной). Различия между этими двумя оскорблений не было столь выраженным, как эффект дозы церулеина, но приводит к значительной разнице в течение первых суток (Р = 0,0024
). Рисунок 8 Соотношение степени тяжести инсульта и величина потребления пищи ileus.Nocturnal за три ночи постинсультных наносили на график для A. после того, как 3 (синий) или 7 (красный) почасовой инъекции церулеина и B. после лапаротомии и либо один минут манипуляции слепая кишка (синий) или 4 минуты манипуляции с GIT (красный). Соответствующие данные управления показан для каждого участка (пунктирная линия). Статистические сравнения обсуждаются в тексте. Значения представляют собой среднее ± SEM.
Снижение потребления пищи коррелирует с задержкой опорожнения желудка
Для проверки использования этих простых мер, как маркеров непроходимости, мы исследовали опорожнение желудка и кишечного транзита в этой модели. Опорожнение желудка еды красный краситель метилцеллюлоза /фенол измеряли у мышей, которые вводили 0,1 мг /кг, внутрибрюшинно LPS за один час до введения через зонд (рисунок 9а). Период быстрого опустошения был замечен в обоих контрольных мышей и мышей, которым вводили эндотоксин в течение первых 15 минут после затравки. Количество красителя переливаем из желудков контрольных мышей продолжали расти в возрасте от 15 до 45 минут после того, как затравки, тогда как опустошение от мышей, которым вводили эндотоксин статическое за тот же период. В целом опорожнения желудка через один час после введения LPS резко сократилось по сравнению с контролем (P &
л; 0,0001 против соответствующих точек управления для 15, 30 и 45 минут времени). 30 минут скорость опорожнения желудка была значительно снижена по сравнению с контролем через 12 ч после введения LPS (P
= 0,0053), но восстановилась до контрольных уровней на 36 часов после введения LPS (рис 9б). Восстановление опорожнение желудка видимому, предшествовало восстановление приема пищи, как нормальный уровень потребления пищи не были очевидны до третьей или четвертой ночи после введения LPS (см На рисунках 1 и 2А). Для того, чтобы наглядно оценить соотношение двух темпов восстановления, ночной образ жизни прием пищи график зависимости измеренного опорожнения желудка за 12 часов до соответствующей ночной прием пищи (рис 9С). В сущности, мы спросили, ночными данные о потреблении пищи может быть "предсказали" по антецедентной опорожнения желудка измерение. Оба набора данных были построены как процент контрольных измерений. Полученный наклон одного указывает на положительную корреляцию между приемом пищи и опорожнение желудка. Рисунок 9 Влияние эндотоксина на опорожнение желудка. A. опорожнения желудка кривая генерируется через 1 час после эндотоксина (0,1 мг /кг, сплошная линия) или носителя (пунктирная линия) инъекции. Пища красный краситель метилцеллюлоза /фенол вводили различным группам мышей путем внутрижелудочного введения через зонд. Измеряли количество красителя, оставшегося в желудке после транзитного периода 1, 15, 30 или 45 минут. Процент красителя опорожняется вычисляли по отношению к общему количеству красителя через желудочный зонд. Каждая точка данных представляет измерения от 3 - 7 мышей. В. Восстановление функции желудка контролировали путем измерения 30 минут опорожнение в различные моменты времени после введения эндотоксина (0,1 мг /кг, сплошная линия) или носитель (пунктирная линия). N = 3-12 мышей в каждой группе. С. Корреляция участок сравнения восстановление приема пищи и опорожнения желудка. Точки данных представляют собой процент соответствующего контроля.

• Легочная lymphangitic карциноматоз в качестве первичного проявления рака желудка в молодых взрослых: отчет о случа…
• Желудочный транзита и тонкого кишечника и время прохождения моторики оценивали с помощью магнита отслеживан…