Vedomé myšou model žalúdočné nepriechodnosti čriev pomocou klinicky relevantných endpoints

vedomej myšiam modeli žalúdočné nepriechodnosti čriev pomocou klinicky relevantných koncových bodov
abstraktné
pozadia
žalúdočné nepriechodnosti čriev je nevyriešený klinický problém a súčasná liečba je obmedzená na podpornými opatreniami. Modely ileu s použitím anestézie zvieratá, svalové prúžky alebo izolovaných buniek hladkého svalstva nedostatočne reprodukovať klinickej situácii. Tak, predchádzajúce štúdie využívajúce tieto techniky neviedli k jasnému porozumeniu patofyziológie ilea. Realizovateľnosť používanie príjem potravy a fekálne výstup jednoduchá, klinicky relevantné koncové body pre monitorovanie nepriechodnosti čriev v myšiam modeli vedomého bola hodnotená na základe posúdenia závažnosti a časový priebeh rôznych urážok známe, že spôsobujú ileus.
Metódy
Oneskorený príjem potravy a fekálne výstup spojený s ileom sa po intraperitoneálnej injekcii endotoxínu, laparotómii s manipuláciou čreva, tepelným poškodením alebo cerulein vyvolané akútnej pankreatitídy monitorované. Korelácia zníženého príjmu potravy po endotoxínu injekcii žalúdočnej nepriechodnosti čriev bola overená meraním vyprázdňovania žalúdka. Účinok endotoxínu vo všeobecnej rovine činnosti a správanie kŕmenie bol tiež stanovený. Malá črevom sa meria za použitia fenolovej červene marker.
Výsledky
Každý urážky viedlo k prechodnému a porovnateľné zníženie príjmu potravy a stolice výstup v súlade s klinickým obrazom ilea. Koncové body boli vysoko citlivé na malé zmeny v nízkych dávkach endotoxínu, rozsah manipulácie čriev a cerulein dávke. Oneskorenie v príjme potravy v priamej korelácii s oneskoreným vyprázdňovaním žalúdka. Zmeny vo všeobecnej správaní činnosti a kŕmenie boli nedostatočné na vysvetlenie zníženie príjmu potravy. Črevné tranzit zostala nezmenená v dobe meraných.
Záver
Food príjem a fekálne výstup sú citlivé markery žalúdočné dysfunkcie v štyroch experimentálnych modelov nepriechodnosti čriev. U myší, oneskorené vyprázdňovanie žalúdka sa zdá, že je hlavnou príčinou anorektických účinku spojeného s ileom. Žalúdočné dysfunkcia je dôležitejšie ako tenkého čreva dysfunkcie u tohto modelu. Obnova žalúdka funkcie sa zdá byť súčasne s hrubého zotavenie.
Pozadie
ileus je obyčajný pooperačná výskyt vyznačuje prechodnému zhoršeniu funkcií tráviaceho traktu. Okrem brušnej chirurgii, sepsa, trauma, pankreatitída, anestetík, a narkotické analgetiká sú tiež spojené s ileom. Mechanizmy ileu zahŕňajú nervové inhibičné signály a humorálnych faktorov, vrátane parakrinný agentov a črevných hormónov [1-3]. Žiadna jednotlivá udalosť alebo faktor, bolo jasne zapletený ako bytia zodpovedné; to je viac pravdepodobné, že viac mediátorov pôsobia v rôznych časoch počas priebehu stavu. Tieto mediátory komunikovať v celom zažívacom trakte. Napríklad chirurgická manipulácia distálnej čreva môže spôsobiť žalúdočné dysfunkcia [4-8]. Po vytvorení ileus je myšlienka riešiť rôznymi rýchlosťami u ľudí s funkčnou inhibícia, ktoré trvajú niekoľko hodín v tenkom čreve, 1-2 dni v žalúdku a 2-3 dní v hrubom čreve [9, 10].
Mnoho nedávne štúdie ileu zamerala pozornosť na tenkého čreva hladkého svalstva dysfunkcie u svalových pásoch [11-14]. Slabinou metódy svalovej pásu, je však nemožnosť skúmať zložité interakcie vrátane brain-gut interakcií alebo orgánové špecifických nervových reflexov. Rovnako tak in vitro
prípravky vyžadujú tkaniva úrodu testom stave a neumožňujú systémový prístup k problému ilea. Dostupnosť kompletný genómovej sekvencie informácií u myší bola podaná žiadosť o Systémový prístup uskutočniteľný pomocou celkovú analýzu génovej expresie. Avšak, fenotypové charakterizácia ileu na zvieracích modeloch, ktoré poskytujú v rámci celého systému informácie chýbajú. Vývoj takéhoto modelu u myší by boli užitočné.
V klinickom prostredí, riešenie nepriechodnosti čriev je určená obnovenie normálneho správania stravovacie a priechod vetrov alebo stolice. Napriek tomu, že príjem potravy a stolice výstup sú jednoduché meranie gastrointestinálne funkcie neboli dôkladne analyzovaný na zvieracích modeloch ileus. Opísaný vedome myšieho modelu, ktorý používa príjem potravy a fekálne výstup sledovať časový priebeh ileus, čo umožňuje meranie ako na veľkosti a trvania ochorenia u toho istého zvieraťa. Tento integračný prístup k definovaniu fenotypu nepriechodnosti čriev môže uľahčiť vyšetrovanie potenciálnych klinicky významných zásahov alebo preventívne stratégie. Okrem toho, tento vedomé myší model poskytuje možnosť študovať molekulárne udalosti spojené s ileom.
Metódy
Animals
Muž C3H myši, 8-12 týždňov staré, boli použité v priebehu celej štúdie. Myši boli udržiavané na 12 hodín cyklu svetlo /tma a voľný prístup k štandardnému hlodavce a vodu. Pre kontinuálne monitorovanie príjmu potravy štúdii, myši dostali 20 mg bezprašnými potravinovej pelety (Bio-Serv, Frenchtown, NJ). Všetky postupy boli schválené a kontrolované z University of Utah ústavnej zvierat starostlivosť a používanie výboru.
Príjmu potravy a meranie fekálne výstup
Myši boli rozdelené do jednotlivých klietok s voľným prístupom k vode a do vyvážené množstvo potravín. Potraviny, fekálne a myš hmotnosť boli merané každých 12 hodín na začiatku každého scotophase a photophase (7 AM a 7 PM). Množstvo spotrebovanej potravy po dobu 12 hodín, bola vypočítaná ako rozdiel medzi hmotnosťou potravín na konci obdobia a množstvo potravín na začiatku obdobia. Fekálne bol stanovený z množstva fekálnych peliet odobratých a zmeraných na konci obdobia 12 hodín. Potenciálny účinok fekálne pelety dehydratácie po dobu 12 hodín bolo určené v pilotnej štúdie, v ktorej bol ileus indukovaná s použitím buď 0,1 mg /kg LPS alebo laparotómii a potom 4 minúty manipuláciou čreva, ako aj zodpovedajúce kontroly. Fekálne pelety boli odoberané každých 12 hodín a fekálne bol stanovený tromi spôsobmi: 1) stanovenie hmotnosti ihneď po odbere (údaj uvedený v tejto štúdii), 2) stanovenie hmotnosti po ďalších 24 hodín dehydratácia obdobie, a 3) počítaním fekálnych peliet , Pokles fekálne výkonu v porovnaní s kontrolnou skupinou po ileus indukcii bol podobný a nie je významne odlišná medzi tromi spôsobmi merania (dáta nie sú uvedené). Došli sme k záveru, že potenciálny účinok dehydratácia bol bezvýznamný. Po trojdňovej aklimatizácii, boli myši náhodne rozdelená do experimentálnych skupín a placebo skupiny. zber dát začať 24 hodín pred indukciou ilea a pokračovala po indukcii až do normálnej (základná línia) cirkadiánní vzor kŕmenie a fekálne výstup vrátená. Pre kontinuálne sledovanie príjmu potravy, boli myši umiestnené do individuálnych metabolických komory s voľným prístupom k vode. Jednotlivé 20 mg bezprašné potravinárske pelety boli dodané na požiadanie s využitím systému COULBOURNE Instruments Habitest (Allentown, PA) vybaveného podávačom peliet a kŕmidlá. Prítomnosť potravinárskej pelety vo vnútri žľabu blokovaný svetla vyžarovaného zo svetelného emitujúca dióda dosahuje fotodetektor. Keď sa myš odstráni pelet, nová peleta bola doručená. Táto výmena bola automaticky sleduje a zaznamenáva podľa Graphic štátnej Notácia 2 softvérového programu (COULBOURNE Instruments, Allentown, PA). Myši sa aklimatizujú klietky 4 dni pred zberu dát.
Indukcia nepriechodnosti čriev
Po aklimatizácia a základné zberu dát období, ileus bol vyvolaný 30 minút pred scotophase, pokiaľ nie je uvedené inak. Ak chcete napodobniť sepsa, lipopolysacharid (E.coli O111
: B4, List Biological Laboratories, Campbell, CA) bol podávaný intraperitoneálnou injekciou. Vzťah závislosti na dávke endotoxínu na príjme potravy a stolice výstupu bola skúmaná stanovením časových priebehov pre každý koncový bod po podaní 0,005, 0,01, 0,02, 0,04, 0,1, 0,2 a 0,4 mg /kg hmotnosti myši endotoxínu. Kontrolné myši dostávali rovnaké množstvo fyziologického roztoku nosiča. Pooperačný ileus bola indukovaná u myší anestetizovaných izofluranom buď laparotómii následnou manipuláciou slepého čreva po dobu 1 minúty alebo laparotómia, pitvanie na fyziologickým zvlhčené špongiou a manipuláciu s tenkého čreva, slepého čreva a hrubého čreva po celkovú dobu manipulácie 4 minúty , Manipulácia bola vykonaná pomocou vatovej tampóny hrotom. Po uzavretí incízie sa stehy, myš bola odstránená z anestézie a nechajú sa zotaviť za otepľovanie lampou po dobu 30 minút predtým, než zber dát znova. Pre posúdenie účinkov tepelným poškodením, 20% celkového povrchu tela (TBSA) obarenie vypáliť bola vyvolaná na myšiach, z ktorého bol odstránený truncal vlasy. Naparovacia horenia bola vyvolaná ponorením exponované chrbtovej kožu v 70 ° C počas 7 sekúnd vodou. Bezprostredne po popálení, myši boli podávané 1 ml intraperitoneálne (IP), Ringerov laktát. Myši dostali 0,5 ml LR IP každých 12 hodín po dobu 72 hodín po spáliť zranenia. Kontrolné zvieratá mala truncal vlasy odstránený a dostal podobný časový priebeh anestézie a resuscitácie s LR. Akútna pankreatitída bola indukovaná u myší po jej hladovaní osemnásť hodín za použitia 3 až 7 hodinovej IP injekcie cerulein (50 ug /kg /dávka). Sham ošetrené kontrolné myši dostali podobné objemy nosiča (0,1% BSA v PBS). Načasovanie injekcií bol koordinovaný tak, aby posledný injekcie došlo na začiatku scotophase.
Vyprázdňovanie žalúdka a čriev tranzitné
Po 2 hodiny rýchlo vyprázdniť žalúdočného obsahu, myši dostali 200 ul 1,5% (hmotnosť /objem), metylcelulóza, 0,5% (w /v), červený roztok fenolu v normálnom fyziologickom roztoku sondou. Tridsať minút po sondou, boli myši usmrtené cervikálnou dislokáciou, laparotómii vykonanej a žalúdka izolované zovretím do dvanástnika v blízkosti pyloru a pažeráka kardio. Celý postup z obete na upnutie bola vykonaná za menej ako jednu minútu. GIT bola odstránená, oddeľujúce žalúdok z čreva. Tenkého čreva bola vyrezané zo slepého čreva hrubého čreva a /rozdelený do štyroch rovnako dlhých úsekov sekvenčné polenie. Množstvo fenolovej červene v žalúdočné a črevné segmenty bola stanovená spektrofotometricky po homogenizácii, ako je popísané [15]. Vyprázdňovanie žalúdka bola vyhodnotená ako percento farbivá zostávajúce v žalúdku, vztiahnuté na celkové množstvo farbiva získaného v normalizačnom skupiny myší, ktoré boli usmrtené bezprostredne po sondou. Črevné transit bola stanovená meraním rozdelenie farbivá pre malé segmenty čreva a hrubého čreva číslované 1-5, proximálne k distálnej. Geometrický stred tranzitu farbiva bola vypočítaná pre každé zviera ako (å (% farbiva na počte segmentov X segmentu) /100), ako je popísané [16].
Stredný arteriálny krvný tlak
Myši boli anestéziu izofluranom a umiestni sa na A 37 ° C vykurovanie pad. Polyetylénová kanyla (PE 10), spojený s tlakovým snímačom, sa vloží približne 5 mm do stehennej tepny. Stredný arteriálny tlak a frekvencia dýchania (počítané počas 1 minúty) bola zaznamenaná každých päť minút. Po 10 minútach sledovania pre zaistenie stability tlaku a dychovej frekvencie, LPS (25 ug /ml, v dávkach 0,1 a 0,4 mg /kg) alebo nosič bol injekčne IP. Krvný tlak a dychová frekvencia bola zaznamenaná každých päť minút po celkovú dobu 1 hodiny. Boli zaznamenané monitoring
aktivity
digitálne video snímok pomocou osobného systém založený počítač sa skladá z webovej kamery (PC-Cam 300, Creative Labs, Milpitas , CA) a webová kamera Control Center verzie 5.6 softvér http: .. //www kamera-control-centrum com. Kamera bola umiestnená nad štyroch štandardných myší klietkach s drôtenými vrcholy. Namiesto vrhu, jeden rozrezaný papierový uterák sa umiestni do každej klietky pre posteľnú bielizeň. Temnej komore svetlo vybavené jednou za 15 wattovú žiarovku a Kodak GBX-2 bezpečnom filter (Eastman Kodak, Rochester, NY) za predpokladu osvetlenia. Jednotlivé Myši boli umiestnené do každej klietky s voľným prístupom k vode a do vyvážené množstvo potravín. Aby bola zachovaná ničím nerušený výhľad, voda bola poskytnutá v sklenenej fľaši a jedlo bolo obmedzené na 4 štandardné krmivo pre hlodavce pelety (približne 5 g každý). Myši sa aklimatizujú klietok počas 5 dní pred zberu dát. Myšiam podávaný fyziologický roztok, 0,1 mg /kg LPS alebo 2 mg /kg LPS zaslepenej fáze 30 minút pred scotophase. Snímky boli nadobudnuté na 1 snímky za sekundu po dobu 10 sekúnd každých 10 minút po dobu 36 hodín. Vyšetrovatelia zaslepených na liečbu strelil zaznamenanej fotografie pre aktivitu u myší a myší vyvolaná pohybom potravinárskych peliet. Aktivita bola hodnotená ak hrubý pohyb tela myši bol zjavný v niektorej z 10-tich sekundových obrazmi. Rovnako tak pohyb potravín peleta sa získal v prípade, že poloha niektorého z potravinárskych peliet boli odlišné, keď boli porovnané 10 obrázkov. Nové potravinárske pelety boli umiestnené a jedlo hmotnosť zaznamenaný v 12 hodinových intervaloch, čo zodpovedá scotophase a photophase.
Štatistické analýzy
Štatistická porovnanie boli vyrobené za použitia faktoriálový ANOVA alebo opakované merania ANOVA (pre časový priebeh analýzy) a Fisher je chránený najmenej významný rozdiel (PLSD) post-hoc testy. Porovnanie boli považované za štatisticky významné pri P Hotel < 0,05 úrovni. Hodnoty sú vyjadrené ako priemer ± SEM, ak sú uvedené údaje z jednotlivých myší.
Na stanovenie strednej Do dávky LPS na príjmu potravy a fekálne výstup dát 12 hodín (prvú noc) bol namontovaný na dávke odozvou krivka. Tento model mal nepriamej úmernosti formulár s kompenzáciou:
príjmu potravín
= A +
(BA) * D
m
/(Dávka
+ D
m
)
+ chyba
kde dávka
je dávka lieku, A
je minimálny príjem potravy v ľubovoľných veľkých dávkach (vodorovná asymptóta), B
je príjem potravy základná (pri dávke
= 0) a D
m
je medián-účinok dávky, že je dávka, pri ktorej je príjem potravy na polceste medzi základné línie B stroje a minimálne a
. Chyba
termín odráža variabilitu medzi-zvieraťa príjmu potravy, predpokladá sa, že majú normálne rozdelenie so strednou hodnotou 0 a rozdielnosť úmernou reakciu: Chyba ~ N (0, s
2 (príjmu potravy ))
. Nastavenie variability v závislosti od odpovede bola nutná, pretože medzi-zvieraťa variabilita znížila ako príjem potravy znížená. Vzhľadom k tomu, každý bod zodpovedá inému myší, pozorovanie sú nezávislé. Vyššie uvedený model bol rozšírený na všetky časové body na základe modelovania strednej účinok dávky D
m
ako funkciu času:
D
m
(T) = D
m
(1) c
T
, kde T
je čas v "noci"
, že je za každú noc dávka potrebná na produkovať medián efekt je zvýšený c
násobne. Tiež sme pridali dva náhodný vplyv termíny: medzi-myšou variabilita medián-účinok dávka D
m
(1)
(na log meradle) a základného príjmu potravy B
. Tieto termíny myšou špecifické nám umožňujú prispôsobiť závislosť vo-myší z pozorovania.
Výsledky
endotoxínu prechodne znížený príjem potravy a fekálne výstup v závislosti na dávke
neliečených (základná) a nosnej liečených myší preukázali cirkadiánneho vzor príjmu potravy. Myši sa veľké jedlo počas raného scotophase a menšie jedlá blízko konca scotophase alebo začiatkom photophase. Aj keď príjem potravy bol nižší v priebehu svetelné obdobia, myši zrejme očakával čakajúci tmavé fáze ako príjem potravy zvyšuje blízko konca photophase. Podanie endotoxínu v čase 0 malo za následok okamžité a nápadné zníženie príjmu potravy (obrázok 1). Kŕmenie správanie sa začal zotavovať v priebehu nasledujúceho photophase a scotophase s návratom do normálneho vzoru zo strany tretej scotophase po injekcii. Obrázok 1 cirkadiánneho vzor príjmu potravy a účinok podania endotoxínu. príjem potravy bol priebežne monitorovaný. Endotoxín (0,1 mg /kg, plná čiara) alebo nosič (prerušovaná čiara), bol podávaný IP v čase 0. čierne pruhy pozdĺž čiary načrtávajú scotophase. Dátové body predstavujú strednú hodnotu zo šiestich myší v 3 hodinových časových košov.
Vzhľadom k diurnálny potravné správanie myší s väčšinou potravy spotrebovanej v tmavej fázy, následné experimenty boli vykonávané na základe analýzy príjmu potravy v priebehu každého 12-hodinový fotoperióda. Tento postup umožnil súčasné využitie fekálnych peliet. podávanie LPS viedla k štatisticky významnému zníženiu nočného príjmu potravy počas prvého (17% kontroly), druhá (60% kontroly), a tretí (83% kontroly) scotophases (obrázok 2A). príjem potravy zotavil na takmer normálnu úroveň tretej scotophase s kompletným obnovenie cirkadiánní vzoru štvrtým scotophase. Tieto údaje sú v súlade s pôvodnými zisteniami s využitím nepretržité monitorovanie potravín. Aj keď sa množstvo potravy spotrebované počas prvého photophase nebola významne odlišná medzi kontrolných myší a LPS u myší, bolo významné zvýšenie príjmu potravy v priebehu druhého photophase o tom, že v priebehu zotavenie z urážky, na vlny cirkadiánní príjmu potravy zostal tlmený. Vzor fekálne výstupu bol podobný vzor príjmu potravy sa významne inhibujú fekálne výstup v prvej (26% kontroly), druhá (51% kontroly), a tretí (86% kontroly) scotophases (obrázok 2B). Na rozdiel od údajov o príjme potravy, fekálne výstup bol významne zvýšená v porovnaní s kontrolami v priebehu štvrtého dňa po injekcii (116% kontroly). Obrázok 2 Indukcia nepriechodnosti čriev po podaní endotoxínu. Merania uskutočniť každých 12 hodín tak, že každý dátový bod predstavuje príjem potravy (A) alebo fekálne výstup (B), ktorá zodpovedá predchádzajúcim scotophase alebo photophase. Pruhy pozdĺž čiary načrtávajú scotophase. Endotoxín (0,1 mg /kg, plná čiara) alebo nosič (prerušovaná čiara), bol podaný intraperitoneálnou injekciou v čase 0 (viď šípka). Dátové body sú uvedené ako priemer ± SEM (n = 9 myší v každej skupine). * P
= 0,02 versus kontrola na zodpovedajúci časový bod ANOVA s opakovaným meraním a Fisherovho PLSD.
Vzťah závislosti na dávke endotoxínu na príjme potravy a stolice výstupu bola skúmaná stanovením časových priebehov pre každý koncový bod po podaní rôznych dávok endotoxínu. Každá dávka viedlo k štatisticky významnému zníženiu príjmu potravy a stolice výkonu v prvom scotophase, tak, prahová dávka endotoxínu bola menšia ako 0,005 mg /kg IP. Odhady pre daný a ich 95% intervaly spoľahlivosti sú uvedené v tabuľke 1, a dej sledovaných údajov s namontovanými kriviek závislosti odpovede na dávke sú uvedené na obrázku 3. Obidve záchvaty viesť k podobným záverom: medián-účinok dávky D
m
bola asi 0,01 mg /kg a zdalo sa, že nenulová minimálny príjem potravy /fekálne výkon aj pri vysokých doses.Table 1 Parametre krivky endotoxín dávka-reakcia na 12 hodín denne. sú zobrazené výsledky poprekladané modelu skúma vplyv rôznych dávok endotoxínu na príjmu potravy a stolice výstup v priebehu prvého scotophase.
Parameter
Odhad

95% interval spoľahlivosti
príjmu potravy
- minimálna gramov
0,16
(0,08, 0,24)
B
- základný, gramov
3,27
(2,90, 3,64)
D
m
- stredná účinok dávka mg /kg
0,011
(0,007, 0,015)
s
- štandard odchýlka gramov
0,33
(0,28, 0,41)
Fekálne Výstup
- minimálna gramov
0,11
(0,08, 0,14)
B
- základný, gramov
1,00
(0,88, 1,12)
D
m
- stredná účinok dávka mg /kg
0,010
(0,006, 0,015)
s
- štandardná odchýlka gramov
0,13
(0,11, 0,16)
Obrázok 3 účinok endotoxínu dávky na príjmu potravy a fekálne výstupu. Dvanásť hodín príjem potravy a stolice výstup bol monitorované po 4 denné obdobie po injekcii nosiča alebo rôznych dávok endotoxínu. Tieto montované krivky dávka-odpoveď na príjem potravy (A) a fekálne výstupu (b) za prvých 12 hodín po injekcii endotoxínu sú zobrazené (n = 6 myší na dávku).
Koeficienty poprekladané celkového modelu, ktorá skúmala údaje v priebehu prvých štyroch nocí sú uvedené v tabuľke 2. Obrázok 4A ukazuje vybavený model ako krivky dávka-odpoveď za "priemerný" myšou, zatiaľ čo 4B pozemky na časovo závislé krivky pre každú myš zvlášť. Model zachytáva väčšinu pozorovaných javov okrem "prekročeniu" na štvrtom noc (84 hodín). Zložitejšie forma by bolo treba zachytiť tento účinok. Výsledný c-multiplikátor ukazuje, že, ako myši vrátené, medián-účinok dávka zvýšiť 11-násobne každý night.Table 2 parametre kriviek závislosti odpovede na dávke endotoxínu na príjmu potravy v priebehu času. Výsledky poprekladané modelu skúma vplyv rôznych dávok endotoxínu na nočné príjmu potravy rozšírený na štyri noci po injekcii LPS.
Parameter
Odhad

95% interval spoľahlivosti
a - minimálna gramov
0,13
(0,05, 0,21)
B
- základný, gramov
3,50
(3.61, 3.72)
D
m
(1)
- stredná účinok dávka pre prvú noc, mg /kg
0,010
(0,007, 0,012)
c
- multiplikátor strednej dávkou, za každú ďalšiu noc
11,00
(8,62, 14,04)
s
B
- štandardná odchýlka B, g

0,27
(0,18, 0,39)
s
D
- štandardná odchýlka VSD
m
(1)
g
0,47
(0,33 , 0,66)
s
- štandardná odchýlka rezíduí gramov
0,23
(0,20, 0,26)
Obrázok 4 účinok endotoxínu dávke nad time.A. Tieto montované krivky dávka-odpoveď pre príjem potravy sú uvedené pre štyri noci po injekcii, ktoré ilustrujú nárast strednej účinnej dávky každú noc. B. v závislosti na čase príjmu potravy krivky sú zobrazené na jednotlivých myší v každej dávke. (N = 6 myší na dávku)
znížený príjem potravy a stolice výstupné účinky boli spoločné pre Ďalšie urážky,
iný klinicky významný urážky, ktoré vedú k nepriechodnosti čriev bola skúmaná pomocou vedomej myšieho modelu. Prechodné zníženie príjmu potravy a stolice výstup bol identifikovaný po manipulácii laparotomie /čreva (obrázok 5), tepelné poškodenie (obrázok 6), a cerulein indukované akútna pankreatitída (Obrázok 7). Všetky tri urážky spôsobilo významné zníženie príjmu potravy (52%, 21% a 54% vzhľadom na kontrolu v danom poradí) a fekálne výstup (50%, 25% a 67% vzhľadom na kontrolu v tomto poradí) v priebehu prvých 12 hodín. Účinky cerulein indukované akútna pankreatitída indukcie na nočnú príjmu potravy a stolice výstupu nedosiahli svoje dno až do druhej scotophase (37% vzhľadom na kontrolu na príjme potravy, 36% kontroly pre fekálne výstup) po injekcii cerulein čo ukazuje, že v porovnaní s ďalšie urážky, bolo potrebné viac času, aby plne rozvinúť účinok (Obrázok 7). Obrázok 5 Indukcia pooperačnej nepriechodnosti čriev. Dvanásť hodín merania sú vynesené ako je popísané v legende k obrázku 2. Myši boli anestéziu, laparotómii vykonanej, a cecum manipulovať s bavlnenými hrotom tampóny po dobu 1 minúty v čase 0 (plná čiara). Kontrolné myši dostali anestéziu počas rovnakej doby (prerušovaná čiara). N = 10 myší na skupinu. * P
= 0,008 versus kontrola na zodpovedajúci časový bod.
Obrázok 6 Indukcia nepriechodnosti čriev po tepelnom zranení. Dvanásť hodín merania boli sú vynesené ako je popísané v legende k obrázku 2. 20% celkového povrchu tela obarenia horenia bola indukovaná v čase 0 (plná čiara). Kontrolné myši dostávali iba anestézii (prerušovaná čiara). N = 3 myši na skupinu. * P
= 0,05 versus kontrola na zodpovedajúci časový bod.
Obrázok 7 Účinok cerulein indukované akútnej pankreatitídy na príjem potravy a stolice výstupu. Dvanásť hodín merania boli vynesené do grafu, ako je opísané v legende k obrázku 2. Seven hodinovej injekcie cerulein (50 ug /kg v jednej dávke) sa podávali počas nalačno 12-hodinovom končí v čase 0 (plná čiara) a v porovnaní s kontrolnou myší, ktoré dostali nosiče sám (bodkovaná čiara). N = 6 myší na skupinu. * P = 0,009
kontrola vs. na zodpovedajúci časový bod.
Špecificitu cerulein a laparotómii /manipuláciu čriev pre spôsobuje prechodné zníženie príjmu potravy a stolice výstup bola hodnotená zmenou závažnosť urážky. Rovnako ako v prípade liečby endotoxínu, existuje priama korelácia medzi závažnosťou a rozsah účinkov (obrázok 8). Akútna pankreatitída bola indukovaná u myší za použitia radu troch alebo siedmich hodinových injekcie cerulein. Obrázok 8a ukazuje účinok každého radu na nočné príjmu potravy cez nasledujúce tri noci. Tri cerulein injekcia viedla k zníženiu príjmu potravy počas prvých dvoch nočných múčok (P
≤ 0,013 verzus zodpovedajúce kontroly) a vrátilo k normálnym hladinám tretej noci. Výraznejšie reakcia bola pozorovaná po siedmich cerulein injekcií, so znížením príjmu potravy zrejmý pre všetky tri noci (P Hotel < 0,0001 vs. zodpovedajúce kontroly). Štatistické porovnanie oboch urážky odhalila významný rozdiel (P
= 0,0018) v každom časovom okamihu oznamujúce, že veľkosť odozvy bola v priamom vzťahu k závažnosti urážky. Podobný výsledok bol pozorovaný, keď bol manipulácia laparotomie /čreva používa na vyvolanie ileus (obrázok 8b). Ako laparotomie doplnené o 1 minútu manipuláciu slepého čreva alebo 4 minút manipulácia tenkého čreva, slepého čreva, hrubého čreva a malo za následok zníženie pre každý z nasledujúcich troch nočnej jedla (P = 0,04 vs.
zodpovedajúce kontrola). Rozdiely medzi týmito dvoma urážky nebolo tak výrazné, ako účinku cerulein dávok, ale za následok významný rozdiel za prvú noc (P
= 0,0024). Obrázok 8 Korelácia urážky závažnosť a rozsah ileus.Nocturnal príjmu potravy pre tri noci po urážke bola vynesená na A. po 3 (modrá) alebo 7 (červená) hodinovými injekciami cerulein a B. Po laparotómii a buď jeden minúta manipulácia slepé črevo (modrá) alebo manipulácia 4 minúty z GIT (červená). Zodpovedajúce kontrolné údaje sú uvedené na každom pozemku (prerušovaná čiara). Štatistická porovnanie sú diskutované v texte. Hodnoty sú priemer ± SEM.
Znížený príjem potravy v korelácii s spomaleného vyprázdňovania žalúdka
Pre overenie použitie týchto jednoduchých opatrení ako markerov ileus, sme sa zaoberali vyprázdňovanie žalúdka a črevom v tomto modeli. Vyprázdňovanie žalúdka z metylcelulóza /fenolovej červene farbiace jedlu bola meraná u myší, ktoré dostávali 0,1 mg /kg IP LPS jednu hodinu pred žalúdočnou sondou (obrázok 9A). Doba rýchleho vyprázdňovania bol videný v oboch kontrolných myší a myší spravovaných endotoxín počas prvých 15 minút po žalúdočnej sondou. Množstvo farbiva vyprázdnený zo žalúdka kontrolných myší pokračovala k zvýšeniu medzi 15 a 45 minút po žalúdočnej sondou, zatiaľ čo vyprázdnenia z myší podávané endotoxín bol statický v rovnakom období. Celková vyprázdňovanie žalúdka jednu hodinu po podaní LPS bol dramaticky znížený v porovnaní s kontrolami (P Hotel &0,0001 vs. zodpovedajúce ovládač pre 15, 30 a 45 minút po podaní). Rýchlosť 30 minút vyprázdňovanie žalúdka bol tiež významne nižšie v porovnaní s kontrolami 12 hodín po podaní LPS (P = 0,0053
), ale späť k riadeniu úrovne tým, že 36 hodín po podaní LPS (obrázok 9B). Oživenie vyprázdňovanie žalúdka zrejme predchádza navrátenie príjmu potravy, ako normálne hodnoty príjmu potravy nie sú viditeľné, kým sa tretia alebo štvrtá noc po podaní LPS (pozri obrázky 1 a 2a). Graficky vyhodnotenie korelácia dvoch výťažnosti, nočné príjem potravy bola vynesená proti vyprázdňovanie žalúdka, merané 12 hodín pred zodpovedajúcim nočného jedla (obrázok 9C). V podstate sme sa spýtali, či nočné dát príjmu potravy by mohla byť "predpovedal" tým predchodca vyprázdňovanie žalúdka meraní. Oba dátové súbory boli vynesené ako percentá kontrolných meraní. Výsledný sklon jedného znamená pozitívnu koreláciu medzi príjmom potravy a vyprázdňovanie žalúdka. Obrázok 9 Účinok endotoxínu na vyprázdňovanie žalúdka. A. vyprázdňovanie žalúdka krivky generované 1 hodinu po endotoxínu (0,1 mg /kg, plná čiara) alebo nosičom (prerušovaná čiara) injekciou. Metylcelulóza /fenolovej červene farbivo múčka bola podaná rôznych skupín myší žalúdočnou sondou. Množstvo zostávajúceho v žalúdku po tranzitnej dobu 1, 15, 30 alebo 45 minút farbiva bola meraná. Percento farbiva vyprázdnil bolo vypočítané v pomere k celkovému množstvu farbiva gavaged. Každý dátový bod reprezentuje merania z 3 - 7 myší. B. Oživenie žalúdočné funkcia bola monitorovaná meraním 30 minút vyprázdňovanie v rôznych časoch po podaní endotoxínu (0,1 mg /kg, plná čiara) alebo nosičom (prerušovaná čiara). N = 3-12 myšou na skupinu. C. Porovnávacie plot nákupný navrátenie príjem potravy a vyprázdňovanie žalúdka. * P <

• Pľúcne lymfangiosarkom Karcinomatóza ako primárny prejav žalúdočného karcinómu u mladých dospelých: kazuistika a prehľad literatúry
• Žalúdočné tranzitu a tenkého čreva čas prepravy a pohyblivosť hodnotí sledovacím systémom magnet