En bevidst musemodel af gastrisk ileus hjælp klinisk relevant endpoints

En bevidst musemodel af gastrisk ileus hjælp klinisk relevante endepunkter
Abstract
Baggrund
Gastric ileus er et uløst klinisk problem og nuværende behandling er begrænset til støtteforanstaltninger. Modeller af ileus ved hjælp bedøvede dyr, muskelafslappende strimler eller isolerede glatte muskelceller ikke i tilstrækkelig reproducere den kliniske situation. Således har tidligere undersøgelser ved hjælp af disse teknikker ikke ført til en klar forståelse af patofysiologien af ​​ileus. Muligheden for at anvende fødeindtagelse og fækal output som simple, klinisk relevante endepunkter til overvågning ileus i en bevidst musemodel blev evalueret ved at vurdere alvoren og tidsforløbet af forskellige fornærmelser kendt for at forårsage ileus.
Metoder
Forsinket fødeindtagelse og fækal output forbundet med ileus blev overvåget efter intraperitoneal injektion af endotoksin, laparotomi med tarm manipulation, termisk skade eller cerulein induceret akut pancreatitis. Korrelationen af ​​nedsat fødeindtagelse efter endotoksin injektion med gastrisk ileus valideret ved at måle ventrikeltømning. Virkningen af ​​endotoksin på generelle aktivitetsniveau og spiseadfærd blev også bestemt. Lille transit tarm blev målt under anvendelse af en phenol rød markering.
Resultater
Hver fornærmelse resulterede i en forbigående og sammenlignelig reduktion i fødeindtagelse og fækal output i overensstemmelse med det kliniske billede af ileus. Endpoints var meget følsomme for små ændringer i lave doser af endotoksin, omfanget af tarm manipulation, og cerulein dosis. Forsinkelsen i fødeindtagelse direkte korreleret med forsinket gastrisk tømning. Ændringer i almindelighed aktivitet og fodring adfærd var utilstrækkelig til at forklare nedsat fødeindtagelse. Intestinal transit forblev uændret på de tidspunkter, der måles.
Konklusion
fødeindtagelse og fækal output er følsomme markører for gastrisk dysfunktion i fire eksperimentelle modeller for ileus. Hos mus, vises forsinket mavetømning at være den vigtigste årsag til den anorektiske virkning forbundet med ileus. Gastrisk dysfunktion er vigtigere end tyndtarmen dysfunktion i denne model. Inddrivelse af mave-funktion synes at være samtidig med colon opsving.
Baggrund
Ileus er en fælles post-kirurgisk forekomst karakteriseret ved forbigående svækkelse af gastrointestinal funktion. Foruden abdominalkirurgi, sepsis, trauma, pancreatitis, anæstesimidler, og opioidanalgetika er også forbundet med ileus. Mekanismerne i ileus involverer neurale hæmmende signaler og humorale faktorer, herunder parakrine agenter og gut hormoner [1-3]. Ingen enkelt begivenhed eller faktor er klart impliceret som ansvarlig; det er mere sandsynligt, at multiple mediatorer handle på forskellige tidspunkter i løbet af forløbet af tilstanden. Disse mediatorer kommunikerer hele mave-tarmkanalen. For eksempel kan kirurgisk manipulation af den distale tarm inducere gastrisk dysfunktion [4-8]. Når de er etableret, er ileus menes at løse ved forskellige hastigheder i mennesker med funktionel hæmning varige et par timer i tyndtarmen, 1-2 dage i maven og 2-3 dage i tyktarmen [9, 10].
Mange nylige undersøgelser af ileus har sat fokus på tyndtarm glatte muskulatur dysfunktion i isolerede muskler strimler [11-14]. Svagheden af ​​musklen strimmel metode er dog, er den manglende evne til at undersøge komplekse samspil, herunder hjerne-tarm interaktioner eller orgel specifikke neurale reflekser. Tilsvarende in vitro
præparater kræver væv høst at analysere tilstanden og ikke tillader en systematisk tilgang til problemet med ileus. Tilgængeligheden af ​​fuldstændig genomisk sekvens information i mus har gjort anvendelsen af ​​et system tilgang muligt med global genekspression analyse. Dog er fænotypiske karakterisering af ileus i dyremodeller, der giver hele systemet oplysninger mangler. Udvikling af en sådan model i mus ville være nyttigt.
I det kliniske omgivelser, er løsningen af ​​ileus bestemt af genoptagelsen af ​​normal spiseadfærd og passage af flatus eller afføring. På trods af at fødeindtagelse og fækal output er enkle målinger af gastrointestinal funktion er de ikke blevet nøje analyseret i dyremodeller for ileus. Her beskriver vi en bevidst musemodel der bruger fødeindtagelse og fækal output til at overvåge tidsforløbet for ileus, tillader måling af både størrelsen og varigheden af ​​tilstanden i det samme dyr. Denne integrerende tilgang til at definere fænotype af ileus kan lette undersøgelser af potentielle klinisk relevante interventioner eller forebyggende strategier. Desuden er denne bevidste musemodel giver mulighed for at studere molekylære begivenheder associeret med ileus.
Metoder Salg Dyr Salg Mand C3H-mus, 8-12 uger gamle, blev anvendt gennem hele undersøgelsen. Mus blev holdt i en 12 timers lys /mørke-cyklus og givet fri adgang til standard gnaverfoder og vand. For den løbende fødeindtagelse overvågning undersøgelse blev musene fik 20 mg støvfrie foderpiller (Bio-Serv, Frenchtown, NJ). Alle procedurer blev godkendt og overvåget af University of Utah Institutional Animal Care og brug Udvalg.
Fødeindtagelse og fækal output måling
Mus blev adskilt i individuelle bure med fri adgang til vand og en tareret mængde mad. Fødevarer, blev fækale og mus masse målt hver 12. time i begyndelsen af ​​hver skotofasen og fotofase (7 AM og 7:00). Mængden af ​​mad indtages over 12 timer blev beregnet som forskellen mellem massen af ​​mad i slutningen af ​​perioden, og mængden af ​​mad i begyndelsen af ​​perioden. Fækal output blev bestemt ud fra massen af ​​fækalpellets opsamlet og målt ved slutningen af ​​den 12-timers periode. Den potentielle effekt af fækal pellet dehydrering i løbet af 12 timer periode blev behandlet i pilotundersøgelser, hvor ileus blev induceret ved hjælp af enten 0,1 mg /kg LPS eller laparotomi efterfulgt af 4 minutter tarm manipulation samt de tilsvarende kontroller. Fækalpellets blev indsamlet hver 12 timer og fækal output blev bestemt i tre måder: 1) masse beslutsomhed umiddelbart efter indsamlingen (som rapporteret i denne undersøgelse), 2) masse beslutsomhed efter yderligere 24 timer dehydrering periode, og 3) ved at tælle fækalpellets . Faldet i fækalt output i forhold til kontroller efter ileus induktion var ens og ikke signifikant forskellig mellem de tre målemetoder (data ikke vist). Vi konkluderede, at den potentielle effekt af dehydrering var ligegyldig. Efter en tre dages akklimatiseringsperiode blev musene randomiseret i forsøgsgrupper og en fingeret gruppe. Dataindsamlingen startede 24 timer før induktion af ileus og fortsatte efter induktion, indtil en normal (baseline) døgnrytmen mønster af fodring og fækal output returneres. Til kontinuerlig overvågning fødeindtagelse blev mus placeret i individuelle metaboliske kamre med fri adgang til vand. Enkelt 20 mg støvfrie foderpiller blev leveret efter behov ved hjælp af en Coulbourn Instruments Habitest systemet (Allentown, PA) udstyret med en pellet feeder og mad trug. Tilstedeværelsen af ​​en foderpille inden truget blokeret lys afgivet fra en lysemitterende diode nå frem til en fotodetektor. Når musen fjernet pelleten blev en ny pellet leveret. Denne udveksling automatisk blev overvåget og registreret af Graphic State Notation 2 program (Coulbourn Instruments, Allentown, PA). Musene blev akklimatiseret til buret i 4 dage før indsamlingen af ​​data.
Induktion af ileus
Efter akklimatisering og baseline dataindsamling perioder var ileus induceret 30 minutter før skotofasen medmindre andet er angivet. For at efterligne sepsis, lipopolysaccharid (E. coli
O111: B4, List Biological Laboratories, Campbell, CA) blev administreret ved intraperitoneal injektion. Den dosisafhængige forhold af endotoksin på fødeindtagelse og fækalt output blev undersøgt ved at bestemme tidsforløbet for hvert endepunkt efter administration af 0,005, 0,01, 0,02, 0,04, 0,1, 0,2, og 0,4 mg /kg mus masse af endotoksin. Kontrolmus modtog en tilsvarende volumen saltvand bærer. Post-kirurgisk ileus blev induceret i mus bedøvet med isofluran enten ved laparotomi efterfulgt af manipulation af coecum i 1 minut eller laparotomi, udtagning af organer på en saltopløsning fugtet svamp og manipulation af tyndtarmen, coecum og colon for en samlet manipulation tid på 4 minutter . Manipulation blev udført ved hjælp af bomuld tippes svaberprøver. Efter lukning af snittet med suturer blev musen fjernet fra anæstesi og får lov at komme sig under en opvarmning lampe i 30 minutter før dataindsamling genoptaget. For at vurdere effekten af ​​termisk skade, blev en 20% total legemsoverflade (TBSA) skolde brænde induceret på mus, hvorfra trunkal hår var fjernet. Den skolde brænde blev induceret ved neddypning af den eksponerede dorsale hud i 70 ° C vand i 7 sekunder. Umiddelbart efter forbrændinger, blev musene administreret 1 ml intraperitoneal (IP) Ringers laktat. Mus blev givet 0,5 ml LR IP hver 12. time i 72 timer efter forbrændinger. Kontroldyr havde trunkal hår fjernet og modtog en tilsvarende tidsforløb for anæstesi og genoplivning med LR. Akut pancreatitis blev induceret i mus efter en atten time fasteperiode anvendelse af 3 eller 7 timebaserede IP injektioner af cerulein (50 ug /kg /dosis). Sham behandlede kontrolmus fik lignende volumener bærer (0,1% BSA i PBS). Timingen af ​​injektionerne blev koordineret, således at den sidste injektion opstod i begyndelsen af ​​skotofasen.
Gastrisk tømning og tarm transit
Efter en 2-timers hurtigt til tom indhold mave, mus fik 200 pi af en 1,5% (vægt /volumen) methylcellulose, 0,5% (vægt /vol) phenol rød opløsning i normalt saltvand via sonde. Tredive minutter efter sondeernæring, blev musene aflivet ved cervikal dislokation, en laparotomi udført, og maven isoleret ved fastspænding duodenum nær pylorus og spiserøret ved Cardia. Hele proceduren fra offer til fastspænding blev udført i mindre end et minut. GIT blev fjernet, adskillelse maven fra tarmen. Tyndtarmen blev dissekeret fra coecum /tyktarm og opdelt i fire lige lange segmenter ved sekventiel bisection. Mængden af ​​phenolrødt i mave og tarm segmenter blev bestemt spektrofotometrisk efter homogenisering som beskrevet [15]. Gastrisk tømning blev evalueret som procentdelen af ​​farvestof er tilbage i maven i forhold til den samlede mængde farvestof udvundet i en standardisering gruppe af mus, som blev aflivet umiddelbart efter sondeernæring. Intestinal transit blev bestemt ved måling af opdeling af farvestof inden tyndtarmen segmenter og colon nummereret 1-5, proximal til den distale. Den geometriske centrum for transit farvestof blev beregnet for hvert dyr som (Σ (% farvestof per segment X segment nummer) /100) som beskrevet [16].
Gennemsnitlige arterielle blodtryk
Mus blev bedøvet med isofluran og placeres på et 37 ° C varmepude. En polyethylenkanyle (PE 10), forbundet til en tryktransducer, blev indsat ca. 5 mm i den femorale arterie. Gennemsnitlige arterielle tryk og respirationsfrekvens (talt i løbet af 1 minut) blev registreret hvert femte minut. Efter 10 minutter af kontrol for at sikre stabiliteten af ​​tryk og respirationsfrekvens, LPS (25 mg /ml, i doser på 0,1 og 0,4 mg /kg) eller bærer blev injiceret IP. Blodtryk og respirationsfrekvens blev registreret hvert femte minut for i alt 1 time.
Aktivitet overvågning
Digitale videobilleder blev registreret ved hjælp af en personlig computer baseret system bestående af en WebCam (PC-Cam 300, Creative Labs, Milpitas , CA) og webCam control center version 5.6 software http:.. //www webcam-kontrol-center com. Kameraet blev placeret over fire standard mus bure med wire toppe. I stedet for kuld blev et enkelt strimlet papirhåndklæde anbringes i hvert bur til strøelse. En mørkekammer lys udstyret med en enkelt 15-watts pære og et Kodak GBX-2 Safelight filter (Eastman Kodak, Rochester, NY) forudsat belysning. Individuelle mus blev anbragt i hvert bur med fri adgang til vand og en tareret mængde mad. For at opretholde en uhindret udsigt blev vand tilvejebragt i en glasflaske og fødevarer var begrænset til 4 standard gnaverfoder pellets (ca. 5 g hver). Musene blev akklimatiseret til bur i 5 dage forud for dataindsamlingen. Mus fik indgivet saltvand, 0,1 mg /kg LPS eller 2 mg /kg LPS i en blindet måde 30 minutter før skotofasen. Billeder blev optaget ved en billede pr sekund i 10 sekunder hvert 10. minut i 36 timer. Efterforskere blindede til behandlingen scorede de optagne billeder til mus aktivitet og mus induceret bevægelse af foderpiller. Aktivitet blev scoret hvis grov bevægelse af musen krop var tydelig inden for en af ​​de 10-sekunders billeder. Ligeledes blev foderpellet bevægelse scoret hvis placeringen af ​​nogen af ​​foderpiller var forskellige, når de 10 billeder blev sammenlignet. Nye foderpiller blev placeret og mad masse optaget ved 12-timers intervaller, der svarer til skotofasen og fotofase.
Statistiske analyser
Statistiske sammenligninger blev foretaget ved hjælp af fakultet ANOVA eller gentagne målinger ANOVA (for tidsforløb analyser) og Fishers beskyttet mindst betydende forskel (PLSD) post-hoc test. Sammenligninger blev betragtet som statistisk signifikant ved P
< 0,05 niveau. Værdier er udtrykt som gennemsnit ± SEM, medmindre data fra individuelle mus vist.
For at bestemme medianen-effekt dosis af LPS på fødeindtagelse og fækal output, blev 12-time (første nat) data monteret på en dosis -svar kurve. Modellen havde en omvendt proportionalitet formular med forskydninger:
Fødeindtagelse
= A
+ (BA) * D
m
/(dosis
+ D
m
)
+ error
hvor dosis
er den dosis af lægemidlet, A
er den minimale fødeindtagelse ved vilkårlige store doser (vandret asymptote), B
er baseline fødeindtagelse (når Dose
= 0) og D
m
er medianen-effekt dosis der er den dosis, hvor fødeindtagelse er halvvejs mellem baseline B
minimum A
. Fejlen
sigt afspejler den mellem-dyr variabilitet af fødeindtagelse, antages at have normalfordeling med middelværdi 0 og varians proportional med svaret: error ~ N (0, r
2 (fødeindtagelse ))
. Justeringen af ​​variabiliteten afhængigt af svaret var nødvendig, da mellem dyr variabilitet faldt som fødeindtagelse faldet. Da hvert datapunkt svarer til en anden mus, observationerne er uafhængige. Ovenstående model blev udvidet til alle tidspunkter ved at modellere median-effekt dosis D
m
som funktion af tiden:
D
m
(T) = D
m
(1) c
T
, hvor T
er tiden i "nætter" Hoteller, som er for hver nat den dosis, der kræves for at frembringe en median effekt øges c
fold. Vi har også tilføjet to tilfældige effekt vilkår: mellem-mus variabilitet af median-effekt dosis D
m
(1) Hotel (på log-skala) og baseline fødeindtagelse B
. Disse mus-specifikke vilkår tillader os at rumme inden-mus afhængighed af observationerne.
Resultater
Endotoxin forbigående nedsat fødeindtagelse og fækal output på en dosisafhængig måde
Ubehandlet (baseline) og carrier behandlede mus demonstreret en cirkadiske mønster af fødeindtagelse. Mus tog et stort måltid under tidlig skotofasen og en mindre måltid nær slutningen af ​​skotofasen eller begyndelsen af ​​fotofase. Selvom fødeindtagelse var lavere i lyset periode musene tilsyneladende foregrebet verserende mørke fase som fødeindtagelse forøget nær slutningen af ​​fotofase. Administration af endotoksin til tiden 0 resulterede i en omgående og iøjnefaldende fald i fødeindtagelse (figur 1). Fodring adfærd begyndte at komme under den efterfølgende fotofase og skotofasen med en tilbagevenden til en normal mønster af den tredje skotofasen efter injektion. Figur 1 Cirkadisk mønster af fødeindtagelse og effekt af endotoxin administration. Fødeindtagelse blev overvåget kontinuerligt. Endotoksin (0,1 mg /kg, optrukket linje) eller bærer (stiplet linie) blev administreret IP til tiden 0. sorte bjælker langs abscissen indikerer skotofasen. Datapunkter repræsenterer middelværdier målinger af seks mus i 3 timers bins.
Betragtning af døgnets fodring opførsel af mus med de fleste fødevarer forbruges under den mørke fase blev efterfølgende eksperimenter udført ved at analysere fødeindtagelse under hver 12-timers lysperiode. Denne procedure tillod samtidig genvinding af fækale pellets. LPS-administration resulterede i en statistisk signifikant reduktion i natlig fødeindtagelse under den første (17% af kontrol), anden (60% af kontrol), og tredje (83% af kontrol) scotophases (figur 2A). Fødeindtagelse inddrives til nær det normale niveau i den tredje skotofasen med fuldstændig genvinding af døgnrytmen mønster ved den fjerde skotofasen. Disse data var i overensstemmelse med de første resultater ved hjælp af kontinuerlig mad overvågning. Selvom mængden af ​​fødevarer forbruges under den første fotofase ikke var signifikant forskellig mellem kontrolmus og LPS-behandlede mus, var der en signifikant stigning i fødeindtagelse under den anden fotofase angiver, at under overvindelse af fornærmelsen, den bølge mønster af døgnrytmen fødeindtagelse forblev fugtig. Mønstret af fækalt output svarede til mønstret af fødeindtagelse med signifikant inhiberet fækal output i den første (26% af kontrol), anden (51% af kontrol), og tredje (86% af kontrol) scotophases (figur 2B). I modsætning indtagelse data fødevarer, blev fækale output signifikant forøget i forhold til kontrol under den fjerde dag efter injektion (116% af kontrollen). Figur 2 Induktion af ileus efter administration af endotoksin. Målinger blev foretaget hver 12. time, således at hvert datapunkt repræsenterer fødeindtagelse (A) eller fækalt output (B) svarende til det foregående skotofasen eller fotofase. Barer som abscisse angiver skotofasen. Endotoksin (0,1 mg /kg, optrukket linje) eller bærer (stiplet linie) blev administreret ved intraperitoneal injektion ved tiden 0 (pil). Datapunkter er præsenteret som gennemsnit ± SEM (n = 9 mus pr gruppe). * P
= 0,02 over for kontrol ved tilsvarende tidspunkt ved gentagne målinger ANOVA og Fishers PLSD.
Dosisafhængig sammenhæng af endotoksin på fødeindtagelse og fækalt output blev undersøgt ved at bestemme tidsforløbet for hvert endepunkt efter administration af forskellige doser af endotoksin. Hver dosis resulterede i en statistisk signifikant fald i fødeindtagelse og fækal output under den første skotofasen dermed tærsklen dosis af endotoksin var mindre end 0,005 mg /kg IP. De estimerede parametre og deres konfidensintervaller 95% er angivet i tabel 1 og plot af de observerede data med de monterede dosis-respons kurver er vist i figur 3. Begge passer resulterer i lignende konklusioner: Medianen-effekt dosis D
m
var ca. 0,01 mg /kg, og der syntes at være en ikke-nul minimum fødeindtagelse /fækal output selv ved høje doses.Table 1 Parametrene af 12-timers endotoksin dosisresponskurve. Resultater af den model, at undersøge effekten af ​​forskellige doser af endotoksin på fødeindtagelse og fækal produktion i første skotofasen vises.
Parameter
Skøn

95% konfidensinterval
fødeindtagelse
A
- minimum gram
0,16
(0,08, 0,24)
B
- baseline, gram
3,27
(2,90, 3,64)
D
m
- median effekt dosis mg /kg
0,011
(0,007, 0,015)
s
- standard afvigelse, gram
0,33
(0,28, 0,41)
Fækal Output
A
- minimum gram
0,11
(0,08, 0,14)
B
- baseline, gram
1,00
(0,88, 1,12)
D
m
- median effekt dosis mg /kg
0,010
(0,006, 0,015)
s
- standardafvigelse, gram
0,13
(0,11, 0,16)
Figur 3 effekt af endotoksin dosis på fødeindtagelse og fækal output. Tolv timers fødeindtagelse og fækalt output blev overvåget over en periode på 4 dage efter injektion af bærer eller forskellige doser af endotoksin. De indbyggede dosis-respons kurver for fødeindtagelse (A) og fækal output (B) for de første 12 timer efter endotoksin injektion er vist (n = 6 mus per dosis).
Koefficienterne i den monteret samlede model, som undersøgte data over de første fire nætter er angivet i tabel 2. Figur 4A viser den model som dosis-respons kurver for en "gennemsnitlige" mus, mens figur 4B plotter tidsafhængige kurver for hver mus for sig. Modellen fanger de fleste af de observerede fænomener undtagen "overskridelse" på den fjerde nat (84 timer). En mere kompliceret form, vil der være behov for at fange denne virkning. Den resulterende c-multiplikator viser, som musene genvundet, median-effekt-dosis forøget 11 gange hver night.Table 2 parametre af endotoksin- dosisresponskurver for fødeindtagelse over tid. Resultater af den model, at undersøge effekten af ​​forskellige doser af endotoksin på natlig fødeindtagelse udvidet til at omfatte de fire nætter efter LPS injektion.
Parameter
Skøn

95% konfidensinterval
A
- minimum gram
0,13
(0,05, 0,21)
B
- baseline, gram
3,50
(3,61, 3,72)
D
m
(1)
- median effekt dosis for den første nat, mg /kg
0,010
(0,007, 0,012)
c
- multiplikator på medianen effekt dosis for hver ekstra nat
11.00
(8,62, 14,04)
s
B
- standardafvigelse af B, g

0,27
(0,18, 0,39)
s
D
- standardafvigelse logD
m
(1)
, g
0,47
(0,33 , 0,66)
s
- residual standardafvigelse, gram
0,23
(0,20, 0,26)
Figur 4 Effekt af endotoksin dosis i time.A. De indbyggede dosisresponskurver for fødeindtagelse er vist for de fire nætter efter injektion illustrerer stigningen i median effektiv dosis hver nat. B. Tid-afhængige fødevareindtaget kurver er vist for individuelle mus ved hver dosis. (N = 6 mus per dosis)
Nedsat fødeindtagelse og fækale output effekter var fælles for andre fornærmelser Salg Andre klinisk relevante fornærmelser, der resulterer i ileus blev undersøgt under anvendelse af bevidste musemodel. En forbigående reduktion i fødeindtagelse og fækalt output blev identificeret efter laparotomi /tarm manipulation (figur 5), termisk beskadigelse (figur 6), og cerulein induceret akut pancreatitis (figur 7). Alle tre fornærmelser forårsagede en signifikant reduktion i fødeindtagelse (52%, 21% og 54% af kontrol henholdsvis) og fækal output (50%, 25% og 67% af kontrol henholdsvis) inden for de første 12 timer. Virkningerne af cerulein induceret akut pancreatitis induktion på natlig fødeindtagelse og fækal output nåede ikke deres nadir, indtil den anden skotofasen (37% af kontrol for fødeindtagelse, 36% af kontrol for fækal output) efter cerulein injektion indikerer, at i forhold til den andre fornærmelser, var mere tid, der kræves til at udvikle den fulde effekt (figur 7). Figur 5 Induktion af postoperativ ileus. Tolv timers målinger er plottet som beskrevet i teksten til figur 2. Mus blev bedøvet, en laparotomi udført, og coecum manipuleret med bomuld tippes svaberprøver i 1 minut ved tiden 0 (optrukket linje). Kontrolmus modtog anæstesi i en lignende tid (stiplet linie). N = 10 mus per gruppe. * P
= 0,008 over for kontrol ved tilsvarende tidspunkt.
Figur 6 Induktion af ileus efter termisk skade. Tolv timers målinger er plottet som beskrevet i teksten til figur 2. En 20% total legemsoverflade skolde brænde blev induceret ved tiden 0 (optrukket linje). Kontrolmus modtog anæstesi kun (stiplet linie). N = 3 mus pr gruppe. * P
= 0,05 over for kontrol ved tilsvarende tidspunkt.
Figur 7 Effekt af cerulein induceret akut pancreatitis på fødeindtagelse og fækal output. Tolv timers målinger blev afbildet som beskrevet i teksten til figur 2. Syv timebasis injektioner af cerulein (50 ug /kg per dosis) blev administreret efter en 12-timers fasteperiode slutter ved tiden 0 (optrukket linje) og sammenlignet med kontrolmus, der modtog bærer alene (stiplet linje). N = 6 mus pr gruppe. * P
= 0,009 over for kontrol på tilsvarende tidspunkt.
Specificitet cerulein og laparotomi /tarm manipulation for at forårsage forbigående fald i fødeindtagelse og fækal output blev vurderet ved at ændre sværhedsgraden af ​​fornærmelser. Som med endotoksin behandling, var der en direkte sammenhæng mellem sværhedsgraden og omfanget af virkningerne (figur 8). Akut pancreatitis blev induceret i mus ved anvendelse af en serie af tre eller syv timebasis injektioner af cerulein. Figur 8A viser effekten af ​​hver serie på natlig fødeindtagelse i de efterfølgende tre nætter. Tre cerulein injektioner resulterede i nedsat fødeindtag for de første to natlige måltider (P Salg ≤ 0,013 vs. tilsvarende kontroller) og vendte tilbage til det normale niveau i den tredje nat. En mere udtalt respons blev set efter syv cerulein injektioner, med nedsat fødeindtagelse tydelig for alle tre nætter (P
< 0,0001 vs. tilsvarende kontrol). Statistisk sammenligning af de to fornærmelser afslørede en signifikant forskel (P
= 0,0018) ved hvert tidspunkt indikerer, at størrelsen af ​​responset var direkte relateret til sværhedsgraden af ​​skade. Et lignende resultat blev set, når laparotomi /tarm manipulation blev anvendt til at inducere ileus (figur 8B). Både laparotomi efterfulgt af enten 1 minut coecum manipulation eller 4 minutter manipulation af tyndtarmen, coecum, colon og resulterede i en reduktion af hvert af de efterfølgende tre nat tid måltider (P
= 0,04 vs. tilsvarende kontrol). Forskelle mellem de to fornærmelser var ikke så udtalt som effekten af ​​cerulein doser, men førte til en signifikant forskel for den første nat (P
= 0,0024). Figur 8 Korrelation af fornærmelse sværhedsgrad og omfanget af ileus.Nocturnal fødeindtagelse for tre nætter efter fornærmelse blev plottet for A. efter 3 (blå) eller 7 (rød) time injektioner af cerulein og B. efter laparotomi og enten en et minut coecum manipulation (blå) eller en 4 minutters manipulation af GIT (rød). Tilsvarende kontroldata er vist for hver plot (stiplet linie). Statistiske sammenligninger diskuteres i teksten. Værdier er middelværdi ± SEM.
Reduceret fødeindtagelse korreleret med forsinket gastrisk tømning
For at validere anvendelse af disse enkle foranstaltninger som markører for ileus, undersøgte vi mavetømning og intestinal transit i denne model. Gastrisk tømning af en methylcellulose /phenol rødt farvestof måltid blev målt i mus, som havde fået indgivet 0,1 mg /kg IP LPS en time før sondeernæring (figur 9A). En periode med hurtig tømning blev set i både kontrol mus og mus administreret endotoksin i løbet af de første 15 minutter efter sondeernæring. Mængden af ​​farvestof tømt fra maver kontrol mus fortsatte med at stige mellem 15 og 45 minutter efter sondeernæring mens tømning fra mus administreret endotoksin var statisk i samme periode. Samlet gastrisk tømning en time efter LPS administration blev drastisk reduceret i forhold til kontrol (P
< 0,0001 vs. tilsvarende kontrol i 15, 30 og 45 minutter tidspunkter). Den 30-minutter på ventrikeltømning var også signifikant reduceret i forhold til kontrol 12 timer efter LPS administration (P
= 0,0053), men genvundet kontrol niveauer ved 36 timer efter LPS-administration (Figur 9B). Genopretningen af ​​gastrisk tømning tilsyneladende gik forud for inddrivelse af fødeindtagelse som normale niveauer af fødeindtagelse ikke var tydelige før den tredje eller fjerde nat efter LPS administration (se figur 1 og 2A). Til grafisk vurdere korrelationen mellem de to genanvendelsesprocenter, blev natlig fødeindtagelse afsættes mod ventrikeltømning målt 12 timer før den tilsvarende natlig måltid (9C). I det væsentlige, vi spurgte, om natlige kostdata kunne "forudsagde" af forgængeren ventrikeltømning måling. Begge datasæt blev plottet som procent af kontrolmålinger. Den resulterende hældning på én indikerer en positiv korrelation mellem fødeindtagelse og mavetømning. Figur 9 Effekt af endotoksin på gastrisk tømning. A. Gastrisk tømning kurve genereret 1 time efter endotoksin (0,1 mg /kg, optrukket linje) eller bærer (stiplet linie) injektion. En methylcellulose /phenol rødt farvestof måltid blev administreret til forskellige grupper af mus ved intragastrisk sondeernæring. Mængden af ​​farvestof er tilbage i maven efter et 1, 15, 30 eller 45 minutter transitperiode blev målt. Procenten af ​​farvestof tømt blev beregnet i forhold til den samlede mængde farvestof tvangsfodret. Hvert datapunkt repræsenterer målinger fra 3 - 7 mus. B. Udvindingen af ​​gastrisk funktion blev overvåget ved at måle 30 minut tømning på forskellige tidspunkter efter administration af endotoksin (0,1 mg /kg, optrukket linje) eller bærer (stiplet linie). N = 3-12 mus per gruppe. C. Korrelation plot sammenligning inddrivelse af fødeindtagelse og gastrisk tømning.

• Pulmonal lymphangitic carcinomatose som en primær manifestation af gastrisk karcinom i en ung voksen: en case-rapport og gennemgang af litteraturen
• Gastric transit og tyndtarmen transittid og motilitet vurderet af en magnet tracking system