En bevisst musemodell for mage ileus ved hjelp av klinisk relevante endepunkter

En bevisst musemodell for mage ileus ved hjelp av klinisk relevante endepunkter
Abstract
Bakgrunn
Gastric tarmslyng er et uløst klinisk problem og nåværende behandling er begrenset til støttetiltak. Alle modeller av ileus ved hjelp bedøvede dyr, muskel strimler eller isolerte glatte muskelceller ikke tilstrekkelig reprodusere den kliniske situasjonen. Dermed har tidligere studier som bruker disse teknikkene ikke ført til en klar forståelse av patofysiologien ved ileus. Muligheten for å bruke matinntak og fekal utgang som enkle, klinisk relevante endepunkter for overvåking ileus i en bevisst musemodell ble evaluert ved å vurdere alvorligheten og tidsforløpet av forskjellige fornærmelser kjent for å forårsake ileus.
Methods
Forsinket matinntak og fecal utgang forbundet med ileus ble overvåket etter intraperitoneal injeksjon av endotoksin, laparotomi med tarm manipulasjon, termisk skade eller cerulein indusert akutt pankreatitt. Korrelasjonen av redusert matinntak etter endotoksin injeksjon med mage tarmslyng ble validert ved å måle gastrisk tømming. Effekten av endotoksin den generelle aktivitetsnivå og foringsadferd ble også bestemt. Tynntarmstransittid ble målt ved anvendelse av en fenol-rød markør.
Resultater
Hver fornærmelse resulterte i en forbigående og sammenlignbar reduksjon i matinntak og fecal utgang i overensstemmelse med det kliniske bildet av ileus. Endepunktene var svært følsom for små endringer i lave doser av endotoksin, omfanget av tarmen manipulasjon, og cerulein dose. Forsinkelsen i matinntak direkte korrelert med forsinket gastrisk tømming. Endringer i generell aktivitet og fôring atferd var utilstrekkelig til å forklare redusert matinntak. Intestinal transitt forble uendret på tider målt.
Konklusjon
Matinntak og avføring utgang er sensitive markører for mage dysfunksjon i fire eksperimentelle modeller av ileus. I mus, vises forsinket ventrikkeltømming å være den viktigste årsaken til den anorektiske effekten assosiert med tarmslyng. Gastric dysfunksjon er viktigere enn tynntarmen dysfunksjon i denne modellen. Gjenoppretting av magen funksjon synes å være samtidig med colonic utvinning.
Bakgrunn
Ileus er et vanlig post-kirurgiske forekomst preget av forbigående nedsatt gastrointestinal funksjon. I tillegg til abdominal kirurgi, sepsis, traumer, pankreatitt, anestesimidler, og opioide smertestillende midler er også forbundet med ileus. Mekanismene for ileus involvere nevrale hemmende signaler og humorale faktorer, inkludert parakrine agenter og gut hormoner [1-3]. Ingen enkelthendelse eller faktor har vært klart innblandet som ansvarlig; Det er mer sannsynlig at multiple mediatorer opptrer på forskjellige tidspunkter i løpet av tilstanden. Disse mediatorer kommuniserer gjennom hele mage-tarmkanalen. For eksempel, kan kirurgisk manipulering av den distale tarmen indusere gastrisk dysfunksjon [4-8]. Når dette er etablert, blir ileus tenkt å løse med forskjellige hastigheter hos mennesker med funksjonell hemning varer noen få timer i tynntarmen, 1-2 dager i magen og 2-3 dager i tykktarmen [9, 10].
Mange nyere studier av ileus har satt fokus på tynntarmen glatt muskulatur dysfunksjon i isolerte muskelstrimler [11-14]. Svakheten av muskelen strip metoden, derimot, er manglende evne til å undersøke komplekse interaksjoner inkludert hjerne-gut interaksjoner eller organ spesifikke nevrale reflekser. Tilsvarende in vitro
forberedelsene krever vev avling å analysere tilstanden og ikke tillate en systemtilnærming til problemet med ileus. Tilgjengeligheten av fullstendige genomiske sekvens informasjonen i mus har gjort bruk av en systemtilnærming mulig å bruke global genekspresjon analyse. Imidlertid er fenotypiske karakterisering av ileus i dyremodeller som gir hele systemet informasjon mangler. Utvikling av en slik modell i mus ville være nyttig.
I klinisk setting, er oppløsning av ileus bestemmes av gjenopptakelse av normal spiseatferd og passasjen av luft eller avføring. Til tross for det faktum at inntaket av mat og fekal utgang er enkle målinger av gastrointestinal funksjon de er ikke blitt grundig analysert i dyremodeller av ileus. Her beskriver vi en bevisst musemodell som benytter matinntak og fecal utgang for å overvåke tidsforløpet av ileus, slik at målingen av både størrelsen og varigheten av tilstanden i det samme dyr. Dette integrerende tilnærming til å definere fenotype av ileus kan lette undersøkelser av potensielle klinisk relevante tiltak eller forebyggende strategier. I tillegg tilbyr dette bevisst musemodell mulighet til å studere molekylære hendelser assosiert med tarmslyng.
Metoder for Dyr
Mann C3H mus, 8-12 uker gamle, ble brukt gjennom hele studien. Mus ble opprettholdt på en 12-timers lys /mørke syklus og gitt fri tilgang til standard gnager chow og vann. For kontinuerlig matinntak overvåking studien ble mus gitt 20 mg dustless mat pellets (Bio-Serv, Frenchtown, NJ). Alle prosedyrer ble godkjent og overvåket av University of Utah Institutional Animal Care og bruk komité.
Matinntak og avføring utgang måling
Mus ble delt inn i individuelle bur med fri tilgang til vann og en tared mengde mat. Mat ble avføring og mus masse målt hver 12. time i begynnelsen av hver scotophase og photophase (7 AM og 19:00). Mengden mat konsumert over 12 timer ble beregnet som differansen mellom massen av mat på slutten av perioden og mengden av mat i begynnelsen av perioden. Fekal utgangs ble bestemt fra massen av fekale pelleter som er samlet og målt på slutten av 12-timers periode. Den potensielle effekten av fecal pellets dehydrering over 12 timers periode ble adressert i pilotstudier hvor ileus ble indusert ved hjelp av enten 0,1 mg /kg LPS eller laparotomi etterfulgt av fire minutter tarm manipulasjon samt de tilsvarende kontroller. Fekale pelleter ble oppsamlet hver 12. time og fekal utgangs ble bestemt på tre måter: 1) massebestemmelse umiddelbart etter samling (som rapportert i denne studien), 2) massebestemmelse etter en ytterligere 24 timers dehydrering periode, og 3) ved telling ekskrementpelletene . Nedgangen i fekalt hastigheten i forhold til kontrollene etter ileus induksjon var lik og ikke signifikant forskjellig mellom de tre målemetoder (data ikke vist). Vi konkluderte med at den potensielle effekten av dehydrering var ubetydelig. Etter en tre-dagers akklimatiseringsperiode ble musene randomisert i forsøksgrupper og en falsk gruppe. Datainnsamling startes 24 timer før induksjon av ileus og fortsatte etter induksjon inntil en normal (baseline) circadian mønster av mate- og fekal utgang returnert. For kontinuerlig matinntak overvåking, ble musene plassert i individuelle metabolske kamre med fri tilgang til vann. Enkelt 20 mg dustless mat pellets ble levert på bestilling ved hjelp av en Coulbourn Instruments Habitest system (Allentown, PA) er utstyrt med en pellet mater og mat trau. Tilstedeværelsen av en mat pellet innenfor trauet blokkerte lys emittert fra en lysemitterende diode og nådde en fotodetektor. Når musen fjernet pelleten, ble en ny pellet levert. Denne utvekslingen ble automatisk overvåket og registrert av Graphic State Notation to program (Coulbourn Instruments, Allentown, PA). Musene ble akklimatisert til buret for 4 dager før datainnsamlingen.
Induksjon av ileus
Etter akklimatiseringen og baseline datainnsamling perioder, ble ileus indusert 30 minutter før scotophase mindre annet er angitt. Å etterligne sepsis, lipopolysakkarid (E. coli
O111: B4, List Biological Laboratories, Campbell, CA) ble administrert ved intraperitoneal injeksjon. Den doseavhengige forhold av endotoksin på matinntak og fekal produksjonen ble undersøkt ved å bestemme tidsforløp for hvert endepunkt etter administrering av 0,005, 0,01, 0,02, 0,04, 0,1, 0,2, og 0,4 mg /kg mus masse av endotoksin. Kontrollmus mottok et lignende volum av saltvann bærer. Post-operativ ileus ble indusert i musene bedøvet med isofluran enten ved laparotomi, etterfulgt av manipulering av cecum i 1 minutt eller laparotomi, sløying på en saltløsning fuktet svamp og manipulering av tynntarmen, cecum og tykktarm for en total manipulering tid på 4 minutter . Manipulasjon ble utført med bomull tipped vattpinner. Etter lukking av snittet med suturer, ble mus fjernet fra anestesi og tillatt å komme seg under en varmelampe i 30 minutter før datainnsamlingen gjenopptatt. For å vurdere effekten av termisk skade, ble en 20% total kroppsoverflate (TBSA) skålde brenne indusert på mus som truncal håret ble fjernet. Skalden burn ble indusert ved nedsenking av den eksponerte rygghuden i 70 ° C vann i 7 sekunder. Umiddelbart etter brannskade, ble musene administrert 1 ml intraperitoneal (IP) Ringer-laktat oppløsning. Musene ble gitt 0,5 ml LR IP hver 12. time i 72 timer etter brannskade. Kontroll dyrene hadde truncal hår fjernet og fikk en lignende tid løpet av anestesi og gjenopplivning med LR. Akutt pankreatitt ble indusert hos mus etter en atten timers faste perioden ved hjelp av 3 eller 7 time IP injeksjoner av cerulein (50 mikrogram /kg /dose). Simuleringsbehandlede kontrollmus ble gitt tilsvarende volum av bærer (0,1% BSA i PBS). Tidspunktet for injeksjonene ble koordinert slik at den siste injeksjon skjedd ved begynnelsen av scotophase.
Gastrisk tømming og intestinal transitt
Etter en 2-timers faste for å tom mage innhold, mus ble gitt 200 pl av en 1,5% (w /v) metylcellulose, 0,5% (vekt /volum) fenol-rødt-oppløsning i normal saltoppløsning ved gavage. Tretti minutter etter inntak, ble musene avlivet ved cervikal dislokasjon, en laparotomi og magesekken ble isolert ved fastklemming i tolvfingertarmen nær pylorus og spiserøret ved cardia. Hele prosedyren fra offer til klem ble utført i løpet av mindre enn ett minutt. Den GIT ble fjernet, skiller magen fra tarmen. Tynntarmen ble dissekert fra cecum /tykktarm og delt i fire like lange segmenter ved sekvensiell halverings. Mengden av fenol-rødt i magen og tarmsegmentene ble bestemt spektrofotometrisk etter homogenisering som beskrevet [15]. Gastrisk tømming ble evaluert som prosentandelen av fargestoff igjen i magen i forhold til den totale mengde av fargestoff gjenvunnet i en standardisering gruppe av mus som ble avlivet umiddelbart etter inntak. Intestinal transit ble bestemt ved å måle partisjonering av fargestoffet i tynntarmen og tykktarmen segmentene nummerert 1-5, proksimalt til distalt. Det geometriske sentrum av fargestoff transitt ble beregnet for hvert dyr som (Σ (% fargestoff per segment X segment nummer) /100), som beskrevet [16].
Midlere arterielt blodtrykk
Mus ble bedøvd med isofluran og plassert på en 37 ° C oppvarming pad. En polyetylenkanyle (PE 10) som er forbundet med en trykkomformer, ble satt inn ca. 5 mm inn i lårarterien. Gjennomsnittlig arterietrykk og respirasjonsfrekvens (tellet i løpet av 1 minutt) ble registrert hvert femte minutt. Etter 10 minutters overvåking for å sikre stabilitet av trykk og respirasjonsfrekvens, LPS (25 pg /ml, i doser på 0,1 og 0,4 mg /kg) eller bærer ble injisert IP. Blodtrykk og respirasjonsfrekvens ble registrert hvert femte minutt i til sammen en time.
Aktivitet overvåking
Digitale videobilder ble registrert ved hjelp av et PC-basert system som består av et webkamera (PC-Cam 300, Creative Labs, Milpitas , CA) og webCam Control center versjon 5.6 software. http: //www. webcam-control-center com. Kameraet ble plassert over fire standard mus bur med netting topper. I stedet for kull, ble et enkelt makulert papir håndkle plassert i hvert bur for sengetøy. Et mørkerom lys utstyrt med en enkelt 15-watts pære og en Kodak GBX-2 Safelight filter (Eastman Kodak, Rochester, NY) forut belysning. Individuelle mus ble plassert i hvert bur med fri adgang til vann og en tarert mengde mat. For å opprettholde en fri utsikt, vann ble gitt i en glassflaske og mat var begrenset til 4 standard gnagerfor pellets (ca. 5 g hver). Musene ble akklimatisert til burene i 5 dager før datainnsamlingen. Mus ble administrert saltløsning, 0,1 mg /kg LPS eller 2 mg /kg LPS i en blindet måte 30 minutter før scotophase. Bilder ble tatt opp ved en bilde per sekund i 10 sekunder for hvert 10. minutt i 36 timer. Etterforskerne blindet for behandling scoret innspilte bilder for mus aktivitet og mus indusert bevegelse av mat pellets. Aktivitet ble scoret hvis brutto bevegelse av musen kroppen var tydelig i noen av de 10-sekunders bilder. Likeledes ble mat pellet bevegelse mottok hvis plasseringen av noen av de mat pellets var forskjellige når de 10 bildene ble sammenlignet. Nye mat pellets ble plassert og mat masse innspilt med 12 timers mellomrom tilsvarer scotophase og photophase.
Statistiske analyser
statistiske sammenligninger ble gjort ved hjelp faktoriell ANOVA eller gjentatte tiltak ANOVA (for tiden løpet analyser) og Fisher beskyttet minst signifikante forskjellen (plsd) post-hoc tester. Sammenligninger ble vurdert som statistisk signifikante på P
< 0,05 nivå. Verdier er uttrykt som gjennomsnitt ± SEM med mindre data fra individuelle mus er vist.
For å bestemme den median-effekt dosen av LPS på matinntaket og fekal utgang, ble 12-timers (første natten) data montert på en dose -response kurve. Modellen hadde en invers proporsjonalitet skjema med forskyvninger:
Matinntak
= A
+ (BA) * D
m Twitter /(Dose
+ D
m
)
+ feil

der dose
er dosen av stoffet, er A
minimum matinntak på vilkårlige store doser (horisontal asymptote), B
er grunnlinjen matinntaket (når dose
= 0) og D
m
er median effektdose, som er den dosen som matinntaket er halvveis mellom grunnlinjen B Hotell og minimum A
. Feilen
sikt reflekterer mellom-dyr variabilitet av matinntak, antas det å ha normalfordeling med middel 0 og varians proporsjonal med responsen: error ~ N (0, s
2 (Food Intake ))
. Justeringen av variasjon avhengig av responsen var nødvendig som mellom-dyr variabilitet redusert som matinntaket redusert. Siden hvert datapunkt svarer til en annen mus, observasjonene er uavhengige. Ovennevnte modell ble utvidet til alle tidspunkter ved å modellere median-effekten dose D
m
som en funksjon av tiden:
D
m product: (T) = D
m product: (1) c
T
, hvor T
er tid i "netter" Hotell som er for hver natt dosen som kreves for å frembringe en midlere effekt økes c
fold. Vi har også lagt til to tilfeldig effekt vilkår: mellom-mus variasjon av medianeffektdose D
m product: (1) plakater (på log-skala) og av grunnlinjen matinntak B
. Disse mus spesifikke vilkår tillater oss å imøtekomme den innen-mus avhengighet av observasjonene.
Resultater
endotoksin midlertidig redusert matinntak og avføring utgang på en doseavhengig måte
Ubehandlet (baseline) og bære behandlet mus demonstrerte en circadian mønster av matinntak. Mus tok et stort måltid i løpet av tidlig scotophase og et mindre måltid nær slutten av scotophase eller begynnelsen av photophase. Selv om matinntaket var lavere i lyset perioden, musene tydeligvis forventet den ventende mørke fasen som matinntak økte mot slutten av photophase. Administrering av endotoksin ved tid 0 resulterte i en umiddelbar og tydelig reduksjon i matinntak (figur 1). Fôring oppførsel begynte å komme i løpet av den påfølgende photophase og scotophase med en retur til et normalt mønster av den tredje scotophase etter injeksjon. Figur 1 Circadian mønster av matinntak og effekten av endotoksin administrasjon. Matinntak ble overvåket kontinuerlig. Endotoksin (0,1 mg /kg, heltrukket linje), eller bærer (stiplet linje) ble administrert IP på tidspunktet 0. svarte striper langs abscissen indikerer scotophase. Datapunkter representerer gjennomsnittsmålinger av seks mus i tre timers tid binger.
Gitt dagaktive fôring oppførsel av musene med flertallet av mat konsumert under den mørke fasen, ble senere eksperimenter utført ved å analysere matinntak i løpet av hver 12-timers daglengde. Denne prosedyren er tillatt for samtidig gjenvinning av fecal pellets. LPS administrasjon førte til en statistisk signifikant reduksjon i nattlige matinntaket i løpet av den første (17% av kontroll), andre (60% av kontroll), og tredje (83% av kontroll) scotophases (figur 2A). Matinntak restituert til nær normale nivåer av den tredje scotophase med fullstendig gjenoppretting av circadian mønster av den fjerde scotophase. Disse data var i samsvar med de første funnene ved hjelp av kontinuerlig mat overvåking. Selv om mengden av mat som forbrukes i løpet av den første photophase var ikke signifikant forskjellig mellom kontrollmusene og LPS-behandlede mus, var det en betydelig økning i matinntak i andre photophase indikerer at det under utvinningen fra fornærmelse, bølgemønsteret av circadian matinntak forble fuktet. Mønsteret av fecal produksjonen var likt mønsteret av matinntak med betydelig hemmet fecal utgang i den første (26% av kontroll), andre (51% av kontroll), og tredje (86% av kontroll) scotophases (figur 2B). I motsetning til inntaksdata mat, ble fecal utgangs signifikant øket i forhold til kontroller i løpet av den fjerde dagen etter injeksjon (116% av kontroll). Figur 2 Induksjon av ileus etter endotoksin administrasjon. Målinger ble gjort hver 12. time, slik at hvert datapunkt representerer matinntak (A) eller fecal utgang (B) som svarer til den foregående scotophase eller photophase. Barer langs abscissen indikerer scotophase. Endotoksin (0,1 mg /kg, heltrukket linje), eller bærer (stiplet linje) ble administrert ved intraperitoneal injeksjon ved tiden 0 (pil). Datapunkter er presentert som gjennomsnitt ± SEM (n = 9 mus pr gruppe). * P
= 0,02 vs. kontroll ved tilsvarende tidspunkt etter repeterte målinger ANOVA og Fisher plsd.
Doseavhengig forhold av endotoksin på matinntak og fekal produksjonen ble undersøkt ved å bestemme tidsforløp for hvert endepunkt etter administrering av forskjellige doser av endotoksin. Hver dose førte til en statistisk signifikant reduksjon i matinntak og fekal utgang i løpet av den første scotophase således terskelen dose av endotoksin var mindre enn 0,005 mg /kg IP. De estimerte parametrene og deres 95% konfidensintervaller er gitt i tabell 1, og plotting av de observerte data med de monterte dose-respons-kurver er vist i figur 3. Begge passer resultere i tilsvarende konklusjoner: median-effekt dosen D
m
var 0,01 mg /kg og det syntes å være en ikke-null minimum matinntak /avføring utgang selv ved høye doses.Table 1 Parametere av 12-timers endotoksin dose-responskurve. Resultater av tilpassede modellen undersøke effekten av ulike doser av endotoksin på matinntaket og avføring utgang i løpet av første scotophase vises.
Parameter
Estimate

95% konfidensintervall
matinntak
A
- minimum gram
0,16 plakater (0,08, 0,24)
B
- baseline, gram
3,27 product: (2,90, 3,64)
D
m
- median effekt dose, mg /kg
0,011 plakater (0,007, 0,015)
s
- standard avvik, gram
0,33 plakater (0,28, 0,41)
Fecal Utgang
A
- minimum gram
0,11 plakater (0,08, 0,14)
B
- baseline, gram
1.00 plakater (0,88, 1,12)
D
m
- median effekt dose, mg /kg
0.010 plakater (0,006, 0,015)
s
- standardavvik, gram
0,13 plakater (0,11, 0,16)
Figur 3 Effekt av endotoksin dose på matinntaket og avføring utgang. Tolv timers matinntak og fekal utgangs ble overvåket i løpet av en 4 dagers periode etter injeksjon av bærer eller forskjellige doser av endotoksin. Den utstyrt dose-responskurver for matinntak (A) og fecal utgang (B) for de første 12 timene etter injeksjonen av endotoksin er vist (n = 6 mus per dose).
Koeffisientene montert generell modell som undersøkte data i løpet av de første fire nettene er gitt i tabell 2. Figur 4A viser den tilpassede modellen som dose-responskurver for en "gjennomsnittlig" mus, mens figur 4B plotter de tidsavhengige kurver for hver mus separat. Modellen fanger opp de fleste av de observerte fenomener bortsett fra "overshoot" på den fjerde natten (84 timer). Et mer komplisert form ville være nødvendig for å fange opp den effekt. De resulterende c-multiplikator indikerer at, som musene gjenvunnet, økte median-effekt dosen 11-ganger hver night.Table 2 parametre av endotoxin dose-responskurver for matinntaket over tid. Resultater av tilpassede modellen undersøke effekten av ulike doser av endotoksin på nattlige matinntaket utvides til å omfatte de fire nettene etter LPS-injeksjon.
Parameter
Estimate

95% konfidensintervall
A
- minimum gram
0,13 plakater (0,05, 0,21)
B
- baseline, gram
3,50
(3,61, 3,72)
D
m product: (1) Anmeldelser - median effekt dose for den første natten, mg /kg
0.010 plakater (0,007, 0,012)
c
- multiplikator av medianeffektdose for hver ekstra natt
11,00 product: (8,62, 14,04)
s
B
- standardavvik av B, g

0,27 product: (0,18, 0,39)
s
D
- standardavvik logD
m product: (1)
, g
0,47 product: (0,33 , 0,66)
s
- reststandardavvik, gram
0,23 plakater (0,20, 0,26)
Figur 4 Effekt av endotoksin dose over time.A. Den utstyrt dose-responskurver for matinntak er vist for de fire nettene etter injeksjon illustrerer økningen i median effektiv dose hver kveld. B. Tidsavhengig matinntak kurver er vist for individuelle mus ved hver dose. (N = 6 mus per dose)
Redusert matinntak og fekal utgangseffekter var felles for andre fornærmelser
Andre klinisk relevante fornærmelser som resulterer i ileus ble undersøkt ved hjelp av bevisst mus modell. En forbigående reduksjon i matinntaket og avføring utgang ble identifisert etter laparotomi /tarm manipulasjon (figur 5), termisk skade (figur 6), og cerulein indusert akutt pankreatitt (figur 7). Alle tre fornærmelser forårsaket en signifikant reduksjon i næringsinntak (52%, 21% og 54% av kontroll henholdsvis) og fekal utgang (50%, 25% og 67% av kontroll henholdsvis) i løpet av de første 12 timene. Virkningene av cerulein indusert akutt pankreatitt induksjon på nattlige matinntak og fekal utgangs ikke nå sitt laveste nivå til den andre scotophase (37% av kontroll for matinntak, 36% av kontroll for fecal output) etter cerulein injeksjon indikerer at, i forhold til andre fornærmelser, mer tid var nødvendig for å utvikle den fulle effekt (figur 7). Figur 5 Induksjon av postoperativ ileus. Tolv timers målinger er plottet som beskrevet i forklaringen til figur 2. Mus ble anestetisert, en laparotomi utført, og cecum manipulert med bomulls tippet vattpinner i 1 minutt ved tid 0 (heltrukket linje). Kontrollmus mottok anestesi i et lignende tidsrom (stiplet linje). N = 10 mus pr gruppe. * P
= 0,008 vs. kontroll på tilsvarende tidspunkt.
Figur 6 Induksjon av ileus etter termisk skade. Tolv timers målinger ble plottes som beskrevet i forklaringen til figur 2. En 20% total kroppsoverflate skålde brenningen ble indusert ved tid 0 (heltrukket linje). Kontrollmus mottok bare anestesi (stiplet linje). N = 3 mus per gruppe. * P
= 0,05 vs. kontroll på tilsvarende tidspunkt.
Figur 7 Virkning av cerulein indusert akutt pankreatitt på matinntaket og avføring utgang. Tolv timers målinger ble plottet som beskrevet i forklaringen til figur 2. Syv time injeksjoner av cerulein (50 ug /kg pr dose) ble administrert etter en 12-timers fasteperiode slutter ved tid 0 (heltrukket linje) og sammenlignet med kontroll mus som mottok bæreren alene (stiplet linje). N = 6 mus per gruppe. * P
= 0,009 vs kontroll ved tilsvarende tidspunkt.
Spesifisiteten av cerulein og laparotomi /tarm manipulasjon for å bevirke forbigående reduksjon i matinntak og fekal utgangs ble vurdert ved å endre graden av fornærmelser. Som med endotoksin behandling, var det en direkte sammenheng mellom graden og størrelsen av effektene (figur 8). Akutt pankreatitt ble indusert i mus ved hjelp av en serie med enten tre eller syv time injeksjoner av cerulein. Figur 8A viser effekten av hver serie på nattlige matinntaket i løpet av de påfølgende tre netter. Tre cerulein injeksjoner resulterte i redusert matinntak for de to første nattlige måltider (P
≤ 0,013 vs. tilsvarende kontroller) og tilbake til normale nivåer av den tredje natten. En mer markert respons ble sett etter sju cerulein injeksjoner, med redusert matinntak tydelig for alle tre netter (P
< 0,0001 vs. tilsvarende kontroll). Statistisk sammenligning av de to fornærmelser viste en signifikant forskjell (P
= 0,0018) ved hvert tidspunkt indikerer at størrelsen av responsen var direkte relatert til graden av fornærmelse. Et lignende resultat ble observert når laparotomi /tarm manipulasjon ble anvendt for å indusere ileus (figur 8B). Både laparotomi etterfulgt av enten 1 minutt cecum manipulering eller 4 minutters manipulering av tynntarmen, cecum og tykktarm resulterte i en reduksjon for hver av de påfølgende tre natten måltider (P
= 0,04 sammenlignet med tilsvarende kontroll). Forskjeller mellom de to fornærmelser ble ikke så uttalt som effekten av cerulein doser, men resulterte i en betydelig forskjell for den første natten (P
= 0,0024). Figur 8 Korrelasjon av fornærmelse alvorlighetsgrad og omfanget av ileus.Nocturnal matinntak for tre netter etter fornærmelse ble plottet for A. etter 3 (blå) eller 7 (rød) time injeksjoner av cerulein og B. etter laparotomi og enten en minutt cecum manipulasjon (blå) eller en 4 minutters manipulering av GIT (rød). Tilsvarende kontrolldata er vist for hver tomt (stiplet linje). Statistiske sammenligninger er diskutert i teksten. Verdier er gjennomsnitt ± SEM.
Redusert matinntak korrelert med forsinket tømming
å validere bruken av disse enkle tiltak som markører for ileus, vi undersøkte ventrikkeltømming og intestinal transitt i denne modellen. Gastrisk tømming av et metylcellulose /fenol-rødt fargestoff måltid ble målt i mus som hadde fått administrert 0,1 mg /kg IP LPS en time før sonde (figur 9A). En periode med rask tømming ble sett i begge styre mus og mus administrert endotoksin i løpet av de første 15 minuttene etter inntak. Mengden av fargestoff tømt fra magen til kontrollmusene fortsatte å øke mellom 15 og 45 minutter etter inntak, mens tømming fra mus administreres endotoksin var statisk i samme periode. Samlet ventrikkeltømming en time etter LPS administrasjon ble dramatisk redusert i forhold til kontrollene (P
< 0,0001 vs. tilsvarende kontroll i 15, 30 og 45 minutters tidspunkter). Den 30-minuttpris av magetømmingen ble også betydelig redusert i forhold til kontroller 12 timer etter LPS administrasjon (P
= 0,0053), men utvinnes for å kontrollere nivåer av 36 timer etter LPS administrasjon (figur 9b). Gjenvinningen av gastrisk tømming tilsynelatende forut for utvinning av matinntaket som normale nivåer av inntak av mat var ikke tydelig før den tredje eller fjerde natten etter LPS-administrering (se figurene 1 og 2A). Grafisk vurdere sammenhengen mellom de to utvinningsgraden, ble nattlige matinntak plottet mot magetømmingen målt 12 timer før den tilsvarende nattlige måltidet (figur 9C). I hovedsak spurte vi om nattlige matinntak data kan bli "spådd" av forutgående ventrikkeltømming måling. Begge datasett ble plottet som prosent av kontrollmålinger. Den resulterende helling av en indikerer en positiv korrelasjon mellom inntak av mat og gastrisk tømming. Figur 9. Effekt av endotoksin på gastrisk tømming. A. Gastrisk tømming kurve generert en time etter endotoksin (0,1 mg /kg, heltrukket linje), eller bærer (stiplet linje) injeksjon. En metylcellulose /fenol rødt fargestoff måltid ble gitt til ulike grupper av mus ved intragastrisk sonde. Mengden av fargestoff igjen i magen etter en 1, 15, 30 eller 45 minutters transitt periode ble målt. Den prosent av farvestoff tømt ble beregnet i forhold til den totale mengde av fargestoff gavaged. Hvert datapunkt representerer målinger fra 3 - 7 mus. B. Utvinning av gastrisk funksjon ble overvåket ved måling av 30 minutter tømmingen ved forskjellige tidspunkter etter administrering av endotoksin (0,1 mg /kg, heltrukket linje), eller bærer (stiplet linje). N = 3-12 mus per gruppe. C. Korrelasjon tomten sammenligne utvinning av matinntak og magetømming. Datapunkter representerer prosentandeler av den tilsvarende kontroll.

• Lunge lymphangitic karsinomatose som en primær manifestasjon av magekreft i en ung voksen: en kasuistikk og gjennomgang av literature
• Gastric transitt og tynntarmen tid og motilitet vurdert av en magnet sporing system