Tietoinen hiirimallissa mahalaukun ileus käyttää kliinisesti merkittävää päätepisteet

Tietoinen hiirimallissa mahalaukun ileus käyttää kliinisesti merkittäviä päätepisteet
tiivistelmä
tausta
Mahalaukun ileus on ratkaisematon kliininen ongelma, ja nykyinen hoito rajoittuu tukitoimiin. Mallit ileuksesta käyttää anestetisoiduilla eläimillä, lihas liuskoja tai eristetyn sileän lihaksen soluissa eivät riittävästi jäljentää kliinisessä tilanteessa. Siten aiemmat tutkimukset Näiden tekniikoiden eivät ole johtaneet selkeä käsitys patofysiologiaan ileus. Mahdollisuutta käyttää ravinnon ja ulosteen lähtö niin yksinkertaista, kliinisesti merkittävää päätepisteet seurannan ileus tietoisessa hiirimallissa arvioitiin vakavuuden arvioinnissa ja ajan kulku monenlaisten traumojen tiedetään aiheuttavan ileus. Tool Menetelmät
Viivästynyt ruokailu ja ulosteen ulostulo liittyy ileus tarkkailtiin intraperitoneaalisen injektion jälkeen endotoksiinin, laparotomy suoliston manipulointi, lämpövaurioilta tai seruleiini aiheuttama akuutti haimatulehdus. Korrelaatio heikkeni syömisen jälkeen endotoksiinin injektiota mahalaukun ileus validoitiin mittaamalla mahalaukun tyhjenemistä. Vaikutus endotoksiinin yleisen toiminnan tasolla ja ruokinta käyttäytyminen määritettiin myös. Ohutsuolen kauttakulku mitattiin fenoli punainen merkki.
Tulokset
Jokainen loukkaus aiheutti ohimenevää ja vertailukelpoinen lasku ravinnon ja ulosteen ulostulo sopusoinnussa kliinistä kuvaa ileus. Päätepisteet olivat erittäin herkkiä pienille muutoksille pieniä annoksia endotoksiinin, laajuus suoliston manipulointi, ja seruleiini annos. Viive ravinnon suoraan korreloi mahalaukun viivästynyttä tyhjentymistä. Muutokset yleiseen toimintaan ja ruokinta käyttäytyminen eivät riittäneet selittämään heikkeni syömisen. Suoliston pysyi ennallaan aikoina mitattu.
Päätelmä
Ruoalla ja ulosteen ulostulo ovat herkkiä markkereita mahalaukun toimintahäiriön neljässä kokeellisissa malleissa ileuksesta. Hiiressä, viivästynyt mahalaukun tyhjenemistä näyttää olevan merkittävä syy anorexic vaikutus liittyy ileus. Mahalaukun toimintahäiriö on tärkeämpää kuin ohutsuolen toimintahäiriöitä tässä mallissa. Talteenotto vatsan toimintaa näyttää olevan samanaikaisesti paksusuolen elpymistä.
Tausta
Ileus on yleinen postoperatiivisia esiintyminen ominaista ohimenevää ruuansulatuskanavan toiminnan. Lisäksi vatsaonteloleikkaus sepsis, trauma, haimatulehdus, anesteettien, ja opioidianalgeettien liittyy myös ileus. Mekanismit ileus liittyy hermo estosignaaleista ja humoraalisen tekijät, kuten paracrine aineet ja suoliston hormonit [1-3]. Mikään yksittäinen tapahtuma tai seikka on syytetty selvästi olevan vastuussa; on todennäköisempää, että useita välittäjäaineita toimivat eri aikoina koko aikana kunnossa. Nämä välittäjäaineiden kommunikoida koko ruoansulatuskanavassa. Esimerkiksi kirurgiset manipulointi distaalisen suoliston voi aiheuttaa mahalaukun toimintahäiriö [4-8]. Perustamisensa jälkeen ileus ajatellaan ratkaisemaan eri tahtiin ihmisillä, joilla on toiminnallinen esto, muutaman tunnin sisällä ohutsuolessa, 1-2 päivää sisällä vatsaan ja 2-3 päivää koolonissa [9, 10].
Monia viimeaikaiset tutkimukset ileuksesta ovat kiinnittäneet huomion ohutsuolen sileään lihakseen toimintahäiriöitä eristetyssä lihas nauhat [11-14]. Heikkous lihasten nauhan menetelmällä on kuitenkin kyvyttömyys tarkastella monimutkainen vuorovaikutus mukaan lukien aivot-gut yhteisvaikutuksista tai elinspesifisiin hermo refleksit. Samoin in vitro
valmisteissa vaatia kudoksen sato määrittämään kunto ja eivät salli järjestelmiä lähestymistapa ongelmaan ileuksesta. Saatavuus selvitettiin genomin sekvenssi-informaatiota hiiren on tehnyt soveltamalla järjestelmien lähestymistapa toteutettavissa käyttämällä globaalin geeniekspressioanalyysissä. Kuitenkin fenotyyppisiä luonnehdintoja ileuksesta eläinmalleissa, jotka tarjoavat koko järjestelmän tiedot puuttuvat. Kehittäminen Tällaisen mallin hiiressä olisi hyödyllistä.
Kliinisessä ympäristössä, resoluutio ileuksesta määräytyy uudelleen normaalin syöminen käyttäytymistä ja kulkua flatus tai ulosteesta. Huolimatta siitä, että ravinnon ja ulosteen ulostulo ovat yksinkertaisia ​​mittauksia ruuansulatuskanavan toiminnan niitä ei ole tarkasti analysoitu eläinmalleissa ileus. Tässä kuvaamme tietoinen hiirimallissa, joka käyttää ruoan saanti ja ulosteen lähtö seurata ajan kuluessa ileus, jolloin mittaus suuruudesta ja kestosta kunnon samassa eläimessä. Tämä integroiva lähestymistapa määritellään fenotyyppi suolen tutkimusten helpottamiseksi Mahdollisten kliinisesti merkittäviä interventioita tai ehkäiseviä strategioita. Lisäksi tämä tajuissaan hiiri malli tarjoaa mahdollisuuden tutkia molekyylien liittyviä tapahtumia ileus. Tool Menetelmät
Eläimet
Mies C3H hiiriä 8-12 viikkoa vanhoja, käytettiin koko tutkimuksen ajan. Hiiriä pidettiin 12 tunnin valo /pimeä sykli ja vapaa pääsy normaalia jyrsijöiden ruokaa ja vettä. Jatkuvaan ravinnon seuranta tutkimuksessa hiirille annettiin 20 mg pölytön ruoka pelletit (Bio-Serv, Frenchtown, NJ). Kaikki toimenpiteet hyväksytään ja niitä seurataan Utahin yliopistossa Institutional Animal Care ja käyttö komitea.
Ravinnon ja ulosteen lähdön mittaaminen
Hiiret erotettiin yksittäisiksi häkeissä vapaasti vettä ja taarattuun määrä ruokaa. Elintarvikkeet, ulosteen ja hiiren massa mitattiin 12 tunnin välein alussa jokaisen scotophase ja photophase (7 AM ja yhdeksäntoista). Ruuan määrää kulutetaan yli 12 tunnin jakson aikana laskettiin erotus massa ruokaa päättyessä ja määrä ruokaa alussa kauden. Ulosteen ulostulo määritettiin massasta ulosteen pellettejä kerätään ja mitataan lopussa 12 tunnin aikana. Mahdollinen vaikutus ulosteen pelletin nestehukka yli 12 tunnin aikana käsiteltiin pilottitutkimuksiin jossa ileus indusoitiin käyttäen joko 0,1 mg /kg LPS tai laparotomy seurasi 4 minuutin suoli manipulointia sekä vastaavan valvontaa. Ulosteen pelletit kerättiin 12 tunnin välein ja ulosteen tuotanto määritettiin kolmella tavalla: 1) massan määritys välittömästi keräämisen (kuten tässä tutkimuksessa), 2) massan määritys sen jälkeen vielä 24 tunnin nestehukka aikana, ja 3) laskemalla ulosteen pellettejä . Lasku ulosteen ulostulon suhteessa kontrolleihin, kun ileus induktio oli samanlainen eikä merkittävästi erilaiset kolmesta mittausmenetelmät (tuloksia ei ole esitetty). Olemme päätellä, että mahdollinen vaikutus nestehukka oli merkityksetön. Sen jälkeen kolmen päivän Akklimatisaatiojakso, hiiret jaettiin satunnaisesti koeryhmään ja huijausta ryhmä. Tietojen keruu aloitettiin 24 tuntia ennen induktiota ileus ja jatkui induktion kunnes normaali (lähtötilanteessa) vuorokausirytmiä malli ruokinta ja ulosteen lähtö palautetaan. Jatkuvaan ravinnon seuranta, hiiret sijoitettiin yksittäisiin metabolisen kammioihin on vapaa pääsy veteen. Yhden 20 mg pölytön ruokaa pellettejä toimitettiin vaadittaessa käyttämällä Coulbourn Instruments Habitest järjestelmä (Allentown, PA) varustettu pellettisyöttimelle ja ruokaa aallonpohjasta. Läsnäolo ruokanapin kourun sisällä estetty lähetetyn valon valodiodi saavuttaa valoilmaisimen. Kun hiiri poistetaan pelletti, uusi pelletti otettiin toimitettu. Tämä vaihto on automaattisesti seurataan ja kirjannut Graphic valtion Notation 2 ohjelma (Coulbourn Instruments, Allentown, PA). Hiiret totutettu korin 4 päivää ennen tiedonkeruuta.
Induktio ileuksesta
jälkeen acclimation ja perustietoja keruujaksoja, ileus aiheutettiin 30 minuuttia ennen scotophase ellei toisin mainita. Matkia sepsis, lipopolysakkaridia (E. coli
O111: B4, List Biological Laboratories, Campbell, CA) annettiin injektiona vatsaonteloon. Annoksesta riippuva suhde endotoksiinin ravinnon kulutusta ja ulosteen tuotanto tutkittiin määrittämällä aika kursseja kunkin päätepiste annon jälkeen 0,005, 0,01, 0,02, 0,04, 0,1, 0,2, ja 0,4 mg /kg hiiri massaa endotoksiinia. Kontrollihiiret saivat samanlainen määrä suolaliuosta kantajaa. Leikkauksen jälkeiset ileus indusoitiin hiirissä nukutettiin isofluraanilla joko laparotomiaa seuraa manipulointi umpisuoli 1 minuutin tai laparotomy, sisäelinten poistaminen päälle suolaliuoksella kostutetulla sienellä ja manipulointi ohutsuolen, umpisuoli ja paksusuolen yhteensä manipuloinnin aikaa 4 minuuttia . Manipulointi suoritettiin käyttäen pumpulipäinen vanupuikkoja. Sulkemisen jälkeen viilto ompeleet, hiiren poistettiin anestesian ja annettiin toipua alla lämpeneminen lampun 30 minuuttia ennen tiedonkeruuta uudelleen. Vaikutusten arvioimiseksi on lämpövaurioilta, 20% koko kehon pinta-alasta (TBSA) Palovammageeli polttaa aiheutettiin hiirille josta truncal hiukset poistettiin. Steriloida polttaa aiheutettiin upottamalla paljaan selkäpuolen iholle 70 ° C vedessä 7 sekuntia. Välittömästi sen jälkeen palovamma, hiirille annettiin 1 ml vatsaonteloon (IP) Ringerin laktaattiliuosta. Hiirille annettiin 0,5 ml LR IP 12 tunnin välein 72 tunnin kuluttua palovamman. Eläimillä oli truncal hiukset pois ja sai samanlaisen ajan anestesian aikana ja elvytys LR. Akuutti haimatulehdus aiheutettiin hiirille kahdeksantoista tunnin paaston aikana käyttäen 3 tai 7 tunnin IP-injektioita seruleiini (50 ug /kg /annos). Sham käsitelty kontrolli hiirille annettiin vastaavia määriä operaattorin (0,1% BSA PBS: ssä). Ajoitus pistosten koordinoi siten, että viimeisen injektion tapahtui alussa scotophase.
Mahalaukun tyhjenemistä ja suoliston
jälkeen 2 tunnin nopeasti tyhjään vatsaan sisältöä, hiirille annettiin 200 ui 1,5% (w /v) metyyliselluloosaa, 0,5% (w /v) fenolipunaliuosta normaalissa suolaliuoksessa letkulla. Kolmekymmentä minuuttia letkuruokinnan jälkeen, hiiret tapettiin taittamalla niiltä niskat, vatsanaukaisuviillon suoritetaan ja mahan eristettiin puristamalla pohjukaissuolen lähellä mahanportin ja ruokatorven on cardia. Koko menettely uhraamaan kiristys tehtiin alle minuutin. GIT poistettiin, erottamalla mahassa suolistossa. Ohutsuolen leikattiin umpisuoli /paksusuoli ja jaettu neljään yhtä pitkiä segmenttejä peräkkäisellä bisection. Fenolin määrä punaista mahassa ja suoliston segmenttien määritettiin spektrofotometrisesti homogenisoinnin jälkeen, kuten on kuvattu [15]. Mahalaukun tyhjenemistä arvioitiin prosentteina väriaineen jäljellä vatsassa suhteessa koko väriaineen määrä talteen standardointia ryhmä hiiriä, jotka tapettiin välittömästi letkuruokinnan jälkeen. Suoliston määritettiin mittaamalla eristämiseen väriaine sisällä ohutsuolen segmenttiä ja paksusuolen numeroitu 1-5, proksimaalisesta distaaliseen. Geometrinen keskipiste väriaineen kauttakulku laskettiin jokaiselle eläimelle (Σ (% väriaine segmenteittäin X segmentin numero) /100) kuvatulla [16].
Mean verenpaine
Hiiret nukutettiin isofluraanilla ja asetetaan 37 ° C lämpötyyny. Polyeteeniä kanyyli (PE 10), joka on yhdistetty paineanturiin, lisättiin noin 5 mm reisivaltimoon. Mean valtimopaineen ja hengitystiheys (laskettuna yli 1 minuutti) tallennettiin viiden minuutin välein. 10. minuutilla valvonnan vakauden varmistamiseksi paineen ja hengitystiheys, LPS (25 ug /ml, annoksina 0,1 ja 0,4 mg /kg) tai kantajaa injektoitiin IP. Verenpaine ja hengitystiheys tallennettiin viiden minuutin välein yhteensä 1 tunti.
Aktiivisuusmääritys
Digital videokuvaa rekisteröitiin käyttäen tietokonepohjaisen järjestelmän, joka koostuu WebCam (PC-Cam 300, Creative Labs, Milpitas , CA) ja webCam Control center versio 5.6 ohjelmiston http: //www. webcam-ohjaus-keskus. com. Kamera asetettiin yläpuolelle neljän tavallisen hiiren häkeissä lanka topit. Sijasta pentueen, yhden silputtu paperia asetettiin kussakin häkissä vuodevaatteet. Pimiössä valo varustettu yhdellä 15 watin lamppu ja Kodak GBX-2 suojavalossa suodatin (Eastman Kodak, Rochester, NY) säädetty valaistus. Yksittäiset hiiret laitettiin kussakin häkissä vapaasti vettä ja taarattuun määrä ruokaa. Säilyttääkseen esteetön näkymä, vesi annettiin lasipullossa ja ruoka oli rajoitettu 4 standardin jyrsijämuonaa pellettejä (noin 5 g kukin). Hiiret totutettu häkkeihin 5 päivää ennen tiedonkeruuta. Hiirille annettiin suolaliuosta, 0,1 mg /kg LPS: ää tai 2 mg /kg LPS: ää pidennetyn tavalla 30 minuuttia ennen scotophase. Kuvat kirjattiin 1 kuvaa sekunnissa 10 sekuntia 10 minuutin välein 36 tuntia. Tutkijat sokaisi hoitoon sijoitettiin tallennettuja kuvia varten hiiren toimintaa ja hiiri aiheuttama liike ruokaa pellettejä. Aktiivisuus pisteytettiin jos brutto hiiren liikuttaminen ruumis oli havaittavissa jonkin 10 sekunnin kuvia. Samoin ruokanapin liike teki jos asema tahansa ruoka pelletit olivat erilaisia, kun 10 kuvaa verrattiin. Uusia ruoka pelletit pantiin ja ruokaa kirjattu massa 12 tunnin välein, jotka vastaavat scotophase ja photophase.
Tilastolliset analyysit
Tilastolliset vertailut tehtiin käyttämällä kertoma ANOVA tai toistuvia ANOVA (aikaa kurssin analyysit) ja Fisherin suojattua pienimmän merkittävän erotus (PLSD) post-hoc testit. Vertailut katsottiin tilastollisesti merkitsevä P
< 0,05 tasolla. Arvot ilmaistaan ​​keskiarvona ± SEM, ellei tietoja yksittäisistä hiiristä esitetään.
Sen määrittämiseksi mediaani vaikutuksettoman annoksen LPS ravinnon kulutusta ja ulosteen ulostulo, 12 tunnin (ensimmäinen yö) Tiedot sovitettiin annos -suhteen käyrä. Malli oli käänteinen oikeasuhteisuuden muodossa siirtymät:
Ruoalla
=
+ (BA) * D
m Twitter /(Annos
+ D
m
) B + virhe

jossa annos
on lääkkeen annos A
on pienin ravinnon satunnaisilla suuria annoksia (horisontaalinen asymptootti), B
on lähtötilanteessa ravinnon (kun annos
= 0) ja D
m
on mediaani-vaikutus annos, joka on annos, jolla ravinnon on välissä perustason B
ja pienin
. Virhe
aikavälillä seurausta välinen-eläinten väliset erot ravinnon, oletetaan olevan normaali jakauma, jonka keskiarvo on 0 ja varianssi suhteessa vastaus: error ~ N (0, s
2 (Food Intake ))
. Säätö vaihtelevuutta riippuen vaste oli tarpeen, koska välissä-eläinten väliset erot vähentynyt ravinnon vähentynyt. Koska kukin tietopiste vastaa eri hiiri, havainnot ovat riippumattomia. Edellä malli ulotettiin kaikkina ajankohtina mallintamalla mediaani vaikutuksettoman annoksen D
m
funktiona aika:
D
m
(T) = D
m
(1) c
T
, jossa T
on aika "yötä"
joka on joka ilta tarvittava annos tuottavat mediaani vaikutus voimistuu c
kertaiseksi. Lisäsimme myös kaksi satunnaista vaikutus termejä: välinen-hiiri vaihtelevuutta mediaani vaikutuksettoman annoksen D
m
(1) B (log-asteikko) ja lähtötilanteen ravinnon B
. Näitä hiiri-termejä avulla voimme mukautua kuluessa-hiiri riippuvuus havainnoista.
Tulokset
Endotoxin tilapäisesti laskea ravinnon ja ulosteen tuotannon annoksesta riippuvaisella tavalla
Käsittelemätön (lähtötilanne) ja operaattorin käsiteltyihin hiiriin osoittanut vuorokausirytmin kuvio ruokailu. Hiiret otti suuren aterian aikana varhain scotophase ja pienemmän aterian loppupuolella scotophase tai alussa photophase. Vaikka ruoan saanti oli alempi valoisan jakson aikana, hiiret ilmeisesti ennakoinut vireillä tumma vaiheen ravinnon lisäsi loppupuolella photophase. Anto endotoksiinia hetkellä 0 johtivat välittömään ja näkyvään väheneminen ravinnon (kuvio 1). Ruokinta käyttäytyminen alkoi elpyä seurannut photophase ja scotophase kanssa paluuta normaaliin ohjeeseen kolmas scotophase injektion jälkeen. Kuva 1 Circadian kuvio ravinnon ja vaikutus -endotoksiinin. Ruoan nauttiminen seurattiin jatkuvasti. Endotoksiinia (0,1 mg /kg, yhtenäinen viiva) tai kantajaa (katkoviiva) annettiin IP hetkellä 0. mustat palkit abskissa osoittavat scotophase. Tiedot edustavat keskimääräistä mittaukset kuusi hiirtä 3 tunnin ajan roskakorit.
Koska diurnal ruokinta käyttäytymistä hiirten useimpien ruoasta pimeinä vaiheessa, myöhemmät kokeet suoritettiin analysoimalla ravinnon edeltäneen 12 tunnin valoisa aika. Tämä menettely mahdollisti samanaikaisen hyödyntämisen ulosteen pellettejä. LPS käyttö aiheutti tilastollisesti merkittävä väheneminen yöllisen ruoan saanti ensimmäisellä (17% kontrollista), toinen (60% kontrollista), ja kolmas (83% kontrollista) scotophases (kuvio 2A). Ruoan nauttiminen taas lähes normaalitasolle kolmannen scotophase kanssa täydellistä toipumista vuorokausirytmin ohjeeseen neljännen scotophase. Nämä tiedot olivat yhdenmukaisia ​​alustavat tulokset käyttämällä jatkuvaa elintarvikevalvonnan. Vaikka määrä ruokaa kulutetaan ensimmäisellä photophase ollut merkitsevää eroa ohjaus hiirillä ja LPS-käsitellyistä hiiristä oli kasvanut merkittävästi ravinnon toisella photophase osoittaa, että aikana toipuminen loukkaus, aaltokuvio vuorokausirytmin ravinnonoton pysyi kostutetulla. Kuvio ulosteen tuotanto oli samanlainen kuvio ravinnon kanssa inhiboi merkittävästi ulosteen ulostulon ensimmäisen (26% kontrollista), toinen (51% kontrollista), ja kolmas (86% kontrollista) scotophases (kuvio 2B). Toisin kuin ravinnon data, ulosteen tuotanto lisääntyi merkittävästi verrattuna verrokkiryhmään aikana neljäntenä päivänä injektion jälkeen (116% kontrollista). Kuva 2 induktio ileuksesta jälkeen -endotoksiinin. Mittaukset tehtiin 12 tunnin välein niin, että kukin datapiste edustaa ravinnon (A) tai ulosteen ulostulon (B), joka vastaa edellisen scotophase tai photophase. Bars pitkin abskissa osoittavat scotophase. Endotoksiinia (0,1 mg /kg, yhtenäinen viiva), tai kantaja (katkoviiva) annettiin vatsaonteloon ajankohtana 0 (nuoli). Datapisteet esitetään keskiarvona ± SEM (n = 9 hiirtä per ryhmä). * P
= 0.02 vs. kontrolli vastaaviin ajankohtana toistuvasti ANOVA ja Fisherin PLSD.
Annoksesta riippuvaa suhdetta endotoksiinin ravinnon kulutusta ja ulosteen tuotanto tutkittiin määrittämällä aika kursseja kunkin päätepiste annon jälkeen erilaisten annosten endotoksiinin. Jokainen annos johti tilastollisesti merkitsevä lasku ravinnon ja ulosteen ulostulo ensimmäisellä scotophase siten kynnys annos endotoksiinia oli alle 0,005 mg /kg IP. Arvioidut parametrit ja niiden 95% luottamusvälit on esitetty taulukossa 1 ja juoni havaitun datan asennettu annos-vaste käyrät on esitetty kuvassa 3. Molemmat sopii aiheuttaa samanlaisia ​​johtopäätöksiä: mediaani vaikutuksettoman annoksen D
m
oli noin 0,01 mg /kg ja siellä näytti olevan nollasta vähintään ravinnon /ulosteen lähtö suurillakin doses.Table 1 parametrit 12 tunnin endotoksiinia annos-vaste-käyrä. Tulokset sovitetun mallin tutkii kyseisten erilaisten annosten endotoksiinin ravinnon kulutusta ja ulosteen ulostulo ensimmäisellä scotophase näytetään.
Parameter
Arvio

95%: n luottamusväli
Food Intake

- vähintään grammaa
0,16
(0,08, 0,24) B B
- lähtötilanteessa, grammaa
3,27
(2,90, 3,64) B D
m
- mediaanivaikutus annos mg /kg
0,011
(0,007, 0,015) B s
- standardin poikkeama, grammaa
0,33
(0,28, 0,41) B ulosteen lähtö

- vähintään grammaa
0,11
(0,08, 0,14) B B
- lähtötilanteessa, grammaa
1,00
(0,88, 1,12) B D
m
- mediaanivaikutus annos mg /kg
0,010
(0,006, 0,015) B s
- keskihajonta, grammaa
0,13
(0,11, 0,16) B Kuva 3 vaikutus endotoksiinin annos ravinnon ja ulosteen ulostulo. Kaksitoista tuntia ravinnon ja ulosteen tuotanto seurattiin yli 4 päivän kuluessa injektion kantajaa tai erilaisten annosten endotoksiinia. Asennettu annos-vaste käyrät ravinnon (A) ja ulosteen ulostulo (B) ensimmäisen 12 tunnin kuluttua endotoksiinin injektiota on esitetty (n = 6 hiirtä per annos).
Kertoimet asennettu yleistä mallia, jossa tarkasteltiin datan ensimmäinen neljä yötä on esitetty taulukossa 2. Kuvio 4A esittää sovitetun mallin kuin annos-vaste käyrät "keskimääräinen" hiiri, kun taas kuva 4B piirtää ajan funktiona käyrät kullekin hiirelle erikseen. Malli kaappaa suurimman osan havaitut ilmiöt paitsi "ylitys" neljäntenä yön (84 tuntia). Monimutkaisempi muoto olisi tarpeen kaapata em. Tuloksena c-kerroin osoittaa, että hiiret talteen, mediaani vaikutuksettoman annoksen kasvoi 11-kertaisesti kunkin night.Table 2 parametrit endotoksiinin annos-vaste käyrät ruoan saannin ajan. Tulokset sovitetun mallin tutkii kyseisten erilaisten annosten endotoksiinin yöllisen ravinnon laajennettava sisältämään neljä yötä LPS-injektion jälkeen.
Parameter
Arvio

95%: n luottamusväli

- vähintään grammaa
0,13
(0,05, 0,21) B B
- lähtötilanteessa, grammaa
3,50
(3,61, 3,72) B D
m
(1) B - mediaanivaikutus annos ensimmäinen yö, mg /kg
0,010
(0,007, 0,012) B c
- kerrointa mediaanivaikutusyhtälöstä annos jokaista yö
11,00
(8,62, 14,04) B s
B
- keskihajonta B, g

0,27
(0,18, 0,39) B s
D
- keskihajonta LoGD
m
(1) B, g
0,47
(0,33 , 0,66) B s
- jäljellä keskihajonta, grammaa
0,23
(0,20, 0,26) B Kuva 4 vaikutus endotoksiinin annokseen yli time.A. Asennettu annos-vaste käyrät ravinnonotto esitetään neljän yön injektion jälkeen havainnollistaa kasvu mediaani tehokasta annosta joka ilta. B. Aika-riippuvainen ravinnon käyrät esitetään yksittäisten hiirten kullakin annoksella. (N = 6 hiirtä per annos) B heikkeni syömisen ja ulosteen lähdön vaikutukset olivat yhteisiä muille solvausten
Muut kliinisesti merkittäviä solvauksia, jotka johtavat ileus tutkittiin käyttämällä tajuissaan hiirimallissa. Ohimenevä väheneminen ravinnon ja ulosteen lähtö tunnistettiin jälkeen laparotomy /suoliston manipuloinnista (kuva 5), ​​lämpövaurioilta (kuva 6), ja seruleiini aiheuttama akuutti haimatulehdus (kuva 7). Kaikki kolme loukkaukset aiheutti merkittävä väheneminen ruoan saanti (52%, 21% ja 54% valvonnan vastaavasti) ja ulosteen ulostulon (50%, 25% ja 67% kontrollilla) ensimmäisten 12 tunnin aikana. Vaikutukset seruleiini aiheuttama akuutti haimatulehdus induktio öinen ravinnon ja ulosteen tuotanto ei pienimmillään kunnes toinen scotophase (37% valvonnan elintarvikkeiden saannin, 36% valvonnan ulosteen lähtö) jälkeen seruleiini injektion osoittaa, että verrattuna muut solvauksia, enemmän aikaa kehittämiseen vaadittu täysi vaikutus (kuvio 7). Kuva 5 induktio leikkauksen jälkeinen ileus. Kaksitoista tuntia mittaukset piirretään kuvattu legenda kuviossa 2. Hiiret nukutettiin, vatsanaukaisuviillon suoritettu, ja umpisuoli manipuloida pumpulipäinen vanupuikkoja 1 minuutin ajankohtana 0 (yhtenäinen viiva). Ohjaus hiiret saivat anestesian vastaavan ajan (katkoviiva). N = 10 hiirtä ryhmässä. * P
= 0.008 vs. valvontaa vastaavan ajankohtana.
Kuva 6 induktio ileuksesta jälkeen lämpövaurioilta. Kaksitoista tuntia mittaukset piirretään kuvattu legenda Kuvio 2. 20% koko kehon pinta-alasta Palovammageeli polttaa aiheutettiin ajankohtana 0 (yhtenäinen viiva). Ohjaus hiiret saivat anestesian vain (katkoviiva). N = 3 hiirtä per ryhmä. * P
= 0.05 vs. kontrolli vastaavilla ajankohtana.
Kuvioon 7 Vaikutus seruleiini aiheuttama akuutti haimatulehdus ravinnon kulutusta ja ulosteen ulostulo. Kaksitoista tuntia mittaukset piirrettiin kuvattu legenda kuvassa 2. Seitsemän tunnin injektiota seruleiini (50 ug /kg per annos) annettiin sen jälkeen, kun 12 tunnin paasto päättyy ajankohtana 0 (yhtenäinen viiva) ja vertailuryhmän hiirtä sai harjoittaja alone (katkoviiva). N = 6 hiirtä ryhmää kohti. * P
= 0,009 vs. kontrolli vastaavilla ajankohtana.
Erityisyys seruleiini ja laparotomy /suolen manipulointia aiheuttamisesta ohimenevä väheneminen ravinnon ja ulosteen tuotanto arvioitiin muuttamalla vakavuuden loukkaukset. Kuten endotoksiinin hoidon, oli olemassa suora korrelaatio vakavuus ja suuruus vaikutuksia (kuva 8). Akuutti haimatulehdus indusoitiin hiirissä käyttämällä sarjaa Kolmen tai seitsemän tunnin injektioita seruleiini. Kuvio 8A esittää vaikutuksen kunkin sarjan öinen ravinnon yli Syntyneessä kolme yötä. Kolme seruleiini injektiot alensivat ravinnonotto kaksi ensimmäistä yöllistä ateriaa (P
≤ 0,013 vs. vastaava tarkastukset) ja palasi normaalitasolle kolmannen yöllä. Entistä voimakkaampi vaste nähtiin seitsemän seruleiini injektiot, joissa vähentynyt ravinnonotto selvää kaikille kolme yötä (P
< 0,0001 vs. vastaava valvonta). Tilastollinen vertailu kahden loukkaukset paljasti merkittävän eron (P
= 0,0018) kunakin ajankohtana osoittaa, että vasteen suuruutta liittyi suoraan vakavuuden loukkaus. Samanlainen tulos nähtiin, kun laparotomiaa /suolen manipulointia käytettiin indusoimaan ileus (kuvio 8B). Molemmat laparotomiaa seuraa joko 1 minuutti umpisuoli manipulointia tai 4 minuutin manipulointia ohutsuolen, umpisuoli, ja paksusuolen vähensi kullekin seuraavien kolmen yöaikaan ateriaa (P
= 0.04 vs. vastaava valvonta). Eroja kahden loukkauksia ei ollut niin jyrkkä kuin vaikutus seruleiini annoksia, mutta tuloksena oli merkittävä ero ensimmäisen yön (P
= 0,0024). Kuva 8 Korrelaatio loukkaus vakavuus ja suuruus ileus.Nocturnal ravinnonotto kolmen yön jälkeinen loukkaus piirrettiin A. jälkeen 3 (sininen) tai 7 (punainen) tunti injektioita seruleiini ja B. jälkeen laparotomy ja joko yksi minuutti umpisuoli manipulointi (sininen) tai 4 minuutin manipulointi GIT (punainen). Vastaava ohjausdata näytetään jokaisesta lohkosta (katkoviiva). Tilastolliset vertailut käsitellään tekstissä. Arvot ovat keskiarvoja ± SEM.
Heikkeni syömisen korreloi hidastunut mahalaukun tyhjeneminen
validoimiseksi käyttää näitä yksinkertaisia ​​toimenpiteitä markkereita ileuksesta, tutkimme mahalaukun tyhjenemistä ja suoliston tässä mallissa. Mahan tyhjenemisen on metyyliselluloosa /fenolipunaliuos aterian mitattiin hiirillä, jotka oli annettu 0,1 mg /kg IP LPS yksi tunti ennen letkulla (kuvio 9A). Aika nopea tyhjennys nähtiin sekä vertailu- hiirissä ja hiirissä endotoksiinin ensimmäisten 15 minuutin letkuruokinnan jälkeen. Väriaineen määrä tyhjentää vatsat verrokkihiirten kasvoi edelleen 15 ja 45 minuutin kuluttua letkuruokinnan taas tyhjennyksen hiiristä annettiin endotoksiini oli staattinen samana ajanjaksona. Kaiken mahalaukun tyhjenemistä tunnin kuluttua LPS: n antamisen väheni dramaattisesti suhteessa kontrolleihin (P
< 0,0001 vs. vastaava ohjaus 15, 30 ja 45 minuutin ajankohtina). 30 minuutin nopeudella mahalaukun tyhjenemistä väheni myös merkitsevästi suhteessa kontrolleihin 12 tunnin kuluttua LPS: n antamisen (P
= 0,0053), mutta talteen hallitsemaan tasoja 36 tunnin kuluttua LPS: n antamisen (kuvio 9B). Elpyminen mahalaukun tyhjenemistä ilmeisesti edelsi elpyminen ravinnonoton kuin normaalin tason ravinnon eivät olleet ilmeisiä vasta kolmantena tai neljäntenä yön jälkeen LPS: n antamisen (katso kuvat 1 ja 2A). Graafisesti arvioida korrelaatio kahden hyödyntämiskiintiöt, öinen ruokailu oli piirrettävä mahalaukun tyhjenemistä mitattiin 12 tuntia ennen kutakin yöllistä aterian (kuvio 9C). Pohjimmiltaan kysyimme yöllisen ravinnon tietoja voitaisiin "ennustaa", jonka edeltäjä mahalaukun tyhjenemistä mittaus. Molemmat aineistoja piirrettiin prosenttia valvontamittaukset. Tuloksena kaltevuus yksi osoittaa positiivinen korrelaatio ravinnon ja mahalaukun tyhjenemistä. Kuva 9 vaikutus endotoksiinin mahalaukun tyhjenemistä. A. mahalaukun tyhjenemistä käyrä tuotti 1 tunnin kuluttua endotoksiinia (0,1 mg /kg, yhtenäinen viiva) tai kantajaa (katkoviiva) injektiona. Metyyliselluloosan /fenolipunaliuos ateria annettiin eri ryhmien hiiret mahaletkulla. Väriaineen määrä jäljellä vatsassa jälkeen 1, 15, 30 tai 45 minuutin kauttakulun aikana mitattiin. Prosentuaalinen väriaineen tyhjennetään laskettiin suhteessa kokonaismäärään väriaineen letkulla. Kukin tietopiste edustaa mittauksia 3-7 hiirillä. B. talteenotto mahalaukun funktiota seurattiin mittaamalla 30 minuutin tyhjenemistä eri aikoina annon jälkeen endotoksiinin (0,1 mg /kg, yhtenäinen viiva), tai kantaja (katkoviiva). N = 3-12 hiirtä per ryhmä. C. Korrelaatio juoni vertaamalla elpyminen ravinnon ja mahalaukun tyhjenemistä. Tietopisteet edustavat prosenttiosuudet vastaavan valvonnan. * P <

• Keuhkojen lymphangitic carcinomatosis ensisijaisena osoitus mahalaukun karsinooman nuori aikuinen: tapausselostus ja katsaus literature
• Mahalaukun kauttakulku ja ohutsuolen läpikulkuaikaa ja liikkuvuutta arvioi magneetilla seuranta system