Plos ONE: Vpliv Daljša acetilsalicilne kisline Dopolnitev inducirano gastritis na neurokemiju simpatičnega nevronov dobaviteljica Prepyloric regiji prašičje Stomach

Povzetek

Ta poskus je bil zasnovan za vzpostavitev lokalizacije in nevrokemije Fenotipizacija z naklonjenostjo nevroni, ki oskrbujejo prepyloric območje prašičjega želodca v fiziološkem stanju in med acetilsalicilno kislino (ASA) inducirane gastritis. Da bi lokalizirati simpatično perikarya v želodce tako kontrolo in acetilsalicilne kisline obdelanega (skupina ASA) živali smo injicirali nevronov retrogradno sledilnega Fast Blue (PP). Sedem dni po FB injekcijo, živali so bile razdeljene v nadzor in ASA dopolnjevanje skupine. Skupina ASA je dal 100 mg /kg telesne teže, ASA oralno 21 dni. Na 28 ^{th dan so bili vsi prašiči žrtvovati s postopnim prevelikega odmerka anestetika. Nato so štirinajst-mikrometer debele kriostat odseki pripravljena za rutinsko imunofluorescenco dvojno označevanje, z uporabo primarnega antiserume usmerjena tirozin hidroksilazo (TH), dopamina β-hidroksilaze (DβH), nevropeptid Y (NPY), galanin (GAL), nevronska dušikovega oksida sintaza (nNOS), lev 5-enkefalin (Lenk), kokaina in amfetamina reguliran transkript peptid (CART), kalcitoninskemu povezanih genov peptid (CGRP), snov P (SP) in vazoaktivni intestinalni peptid (VIP). Podatki, pridobljeni v tej študiji, kažejo, da vozliščih simpatičnih živčnih vlaken, ki opravljajo prepyloric območje prašičjega želodca izvirajo iz celiakijo-lobanjske mezenterična ganglion kompleksa (CCMG). V kontrolnih živali se FB-označeni nevroni izrazil TH (94,85 ± 1,01%), DβH (97,10 ± 0,97%), NPY (46,88 ± 2,53%) in GAL (8,40 ± 0,53%). V skupini ASA, so se znižale TH- in DβH- pozitivne živčne celice (85.78 ± 2.65% in 88.82 ± 1.63% v tem zaporedju). Poleg tega ASA- inducirane gastritis posledico povečano ekspresijo NPY (76,59 ± 3,02%) in GAL (26,45 ± 2,75%) kot tudi NOVO-sintezi nNOS (6,13 ± 1,11%) in Lenk (4,77 ± 0,42%), pri izslediti CCMG nevroni. Poleg tega mreža CART-, CGRP-, SP, VIP-, LENK-, so pri obeh neokrnjenih in ASA, zdravljenih živalih opazili nNOS- imunoreaktivnega (IR) živčna vlakna, ki obkroža FB-pozitivnih perikarya. Rezultati te študije kažejo, vključevanje teh nevropeptidov v razvoju ali morda protiukrepe vnetja želodčne}

Navedba. Palus K, Całka J (2015) Vpliv podaljšanim Acetilsalicilna kislina Dopolnitev inducirano gastritis na neurokemiju od simpatični nevroni Oskrba Prepyloric regiji prašičje želodec. PLoS ONE 10 (11): e0143661. doi: 10,1371 /journal.pone.0143661

Urednik: Michael Bader, Max-Delbrück Center za molekularno medicino (MDC), NEMČIJA

Prejeto: 16. avgust 2015; Sprejeto: 6. november 2015; Objavljeno: 25. november 2015

Copyright: © 2015 palus, Całka. To je prost dostop članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Razpoložljivost podatkov: Vsi pomembni podatki so v prispevku

Financiranje:. Objava Odbor državnega poljskega podpira Znanstvenoraziskovalnega številko 1890 /B /P01 /2010/39, University of Warmia in Mazury Olsztyn (zakonska raziskave) odobri št 15.610. 003-300 in KNOW (Glavno National Research Centre) Znanstvena Konzorcij "Zdrava živali - Safe Food", odločba Ministrstva za znanost in visoko šolstvo No. 05-1 /KNOW2 /2015

nasprotujočimi si interesi: avtorji. so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi.

Uvod

v zadnjih tridesetih letih se je pokazalo bolj hiter napredek pri raziskavah inervacije prebavil. V splošnem se želodec in črevesje oživčeni tako z nevroni najdemo v occasional ganglijih in s tem pripadajo enteralne živčnega sistema (VSD) [1, 2], kakor tudi s strani zunanjimi telesi celic, ki izvirajo iz simpatičnega, parasimpatično in senzoričnih ganglijih [3- 5]. Nedavne raziskave so pokazale, da so simpatični gangliji ne le centri živčnega integracije, ampak tudi imeti pomembnih lastnosti s strani njihovih nevronov. Med drugim vključujejo konvergenco osrednjih impulzov, projekcijo visceralno impulzov v pred- in postsinaptičnimi ravni, dostop do /omogoča osrednjih vlakna trebušne zaščite in srčnega spodbujevalnika dejavnosti [6, 7]. Vendar pa simpatičnega vozliščih nevroni, ki oskrbujejo prebavila ne vplivajo neposredno na svojih funkcijah, vendar izvajajo svoje učinke preko VSD [8, 9], ali Obkladek arterij, ki oskrbujejo prebavni organ [10]. Poleg tega je funkcija želodec posredovana in prirediti veliko živčnih oddajnikov in nevropeptidov, ki igrajo pomembno vlogo pri regulaciji gibljivost izločanja želodčne kisline, sproščanje hormonov, lokalni pretok krvi in ​​sluznice obrambnih mehanizmov [3].

obstaja velika količina objavljenih študij, ki opisujejo razumevanjem inervacijo v želodcu, ki temelji predvsem na malih laboratorijskih živalih, kot so podgane [10-12], miške [13, 14], morski prašiček [15, 16], zajec [17] ali domače živali, kot pes [7] in mačke [18, 19]. Avtorji poročajo, da prevertebral ganglijev npr. celiakija ganglion predstavljajo glavni vir vozliščih simpatičnega inervacije trebušne notranjih organov. Ker je bilo ugotovljeno, le posamezne perikarya v paravertebral ganglijih npr. simpatična ganglije verige [16, 20]. Doslej je relativno malo znanega o inervacije želodca v domačem prašiču, ki je zelo podobna, da v človeku za anatomske in fiziološke karakteristike [21, 22]. Prejšnje študije na področju opisoval le ekstrinzični inervacijo malih in debelega črevesa [4, 20] ali se osredotočiti na črevesne živčnega sistema [23, 24].

avtonomni živčni sistem je značilna visoka plastičnost v odgovor različnih patoloških dražljaje, in sposobnost prilagajanja na spreminjajoče se razmere v okolju [25, 26]. Ta prilagoditev vključuje spremembo v kemični fenotip nevronov s povečanim izražanjem nekaterih nevrotransmiterjev in zmanjšana drugih ali aktivacijo izražanja prej neaktivnih genov [26, 27]. V zadnjih letih je prišlo do povečanja količine literature, ki opisuje spreminjanje kemičnega kodiranja simpatičnih nevronov, ki oskrbujejo prebavila med ileitisa [20], proliferacije enteropatije [28], kolitis [4] in aksotomije [29-31]. Poleg tega nekateri avtorji predlagajo, da simpatični nevroni spreminjajo ne le njihove kemične lastnosti, ampak tudi kažejo sposobnost obnavljanja [32]. Zanimivo je, da nekateri avtorji predlagajo, da simpatično živčevje vlogo kot modulator vnetja v prebavilih, ker simpatični nevroni dobavo limfoidne tkiva. Poleg tega so potrdili prisotnost receptorjev za simpatičnega nevrotransmiterjev v imunskih celic [33].

acetilsalicilno kislino, ki je znana kot aspirin (ASK), je eden izmed najpogosteje uporabljena nesteroidna protivnetna zdravila (NSAID) po vsem svetu in je še posebej cenjena zaradi svojih zdravilnih lastnostih. Prednosti široke možnosti zdravljenja, kot so preprečevanje kardiovaskularnih bolezni, zdravljenje simptomov različnih vnetnih stanj, protitumorsko aktivnost, ali lajšanje bolečin so znani že več let [34]. Aspirin preprečuje sintezo prostaglandinov z inhibicijo encima ciklooksigenaze (COX) preko nepovratnega acetilacijo hidroksilne skupine 1 serinske ostanka [35, 36]. COX imenovana tudi kot prostaglandin endoperoksidaza sintazo je membrano vezan hemoprotein in glikoproteina encim, ki katalizira pretvorbo celične membrane fosfolipidov, ki sodelujejo pri sintezi prostanoidov obsega: prostaglandinov (PG), prostaciklina (ZGO) in tromboksane (TXA) in obstaja kot 3 izooblike (COX-1, -2 in -3) [34, 37]. Eicosanoids, ki izhajajo iz reakciji s COX-1 katalizira, so vključeni v agregacijo trombocitov, zaščito želodčne sluznice, in mnogih drugih fizioloških procesov, medtem ko so tisti, ki oblikujejo s sodelovanjem COX-2, ki sodelujejo le pri razvoju vnetnega odziva. COX-3 je post-transkripcijski modifikacija COX-1, ki se pojavljajo v centralnem živčnem sistemu [38].

Aspirin je neselektivni NSAID in inhibira encimatsko aktivnost COX-1 nekaj stokrat več učinkovito, v primerjavi s COX-2 [38, 39]. Dejansko se njena tožba rezultati v obeh koristnih (antipiretik in protivnetno) in strupene (gastrointestinalne škode) učinkov [40]. Tudi majhen odmerek aspirina povzroči površinske poškodbe na želodcu epitela in vodi do nenormalnega toka ionov s povečano H ^{+ nazaj difuzije. Nadalje, inhibicija COX-1, ki vodijo k pomanjkanju prostaglandinov (SP) v želodcu in črevesne sluznice, je sprejeta kot glavni mehanizem poškodbe sluznice, ki vključuje krvavitev, erozij in razjede [41]. Te škoduje se najpogosteje pojavljajo v človeškem antruma in prepyloric področju, čeprav se kaže tudi v proksimalnem delu dvanajstnika [34]. Poleg tega zmanjšal nivo prostaglandinov E2 (PGE2) izpostavlja sluznica za škodo, ki jo solno kislino in žolča povzročil, in zmanjšuje sposobnost regeneracije sluzničnih celic z zmanjšanjem sproščanje sluzi, inhibicijo površinsko in fosfolipidov sinteze, znižanje izločanja HCO _{3 in motnje krvnega pretoka v mikrocirkulacije [40, 42]. Trenutno je vpliv-aspirina povzroča gastritis na prilagodljivih procesov in nevrokemije lastnosti simpatičnih nevronov dobavljajo želodec precej razdrobljeni}}

Zato je bil ta poskus zasnovan za vzpostavitev. 1) lokalizacije in distribucijo simpatičnih nevronov, ki oskrbujejo prepyloric območje želodca domačega prašiča; 2), Nevrokemične fenotip izsledi perykarya v fiziološkem stanju; 3) možne spremembe v nevrokemije kodiranje slediti nevronov med gastritis z dolgotrajnim dopolnitev acetilsalicilne kisline inducirani.

Materiali in metode

Etika Izjava

je bil odobren Eksperimentalni postopek Živalsko evtanazije Okrajnega etični komisiji za poskuse na živalih, na Univerzi v Varmija nad Mazury v Olsztyn (dovoljenje številke 05/2010). Vse operacija je bila izvedena v skladu z natrijevim tiopentalom anesteziji, in so bile vse možne prizadevanja za zmanjšanje trpljenja živali.

Živali in kirurški posegi

Raziskava je bila izvedena na desetih juvenilni svinjah v large white poljski pasma, stara približno 8 tednov in tehta ca. 20 kg. Živali so bile v okviru rednih svetlobnih pogojih v okolju z nadzorovano temperaturo. So bile hranjene s komercialno mešanico zrn in tekočo vodo ad libitum
. Vse živali so bile preanesthetized z azaperona (Stresnil, Jansen Pharmaceutica NV, Belgija, 4 mg /kg telesne teže, im) 15 minut pred uporabo glavnega anestetika, natrijev tiopental (tiopentala, Sandoz, Kundl-Rakúsko, Avstrija; 10 mg /kg telesne mase, podane intravenozno). Da bi lokalizirati telesa ati razumevanjem celic, so prašiči izpostavljeni na sredinsko laparotomijo in prejela injekcije fluorescentne retrogradno nevronov sledila hitra Blue (FB, EMS Chemie, GmbH, Nemčija), v obliki romba del (ca. 4 cm x 4 cm) v želodcu sprednjo prepyloric steni v celotnem volumnu 50 ul ene 5% raztopine (1 p.l na 1 injekcijo). Da bi zmanjšali uhajanje sledila v okoliških tkiv, je igle na brizgi Hamilton ostane v veljavi 20-ih po vsaki injekciji, nato pa se je površina za injiciranje nato speremo s fiziološko raztopino in nežno obrišite z gazo. Po injekcijah kirurgije antibiotika (Betamox L.A., ScanVet, Poljska, 15 mg /kg telesne teže,, i.m.) in analgetik zdravila (meloksikam-Metacam, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Nemčija, 0,4 mg /kg telesne teže,, i.m.) so bili uporabljeni. Da bi zmanjšali bolečina po kirurškem posegu, da meloksikam (Metacam Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Nemčija, 0,4 mg /kg telesne teže,, i.m.) injekciji smo ga upravlja enkrat na dan. Zdravstveno stanje živali je spremljala veterinar najmanj 4 čas dneva

Potem so prašiči naključno razporedili v eno od dveh eksperimentalne skupine:. Nadzor (skupina C, n = 5) in skupine ASA ( n = 5). Živali, ki sestavljajo ASA skupino, od sedmega dne po injiciranju FB, so imele acetilsalicilno kislino peroralno (aspirin, BAYER, 100 mg /kg telesne teže,), 1 h pred hranjenjem. Gastroscopic pregled je bil opravljen izključiti poškodbe v želodčni sluznici pri živalih iz skupine ASA na prvi dan in za potrditev gastritis ASA ravnanje povzroči pri zadnji dan aspirin dopolnitev (s pomočjo video-endoskop Olympus GIF 145 z delovno dolžino 1030 mm in premer 9,8 mm).

Po času preživetja 4 tednov (21 ^{st dan zdravljenja ASA), sta bila nadzor in ASA prašiči globoko reanaesthetized in žrtvovali s prevelikega odmerka natrijevega tiopental. Potem so transkardialnim škropili s 4% zastalega paraformaldehid (pH 7,4). Gastritis pri živalih skupine ASA je potrdil histopatološko preiskavo fragmentov v prepyloric stene želodca, zbranih po perfuzije (z uporabo rutinskih histopatoloških metod). Po perfuzije zberemo naslednja tkiva: za celiakijo-lobanjske mezenterična ganglion kompleks (CCMG) (znana tudi kot celiakijo-superior mezenterična ganglion kompleks (CSMG)); prsnega koša, ledvenih in križnih gangliji simpatična verige (SChG), lobanje in srednje materničnega vratu gangliji, suprarenal gangliji, majhen ganglije od intermesenteric in ledvic pleksusi, repne mezenterična ganglije (CaMG). Zbrane tkiva smo ga potopimo po določen v isti fiksiranje, za 20 minut, speremo v fosfatnem pufru (pH 7,4) v treh dneh in na koncu so bili shranjeni pri 30% zapufrani raztopini saharoze, dokler ne potonil na dno posode za nadaljnjo predelavo .}

Imunohistokemija in statistika

Štirinajst-mikrometrov-debele kriostat deli vzorcev tkiva so bili analizirani pod fluorescenčnim mikroskopom (Olympus BX 51, Olympus, Poljska), ki so opremljeni s filtrom določiti primeren za opazovanje FB, lokalizirati in štetje simpatični nevroni, ki vsebujejo tracer. Za določitev relativnega števila FB-pozitivnih perikarya, so nevroni šteje v vsakem četrtem poglavju. so bile upoštevane le nevroni z jasno vidno jedra. Nato so bili obdelani izbrani odseki z FB-označenih perikarya za rutinsko dvojno označevanje imunofluorescenčni tehniko, z uporabo primarnega antiserume postavljeno v različnih vrst in vrste specifičnih sekundarnih protiteles (tabela 1). Na kratko, potem ko zračno sušenje pri sobni temperaturi 45 minut. in zemljo v 0,1 M fosfatnim pufrom (PBS, pH 7,4;. 3 x 10 minut), so odseki blokirani z zmesjo, ki vsebuje 10% konjske serum in 0,1% govejega seruma albumina v 0.1 M PBS, 1% Triton X- 100, 0,05% timerosal in 0,01% natrijevega azida 1 uro pri sobni temperaturi, da se zmanjša nespecifično obarvanje ozadja. Po spiranju v PBS (3 x 10 min.) So bili odseki inkubirali preko noči pri sobni temperaturi, s primarnim antiserumov dvignjeno nad tirozin hidroksilazo (TH), dopamin beta-hidroksilaze (DβH), nevropeptid Y (NPY), galanina (GAL), nevronska sintaze dušikovega oksida (nNOS), lev 5-enkefalin (Lenk), kokaina in amfetamina urejen prepis peptid (CART), kalcitonin, povezane z gensko peptid (CGRP), snov P (SP) in vazoaktivni intestinalni peptid (VIP) ( tabela 1). Po naknadnem spiranju v PBS (3 x 10 min.) So bili odseki inkubirana z mešanico sekundarnih protiteles (tabela 1) za 1 h pri sobni temperaturi, za vizualizacijo primarnih protiteles, uporabljene v tej študiji. Po barvanja, so odseki montirani z-karbonata buffered glicerola (pH 8,6) in pokrova zdrsnilo.

Standardni kontrole, tj preabsorption za nevropeptidov antiserumov z ustreznim antigenom (20 mikrogramov antigena /ml razredčene protitelesi, vse antigene kupljene od polotoka, Sigma ali Abd Serotec) in opustitev kot tudi zamenjava vse primarne antiserumov ne-imunski serumi so bili izvedeni za testiranje imunohistokemičnim označevanje. Ni bilo opaziti v vseh teh nadzornih stainings fluorescence, kar potrjuje specifičnost metodologije in protitelesa, ki se uporablja.

Profili so nato preučili v okviru Olympus BX51 mikroskopom, ki je opremljen s filtri, primernimi za AlexaFluor 488, AlexaFluor 546, in hitro Blue, in slike so bile posnete z digitalnim fotoaparatom povezan na osebni računalnik, ki je opremljen z Olympus Cell F slika analiziranja programske opreme (Olympus, Tokio, Japonska). Oddelki obarvajo za isto kombinacijo antigenov dodeljenih kvantitativnih raziskavah, so ločeni z najmanj 100 um, da bi se izognili dvojnemu analizo nevronov somata. Število na FB-pozitiven perikarya preštetih za vsako kombinacijo protiteles je bila nad 200 nevronov na žival. so združeni podatki iz obeh skupin statistično analizirali z statistica 10 programske opreme (StatSoft Inc., Tulsa, OK, ZDA), in so bili predstavljeni kot sredstvo ± standardno napako povprečja (SEM). Pomembne razlike so ovrednotili s testom t študent za neodvisne vzorce (* P < 0,05 in ** P < 0,001). Poleg tega je za semi-kvantitativno ovrednotenje gostote živčnih vlaken imunoreaktivna za vsako snov študirali, je bila uporabljena poljubna lestvice, kjer je (-) - odsotnost vlaken; (+) - Enojni vlakna; (++) - Redki živčnih vlaken; (+++) - Prikazuje zelo gosto živčnih vlaken

Rezultati

Hitro Blue sledenje in imunohistokemija

Hitro Blue telesa, ki vsebuje živčne celice so bile ugotovljene izključno na CCMG. kompleks, medtem ko so ostali pred in paravertebral simpatičnega gangliji brez FB- označenih celic. V povprečju je CCMG Kompleks vsebuje 1615 ± 20.73 FB + nevronov v kontroli in 1644 ± 38.03 nevronov v skupini ASA, v tem zaporedju. Večina označenih nevronov so se nahajala v območju celiakijo polov kompleksa CCMG le eno- ali so bile ugotovljene označeni somata v drugem delu CCMG. Celična telesa so ovalne, okrogle ali večpolarnem s kratkimi dendriti in centralno nahaja jedro in merijo 20-45 um v premeru. V nekaterih primerih so opazili ena sama dolga akson podoben proces zasledimo iz celice.

V kontrolnih živali dvojno označevanje imunohistokemija pokazala, da je bila velika večina + celic FB imunoreaktivnega na TH (94,85 ± 1,01%) in DβH (97,10 ± 0,97%). Poleg tega so bili vsi TH- pozitivne telesa celic imunoreaktivnega za DβH, kar so potrdili svojo močno kateholaminergičnega znak (slika 1A, 1B, 1C in 1D). Uporaba protiteles proti neuropeptida Y narisano, je, da NPY immunolabeling nahaja v 46.88 ± 2.53% od FB- označeni perikarya (slika 1E, 1F, 1G in 1h). Poleg tega druga populacija FB- pozitivne nevroni zaprtem GAL v 8.40 ± 0,53% (slika 1I, 1J, 1K in 1L). Poleg tega GAL-pozitiven živčnih vlaken (+) mimogrede oblikovane formacije, ki obkroža celice telesa GAL- IR. Po drugi strani pa nobeden od FB + nevronov v zaprtem nNOS, Lenk, CART, SP in VIP. Vendar pa so vsi ti nevrotransmiterjev prisotna v živčnih vlaknih okoliških sledenja perikarya. Veliko število krčne CART-pozitivnih živčnih vlaken (+++) tesno obdano FB-označenih nevronov v in oblikovali košaro podobne strukture okoli njih (slika 2A, 2B, 2C in 2D). Mikroskopska analiza oddelkov inkubiranih z protitelesa proti CGRP pokazala gosto mrežo CGRP pozitivnih vlaken (+++) pogosto lokalizirani v bližini na FB-pozitivnih celic (slika 2E, 2F, 2G in 2H). Samo z enim krčnih ali navaden nNOS-IR (+) (slika 1M, 1N, 1O in 1P), Lenk-IR (++) (slika 1 R, 1S, 1T in 1U), SP-IR (+) (slika 2I, 2J, 2K in 2L) in VIP-IR (+) (slika 2M, 2N, 2O in 2P) živčna vlakna, včasih tvorijo majhne pakete, so razpršeni po vsej ganglija med izsledi celičnih teles (tabela 2).

gastritis zaradi daljšega dopolnitev acetilsalicilna kislina povzroča spremenila vzorce kodiranje iz mnogih FB + celic. Populacija TH-pozitivnih in DβH-pozitivnih celic se je zmanjšala (tabela 3). Mikroskopski pregled odsekov je pokazala, da so bile 85,78 ± 2,65% TH-pozitiven, medtem ko 88,82 ± 1,63% od FB- izsledi nevronov, izražen DβH radioinkorporacijo (slika 3A, 3B, 3C in 3D). Poleg tega je tudi navzgor regulacijo NPY-IR nevronov so na 76.59 ± 3,02% statistično pomembna (Slika 3E, 3F, 3G in 3H). Najbolj občutno razliko v kemični kodiranje slediti simpatičnih nevronov med kontrolo in ASA zdravljenih prašičev vključene zelo povečano število GAL (do 26.45 ± 2,75%) (sl 3I, 3J, 3K in 3L). V FB- pozitivne celice, ki vsebujejo GAL so na voljo tudi številni, predvsem krčne GAL-IR živčnih vlaken. Poleg tega so opazili celice, ki vsebujejo nNOS v 6.13 ± 1,11% (slika 3M, 3N, 3o in 3P) in Lenk pri 4,77 ± 0,42% (slika 3R, 3S, 3T in 3U) samo v ASA- zdravljenih živali. Podobno kot za nadzor živali, skice perikarya niso imunoreaktivnega CART, CGRP, SP in VIP pa živčnih vlaken, ki vsebujejo te nevrotransmiterjev v neposredni bližini FB- označena somata so opazili in podobna so jih opazili v kontrolni skupini.

Gastroscopic in histopatološko preiskavo

Gastroscopic preiskavo opraviti na prvi dan poskusa izključena lezij v želodčni sluznici pri živalih tako iz kontrolne skupine in skupine ASA. Vendar je v istem preiskavo opraviti na zadnji dan potrdili gastritis, ki ga dopolnitvi acetilsalicilne kisline je povzročil. Makroskopske spremembe, kot so: hiperemija, petehija, površinske erozije in majhne razjede so opazili, ne samo v želodcu, ampak tudi dvanajsternik sluznico. Histopatološke vrednotenje fragmentov stene želodca prepyloric regije razkriti mikroskopskih sprememb, kot so:. Hiperemijo sluznice, globoke erozij, foliculosis, širjenju nevtrofilcev in eozinofilnim infiltracijo raztezajo v submucosa (slika 4A, 4B, 4C in 4D)

Pogovor

To je prvo poročilo dokazuje, natančno lokalizacijo, morfologijo in kemijsko kodiranje simpatičnih nevronov, ki štrlijo na prepyloric področju prašičjega želodca. Glavni vir vozliščih živčnih vlaken, ki oskrbujejo ta regija izvira iz kompleksa CCMG, medtem ko so bili pred in paravertebral sočutno gangliji brez označenih celic FB-. Ti rezultati so skladni s podatki, pridobljenimi iz podganjih [3, 12], morski prašiček [15, 16], in pes [7] in zagotavljanje dodatnih dokazov o ustanovitvi prevladujoč pomen CCMG nevronov v želodcu inervacije. Ne glede na manjši vložek v simpatičnega inervacije želodca pri podganah in morskih prašičkov prišel iz prsnih ganglijev verige. Nevroni oskrbujejo želodčne stene na podganah so nahajajo od T _{1 do L 3 v desni verigi, od T 2 do L 3 v levo oz [10], medtem ko celičnih teles innervating podgane želodčne sluznice je bilo ugotovljeno, od T 6 T 9 simpatična gangliji verige [3]. Prašiča nevroni morski, ki se nahajajo v vseh prsni ganglijih verige so projekcijski želodec [16]. Nasprotno, ta raziskava je pokazala, da so ti gangliji niso vključeni v inervacije prepyloric regije prašičjega želodca, najverjetneje pa Poživite druge dele želodcu, ki zahteva nadaljnjo preiskavo. Poleg tega je ta ugotovitev sovpada tudi s te študije postulating značilno topografsko ureditev nevronov, v zvezi z njihovimi ciljna tkiva, v prašičji CCMG kompleks [43].}

Ta študija je pokazala, da velika večina FB- pozitivne nevroni v kontrolni skupini je bilo močno kateholaminergičnega značaja, kot hkratno TH- in DβH- radioinkorporacijo pokazala. Ti rezultati so v dobri korelaciji s študijami, ki opisujejo adrenergični naravo večine CCMG nevronov pri podganah, zamorček, psa in domače prašiča [10, 16, 44, 45]. Le majhno število izsledi CCMG nevronov je brez teh encimov, ki lahko kažejo, da so prebivalstvo ne-adrenergične, morda holinergičnih nevronov, ki je v soglasju s predhodnimi ugotovitvami o histokemijski od CCMG tako v morski in domačih prašičev [45, 46]. Še več, ti podatki kažejo, da znatna količina FB- označeni perikarya izražena NPY radioinkorporacijo. Podatki iz literature kažejo, da je NPY šteje, da je glavni peptidergic oddajnik v obeh: simpatičnega in parasimpatičnega živčnega sistemi [47]. Namreč, NPY kot nevronov in hormonski regulator igrajo pomembno vlogo pri fiziologiji sesalca prebavil, vključno z zaviranjem delovanja črevesja, želodca, izločanje kisline in trebušne slinavke izločanje exocrine. Poleg tega je ta peptid vpliva na krvne žile in sodeluje pri regulaciji črevesnega pretoka krvi [48, 49]. Po drugi strani pa je NPY opazili tudi pri prašičih CCMG nevronov, ki štrlijo na ileumu [50]. Poleg tega je ta študija pokazala, da GAL- IR nevroni predstavljajo del retrogradno označenih celic. To je dobro povezana z dejstvom, da je galanin biološko aktivni nevropeptid, ki ima široko distribucijo v centralni in periferni živčni sistem, kot tudi obrobne tkiva mnogih vrst [51-53]. Na nivoju prebavilih, galanin zavira izločanje želodčne kisline, izpustitev številnih trebušne slinavke peptidov, uravnava sluznice absorpcijo epitelijskih celic in modulira gibljivost gastrointestinalnega trakta [54]. Galanina izvaja svojo fiziološko vlogo deluje na enem od treh različnih podtipov G protein pripojenega receptorja (GAL-R1, GAL-R2 in GAL-R3) razširjena v mnogih tkivih in organih [52].

Čeprav nobeden od FB- pozitivnih nevronov v zaprtem nNOS, Lenk, CART, CGRP, SP in VIP, so bili vsi ti nevrotransmiterjev prisotne v živčnih vlaken, ki obdajajo zarisanih perikarya. Številne krčne CART-pozitiven živčna vlakna tesno obdano z FB-pozitivnih nevronov in oblikovali basket- kot strukture okoli njih. Kokaina in amfetamina reguliran transkript (CART) peptid odkrili leta 1981 v ovac hipotalamusu je opisana v različnih segmentih prebavil številnih vrst sesalcev, vključno s človekom [2, 55, 56]. Kljub temu, da je vloga tega peptida v funkciji črevesni v celoti, ki nima sedeža, nekateri avtorji predlagajo, da se VOZIČEK sodeluje pri urejanju črevesno gibljivost inhibicijo hranjenje, zmanjšanje izločanja želodčne kisline, poslabšanje debelega gibljivosti [57]. Doslej so bile opisane spremembe v številu CART-pozitivnih živčnih struktur v VSD v različnih bolezenskih dejavnikov, kar lahko spodbudi sodelovanje CART preživetja in nevro [58, 59]. CGRP in SP se štejejo kot pronociceptive senzoričnih nevropeptidov [60]. Število in razporeditev SP-IR in CGRP-IR vlakna so precej podobni tistim, ki so jih Lakomy et al že opisali. [45] za vlakna okoliških TH-pozitivnih nevrone v prašičjim CCMG. Predstavljajo eno od izvirov viscerofugal projekcije iz črevesne stene ali izvirajo iz DRG dovodnih nevronov, saj so ti posebej kodirana nevroni opisano v enteralne ganglijih [55, 61], kakor tudi široko razširjeno v senzoričnih nevronov [5]. Poleg tega so opazili posamezne krčne VIP-IR živčna vlakna razpršeni po vsej ganglija med izsledi celičnih teles. VIP je verjetno vpletena v črevesu-črevesne zaviralnega refleksno loka in se pojavlja v gastrorezistentne aference innervating na CCMG [45]. Končno, bi lahko vir nNOS-IR in Lenk-IR vlaken vizualizira v tej študiji biti preganglionic nevroni, ki se nahajajo v intermediolateral jedru ledvenega dela hrbtenjače ali DRG nevronov. Bližina vlaken, izkazanih v tej raziskavi v zvezi retrogradno, da so označeni CCMG nevroni lahko kažejo posredne učinke tega peptida v simpatičnega inervacije želodcu. Vendar pa ostaja vprašanje o vplivu teh vlaken na simpatičnih nevronov, ki dobavljajo prepyloric področje želodca ni pojasnjen.

Kljub temu, da je vnetje želodčne sluznice, ki je posledica dolgotrajnega dopolnitev acetilsalicilna kislina povzročila no vpliv na število nevronov innervating proučevanega območja želodcu, retrogradno oznako simpatičnega celice kažejo veliko plastičnosti v svoji nevropeptidov fenotip. ASA-inducirane gastritis prišlo do pomembnih sprememb v kemični kodiranje slediti nevronov, z zmanjšanjem proizvodnje trakta encimih kateholamina-sinteznih in up-regulacije sinteze nevropeptidov vključenih v živčnih obrambnih mehanizmov (NPY, GAL, nNOS, Lenk). Ti podatki so v dogovoru z dejstvom, da regeneracijo simpatični nevroni, začasno navzdol regulira izražanje nekaterih nevrotransmiterjev posebej TH [32] in začeli proizvajati nevrotransmiterjev, ki sodelujejo pri obrambi in preživetje [31].

NPY se pojavljajo kot regulator vnetja, vključenih v avtoimunosti, astma, rak in mnoge bolezni prebavil, kot so melabsorption, kratke črevesja, vnetne črevesne bolezni in trebušne slinavke. NPY, kot protivnetno peptida, sodeluje pri vnetni odziv novačenjem nezrelih dendritičnih celic in s spodbujanjem Th2 polarizacijo [49]. NPY lahko sodelujejo tudi v vnetnega odziva z diferenciacijo celica pomagalka, monocit sproščanje mediatorjev, naravni killer [NK] aktivacijo celic in celične redistribucijo imunskega kaj potrjena prejšnja poročila o dvosmerno presluha med živčnim in imunskim sistemom v prebavnem traktu [62, 63 ]. Te ugotovitve so podobni tistim iz predhodnih študij, kjer so povišano število NPY-pozitivnih simpatičnih nevronov pri različnih patoloških stanj, vključno proliferativne enteropatije in prašičjim kolitis [4, 28]. Poleg tega je eksperiment v človeku upodobljen povečanje NPY- IR živčnih končičev v sluznici med kroničnega gastritisa s Helicobacter pylori
[62] je povzročil. To pomeni, da je NPY pomemben dejavnik živčevje, ki igra vlogo pri preživetju in regeneraciji poškodovanih nevronov znotraj vnetij. Zanimivo je mogoče, NPY se izloča tudi nekateri immunocytes, kar lahko pomeni, da je NPY neposredno vključena v nevrogenega vnetja [64]. Vendar natančna funkcija NPY v nevronov odziv med ASA-inducirane gastritisa pri prašičih ostaja nepojasnjena in zahteva dodatne preiskave.

Najbolj občutno razliko v immuhistochemical fenotip slediti nevronov se je zelo povečalo število GAL- imunoreaktivnih celic organi v ASA- živali v skupini. Galanina se nedvomno ukvarja z regulacijo vnetnih procesov. Dejansko se galanin šteje kot regulator pro-vnetnih citokinov, saj je uporaba galanina povečano produkcijo TNF-a, IL-1 a in IL-8 v človeških keratinocitov v fiziološko stanje [65]. Do danes je porast galanina izražanja v živčne strukture, tako avtonomnem in gastrorezistentne živčni sistem, so bile med kemično povzročenimi kolitis [4, 51] in proliferacijske enteropatije [28] pri prašičih, kroničnega divertikulitisa pri človeku [66] in enteralne okužbe s salmonelo opazili pri miših [67].

• Plos ONE: Clinicopathological Značilnosti in preživetju Izidi Osnovna pečatni prstan karcinom v želodec: Retrospektivna analiza enotnega Center Database
• Plos ONE: konjugirana linolna kislina Dopolnitev pod High-Fat Diet modulira Želodec Protein izražanja in Črevesne Mikrobiota v miši odrasle