PLoS One: A hatása hosszantartó acetilszalicilsav-kiegészítés által indukált gyomorhurut a neurokémiai a szimpatikus neuronok Szállító Prepyloric régió, sertés gyomor

absztrakt katalógusa

Ez a kísérlet célja az volt, hogy létrehozzák a lokalizáció és neurokémiai fenotípizálás szimpatikus neuronok ellátó prepyloric területe sertés gyomor fiziológiás állapotban és közben az acetilszalicilsav (ASA) által indukált gyomorhurut. Annak érdekében, hogy lokalizálja a szimpatikus perikaryonok a gyomor mind a kontroll és acetilszalicilsav kezelt (ASA csoport) állatokat oltottunk be a neuronális retrográd tracer Fast Blue (FB). Után hét nappal FB injekció, állatok osztottuk a kontroll és az ASA pótlás-csoport. Az ASA csoport kapott 100 mg /kg testtömeg ASA orálisan 21 napig. A 28 ^{napon minden sertést eutanáziát fokozatos túladagolás érzéstelenítő. Azután tizennégy mikrométeres vastagságú fagyasztott metszeteken feldolgozása rutin kettős immunfluoreszcencia segítségével elsődleges antiszérumokban felé tirozin-hidroxiláz (TH), a dopamin β-hidroxiláz (DpH), neuropeptid Y (NPY), galanin (GAL), neuronális nitrogén-oxid szintáz (nNOS), Leu 5-enkefalin (LENK), kokain és amfetamin- regulált transzkript peptid (CART), kalcitonin gén-rokon peptid (CGRP), P-anyag (SP) és vazoaktív intesztinális peptidet (VIP). Az adatok ebben a kísérletben kapott azt jelzik, hogy posztgangiionáiis szimpatikus idegrostok ellátó prepyloric területe a sertés gyomor származnak lisztérzékenység-koponya mesenterialis ganglion komplex (CCMG). A kontroll állatokban az FB-jelölt sejtek kifejezve TH (94,85 ± 1,01%), DpH (97,10 ± 0,97%), NPY (46,88 ± 2,53%) és a Gal-t (8,40 ± 0,53%). ASA csoportban TH és DβH- pozitív idegsejtek csökkent (85,78 ± 2,65% és 88,82 ± 1,63% -kal). Sőt, ASA- indukált gyomorhurut eredményezett fokozott expressziója NPY (76,59 ± 3,02%) és a Gal-t (26,45 ± 2,75%), valamint a Novo-szintézisét nNOS (6,13 ± 1,11%) és a LENK (4,77 ± 0,42% -kal) vezethető CCMG neuronokat. Továbbá, a hálózat kazettamentes, CGRP-, SP, VIP, LENK-, nNOS- immunreaktív (IR) idegrostok körülveszi a FB-pozitív perikaryon észleltek mind ép, mind az ASA-val kezelt állatokban. A vizsgálat eredményei azt mutatják, bevonása ezen neuropeptidek fejlesztése vagy feltehetően ellensúlyozására gyomor gyulladás. Katalógusa}

Citation: Palus K, Całka J (2015) A hatása hosszantartó acetilszalicilsav-kiegészítés által indukált gyomorhurut a neurokémiai a szimpatikus neuronok Szállító Prepyloric régió, sertés gyomor. PLoS ONE 10 (11): e0143661. doi: 10,1371 /journal.pone.0143661 katalógusa

Vágó: Michael Bader, Max-Delbrück Központ Molekuláris Orvostudomány (MDC), NÉMETORSZÁG katalógusa

Beérkezett: augusztus 16, 2015; Elfogadva: november 6, 2015; Megjelent: november 25, 2015 katalógusa

Copyright: © 2015 Palus, Całka. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra katalógusa

Az adatok elérhetősége: Minden lényeges adatot belül a papír. katalógusa

Forrás: Publication támogatja a lengyel állam a Tudományos kutatások Bizottsága száma 1890 /B /P01 /2010/39, a University of Mazurszki Olsztyn (kötelező vizsgálatok) nem adnak 15,610. 003-300, és tudom, (Leading National Research Centre) Tudományos konzorcium "Egészséges Állat - biztonságos élelmiszer", döntés Minisztérium Felsőoktatási és Tudományos No. 05-1 /KNOW2 /2015. katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. katalógusa

Bevezető katalógusa

az elmúlt harminc évben megmutatták egyre gyorsuló fejlődése tanulmányok beidegzése a tápcsatornában. Általánosságban, a gyomor és a bél vannak beidegzett mind neuronok belül található intramurális ganglionok és így tartoznak enterális idegrendszer (ENS) [1, 2], valamint extrinsic sejttestek származó szimpatikus, paraszimpatikus és szenzoros ganglionokban [3- 5]. A legújabb vizsgálatok kimutatták, hogy a szimpatikus ganglionok nemcsak központok ideges integráció, hanem a birtokában fontos tulajdonságok a neuronok. Többek között ide tartoznak a konvergencia központi impulzusok kivetítése zsigeri impulzusok a pre- és posztszinaptikus szinten való hozzáférés /lehetővé teszi a központi szálak zsigeri védelem és pacemaker aktivitás [6, 7]. Ugyanakkor szimpatikus posztganglionáris neuronok látják el a gyomor-bél traktus nem befolyásolja közvetlenül a feladataira, de hatásukat a ENS [8, 9], vagy szorít az artériák látják el a emésztőszervi [10]. Továbbá, a gyomor funkció közvetített és modulálja bő neuronális adók és neuropeptidek, amelyek szerepet játszanak a szabályozásában motilitás, savkiválasztás, hormon felszabadulását, a helyi véráram és a nyálkahártya védekező mechanizmusokat [3].

van egy nagy térfogatú megjelent tanulmány leírja szimpatikus beidegzés a gyomor, a alapja főleg kis laboratóriumi állatok, mint például patkány [10-12], egér [13, 14], tengerimalac [15, 16], nyúl [17] vagy háziállatok, mint például kutya [7] és a macska [18, 19]. A szerzők beszámolnak, hogy prevertebrális ganglionok pl. lisztérzékenység ganglion képezik a fő forrása a postganglionáris szimpatikus beidegzése a hasi zsigerek. Mivel csak egyetlen perikaryonok találtak paravertebralis ganglionok pl. szimpatikus lánc ganglionok [16, 20]. Mindeddig viszonylag keveset tudunk a beidegzés a gyomor a hazai sertés, amelyek nagyon hasonlítanak, hogy a humán tekintetében anatómiai és fiziológiai jellemző [21, 22]. Korábbi tanulmányok a leírására csak a külső beidegzése a vékony- és vastagbél [4, 20], vagy összpontosítson az enterális idegrendszert [23, 24]. Katalógusa

A vegetatív idegrendszer jellemzi a magas plaszticitás válasz a különböző kóros ingerekre, és képes alkalmazkodni a változó környezeti feltételek [25, 26]. Ez az alkalmazkodás a változó magában foglalja a kémiai fenotípus neuronok fokozott expressziója bizonyos neurotranszmitterek és csökkentett mások vagy aktiválás kifejezési korábban inaktív gének [26, 27]. Az utóbbi években, nem volt egyre növekvő mennyiségű irodalom leírja változásának kémiai kódolása szimpatikus neuronok ellátó a gasztrointesztinális traktus alatt ileitis [20], proliferatív enteropátia [28], colitis [4] és axotomia [29-31]. Továbbá, egyes szerzők arra utalnak, hogy a szimpatikus neuronok nem csak változtatni a kémiai jellemzője, hanem arra is képesek, hogy regenerálódni [32]. Érdekes, hogy egyes szerzők azt sugallják, hogy a szimpatikus idegrendszer játszanak szerepet, mint modulátor bélrendszeri gyulladás, mert szimpatikus neuronok kínálat limfoid szövetekben. Ezen kívül, a jelenléte a receptorok szimpatikus neurotranszmitterek immunsejtek is megerősítette [33].

acetilszalicilsav, jól ismert, például az aszpirin (ASA), az egyik leggyakrabban használt nem-szteroid gyulladáscsökkentő (NSAID) a világon, és különösen értékes annak terápiás tulajdonságait. Az előnyök a széles terápiás lehetőségek, mint például a megelőzés a szív- és érrendszeri betegségek, a kezelés, a tünetek a különböző gyulladásos körülmények között, tumorellenes aktivitás, vagy fájdalomcsillapítást már sok éve ismert [34]. Az aszpirin megakadályozza a prosztaglandin-szintézis gátlásával ciklooxigenáz enzim (COX) keresztül visszafordíthatatlan acetilezése a hidroxilcsoport 1 szerin-maradék [35, 36]. COX is nevezünk prosztaglandin endoperoxidase szintáz egy membrán-kötött hemoprotein és glikoprotein enzim, amely katalizálja a sejtmembrán foszfolipidek, részt vesz a szintézis a prosztanoidok, amely tartalmaz: a prosztaglandin (PG), a prosztaciklin (PGI) és a tromboxánok (TXA), és létezik 3 izoformák (COX-1, -2 és -3) [34, 37]. Eikozanoidok, származó által katalizált reakció a COX-1, részt vesznek a vérlemezke-aggregáció, védelme a gyomor nyálkahártya, és sok más élettani folyamatok, mivel ezek a képződött részvételével COX-2 részt csak a fejlődés a gyulladásos választ. A COX-3 egy poszttranszkripciós módosítása a COX-1, előforduló a központi idegrendszerben [38].

Az aszpirin egy nem-szelektív NSAID és gátolja az enzimaktivitást a COX-1 több százszor nagyobb hatékonyan, míg a COX-2 [38, 39]. Sőt, az intézkedés az eredményeket mind jótékony (lázcsillapító és gyulladáscsökkentő) és a mérgező (gasztrointesztinális sérülés) hatások [40]. Még a kis dózisú aszpirin idézi elő felületes sérülés gyomornyálkahártya és vezet kóros ionfluxust fokozott H ^{+ vissza diffúzió. Továbbá a COX-1, ami a hiány a prosztaglandinok (PG) a gyomor és a bél nyálkahártyájában, elfogadott, mint a fő mechanizmus a nyálkahártya-károsodás, amely a vérzés, eróziók és fekélyesedés [41]. Ezek Harms fordulnak elő leggyakrabban a humán antrum, és prepyloric területen, bár ezek is látható a proximális része duodenum [34]. Sőt, csökkent szintje a prosztaglandin E2 (PGE2) teszi ki a nyálkahártya által okozott kár sósav és epe, és csökkenti annak lehetőségét, regenerálódását nyálkahártya sejtek csökkenő felszabadulása nyálka, a gátlás a felületaktív anyagok és foszfolipidek szintézise, ​​csökken a szekréciója HCO _{3 és rendellenességek a vér áramlását a mikrocirkuláció [40, 42]. Jelenleg a hatása az aszpirin-indukált gyomorhurut adaptív folyamatok és neurokémiai tulajdonságait szimpatikus neuronok ellátó gyomor meglehetősen töredékes. Katalógusa}}

Tehát ez a kísérlet célja az volt, hogy meghatározzák: 1) a lokalizáció és forgalmazása szimpatikus neuronok ellátó prepyloric területe a gyomor házisertéstartó; 2) A neurokémiai fenotípusa vezethető perykarya fiziológiás állapotban; 3) lehetséges változások neurokémiai kódolása vezethető neuronok gyomorhurut által kiváltott hosszantartó acetilszalicilsav kiegészítése. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

Etikai Nyilatkozat katalógusa

A kísérleti eljárás, beleértve az állati eutanázia engedélyezett a helyi etikai bizottság az állatkísérletek, a University of Warmia nad Mazury Olsztyn (engedély számok 05/2010). Minden műtét alatt végeztük nátrium thiopental érzéstelenítés, és minden lehetséges erőfeszítést tettek arra, hogy minimálisra csökkentsék az állatok szenvedését. Katalógusa

Állatok és sebészeti eljárások katalógusa

A vizsgálatot tíz fiatalkorú nőstény sertések, a nagy fehér lengyel fajta, körülbelül 8 hetes, és a súlya kb 20 kg. Az állatokat rendszeresen fényviszonyok között egy hőmérséklet-szabályozott környezetbe. Etették kereskedelmi gabona keverék és a csapvíz ad libitum katalógusa. Minden az állatokat preanesthetized a azaperon (Stresnil, Jansen Pharmaceutica NV, Belgium, 4 mg /kg testtömeg, IM) 15 percig, mielőtt a kérelmet a fő érzéstelenítő, tiopentál-nátrium (Thiopental, Sandoz, Kundl-Rakúsko, Ausztria; 10 mg /kg testtömeg, intravénásan). Annak érdekében, hogy lokalizálja a szimpatikus sejttestek, a sertéseket vetettük alá medián laparotomiát és injekciót kapott a fluoreszcens retrográd neuronális tracer Fast Blue (FB, EMS-Chemie GmbH, Németország) a rombusz alakú rész (körülbelül 4 cm x 4 cm), a gyomor elülső prepyloric fal teljes térfogatban 50 ul 5% -os oldat (1 ul per 1 injekció). Ahhoz, hogy minimálisra csökkentsék a szivárgás a nyomjelző a környező szövetekbe, a tűt a Hamilton fecskendő maradt a helyén 20s minden injekció után, majd azt követően az injekciós területen ezután öblítjük izotóniás sóoldat és óvatosan letöröljük gézzel. A műtét után injekciók antibiotikum (Betamox L. A., ScanVet, Lengyelország, 15 mg /testtömeg kg, i.m.), és fájdalomcsillapító gyógyszerek (meloxicam-Metacam, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Németország, 0,4 mg /testtömeg kg, i.m.) alkalmaztunk. Annak érdekében, hogy minimálisra csökkentsék a műtét utáni fájdalom a meloxicam (Metacam, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Németország, 0,4 mg /testtömeg kg, i.m.) injekciót adtunk adminisztrátora naponta egyszer. Az egészségi állapot az állatok követtük állatorvos legalább 4 alkalommal egy nap. Katalógusa

Ezek után a malacokat véletlenszerűen két kísérleti csoport: kontroll (C csoport, n = 5) és az ASA csoport ( n = 5). Az állatok alkotó ASA-csoport, a követő hetedik napon FB injekció, kaptak acetilszalicilsavat orálisan (aszpirin, a Bayer; 100 mg /kg testtömeg), 1H etetés előtt. Gasztroszkopikus vizsgálatot végeztünk, hogy kizárják elváltozások a gyomornyálkahártya állatoknál ASA csoportban az első nap, és meg kell erősítenie a gyomorhurut okozta ASA-kezelés utolsó napján aszpirin kiegészítés (egy video-endoszkópos Olympus GIF 145 munkahossz 1030 mm és átmérője 9,8 mm).

Miután 4 hetes túlélést (21 ^{ST nap ASA kezelés), mind a kontroll és az ASA malacokat mélyen reanaesthetized és elpusztítjuk túladagolt nátrium tiopentál. Aztán, hogy transzkardiálisan perfundáltuk 4% -os pufferolt paraformaldehiddel (pH = 7,4). Gyomorgyulladásához állatok ASA csoport megerősítette kórszövettani vizsgálata darabjai a prepyloric gyomorfal után gyűjtött perfúzió (rutin kórszövettani módszerekkel). Követően perfúzió, a következő szöveteket gyűjtöttük: a lisztérzékenység koponyán mesenterialis ganglion komplex (CCMG) (más néven a lisztérzékenység superior mesenterialis ganglion komplex (CSMG)); mellkasi, ágyéki és szimpatikus lánc ganglionok (SChG), a koponya és a középső nyaki ganglionok, mellékvese ganglionok kis ganglionok a intermesenteric és vese plexus, caudalis mesenterialis ganglionok (CaMg). Összegyűjtött szöveteket utáni rögzített merítéssel ugyanilyen fixáló 20 percig, leöblítjük foszfátpufferben (pH 7,4) több mint három nap, és végül lett eltárolva 30% -os pufferelt szacharóz oldatban, amíg el nem süllyedt, hogy az alján a tartály további feldolgozásra .}

immunhisztokémia és statisztikák katalógusa

tizennégy mikrométer vastagságú fagyasztott metszeteken a szöveti mintákat fluoreszcens mikroszkóp alatt (Olympus BX 51, Olympus, Lengyelország), szűrővel vételére alkalmas megfigyelése FB, lokalizálja és számolni szimpatikus neuronok tartalmazó nyomjelző. Annak megállapításához, a relatív száma FB-pozitív sejttestek, a neuronokat minden negyedik részben. Csak idegsejtek világosan látható nucleus tekintették. Ezután a kiválasztott szakaszok FB-jelölt sejttestek feldolgoztuk rutin dupla immunfluoreszcencia eljárást, primer antiszérum különböző fajok és fajspecifikus másodlagos antitesteket (1. táblázat). Röviden, Levegőn történő szárítás után szobahőmérsékleten 45 percig keverjük. és az emelkedő 0,1 M foszfát-pufferolt sóoldattal (PBS, pH = 7,4; 3 x 10 min.), a metszeteket blokkoltuk egy keverék, amely 10% lószérumot és 0,1% szarvasmarha szérum albumint tartalmazó 0,1 M PBS, 1% Triton X- 100, 0,05% thimerosal és 0,01% nátrium-azid, 1 órán át szobahőmérsékleten, hogy csökkentsék a nem specifikus háttér-festéssel. Öblítés után PBS-ben (3 x 10 min.), A metszeteket egy éjszakán át inkubáltuk szobahőmérsékleten, az elsődleges antiszérum ellen a tirozin-hidroxiláz (TH), a dopamin β-hidroxiláz (DpH), neuropeptid Y (NPY), galanin (GAL), neuronális nitrogén-oxid-szintáz (nNOS), Leu 5-enkefalin (LENK), kokain és amfetamin- regulált transzkript peptid (CART), kalcitonin gén-rokon peptid (CGRP), P-anyag (SP) és a vazoaktív intesztinális peptid (VIP) ( Asztal 1). Miután az ezt követő öblítés PBS-ben (3 x 10 min.), A metszeteket keverékével másodlagos antitestek (1. táblázat) 1 órán át szobahőmérsékleten, hogy szemléltesse használt primer ellenanyagok ebben a vizsgálatban. A festés után metszeteket karbonát pufferelt glicerint (pH = 8,6), és fedjük csúszott. Katalógusa

Normál ellenőrzés, azaz preabszorpció a neuropeptid antiszérumok megfelelő antigén (20 ug antigén /ml hígított antiszérumot valamennyi antigén vásárolt Peninsula, Sigma vagy ABD Serotec), és a kihagyás, valamint a csere összes elsődleges antiszérum a nem-immun szérumot végeztünk annak vizsgálatára, az immunhisztokémiai címkézés. Nem volt fluoreszcencia figyelhető meg minden ilyen ellenőrzés festéseket, mi megerősíti a sajátosságait a módszertan és az antitest alkalmazni. Katalógusa

A metszeteket ezután megvizsgálta egy Olympus BX51 mikroszkóp, felszerelt alkalmas szűrőkkel AlexaFluor 488, AlexaFluor 546 és Fast Blue, és a képek elfogták a digitális fényképezőgép van csatlakoztatva a számítógéphez, felszerelt Olympus Cell F képelemző szoftver (Olympus, Tokió, Japán). A metszeteket megfestettük ugyanazon antigének kombinációját rendelt kvantitatív vizsgálatok egymástól legalább 100 jim, hogy elkerüljék a kettős-analízis a neuronális sejttestekkel. A szám az FB-pozitív perikaryon számít, ahány kombináció antitestek felett 200 neuronok számát egy állat. Az adatok a két csoportban összeöntöttük, statisztikailag analizáltunk Statistica 10 szoftver (StatSoft Inc., Tulsa, OK, USA), és bemutatták, mint olyan eszközön ± standard hiba átlag (SEM). Szignifikáns különbséget értékeltünk a Student-féle t teszt független mintákra (* P < 0,05 és ** P < 0,001). Továbbá, szemi-kvantitatív értékelése sűrűsége idegrostok immunreaktív minden egyes anyag tanult, egy tetszőleges skálát alkalmaztunk, ahol a (-) - hiánya szálak; (+) - Egyetlen szál; (++) - Ritka idegrendszeri szálak; (+++) - Egy roppant sűrű idegrostokat. Katalógusa

Eredmények katalógusa

Fast Blue felkutatásának és immunhisztokémiai katalógusa

Fast Blue tartalmazó idegsejtek találtak kizárólag a CCMG komplex, míg a többi elő- és paravertebralis szimpatikus ganglionok sincsen FB jelölt sejtek. Átlagosan a CCMG komplex tartalmazott 1615 ± 20,73 FB + neuronok az ellenőrzési és 1644 ± 38,03 neuronok ASA csoportban. A legtöbb jelölt neuronok régióban található a lisztérzékenység pólusainak CCMG összetett, csak egy- jelzett sejttestekkel másik részében CCMG azonosítottak. Sejttesttel ovális, kerek vagy multipoláris rövid dendritek, központi helyen, a nucleus és mért 20-45 mm átmérőjű. Bizonyos esetekben egyetlen hosszú axon-szerű folyamat nyomon követését, a sejt volt megfigyelhető.

A kontroll állatokban kettős címkézés immunhisztokémiai kiderült, hogy a nagy többsége a FB + sejtek immunreaktív a TH (94,85 ± 1,01%) és DpH (97,10 ± 0,97%). Emellett az összes TH pozitív sejt testek immunreaktív hogy DpH milyen megerősítette erősen katekolaminergiás karakter (ábra 1A, 1B, 1C és 1D). Az alkalmazás elleni antitestek neuropeptid Y ábrázolt, hogy az NPY immunfestést találtak 46,88 ± 2,53%, a FB- jelzett perikaryonok (ábra 1E, 1F, 1G és 1H). Ezen kívül egy másik populációja FB- pozitív neuronok tartalmazott gal 8,40 ± 0,53% (ábra 1I, 1J, 1K és 1 I). Továbbá GAL-pozitív idegrostok (+) esetenként kialakult képződmények körülveszi gal IR sejttestek. Másrészt, sem a FB + neuronok tartalmazott nNOS, LENK, CART, SP és a VIP. Azonban az összes ilyen neurotranszmitterek jelen voltak a idegrostok körülvevő vezethető perikaryonok. Számos visszeres CART-pozitív idegrostok (+++) szorosan körül az FB-jelölt neuronok és egy kosár-szerű körülöttük (2A, 2B, 2C és 2D). Mikroszkópos vizsgálattal szakaszok inkubáltuk anti-CGRP antitesteket feltárta a sűrű a CGRP-pozitív rostok (+++) gyakran lokalizált adott FB-pozitív sejtek (ábra 2E, 2F, 2G és 2H). Csak egyetlen visszeres vagy sima nNOS-IR (+) (ábra 1M, 1N, 1O és 1P), LENK-IR (++) (ábra 1R, 1S, 1T és 1U), SP-IR (+) (ábra 2I, 2J, 2K és 2L), és VIP-IR (+) (ábra 2 M, 2 N, 2O és 2p) idegrostok, néha alkotó kis kötegek voltak elszórtan a ganglion között vezethető sejttestek (2. táblázat).

gyomorhurut által kiváltott hosszantartó acetilszalicilsav kiegészítése megváltozott kódolási szokások sok FB + sejteket. A lakosság a TH-pozitív és DpH-pozitív sejtek csökkent (3. táblázat). Mikroszkópos vizsgálata szakaszok azt mutatta, hogy 85,78 ± 2,65% volt, a TH-pozitív, míg a 88,82 ± 1,63% -a FB- vezethető neuronok kifejezve DpH immunreaktivitást (ábra a 3A, 3B, 3C és 3D). Továbbá up-szabályozás a NPY-IR neuronok 76,59 ± 3,02% volt statisztikailag szignifikáns (ábra 3E, 3F, 3G és 3H). A leginkább figyelemre méltó különbség a kémiai kódolása vezethető szimpatikus neuronok között a kontroll és az ASA-val kezelt sertések tartalmazott egy nagyon megnövekedett száma GAL (legfeljebb 26,45 ± 2,75%) (ábra 3I, 3J, 3K és 3L). Az FB pozitív sejteket tartalmazó GAL is által szolgáltatott számos, elsősorban visszeres GAL-IR idegrostok. Továbbá tartalmazó sejtek nNOS 6,13 ± 1,11% (ábra 3M, 3N 3O és 3P), és LENK a 4,77 ± 0,42% (ábra 3R, 3S, 3T és 3U) figyeltek meg csak ASA- kezelt állatokban. Hasonló a kontroll állatokban vezethető perikaryonok nem voltak immunreaktív CART, CGRP, SP és a VIP de idegrostok ezeket tartalmazó neurotranszmitterek észleltek közvetlen közelében a FB- jelzett szomatikus és hasonlítottak megfigyelhető a kontrollcsoportban.

gasztroszkopikus és kórszövettani vizsgálat

gasztroszkopikus elvégzett vizsgálat első napján a kísérlet kizárt elváltozások a gyomornyálkahártya állatoknál mind a kontroll és az ASA-csoport. Ugyanakkor ugyanez a vizsgálat végzett utolsó napján megerősítette a gyomorhurut által okozott acetilszalicilsav kiegészítés. Makroszkopikus változások, mint például: vérbőség, bevérzés, felszínes erózió és a kis fekélyek észleltek nemcsak a gyomor, hanem a nyombél nyálkahártyáját. Hisztopatológiai értékelése fragmensek a fal a gyomor prepyloric régió ismertetett mikroszkopikus változások, mint például: hyperaemiája a nyálkahártya, a mély eróziók, foliculosis, proliferáció neutrofilek és eozinofil infiltráció belenyúlnak a submucosa (ábra 4A, 4B, 4C és 4D).

Vita katalógusa

Ez az első jelentés, amely igazolja a pontos helymeghatározáshoz, morfológiája és kémiai kódolását szimpatikus neuronok vetítő prepyloric területe a sertés gyomor. A fő forrása a postganglionáris idegrostok ellátása a régió származnak CCMG komplex, míg az elő- és paravertebralis szimpatikus ganglionok voltak mentesek az FB-jelölt sejtek. Ezek az eredmények összhangban vannak a kapott adatok patkány [3, 12], tengerimalac [15, 16], és a kutya [7], és további bizonyítékokat létrehozó túlnyomó fontosságát CCMG neuronok gyomorban beidegzés. Annak ellenére, kisebb bemeneti szimpatikus beidegzés gyomor patkány és tengerimalac érkezett mellkasi lánc ganglionok. A neuronok ellátó gyomor fala a patkány található T _{1-L 3 a jobb lánc, és a T 2 L 3 a bal, illetve [10], míg sejttesttel beidegző patkányokat gyomornyálkahártya talált: T 6 és T 9 szimpatikus lánc ganglionok [3]. A tengerimalac neuronok található összes mellkasi lánc ganglionokat kiálló gyomor [16]. Ezzel ellentétben, ez a kutatás azt mutatja, hogy ezek a ganglionok nem vesznek részt a beidegzés prepyloric régió a sertés gyomor, valószínűleg ők beidegző más részein gyomor, amely további vizsgálatot igényel. Sőt, ez a megállapítások jól korrelálnak azokkal tanulmányok tételezünk jellemző topográfiai elrendezése neuronok, tekintettel azok célszöveteiben a sertés CCMG komplex [43]. Katalógusa}

Ez a tanulmány felfedte, hogy a nagy többsége FB pozitív neuronok kontroll csoport erősen catecholaminerg karakter, mint kiderült, a szimultán TH és DβH- immunreakció. Ezek az eredmények jól korrelál ismertető tanulmányok adrenerg jellege legtöbb CCMG neuronok a patkány, tengerimalac, kutya és a hazai sertés [10, 16, 44, 45]. Csak kis számú vezethető CCMG neuronok nem volt alkalmas ilyen enzimek, ami arra utalhat,, hogy ezek a lakosság nem-adrenerg, esetleg kolinerg neuronok, ami összhangban van azzal a korábbi megállapítások hisztokémia a CCMG mind tengerimalac és házisertéseken [45, 46]. Sőt, ez az adatok azt jelzik, hogy jelentős mennyiségű FB- jelzett perikaryonok kifejezett NPY immunreaktivitás. Irodalmi adatok arra utalnak, hogy az NPY kell tekinteni a fő peptiderg adó mindkét: a szimpatikus és paraszimpatikus idegrendszer [47]. Nevezetesen, NPY, mint neuronális és hormonális szabályozó fontos szerepet játszanak az emlősök fiziológiájában a gasztrointesztinális traktus, beleértve a gátlás a bélmozgás, a gyomor kiürülését,-szekréció és a hasnyálmirigy exokrin szekréció. Sőt, ez a peptid befolyásolja az ereket és részt vesz a szabályozás a bél véráramlás [48, 49]. Másrészt az NPY is megfigyelhető volt sertés CCMG neuronok vetítő ileum [50]. Továbbá, ez a tanulmány kimutatta, hogy a gal IR neuronok jelentik részét retrográd jelölt sejtek. Ez jól korrelál a tény, hogy a galanin biológiailag aktív neuropeptid, amely egy széles körben elterjedt eloszlása ​​a központi és a perifériás idegrendszerben, valamint a perifériás szövetekben számos faj [51-53]. A gyomor-bél szinten, galanin gátolja a gyomorsav-szekréciót, a kibocsátás a számos hasnyálmirigy peptidek, szabályozza nyálkahártya epiteliális sejt abszorpció és modulálja motilitása gyomor-bél traktus [54]. Galanin fejti ki élettani szerepét hatva egyik a három különböző altípusok a G-fehérjéhez kapcsolt receptorok (GAL-R 1, GAL-R2 és GAL-R3) széles körben elterjedt számos szövetben és a szervekben [52].

Bár egyik sem FB- pozitív neuronok tartalmazott nNOS, LENK, CART, CGRP, SP és VIP, az összes ilyen neurotranszmitterek jelen voltak a idegrostok körülvevő vezethető perikaryonok. A számos visszeres CART-pozitív idegrostok szorosan körül az FB-pozitív neuronok és egy kosár- struktúrák körülöttük. Kokain és amfetamin-szabályozott transzkript (CART) peptid fedezték fel 1981-ben juh- hipotalamuszban leírták különböző szegmensek a GI traktus számos emlős fajban, beleértve az embert [2, 55, 56]. Annak ellenére, hogy a szerepe ennek a peptid bél funkciója nem teljesen ismert, egyes szerzők arra utalnak, hogy kosara szabályozásában vesz részt a bél motilitás gátlása etetés, csökken a gyomorsav-szekréciót, súlyosbodása a vastagbél motilitását [57]. Mindeddig számának változását a CART-pozitív ideges struktúrák az ENS alapján különböző patológiai faktorok le, hogy mi azt sugallja, bevonása CART túlélés és az idegek [58, 59]. CGRP és SP minősülnek pronociceptive szenzoros neuropeptidek [60]. Száma és eloszlása ​​SP-IR és a CGRP-IR rostok meglehetősen hasonlóak, amelyeket már leírt Lakomy et al. [45] A rostok körüli TH-pozitív neuronok a sertés CCMG. Ezek jelentik az egyik forrását a viscerofugal nyúlványok a bélfal vagy származó DRG afferens neuronok, mert ezek a kifejezetten kódolt neuronokat leírt bélben oldódó ganglionokban [55, 61], valamint a széles körben elterjedt az érző idegsejtekben a [5]. Sőt, egyetlen visszér VIP IR idegrostok elszórtan a ganglion között vezethető sejttestek észleltek. VIP valószínűleg részt vesz egy bélben-bél gátló reflex ív, és előfordul enterális afferens innerváló CCMG [45]. Végül forrása az nNOS-IR és LENK-IR rostok láthatóvá ebben a tanulmányban lehet preganglionic neuronok található intermediolaterális nucleus ágyéki gerincvelő vagy DRG neuronok. A közelsége szálak nyilvánosságra ebben a vizsgálatban kapcsolatban dal jelölt CCMG neuronok jelezhetik közvetett hatásai e peptid szimpatikus beidegzés a gyomor. Azonban az a kérdés, hogy hogyan hatnak ezek a szálak szimpatikus neuronok ellátó prepyloric területe gyomor még nem tisztázott. Katalógusa

Annak ellenére, hogy a gyulladást a gyomornyálkahártya által okozott hosszú távú acetilszalicilsav kiegészítése, nincs befolyásolja a idegsejtek száma beidegző a vizsgált területen a gyomor, a retrográd jelölt szimpatikus sejtek mutatnak nagy plaszticitás a neuropeptidek fenotípus. ASA-indukált gyomorhurut vezetett jelentős változás a kémiai kódolása vezethető neuronok, a termelés csökkentése a katekolamin szintézis traktus enzimek és up-reguláció szintézisének neuropeptidek szerepet játszik az idegsejtek védelmi mechanizmusok (NPY, GAL, nNOS, LENK). Ezek az adatok összhangban vannak a tény, hogy a regeneráló szimpatikus neuronok ideiglenesen le-expresszióját szabályozzák néhány neurotranszmitter különösen TH [32], és elkezd termelni neurotranszmitterek részt vesznek a védelmi és a túlélés. [31] katalógusa

NPY van kialakulóban mint szabályozó gyulladás, részt vesz az autoimmunitás, asztma, rák és sok gyomor-bélrendszeri rendellenességek, például melabsorption, rövid bél, gyulladásos bélbetegség és hasnyálmirigy-gyulladás. NPY, mint gyulladásgátló peptid, részt vesz a gyulladásos válasz által a felvételi éretlen dendritikus sejtek, valamint elősegíti a Th2 polarizáció [49]. NPY is részt vesz a gyulladásos válasz a differenciálódást a T helper sejtek, monociták mediátor felszabadulás, a természetes killer [NK] sejt aktiváció és az immunsejtek újraelosztás milyen megerősítette a korábbi jelentéseket kétirányú áthallás idegrendszer és az immunrendszer a gyomor-bél traktusban [62, 63 ]. Ezek az eredmények hasonlóak a korábbi vizsgálatok, ahol a számos NPY-pozitív szimpatikus neuronok ideje alatt emelkedett különböző kóros állapotok, beleértve a proliferatív enteropátia és sertésfélék vastagbélgyulladás [4, 28]. Továbbá kísérlet emberi ábrázolt növekedését NPY- IR idegvégződésekben belül a nyálkahártya alatt krónikus gasztritisz által okozott Helicobacter pylori katalógusa [62]. Ez arra utal, hogy az NPY fontos neuroprotektív tényező, amely szerepet tölt túlélési és sérült neuronok regenerálódásának belül gyulladás. Érdekes, NPY is szekretálják néhány immunociták, ami arra utalhat, hogy az NPY közvetlenül részt vesz a neurogén gyulladás [64]. Azonban a pontos funkciója NPY idegi választ során ASA-indukálta gastritis sertésekben is tisztázatlan és további vizsgálatot igényel. Katalógusa

A leginkább figyelemre méltó különbség immuhistochemical fenotípus vezethető neuronok rendkívül megnövekedett számú gal immunreaktív sejtek szervek ASA- állatai. Galanin vitathatatlan, részt vesz a gyulladásos folyamatok szabályozását. Valóban, galanin minősül szabályozó proinflammatorikus citokinek, mert az adminisztráció galanin növelte a termelést a TNF-α, IL-1α és IL-8 humán keratinocitákban fiziológiás állapotban [65]. A mai napig a növekedése galanin expresszió idegi szerkezetek, mind a vegetatív és enterális idegrendszer, figyeltek során kémiailag indukált kolitisz [4, 51] és a proliferatív enteropátia [28], sertésben, krónikus diverticulitis humán [66] és a bélben oldódó Salmonella fertőzés egerekben [67]. Érdekes, Talero et al.

• PLoS One: Klinikopatológiai jellemzői és túlélési eredményei primer pecsétgyűrű sejtes karcinóma a gyomorban: retrospektív elemzése egységes Center Database
• PLoS One: konjugált linolsav pótlás mellett a magas zsírtartalmú diéta modulálja Gyomor Protein Expression és a bél mikroorganizmusok Felnőtt Mice