PLoS ONE: Utjecaj Dugotrajno acetilsalicilne kiseline Nadoknada inducirane gastritis na Ncurochcmistrv simpatičkog neurona opskrbu Prepyloric Regija svinja Stomach

Sažetak pregled

Ovaj eksperiment je bio dizajniran za uspostavu lokalizaciju i neurochemical fenotipa simpatičkog neuroni koji opskrbljuju prepyloric područje svinjskog želuca u fiziološkom stanju i za vrijeme acetilsalicilna kiselina (ASK), uzrokuje gastritis. Kako bi se lokalizirati simpatički perikarya želucima obje kontrole i acetilsalicilne kiseline (ASK tretirana skupina) životinjama je ubrizgan neurona retrogradno obilježenog Fast Blue (FB). Sedam dana nakon injekcije FB, životinje su podijeljene u kontroli i ASA nosa skupinu. ASA grupa je dobila 100 mg /kg tež ASA oralno tijekom 21 dana. Na 28 ^{og dana sve svinje su eutanazirane uz postupno predoziranje anestetika. Zatim sekcije zamrznuti četrnaest mikrometra debljine su obrađeni za rutinsku dvostruko označavanje imunofluorescencije, primarnim antiseruma usmjerenog prema tirozin hidroksilaze (TH), dopamin β-hidroksilaze (DβH), neuropeptid Y (NPY), galanin (GAL), neurona dušičnog oksida sintaze (nNOS), leu-enkefalin 5 (Lenk), kokainom amphetamine- regulirani transkript peptid (CART), kalcitonin peptid povezan s genom (CGRP), supstanca P (SP) i vazoaktivni intestinalni peptid (VIP). Podaci dobiveni u ovom istraživanju pokazuju da postganglionic simpatički živčanih vlakana koji opskrbljuju prepyloric područje svinjskog želuca potječu od celijakije-lubanje mezenterijalnih ganglija kompleksa (CCMG). U kontrolnih životinja, FB-obilježeni neuroni izraženi TH (94,85 ± 1,01%), DβH (97,10 ± 0,97%), NPY (46.88 ± 2.53%) i GAL (8,40 ± 0,53%). U ASA grupe, TH- i DβH- pozitivne živčane stanice su smanjeni (85.78 ± 2.65% i 88.82 ± 1.63% respektivno). Štoviše, ASA- uzrokuje gastritis rezultirala je povećanom ekspresijom NPY (76,59 ± 3,02%) i GAL (26,45 ± 2,75%), kao i novo-sinteza nNOS (6,13 ± 1,11%) i Lenk (4,77 ± 0,42%) u pratiti trag CCMG neuroni. Osim toga, mreža CART-, CGRP-, SP-, VIP-, LENK-, nNOS- imunoreaktivnost (IR) živčanih vlakana koja okružuje FB-pozitivne perikarya zabilježene su u oba netaknutih i liječenih ASA-životinja. Rezultati ovog istraživanja ukazuju na uključenost tih neuropeptida u razvoju ili pretpostavlja protumjere želučane upale pregled}

Izvor:. Palus K, Całka J (2015) Utjecaj Dugotrajno acetilsalicilne kiseline Nadoknada inducirane gastritis na Ncurochcmistrv od simpatički neuroni opskrbu Prepyloric regija svinja želudac. PLoS ONE 10 (11): e0143661. doi: 10,1371 /journal.pone.0143661 pregled

Urednik: Michael Bader, Max-Delbrück Centar za molekularnu medicinu (MDC), NJEMAČKA pregled

Primljeno: 16. kolovoza 2015. godine; Prihvaćeno: 6. studenog 2015. godine; Objavljeno: 25. studenog 2015 pregled

Copyright: © 2015 Palus, Całka. Ovo je otvoreno pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled

Podaci Dostupnost: sve relevantne podatke su u radu pregled

Financiranje:. Objavljivanje podržan od strane Državnog odbora poljske za znanstvena istraživanja broj 1890 /B /P01 /2010/39, Sveučilište u Warmia i Mazury u Olsztyn (zakonska istraživanje) ne može dati 15.610. 003-300 i znam (vodeći National Research Centre) Znanstveni Konzorcij "Zdrava životinja - Sigurna hrana", odluka Ministarstva znanosti i visokom obrazovanju br 05-1 /KNOW2 /2015

suprotstavljenih interesa: autori. su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi. pregled

Uvod pregled

u posljednjih trideset godina pokazala sve brz napredak u studijama inervacije gastrointestinalnog trakta. Općenito, želudac i crijeva su podražava i od strane neurona nalaze unutar unutar škole ganglija i time pripadaju gastroinertne živčanog sustava (ENS) [1, 2], kao i na vanjsku stanica tijela podrijetlom iz simpatikusa, parasimpatički i senzornih ganglija [3- 5]. Nedavna istraživanja su pokazala da simpatički gangliji nisu samo centri živčanog integracije, ali i posjed važnih svojstava od strane njihovih neurona. Između ostalog oni su konvergenciju središnjih poticaja, projekciju visceralni impulsa u pred i post-sinaptičkih razina, pristupanje /omogućujući središnje vlakana visceralne zaštite i pejsmejkera aktivnosti [6, 7]. Međutim, simpatički postganglionic neuroni koje opskrbljuju na gastrointestinalni trakt ne utječu izravno na svojim funkcijama, ali svoj učinak kroz ENS [8, 9], ili stisnuti arterije koje opskrbljuju probavni organ [10]. Nadalje, funkcija želuca posredovan i modulirane mnoštvom neuronskih odašiljača i neuropeptida, koji igraju važnu ulogu u regulaciji pokretljivosti, sekreciju kiseline, oslobađanja hormona, lokalni protok krvi i mukozni obrambenih mehanizama. [3] pregled

Tu je i veliki obujam objavljenih studija koje opisuju simpatički inervacije želucu, temelji se uglavnom na malim laboratorijskim životinjama, kao što su rat [10-12], miš [13, 14], zamorca [15, 16], zeca [17] ili domaće životinje, poput psa [7] i kat [18, 19]. Autori navode da prevertebral ganglija npr. celijakija ganglion predstavljaju glavni izvor postganglionic simpatičke inervacije trbušne utroba. Dok su pronađene samo jednu perikarya u paravertebral ganglija npr. lanac ganglije suosjećajan [16, 20]. Do sada, relativno malo se zna o inervacije želuca u domaćoj svinji, koja nalikuju da je u čovjeka s obzirom na anatomske i fiziološke obilježje [21, 22]. Prethodna istraživanja u području opisati samo izvanjsko inervacije tankog i debelog crijeva [4, 20], ili se usredotočiti na trbušni tifus živčani sustav [23, 24]. Pregled

Autonomni živčani sustav odlikuje se visokom plastičnost u odgovoru na različitim patološkim podražaje, kao i sposobnost da se prilagodi promjenjivim uvjetima okoline [25, 26]. Ova prilagodba uključuje promjenu u kemijskoj fenotipa neurona povećanom ekspresijom nekih neurotransmitera i smanjene od drugih ili aktivacije ekspresije prethodno neaktivnih gena [26, 27]. U posljednjih nekoliko godina, došlo je do povećanja količina literature koja opisuje promjenu kemijskog kodiranje simpatičkih neurona opskrbljuju gastrointestinalnog trakta tijekom ileitis [20], proliferativna enteropatija [28], kolitis [4] i Aksotomija [29-31]. Osim toga, neki autori sugeriraju da simpatički neuroni ne samo promijeniti svoje kemijske karakteristike, ali i pokazuju sposobnost regeneracije [32]. Zanimljivo, neki autori sugeriraju da simpatički živčani sustav igra ulogu kao modulator gastrointestinalnih upala zbog simpatičkih neurona opskrbu limfna tkiva. Osim toga, prisutnost receptora za simpatičkih neurotransmitera u imune stanice potvrđena [33]. Pregled

acetilsalicilna kiselina, poznat kao aspirin (ASA), je jedan od najčešće koristi nesteroidni protuupalni lijekovi (NSAID) diljem svijeta, a posebno je cijenjena zbog svojih ljekovitih svojstava. Prednosti širokih terapijskih mogućnosti, kao što su prevencija kardiovaskularnih bolesti, liječenje simptoma raznih upalnih stanja, protu-tumorskog djelovanja, odnosno ublažavanje boli su poznati već dugi niz godina [34]. Aspirin sprječava sintezu prostaglandina inhibicijom enzima ciklooksigenaze (COX), preko nepovratnog acetilaciju hidroksilne skupine 1 serinskog ostatka [35, 36]. COX naziva i kao prostaglandinske endoperoksidaze sintaza je hemoproteina membranski i glikoproteina enzima koji katalizira pretvorbu fosfolipidima staničnih membrana, koji su uključeni u sintezu prostanoida obuhvaća: prostaglandina (PG), prostaciklin (PGI) i tromboksane (TXA), u obliku 3 izoformi (COX-1, -2 i -3) [34, 37]. Eikosanoidi, izvedene iz reakcije katalizirane COX-1, su uključeni u agregacije trombocita, zaštitu sluznice želuca i mnogih daljnjih fizioloških procesa, dok su oni koji su formirani uz sudjelovanje COX-2 koji su uključeni samo u razvoju upalnog odgovora. COX-3 je post-transkripcijski modifikacija COX-1, te se pojavljuje u središnjem živčanom sustavu [38]. Pregled

Aspirin je neselektivni NSAID i inhibira enzimsku aktivnost COX-1 nekoliko stotina puta više djelotvorno u odnosu na COX-2 [38, 39]. Doista, njegova akcija rezultati u obje korisnih (antipiretik i protuupalno) i toksične (gastrointestinalni ozljede) učinaka [40]. Čak i mala doza aspirina izaziva površna ozljeda u želučanom epitel i dovodi do abnormalnog protoka iona s povećanim H ^{+ povratna difuzija. Nadalje, inhibicija COX-1, što dovodi do nedostatka prostaglandina (PG) u sluznicu želuca i crijeva, prihvaćen kao glavni mehanizam oštećenja sluznice koji uključuje krvarenje, erozije i ulceracije [41]. Te štete javljaju najčešće u ljudskom antruma i prepyloric područje, iako se također može vidjeti u proksimalnom dijelu dvanaesnika [34]. Nadalje, smanjena razina prostaglandina E2 (PGE2), izlaže sluznice na štete nastale sa solnom kiselinom i žuči i smanjuje sposobnost regeneracije stanica sluznice smanjuje oslobađanje sluzi, inhibiciju sinteze tenzidi i fosfolipidi, smanjenje u izlučivanju HCO _{3 i poremećaji krvotoka u mikrocirkulaciji [40, 42]. Trenutno, utjecaj aspirin izazvanog gastritis na adaptivnih procesa i neurokemijske svojstava simpatičkih neurona opskrbljuju želudac je prilično fragmentarni pregled}}

Stoga, ovaj eksperiment je osmišljen kako bi uspostaviti. 1) lokalizacije i distribuciju simpatičkih neurona opskrbljuju prepyloric područje trbuha domaće svinje; 2) neurokemijske fenotip pratiti perykarya u fiziološkom stanju; 3) moguće promjene u neurokemijske kodiranje pratiti neurona tijekom gastritis potaknute dužeg nosa acetilsalicilne kiseline. Pregled

materijali i postupci

Etika Izjava pregled

Eksperimentalna procedura, uključujući životinja eutanazija je odobren od strane lokalne Etičkog povjerenstva za pokuse na životinjama na Sveučilištu u Warmia nad Mazury u Olsztyn (dozvole brojevi 05/2010). Sve operacije se izvode pod natrijevim tiopentala anestezijom, a učinjeni su svi mogući napori kako bi se smanjili patnju životinja. Pregled

Životinje i kirurški zahvati pregled

Istraživanje je provedeno na deset maloljetnik ženskih svinja Veliki bijeli poljski pasmina, oko 8 tjedana stara i težine oko 20 kg. Životinje su držane pod redovitim uvjetima osvjetljenja u okolini kontroliranom temperaturom. Oni su hranjene komercijalnom smjesom žitarica i vode iz slavine ad libitum
. Sve životinje su preanesthetized s azaperone (Stresnil, Jansen Pharmaceutica NV, Belgija, 4 mg /kg tjelesne težine, ne) 15 min prije primjene glavnog anestetika, natrij tiopental (tiopental, Sandoz, Kundl-Rakusko Austrija 10 mg /kg tjelesne težine, daje intravenozno). Kako bi se lokalizirati simpatički stanica tijela, svinje su podvrgnuti središnje laparotomije, a primile injekcije fluorescentnog retrogradnog neurona obilježivača Fast Blue (FB, EMS-Chemie, GmbH, Njemačka), u obliku romba dijela (oko 4 cm x 4 cm) u želudac prednjem prepyloric zid na ukupnom volumenu od 50 ul 5% otopinom (1 ml po 1 injekcija). Da smanji istjecanje obilježivača u okolna tkiva, igla Hamilton štrcaljke je ostavljena na mjestu 20-ih, nakon svake injekcije, nakon čega se prostor za ubrizgavanje se zatim ispere s izotoničnom otopinom i lagano obrisala gazom. Nakon operacije injekcije antibiotika (Betamox L. A., ScanVet, Poljske, 15 mg /kg tjelesne težine, i.m.) i analgetici (mcloksikam-Metacam, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Njemačka, 0,4 mg /kg tjelesne težine, intramuskularno) su primijenjene. Kako bi se smanjio nakon operacije boli meloksikam (Metacam, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Njemačka, 0,4 mg /kg tjelesne težine, i.m.) injekcije su primijenjeni jednom dnevno. Zdravstveno stanje životinja praćena je veterinar barem četiri puta na dan pregled

Nakon toga, svinje su nasumce raspoređeni u jednu od dvije eksperimentalne skupine:. Kontrole (skupine C, n = 5) i ASA grupe ( n = 5). Životinje koje čine ASA grupe, od sedmog dana nakon FB injekcije, dobili su acetilsalicilnu kiselinu oralno (aspirin, BAYER, 100 mg /kg tjelesne težine), 1 sat prije hranjenja. Gastroscopic provedeno je ispitivanje isključiti lezije u želučane sluznice kod životinja iz ASA grupe u prvom danu i za potvrdu gastritis uzrokovan ASA tretmana u posljednji dan aspirina nosa (pomoću video-endoskop Olympus GIF 145 s radne duljine 1030 mm i promjera 9,8 mm). pregled

Nakon 4 tjedna vrijeme preživljavanja (21 ^{st dan ASA tretmana), i kontrola i ASA svinje su duboko reanaesthetized i žrtvuje predoziranja natrij tiopental. Zatim su ona bila transkardijalno perfundirani s 4% -tnim paraformaldehidom puferiranim (pH 7,4). Gastritis kod životinja ASA grupe je potvrdio patohistološku ispitivanje fragmenata prepyloric želuca zid prikupljenih nakon perfuzije (rutinskim patohistološke metode). Nakon perfuzije, prikupljeni su sljedeći tkiva: na celijakiju-lubanje mezenterijalnih ganglija kompleks (CCMG) (poznat i kao celijakija-mezenterijskoj ganglija kompleksa (CSMG)); torakalne, lumbalne i sakralne simpatički lanac ganglije (SChG), lubanje i srednji cervikalnih ganglija, nadbubrežne ganglija, mali ganglije od intermesenteric i bubrežne plexuses, repna mezenterijalnih ganglije (CaMG). Prikupljeni tkiva su naknadno obrađena uranjanjem u istom fiksativu 20 minuta, isprane u fosfatnom puferu (pH 7,4) tijekom tri dana, te konačno su pohranjene u 30% -tnom puferiranom otopine saharoze dok se potonuo na dno spremnika za daljnju obradu . pregled}

Imunohistokem i statistike

Četrnaest-mikrometra debele zamrznuti dijelovi uzoraka tkiva su analizirani pod fluorescentnim mikroskopom (Olympus BX 51, Olympus, Poljska), opremljen filterom postaviti prikladne za promatranje FB, lokalizirati i brojati simpatičkih neurona koji sadrže crtač. Za određivanje relativnog broja FB-pozitivnih perikarya, neuroni se broji u svakom četvrtom poglavlju. smatrani su samo neuroni s jasno vidljivim jezgre. Zatim, odabrani dijelovi s FB-obilježenih perikarya su obrađeni za rutinsku dvostruko označavanje imunofluorescencije tehnici, koristeći primarne protuserumima u različitim vrstama i vrstu specifične sekundarna protutijela (Tablica 1). Ukratko, poslije sušenja na zraku na sobnoj temperaturi 45 minuta. i diže se u 0.1 M fosfatnog pufera (PBS, pH 7.4,. 3 x 10 minuta), sekcije su blokirane sa smjesom koja sadrži 10% konjskog seruma i 0,1% goveđeg serumskog albumina u 0.1 M PBS, 1% Triton X- 100, 0.05% Thimerosal 0,01% natrijev azid za 1 sat na sobnoj temperaturi, kako bi se smanjila nespecifična pozadinska bojenje. Nakon ispiranja u PBS-u (3 x 10 min.), Sekcije su inkubirane preko noći na sobnoj temperaturi s primarnim antiserumom podignuta na tirozin hidroksilaze (TH), dopamin P-hidroksilaza (DβH), neuropeptid Y (NPY), galanin (GAL), neuronske sintaze dušičnog oksida (nNOS), leu-enkefalin 5 (Lenk), kokainom amphetamine- regulirani transkript peptid (CART), kalcitonin povezan s genom za peptid (CGRP), supstanca P (SP) i vazoaktivni intestinalni peptid (VIP) ( tablica 1). Nakon naknadnog ispiranja u PBS-u (3 x 10 min.), Sekcije su inkubirane s mješavinom sekundarnih antitijela (Tablica 1) kroz 1 sat na sobnoj temperaturi, za vizualizaciju primarnih antitijela korištenih u ovom radu. Nakon bojenja, sekcije su postavljene s karbonata pričuvom glicerola (pH 8.6) i poklopca-iščašenje.

Standardna kontrola, odnosno preabsorption za neuropeptid antiseruma s odgovarajućim antigenom (20 ug antigena /ml razrijeđenog antiseruma, svih antigena kupljen od Peninsula, Sigma ili Abd Serotec) i propust, kao i zamjena svih primarne antiseruma ne-imuni serum je poslužio za ispitivanje imunohistokemijsku označavanja. Nije bilo fluorescentna zabilježen je u svim tim kontrolnim stainings, što potvrđuje specifičnost metodologije i nanesenog antitijela. Pregled

Sekcije su zatim analizirali pod Olympus BX51 mikroskop opremljen odgovarajućim filtrima za AlexaFluor 488, AlexaFluor 546, a Fast Blue, a slike su zarobljeni od strane digitalni fotoaparat spojen na računalo, opremljenu Olympus Cell F slike za analizu softvera (Olympus, Tokyo, Japan). Odjeljci obojene za istu kombinaciju antigena koji su dodijeljeni kvantitativna ispitivanja su razdvojeni najmanje 100 mm, kako bi se izbjeglo dvostruko analizu neuronskog somata. Broj FB-pozitivnih perikarya računajući za svaku kombinaciju protutijela bio je veći od 200 neurona po životinji. Podaci iz obje skupine su spojene, statistički obrađeni Statistica 10 programa (StatSoft Inc., Tulsa, OK, USA), a predstavljeni su kao sredstvo ± standardna pogreška srednje vrijednosti (SEM). Značajne razlike procijenjena korištenjem Student-ovog testa za nezavisne uzorke (* p 0.05 i ** P 0,001). Nadalje, za polu-kvantitativnu procjenu gustoće živčanih vlakana imunološki za svaku tvar studirao, proizvoljna ljestvica, gdje se (-) - nedostatak vlakana; (+) - Pojedinačna vlakna; (++) - Rijetka živčana vlakna; (+++) - Prikazuje vrlo gustom živčana vlakna pregled

Rezultati

Fast Blue traženja i imunohistokemijski pregled

Brzo Blue- tijela sadrži živčane stanice se naći isključivo u CCMG. kompleks, dok je ostatak prije i paravertebral simpatičke ganglije bez FB- obilježenih stanica. U prosjeku je, CCMG kompleks sadržavao 1615 ± 20.73 FB + neurona u kontroli i 1644 ± 38.03 neurona u ASA grupe, respektivno. Većina označenih neurona su se nalazile u regiji od celijakije polova CCMG kompleksa, samo jedno- označen somata u drugom dijelu CCMG su identificirani. Stanica tijela su ovalni, okrugli ili multipolarni s kratkim dendrita i centralno smještena jezgra i mjere 20-45 lm promjeru. U nekim slučajevima zabilježene su jedan dugi akson-kao proces pratiti iz ćelije. Pregled

U kontrolnim životinjama dvostruko označavanje imunohistokemijski otkrila je da je velika većina FB + stanica su imunoreaktivne za TH (94,85 ± 1,01%) i DβH (97,10 ± 0,97%). Pored toga, sve TH- pozitivna stanična tijela su imunoreaktivne da DβH što su potvrdili snažno kateholaminergijskim karaktera (Slika 1A, 1B, 1C i 1D). Primjena protutijela za neuropeptid Y prikazano, da NPY imuno pronađen je u 46.88 ± 2.53% od FB- označen perikarya (Slika 1e, 1f, 1g i 1H). Nadalje, druga populacija FB- pozitivnih neurona sadržavao GAL u 8,40 ± 0,53% (Slika 1i 1J, 1K i 1L). Štoviše, GAL-pozitivnih živčanih vlakana (+) usput formira formacija okružuje tijela stijenke na IR stanica. S druge strane, nitko od FB + neurona sadržane nNOS Lenk, CART, SP i VIP. Međutim, sve ove neurotransmitera su bili prisutni u živčanih vlakana okolnim ucrtanim perikarya. Veliki broj proširenih CART-pozitivnih živčanih vlakana (+++) usko okružili FB-označene neurone i formira košaru strukture poput oko njih (slika 2a, 2b, 2c i 2d). Mikroskopska analiza Uzorci inkubirani sa anti-CGRP antitijelima otkriva gustu mrežu CGRP-pozitivnih vlakana (+++) često lokaliziran u blizini krajnjih-pozitivnih stanica (Slika 2e, 2F, 2G i 2 H). Samo jedan proširenih vena ili običan nNOS-IR (+) (slika 1 M, 1 N, 1O i 1P), Lenk-IR (++) (Sl 1R, 1 S, 1T i 1U), SP-IR (+) (Sl 2I, 2J, 2K i 2 L) i VIP-IR (+) (slika 2 M, 2 N, 2O i 2P) živčanih vlakana, ponekad stvarajući male snopove, raspršene su tijekom ganglija između pratiti staničnim tijelima (tablica 2). pregled

Gastritis izazvana dužeg nosa acetilsalicilne kiseline promijenio kodiranje uzorke mnogih FB + stanica. Populacija TH-pozitivnih i DβH-pozitivnih stanica je smanjen (Tablica 3). Mikroskopska analiza presjeka pokazali da 85,78 ± 2,65% je TH-pozitivno, dok je 88,82 ± 1,63% od FB- pratiti neurona izraženi DβH imunoreaktivnost (3A, 3B, 3C i 3D). Nadalje, doreguliranje od NPY-IR neurona 76.59 ± 3.02% bilo je također statistički značajna (slika 3E, 3F, 3G i 3H). Najviše pažnje razlika u kemijskoj kodiranje pratiti simpatičkih neurona između kontrole i tretiranih ASA-svinja uključene jako povećan broj GALL (do 26,45 ± 2,75%) (Sl 3I, 3j, 3K i 3L). U FB- pozitivne stanice koje sadrže GAL su također dobili od brojnih, uglavnom proširenih GAL-IR živčanih vlakana. Osim toga, stanice koje sadrže nNOS u 6.13 ± 1.11% (slika 3M, 3N, 3o i 3P) i Lenk u 4,77 ± 0,42% (slika 3R, 3S, 3T i 3U) zabilježene su samo u ASA- tretirane životinje. Slično kao kontrolne životinje, trasirana perikarya nisu bili imunoreaktivnost u košaricu, CGRP, SP i VIP, ali živčanih vlakana koji sadrže te neurotransmitere zabilježene su u neposrednoj blizini FB- označeni somata i nalikovala onih u kontrolnoj skupini. Pregled

Gastroscopic i patohistološke pregled pregled

Gastroscopic ispitivanje provedeno je na prvi dan eksperimenta isključena lezija u želučane sluznice kod životinja i od kontrole i ASA grupe. Međutim, isti pregled obavlja se na zadnji dan potvrdio gastritis uzrokovan nosa acetilsalicilne kiseline. Makroskopski promjene kao što su: hiperanemije, petechia, površinskih erozija i malih čireva uočene su ne samo u želuca, ali i dvanaesnika sluznica. Histopatološka procjena fragmenata stijenke želuca prepyloric regije opisan mikroskopske promjene, kao što su:. Hiperanemije sluznice, duboke erozije, foliculosis, proliferaciju neutrofila i eozinofilne infiltracije protežu u submukozu (Slika 4A, 4B, 4C i 4D)

Rasprava pregled

Ovo je prvo izvješće pokazuje točnu lokalizaciju, morfologiju i kemijske kodiranje simpatičkih neurona strše na prepyloric području svinjskog želuca. Glavni izvor postganglionic živčanih vlakana koji opskrbljuju ova regija potječu iz CCMG kompleksa, a prije i paravertebral simpatički gangliji su lišeni FB- obilježenih stanica u. Ovi rezultati su u skladu s podacima dobivenim od štakora [3, 12], zamorca [15, 16], a pas [7] i daju dodatni dokaz o uspostavi dominantni značaj CCMG neurona u želucu inervacije. Bez obzira, manja ulaz u simpatičke inervacije želuca u svinje rat i morske došao iz torakalnog lanca ganglija. Neuroni koji opskrbljuju stijenku želuca u štakora su se nalazile od T _{1 na L 3 u pravom lancu, a od T 2 na L 3 u lijevoj odnosno [10], dok je stanica tijela inerviraju štakori želučane sluznice pronađeni su iz T 6 T 9 simpatički lanac gangliji [3]. U zamorac neuroni smješteni u svim torakalne lanca ganglija su strši na trbuhu [16]. Za razliku od toga, istraživanje je pokazalo da su ti ganglije nisu uključeni u inervacije prepyloric regiji svinjskog želuca, najvjerojatnije inervira druge dijelove želuca, što zahtijeva daljnju istragu. Štoviše, ovaj nalaz dobro koreliraju s one studije postulirajući karakterističan topografski raspored neurona, s obzirom na njihove ciljnim tkivima, u svinjski CCMG kompleksa [43]. Pregled}

Ova studija je otkrila da je velika većina FB- pozitivnih neurona u kontrolnoj skupini imali jako kateholaminergijskim karakter, kao što su pokazale istodobnim TH- i DβH- imunoreaktivnost. Ovi rezultati dobro koreliraju s studijama koje opisuju adrenergički prirodu većine CCMG neurona u štakora, zamorac, pas i domaće svinje [10, 16, 44, 45]. Samo mali broj pratiti CCMG neurona bilo bez tih enzima, što može ukazivati ​​da su populacija ne-adrenergičke, možda kolinergičke neurone, što je u skladu s ranijim nalazima o histologija od CCMG u oba Gvineja i domaćih svinja [45, 46]. Osim toga, ovi podaci pokazuju da značajna količina FB- označeni perikarya izrazio NPY imunoreaktivnost. Literatura podaci ukazuju da NPY se smatra da je glavni peptidergic odašiljač u oba: simpatički i parasimpatički živčani sustav [47]. Naime, NPY kao neurona i hormonski regulator imaju važnu ulogu u fiziologiji sisavaca probavnog trakta, uključujući inhibiciju motiliteta crijeva, pražnjenja želuca, izlučivanja kiseline i egzokrinog izlučivanja pankreasa. Osim toga, ovaj peptid utječe na krvne žile i sudjeluje u regulaciji crijevnih protoka krvi [48, 49]. S druge strane, NPY je također zabilježen u svinja CCMG neuronima strše ileum [50]. Nadalje, ova studija je pokazala da stijenke na IC neuroni predstavljaju dio od retrogradno označenim stanicama. To je dobro korelira s činjenicom da galanina je biološki aktivan neuropeptid, koji ima široku distribuciju u središnjem i perifernom živčanom sustavu, kao i perifernim tkivima mnogih vrsta [51-53]. U gastrointestinalnom razini galanin inhibira izlučivanje želučane kiseline, oslobađanje mnogih gušterače peptida regulira sluznice apsorpciju epitelnih stanica i modulira motilitet probavnog trakta [54]. Galanina, pokazuje svoju fiziološku ulogu djeluje na jedan od tri različita podtipa G protein-vezanih receptora (GAL-R1, R2 i GAL-GAL-R3) široko rasprostranjena u mnogim tkivima i organima [52]. Pregled

Iako nitko od FB- pozitivnih neurona sadržane nNOS Lenk, CART, CGRP, SP i VIP, sve ove neurotransmitera su bili prisutni u živčanih vlakana okolnim ucrtanim perikarya. Brojni proširenih CART-pozitivnih živčanih vlakana usko okružili FB-pozitivnih neurona i formirao košaru s poput strukture oko njih. Kokain- i amfetamin-regulirajuće prijepis (CART) peptida otkrivena je 1981. u ovčjeg hipotalamusu što je opisano u različitim segmentima GI sustavu mnogih vrsta sisavaca, uključujući i ljude [2, 55, 56]. Unatoč tome što nije potpuno uspostavljen uloga ovog peptida u crijevo funkciji, neki autori sugeriraju da je košarica uključen u regulaciju pokretljivosti crijeva, inhibicija prehrane, smanjenja lučenja želučane kiseline, pogoršanje debelog crijeva [57]. Do sada, promjene u broju CART-pozitivnih živčanih struktura u ENS pod različitim patološkim faktorima su opisani, što bi moglo sugerirati uključenost košaricu u preživljavanju i živčanih [58, 59]. CGRP i SP smatraju pronociceptive osjetilnim neuropeptida [60]. Broj i raspodjela SP-IR i CGRP-IR vlakna su vrlo slični onima koje su već opisali Lakomy et al. [45] na vlakna okolnim TH-pozitivnih neurona u svinjskog CCMG. One predstavljaju jedan od izvora za viscerofugal projekcije iz stijenke crijeva ili potječu iz DRG aferentnih neurona, jer su ti posebno kodirane neuroni su opisani u gastroinertne ganglija [55, 61], kao i široko rasprostranjeni u senzornih neurona [5]. Osim toga, uočene su pojedinačni proširenih VIP-IR živčanih vlakana raspršene diljem ganglija između pratiti stanica tijela. VIP vjerojatno je uključen u crijevu-crijevne inhibitorni refleks luk te se pojavljuje u želučanom aferenti inerviraju CCMG [45]. Konačno, izvor nNOS-IR i Lenk-IR vlakana vizualiziraju u ovoj studiji mogu biti preganglionic neuroni smješteni u intermediolateral jezgri lumbalne kičmene moždine ili DRG neurona. Blizina vlakana prikazanih u ovom istraživanju u odnosu na retrogradno označeni CCMG neuroni mogu ukazati na neizravne učinke tog peptida u simpatički inervacije želuca. Međutim, ostaje pitanje o utjecaju tih vlakana na simpatičkih neurona koji opskrbljuju prepyloric područje trbuha treba razjasniti. Pregled

Unatoč činjenici da je upala želučane sluznice, uzrokovana dugotrajnom nosa acetilsalicilnom kiselinom, nema utjecaj na broj neurona koji inerviraju istraživano područje želuca, retrogradno oznakom simpatički stanice pokazuju veliku plastičnost u svojoj neuropeptidi fenotipu. ASA inducirane gastritis dovelo je do značajnih promjena u kemijskoj kodiranje pratiti neurona smanjenjem proizvodnje enzima kateholamin-sinteze trakta i doreguliranje sinteze neuropeptida koji su uključeni u neuronskim obrambenih mehanizama (NPY, GALL, nNOS Lenk). Ovi podaci su u skladu s činjenicom da regenerira simpatičkih neurona privremeno down-regulaciju ekspresije nekih neurotransmitera posebno TH [32] i početi proizvoditi neurotransmitere koji su uključeni u obranu i opstanak [31]. Pregled

NPY je u nastajanju kao regulator upale, koji su uključeni u autoimunosti, astme, raka i mnogih gastrointestinalnih poremećaja, kao što su melabsorption, kratkog crijeva, upalne bolesti crijeva i pankreatitisa. NPY, kao protu-upalni peptida, sudjeluje u upalnom odgovoru regrutiranju nezrelih dendritičke stanice, a, promicanjem Th2 polarizaciju [49]. NPY također mogu biti uključeni u upalnom odgovoru kroz diferencijaciju T helper stanica, monocita oslobađanja medijatora, prirodnih ubojica aktivacije stanica [NK], i staničnu preraspodjele imunološkog što je potvrdio ranija izvješća o dvosmjernom preslušavanja između živčanog i imunološkog sustava u probavnom sustavu [62, 63 ]. Ti su rezultati slični onima iz prijašnjih studija, gdje je povišena je broj NPY-pozitivnih neurona u raznim simpatičkih patološka stanja, uključujući proliferativni enteropatija i svinjskim kolitisa [4, 28]. Nadalje, eksperiment u čovjeka prikazan je porast NPY- IR živčanih završetaka unutar sluznice tijekom kroničnog gastritisa uzrokovanog Helicobacter pylori pregled [62]. To sugerira da NPY je važno neuroprotektivnih faktor, koji igra ulogu u opstanku i regeneraciju oštećenih neurona unutar upale. Zanimljivo je da NPY može se također luči neke imunocitima, što može sugerirati da NPY izravno uključeni u neurogene upale [64]. Međutim, točan funkcija NPY u neuronskom odgovora tijekom ASA-inducirane gastritis kod svinja ostaje neobjašnjeno i zahtijeva daljnja istraživanja. Pregled

Najviše pažnje razlika u immuhistochemical fenotipa pratiti neurona je jako povećan broj stijenke na imunološke reaktivnosti stanica tijela u ASA- skupina životinja. Galanina nesumnjivo je angažiran u regulaciji upalnih procesa. Doista, galanin smatra kao regulator proupalnih citokina, jer davanje galanin povećao proizvodnju TNF-a, IL-1 a i IL-8 u ljudskim keratinocita u fiziološko stanje [65]. Do danas, povećanje u galanin izražavanja u živčanim strukturama, i autonomna i želučanom živčanog sustava, primijetio je tijekom kemijski izazvanog kolitisa [4, 51] i proliferativni enteropatija [28] u svinja, kronične divertikulitisa u čovjeka [66] i gastroinertne Salmonella infekcije kod miševa [67].