Vzťah vaskulárny endoteliálny rastový faktor polymorfizmov génov a klinický výsledok u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka liečených FOLFOX: VEGF polymorfizmus u karcinómu žalúdka

Vzťah vaskulárny endoteliálny rastový faktor génových polymorfizmov a klinický výsledok u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka liečených FOLFOX: VEGF polymorfizmus u karcinómu žalúdka
abstraktné
pozadia
Cieľom tejto štúdie je vyhodnotiť vzťahy medzi cievneho endotelu rastový faktor (VEGF) Single-nukleotidových polymorfizmov (SNP) a klinický výsledok u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka liečených Oxaliplatin, 5-fluorouracil a leukovorín (FOLFOX).
metódy
genómovej DNA bola izolovaná z plnej krvi, a šesť VEGF (-2578C /a, -2489C /T, -1498 T /C, -634 G /C, + 936C /T, a 1612 G /a) polymorfizmy génu boli analyzované pomocou PCR. Sérové ​​hladiny VEGF boli merané pomocou imunoanalýzy s enzýmom naviazaným.
Výsledky
Pacienti s G /G genotyp VEGF -634 G polymorfizmu /C vykazovali nižší stupeň odpovede (22,2%) ako tie, ktoré sa G /C alebo C /C genotypom (32,3%, 51,1%, p = 0,034
). Pacienti s VEGF -634 G /C polymorfizmus G /C + C /C genotypom mal dlhšie prežitie bez progresie (PFS) 4,9 mesiaca v porovnaní s PFS 3,5 mesiacov u pacientov s G /G (P
= 0,043, log-rank test). Multivariačný analýzou bolo zistené, tento G /G genotypu VEGF -634 G /C polymorfizmus bol identifikovaný ako nezávislý prognostický faktor (pomer rizika 1.497, P
= 0,017).
Záver
Naše dáta naznačujú, že G /G genotyp VEGF -634 G /C polymorfizmus je spojená s vyššími hladinami VEGF a zlým klinickým výsledkom u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka.
Kľúčové
VEGF polymorfizmus karcinóm žalúdka pozadí
rakovinou žalúdka zostáva významným zdravotný problém aj napriek klesajúcej výskyt na západe. Ide o štvrtý najčastejšou rakovinou na svete, čo predstavuje 8,6% všetkých nových onkologických diagnóz v roku 2002 [1]. Aj keď je výskyt rakoviny žalúdka u kórejský poklesla v priebehu posledných dvoch desaťročí, rakovina žalúdka je najčastejšou karcinóm u mužov a tretí najčastejší typ rakoviny u žien, ako najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu v Kórei [2].
V prípade pacientov, ktorí boli najviac novo diagnostikovaných s rakovinou žalúdka alebo karcinómu žalúdka so vzdialenými metastázami, stredné 5-ročné prežitie sa uznáva, že je chudobný na menej ako 10% [3]. Až do dnešného dňa žiadny randomizovanej štúdie o kombinovanej chemoterapii vykázala medián prežitia dlhšia ako 12 mesiacov [4]. 5-fluorouracil (5-FU), bol použitý ako hlavný chemoterapeutickým činidlom pre liečenie rakoviny žalúdka, a kombinačné chemoterapia s 5-FU je znázornené zlepšené klinické výsledky. Aj napriek tomu, že 5-FU v kombinácii s cisplatinou je účinným činidlom, bola považovaná za vysokú úroveň toxicity [4]. Oxaliplatina, ďalší prostriedok na báze platiny, má priaznivejšie znášanlivosť než cisplatina. Kyselina /5-FU /Oxaliplatina kombinácia folínová (FOLFOX) Ukázalo sa, že efektívna prvej alebo druhej línii u činidlá pre pokročilého karcinómu žalúdka [5, 6]. Avšak niektorí pacienti sú náchylní na žiaruvzdorných ochorenie, zatiaľ čo iné vyvinúť rezistencia po počiatočnej reakcii. Pacienti môžu mať tiež rôznu závažnosť nežiaducich účinkov súvisiacich s drogami. Rastúci dopyt po zlepšených techník pre predikciu odpovede na liečbu a prežitie môžu uľahčiť prispôsobiť chemoterapiu a terapiu rizík súvisiacich s, čo má za následok významne zvýšiť prežitie.
Vaskulárne endoteliálny rastový faktor (VEGF) je dobre známy pre-angiogénny rastový faktor, a jeho stimulácia za hypoxických podmienok, hrá zásadnú úlohu v podpore prežitia malígnych buniek v miestnej rastu nádoru a inváziou, a vo vývoji metastáz [7]. Boli hlásené niekoľko dôležitých role VEGF v progresii ľudského karcinómu žalúdka. Expresie VEGF-A koreluje s nádorovú prekrvenie [8], a frekvencia pečeňových metastáz významne zvýšila u pacientov s VEGF pozitívny nádormi [9]. Expresie VEGF-A je v korelácii s zlého výsledku, a je nezávislý prognostický faktor u pacientov s rakovinou žalúdka [8, 9].
Gen VEGF je lokalizovaný na chromozóme 6p21.3, a obsahuje osem exóny sú oddelené sedem IntronA. Niekoľko jednonukleotidových polymorfizmov (SNP), ktoré boli popísané v VEGF génu, z ktorých niektoré bolo preukázané, že vplyv na expresiu génu [10]. Medzi týmito SNP existuje päť SNP (-2578 C /A, -1154 G /A, -460 T /C v oblasti promótorom VEGF, 405 G /C v 5'-nepřekládané oblasti a + 936C /T in the 3'-nepřekládaná oblasť), ktoré sú bežné a sú spojené s VEGF syntézu proteínov [11]. Veľmi obmedzené množstvo publikovaných údajov o VEGF polymorfizmy v spojení s rakovinou žalúdka prognózou je k dispozícii, a výsledky sú odlišné [12, 13]. Tieto štúdie ukázali zvýšenú hladinu združenia rakovinou žalúdka a /alebo zlé klinické výsledky v podskupine s genotypom, ktoré by predpovedajú vyššiu expresiu VEGF.
VEGF nielen podporuje neovaskularizácie a migrácie, ale tiež zvyšuje vaskulárnej permeabilitu a únik [14]. To má za následok zvýšené intersticiálnej tlaku tekutiny, ktorý bráni efektívnej transport terapeutických liekov do nádorov a tým znižuje účinnosť liečby anti-rakoviny. SNP v VEGF môže dôjsť k zmene koncentrácie VEGF proteínu, a môže sa vzťahovať na interindividuálne variability v riziku a progresii nádorov vybraných, a ich odolnosť voči ošetrenie. Tam bolo niekoľko správ, ktoré vykazovali prediktívnu hodnotu VEGF polymorfizmus FOLFOX alebo kapecitabínom a chemoterapiu oxalipatin (XELOX) v kolorektálneho karcinómu [15, 16]. Avšak, žiadne štúdie, ktorá skúmala SNP génu VEGF a ich vzťah ku klinické výsledky u pacientov s karcinómom žalúdka liečených FOLFOX nebola doteraz publikovaná.
Účelom tejto štúdie je zistiť, či VEGF SNP sú spojené s klinickými výsledkami u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka liečených v prvej línii paliatívna chemoterapia FOLFOX alebo nie.
metódy
populácii
Všetci pacienti v tejto štúdii bol potvrdený histologicky adenokarcinóm žalúdka. Títo pacienti boli liečení chemoterapiou FOLFOX. Všetci pacienti, ktorí boli v ich veku medzi 18 až 79 mal performance status s výsledkom menším ako alebo rovná dvom podľa stupnice Eastern Cooperative Oncology Group a adekvátne kostnej drene, rovnako ako funkcia obličiek Predchádzajúci adjuvantnej chemoterapie, sa ukončí minimálne 6 mesiacov pred zaradením. vylučovacie kritériá prítomnosť centrálneho systému metastáz nervózny, závažná alebo nekontrolovaná súbežné lekárske choroby a históriu iných malignít. Písomný informovaný súhlas bol získaný od každého pacienta pred vstupom do štúdie. Používanie všetkých materiálov pacientov bola schválená inštitucionálnej etickou komisiou Dong-A University Hospital.
Charakteristiky pacienta predaj z marca 2007 do augusta 2010, celkovo 190 pacientov zaradených do tejto štúdie. Demografické údaje zaradených pacientov sú uvedené v tabuľke 1. Pacienti sa skladala z 125 mužov a 65 žien, a ich priemerný vek bol 55 (rozmedzie 24-79). Ninty sedem pacientov podstúpilo operáciu kuratívny (štádium I, 8; etapu II 28; etapu III, 41; stupeň IV (M0), 20) a paliatívnu resekcie bola vykonaná v 30-tich stupňami IV pacientmi. Sedemdesiat deväť pacientov (41,6%) dostal 5-FU založené adjuvantnej chemoterapii. Takmer všetci pacienti mali dobrého stavu výkonu. nebola zistená žiadna významná súvislosť medzi genotypov SNP a na charakteristikách pacienta (dáta nie sú uvedené). Genotypizácia pre šesť VEGF polymorfizmy boli získané zo všetkých 143 pacientov. Frekvencia každého genotypu sú uvedené v tabuľke 2.Table 1 charakteristiky pacientov
Variabilný
podskupiny
No. chorých
%
sex
Male
125
65,8
Žena
65
34,2
Vek
Median
55 rokov
Rozsah
(24-79 rokov)
výkonnostný stav ECOG
0,1
186
97,9
2
4
2,1
Lauren
Črevné
26
13,7
Difúzna
41
21,6
Mixed
18
9,5
Neznámy
105
55,3
Počiatočná fáza
1
8
4,2
2
28
14,7 Sims 3
41
21,6
4.
113
59,5
Prevádzka
+
127
66,8 -
63
33,2
Adjuvantná liečba
+
79
41,6
-
111
58,4
No. metastáz
1
106
55,8
2
54
28,4 Hotel > 3
30
15,8
CEA Hotel < 5 ng /ml
119
62,6
≥ 5 ng /ml
54
28,4
Nekontrolovaná
17
8,9
status stupne: Eastern Cooperative Oncology Group, CEA :. karcinoembryonální antigén
Tabuľka 2 Distribúcia genotypov a sérového vaskulárny endoteliálny rastový faktor
genotypu
polymorfizmus
No. chorých
%
Stredná ± SD (pg /ml)
P *
-2578C /A
CC
116
61,1
453,2 ± 278,8
0,606
CA
63
33,2
520,0 ± 392,3
AA
11
5,8
523,9 ± 391,7
-2489C /T
CC
116
61,1
453,2 ± 278,8
0,117
CT
60
31,6
478,4 ± 350,0
TT
14
7,4
724,0 ± 517,7
-1498 T /C
TT
116
61,1
453,2 ± 278,8
0,563
TC
61
32,1
512,2 ± 400,7
CC
13
6,8
568,2 ± 324,9
-634 G /C
GG
54
28,4
889,7 ± 453,7
0,004
GC
93
48,9
471,4 ± 222,6
CC
43
22,6
410,7 ± 222,6
+ 936C /T
CC
135
71,1
440,0 ± 292,0
0,722
CT 45
23,7
495,5 ± 329,3
TT
10
5,3
502,6 ± 371,1
1612 G /A
GG
139
73,2
472,4 ± 339,2
0,371
GA
47
24,7
538,3 ± 295,9
AA
4
2,1
267,0 ± 159,3
* podľa Mann-Whitney
SD: .. štandardná odchýlka
liečebné protokoly a úprava dávky
v deň 1, oxaliplatina (85 mg /m 2) sa podáva intravenózne (iV) infúziou v 500 ml fyziologického roztoku alebo dextróza v priebehu 2 hodín. V deň 1 a 2, LEUCOVORIN (20 mg /m 2), bol podávaný ako i.v. bolus, bezprostredne nasledovaný 5-FU (400 mg /m 2), vzhľadom k tomu, ako je 10 min i.v. bolus, nasledovaný 5-FU (600 mg /m 2) ako kontinuálne 22-h infúzie s ľahkým štítom. úpravy dávky oxaliplatiny a 5-FU boli vyrobené pre hematologické, gastrointestinálne, alebo neurologických toxické účinky na základe najzávažnejšie stupeň toxicity, ku ktorým došlo v priebehu predchádzajúceho cyklu. Liečba by mohla byť odložená až 2 týždňov, ak symptomatickej toxicity pretrvával, alebo ak je APN bola < 1500 /ul alebo krvných doštičiek gróf < 100000 /ul. 5-FU bola dávka znížená o 25% nasledujúcich cykloch po Kritériá National Cancer Institute Common Toxicity (NCI-CTC) stupeň 3 hnačka, došlo stomatitída, alebo dermatitídu. Dávka oxaliplatiny bola znížená o 25% v nasledujúcich cykloch v prípade, že boli trvalé parestézia medzi cyklami alebo parestézia s trvalé funkčné poškodenie > 7 dní. Liečba pokračovala, kým tam boli známky progresie ochorenia, neprijateľné toxické účinky rozvinutý, alebo pacient odmietol ďalšiu liečbu.
Nadväzujúca hodnotenia a posúdenie odpovede
Pred každým priebehu liečby, fyzikálne vyšetrenie, rutinné hematológia, biochémia a hrudníka X-ray boli vykonané. Počítačová tomografia skenovanie definovať rozsah ochorenia a reakcie boli vykonávané po štyroch cykloch chemoterapie alebo skôr, ak existujú dôkazy o klinickej zhoršenie. Pacienti boli hodnotené pred začatím každej 2-týždňový cyklus pomocou NCI-CTC, s výnimkou v prípade neurotoxicity. Pre neurotoxicitu, čo meradle oxaliplatina špecifické bolo použité: stupeň 1, parestézia alebo dysesthesias na krátku dobu, ale riešenie pred ďalším podaním; stupeň 2, paresthesias pretrvávajúce medzi dávkami (2 týždne); a stupeň 3, paresthesias ovplyvňujúci funkčnosť.
Odpovede boli hodnotené pomocou RECIST. Kompletná odpoveď (CR) bola definovaná ako vymiznutie všetkých dokazuje ochorení a normalizácie nádorových markerov po dobu najmenej 2 týždňov. Čiastočná odpoveď (PR) bola definovaná ako ≥ 30% zníženie veľkosti nádoru uni-dimenzionálnej, bez výskytu akýchkoľvek nových lézií alebo progresie už existujúcich lézií. Progresívne ochorenie (PD) bola definovaná ako niektorý z nasledovných: zvýšenie o 20% v súčte súčinov všetkých merateľných lézií, vzhľad každého nového lézie, alebo objavenie akékoľvek lézie, ktoré boli predtým zmizol. Stabilné ochorenie (SD) bola definovaná ako odozva nádoru nespĺňajú kritériá pre ČR, PR alebo PD.
Meranie sérové ​​hladiny VEGF
vzorku krvi bolo čerpaných z každého účastníka cez napichnutie žily pred chemoterapiou a po troch cykloch liečby. Krvné vzorky boli odstreďovanie dobu 10 minút pri 3000 ot /min pri teplote -4 ° C. Sérum sa potom odstráni a skladuje sa pri -80 ° C až do biochemickú analýzu. Sérum VEGF enzyme-linked ImmunoSorbent assay (ELISA) bola dokončená podľa výrobcu protokolov (R &D Systems, Minneapolis MN). V stručnosti, vzorky séra boli rozmrazené na ľade, mokrej tri hodiny pred testom. Vzorky séra boli vopred ošetrené kyslým roztokom, aby podporovali disociácia VEGF z bohatej VEGF väzbové proteíny a stabilizovaný v pufri a konzervačných látok. Vzorky boli umiestnené v 96 jamkovom formáte dvojmo po každom konjugovaného VEGF-1 /HRP polyklonálnej sekundárnej protilátky bolo pridané. Roztok substrátu (H 20 2 /tetrametylbenzidín), potom bola podávaná po dobu tridsať minút potom, čo sa reakčná zmes rozloží kyselinou sírovou. Doštičky boli odpočítané na absorbanciu pri vlnovej dĺžke 450 nm na Victor 3 plate reader (Perkin Elmer, Boston MA). Extrapolovať absorbancia bola analyzovaná pomocou softvéru Masterplex Readerfit ELISA (Hitachi, Waltham MA) a koncentrácia bola stanovená na základe 4 riadiacu logistickú medziznakové podľa odporúčania výrobcu. Merania uskutočniť podľa jedného skúšajúcim zaslepeným na klinicko dát pacienta. Extrakcia
DNA a príprava vzorky
DNA bola extrahovaná z 75 ul buffy coat pomocou MagAttract DNA Blood Midi M48 Kit (Qiagen, Inc.), za použitia pracovná stanica Qiagen Biorobot M48, automaticky podľa protokolov výrobcu. Čistota a koncentrácia izolované DNA bola stanovená Nanodrop® ND-1000 spektrofotometra (NanoDrop technológie, DE, USA). Vzhľadom na to, že potrebujeme podrobnejšie množstvo každej vzorky na stanovenie genotypu reakciu, sme merali množstvo DNA pomocou Quant-it ™ PicoGreen® dsDNA Assay Kit (Molecular Probes, Inc., USA). Vyrobili sme suché dosky pre stanovenie genotypu reakcie s 10 ng do každej jamky 384 dosiek.
Kandidátskym polymorfizmov a základ navrhnúť
SNP boli vybrané z predchádzajúcej štúdie (11). Šesť SNP Analyzované boli VEGF -2578 C /A SNP (rs699947), VEGF -1498 C /A SNP (rs833061), VEGF -634 G /C SNP (rs2010963), VEGF 936 C /T SNP (rs3025039), a VEGF 1612 G /A SNP (rs10434). Multiplexovanie Test skupina bola navrhnutá pre testovanie až 18 SNP v tej istej reakčnej skupiny, za použitia MassARRAY Assay Designer v3.0 (Sequenom, CA).
Genotypizácia
genotypizácia bola vykonaná za použitia testu Iplex Gold ™ na MassARRAY ® Platform (Sequenom, CA). PCR reakcie boli vykonávané v celkovom objeme 5 ul 10 ng genómovej DNA, 1,625 mM MgCl 2, 0,1 jednotky HotStarTaq polymerázy (Qiagen, Valencia, CA), 0,5 mM dNTP (Invitrogen, Inc.), a 100 nm primery. PCR reakcia začala pri teplote 94 ° C počas 15 minút, nasledovalo 45 cyklov pri 94 ° C počas 20 s, 50 ° C počas 30 s a 72 ° C po dobu 1 min, s konečným predĺžením pri 72 ° C počas 3 minút , vzniknuté amplifikáciou PCR boli ošetrené zmesou SAP v celkovom 7ul s Shirimp enzýmom alkalickej fosfatázy &Co. vyrovnávacia pamäť. SAP reakcia začala pri teplote 37 ° C počas 40 minút a 85 ° C po dobu 5 min. Regióny, ktoré obsahujú cieľovú SNP boli amplifikovanej pomocou PCR a spracuje SAP s následným jednej bázy extenzní reakciu, čo má za následok rozdiel alelově špecifickej hmotnosti medzi predĺžených produktov. Predlžovací reakcie sa vykonávali v celkovom objeme 9 ul s 50 uM dNTP /didesoxynukleotidů fosfát (ddNTP) každej, 0,063 jednotky /ul Thermo Sequenase (a to ako z SEQUENOM, Inc.), a 625 nM do 1.25uM predĺženia primérov. Za podmienok cyklovanie, dve cyklistické slučky, jeden z piatich cyklov, ktorá je umiestnená vo vnútri cyklu 40 cyklov boli použité. Vzorka bola denaturovaný pri 94 ° C. Pramene sú žíhané pri 52 ° C počas 5 sekúnd a predlžuje pri teplote 80 ° C po dobu 5 sekúnd. Nasadnutie a predĺženie cyklus bol opakovaný viac štyrikrát pre celkom päť cyklov a potom, slučke späť do denaturačného kroku pri 94 ° C po dobu 5 sekúnd. Po tej doby, 5-cyklus žíhanie a predĺženie slučky bol znovu vykonaný. Päť žíhanie a rozšírenie kroky s jednotnou denaturačný krok bol opakovaný ďalší 39-krát na celkom 40. 40 cyklov krokov 5-cyklus žíhanie a rozšírenie znamienko rovnosti celkom 200 cyklov (5 x 40). Konečné predĺženie bolo vykonané pri teplote 72 ° C po dobu troch minút a potom sa vzorka wascooled dole až na 4 ° C. Po vyčistení predĺžení reakčné produkty s SpectroCLEAN, výrobky boli prevedené na SpectroCHIP pomocou SpectroPOINT a potom skenované pomocou SpectroREADER (MALDI-TOF). Výsledné údaje genotypov boli zhromaždené Typer v4.0 (Sequenom, CA).
Štatistická analýza
sérové ​​hladiny VEGF boli vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka. Asociácia medzi VEGF SNP a sérové ​​hladiny VEGF boli hodnotené pomocou Mann-Whitneyho testu. Súvislosť medzi VEGF SNP a reakciu na chemoterapiu bola hodnotená χ
2 štatistík.
Primárnym cieľom tejto štúdie bolo zistiť vzťah medzi genotypom a prežitie bez progresie (PFS). PFS a celkové prežívanie (OS) sa vypočítalo z dátum liečba začala odo dňa progresie ochorenia a úmrtia, resp. Pacienti, ktorí boli nažive pri poslednom sledovaní boli premietané v tej dobe. Pacienti, ktorí boli vylúčení z tejto štúdie, alebo ktorí zomreli pred progresie boli premietané v čase, keď boli vylúčení z tejto štúdie. Združenie každého markeru s prežitím bola analyzovaná pomocou Kaplan-Meierovej grafy, log-rank testu a jeho pridružené 95% interval spoľahlivosti (CI) boli vypočítané. pomery rizík (h) pre prežitie, spolu s ich 95% CI, bol vypočítaný pomocou Coxovho proporcionálneho rizika zhoršenia vzhľadom na vek, pohlavie, histologické podskupiny, stav výkonnosti, štádium ochorenia a polymorfizmus podtyp.
Všetky testy boli obojstranné, a P Hotel < 0,05 bola považovaná za štatisticky významnú. Analýzy boli vykonáva pomocou SPSS verzia 14.0 (SPSS Inc., Chicago, IL).
Výsledky
VEGF genotyp a reakcie chemoterapia
sme analyzovali asociáciu úrovňou predčistenia v sére VEGF s VEGF SNP. Distribúcia genotypov VEGF a jeho sérové ​​hladiny VEGF sú uvedené v tabuľke 2. sérového VEGF bola významne vyššia u nosičov na -634 G /G genotypu v porovnaní s G /C alebo C /C (889,7 ± 453,7 oproti 471,4 ± 328,1 vs. 410,7 ± 222.6 pg /ml, v danom poradí, P
= 0,004). Žiadny z ostatných testovaných SNP bolo spojené s sére úrovňou VEGF
Celkový podiel odpovedí chemoterapiou pre liečbu bola 34,2% (95% CI: 20,0-40,5%) .. Šesť pacientov dosiahne úplnú odpoveď (3,2%), 59 pacientov dosiahlo čiastočnú odpoveď (34,2%), 76 pacientov došlo k stabilného stavu (40,0%) a 49 vykazovali progresívne stav (25,8%). Lauren klasifikácie (P
= 0,029) a počet metastáz bola spojená s odpoveďou na chemoterapiu (P
= 0,034). Ďalšie parametre, ako je pohlavie, vek, predchádzajúce operácie, počiatočnej fáze, adjuvantnej chemoterapie, a úroveň karcinoembryonální antigén (CEA), neboli významne koreluje s klinickou odpoveďou na FOLFOX chemoterapiu. VEGF SNP a jeho súvislosť s odpoveďou sú zhrnuté v tabuľke 3. VEGF-A -634 G /G genotypov boli spojené s nižšími odozvy v porovnaní s G /C alebo C /C genotypov (22,2%, 32,3%, 51,1%, resp , P
= 0,034). Žiadny z druhého analyzovaného SNP predpovedal odpovede rate.Table 3 Reakcie podľa genotypizácia vaskulárny endoteliálny rastový faktor
genotypu
polymorfizmus
ORR
%

P *
-2578C /A
CC
41/116
35,3
0,798
CA
20/63
31,7
AA
3/11
27,3
-2489C /T
CC
41/116
35,3
0,812
CT
19/160
31,7
TT
4/14
28,6
-1498 T /C
TT
41/116
30,8
0,832
TC
19/61
31,1
CC
4/13
35,3
-634 G /C
GG
12/54
22,2
0,034
GC
30/93
32,3
CC
dvadsať dva štyridsať třitina
51,1
+ 936C /T
CC
46/135
34,1
0,852
CT
14/45
31,1
TT
4/10
40,0
+1612 G /A
GG
50/139
36,0
0,333
GA
12/47
25,5
AA
2/4
50,0
* podľa Fisherovho exaktného a chi-kvadrát testu
ORR .: celková miera odpovede.
asociácie genotypu VEGF a prežitie
Medián dĺžky sledovania bola 14,6 mesiacov (v rozmedzí 1.0-48.3 mesiacov). PFS bol 4,5 mesiaca (95% CI 3.8-5.1 mesiacov) a medián OS bol 12,9 mesiaca (95% CI 10.6-15.2 mesiacov). Medzi klinických parametrov hodnotených, pohlavie, predchádzajúce operácie, Lauren klasifikácie, adjuvantnej chemoterapie, CEA neboli korelované s jedným PFS alebo OS. vek pacienta bol spojený s oboma PFS (P
= 0,035) a OS (P
= 0,011). Mladší pacienti (menej ako 60 rokov) mal lepší klinické výsledky. Tabuľka 4 ukazuje vzťah VEGF SNP s PFS a OS v 190 pacientov analyzované. Pacienti s VEGF -634 G /C polymorfizmus G /C + C /C genotypom mal dlhšie PFS 4,9 mesiacov v porovnaní s PFS 3,5 mesiacov u pacientov s G /G (P = 0,043,
obrázku 1 ). Žiadny významný vplyv na OS bol pozorovaný u VEGF -634 G /C. Avšak, ďalšie VEGF SNP boli nesúvisí s PFS, alebo OS.Table 4 Jednorozmerná analýza podľa genotypizácia vaskulárny endoteliálny rastový faktor
genotypu
polymorfizmus
No. Z pacientov
PFS (MO)
P *
OS (Mo)
P *
-2578C /A
CC
116
4,9
0,676
12,8
0,423
CA
63
3,9
14,4
AA
11
3,0
11,5
-2489C /T
CC
116
4,9
0,249
12,8
0,462
CT
60
4,0
14,4
TT
14
2,9
11,5
-1498 T /C
TT
116
4,9
0,647
12,8
0,440
TC
61
3,9
13,7
CC
13.
3,0
11,8
-634 G /C
GG
54
3,5
0,043
13,1
0,407
GC
93
4,8
14,4
CC
43
4,9
11,5
+ 936C /T
CC
135
4,5
0,925
13,1
0,711
CT 45
4,7
11,9
TT
10
3,9
11,9
1612 G /A
GG
139
4,4
0,448
12,8
0,644
GA
47
5,0
14,4
AA
4
2,1
10,6
* tým, log-rank testu
PFS :. prežitia bez progresie, Mo: mesiacov , OS :. ​​celkové prežitie
Obrázok 1 Kaplan-Meierove krivky bez progresie prežitie podľa vaskulárny endoteliálny rastový faktor -634 G /C polymorfizmov (P = 0,043).
Faktory, ktoré mali štatistickej významnosti v jednorozmerných modelov boli zahrnuté do mnohorozmerné modelu. V viacnásobnej analýzy, staroba (pomer rizika (HR): 1,521, 95% interval spoľahlivosti: 1,105 - 2,093, p = 0,010) a počet metastáz (HR: 1,375, 95% interval spoľahlivosti: 1,129 - 1,674, p = 0,002) zostal ako nezávislé prognostické faktory pre PFS. G /G genotypu -634 G /C polymorfizmus bol tiež identifikovaný ako nezávislý prognostický faktor pre PFS (HR: 1,497, 95% interval spoľahlivosti: 1.074-2.088, P = 0,017) (tabuľka 5). Žiadny iný VEGF SNP boli významné nezávislé prognostické faktory ovplyvnili PFS.Table 5 viacrozmerné analýzy
času do progresie
Variable
HR
95% CI
p
value*

Age
1.521
1.105–2.093
0.010
Gender
1.313
0.939–1.837
0.111
Performance
2.079
0.743–5.816
0.163
Operation
1.143
0.763–1.713
0.516
Stage
0.941
0.763–1.161
0.571
Lauren typ
1.035
0.857-1.250
0,720
počet metastáz
1,375
1,129-1,674
0,002
-634 G /C polymorfizmus
1.497
1,074 až 2,088 0,017
* cox regresie testom
VEGF :. vaskulárny endoteliálny rastový faktor
Diskusia
identifikácie pacientov s potenciálne zlou prognózou po chemoterapii FOLFOX by nám pomáhajú optimalizovať ďalšie protokol liečby pre pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka. hlásené sme, že imunohistochemické farbenie na vyrezanie Repair komplementáciu 1 (ERCC1) môžu byť užitočné pri predikciu klinický výsledok u pacientov s pokročilou rakovinou žalúdka liečených modifikovaným FOLFOX4 [17]. Tiež sme ukázali, že glutatión S-transferáza M1 (GSTM1) pozitívny genotyp svedčí výrazne lepšie času do progresie v prípade pokročilého karcinómu žalúdka liečení FOLFOX [18].
Asociácia polymorfizmov génov VEGF s rizikom alebo už skôr bolo ukázané prognózu karcinómu žalúdka [12, 13]. V gréckom štúdii, 634C /C bol genotyp významne spojené so zvýšeným rizikom vzniku rakoviny žalúdka, a nesúci -634C /C genotypu bola spojená so znížením celkové prežívanie [12]. V kórejskej štúdii 936 T /T genotypu mal horšie celkové prežívanie v porovnaní s C /C genotypu a -460 T /C alebo C /C genotypu bol zlý prognostický faktor u pacientov s pódiom 0 alebo I rakoviny žalúdka [ ,,,0],13].
Predchádzajúce štúdie ukázali, že expresia VEGF súvisí s rozsahom nádorové vaskularizácia a prognózou u solídnych nádorov, a je prediktívne rezistencie na chemoterapiu [19]. SNP v géne VEGF by mohli mať vplyv na dodávku chemoterapie do nádorových buniek a v dôsledku toho môže držať prediktívne informácie týkajúce sa odpovedí [7]. Tam bolo niekoľko správ o prediktívne hodnote VEGF SNP bevacizumabu liečených pacientov [20-22]. Schultheis et al.
[20] hlásil, že opakujúce sa pacienti s rakovinou vaječníkov s VEGF +937 T polymorfizmus C /T genotypu mal dlhšie PFS pri liečbe cyklofosfamidom a bevacizumabom. Schneider et al
. [21] ukázali, že VEGF -2578AA genotyp bol spojený s nadradeným medián OS, a VEGF -1154A alela tiež preukázal vynikajúcu strednej OS u pacientov s pokročilým karcinómom prsníka s paklitaxelom a bevacizumabom liečby. Formica et al
. [22] hlásil, že VEGF -1154 G /A bol nezávislý prognostický faktor pre PFS a VEGF -634 G /C bola významne spojená s rýchlosťou odozvy u pacientov s metastatickým pacientov s kolorektálnym karcinómom liečených v prvej línii liečby zahŕňajúce fluorouracil, Irinotecan, a bevacizumab.
v tejto štúdii sme hodnotili šesť spoločných polymorfizmy VEGF génov a ich spojenie s odozvou a prežitie v metastatických pacientov s karcinómom žalúdka liečených FOLFOX. Pokiaľ je nám známe, toto je prvá štúdia, ktorá preukázala vzťah medzi SNP v géne VEGF a reakciu na chemoterapiu u pacientov s karcinómom žalúdka. Genotyp frekvencia -634 G /C, -2578C /A, alebo + 936C /T v tejto štúdii zodpovedali tým, ktoré sa uvádza v literatúre o kórejskej pacientov s kolorektálnym karcinómom [23-25], zatiaľ čo frekvencia -1498 C /T genotypu bol podobný ako u pacientov s karcinómom prostaty japonských [26]. Akákoľvek malá odchýlka môže byť vysvetlená veľkosťou vzorky.
Tam boli dve správy, ktoré vykazovali prediktívnu hodnotu VEGF SNP na FOLFOX alebo XELOX chemoterapie u kolorektálneho karcinómu [15, 16]. Dolné sadzby odozvy a kratšie PFS bolo preukázané u pacientov s VEGF -2578 C /A a 405 G /C genotypu, ktorí boli liečení XELOX [15]. Iné štúdie ukázali, že VEGF -460 T /C alebo C /C genotypy boli spojené s nižšou rýchlosťou reakcie na FOLFOX-4 a kratším prežitím [16]. Podľa našej štúdie, iba VEGF -634 G /G genotypu ukázal významný vzťah s nižšou rýchlosťou odozvy a bola preložená do krátkej PFS. Kratšia doba celkového prežívania bola tiež preukázaná u pacientov kórejských kolorektálnym karcinómom s VEGF -634 G /G fenotyp [27]. VEGF -634 G /C pravdepodobne ovplyvňuje expresiu na posttranskripční úrovni zmenou aktivity IRES B, čím sa zvyšuje iniciáciu translácie v AUG štartovacieho kodónu a regulačné produkciu veľkého VEGF izoformy, ktorý je preložený na alternatívnom CUG kodóne [28]. Takéto zmeny by mohli byť možné vysvetlenie k nízkej miere odozvy, ale niekoľko iné mechanizmy môžu byť tiež zapojené. Avšak, nemôžeme určiť, či išlo o odpoveď na 5-FU, oxaliplatina alebo kombinácia oboch, ktorá sa zdala byť príbuzný SNP v géne VEGF, alebo nie v tejto štúdii. Žiadny z ostatných, skúmaných SNP priznaných žiadny klinický význam.
Niekoľko štúdií vyplýva, že VEGF-634 G /C polymorfizmy génu sú spojené s výrobou VEGF. Avšak, výsledky sú konzistentné. AWAT et al.
[29] uvádzajú, že jedinci s C /C genotypom -634 mal vyšší v sére nalačno hladinu VEGF ako pacienti s inými genotypmi, a že sa vykonáva zvýšené riziko diabetickej retinopatie. Medzitým, Watson a spol.
[10] ukázal, že -634 G alely je spojená s vyššou produkcia VEGF než + 405C alely. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Mir-146a rs2910164 G /C polymorfizmus a rakovina žalúdka citlivosť: meta-analysis
• Román difúzna žalúdočné variantu rakovina citlivosť u E-cadherinu (CDH1) intronom 2: Kontrolný Prípadová štúdia v talianskej population