Il rapporto di crescita endoteliale vascolare polimorfismi del gene fattore e l'outcome clinico nei pazienti con cancro gastrico avanzato trattati con FOLFOX: polimorfismo VEGF nel carcinoma gastrico

Il rapporto di crescita endoteliale vascolare polimorfismi del gene fattore e l'outcome clinico nei pazienti con cancro gastrico avanzato trattati con FOLFOX: polimorfismo VEGF nel carcinoma gastrico
Abstract
sfondo
Lo scopo di questo studio è quello di valutare le associazioni tra endoteliale vascolare fattore di crescita (VEGF) polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) e l'esito clinico nei pazienti affetti da cancro gastrico avanzato trattati con oxaliplatino, 5-fluorouracile, e Leucovorin (FOLFOX).
Metodi
DNA genomico è stato isolato da sangue intero, e sei VEGF (-2578C /A, -2489C /T, -1498 T /C, -634 G /C, + 936C /T, e 1612 G /A) polimorfismi del gene sono stati analizzati mediante PCR. I livelli di VEGF nel siero sono stati misurati utilizzando immunoenzimatici-linked.
Risultati
pazienti con G /G genotipo VEGF per -634 G /C polimorfismo del gene ha mostrato un tasso di risposta inferiore (22,2%) rispetto a quelli con G /C o C /C genotipo (32,3%, 51,1%; P = 0.034
). I pazienti con il VEGF -634 G /C polimorfismo G /C + C /C genotipo ha avuto una sopravvivenza libera da progressione più lunga (PFS) di 4,9 mesi, rispetto al PFS di 3,5 mesi per quelli con la G /G (P
= 0,043, log-rank test). All'analisi multivariata, questo genotipo G /G di VEGF -634 G /C polimorfismo è stato identificato come un fattore prognostico indipendente (Hazard ratio 1.497, P = 0.017
).
Conclusione
nostri dati suggeriscono che G /G genotipo di VEGF -634 G /C polimorfismo è legato ai più alti livelli sierici di VEGF e scarso esito clinico nei pazienti affetti da cancro gastrico avanzato.
Parole
VEGF polimorfismo cancro gastrico Sfondo
cancro gastrico rimane una significativa problema di salute nonostante calo dell'incidenza in Occidente. E 'il 4 ° tumore più comune in tutto il mondo, che rappresentano il 8,6% di tutte le nuove diagnosi di cancro nel 2002 [1]. Sebbene l'incidenza di cancro allo stomaco tra coreana è diminuita nel corso degli ultimi due decenni, il cancro gastrico è il carcinoma più comune negli uomini, e il terzo tipo più comune di cancro nelle donne come una delle principali cause di morte per cancro in Corea [2].
In caso di pazienti che sono stati più recentemente diagnosticati con cancro gastrico o cancro gastrico con metastasi a distanza, il tasso di sopravvivenza media a 5 anni è riconosciuto per essere poveri a meno del 10% [3]. Fino ad oggi, nessuno studio randomizzato sulla chemioterapia di combinazione ha riportato un tempo mediano di sopravvivenza superiore a 12 mesi [4]. 5-fluorouracile (5-FU) è stato usato come agente chemioterapico principale per il trattamento del cancro gastrico, e chemioterapia di combinazione con 5-FU ha mostrato un miglioramento dei risultati clinici. Anche se 5-FU con cisplatino è un agente efficace, si è ritenuto di avere un alto livello di tossicità [4]. Oxaliplatino, un altro agente a base di platino, ha un profilo di tollerabilità più favorevole di cisplatino. L'acido /5-FU /oxaliplatino combinazione folinico (FOLFOX) ha dimostrato di essere un agente efficace trattamento di prima o di seconda linea per il carcinoma gastrico avanzato [5, 6]. Tuttavia, alcuni pazienti sono predisposti a malattie refrattarie mentre altri sviluppano resistenza dopo la risposta iniziale. I pazienti possono anche avere una diversa gravità degli eventi avversi correlati al farmaco. La crescente domanda di miglioramento delle tecniche per la previsione della risposta al trattamento e la sopravvivenza può facilitare personalizzato chemioterapia e rischi connessi, con conseguente tassi di sopravvivenza significativamente migliorate.
Fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) è un fattore di crescita pro-angiogenico ben noto, e la sua stimolazione in condizioni di ipossia gioca un ruolo critico nel promuovere la sopravvivenza delle cellule maligne nella crescita locale del tumore e l'invasione, e nello sviluppo di metastasi [7]. Sono stati riportati diversi importanti ruoli di VEGF nella progressione del cancro gastrico umano. L'espressione di VEGF-A è correlato con vascolarizzazione del tumore [8], e la frequenza di metastasi epatiche aumentato significativamente tra i pazienti con tumori positivi VEGF [9]. L'espressione di VEGF-A è anche correlato con una prognosi sfavorevole, ed è un fattore prognostico indipendente nei pazienti con cancro gastrico [8, 9].
Il gene VEGF è localizzato sul cromosoma 6p21.3, e contiene otto esoni essendo separate da sette introni. Diversi polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) sono state descritte nel gene VEGF alcuni dei quali hanno dimostrato di influenzare l'espressione del gene [10]. Tra questi SNP sono cinque SNP (-2578 C /A, -1154 G /A, -460 T /C nel promotore VEGF, 405 G /C nella regione 5'-non tradotta e + 936C /T in 3'-non tradotta regione) che sono comuni e sono legati alla sintesi delle proteine ​​VEGF [11]. quantità molto limitata di dati pubblicati su polimorfismi di VEGF in associazione con la prognosi del cancro gastrico è disponibile, ed i risultati stanno divergendo [12, 13]. Questi studi mostrano un aumento del livello di associazione di cancro gastrico e /o risultati clinici poveri nel sottogruppo con genotipi, che prevedere un più elevato livello di espressione di VEGF.
VEGF non solo promuove neovascolarizzazione e migrazione, ma aumenta anche la permeabilità vascolare e perdite [14]. Ciò si traduce in una elevata pressione del fluido interstiziale che impedisce il trasporto effettivo di farmaci terapeutici in tumori e quindi, riduce l'efficacia del trattamento anti-cancro. SNPs in VEGF possono alterare le concentrazioni della proteina VEGF, e possono riguardare variabilità inter-individuale del rischio e la progressione dei tumori selezionati, e la loro resistenza ai trattamenti. Ci sono stati pochi rapporti che hanno mostrato il valore predittivo di VEGF polimorfismo a FOLFOX o capecitabina e chemioterapia oxalipatin (XELOX) nel tumore del colon-retto [15, 16]. Tuttavia, nessuno studio che ha indagato il SNPs del gene VEGF, e la loro relazione con gli esiti clinici dei pazienti affetti da cancro gastrico trattati con FOLFOX è stato ancora pubblicato.
Lo scopo di questo studio è quello di verificare se VEGF SNP sono associati con esiti clinici di pazienti con carcinoma gastrico avanzato trattati con FOLFOX prima linea di chemioterapia palliativa o non
. Metodi
popolazione di studio
Tutti i pazienti di questo studio avevano istologicamente confermato adenocarcinoma dello stomaco. Questi pazienti sono stati trattati con chemioterapia FOLFOX. Tutti i pazienti che erano in loro età compresa tra i 18 attraverso 79 avevano un performance status con un punteggio inferiore o uguale a due secondo la scala Eastern Cooperative Oncology Group, e adeguata del midollo osseo così come la funzione renale chemioterapia adiuvante precedente deve essere completata almeno 6 mesi prima dell'inclusione. I criteri di esclusione includevano la presenza di metastasi del sistema nervoso centrale, malattie mediche concomitante grave o non controllata, e una storia di altri tumori maligni. consenso informato scritto è stato ottenuto da ciascun paziente prima dell'ingresso nello studio. L'uso di tutti i materiali dei pazienti è stato approvato dal Comitato Etico di Dong-A University Hospital.
Le caratteristiche dei pazienti
dal marzo 2007 ad agosto 2010, un totale di 190 pazienti arruolati in questo studio. dettagli demografici sui pazienti inclusi nello studio sono riportati nella tabella 1. I pazienti consisteva di 125 uomini e 65 donne, e la loro età media era di 55 (che vanno 24-79). Ninty-sette pazienti sono stati sottoposti operazione curativa (stadio I, 8; fase II, 28; fase III, 41; stadio IV (M0), 20), e una resezione palliativa è stato fatto in 30-stadio IV pazienti. Settantanove pazienti (41,6%) hanno ricevuto chemioterapia adiuvante 5-FU-based. Quasi tutti i pazienti avevano una buona performance status. Nessuna associazione significativa è stata rilevata tra i genotipi del SNP e caratteristiche del paziente (dati non riportati). La genotipizzazione per i sei polimorfismi di VEGF sono stati ottenuti da tutti i 143 pazienti. Le frequenze di ogni genotipo sono riportati nella tabella 1 2.Table caratteristiche dei pazienti
variabile
sottogruppo
No. dei pazienti
%
sesso maschile

125
65,8
femminile
65
34,2
Età
mediana
55 anni
Gamma
(24-79 anni)
ECOG performance status
0,1
186
97,9
2 4
2.1
Lauren
intestinale
26
13,7
Diffondere
41
21,6
misto 18
9.5
sconosciuta
105
55.3
fase iniziale
1 8
4,2 2
28
14,7 3
41
21,6 4
113
59,5
Operazione
+
127
66,8 -
63
33,2
La terapia adiuvante
+
79
41.6
-
111
58,4
No. di metastasi
1 106
55,8 2
54
28,4
> 3
30
15,8
CEA
< 5 ng /ml
119
62,6
≥ 5 ng /ml
54
28,4
incontrollato
17
8.9
ECOG: orientale gruppo oncologia cooperativo, CEA:. antigene carcinoembrionario
Tabella 2 distribuzione dei genotipi e dei livelli sierici di vascular endothelial growth factor
genotipo
polimorfismo
No. dei pazienti
%
Media ± SD (pg /ml)
P *
-2578C /A
CC
116
61,1
453,2 ± 278,8
0,606
CA
63
33,2
520.0 ± 392.3
AA
11
5.8
523,9 ± 391,7
-2489C /T
CC
116
61,1
453,2 ± 278,8
0,117
CT
60
31,6
478,4 ± 350.0
TT
14
7.4
724,0 ± 517,7
-1498 T /C
TT
116
61,1
453,2 ± 278,8
0,563
TC
61
32,1
512,2 ± 400,7
CC
13
6,8
568,2 ± 324,9
-634 G /C
GG
54
28.4
889,7 ± 453,7
0.004
GC
93
48,9
471,4 ± 222,6
CC
43
22,6
410,7 ± 222.6
+ 936C /T
CC
135
71,1
440,0 ± 292,0
0,722
CT
45
23,7
495,5 ± 329,3
TT 10
5.3
502,6 ± 371,1
1612 G /A
GG
139
73,2
472,4 ± 339,2
0,371
GA
47
24,7
538,3 ± 295,9
AA 4
2.1
267,0 ± 159,3
* da Mann-Whitney
SD:.. deviazione standard
protocolli di trattamento e la modificazione della dose
Il giorno 1, oxaliplatino (85 mg /m 2) è stato somministrato per via endovenosa (iv) l'infusione in 500 ml di soluzione fisiologica o glucosata oltre 2 ore. Il giorno 1 e 2, leucovorin (20 mg /m 2) è stato somministrato come i.v. bolo, immediatamente seguito da 5-FU (400 mg /m 2) dato in i.v. 10-min bolo, seguiti da 5-FU (600 mg /m 2) come un continuo di 22 ore di infusione con uno scudo di luce. Modifiche della dose di oxaliplatino o 5-FU sono stati effettuati per ematologica, gastrointestinale, o effetti tossici neurologici sulla base delle più grave grado di tossicità che si era verificato durante il ciclo precedente. Il trattamento potrebbe essere ritardata fino a 2 settimane se la tossicità sintomatica persisteva, o se il numero assoluto di neutrofili era < 1.500 /ml o piastrine conte era < 100.000 /ml. La dose di 5-FU è stato ridotto del 25% per i corsi successivi dopo criteri del National Cancer Institute Common Toxicity (NCI-CTC) di grado 3 diarrea, si era verificato stomatite, o dermatiti. La dose di oxaliplatino è stato ridotto del 25% nei cicli successivi se ci fossero parestesie persistenti tra cicli o parestesie con compromissione funzionale della durata > 7 giorni. Il trattamento è stato continuato fino c'erano segni di progressione della malattia, effetti tossici inaccettabili sviluppati, o il paziente ha rifiutato un ulteriore trattamento.
Follow-up e valutazione della risposta
Prima di ogni ciclo di trattamento, un esame fisico, ematologia di routine, biochimica e radiografia del torace sono stati effettuati. scansioni di tomografia computerizzata per definire l'estensione della malattia, e le risposte sono state effettuate dopo quattro cicli di chemioterapia, o prima se ci fosse evidenza di peggioramento clinico. I pazienti sono stati valutati prima di iniziare ogni ciclo di 2 settimane con il NCI-CTC, tranne nel caso di neurotossicità. Per la neurotossicità, una scala specifica per oxaliplatino è stato utilizzato: grado 1, parestesie o disestesie di breve durata, ma risolvere prima della prossima dosaggio; grado 2, parestesie persistenti tra le dosi (2 settimane); e di grado 3, parestesie che interferiscono con la funzione.
Le risposte sono state valutate utilizzando criteri RECIST. risposta completa (CR) è stata definita come la scomparsa di tutte le prove di malattia e la normalizzazione dei marcatori tumorali per almeno 2 settimane. Una risposta parziale (PR) è stato definito come ≥ riduzione del 30% nelle misurazioni del tumore uni-dimensionale, senza la comparsa di nuove lesioni o la progressione di ogni lesione esistente. malattia progressiva (PD) è stata definita come una delle seguenti: aumento del 20% nella somma dei prodotti di tutte le lesioni misurabili, aspetto di qualsiasi nuova lesione o ricomparsa di qualsiasi lesione che aveva precedentemente scomparso. malattia stabile (SD) è stata definita come una risposta del tumore che non soddisfano i criteri per CR, PR, o PD.
misurazioni dei livelli sierici di VEGF
campione di sangue è stato elaborato da ciascun partecipante attraverso prelievo venoso prima della chemioterapia e dopo tre cicli di trattamento. I campioni di sangue sono stati centrifugati per 10 min a 3000 giri /min a -4 ° C. Il siero è stato successivamente rimosso e conservato a -80 ° C fino all'analisi biochimica. Serum VEGF immunoenzimatico (ELISA) è stata completata secondo i protocolli del produttore (R & D Systems, Minneapolis MN). In breve, i campioni di siero sono stati scongelati in ghiaccio tre ore prima del test. I campioni di siero sono stati pre-trattati con una soluzione acida di promuovere la dissociazione di VEGF da abbondanti VEGF proteine ​​leganti e stabilizzati in tampone e conservanti. I campioni sono stati placcati in 96 formato ben in duplicato dopo ciascuna delle anticorpo secondario policlonale VEGF-1 /HRP coniugato è stato aggiunto. Soluzione substrato (H 20 2 /tetrametilbenzidina) è stato poi somministrato per trenta minuti dopo la reazione è stata spenta con acido solforico. Le piastre sono state lette in assorbanza a 450 nm su un lettore di piastre Victor 3 (Perkin Elmer, Boston MA). assorbanza estrapolata è stato analizzato utilizzando il software Masterplex Readerfit ELISA (Hitachi, Waltham MA) e la concentrazione è stata determinata a seguito di un 4 Parametro curva logistica in forma come da raccomandazioni del fabbricante. Le misurazioni sono state effettuate dal singolo ricercatore cieco ai dati clinico-patologici dei pazienti. Dell'estrazione
del DNA e preparazione del campione
DNA è stato estratto dal buffy coat 75 ul utilizzando il kit MagAttract DNA del sangue Midi M48 (Qiagen, Inc), utilizzando una stazione di lavoro Qiagen biorobot M48, secondo i protocolli del produttore automaticamente. La purezza e la concentrazione del DNA isolato sono stati determinati da Nanodrop® spettrofotometro ND-1000 (tecnologie NanoDrop, DE, USA). Dal momento che abbiamo bisogno di quantità più dettagliata di ogni campione per reazione genotipizzazione, abbiamo misurato la quantità di DNA utilizzando l'™ PicoGreen® dsDNA Assay Kit Quant-iT (Molecular Probes, Inc., Stati Uniti d'America). Abbiamo fatto lastre secche per la reazione genotipizzazione con 10 ng in ciascun pozzetto di 384 piatti. Polimorfismi
candidati e progettazione di primer
SNP sono stati selezionati dallo studio precedente (11). I sei SNPs analizzati erano VEGF -2578 C /A SNP (rs699947), VEGF -1498 C /A SNP (rs833061), VEGF -634 G /C SNP (rs2010963), VEGF 936 C /T SNP (rs3025039), e VEGF 1612 G /A SNP (rs10434). Il gruppo di test multiplex è stato progettato per testare fino a 18 SNPs nello stesso gruppo di reazione utilizzando MassARRAY Assay v3.0 Designer (Sequenom, CA). Genotipizzazione
genotipizzazione è stata effettuata utilizzando il test IPLEX Gold ™ sul MassARRAY ® Platform (Sequenom, CA). Le reazioni PCR sono state eseguite in un volume totale di 5 ul con 10 ng di DNA genomico, 1,625 mM MgCl 2, 0,1 unità di HotStarTaq polimerasi (Qiagen, Valencia, CA), 0,5 mM dNTP (Invitrogen, Inc.), e 100 primer nm. Le reazioni di PCR iniziato a 94 ° C per 15 minuti, seguita da 45 cicli a 94 ° C per 20 s, 50 ° C per 30 s, e 72 ° C per 1 min, con l'estensione finale a 72 ° C per 3 min . Amplified prodotti di PCR sono stati trattati con miscela di SAP in un 7UL totale con Shirimp enzima fosfatasi alcalina & buffer. reazione SAP iniziata a 37 ° C per 40 min a 85 ° C per 5 min. Le regioni che contengono SNP bersaglio sono stati amplificati mediante PCR e trattati da SAP seguita dalla reazione di estensione di base singola, con un conseguente differenza allele-specifica di massa tra i prodotti di estensione. Le reazioni di estensione sono state eseguite in un volume totale di 9 ul con 50 uM dNTP /dideoxynucleotide fosfato (ddNTP) ciascuna, 0,063 unità /ul Thermo Sequenase (sia dal SEQUENOM, Inc.), e 625 nM a 1.25uM primer estensione. Nelle condizioni di ciclismo, due anelli in bicicletta, uno dei cinque cicli che si trova all'interno di un ciclo di 40 cicli sono stati utilizzati. Il campione è stato denaturato a 94 ° C. Filamenti vengono ricotti a 52 ° C per 5 s ed esteso a 80 ° C per 5 s. Il ciclo di ricottura e estensione è stata ripetuta altre quattro volte per un totale di cinque cicli e poi, ricollegati al denaturazione passo 94 ° C per 5 s. Dopo poi, la ricottura e estensione loop 5-ciclo è stato condotto di nuovo. I cinque di ricottura e di estensione passi con il passo singolo di denaturazione sono state ripetute ulteriori 39 volte per un totale di 40. Le 40 cicli dei passi 5-ciclo di ricottura e di estensione equivale a un totale di 200 cicli (5 × 40). Un'estensione finale è stata effettuata a 72 ° C per tre minuti e poi, il campione wascooled giù fino a 4 ° C. Dopo aver pulito i prodotti di reazione di estensione con SpectroCLEAN, i prodotti sono stati trasferiti al SpectroCHIP utilizzando SpectroPOINT e poi, scandita attraverso SpectroREADER (MALDI-TOF). dati genotipo risultanti sono stati raccolti da Tipi v4.0 (Sequenom, CA). Analisi statistica

I livelli sierici di VEGF sono stati espressi come media ± deviazione standard. Le associazioni tra VEGF SNPs e livelli di VEGF nel siero sono stati valutati da test di Mann-Whitney. L'associazione tra VEGF SNP e la risposta alla chemioterapia è stata valutata mediante χ
2 statistiche.
L'end point primario dello studio è stato quello di indagare l'associazione tra genotipi e la sopravvivenza libera da progressione (PFS). La sopravvivenza libera da progressione e la sopravvivenza globale (OS) sono stati calcolati dalla data di terapia ha iniziato a partire dalla data della progressione della malattia e della morte, rispettivamente. I pazienti che erano vivi all'ultimo follow-up sono stati proiettati in quel momento. I pazienti che sono stati esclusi da questo studio o che sono morti prima di progressione sono stati proiettati nel momento in cui essi sono stati esclusi da questo studio. L'associazione di ogni marcatore con la sopravvivenza è stato analizzato utilizzando trame di Kaplan-Meier, il log-rank test, e la sua associata intervallo di confidenza 95% (CI) è stata calcolata. Gli hazard ratio (HR) per la sopravvivenza, insieme con il loro 95% CI, sono stati calcolati usando rischio proporzionale di Cox di regressione per età, sesso, sottogruppo istologico, performance status, stadio della malattia, e il polimorfismo sottotipo.
Tutti i test erano a due code, e P
< 0.05 è stato considerato statisticamente significativo. Le analisi sono state fatte utilizzando SPSS versione 14.0 (SPSS Inc., Chicago, IL).
Risultati
VEGF genotipo e risposta chemioterapia
Abbiamo analizzato l'associazione tra i livelli sierici di pretrattamento VEGF con VEGF SNP. Distribuzione dei genotipi del VEGF e dei suoi livelli sierici di VEGF sono riportati nella tabella 2. I livelli sierici di VEGF era significativamente più alto nei portatori del genotipo -634 G /G rispetto al G /C o C /C (889,7 ± 453,7 vs 471,4 ± 328,1 contro 410,7 ± 222,6 pg /ml, rispettivamente; p = 0.004
). Nessuno degli altri SNPs testato è risultato associato a livelli di VEGF nel siero
Il tasso di risposta globale per la chemioterapia trattamento è stato del 34,2% (95% CI: 20,0-40,5%).. Sei pazienti hanno raggiunto una risposta completa (3,2%), 59 pazienti hanno raggiunto risposta parziale (34,2%), 76 pazienti hanno mostrato una condizione stabile (40,0%) e 49 hanno mostrato uno stato di progressivo (25,8%). di Lauren classificazione (P = 0.029
) e il numero di metastasi erano correlati alla risposta alla chemioterapia (P = 0.034
). Altri parametri come il sesso, l'età, il funzionamento precedente, fase iniziale, la chemioterapia adiuvante, e il livello dell'antigene carcinoembrionario (CEA) non erano significativamente correlati con la risposta clinica alla chemioterapia FOLFOX. VEGF SNP e la sua associazione con le risposte sono riassunte nella Tabella 3. Il VEGF-A -634 genotipi G /G è stato legato al tasso di risposta inferiore rispetto a, rispettivamente, G /C o genotipi C /C (22,2%, 32,3%, 51,1%, , P = 0.034
). Nessuno degli altri SNPs analizzato predetto una risposta rate.Table 3 Risposta in base alla genotipizzazione del vascular endothelial growth factor
genotipo
polimorfismo
ORR
%

P *
-2578C /A
CC
41/116
35,3
0,798
CA
20/63
31,7
AA
3/11
27,3
-2489C /T
CC
41/116
35,3
0,812
CT
19/160
31,7
TT
4/14
28,6
-1498 T /C
TT
41/116
30,8
0.832
TC
19/61
31,1
CC
4/13
35,3
-634 G /C
GG
12/54
22,2
0,034
GC
30/93
32,3
CC
22/43
51,1
+ 936C /T
CC
46/135
34,1
0.852
CT
14/45
31,1
TT
4/10
40,0
1612 G /A
GG
50/139
36.0
0.333
GA
12/47
25,5
AA
2/4
50,0
* per il test esatto e chi-quadrato di Fisher
ORR.: tasso complessivo di risposta.
Associazione VEGF genotipo e la sopravvivenza
La durata mediana del follow-up è stata di 14,6 mesi (che vanno 1.0-48.3 mesi). La PFS è stata di 4,5 mesi (95% CI 3.8-5.1 mesi), e il sistema operativo mediana è stata di 12,9 mesi (95% CI 10.6-15.2 mesi). Tra i parametri clinici valutati, genere, operazione precedente, di classificazione di Lauren, chemioterapia adiuvante, CEA non sono stati correlati sia con PFS o OS. l'età del paziente era legato a entrambi PFS (P = 0,035
) e OS (P = 0,011
). I pazienti più giovani (meno di 60 anni di età) hanno avuto migliori risultati clinici. La tabella 4 mostra l'associazione di VEGF SNP con la PFS e OS nei 190 pazienti analizzati. I pazienti con il VEGF -634 G /C polimorfismo G /C + C /C genotipo avevano una PFS più di 4,9 mesi, rispetto al PFS di 3,5 mesi per quelli con il G /G (P = 0,043
, Figura 1 ). Nessuna influenza significativa su OS è stato osservato dal VEGF -634 G /C. Tuttavia, altri VEGF SNP non fosse legato alla sopravvivenza libera da progressione, o OS.Table 4 L'analisi univariata secondo la genotipizzazione del fattore di crescita vascolare endoteliale
genotipo
polimorfismo
No. di
pazienti
PFS (Mo)
P *
OS (Mo)
P *
-2578C /A
CC
116
4.9
0.676
12,8
0,423
CA
63
3.9
14,4
AA
11
3.0
11,5
-2489C /T
CC
116
4.9
0.249
12,8
0.462
CT
60
4.0
14,4
TT
14
2.9
11,5
-1498 T /C
TT
116
4.9
0,647
12.8
0,440
TC
61
3.9
13,7
CC
13
3.0
11,8
-634 G /C
GG
54
3,5
0,043
13,1
0,407
GC
93
4.8
14,4
CC
43
4.9
11.5
+ 936C /T
CC
135
4,5
0,925
13,1
0,711
CT
45
4.7
11,9
TT 10
3.9
11,9
1612 G /A
GG
139
4.4
0.448
12,8
0,644
GA
47
5,0
14,4
AA 4
2.1
10.6
* da log-rank test
PFS:. sopravvivenza libera da progressione, Mo: mesi , OS:. sopravvivenza globale
Figura 1 curva di sopravvivenza libera da progressione di Kaplan-Meier in base al fattore di crescita vascolare endoteliale -634 G /C polimorfismi (P = 0,043).
fattori che hanno avuto la significatività statistica nei modelli univariati sono state incluse nel modello multivariato. All'analisi multivariata, l'età (hazard ratio (HR): 1.521, 95% CI: 1,105-2,093, p = 0,010), e il numero di metastasi (HR: 1.375, 95% CI: 1,129-1,674, p = 0,002) è rimasto come fattori prognostici indipendenti per la sopravvivenza libera da progressione. Il genotipo G /G di -634 G /C polimorfismo è stato anche identificato come un fattore prognostico indipendente per la sopravvivenza libera da progressione (HR: 1.497, 95% CI: 1,074-2,088, P = 0.017) (Tabella 5). Nessun altro VEGF SNP sono stati significativi fattori prognostici indipendenti impatto sull'analisi PFS.Table 5 multivariata
Il tempo alla progressione
variabile
HR
95% CI
p
value*

Age
1.521
1.105–2.093
0.010
Gender
1.313
0.939–1.837
0.111
Performance
2.079
0.743–5.816
0.163
Operation
1.143
0.763–1.713
0.516
Stage
0.941
0.763–1.161
0.571
Lauren tipo
1.035
0,857-1,250
0.720
Numero di metastasi
1.375
1,129-1,674
0.002
-634 G /C polimorfismo
1.497
1,074-2,088
0.017
* da test di regressione di Cox
VEGF:. fattore di crescita vascolare endoteliale
Discussione
identificazione di pazienti con prognosi infausta potenzialmente dopo la chemioterapia FOLFOX ci aiuterebbe ad ottimizzare un'altra protocollo di trattamento per i pazienti con carcinoma gastrico avanzato. Abbiamo riportato che colorazione immunoistochimica per Excision Repair Complementation 1 (ERCC1) può essere utile in previsione del risultato clinico nei pazienti con cancro gastrico avanzato trattati con FOLFOX4 modificata [17]. Abbiamo anche dimostrato che il glutatione S-transferasi M1 (GSTM1) genotipo positivo evidenziato un tempo significativamente migliore alla progressione nei casi di carcinoma gastrico avanzato in trattamento con FOLFOX [18].
L'associazione dei polimorfismi del gene VEGF con il rischio o prognosi di cancro gastrico è già stato dimostrato [12, 13]. In uno studio greco, 634C /C genotipo era significativamente associato ad un aumentato rischio di sviluppo del cancro gastrico, e portando il -634C /C genotipo era associata ad una ridotta sopravvivenza globale [12]. In uno studio coreano, 936 T /T genotipo aveva una sopravvivenza complessiva peggiore rispetto al C /C genotipo, e il -460 T /C o C /C genotipo era un fattore prognostico negativo nei pazienti con stadio 0 o io cancro gastrico [ ,,,0],13].
precedenti studi hanno dimostrato che l'espressione di VEGF è correlato all'entità della vascolarizzazione del tumore e la prognosi di tumori solidi, ed è predittivo di resistenza alla chemioterapia [19]. SNPs nel gene VEGF potrebbero influenzare la consegna della chemioterapia alle cellule tumorali e possono quindi contenere informazioni predittive in relazione alla risposta [7]. Ci sono state diverse segnalazioni di valore predittivo di VEGF SNPs per i pazienti trattati con Bevacizumab [20-22]. Schultheis et al.
[20] ha riferito che ricorrenti pazienti con tumore ovarico con VEGF 937 T del polimorfismo C /T genotipo avevano una sopravvivenza libera da progressione più lunga se trattati con ciclofosfamide e bevacizumab. Schneider et al
. [21] hanno dimostrato che il VEGF -2578AA il genotipo era associata con un sistema operativo mediana superiore, e VEGF -1154A allele anche dimostrato un OS mediana superiore in pazienti con carcinoma mammario avanzato con paclitaxel più il trattamento con bevacizumab. Formica et al
. [22] hanno riportato che il VEGF -1154 G /A era un fattore prognostico indipendente per la sopravvivenza libera da progressione, e VEGF -634 G /C era significativamente associato con il tasso di risposta nei pazienti con carcinoma metastatico del colon-retto pazienti con tumore trattati con trattamento di prima linea tra cui fluorouracile, irinotecan, e bevacizumab.
in questo studio, abbiamo valutato sei polimorfismi comuni dei geni VEGF e la loro associazione con la risposta e la sopravvivenza nei pazienti con carcinoma gastrico metastatico trattati con FOLFOX. A nostra conoscenza, questo è il primo studio a dimostrare una relazione tra SNPs nel gene VEGF e la risposta alla chemioterapia nei pazienti con tumore gastrico metastatico. Le frequenze genotipiche di -634 G /C, -2578C /A, o + 936C /T nel presente studio corrisponde a quelli riportati in letteratura su pazienti affetti da cancro del colon-retto coreano [23-25], mentre la frequenza del -1498 C /T genotipo era simile a quella dei pazienti affetti da cancro prostatico giapponese [26]. Ogni variazione minore potrebbe essere spiegata con le dimensioni del campione.
Ci sono state due relazioni che hanno mostrato il valore predittivo di VEGF SNP a FOLFOX o XELOX chemioterapia nel tumore del colon-retto [15, 16]. I tassi di risposta inferiori e PFS più brevi sono stati mostrati nei pazienti con VEGF -2578 C /A e 405 G /C genotipo che sono stati trattati con XELOX [15]. Altro studio ha dimostrato che il VEGF -460 T /C o C /C genotipi sono stati associati con il tasso di risposta inferiore a FOLFOX-4 e più breve sopravvivenza [16]. Secondo il nostro studio, solo VEGF -634 G /G genotipo ha mostrato una significativa associazione con il tasso di risposta inferiore ed è stato tradotto in breve PFS. Shorter sopravvivenza globale è stato dimostrato anche in pazienti affetti da cancro del colon-retto coreano con VEGF -634 G /G fenotipo [27]. Il VEGF -634 G /C probabile influenza l'espressione a livello post-trascrizionale alterando l'attività del sito interno ribosomiale ingresso B, in tal modo aumentando l'inizio della traduzione in agosto inizio codone e regolando la produzione del grande isoforma VEGF, che viene tradotto ad un codone CUG alternativa [28]. Tali cambiamenti potrebbero essere una possibile spiegazione per i tassi di risposta bassi, ma molti altri meccanismi possono anche essere coinvolti. Tuttavia, non siamo in grado di specificare se fosse la risposta al 5-FU, oxaliplatino o la combinazione di entrambi che sembrava essere correlato alla SNPs nel gene VEGF o meno in questo studio. Nessuno del resto, degli SNP esaminati conferiti alcun significato clinico.
Alcuni studi hanno riportato che VEGF-634 polimorfismi G C Gene /sono associati con la produzione di VEGF. Tuttavia, i risultati non sono coerenti. Awata et al.
[29] hanno riportato che gli individui con il C /C genotipo -634 avevano un livello di VEGF a digiuno superiore a quelli con altri genotipi, e che portavano un aumento del rischio di retinopatia diabetica. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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