GP73 je down-regulovaný u karcinómu žalúdka a spojené s nádorom differentiation

GP73 je down-regulovaný u karcinómu žalúdka a spojenú s diferenciáciou nádoru
abstraktné
pozadia
Golgi proteín 73 (GP73) je typ II Golgi transmembránový proteín , Je nadmerne exprimovaný v rôznych rakovín, vrátane hepatocelulárny karcinóm, žlčových ciest karcinómov, rakoviny pľúc a rakovinu prostaty. Avšak, existuje niekoľko správ o GP73 v rakoviny žalúdka. Táto štúdia je zameraná na skúmanie expresie GP73 a jej vzťah s klinickými patologickými znaky v karcinómu žalúdka.
Metódy
GP73 mRNA hladina bola stanovená kvantitatívne real-time RT-PCR v 41 dvojíc žalúdočných nádorových tkanív a priľahlé non-nádorové slizničné tkanivá. Western blotting bol tiež vykonaný pre detekciu hladiny proteínov GP73. Expresia proteínov sa analyzovala GP73 imunohistochemicky u 52 pacientov s klinicky charakterizovaných rakovinou žalúdka a 10 non-nádorových žalúdočné kontroly slizničnej tkanivo.
Výsledky
mRNA a proteínovej úrovni z GP73 bol významne down-regulované v žalúdočných nádorových tkanivách v porovnaní s non-nádorové slizničné tkanivá. V non-nádorového sliznice, silné difúzne cytoplazmatické farbenie môže byť videný v bunkách umiestnených na povrchu glandulární a foveolární priestoru; zatiaľ čo v nádorových tkanivách, farbenie bolo oveľa slabšie, alebo dokonca chýba, a najmä v semi-granulované dot-ako vzor farbenie. Hladina expresie proteínu GP73 bol spojený s pohlavie pacienta a diferenciácie tumoru.
Závery
GP73 bol normálne vyjadrených v non-nádorové žalúdočnej sliznice a down-regulovaný u rakoviny žalúdka. Jeho expresia v karcinómu žalúdka bola v korelácii s diferenciáciou nádoru.
Kľúčové
GP73 karcinómu žalúdka nádoru diferenciačný pozadia
GP73, tiež známy ako GOLM1 a GOLPH2, je typ II Golgiho transmembránový proteín. Štrukturálne, GP73 obsahuje krátky N-terminálny cytoplazmatickú doménu, transmembránovú doménu a väčší luminální C-terminálny doménu, ktorá sa skladá z domény stočený-coil a kyseliny chvosta. Luminální C-koncová doména je hlavnou funkciou doména GP73 [1-3]. Myši s ťažkým skrátenie na GP73 C-konca ukázalo zníženú prežitie a ťažké epitelové abnormality obličky a pečeň [4]. Doména stočený-coil mohli interagovať ako s prekurzorom a zrelé sCLU, čo naznačuje, že by mohli prispieť k GP73 na posttranslační modifikáciu, prepravu a sekrécia sCLU [5]. Uznanie proproteinconvertase miesto R 52VRR 55 sa nachádza v C-koncovej ektodomény; PC-sprostredkované štiepenie GP73 transformuje na intracelulárny, Golgiho lokalizované GP73 na rozpustnú, sekrečnú proteín [6]. Avšak funkcia GP73 je stále nejasná.
GP73 bol prvýkrát identifikovaný z knižnice cDNA odvodenej z pečene dospelého pacienta s velkobuněčný hepatitídy. To je považované za epitelových buniek, špecifických pre proteín, ktorý je vysoko exprimovaný v hrubého čreva, žalúdka, prostaty a priedušnice u normálnych, zdravých osôb [1]. ochorenie pečene, ako sú vírusové infekcie a cirhóza, by si-regulujú expresiu GP73 v hepatocytoch [1, 7, 8]. Nedávne štúdie ukázali, že GP73 bol nadmerne vyjadrený v niekoľkých druhov rakoviny, ako je napríklad hepatocelulárny karcinóm [9-11], žlčových ciest karcinómov [11], pľúcne adenokarcinómy [12], rakovina prostaty [13, 14] a seminoma [15]. Expresia GP73 u rakoviny obličiek je oveľa komplexnejšie. Bola označená ako down-regulované vo väčšine jasných buniek karcinómov obličiek (RCC), ale vysoko exprimovaný v papilárnej a chromofobní renálneho karcinómu [16]. Sérum GP73 Bolo tiež zistené, zvýšené v hepatocelulárny karcinóm, karcinómov žlčových ciest a pľúc adenokarcinómy. To dokonca ukázala výhodu oproti alfa-fetoproteínu (AFP) pre diagnostiku skoré hepatocelulárny karcinóm [17, 18]. Tiež, mRNA expresie GP73 v moči prekonal PSA v sére pri detekcii karcinómu prostaty [13].
Karcinóm žalúdka je jedným z najčastejších druhov rakoviny a druhou najčastejšou príčinou úmrtí na nádorové ochorenie na celom svete. To má obzvlášť vysoké frekvencie v Číne [19]. Až do tejto chvíle sa všetci etiologické faktory a patogenézy rakoviny žalúdka neboli plne pochopené. V tejto štúdii sa snažíme skúmať vyjadrenie GP73 a jej vzťah s klinickými patologickými znakmi u karcinómu žalúdka meraním hladiny mRNA a expresiu proteínu GP73 v žalúdočných nádorových a priľahlých non-nádorové sliznice.
Metódy
materiály a pacienti
štyridsať jedna dvojíc žalúdočné nádorové a priľahlé non-nádorové sliznice (viac ako 5 cm od okraja nádoru) bola získaná od pacientov s primárnou rakovinou žalúdka v Zhejiang provincie ľudovej nemocnice, Čína od januára 2011 do decembra 2012. charakteristiky 41 GCsare je uvedené v tabuľke 1. Po chirurgickom odstránení tkaniva boli zmrazené bezprostredne v tekutom dusíku a skladované pri teplote -80 ° C až do use.Table 1 Zhrnutie patologickým charakteristiky pacientov s karcinómom žalúdka
Clinical parametre
N (%)
Pohlavie
mužov
27 (65,9)
Ženy
14 (34,1)
Veľkosť
23 (56,1 ) Hotel < 20
18 (43,9)
≧ 20
histologické diferenciácie
No Sims 3 (7,3)
Stredne
17 (41,5)
Zle
21 (51,2)
Lymfatická metastázy
Nie
11 (26,8)
Áno
30 (73,2)
vzdialenej metastázy
Nie
34 (82,9)
Áno
7 (17,1)
TNM štádium
Aj
8 (19,5)
II
17 (41,5)
III
10 (24,4)
IV
6 (14,6)
päťdesiatdva parafínové exempláre rakoviny žalúdka (GC) tkanivo (43 mužov, 9 žien) bola získaná z provincie Zhejiang ľudovej nemocnice, ktoré boli zhromaždené v rokoch 2010 až 2011. Všetky prípady žalúdočných rakovina boli klasifikované podľa klasifikácie WHO a predstavené pomocou pTNM systému [20]. Tieto prípady sa skladala z 22. patientsaged < 60 rokov, 30 pacientov vo veku ≥60years; 20 pacientov s veľkosťou nádoru < 5cm, 32 pacientov s veľkosťou nádoru ≥5cm; 22 pacientov so stredne diferencovaným karcinómom, 30 pacientov sa zle diferencovaným karcinómom; 14 pacientov s T1 alebo T2 múru inváziou, 38 pacientov s T3 alebo T4 steny inváziu; 39 pacientov s lymfatických uzlín a 13 pacientov bez lymfatických uzlín; 10 pacientov s vzdialenými metastázami a 42 pacientov bez vzdialených metastáz. Počty pacientov klasifikovaných podľa TNM fáze boli nasledovné: 18 boli v TNM štádiu I alebo II; 34 v TNM štádiu III alebo IV. Pacienti boli medzi 32 a 84 rokov, a nebolo rádioterapia alebo chemoterapia pred operáciou. Vzorky boli stanovené formalínu a vložené do parafínu. Vzorky Tennormal tkaniva žalúdka u pacientov bez zhubnými nádormi boli tiež získané endoskopicky ako u kontrolnej skupiny.
Všetci pacienti za predpokladu, informovaný súhlas na použitie ich tkanív pred operáciou. Využitie všetkých vzoriek bola schválená etickou komisiou provincia Zhejiang ľudovej nemocnici.
Kvantitatívne real-time PCR
QRT-PCR bola vykonaná na stanovenie úrovne mRNA GP73. V stručnosti, celková RNA bola extrahovaná z 40 dvojíc vzoriek žalúdočnej nádorových a priľahlých non-nádorových slizničnej tkanivo, za použitia TRIzolu (Invitrogen, Camarillo, USA) podľa inštrukcií výrobcu. Syntéza cDNA bola vykonaná s PrimeScript 1. Strand cDNA Synthesis Kit (Takara, Dalian, Čína), za použitia 1 ug celkovej RNA ako templátu a OligodT primeru pod 65 ° C, 5 minút, 42 ° C, 60 minút a 70 ° C, 10 minút reverznej transkripcii. Výsledná cDNA bola amplifikovaná pomocou qPCR s použitím špecifických primerov s SYBR Premix Ex Taq (Takara, Dalian, Čína). GAPDH bola použitá ako vnútorná kontrola. Primery pre GP73 bol 5'-GCAAAGCAACATCTTCCCTA-3 '(sense) a 5'-CCACAACAAACTTGCCCTC-3' (antisencie). Primery pre GAPDH boli 5'-TGAAGGTCGGAGTCAACGG-3 '(sense) a 5'-CTGGAAGATGGTGATGGGATT-3' (antisencie). Parametre PCR boli nasledujúce: 95 ° C po dobu 5 minút, nasleduje 40 cyklov 95 ° C počas 10 sekúnd, 60 ° C počas 20 sekúnd a 72 ° C počas 20 sekúnd. Na konci cyklov PCR, bola vykonaná analýza krivky tavenia. Relatívna expresia GP73 k GAPDH bola vypočítaná za použitia 2 -ΔCT metódou.
Western blotting
Western blotting bol uskutočnený vyšetriť hladinu proteínu GP73 u 5 z 41 párov žalúdočné nádorových tkanív a priľahlé non-nádorové slizničnej tkanivo. Proteín bol izolovaný z tkanív vzoriek po extrakcii RNA. A približne 30 ug proteínu sa oddelí na 10% polyakrylamidovom gélu po dobu dvoch hodín. Potom, čo bol prevedený do polyvinylidenedifluoride (PVDF) membránu (GE Healthcare, Fairfield, Connecticut, USA) boli vzorky testované s primárnymi protilátkami proti GP73 (1: 2000, Sigma, St. Louis, MO, USA) a β-aktínu ( 1: 5000, Sigma, USA) pri 4 ° Covernight. Po inkubácii so sekundárnou protilátkou (1: 5000, CapitalBio, Peking, Čína) po dobu 2 hodín, membrány boli liečení Elektrochemiluminiscenční (ECL) činidlo (Generate, Shanghai, Čína) a vystaví sa autoradiographicfilms
Imunohistochemické farbenie
imunohistochemické. farbenie bolo vykonané štandardným spôsobom. V stručnosti, 52 prípadov parafínových gastrických nádorov tkanív a 10 prípadov susedných non-nádorových kontrol slizničnej tkanivo boli narezané na 5 um hrubé a umiestnené na mikroskopické sklíčka a sušia sa vo 60 ° C po dobu 2 hodín rúre. Potom boli rezy de-paraffinized v xylénu, rehydratovaný použitie gradientu koncentrácie etanolu, v mikrovlnnej rúre v 10 mM citrátovom pufri po dobu 15 minút pre získanie antigénu, blokovaný s 3% peroxidu vodíka po dobu 10 minút na inhibíciu endogénnej peroxidázy a inkubované s 10 % kozie non-imúnna sérum po dobu 20 minút k zníženiu pozadí nešpecifické farbenie. Po tom, boli rezy inkubované s králičím anti-GP73 polyklonálnou protilátkou (abca, Cambridge, UK) (1: 100 riedenie) pri teplote 4 ° C cez noc, potom sa inkubujú s biotínom značenej sekundárnej protilátky (Invitrogen, USA) pri teplote miestnosti po dobu 20 minút, s následnou inkubáciou s HRP-konjugovaným streptavidínom (Invitrogen, USA) pri teplote miestnosti po dobu 20 minút. Potom, vyvíjanie farby bola vykonaná s DAB substrát Kit (Dako, Carlsbad, USA). Nakoniec sa rezy boli kontrastne hematoxylínom, dehydratáciu, vymazaná a montáž.
Vyhodnotenie immunohistochemicalstainings
immunohistochemicalstainings z GP73 boli hodnotené dvoma patológmi nezávisle, na základe intenzity a podielu pozitívne zafarbených buniek. Farbenie intenzita bola vyhodnotená s štyri-stupňová systému klasifikácie: 0 = negatívna, 1 = slabá, 2 = stredný, 3 = silné. Percento pozitívnych buniek bola hodnotená nasledovne: 0 bez bunky farbené, 1 na 1% až 25% buniek farbené, 2 na 26 až 50% buniek farbené, 3, 51 až 75% buniek zafarbených a 4 pre ďalšie ako 75% buniek zafarbia. Skóre pre intenzitu a percento pozitívnych buniek sa násobí. Skóre ≤ 3 bol použitý pre definovanie nádorov s nízkou expresiou GP73 a dáva • 4 s vysokou expresiou GP73.
Štatistická analýza
Štatistická analýza bola vykonaná pomocou softwaru SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Párované-vzorky t-test bol použitý na analýzu rozdielov expresie mRNA GP73 medzi nádorom a bez nádorových tkanív. Chi-kvadrát test bol použitý na posúdenie štatistickej významnosti združenia medzi GP73 prejavu a klinicko-parametrov. P
menšia ako 0,05 bola považovaná za štatisticky významnú
Výsledky
GP73 úroveň expresie v nádore žalúdku a non-nádorového tkaniva
expresie mRNA GP73 bol v žalúdočných nádorových tkanivách v porovnaní s non-priľahlé nádorové výrazne znížila. tkaniva (tridsať tri štyridsať jedenin; 80,5%). Hladiny expresie GP73 vzhľadom k GAPDH boli v žalúdočných nádorových tkanivách (0,259 ± 0,308), než je oveľa nižšia ako nádorových sliznice (0,584 ± 0,523; P Hotel &0,01; Obrázok 1). V súlade s RT-qPCR, úroveň GP73 bielkovín v žalúdku nádorových vzoriek bola významne nižšia ako u non-nádorových vzoriek, ktoré boli testované Western blotting (obrázok 2). Obrázok 1 GP73 mRNA expresie v nádorových tkanivách žalúdku a priľahlých non-nádorové sliznice.
Obrázok level 2 GP73 proteín v žalúdočných nádorových vzoriek a priľahlých non-nádorové slizničných vzoriek. A) Hladina GP73 bielkovín v žalúdku nádorových vzoriek a priľahlých non-nádorových vzoriek slizničných. B) na úrovni mRNA GP73 v rovnakých nádorových vzoriek žalúdočnej a priľahlých non-nádorových vzorkách sliznice. C) rakovina žalúdka; N :. Normálny)
Korelácia medzi expresiou proteínu GP73 a patologickým parametrov
IHC ukázali, že GP73 bol vysoko exprimovaný v priľahlej non-nádorové slizničnej tkanivo, ale znížili alebo dokonca neprítomné v žalúdočných nádorových tkanivách. V non-nádorového sliznice, silné difúzne cytoplazmatické farbenie bolo vidieť v bunkách umiestnených na povrchu glandulární a foveolární priestoru (obrázok 3A). V nádorových tkanivách, GP73 expresia bola exprimované hlavne v výraznú semi-granulované bodiek vzor farbenie (obrázok 3B, C). bolo nájdených len niekoľko málo žalúdočné nádorového tkaniva so silným výrazom GP73 (3D obrázok). Obrázok 3 GP73 expresie proteínu v žalúdočných nádorových tkanivách a priľahlých non-nádorové sliznice. A) Silná expresie GP73 v non-nádorových tkanivách. B) Slabá expresie GP73 v žalúdočných nádorových tkanivách. C) Stredná expresie GP73 v žalúdočných nádorových tkanivách. D) Silná expresie GP73 v žalúdočných nádorových tkanivách. a, b, c, d: pôvodné zväčšenie 100 x. A, B, C, D :. Pôvodný zväčšenie x 200
koreláciu medzi expresiou proteínu GP73 a klinických premenných sú uvedené v tabuľke 2. Hladina GP73 expresie bola významne súvisí s pohlavia pacientov (P =
0,027) a diferenciácie (P
= 0,049). Expresie v GP73 zle diferencovaných nádorov žalúdka bola oveľa nižšia ako v stredne diferencovaných nádorov žalúdka. Celkom 21 z 30 zle diferencovaných žalúdočných prípadov nádorových ukázali nízku expresiu GP73, zatiaľ čo v stredne diferencovaných prípadoch nádor žalúdka to bolo len 9/22. Tiež expresia GP73 u pacientov mužského pohlavia bola down-regulované častejšie ako u žien. Nebol žiadny signifikantný korelácia medzi GP73 prejavu a iným patologickým parameters.Table 2 Vzťah GP73 prejavu s patologickými parametrami nádoru
Klinické parametre
GOLPH2
P-hodnota


Low
spoločností High
Celkový počet
30
22
Pohlavie
0,027
Muž
28
15
Žena
2
7
vek (roky)
0,456 Hotel < 60
12
10
≥60
18
12
veľkosť nádoru (cm2)
1,000 Hotel < 20
14
6
≥20
16
16
Diferenciácia
0,049
Stredne diferencovaný
9
13
zle diferencované
21
9
Stage
0,390
I + II
12
6
III + IV
18
16
Hĺbka steny invázie
1.000
T1 + T2
8
6
T3 + T4
22
16
Lymfatická metastázy
0,757
No
7
6
Áno
23
16
vzdialenej metastázy
0,725
Nie
25
17
Áno
5
5
Diskusia
v poslednej dobe niekoľko štúdií ukázalo, že GP73 je nadmerne exprimovaný v niektorých druhov rakoviny, vrátane hepatocelulárny karcinóm, karcinómov žlčových ciest, rakoviny pľúc, rakoviny prostaty a seminoma [ ,,,0],9-15]. V hepatocelulárny karcinóm, high-expresia GP73 bol spájaný s veľkosťou nádoru, diferenciácie triede a žilovej invázii [7-9]. V žlčovodu karcinómov, GP73 expresie koreluje s vekom a prežitie pacienta [11]. V prípade rakoviny pľúc, GP73 expresia bola spojená s nádorovú histológiu a pohlavie pacienta; jeho expresie v adenokarcinóme bol významne vyšší ako u iných typov rakoviny pľúc [12]. Avšak, žiadna korelácia s klinicko parametrov bola nájdená v karcinómu prostaty a seminoma [13, 15]. GP73 tiež bolo zistené, down-regulované v jasných buniek RCC, čo je najbežnejší histologický podtyp rakoviny obličkových buniek, zatiaľ čo expresia v papilárnych a chromofobní RCC bola silná [18]. V tejto štúdii sme zistili, že obaja GP73 mRNA a proteínové hladiny boli vysoko exprimovaný v non-nádorových žalúdočných slizníc, ktoré boli proti väčšiny predchádzajúcich štúdií v iných druhov rakoviny.
Znalosť funkcie GP73 je stále obmedzená. Zatiaľ vieme, že GP73 je nevyhnutný pre pečeň a obličky na udržanie normálnej funkcie a vzhľad. Je tiež známe, že GP73 môže fungovať v pomoc pri doprave bielkovín a sekrécie. Jeden taký proteín, sCLU, už bola identifikovaná. sCLU môže zabrániť apoptóze a je nadmerne exprimovaný v rôznych druhov rakoviny. GP73 mohla interagovať s doménou sCLU cez stočený-coil a pomáhať prepravu a sekréciu sCLU, čo môže vysvetliť vzťah medzi vysokým vyjadrené GP73 a agresívneho správania hepatocelulárnych karcinómov [3]. V hepatocelulárneho karcinómu (HCC), nadmerné expresie GP73 bol nielen detekovaný v nádorových tkanivách, ale aj v sére pacientov, ktoré preukázali významné zvýšenie hladiny GP73 by poskytoval marker pre včasnú detekciu. Niektoré správy dokonca uviedol, že GP73 je lepšia ako markerom AFP pre diagnostiku HCC [10, 11, 18, 21]. Avšak to, čo je funkcia GP73 v žalúdku a prečo by malo byť down-regulovaný u karcinómu žalúdka? To je stále nejasná. GP73 je epiteliálne proteín bunky a špecifické pre vysoko exprimovaný v početných normálnych ľudských tkanivách, najmä v hrubom čreve a žalúdku. To je tiež prevažne exprimovaný v tenkom čreve, hrubom čreve a žalúdku myší [22]. V súlade s týmito štúdiami, sme tiež zistili, že GP73 bol vysoko exprimovaný bunkami umiestnenými na povrchu glandulární a foveolární priestoru normálnej ľudskej žalúdočnej sliznice. Vzhľadom k tomu, najvyšší expresie GP73 je v epiteliálnych bunkách tráviaceho ústrojenstva, je rozumné predpokladať, že môže hrať niektoré dôležité, neznáme role v tráviacom systéme.
Tiež zistené, že expresia GP73 bola spojená s diferenciáciou nádoru. Expresie v GP73 zle diferencovaných nádorov žalúdka bola oveľa nižšia ako v stredne diferencovaných nádorov žalúdka. Bolo oznámené, že knock-down z GP73 v HepG2.2.15 bunky by mohli spôsobiť zníženie rozlohy komplexu Golgiho. Vzhľadom na to, že veľkosť a vývoj Golgiho komplexu v pozitívnej korelácii s diferenciáciou tumoru, niektorí výskumníci predpokladal, že GP73 expresia môže byť spojené so udržuje štrukturálnu integritu Golgiho komplexu pri onkogenézy [23, 24]. Nedávne štúdie preukázali, že strata spôsobená GP73 up-regulácia WT1, ktoré môžu podporovať tvorbu glomus a inhibovať pronephric kanálik diferenciáciu. To navrhol, že GP73 hrá dôležitú úlohu vo vývoji pronefros a diferenciácie [25]. V hepatocelulárneho karcinómu, GP73 proteín sa silne spojený s veľkosti nádoru, cievne invázie a diferenciáciu nádoru, čo naznačuje, výraz GP73 je v korelácii s agresívnym správaním rakoviny [10]. Okrem toho, expresia GP73 bol tiež spájaný s pohlavia pacienta. Pacienti mužského pohlavia ukázala nízku GP73 výraz častejšie než pacientky. Podobný jav tiež bol hlásený u karcinómu pľúc. Ženské pacienti mali vyššiu expresiu GP73 než mužských pacientov [12]. To je tiež hlásil, že fenotypové zmeny pozorované u myší s skrátenej GP73 C-konci, sú závislé na pohlaví [4]. Jedným z možných vysvetlení je, že GP73 mRNA je regulovaná estrogény a kalcitriolu [26]. Naša práca opäť potvrdila hypotézu, že GP73 expresia je pod hormonálnou kontrolou.
Záver
Na záver, sme zistili, že ako GP73 mRNA a na úrovni proteínov bola významne down-regulované v žalúdočných nádorových tkanivách v porovnaní s non-nádorového sliznicu a expresie GP73 bola spojená s diferenciáciou nádoru a pohlavie pacienta. Naše ďalšie práce sa zameria na skúmanie funkcie a regulačný mechanizmus GP73 v žalúdku
Skratky
AFP :.
Α-fetoproteínu
ECL :
Elektrochemiluminiscenční
GC:
karcinóm žalúdka
GP73:
Golgiho bielkovín 73

HCC:
Hepatocelulárny karcinóm
PSA:
prostatického špecifického antigénu
PVDF:
Polyvinylidenedifluoride
RCC :.
renálny karcinóm
deklarácia
Poďakovanie
Táto práca bola podporená provincia Zhejiang Program pre pestovanie High-level inovatívne zdravotné talenty.
Autori ďalej len "pôvodné predložený súbory obrazov
Nižšie sú uvedené odkazy na autorov pôvodných predložených súborov pre obrázky. "Pôvodný súbor na obrázku 1 12957_2012_1362_MOESM2_ESM.tif autorského 12957_2012_1362_MOESM1_ESM.tif autorov pôvodného súboru na obrázku 2 12957_2012_1362_MOESM3_ESM.tif autorského pôvodného súboru pre obrázok 3 protichodnými záujmami
Autori vyhlasujú, že nemajú žiadne protichodné záujmy.
Autori" príspevky
LGC a HJW boli podieľajú na vývoji štúdie vykonal QRT-PCR, západnej vybiehanie a imunohistochemické analýzou farbenie, a navrhol rukopis. ZYY a HQT sa podieľali na návrhu štúdie a dohliadal na štúdiu. HBY, FW a TPG zber dát a pomohol navrhnúť rukopis. XJH a YYM za predpokladu, všeobecnú podporu a pomáhal navrhnúť rukopis. Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Marginálne zakalená band a svetlo modrej hrebeň, príznaky pozorované u zväčšovacie úzkopásmové zobrazovacie endoskopia, sú orientačné žalúdočné črevné metaplázia
• Niekoľko primárnych nádorového ochorenia postihujúce primárne sporadickú kolorektálneho karcinómu v Japonsku: výskyt rakoviny žalúdka u pacientov s kolorektálnym karcinómom môže byť v…