Maior número de sítios de fosforilação Helicobacter pylori CagA Epiya C aumenta o risco de câncer gástrico, mas não ulcer

duodenais número maior de Helicobacter pylori
sítios de fosforilação CagA Epiya C aumenta o risco de câncer gástrico, mas não úlcera duodenal da arte abstracta
Fundo
Helicobacter pylori
infecção é uma das infecções mais comuns em todo o mundo e está associado com câncer de estômago e úlcera péptica. factores de virulência bacteriana, tal como CagA ter sido demonstrado que o aumento do risco de ambas as doenças. Estudos sugeriram um papel causal para polimorfismos CagA Epiya na carcinogénese gástrica, e tem sido mostrado para ser geograficamente diversas. Foram estudadas as associações entre H. pylori
padrões CagA Epiya e câncer gástrico e duodenal, em uma população ocidental etnicamente misturada do Brasil. CagA Epiya foi determinada por PCR e confirmados por sequenciação. Um total de 436 pacientes foram incluídos, sendo 188 com câncer gástrico, 112 com úlcera duodenal e 136 com gastrite.
Resultados
O número de segmentos Epiya C foi significativamente associada com o aumento do risco de carcinoma gástrico (OR = 3,08 , IC 95% = 1,74-5,45, p < 10 -3), mesmo após o ajuste para idade e sexo. Maior número de segmentos Epiya C também foi associada com atrofia gástrica (p = 0,04) e a metaplasia intestinal (p = 0,007). Além disso, os pacientes infectados por cag of a estirpes que possuam mais de um segmento Epiya C apresentaram níveis diminuídos de pepsinogen I em comparação com os infectados por cepas contendo um ou menos Epiya C repetição. Caso contrário, o número de segmentos Epiya C não associamos com úlcera duodenal.
Conclusões
Nossos resultados demonstram que a infecção com H. pylori
estirpes albergando mais de um motivo CagA Epiya C foi claramente associado ao câncer gástrico, mas não com úlcera duodenal.
Maior número de segmentos Epiya C também foi associada com lesões pré-cancerosas gástricas como demonstrado por alterações atróficas e metaplasia gástrica histológicos e diminuição dos níveis séricos de pepsinogen I.
Fundo
Helicobacter pylori
coloniza o estômago de mais de metade da população do mundo e está associada com o desenvolvimento de complicações, tais como doença de úlcera péptica, cancro gástrico, linfoma e tecido linfóide associado à mucosa gástrica [1-4]. Os fatores que levam alguns indivíduos a desenvolver doenças associadas, enquanto a maioria das pessoas infectadas permanece assintomática, são desconhecidas, mas eles têm sido objecto de intensa investigação. Entre os fatores do hospedeiro, polimorfismos do gene de citocinas foram mostrados para aumentar o risco de câncer gástrico, especificamente IL1B
-31, IL1RN
e TNFA
-307 polimorfismos de nucleotídeo único em populações europeias, e IL1RN
em uma população brasileira [5-9]. factores específicos de tensão patógeno têm sido fortemente investigada. Entre eles, a proteína CagA é aceito como um fator de risco para úlcera péptica e câncer gástrico [5, 10-12]. Em um estudo do nosso grupo, a infecção por H. pylori cag
cepas A-positivas tiveram um odds ratio (OR) de 11,9 para câncer gástrico, após o ajuste para polimorfismos de acolhimento e outras variáveis, enquanto que o fator de acolhimento mais forte foi IL1RN
alelo 2, com um OR de 1,9 [5].
CAG
a pertence a um CAG
PAI (ilha de patogenicidade) que codifica um sistema de secreção de tipo IV (T4SS) associado com o aumento da secreção de IL -8, uma muito forte quimiocina pró-inflamatória que participa na gastrite induzida por H. pylori
. O T4SS também é responsável pela entrada da proteína CagA para dentro das células epiteliais gástricas onde CagA é fosforilada no resíduo de tirosina dentro dos motivos de fosforilação da região variável carboxi-terminal da proteína. Estes motivos são definidos como Epiya (Glu-Pro-Ile-Tir-Ala) A, B, C e D de acordo com diferentes aminoácidos f lanqueadoras. proteína CagA quase sempre possui segmentos Epiya A e B, que são seguidos por ninguém, um, dois ou três segmentos C, em cepas circulantes nos países ocidentais, ou um segmento D, em países do Leste Asiático. O Epiya C e D são os principais locais para a fosforilação de CagA. Fosforilada CagA forma um complexo físico com SHP-2 fosfatase e desencadeia sinais celulares anormais que conduzem a uma desregulação do crescimento celular, célula para contacto das células e a migração de células, o alongamento das células epiteliais e aumento de volume de células epiteliais, o que aumenta o risco de células danificadas para adquirir alterações genéticas pré-cancerosas. Levar o tipo D Epiya ou múltipla C repete está associada com o aumento da atividade da fosfatase SHP-2 induzida por CagA [13, 14], que levanta a possibilidade de que a infecção por cepas CagA possuir maior número de segmentos Epiya C predispõe a lesões pré-cancerosas e câncer gástrico.
na verdade, esta hipótese foi testada em países orientais, mas os resultados do estudo são discordantes. Azuma et al
. [15] encontraram aumento da proporção de cepas Epiya D entre os pacientes com gastrite atrófica e câncer gástrico, mas outros autores têm sido incapazes de reproduzir esses resultados [16, 17]. Da mesma forma, nas populações ocidentais, associação significativa entre câncer gástrico e aumento do número de motivos Epiya C pode ser demonstrada em dois estudos [18, 19], talvez seja pelo pequeno número de pacientes incluídos em outros estudos [20-22], ou por regionais /etnia diferenças como já demonstrado por outros H. pylori
marcadores de virulência [23, 24]. Além disso, as discrepâncias foram também demonstrada em estudos que avaliaram o número de motivos Epiya C e úlcera duodenal [19, 25], que merece em investigações profundas por causa úlcera duodenal e cancro gástrico são H. pylori
doenças -associated mutuamente exclusivos.
por isso, avaliamos se aumento do número de CagA Epiya C motivos fosforilação está associado ao câncer gástrico e /ou úlcera duodenal, incluindo uma grande série de pacientes para evitar preconceitos e para permitir o ajuste para idade e sexo em uma população ocidental do Brasil. Desde úlcera duodenal e carcinoma gástrico são doenças que se excluem mutuamente, e cag
A é um fator de risco para ambas as condições, nós também avaliamos se o número de segmentos Epiya C das cepas isoladas de pacientes com úlcera duodenal difere do que as cepas isolado a partir de doentes com cancro gástrico. Porque gástricas alterações atróficas e metaplásicas - lesões pré-cancerosas - levar à diminuição da produção de pepsinogen I (IGP) pelo chefe e as células mucosas do colo do corpus e glândulas fúndica, avaliou-se o maior número de motivos Epiya C foi associado com o soro níveis pepsinogênio.

resultados as características dos pacientes são mostradas na Tabela 1. a presença de H. pylori ure
espec�ico
a e 16S rRNA
foi confirmada por PCR com sucesso em todas as cepas estudadas ea cag of a PCR foram positivos, por pelo menos um do método utilizado, em todas as strains.Table 1 características dos pacientes e distribuição de genótipos CagA Epiya de acordo com H. pylori
doenças -associated

Gastrite 136 (%)
O câncer gástrico 188 (%)
úlcera duodenal 112 (%)

média de idade (SD)
52,5 (16,9)
62,3 (13,9)
43,5 (15,1)
sexo masculino
48 (35,3)
114 (60,6)
53 (47,3)
Epiya-AB Sims 3 (2.2) Sims 3 (1,6)
4 (3.6)
Epiya-ABC
108 (79,4)
107 (56,9)
93 (83,0)
Epiya-ABCC
21 (15,4)
65 (34,6)
15 (13,4)
Epiya-ABCCC
4 (3.0)
13 (6,9)
0 (0,0)
SD, Desvio padrão
Determinação do padrão CagA Epiya
produtos amplificados por PCR de todos os cag
cepas a-positivos apresentaram padrões distintos em região variável 3 'do cag
A. Um gel de electroforese que representa os diferentes tipos CagA Epiya é mostrado na Figura 1. os resultados da PCR foram confirmados por sequenciação em setenta e cinco produtos de PCR seleccionados aleatoriamente a partir de pacientes de cada grupo. Figura 1 A electroforese de amostras representativas com cada um dos tipos CagA Epiya observados em pacientes com H. pylori -associated doenças. Coluna 1: 100 pb padrão; Coluna 2: Epiya-AB; Colunas 3, 8, 11 e 12: Epiya-ABC; Coluna 4: Epiya-ABC + -ABCCC; Colunas 5 e 13: Epiya-ABCC; Coluna 6: Epiya ABCCC; Coluna 7: Epiya-ABCC + -ABCCC; Coluna 9: Epiya-ABC + -ABCC + -ABCCC; Coluna 10:. Epiya-ABC + -ABCC
Sem Epiya D foi encontrado no H. pylori
cepas estudadas. A distribuição dos genótipos Epiya é mostrado na Tabela 1.
associação entre os números de segmentos Epiya C e cancro gástrico e duodenal
colonização por H. pylori estirpes
CagA-positivas que possuem dois ou três Epiya C motivos foi mais frequentemente observada (p < 10 -3) no câncer gástrico (78/188, 41,5%) do que no gastrite (25/136, 18,4%) pacientes. A associação permaneceu fortemente significativa mesmo após o ajuste para idade e sexo por meio de regressão logística (Tabela 2). O teste de Hosmer-Lemeshow mostrou boa aptidão do modelo (qui-quadrado = 3,98, 8 graus de liberdade, p = 0,86, com 10 etapas). Caso contrário, o número de segmentos Epiya C não se associou com a úlcera duodenal (Tabela 2) .table 2 associação entre o número de motivos CagA Epiya C e H. pylori
doenças -associated

A análise univariada
análise multivariada

p
OU

95% CI
p
câncer
gástrico - o aumento da idade Art < 10-3
1,04
1,03-1,06 Art < 10-3 viajantes - O sexo feminino Art < 10-3
0,29
0,18-0,48 Art < 10-3 viajantes - de alto risco Epiya (ABCC ou ABCCC) Art < 10-3
3,08
1,74-5,45 Art < 10-3
úlcera duodenal viajantes - o aumento da idade Art < 10-3
1,03
1,02-1,05 Art < 10-3 viajantes - O sexo feminino
0,04
1,26
0,73 - 2,18 0,41
viajantes - de alto risco Epiya (ABCC ou ABCCC)
0,29 Restaurant -
-
- o teste de Hosmer-Lemeshow mostrou boa aptidão do modelo de câncer gástrico (8 graus de liberdade, p = 0,86, com 10 etapas) e úlcera duodenal (8 graus de liberdade, p = 0,25, com 10 etapas).
Porque pode-se especular que o número de Epiya C motifs aumenta com o aumento da idade, também construiu um modelo com o número de Epiya C sendo a variável dependente e a idade, sexo e H. pylori
doenças -associated como co-variáveis ​​independentes. Aumento segmentos Epiya C não se associou com a idade (p = 0,13), sexo (p = 0,66) e úlcera duodenal (p = 0,29), mas manteve-se associada com o câncer gástrico (p < 10 -3, OR = 2,81; IC95% = 1,64 -. 4,82)
Associação entre a colonização estirpe mista e doenças
infecção estirpe mista foi observada em 57 (13,08%) pacientes e foi significativamente mais frequente em pacientes com câncer gástrico (38/188, 20,2%) do que naqueles com gastrite (14/136, 10,3%), com um OR de carcinoma gástrico da CI 2,21 (95% = 1,10-4,50). Caso contrário, infecção mista foi menos frequentemente observada em pacientes com úlcera duodenal (5/112, 4,5%), com uma tendência para uma associação negativa (p = 0,09).
Associação entre o número de segmentos Epiya C e níveis de IGP soro
O pepsinogênio I níveis séricos foram significativamente maiores (p = 0,01) na úlcera duodenal (média de 161,67 ± 102,36 mg /L) do que na gastrite (100,37 ± 70,85 mg /L).
Os pacientes infectados pelo CagA estirpes que possuam dois ou três segmentos Epiya C apresentaram diminuição dos níveis de IGP, quando comparado com aqueles com infecção por cepas CagA possuindo ≤ 1 Epiya C segmento (úlcera duodenal: 179,67 ± 83,30 vs 67,01 ± 34,30, respectivamente, p = 0,02 e gastrite: 109,26 ± 85,61 vs. 57,55 ± 34,61, respectivamente, p = 0,01).
associação entre o número de repetições Epiya C e alterações histológicas e classificação de tumores gástricos
Aumento do número de segmentos Epiya C foi associada com a presença de lesões pré-cancerosas, ou a atrofia ( p = 0,04) ou metaplasia intestinal (p = 0,007), mas não com os outros parâmetros histológicos. Além disso, a infecção por estirpes de transporte acrescida motivos Epiya C não se associou com o tipo de tumor intestinal ou difuso (p = 0,34).

Discussão Neste estudo, por avaliação de um grande conjunto de pacientes, que demonstraram que os infectados pelo H. pylori
cepas CagA-positivas que possuem mais de um motivo Epiya C estão em risco três vezes vezes maior de desenvolver câncer gástrico. Os pontos fortes do nosso estudo incluem o tamanho da amostra adequada, a identificação de cepas por meio de PCR com confirmação por sequenciação e ajuste para fatores de confusão por análise de regressão logística.
CagA é considerada um importante fator de virulência bacteriana associada tanto com adenocarcinoma gástrico e úlcera duodenal doença [2, 5, 11, 12, 26]. O número e padrão de motivos de fosforilação parecem estratificar ainda mais o risco associado com estirpes individuais [18, 27].
Tem sido demonstrado que os padrões de H. pylori
CagA Epiya têm uma variabilidade geográfica significativa e acompanhar de perto os padrões de migrações humanas históricas. Epiya D é um padrão característico asiática Epiya que praticamente não ocorre no oeste H. pylori
estirpes [28]. Os brasileiros formar uma população ocidental único porque, apesar das várias origens e a consequente grande diversidade de aparência fenotípica, tem havido um substancial grau de reprodução inter-étnica e, portanto, a maioria dos indivíduos não pode ser atribuída a qualquer um dos grupos fundadores com base fundo genético, em vez eles carregam cerca de 33% dos genes de cada uma das raças principais que historicamente composto do país (caucasianos, africanos e ameríndios) [29]. Com este pano de fundo, seria de esperar para encontrar algum CagA Epiya D no nosso H. pylori
cepas, como foi detectado entre os ameríndios (de acordo com a teoria de que, inicialmente, pessoas da Ásia povoaram as Américas migram do leste da Ásia ), mas nós não detectar qualquer Epiya D em nossa população.
Infelizmente, existem poucos estudos no que diz respeito à associação entre o número Epiya C e H. pylori doenças
associados em populações ocidentais com resultados discordantes entre eles. Basso et al
. [19] mostraram que um maior número de segmentos Epiya C foi associado com carcinoma gástrico numa população caucasiana da Itália, semelhante aos resultados de Yamaoka et ai
. [18] avaliando pacientes americanos de Texas. Caso contrário, nenhuma associação foi observada quando os pacientes colombianos foram avaliados em um estudo do Yamaoka [18] de acordo com os resultados obtidos por Acosta et al
. [22], ao passo que Sicinschi et al
. [21] observaram associações entre o aumento segmentos Epiya C e lesões pré-cancerosas. Além disso, os resultados não conclusivos publicado pela Argent et al
. [20] avaliando 44 cepas de pacientes africanos os autores mostraram tendência de associação entre CagA com dois ou mais segmentos Epiya C e câncer gástrico.
Estas diferenças podem ser explicadas por diferentes desenhos de estudo, tamanho da amostra, populações e diversidade geográfica de H . pylori
marcadores de patogenicidade, em relação ao padrão CagA Epiya, destacando a necessidade de estudar diferentes regiões geográficas.
os resultados deste estudo mostraram que o maior número de segmentos Epiya C está associado ao câncer gástrico e com pre lesões -malignant, a atrofia e a metaplasia intestinal da mucosa corpo no grupo de pacientes com gastrite. De acordo com estes resultados, nós também demonstrou que a concentração sérica de PGI foi duas vezes diminuiu nos pacientes infectados pelo cag
cepas A-positivos com duas ou três motivos Epiya C. Porque IGP é secretada por células principais e células mucosas do colo nas glândulas corpus e fúndica, os níveis séricos IGP refletir o status funcional e morfológica da mucosa gástrica oxíntica; Assim, gástricas alterações atróficas /metaplásicas levar à diminuição dos níveis séricos IGP [30, 31]. Embora a mucosa corpus de pacientes com H. pylori
associado úlcera duodenal é ou levemente ou não inflamado, os níveis séricos IGP foram também diminuiu em pacientes com úlcera duodenal infectados por cepas contendo maior número de segmentos Epiya C.
Os resultados do presente estudo reforçar o papel potencial do polimorfismo CagA no desenvolvimento do cancro gástrico de acordo com os resultados dos estudos anteriores [18, 19]. No entanto, não podemos excluir a possibilidade de que a constituição genética do hospedeiro, mais do que a estirpe da bactéria, pode predispor a gastrite atrófica e do H. pylori
estirpes que transportam um número crescente de repetições Epiya C teria uma vantagem sobre outras cepas em colonizar o novo ambiente gástrico ou, alternativamente, uma interacção mais complexa de ambos os mecanismos. Online em relação a úlcera duodenal, também os resultados dos estudos são discordantes [19, 25]. Nossos resultados estão de acordo com os relatados por Basso et al
. [19] que também não encontrou associação entre a doença e o número de segmentos Epiya C em uma população italiana. Notavelmente, nenhum paciente com úlcera duodenal da nossa coorte foi colonizada por CagA possuindo três segmentos Epiya C. Como sugerido por Yamaoka et al
. [18], é possível que as estirpes com maior número de segmentos Epiya C podem ser menos resistentes ao ácido [18].
Nós também avaliamos se a colonização por diferentes cepas (infecção mista) pode estar associada com a evolução das doenças. Descobrimos que pacientes com câncer gástrico foram significativamente mais frequentemente colonizados por cepas mistas, enquanto os pacientes com úlcera duodenal teve uma tendência para a colonização estirpe menos mista. Uma possibilidade é que os pacientes com cancro gástrico teria áreas da mucosa gástrica mostrando a transformação do cancro, alternando com áreas de atrofia, metaplasia intestinal, displasia, e mucosa normal, cada um deles representando microambientes que seriam selectivamente vantajoso infecções mistas [32, 33 ].
Conclusões
em conclusão, verificou-se que a infecção pelo H. pylori
cepas CagA-positivas que abrigam múltiplas Epiya C repete está associada a lesões pré-cancerosas gástricas e câncer gástrico, mas não com úlcera duodenal em um etnicamente diverso, misturado, a população ocidental.
Embora a infecção pelo H. pylori cag
cepas a-positivos é um fator de risco para as doenças que se excluem mutuamente, câncer de estômago e úlcera duodenal, estirpes CagA que possuem maior número de segmentos Epiya C foram associado com câncer gástrico, mas não com úlcera duodenal.
Maior número de segmentos Epiya C também foi associada com lesões pré-cancerosas gástricas como demonstrado por alterações atróficas e metaplasia gástrica histológicos e diminuição dos níveis séricos de pepsinogen I.
Métodos
os pacientes
foram incluídos 436 pacientes infectados com cag of a-positivos cepas de H. pylori
(188 com câncer gástrico, 112 com úlcera duodenal e 136 com gastrite), entre aqueles que foram submetidos à endoscopia para esclarecer a origem dos sintomas relacionados ao trato gastrointestinal superior ou que foram submetidos a cirurgia gástrica para remover carcinoma gástrico no Hospital Universitário /UFMG, Luxemburgo, e Mário Penna Hospitais, em Belo Horizonte, Brasil. A maioria dos indivíduos incluídos (> 80%) eram de baixo nível socioeconômico com os hábitos culturais semelhantes, e todos eram nativos do estado de Minas Gerais com a mesma origem étnica, aproximadamente 33% de Português, 33% do ameríndia e 33% dos Africano ascendência, homogeneamente presente a cada um [29].
O estudo foi aprovado pelos Comitês de Ética institucional e consentimento informado foi obtido de todos os pacientes. O transporte, cultura e identificação microbiológica dos isolados bacterianos foram realizados conforme descrito anteriormente [34, 35].
Histologia
No grupo de gastrite e úlcera duodenal pacientes, amostras de biópsia endoscópica da antral e mucosa gástrica oxíntica foram obtidos para estudo histológico e microbiológico. espécimes de biópsia e antrais oxínticas foram fixados em formalina a 10% e embebidos em cera de parafina, e as secções histológicas de 4 um de espessura foram coradas com carbolfuchsin para H. pylori
investigação [35] e hematoxycilin e eosina, para avaliação histológica de acordo com o sistema Sydney [36]. No grupo de doentes com cancro gástrico, os fragmentos foram obtidos a partir do estômago removido por gastrectomia depois de ser aberto ao longo da curvatura maior na primeira hora após a ressecção. O tumor foi classificado de acordo com Lauren [37].
Extração de DNA bacteriano
DNA Bactéria obtido a partir crescimento prato 60 milímetros Petri foi extraído utilizando o kit QIAmp (QIAGEN, Hilden, Alemanha) de acordo com as recomendações do fabricante com pequenas modificações . A água destilada foi utilizada como um controlo de reacção. A concentração de ADN foi determinada por espectrofotometria utilizando NanoDrop 2000 (Thermo Scientific, Wilmington, NC) e armazenado a -20 ° C até à sua utilização.
Amplificação de H. pylori ure
espec�ico
A e 16S rRNA
genes
a presença de ure específica
a e 16S rRNA
genes foi avaliada de acordo com Clayton et al.
[38] e Fox et al
. [39], respectivamente. O padrão Tx30a H. pylori
estirpe foi usada como um controlo positivo, e uma estirpe de Escherichia coli
e água destilada foram ambas utilizadas como controlos negativos.
O termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems, Foster City , CA) foi usado para todas as reacções. Os produtos amplificados foram submetidos à eletroforese em gel de agarose 2%, corado com brometo de etídio e analisados ​​em um transiluminador de luz ultravioleta.
Amplificação do cag
Um gene
O cag
Um gene foi amplificado por meios dos dois pares de iniciadores previamente descrito [40, 41]. Uma estirpe de H. pylori
da nossa colecção (1010-1095), conhecido por ser CAG
A-positivo, foi utilizado como um controlo positivo, e Tx30a H. pylori
estirpe sem CAG Um
e água destilada foram ambas utilizadas como controlos negativos. As H. pylori
estirpes foram consideradas CAG
A-positivo quando, pelo menos, uma das duas reacções foi positiva.
Amplificação da região variável 3 'do cag
Um
Para a amplificação por PCR da região variável de 3 'do cag
um gene (que contém as sequências Epiya), de 20 a 100 ng de ADN foram adicionados a uma solução tampão de polimerase de ADN de Taq a 1% (KCl 50 mM e Tris-HCl 10 mM), 1,5 mM MgCl 2, 100 ^ M de cada desoxinucleótido, 1,0 U de polimerase de ADN Taq Platinum (Invitrogen, São Paulo, Brasil), e 10 pmol de cada iniciador, para um volume total de solução de 20 ul. Os iniciadores utilizados foram previamente descrito por Yamaoka et ai
. [27]. As condições de reacção foram: 95 ° C durante 5 minutos, seguido por 35 ciclos de 95 ° C durante 1 minuto, 50 ° C durante 1 minuto, e 72 ° C durante 1 minuto, terminando com 72 ° C durante 7 minutos. Os produtos amplificados foram submetidos a electroforese em gel de agarose a 1,5%, que foi corado com brometo de etídio e analisados ​​num transiluminador de luz ultravioleta. A reacção originou produtos de 500-850 pb de acordo com o número de Epiya C. Esta metodologia permite também a detecção de infecção mista.
A sequenciação da região variável 3 'do cag
Um
Um subconjunto significativo de amostras (cerca de 75 pacientes de cada grupo) foi selecionado aleatoriamente para a sequenciação, a fim de confirmar os resultados da PCR. Os produtos de PCR foram purificados com o Assistente SV gel e PCR Clean-Up System (Promega, Madison, MI) de acordo com as recomendações do fabricante. produtos purificados foram sequenciados usando um Big Dye ® Terminator v3.1 Kit Cycle Sequencing em um ABI 3130 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA). As sequências obtidas foram alinhadas usando o Programa da Assembléia Sequence CAP3 (disponível em: http:... //PBIL univ-lyon1 fr /cap3 php). Após o alinhamento, sequências de nucleótidos foram transformados em sequências de aminoácidos, usando o programa de blastx (disponível a partir de: http:..... //Blast do NCBI NLM NIH gov /explosão CGI) e comparadas com sequências depositadas na GenBank. (http:.... //www NCBI NLM nih gov /Genbank /)
Determinação dos níveis séricos IGP
as concentrações séricas de PGI foram determinados em pacientes com gastrite e úlcera duodenal por um ELISA específico (Biohit, Helsínquia, Finlândia) de acordo com as recomendações do fabricante. a análise estatística

um tamanho da amostra de pelo menos 112 indivíduos em cada grupo, a fim de mostrar uma diferença de 15% entre os grupos com uma potência de 80%, alfa de 5% e intervalo de confiança de 95% foi calculado com o programa Epi Info versão 3.5.1 (Centros para o Controle e Prevenção de Doenças, Atlanta, GA).
Associação entre o número de motivos Epiya C e câncer gástrico foi inicialmente avaliada em análise univariada e variáveis ​​com um valor de p inferior a 0,2 foram incluídos no modelo final de regressão logística, controlando-se as influências da idade e sexo. Também avaliamos o efeito do sexo e da idade do número de segmentos Epiya C em um modelo com o número de Epiya C sendo a variável dependente e a idade, sexo e H. pylori
doenças -associated co-variáveis ​​como independentes. A aptidão modelo logístico foi avaliada com o teste de Hosmer-Lemeshow. Uma vez que os níveis de IGP não foram distribuídos normalmente o registo de dados transformados e tornaram-se normais. As associações foram, assim, avaliada pelo teste t de Student (média ± desvio padrão). Associação entre o número de segmentos Epiya C e o grau de inflamação gástrica, a atrofia e a metaplasia intestinal foi feita pelo teste de Mann-Whitney de duas caudas. O nível de significância foi fixado em um valor de p ≤ 0,05.
Declarações
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado por bolsas do CNPq, FAPEMIG e INCT, Brasil.
DMM, Queiroz é financiado no âmbito do Sexto Programa-quadro da União Europeia, o conteúdo do projeto (INCO-CT-2006-032136).
Autores 'original apresentada arquivos para imagens
Abaixo estão os links para os autores' arquivos originais apresentados para imagens. 'arquivo original para a figura 1 12866_2010_1347_MOESM2_ESM.pdf Autores' 12866_2010_1347_MOESM1_ESM.pdf Autores arquivo original para o arquivo original figura 2 12866_2010_1347_MOESM3_ESM.pdf dos autores para a figura 3

• A falta de acordo entre tonometria e suco gástrico tensão de dióxido de carbono parcial
• Regulação negativa do factor de crescimento do tecido conjuntivo inibe o crescimento e invasão de células cancerosas gástricas e atenua difusão peritoneal