Slijmappel
fruit extract verzwakt Helicobacter pylori
Lipopolysaccharide oxidatieve stress in Sprague Dawley ratten
Abstracte achtergrond
Bael (slijmappel
(L.) Corr.) Is op grote schaal gebruikt in inheemse systemen van de Indiase medicijnen om zijn geneeskrachtige eigenschappen, waaronder samentrekkende, diarree, antidysenteric, verzachtend, koortswerend, tegen zweren, anti-inflammatoire en anti-kanker activiteiten te benutten. Deze studie is bedoeld om de antioxidatieve en antiulcer effect van methanol extract van de onrijpe vrucht van slijmappel
(MEAM) tegen Helicobacter pylori
-Lipopolysaccharide (HP-LPS) geïnduceerde maagzweer in Sprague Dawley (SD) ratten te evalueren.
methoden
De dosering en duur van de HP-LPS en MEAM werden vastgesteld op basis van ulcus index van maag- weefsel van proefdieren. Diverse maag secretoire parameters zoals volume van maagsap, vrij en totaal zuurgraad, zuur output, werden pepsine concentratie geanalyseerd. De activiteiten van enzymatische antioxidanten (superoxide dismutase, catalase, glutathion peroxidase, en glutathion reductase glutathion transferase), niet-enzymatische antioxidanten (gereduceerd glutathion, vitamine C en vitamine E) en de niveaus van lipideperoxidatie producten werden gemeten. Histologische analyse werd uitgevoerd om het effect van slijmappel
evalueren HP-LPS opgewekte maagzweer.
Resultaten
Orale toediening van HP-LPS (50 ug per dier) gedurende vier opeenvolgende dagen resulteerde in inductie van zweren met de toename van gastrische secretoire parameters zoals volume maagsap, vrij en totaal zuurgehalte, maagzuurproductie, pepsine concentratie. Orale toediening methanolische extract van slijmappel
fruit (MEAM) (25, 50, 100, 250 en 500 mg /kg) verminderde de maagzweer met 2,8%, 52,4%, 73%, 93% en 93,98%, respectievelijk , vergeleken met 89,2% reductie van sucralfaat (100 mg /kg). MEAM behandeling significant (p
< 0,05) remde de toename van gastrische secretoire parameters in ratten zweren, en voorkomen tevens de afname van enzymatische (superoxide dismutase, catalase, glutathion peroxidase, en glutathion reductase glutathion transferase) en non-enzymatische antioxidanten (gereduceerd glutathion, vitamine C en vitamine E) na HP-LPS inductie. Bovendien werd lipideperoxidatie geremd door MEAM in HP-LPS geïnduceerde ratten. De resultaten van histologische analyse correleerde goed met biochemische parameters.
Conclusie
Deze waarnemingen onderzocht de antioxiderende eigenschappen van MEAM bijdragen aan de gastrobeschermende effect in HP-LPS geïnduceerde maagzweer model.
Sleutelwoorden
Helicobacter pylori
lipopolysaccharide slijmappel
Antioxidanten Maagulcus Achtergrond
Helicobacter pylori
(H. pylori
) is een veel voorkomende bacteriële gastro-pathogeen van de mens infecteren bijna 50% van de wereldbevolking, en de meeste geïnfecteerde individuen blijven asymptomatische [1]. H. pylori
wordt nu erkend als een oorzakelijke factor van chronische gastritis, gastroduodenale zweer, maagkanker en mucosa-geassocieerde lymfeweefsel lymphoma [2, 3]. Verschillende factoren van H. pylori
bemiddelen cytotoxiciteit en de ontstekingsreactie. Onder deze zijn, vacuolating toxine (VacA), ammoniumionen door urease, cytotoxine geassocieerde gen A (CagA) eiwit, het type IV secretie systeem en lipopolysaccharide (LPS) [4, 5].
Algemeen gramnegatieve bacteriële Lipopolysacchariden zijn belangrijke ontstekingen inducerende. Echter, Helicobacter pylori
-Lipolysaccharide (HP-LPS) toont zeer lage endotoxische activiteit in vergelijking met typische Gram-negatieve bacteriële LPS, zoals die van Escherichia coli
, waardoor het te dragen mogelijk bij tot de aanhoudende infectie [6-9]. Helicobacter pylori
, die een Gram-negatieve bacterie die het maagslijmvlies koloniseert, wordt gezien als een primaire oorzaak van maagklachten en de celwand lipopolysaccharide is geïdentificeerd tussen de belangrijkste virulentiefactoren die verantwoordelijk zijn voor het opwekken van mucosale ontstekingsreacties die kenmerkend gastritis en darmzweren [10-14]. De gastrische mucosale responsen geassocieerd met H. pylori
infectie bij mensen evenals die kenmerkend mucosale ontstekingsreactie in het diermodel van HP-
LPS geïnduceerde gastritis zich uiten in een duidelijke toename van epitheelcel apoptose en pro-inflammatoire interleukine expressie , overmatige stikstofoxide en prostaglandine generatie, en de onlusten in NFKB en MAPK signalisatie cascades [15-18]. HP-LPS is betrokken bij het stimuleren van pepsinogeen en histamine remming van gesulfateerde mucine synthese en de productie van potentieel destructieve autoantilichamen, die allemaal kunnen bijdragen aan het verlies van mucosale integriteit [19]. Daarnaast werd HP-LPS aangetoond binden aan het maagslijmvlies somatostatine receptor, waardoor het interfereert met het regulerende effect van somatostatine op maagslijmvlies G celfunctie [20]. Pathogeen-geïnduceerde ontsteking geassocieerd met een toename reactive oxygen species (ROS) en Reactive stikstofspecies (RNS) productie en activering van de ontstekingsreactie uitput weefsel antioxidanten en onthult de gastheer verhoogd risico op oxidatieve stress [21, 22].
uitroeiing van H. pylori
lijkt zowel infectie en zweren genezen. Succesvolle behandeling leidt daarom tot de oplossing van gastritis en vermindert de kans op terugkeer van maagzweren [23]. De combinatie van een protonpompremmer (zoals omeprazol) en antibiotica (bijvoorbeeld ampicilline, amoxicilline, tetracycline of ofloxacine) curatief in maximaal 90% van de patiënten [24] Infectieziekten. Wat zijn bekend te worden behandeld met kruiden de hele geschiedenis van de mensheid. Plantaardige materialen nog steeds een belangrijke rol in de eerstelijns gezondheidszorg als therapeutische middelen te spelen in veel ontwikkelingslanden. Planten nog steeds bijna de enige bron van geneesmiddelen voor de meerderheid van de wereldbevolking worden. De Wereldgezondheidsorganisatie meldde dat 80% van de wereldbevolking vertrouwen vooral op traditionele geneeskunde en een groot deel van de traditionele therapieën omvatten het gebruik van plantenextracten of hun actieve bestanddelen [25]. Verschillende planten worden gebruikt voor de behandeling van gastrische aandoeningen, waaronder buikpijn en maagzweren [26-31]. Medicinale planten worden erkend als rijke bronnen van natuurlijke antioxidanten die kunnen beschermen tegen-ontsteking geassocieerd oxidatieve stress met hun extra voordelen, zoals minder toxiciteit, betaalbaarheid en medicinale en traditionele waarden. Een voorbeeld van zo'n traditioneel gebruikte medicinale plant sinds de oudheid is slijmappel
Correa, beter bekend als Bael, die behoort tot de familie Rutaceae. Elk deel van de plant, zoals fruit, zaden, blad, schors en de wortel staat bekend om zijn therapeutische en geneeskrachtige waarde. De bael vruchtvlees bevat vele functionele en bioactieve stoffen zoals carotenoïden, fenolen, alkaloïden, coumarines, flavonoïden, terpenen en andere antioxidanten die ons kan beschermen tegen chronische ziekten. Een hoofdbestanddeel van de vrucht het bindmiddel en marmelosin (0,5%), een cumarine. Daarnaast bevat het ook veel vitaminen en mineralen, waaronder vitamine C, vitamine A, thiamine, riboflavine, niacine, calcium en fosfor [32]. Opgemerkt wordt dat de onrijpe vruchten bitter, bitter, zuur, en samentrekkend; de spijsvertering en maag irritatie; en zijn bruikbaar bij de behandeling van diarree, dysenterie en stomachalgia [33].
Ondanks zijn lange traditionele gebruik in de Indiase geneeskunde, anti-oxidant en antiulcer eigenschappen van slijmappel
fruit zijn niet onderzocht in vivo
met HP -LPS geïnduceerde Sprague Dawley (SD) ratten als model. Een eerdere studie maagzweer geïnduceerd door aspirine albino ratten het beschermende effect van slijmappel
fruit [34] getoond. Op soortgelijke studie, het rijpe fruit pulp AM toont gastrointestinale cytoprotectieve activiteit Aspirine geïnduceerde, Cold terughoudendheid stress geïnduceerde en cerebellum-laesie geïnduceerde ulcer modellen door het vrijkomen van serotonine (5-hydroxytryptamine, 5-HT) vanaf enterochromaffin ( EG) cellen [35]. Daarom werd het onderhavige onderzoek gericht op het antioxidatieve effect van methanol extract van de onrijpe vrucht van slijmappel
tegen HP-LPS geïnduceerde maagzweer in SD-ratten te onderzoeken. Secretorische parameters en analyses van antioxidatieve enzymen werden uitgevoerd met biochemische assays. Deze resultaten werden verder bevestigd door histologische analyse.
Methoden
Voorbereiding van methanol extract van de onrijpe vrucht van slijmappel
(MEAM) Ondernemingen De vruchten van A. marmelos
werden verzameld uit Marudeeswarar tempel,
Thiruvanmiyur, Tamilnadu, India tijdens de maand maart 2009. de fabriek materiaal werd geïdentificeerd door Dr. Mathivanan, Professor, Centre for Advanced Study in Plantkunde, Universiteit van Madras, Guindy Campus, Chennai, Tamilnadu, India en het monster was gedeponeerd in dezelfde. Ondernemingen de vruchten werden mechanisch opengesneden, ontpit, schaduw gedroogd en gemalen. Droog materiaal (500 g) werd eerst ontvet met n-hexaan (1 L) gedurende 48 uur. Het residu werd geëxtraheerd met absolute methanol (1 L) gedurende 48 uur. Het extract werd gefiltreerd, 80% van het oplosmiddel werd afgedestilleerd bij atmosferische druk en de laatste sporen van methanol werd verwijderd onder verlaagde druk (opbrengst, 21,86%).
Dieren Mannelijke SD ratten van 150-200 g werden verkregen van het Institute of Basic Medische Wetenschappen, Chennai, India. Ze werden geacclimatiseerd aan stal omstandigheden, gevoed commerciële gepelleteerd rat chow (Hindustan Lever Ltd, Bangalore, India) en hadden vrije toegang tot water. Alle dieren werden onder standaard condities van temperatuur (28 ± 2 ° C) en licht (12 uur licht /donker cycli) gehandhaafd. De dieren werden gehuisvest in polypropyleen kooien (45 × 24 × 15 cm) en gevoed met een standaard dieet pellets en water ad libitum
. De dieren werden behandeld volgens de voorschriften van het Ethisch Comité Institutional Animal, universiteit van Madras. Alle experimenten uitgevoerd op dieren werden goedgekeurd en uitgevoerd in overeenstemming met de institutionele Dieren Ethische Commissie (IAEC No. 01/084/09).
H. pylori
Lipopolysaccharide
HP-LPS is een soort geschenk van Professor Manfred Kist, Institut für Medizinische Mikrobiologie und hygiëne, Freiburg, Duitsland. Het werd opgesteld door de conventionele methode van 26.695 stam van H. pylori
. De bacteriën gekweekt in Brucella bouillon met 5% foetaal kalfserum werd gepelleteerd door centrifugatie, tweemaal met 0,9% NaCl, hitte geïnactiveerd gedurende 2 uur stoom gewassen en tweemaal met 0,9% NaCl gewassen. De pellet werd vervolgens gesuspendeerd in 1 ml 0,9% NaCl en gevriesdroogd. Werd bewaard bij 4
0 C tot verder gebruik. Ondernemingen De optimale dosis HP-LPS om maagzweren te induceren werd geëvalueerd door orale toediening van HP-LPS gesuspendeerd in zoutoplossing in verschillende doses van 10, 25, 50, 75 en 100 mg per dag gedurende 4 achtereenvolgende dagen. Maagzweer index werd gemeten als de som van de lengte (in mm) van elke laesie volgens Okabe et al. [36]. De concentratie van HP-LPS te induceren ulcer werd bepaald op basis ulcus index proefdieren.
Dosis bepalen MEAM
mannelijke SD-ratten werden verdeeld in 7 groepen van zes ratten. Maagzweren werden alle groepen geïnduceerd door 4 dagen behandeling met HP-LPS (50 μ
g per dier per dag). Groepen 2-6 werden oraal behandeld met verschillende doses MEAM opgelost in water (25, 50, 100, 250 en 500 mg per kg lichaamsgewicht) gedurende 10 dagen na inductie met ulcus HP-LPS. Groep 7 ratten, dat als referentie controle werden behandeld met sucralfaat (100 mgkg -1 opgelost in water en oraal toegediend) gedurende 10 dagen [37].
Na de experimentele periode, de ratten van alle fracties werden opgeofferd door cervicale onthoofding. De magen werden verwijderd en opengesneden langs de grote curvatuur en vervolgens onder een lichtmicroscoop. . Groep I:: Controle
Groep II: Induced (op basis van de zweer index, werd effectieve dosis van de behandeling bepaald
Verdere werkzaamheden werd uitgevoerd met de combinatie van dieren, zoals hieronder uitgevoerd HP-LPS alleen [50 μ
g per dier per dag])
Groep III: behandeld (HP-LPS 50 μ
g per dier per dag + 250 mg per MEAM kg lichaamsgewicht
Groep IV:. Besturingsketen (HP-LPS 50 μ
g per dier per dag + 100 mg sucralfaat per kg lichaamsgewicht
Groep V:. Drug control (250 mg MEAM per kg lichaamsgewicht)
Pyloric ligatie
Pyloric ligatie werd uitgevoerd door de methode van Shay Komarov [38] Na de experimentele periode, ratten werden onderworpen aan ligatie pylorus onder ether anesthesie voor het verzamelen van maagsap. Onder lichte verdoving, werd het abdomen geopend door een kleine incisie onder de processus xiphoideus; de pyloric deel van de maag is iets opgetild en afgebonden, het voorkomen van schade aan de bloedtoevoer. De maag werd vervangen en de buikwand werd gesloten met onderbroken hechtingen.
Bepaling zuur uitscheiding parameters
de dieren opgeofferd 4 uur na pylorus ligatie. Maag uitgesneden, opengesneden en het maagsap werd afgevoerd in een klein bekerglas, en gecentrifugeerd bij 2000 rpm gedurende 10 min. Het supernatant werd verzameld en gebruikt voor het schatten van de omvang van maagsap, pH, vrije vetzuren, totaal zuurgehalte, pepsine concentratie en maagzuurafscheiding. Het volume werd genoteerd en uitgedrukt als ml /100 g /4 uur en de pH werd gemeten met een pH meter. Schatting van vrij en totaal zuur in maagsap werd uitgevoerd via de methode van kaart en Marks [39] uitgevoerd. Vrije vetzuren en totaal zuurgehalte werden bepaald door titratie met 0,01 N natriumhydroxide met behulp van reagens en fenolftaleïen Toepfer als indicator, respectievelijk. De zuurgraad werd uitgedrukt in mEq /l /100 g en zuurproductie als mEq /100 g /4 uur. Pepsine werd getest volgens de methode van Anson [40] met hemoglobine als substraat. De absorptie van de oplossing werd afgelezen bij 650 nm. Resultaten werden uitgedrukt als umol tyrosine vrijgemaakt /ml.
Bereiding van maagweefsel
De maag werd uitgesneden, gespoeld in ijskoude fysiologische zoutoplossing en gehomogeniseerd in 0,1 M Tris-HCl buffer (pH 7,4), met een tissue homogenisator met een teflon stamper bij 4 ° C. Het resulterende weefsel homogenaat werd gebruikt voor biochemische metingen.
Biochemische analyse
Totaal eiwit werd geschat door de werkwijze van Lowry et al. [41]. Enzymatische antioxidanten werden gemeten in de gastrische weefsels. SOD werd gemeten volgens de door Misra en Fridovich [42] methode. CAT en GPX werden gemeten volgens Takahara et al. [43] en Rotruck et al. [44], respectievelijk. Glutathion reductase (GR) werd geanalyseerd met de werkwijze van Staal et al. [45]. Niet-enzymatische antioxidanten, namelijk vitamine E, C en gereduceerd glutathion (GSH) werden gemeten volgens de methode van Desai [46], Omaye et al. [47] en Ellman [48], respectievelijk. Glutathion-S-transferase-activiteit werd getest volgens de werkwijze van Habig et al. [49]. LPO werd in de maag weefsel bepaald door de vorming van thiobarbiturinezuur reactieve substanties (TBARS) volgens de werkwijze van Ohkawa et al. [50].
Histologische studies
Gastric weefsels werden eerst gespoeld met ijskoude 0,9% zoutoplossing om het puin hechten aan weefsels te verwijderen. De weefsels werden daarna in 10% gebufferde formaline gefixeerd, routinematig verwerkt en ingebed in paraffine. Secties (5 mm dik) werden gesneden en gekleurd met hematoxyline en eosine. De glaasjes werden vervolgens geëvalueerd onder lichtmicroscoop (Nikon XDS-1B).
Statistische methoden
Alle de gegroepeerde gegevens werden geëvalueerd met behulp van SPSS /10.0 software. Hypothese testmethode opgenomen one-way variantie-analyse (ANOVA), gevolgd door minstens significant verschil (LSD) te testen. p <
0,05 werd beschouwd als statistisch significant te geven. Alle resultaten werden uitgedrukt als gemiddelde ± S.D. zes ratten in elke groep.
Resultaten
Dosis bepaling van HP-LPS
Figuur 1 toont het dosering-curve vaststellen van HP-LPS aan maagzweren induceert bij SD-ratten. Doses van 10 en 25 ug HP-LPS per dag gedurende 4 achtereenvolgende dagen geproduceerd lichte stijging ulcus index in vergelijking met controle, terwijl het de neiging toe te nemen (p
< 0,001) drastisch met 50, 75 en 100 ug per dag gedurende dezelfde periode een dosis afhankelijke wijze. Dus 50 ug HP-LPS per dag gedurende vier dagen werd beschouwd als de minimale effectieve dosis voor maagzweer induceren in SD ratten. Fig. 1 Dosis bepaling van HP-LPS voor de inductie van gastrische lesies bij SD-ratten. Gegevens zijn uitgedrukt als gemiddelde ± SD zes dieren in elke groep. Statistische significantie: * p
< 0.001, alle groepen versus controle
Dosis bepaling van MEAM
Effectieve dosis bepalen van MEAM behandeling tegen HP-LPS-geïnduceerde maagzweren wordt getoond in Fig. 2. Orale toediening van MEAM (25, 50, 100, 250 en 500 mg /kg) verminderde de maagzweer met 2,8%, 52,4%, 73%, 93% en 93,98%, respectievelijk, vergeleken met 89,2% reductie van sucralfaat ( 100 mg /kg). Er was een significante dosisafhankelijke afname (p
< 0,001) in de ulcus index van ratten behandeld met MEAM vergelijking met onbehandelde ratten zweren. Derhalve 250 mg /kg MEAM gedurende 10 dagen werd gekozen als de minimale effectieve dosis MEAM die aanzienlijke bescherming geboden. Daarom werd deze dosis gebruikt voor verdere evaluatie van de activiteit van gastrobeschermende MEAM. Fig. 2 Effectieve dosisbepaling methanolisch extract van slijmappel
(MEAM) in HP-LPS geïnduceerde dieren. Gegevens zijn uitgedrukt als gemiddelde ± SD zes dieren in elke groep. Statistische significantie: * p
< 0,001; #p Restaurant < 0,05; NS, niet significant. a: alle groepen vs HP-LPS-geïnduceerde; b: alle groepen versus ratten behandeld met sucralfaat
Effect van MEAM op secretorisch parameters
MEAM remde de toename secretorische parameters zoals weergegeven in tabel 1. zweren ratten (groep II), was er significante toename (p
<0,05) volume maagsap, vrije vetzuren, totaal zuurgehalte, maagzuurproductie en pepsine concentratie in vergelijking met die van de controle. Echter, deze parameters weer normaal niveau na MEAM behandeling (groep III), vergelijkbaar met die van controledieren (groep I). Sucralfaat behandelde dieren (IV) ook soortgelijke resultaten opgeleverd. Geneesmiddel alleen toegediend dieren (groep V) leverde geen significante veranderingen in vergelijking met die van de controle dieren (groep I) .table 1 Effect van MEAM op de niveaus van zuur secretoire parameters in maagsap van experimentele ratten
Groepen
Volume van maagsap
pH
Gratis zuurgraad
Totale zuurgraad
Acid Output
Pepsin concentratie
I
1.45 ± 0.10
4,6 ± 0,28
32.69 ± 1.93
58,73 ± 3,95
85,16 ± 5,74
155,13 ± 10,24
II
3,27 ± 0,27 a *
1,92 ± 0.14a *
60,17 ± 4.39a *
91,82 ± 5.22a *
300,25 ± 21.03a *
262,91 ± 17.85a *
III
1.65 ± 0.12b *
4,45 ± 0.35b *
33,26 ± 2.28b *
59,97 ± 3.47b *
98.95 ± 7.27b *
174,36 ± 13.03b *
IV
1,7 ± 0.11b *
4,2 ± 0.27b *
33,9 ± 2.26b *
60,66 ± 4.15b *
103,12 ± 7.59b *
180,88 ± 8.87b *
V
1,4 ± 0.10c NS
4,7 ± 0.34c NS
32.41 ± 2.22c NS
58,11 ± 4.65c NS
81,35 ± 5.45c NS
155,18 ± 10.20c NS
De gegevens worden uitgedrukt als gemiddelde ± SD zes dieren in elke groep. : Volume maagsap (100 ml g-1 4 h-1); vrije vetzuren (mEq L-1100 G-1); totaal zuurgehalte (mEq-1 L 100 g-1); maagzuurafscheiding (mEq 100 g 1 4 h-1); Deze activiteit (μ
mol tyrosine bevrijd ml-1). Statistische significantie: * p
< 0,05; NS, niet significant. a: groep II vergeleken met Groep I. b: Groepen III en IV ten opzichte van groep II. c: groep V vergeleken met groep I
Effect van MEAM op enzymatische antioxidanten en niet enzymatische antioxidanten
De verschillen in de activiteiten van enzymatische antioxidanten en de niveaus van niet-enzymatische antioxidanten worden samengevat in Tabellen 2 en 3, respectievelijk . Bij HP-LPS inductie, een significante daling (p
<0,05) bij de activiteiten van enzymatische antioxidanten (SOD, CAT, GPx, GR en GST) werd in groep II dieren waargenomen in vergelijking met die van controledieren (groep I ). MEAM behandeling van zweren ratten significant verhoogde de activiteit van deze enzymen tot bijna normale niveaus. Zeer significante vermindering (p
< 0,05) in de gehaltes van niet enzymatische antioxidanten (GSH, vitamine E en vitamine C) bleek uit de HP-LPS geïnduceerde dieren (groep II). Deze negatieve veranderingen werden teruggedraaid naar normaliteit in groep III (MEAM behandelde) dieren. Groep IV en V dieren bleken geen significante veranderingen zien in vergelijking met de controle animals.Table 2 Effect van MEAM over de activiteiten van enzymatische antioxidanten in proefdieren
Groepen
SOD
CAT
GPx
GR
GST
I
4.43 ± 0.26
17.63 ± 0.91
206,28 ± 14,49
2,64 ± 0.16
4,82 ± 0,24
II
2,51 ± 0.18a *
9.06 ± 0.61a *
138,28 ± 37.39a *
1,39 ± 0.11a *
3,02 ± 0.19a *
III
4,39 ± 0.30b *
17.32 ± 1.15b *
205,74 ± 15.07b *
2,51 ± 0.15b *
4,8 ± 0.38b *
IV
4.41 ± 0.28b *
17,47 ± 1.24b *
204,93 ± 13.40b *
2,62 ± 0.18b *
4,79 ± 0.26b *
V
4,42 ± 0.20c NS
17.58 ± 1.12c NS
205,62 ± 12.67c NS
2,63 ± 0.22c NS
4,81 ± 0.35c NS
data worden uitgedrukt als gemiddelde ± SD voor zes dieren in elke groep. Eenheden: SOD, eenheden /mg proteïne (een eenheid van de SOD-activiteit is de hoeveelheid enzym die nodig is om 50% remming van epinefrine auto-oxidatie geven); CAT, umol H2O2 verbruikt /min /mg eiwit; GSH, nmol /g weefsel; GPx, GSH nmol geoxideerd /min /mg eiwit; GR, umol NADPH geoxideerd /min /mg eiwit; GST, umol van 1-chloor-2,4- dinitrobenzeen conjugaat gevormd /min /mg eiwit. Statistische significantie: * p
< 0,05; NS, niet significant. a: Groep II (HP-LPS-geïnduceerde), vergeleken met groep I (Control). b: Groepen III (MEAM behandeld) en IV (Sucralfate behandeld) in vergelijking met de groep II (HP-LPS geïnduceerde). c: Groep V (Drug Control), vergeleken met groep I (Control)
Tabel 3 Effect van MEAM over de activiteiten van niet-enzymatische antioxidanten in proefdieren
Groepen
GSH
Vit C
Vit E
I
3,92 ± 0,23
7.52 ± 0.33
5.85 ± 0.32
II
1,46 ± 0.10a *
4.64 ± 0.36a *
3,08 ± 0.21a *
III
3,89 ± 0.25b *
7,48 ± 0.55b *
5,8 ± 0.44b *
IV
3.8 ± 0.25b *
7.45 ± 0.46b *
5,75 ± 0.37b *
V
3,88 ± 0.33c NS
7,5 ± 0.54c NS
5,79 ± 0.34c NS
De gegevens worden uitgedrukt als gemiddelde ± SD zes dieren in elke groep. Units: GSH, ug /mg eiwit; Vitamine E, ug /mg eiwit; Vitamine C, ug /mg eiwit. Statistische significantie: * p
< 0,05; NS, niet significant. a: Groep II (HP-LPS-geïnduceerde), vergeleken met groep I (Control). b: Groepen III (MEAM behandeld) en IV (Sucralfate behandeld) in vergelijking met de groep II (HP-LPS geïnduceerde). c: groep V (Drug controle) vergeleken met groep I (controle)
Effect van MEAM op lipideperoxidatie
Figuur 3 toont de mate van lipideperoxidatie in maagweefsel controle- en experimentele groepen ratten. Een opmerkelijke verhoging van het niveau van TBARS waargenomen in de HP-LPS geïnduceerde ratten in vergelijking met controleratten. Behandeling met MEAM resulteerde in een significante afname (p
< 0,05) in deze niveaus in vergelijking met dieren zweren. Echter, MEAM alleen en sucralfaat behandelde dieren bleken geen significante veranderingen in deze niveaus te laten zien in vergelijking met die van de controle dieren. Fig. 3 Effect van MEAM op lipideperoxidatie in Gastric weefsel van proefdieren. Gegevens zijn uitgedrukt als gemiddelde ± SD zes dieren in elke groep. Units: LPO, nmol MDA vrijgegeven /mg eiwit. Statistische significantie: * p
< 0,05; NS, niet significant. a: Groep II (HP-LPS-geïnduceerde), vergeleken met groep I (Control). b: Groepen III (MEAM behandeld) en IV (Sucralfate behandeld) in vergelijking met de groep II (HP-LPS geïnduceerde). c: groep V (Drug controle) vergeleken met groep I (controle)
Histologische analyse van het maagslijmvlies
Het effect van MEAM op gastrische histologie van controle en experimentele groep dieren is weergegeven in Fig. 4. De maagslijmvlies van controle ratten toonden normale architectuur met perfect intact en regelmatige epitheel (Fig. 4a). Het maagslijmvlies van HP-LPS geïnduceerde ratten toonden ulceratie, submucosale oedeem, ontstekingen en polymorfonucleaire infiltratie in de ulcer (figuur 4b.); dat het maagslijmvlies van ratten behandeld met MEAM toonde geen zweren, in plaats tentoongesteld regenererend epitheel met lichte ontsteking (fig. 4c). De maagslijmvlies van ratten behandeld met sucralfaat toonde ook lichte herstel van oppervlakkige epitheel en met minder ontstekingscellen (Fig. 4d). Het maagslijmvlies geneesmiddel controledieren vertoonden normale architectuur vergelijkbaar met die van controledieren (Fig. 4e). Fig. 4 Histologische analyse van het maagslijmvlies controle- en proefdieren. Secties gekleurd met hematoxyline en eosine werden gevisualiseerd onder lichtmicroscoop. een controle maagslijmvlies toont normale architectuur van epitheel b maagslijmvlies ratten geïnduceerd met HP-LPS toont duidelijke ontsteking, neutrofielen infiltratie en mucosale zweren met sub-mucosale oedeem c maagslijmvlies van MEAM behandelde ratten vertoont geen zweren, mucosale regeneratie met milde inflammatoire cellen en licht oedeem. d maagslijmvlies van ratten behandeld met sucralfaat toont ook soortgelijke architectuur die van MEAM e maagslijmvlies van ratten behandeld met alleen MEAM toont normale gastrische epitheel vergelijkbaar met die van de controle. Vergroting: 5 X
Discussie
Hoewel diverse farmacologische interventies, alleen of in combinatie, zijn gunstig gebleken bij de behandeling van maagzweren in verschillende studies zijn, ze zijn niet vrij van hun schadelijke bijwerkingen. Deze nadelige gevolgen hebben immense belang in een zoektocht naar alternatieve kruidengeneesmiddelen geactiveerd. Daarom werd deze studie gericht op het effect methanolisch extract van onrijpe vruchten van slijmappel
vinden tegen HP-LPS opgewekte maagzweer SD ratten.
In deze studie een vermindering van de ulcus index werd opgemerkt in MEAM behandelde groep dieren die duidelijk wijst naar de begunstigde effecten van het extract. Hoge maagzuurproductie bij patiënten ontwikkelt aanzienlijk antrum overheersende gastritis en is een verhoogd risico op duodenale ulcera. Lage maagzuursecretie daarentegen ontwikkelt chronische atrofische gastritis en carcinoma [51]. H. pylori
infectie bij patiënten resulteert in significante toename van de maagzuurproductie en duodenale zweren, wat wijst op een belangrijke rol van zuur in de pathogenese van gastro mucosale ulceratie. Sterk zure pH (lage pH) is aangetoond dat H. pylori versterken
geïnduceerde NF-KB nucleaire binding [52]. Verhoogde zuur afscheiding door HP-LPS bijdraagt aan de schade van de maag mucosale. Op ingeboren niveau, kan HP-LPS histamine afgifte uit de rat enterochromaffiene cellen die bijdraagt aan de toename van de zuursecretie [53] te stimuleren. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.