Selenoproteïne S (SEPS1) gen -105G > Een promotor polymorfisme beïnvloedt de gevoeligheid voor maagkanker in de Japanse bevolking

Selenoproteïne S (SEPS1) gen -105G > Een promotor polymorfisme beïnvloedt de gevoeligheid voor maagkanker in de Japanse bevolking
Abstract achtergrond
Ontsteking is een belangrijke factor in het proces van carcinogenese van chronische gastritis veroorzaakt door Helicobacter pylori
. Selenoproteïne S (SEPS1) is betrokken bij de controle van de ontstekingsreactie in het endoplasmatisch reticulum (ER). Onlangs de -105G > A polymorfisme in de promotor van SEPS1 werd aangetoond dat pro-inflammatoire cytokine-expressie te verhogen. Onderzochten we het verband tussen het polymorfisme en het risico op maagkanker.
Methods
We namen maag biopten tijdens endoscopies van 268 Japanse maagkanker patiënten (193 mannen en 75 vrouwen, gemiddelde leeftijd 65,3) en 306 controlepatiënten ( 184 mannen en 122 vrouwen, gemiddelde leeftijd 62,7) en geëxtraheerd het DNA uit de biopsie specimens. Alle proefpersonen gaven schriftelijk toestemming. Voor de genotypering van SEPS1 promoter polymorfisme op positie -105G > A, werden PCR-RFLP methoden en de PCR producten werden geknipt met PspGI
Logistic regressieanalyse werd gebruikt om odds ratio (OR) en 95% betrouwbaarheidsintervallen te schatten. . interval (CI), correctie voor leeftijd, geslacht, en H. pylori
infectiestatus
Resultaten
Onder gevallen, de verdeling van genotypen was als volgt: 88,4% waren GG, 11,2% waren GA, en 0,4% waren AA. Onder besturing, de verdeling was als volgt: 92,5% waren GG, 7,2% GA en 0,3% waren AA. Onder mannen, die het allel was geassocieerd met een verhoogde kans op maagkanker, vergeleken met de GG genotype (OR 2.0, 95% CI 1,0-4,1, p = 0,07). Vergeleken met het GG genotype, die het allel was significant geassocieerd met een verhoogd risico van intestinale soort maagkanker (OR 2.0, 95% CI 1,0-3,9, p < 0,05) en maagkanker in het middelste derde deel van de maag (OR: 2,0, 95% CI 1,0-3,9, p < 0,05).
Conclusie
-105G > Een promotor polymorfisme van SEPS1 werd geassocieerd met de intestinale vorm van maagkanker. Dit polymorfisme kan ontstekingen van het maagslijmvlies beïnvloeden. Grotere bevolking op basis van studies zijn nodig om de relatie tussen ontstekingsreacties en SEPS1 polymorfisme te verduidelijken. Achtergrond
Maagkanker blijft een groot probleem voor de volksgezondheid wereldwijd. Hoewel de incidentie en sterfte van maagkanker geleidelijk zijn gedaald, maagkanker is de tweede alleen voor longkanker als de belangrijkste oorzaak van kanker overlijden in de hele wereld [1, 2]. Helicobacter pylori
(H. pylori
) werd aangewezen als een ziekteverwekker voor de maag carcinogenese [3]. Ontsteking kan een belangrijke factor in het proces van carcinogenese van chronische gastritis veroorzaakt door H. pylori zijn
[4]. Slechts een klein aantal geïnfecteerde patiënten daadwerkelijk ontwikkelen maagkanker. Dit suggereert dat gastheer genetische factoren, zoals genen geassocieerd met inflammatoire responsen, kunnen ook een belangrijke rol in de maag carcinogenese.
Selenoproteïne S (SEPS1, ook bekend als Sels SELENOS, VIMP) is een nieuw selenoproteïne in het endoplasmatisch reticulum (ER) en het plasmamembraan. . Het is betrokken bij de controle van de ontstekingsreactie in ER [5]
SEPS1 beschermt de cellen tegen oxidatieve schade en apoptose, en is algemeen voor in verschillende weefsels [6-8]
Onlangs heeft de. - 105G > een promoter polymorfisme van SEPS1 bleek sterk geassocieerd met plasma niveaus van pro-inflammatoire cytokines, zoals interleukine 1 bèta (IL-1β), interleukine 6 (IL-6) en tumornecrosefactor-alfa (TNF-α) . De -105G > Een promotor polymorfisme van SEPS1 kunnen beïnvloeden SEPS1 mRNA-niveaus [9]. De vervanging van het A allel van het G-allel op positie -105 verminderde de promoteractiviteit in HepG2-cellen [10].
Na het verslag van een polymorfisme in het SEPS1 promotorgebied, hebben sommige klinische studies aangetoond associaties tussen de SEPS1 polymorfisme met coronaire hartziekte en ischemische beroerte [11] en preëclampsie [12], terwijl andere studies gemeld geen associaties tussen deze variant met een inflammatoire darmziekte [13] of cerebrovasculaire aandoeningen [14].
echter, de associatie tussen de -105G >, Een promoter polymorfisme van SEPS1 en maag kankerrisico is nog niet onderzocht
IL-1β niveaus zijn geassocieerd met maagkanker [15], en omdat de SEPS1 polymorfisme invloed op de niveaus van IL-1β, kan de SEPS1 polymorfisme. een belangrijk genetische factor voor de ontwikkeling van maagkanker.
in deze case-control studie onderzochten we de associatie tussen de SEPS1 promoter polymorfisme en zowel de maag kankerrisico en ontstekingsreacties in maagslijmvlies gemeten maag biopsiemonsters .
methoden
patiënten en controles Ondernemingen de studie omvatte patiënten die een bovenste gastro-intestinale endoscopie aan de Fujita University Health Hospital in Japan ontvangen. Achtereenvolgens ingeschreven patiënten werden gescreend op maagkanker door het bovenste maagdarmkanaal endoscopie gevolgd door een barium X-ray onderzoek. Gevallen waren 268 Japanse patiënten (193 mannen, 75 vrouwen, gemiddelde leeftijd 65,3 ± 12,0 jaar) die met primaire maagkanker werden gediagnosticeerd en controles waren 306 personen (184 mannen, 122 vrouwen) zonder maagkanker die ook onderging bovenste maagdarmkanaal endoscopie. Maagkanker werd histologisch gediagnosticeerd op de Pathologie afdeling van ons ziekenhuis, en kanker werd geclassificeerd volgens de indeling Lauren 's [16]. De kanker enscenering en anatomische locatie-informatie werden ook verkregen. Patiënten met systemische ziekten en kwaadaardige tumoren in andere organen, of die hadden niet-steroïdale anti-inflammatoire geneesmiddelen werden uitgesloten ontvangen. Ondernemingen De Ethische Commissie van de School of Medicine aan de Fujita Health University keurde het protocol. Schriftelijke toestemming werd verkregen van elke studie deelnemer.
Histologische studie en DNA Extraction
Gastric biopten werden genomen uit de niet-kankerachtige mucosa in het antrum en de grotere kromming van de maag, met een bovenste maagdarmkanaal scope. Sommige delen van elk monster werden gefixeerd in 10% gebufferde formaline en ingebed in paraffine, terwijl de rest direct werden ingevroren en bewaard bij -80 ° C tot DNA-extractie. Alle histologische diagnoses werden uitgevoerd bij de afdeling pathologie van ons ziekenhuis. De ernst van chronische gastritis werd ondergebracht in een patholoog die geen toegang tot klinische informatie had, volgens de bijgewerkte Sydney stelsel [17] met elke factor gescoord van 0 (normaal) tot 3 (gemerkt). Ondernemingen De genomische DNA werd geëxtraheerd uit monsters bewaard bij -80 ° C met behulp van proteinase K en DNA extractie kit (Quiagen, Valencia, CA).
Polymorfisme Analyse van SEPS1 Gene
het genotype van de SEPS1 promotorgebied op positie -105 bepaald met behulp van PCR-gebaseerde restrictiefragmentlengtepolymorfismen (PCR-RFLP). Gebruikten we primers die de SEPS1 (-105) polymorfisme gebied opgenomen. Vervolgens werd de identificatie uitgevoerd na PCR-amplificatie, met de volgende primers 5'-AAATCCGTGAACGAGGTCCG-3'- en 5'-GAGCAACTAATCTGAATCAGG-3 '. PCR werd uitgevoerd met 0,1 ug genomisch DNA uitgevoerd in een volume van 20 ul. Het DNA werd gedurende 20 seconden denatureren bij 94 ° C gedurende 5 minuten, gevolgd door 35 cycli bij 94 ° C gedurende 20 seconden, 53 ° C en 72 ° C gedurende 40 seconden, met een laatste verlenging bij 72 ° C gedurende 7 minuten . De PCR-reacties werden uitgevoerd met behulp van Blend Taq (Toyobo Co., Ltd., Osaka, Japan). De geamplificeerde PCR producten werden gedurende de nacht gedigereerd met 5 eenheden PspGI (New England Biolabs, Inc., Beverly, MA, USA) bij 75 ° C. Vervolgens werden de verteerde producten geanalyseerd op 3% agarose gels. De gelen werden gekleurd met ethidiumbromide (0,5 ug /ml), en de genotypen werden bepaald door analyses van verschillende banden. De aanwezigheid van een PspGI plaats werd aangegeven door de splitsing van de 324 bp geamplificeerde product fragmenten van 179 en 145 bp opleveren. Genotypering werd bevestigd door directe sequentiebepaling in een aantal willekeurig geselecteerde monsters.
Detectie van H. pylori
H. pylori
positiviteit werd bepaald door microscopisch onderzoek, ureum ademtest, of serum anti-HP antilichaamtiters. Infectie gediagnosticeerd als ten minste één van deze test was positief.
Statistische analyse
Hardy-Weinberg evenwicht van de SEPS1 gen allel in de controlegroep en maagkanker patiënten werden door χ 2 statistieken. Klinische kenmerken tussen patiënten met en zonder maagkanker en gastritis verschillen in scores tussen A en dragers G /G zijn door de Mann-Whitney U test. Logistische regressieanalyse werd gebruikt om odds ratio (OR) en 95% betrouwbaarheidsintervallen (CI) schatting voor de genotypes met correctie voor leeftijd, geslacht en H. pylori
infectiestatus. Een p-waarde < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant.

Resultaten Kenmerken van patiënten
De kenmerken van de patiënten en controles worden in tabel 1 samengevat H. pylori infectie
en leeftijd was hoger bij maagkanker patiënten dan bij controles (p < 0,05) .table 1 Kenmerken van de proefpersonen

GC
controls
P

aantal
268
306
mannetjes /vrouwtjes
193/75
184/122
NS
Gemiddelde leeftijd (± SD)
65,3 ± 12,0
62,7 ± 13,2
< 0.05A
HP positief tarief (%) 86,2

68,0
< 0.05A
GC: maagkanker, HP: Helicobacter pylori
AGC vs. Controls, Mann-Whitney U test Ondernemingen De belangrijkste endoscopische bevindingen van de controlegroep waren:. Maagzweer in 68 patiënten ( 22,2%), darmzweren bij 35 (11,4%), maag- en darmzweren in 5 (1,7%) en gastritis bij 198 (64,7%).
Verspreiding van de SEPS1 genotypes
Tabel 2 toont de genotype frequenties van SEPS1 bij patiënten met maagkanker en de controlegroep. Het polymorfisme op positie -105 van SEPS1 werd getypt in alle 574 proefpersonen. Onder gevallen, de verdeling van genotypen was als volgt: 88,4% waren GG, GA 11,2% was en 0,4% waren AA. Onder besturing, de verdeling was als volgt: 92,5% waren GG, 7,2% GA en 0,3% waren AA (tabel 2). De frequentie van SEPS1 polymorfisme in de controlegroep en maagkanker patiënten niet significant afwijken van de (p = 0,42, 0,96 respectievelijk) onder het Hardy-Weinberg-evenwicht verwacht. Onder mannen in vergelijking met de GG genotype, de genotypes GA en AA gecombineerd werd geassocieerd met een verhoogde kans op maagkanker (OR: 1,97, 95% CI 0,95-4,06, p = 0,067, Tabel 3) .table 2 SEPS1 polymorfisme en GC risico
genotypes
patiënten met GC
n (%)
controlepatiënten
n (% )
OR (95% CI)
P
G /G
237 (88,4)
283 (92,5)
verwijzing
G /A
30 (11,2)
22 (7.2)
1,66 (0,91-3,01)
0,097
A /A
1 (0.4)
1 (0,3)
0,77 (0,05-12,44)
0,852
G /A + A /A
31
23
1,61 (0,90-2,89)
0,112
GC: maagkanker, CI: vertrouwen interval
Tabel 3 Verband tussen SEPS1 polymorfisme en geslacht


genotype
G /G ten opzichte van G /A + A /A



G /G
G /A
A /A
OR (98% CI)
P
controle patiënten
mannelijke
171
12 1
verwijzing
vrouwelijke
112
10

• Toepassing van Weibull model voor de overleving van patiënten met maag- cancer
• Coëxistentie van gastro-intestinale stromale tumor en inflammatoire myofibroblastische tumor van de maag te presenteren als een botsing tumor: eerste geval verslag en literatuur review