Selenoprotein S (SEPS1) gena -105G > polimorfizma promotora utječe na osjetljivost na rak želuca u japanskom population

Selenoprotein S (SEPS1) gena -105G > polimorfizma promotora utječe na osjetljivost na rak želuca u japanskoj populaciji
Sažetak
pozadini pregled Upala je ključni čimbenik u procesu karcinogeneze od kroničnog gastritisa izazvane Helicobacter pylori
. Selenoprotein S (SEPS1) koji su uključeni u kontrolu upalnog odgovora u endoplazmatski retikulum (ER). Nedavno je -105G > polimorfizam promotora SEPS1 pokazalo se da se poveća ekspresiju pro-upalni citokin. Ispitali smo povezanost između ovog polimorfizma i rizik od raka želuca.
Metode pregled uzeli smo u stomaku biopsija tijekom endoscopies od 268 japanskih pacijenata oboljelih od raka želuca (193 muškaraca i 75 žena, prosječne starosti 65,3), i 306 kontrolnih pacijenata ( 184 muškaraca i 122 žena, prosječne dobi 62,7) i ekstrahira DNK iz uzorka biopsije. Svi subjekti predviđeni pisani pristanak. Za određivanje genotipa polimorfizma SEPS1 promotora na poziciji -105G > A, korišteni su metode PCR-RFLP i PCR proizvodi su probavljeni sa PspGI pregled Logistička-regresijska analiza je korištena za procjenu omjer vjerojatnosti (OR) i 95% povjerenja. . intervali (CI), nakon prilagodbe za dob, spol, i H. pylori pregled statusa infekcije | Rezultati
Među predmetima, distribucija genotipova bio je sljedeći: 88,4% bilo GG, 11,2% su bili GA, a 0,4% su AA. U kontrolnoj skupini raspodjela je bila kako slijedi: 92,5% su GG, 7,2% su GA i 0,3% su AA. Kod muškaraca koji nose A alela bila je povezana s povećanim izgledima raka želuca, u usporedbi s GG genotipom (ili: 2,0, 95% CI 1,0-4,1, p = 0,07). U usporedbi s GG genotipom, noseći A alel značajno je povezana s povećanim rizikom od crijevna tipa karcinoma želuca (ili: 2,0, 95% CI 1.0-3.9, p < 0,05), kao i karcinoma želuca nalazi se u srednjoj trećini želuca (OR: 2,0, 95% CI 1,0-3,9, p 0.05). pregled Zaključak
-105G > promotor polimorfizam SEPS1 bio povezan s crijevne vrsti raka želuca. Ovaj polimorfizam može utjecati na upalnih stanja sluznice želuca. Veće populacijske studije temeljene su potrebne za razjašnjavanje odnosa između upalnih reakcija i SEPS1 polimorfizma. Pregled Pozadina pregled, raka želuca ostaje značajan javnozdravstveni problem u svijetu. Iako su incidencije i mortaliteta od raka želuca postupno smanjivao, raka želuca je samo rak pluća kao vodeći uzrok smrti od raka u svijetu drugi [1, 2]. Helicobacter pylori pregled (H. pylori pregled) je označen kao uzročnik patogena za želučane karcinogeneze [3]. Upala može biti ključni faktor u procesu karcinogeneze od kroničnog gastritisa izazvanog H. pylori pregled [4]. Međutim, samo mali broj zaraženih pacijenata zapravo razviti rak želuca. To sugerira da domaćini genetski faktori, kao što su geni povezani s upalnim bolestima, također može igrati važnu ulogu u želucu karcinogeneze.
Selenoprotein S (SEPS1, također poznat kao vazi, SELENOS, VIMP) je roman selenoprotein nalazi u endoplazmatska retikulum (ER) i membrane plazme. , On je uključen u kontrolu upalnog odgovora u ER [5] pregled SEPS1 štiti stanice od oksidativnog oštećenja i apoptoze, a široko je eksprimirana u različitim tkivima [6-8] pregled Nedavno je, - 105 g > promotor polimorfizam SEPS1 pokazalo se da je snažno povezana s razinama u plazmi pro-upalnih citokina, kao što je interleukin 1 beta (IL-1), interleukin 6 (IL-6) i nekroze tumora alfa faktora (TNF-α) , -105G ≫ polimorfizam promotor SEPS1 može utjecati na razinu SEPS1 mRNA [9]. Supstitucija A alela za G alel na položaju -105 smanjio promotorsku aktivnost Stanice HepG2 [10].
Nakon izvješća polimorfizma u SEPS1 promotorske regije, neke kliničke studije su pokazale povezanost između polimorfizma SEPS1 s koronarnom bolesti srca i ishemijskog moždanog udara [11] i preeklampsije [12], dok druge studije izvijestile o povezanost između ove varijante s upalnom bolesti crijeva [13] ili cerebrovaskularne bolesti [14].
Međutim, povezanost između -105G >a polimorfizam promicatelj SEPS1 želučanim rizika od raka još nije ispitivan pregled IL-1 razine su povezane s rakom želuca [15], a budući da je polimorfizam SEPS1 utječe na razine IL-1, polimorfizam SEPS1 može. biti važan genetski faktor za razvoj karcinoma želuca.
u ovom case-control studiji, ispitali smo povezanost između polimorfizma SEPS1 promotora i oba rizika od raka želuca i upalnim odgovorima u sluznici želuca, mjereno u želučanom biopsijom uzorka .
Metode pregled bolesnika i kontrola
studiju su uključeni bolesnici koji su primili gornji gastrointestinalni endoskopiju u sveučilišnoj bolnici Zdravlje Fujita u Japanu. Sukcesivno ispitanici su prikazivali za rak želuca strane gornjeg gastrointestinalnog endoskopije, nakon čega slijedi barij X-ray pregled. Slučajevi su 268 japanskih bolesnika (193 muškaraca, 75 žena, prosječne dobi 65,3 ± 12,0 godina) koji su s primarnim karcinomom želuca dijagnozom, a kontrole su 306 osobe (184 muškaraca, 122 žena) bez raka želuca, koji je također prošao kroz gornji gastrointestinalni endoskopiju. Rak želuca je dijagnosticirana histološki na patologiju Zavoda za naše bolnice, i rak je klasificiran prema Lauren 's klasifikacijom [16]. Također su dobiveni uprizorenje raka i anatomski podaci o lokaciji. Pacijenti s sustavne bolesti i zloćudnih bolesti u drugim organima, ili koji su dobili nesteroidne protuupalne lijekove su isključene.
Etičkog povjerenstva Medicinskog fakulteta, na Fujita University Health odobrio protokol. Pismeni informirani pristanak dobiven je od svakog sudionika studije.
Histološke studiju i DNA ekstrakcije pregled želučanom biopsijom primjerci uzeti iz ne-kancerozne sluznice u antruma i veće zakrivljenosti želuca, koristeći gornji gastrointestinalni opseg. Neki dijelovi svakog uzorka se fiksiraju u 10% puferiranom formalinu i uklopljene u parafin, dok su ostali dijelovi su odmah zamrznuti i pohranjeni na -80 ° C do DNA ekstrakcije. Svi histološka dijagnoza su izrađene u Zavodu za patologiju naše bolnice. Ozbiljnost kroničnog gastritisa je klasificiran od strane patologa koji nisu imali pristup bilo kliničkih informacija, u skladu s ažuriranom Sydney sustava [17] sa svakom faktoru biti gol od 0 (normalna) do 3 (označen).
Genomske DNA je izvađen iz pohranjenih uzoraka na -80 ° C pomoću proteinaze K i vađenje setove DNA (Quiagen, Valencia, CA). pregled Polimorfizam Analiza SEPS1 Gene
genotip za SEPS1 promotorske regije na poziciji -105 utvrđena je uporabom PCR-bazirane duljine restrikcijskih odsječaka polimorfizama (PCR-RFLP). Koristili smo primera koja je uključivala SEPS1 (-105) polimorfizam područje. Nakon toga, identifikacija je učinjeno nakon PCR amplifikaciju, uporabom sljedećih klica 5'-AAATCCGTGAACGAGGTCCG-3'and 5'-GAGCAACTAATCTGAATCAGG-3 '. PCR je proveden s 0,1 ug genomne DNA u volumenu od 20 uL. DNA su denaturirani pri 94 ° C kroz 5 minuta, zatim je slijedilo 35 ciklusa na 94 ° C 20 sekundi, 53 ° C tijekom 20 sekundi i 72 ° C tijekom 40 sekundi, uz konačno proširenje pri 72 ° C tijekom 7 minuta , PCR reakcije su učinili pomoću Blend Taq (Tovobo Co., Ltd., Osaka, Japan). Amplificirani PCR proizvodi pocijepani su preko noći s 5 jedinica PspGI (New England Biolabs, Inc., Beverly, MA, USA) na 75 ° C. Nakon toga, razgrađeni produkti bili su analizirani na 3% agaroznom gelu. Ovi gelovi su obojeni etidij bromidom (0.5 ug /mL) i genotipovi su određene analize različitih sastava. Prisutnost PspGI stranice je označeno cijepanju 324 bp pojačanog produkta u kako bi se dobio fragmente 179 i 145 bp. Genotipiziranje je potvrđena direktnim sekvencioniranjem nekoliko slučajno odabranih uzoraka. Pregled Detekcija H. pylori H. pylori
pregled pozitivnost određena je mikroskopskim pregledom, urea daha testa, ili seruma protiv HP antitijela. Infekcija se dijagnosticira kada je barem jedan od tih testova je bio pozitivan. Pregled, Statistička analiza pregled Hardy-Weinberg ravnoteže genskog alela SEPS1 u kontrolama i pacijenata s rakom želuca su ocijenjeni od strane χ 2 statistiku. Klinička obilježja između bolesnika, sa ili bez raka želuca, te razlike u rezultatima gastritisa između nosača i /g ispitana su Mann-Whitney U test. Logistička-regresijska analiza je korištena za procjenu omjer vjerojatnosti (OR) i intervali 95% pouzdanosti (CI) za genotipova, uz prilagodbe za dob, spol, i H. pylori
status infekcije. P-vrijednost < 0,05 smatrala se statistički značajnom. | Rezultati
Karakteristike ispitanika
obilježjima slučajeva i kontrola sažeti su u tablici 1. H. pylori pregled infekcija i dob bila je viša u bolesnika s rakom želuca, nego u kontrole (p < 0,05) .table 1 Karakteristike ispitanika pregled pregled GC
kontrole
p

broj pregled 268
306
mužjak /ženka
193/75
184/122
NS
prosječna dob (± SD)
65,3 ± 12,0 pregled 62,7 ± 13,2 izvoznici < Razini 0.05 pregled HP pozitivne stope (%)
86,2
68,0 Netlogu < Razini 0.05 pregled GC: rak želuca, HP: Helicobacter pylori
AGC naspram kontrole, Mann-Whitney U test
Glavni endoskopskih nalaza za kontrolnu skupinu bili su:. Želučanog čira u 68 bolesnika ( 22,2%), na dvanaesniku u 35 (11,4%), želučani i duodenalni ulkus u 5 (1,7%), i gastritis u 198 (64,7%). pregled Raspodjela genotipova SEPS1 pregled Tablica 2 prikazuje frekvencije genotip od SEPS1 u bolesnika s karcinomom želuca i kontrolne grupe. Polimorfizam na položaju -105 u SEPS1 se upisali u svim 574 ispitanika. Među slučajevima, distribucija genotipova bio je sljedeći: 88,4% bilo GG, 11,2% su bili GA, a 0,4% su AA. U kontrolnoj skupini raspodjela je bila kako slijedi: 92,5% su GG, 7,2% su GA i 0,3% su AA (Tablica 2). Učestalost SEPS1 polimorfizma u kontrolnoj i bolesnika s karcinomom želuca nije znatno odstupaju od onih koji se očekuju pod Hardy-Weinberg ravnoteže (p = 0.42, 0.96, respektivno). Kod muškaraca, u usporedbi s GG genotipom, genotipovi GA i AA u kombinaciji je bio povezan s povećanim izgledima karcinoma želuca (ILI: 1,97, 95% CI 0,95-4,06, p = 0,067 Tablica 3) .table 2 SEPS1 polimorfizam i GC rizik pregled genotipova pregled
bolesnika s GC pregled n (%)
bolesnika kontrolne
n (% )
ILI (95% CI)
P
G /G pregled 237 (88,4) pregled, 283 (92,5) pregled referenca pregled G /A
30 (11,2)
22 (7.2)
1,66 (0.91-3.01)
0,097
A /A
1 (0.4)
1 (0.3) pregled, 0,77 (0,05 - 12,44) pregled 0,852 pregled G /A + A /A pregled 31 pregled, 23 pregled, 1.61 (0.90-2.89) pregled 0,112 Netlogu GC: rak želuca, CI: uvjeren interval pregled Tablica 3 Povezanost između SEPS1 polimorfizma i spolu pregled pregled pregled genotipa
G /G u odnosu na G /A + A /A
pregled pregled pregled G /G
G /A
a /a
ILI (98% CI)
P
kontrole pacijenata pregled muški pregled 171 pregled 12
1 pregled referenca pregled ženske Netlogu 112 pregled 10 pregled, 0
GC pacijenata
muški
169
23 pregled 1 pregled 1,97 (0,95-4,06)
0,067 pregled ženska pregled 68 pregled 7
0 pregled 1,17 (0,42-3,23) pregled 0.764
GC: rak želuca, CI: uvjeren interval pregled u dodatnim analizama, udruge između polimorfizma SEPS1 i kliničko obilježja karcinoma želuca, kao što su na mjesto tumora, stadiju, a Laurenov histološke klasifikacije, ocjenjuje se. Nosi -105 alela značajno je povezana s povećanim rizikom od crijevnih vrste raka želuca Laurenov (OR 1.99, 95% CI 1,01-3,93, p < 0,05) i raka želuca nalazi se u središnjem trećem dijelu želuca (OR : 2,01, 95% CI 1,03-3,92, p < 0,05) (tablica 4) .table 4 pridruživanju između SEPS1 polimorfizma i mjesto tumora, odmorišta i Laurenov klasifikaciji pregled varijable (n)
genotip
G /G u odnosu na G /A + A /A
pregled
G /G
G /A
a /a
ILI (95% CI)
P

Bolesnici bez GC (306) pregled, 283 pregled 22 pregled 1
Reference
tumora lokaciji
kardija (5) pregled 5
0 pregled 0
1,93 (0,40-9,22)
0.411 pregled Non-kardija (263)
232 pregled 30
1 pregled 2.81 (0.69-11.48)
0,15 pregled gornjoj trećini ( 16)
14 pregled 2 pregled, 0 pregled ND pregled srednjoj trećini (134) pregled, 115
19 pregled, 0 pregled 2.01 (1.03-3.92) Netlogu 0.041 pregled Donja trećina (113) pregled, 103 pregled 9
1 pregled 1,18 (0,52-2,64)
0,696 pregled inscenacije pregled Rana (138) pregled 121
17
0 pregled 1,74 (0,88-3,47)
0.112
Advanced (130)
117 pregled 12
1 pregled 1.52 (0.74-3.12)
0,253 pregled Lauren je klasifikacija pregled crijevnoj tipa (151)
132 pregled 19
0 pregled 1.99 (1.01-3.93)
0,047 pregled tipa šire (110)
100 pregled 9
1 pregled 1,19 (0,54-2,63)
0.659
Mixed (7)
5
2
0
6,82 (1.07-43.65 )
0.043 pregled NAPOMENA: Svi podaci su prilagođeni za spol, dob, i H. pylori
status infekcije. ND: nije određeno, GC: rak želuca, CI: Uvjeren interval pregled Među 301 H. pylori pregled pozitivnih ispitanika, infiltracije neutrofila, infiltracijom mononuklearnih stanica, atrofije i metaplazije rezultate od antralnog sluznice nisu pokazale značajne razlike između -105 a alela prijevoznika i predmetima homozigota za G alel (podaci nisu prikazani). U kontrolnoj skupini nije bilo značajne genotipske razlike između bolesnika s čira na želucu, čir na dvanaestercu i gastritis (podaci nisu prikazani). Pregled Rasprava pregled U ovoj studiji japanskog stanovništva, pokazali smo po prvi put da je -105G aminokiselina, polimorfizam SEPS1 gena bila je povezana s povećanim rizikom od crijevnog tipa raka želuca i želučani rak koji se nalazi u srednjem trećem dijelu želuca. Iako je stanje niske selen je povezan s rizikom od humanog karcinoma želuca [18, 19], i visoke selena prehrane inhibira rast H. pylori
na zamorcima [20], klinička ispitivanja na ljudima nije se uspjelo pokazati korist za selena dodataka u prevenciji prekanceroznih lezija želuca [21]. -105G ≫ polimorfizam promotor, koji se nalazi u ER stresni odgovor element seps1 gena koji kodira za SEPS1, je snažno povezana s cirkulirajuće razine proupalnih citokina, kao što su IL-1b, IL-6 i TNF a, i s SEPS1 razine ekspresije gena u ljudi [9]. Fenotipske Posljedice ove -105G > polimorfizam su istraživani u nekim bolestima povezanih s kroničnom upalom [11-14]. Rezultati su bili nedosljedni. Jedno istraživanje u finskoj skupini pokazali odnos druge SEPS1 SNP i koronarne bolesti srca ili ishemijskog moždanog udara događaja [11], a jednom izvješću u velikom norveškom case-control skupini pokazali A alel SEPS1-105G > polimorfizam je značajan faktor rizika za preeklampsije [12]. S druge strane, izvještaj u Njemačkoj pokazala žila-105 g > polimorfizam nije bila povezana s IBD osjetljivosti i ne doprinosi određenom fenotipa bolesti ili povećane razine TNF-alfa u IBD bolesnika [13]. Također jedan izvješće pokazalo nisu značajne razlike u SEPS1 učestalosti alela između mladih bolesnika s moždanim udarom i zdravih kontrola iz Italije i Njemačke [14]
U našoj studiji nije bilo udruga u ukupnom poretku između -105G >. A varijantu i raka želuca. Međutim, u detaljnom kliničkopatološkim analizi, našli smo značajnu povezanost između nosi alel A i izgledi za određene vrste raka želuca, uz prilagodbe za dob, spol, i H. pylori
status infekcije. Imamo 74 zdravu volonterski DNA (svi su H. pylori
negativan). Ispitali smo DNK o SEPS1 polimorfizma -105G > a. Kao rezultat toga, broj GG bile 70, broj GA bile 4 i nitko od njih nije bio AA. Iz ovih rezultata, mislili smo da je naša usporedba između pacijenata oboljelih od raka želuca i ne bolesnika s karcinomom želuca bila ispravna usporedba za analizu rizika Udruge raka želuca i SEPS1 polimorfizma osim u organizaciji H. pylori
.
Kancerogeni put za crijevni oblik raka želuca uglavnom uključuje H. pylori pregled infekcije. Infekcija uzrokuje regeneraciju upalu i tkiva, a ti procesi uzrokuju odstupanje od normalnog puta želučane diferencijacije do prekanceroznih stanja [4, 22]. Predloženo je da polimorfizam SEPS1 mogu biti uključeni u putu od kronične želučane upale na karcinogeneze. Međutim, AA genotipa je vrlo rijetka u japanskoj populaciji, a time i čvrsti zaključci o genotip fenotipskih korelacija homozigota nosača ovog polimorfizma SEPS1 promotora može izvući samo iz većih studija koje uključuju višestruke bolničkim centrima.
Kod muškaraca su SEPS1 -105A alela nositelji povećao izglede za rak želuca, u usporedbi s onima s GG genotipom. Tu je jedan izvještaj sa rodno specifične udruge polimorfizma SEPS1 s koronarnom bolesti srca [11]. Autori studije otkrili odnose između polimorfizma u drugoj regiji gena SEPS1 i rizika od koronarne bolesti srca u žena. Oni su osumnjičeni da su udruge rodno specifična s SEPS1 SNP su zbog razlika u etiologiji bolesti ili u hormonskog okruženja za muškarce i žene [11]. U epidemiološkim studijama, spol također je povezana s rakom želuca [23, 24]. Ovi epidemiološki su rezultati u skladu s rodno specifične povezanosti između -105G > polimorfizma i raka želuca
Na temelju izvješća o posljedicama oslabljen izražavanja SEPS1 gena i od SEPS1 -105G > a. Polimorfizam bude funkcionalno uključenih u upalni odgovori [9], mi i dalje procjenjuje gastritis rezultate u ne-kancerogene područja antruma u H. pylori pozitivnih bolesnika. Međutim, nismo pronašli značajne razlike između SEPS1 -105GG homozigoti i -105A alela prijevoznika (podaci nisu prikazani). Moguće je da je broj slučajeva za analize bili su relativno niski. Također, ovo ispitivanje nije izravna usporedba upalnih citokina od genotipova ovog polimorfizma koji kao što je prikazano u literaturi [9]. Dakle, točnu uloga selenoproteins u želučanom karcinogeneze i upale još nije određen. Raniji izvještaji su otkrili povezanost između citokina i rakom želuca [15, 25]. U budućim istraživanjima, analiza tih upalnih citokina u rak želuca će biti korisno za razumijevanje mehanizama karcinogeneze u želucu pregled Zaključak
U zaključku, nosi A alel na SEPS1 -105G > a. Polimorfizam je faktor rizika za crijevne vrstu raka želuca i raka želuca se nalazi u srednjoj trećini želuca u japanskoj populaciji. A alel možda pridonosi raka želuca utjecajem na upalni odgovor na H. pylori pregled infekcije u želucu. Daljnja istraživanja u većim skupinama od raka želuca može biti potrebno ispitati stvarnu ulogu SEPS1 i važnih implikacija genetskih preinaka na selenoproteins u kroničnim upalnim bolestima i karcinogeneze u želucu.
Izjavama
Zahvale pregled smo hvala svima medicinskog osoblja na endoskopiju jedinice u Fujita University Health bolnice za uzimanje uzoraka, i zahvaljujemo gospođi Y. Kimura za znanstvenog ulaz.
ovaj rad je podržan, djelomično, o potpori-u-Aid za 21. stoljeće centar izvrsnosti programa Fujita zdravstvo Sveučilišta iz Ministarstva obrazovanja, kulture, športa, znanosti i tehnologije Japana.
suprotstavljenih interesa
autori izjavljuju da nemaju konkurentne interese. pregled

• Primjena Weibullove model za preživljavanje pacijenata s rakom želuca
• Suživot gastrointestinalnog tumora strome i upalni miofibroblastični tumor želuca prezentira kao tumor sudara: prvi prikaz slučaja i pregled literature