Selenoprotein S (SEPS1) geeni -105G > Promoottori polymorfismi vaikuttaa alttiuteen mahalaukun syövän Japanin väestö

Selenoprotein S (SEPS1) geeni -105G > Promoottori polymorfismi vaikuttaa alttiuteen mahalaukun syövän Japanin väestöstä
tiivistelmä
tausta
Tulehdus on keskeinen tekijä prosessissa syövän kroonisesta gastriitti aiheuttama Helicobacter pylori
. Selenoprotein S (SEPS1) on mukana valvontaan tulehdusvasteen endoplasmakalvostossa (ER). Äskettäin -105G > polymorfismi promoottori SEPS1 havaittiin lisäävän pro-inflammatoristen sytokiinien ilmentymistä. Tutkimme yhdistyksen välinen polymorfismin ja mahalaukun syövän riski. Tool Menetelmät
Otimme vatsa koepaloja aikana endoscopies 268 Japani mahasyöpäpotilaista (193 urosta ja 75 naarasta, keskimääräinen ikä 65,3), ja 306 verrokeilla ( 184 urosta ja 122 naarasta, keskimääräinen ikä 62,7) ja uutetaan DNA: n biopsianäytteistä. Kaikki koehenkilöt edellyttäen kirjallinen lupa. Sillä genotyypitys SEPS1 promoottorin polymorfismi asemassa -105G > A, PCR-RFLP menetelmiä käytettiin ja PCR-tuotteet digestoitiin PspGI.
Logistinen-regressioanalyysiä käytettiin arvioitaessa kertoimet suhde (OR) ja 95%: n luottamusväli (IC), säätämisen ikä, sukupuoli, ja helikobakteeri
tartunnan tilan.
tulokset
joukossa tapauksia, jakelu genotyyppien oli seuraava: 88,4% oli GG, 11,2% oli GA, ja 0,4% oli AA. Kontrollien joukossa, jakauma oli seuraava: 92,5% oli GG, 7,2%: lla GA, ja 0,3% oli AA. Miehillä, kuljettaa A alleeli liittyy lisääntynyt kertoimella mahasyövän verrattuna GG genotyypin (OR: 2,0, 95% CI 1,0-4,1, p = 0,07). Verrattuna GG genotyypin kantaen A-alleelin merkitsevästi liittyy lisääntynyt riski suolen tyyppiä mahasyövän (OR: 2,0, 95% CI 1,0-3,9, p < 0,05) sekä mahasyövän sijaitsee keskellä kolmanneksen vatsaan (OR: 2,0, 95% CI 1,0-3,9, p < 0,05).
Päätelmä
-105G > promoottori polymorfismi SEPS1 liittyi suolen tyypin mahasyöpä. Tämä polymorfismi voi vaikuttaa tulehdustiloja mahalaukun limakalvon. Suurempi väestöpohjainen tutkimuksia tarvitaan selventää suhde tulehdusreaktioita ja SEPS1 polymorfismi.
Tausta
Mahalaukun syöpä on edelleen huomattava kansanterveysongelma maailmanlaajuisesti. Vaikka ilmaantuvuus ja kuolleisuus mahasyövän ovat vähentyneet asteittain, mahasyöpä on toinen vain keuhkosyövän kuin suurin syy syövän kuolemaan ympäri maailmaa [1, 2]. Helicobacter pylori
(H. pylori
) nimettiin taudinaiheuttajien varten mahasyövän [3]. Tulehdus voi olla keskeinen tekijä prosessissa syövän kroonisesta gastriitti aiheuttama helikobakteerin
[4]. Kuitenkin vain pieni määrä tartunnan saaneiden potilaiden todella mahalaukun syöpä. Tämä viittaa siihen, että isäntä geneettiset tekijät, kuten geenejä, jotka liittyvät tulehdusreaktioita, voi myös olla tärkeä rooli mahan karsinogeneesissä.
Selenoprotein S (SEPS1, joka tunnetaan myös nimellä lissä, SELENOS, VIMP) on uusi selenoprotein sijaitsee solulimakalvostossa retikulumissa (ER) ja solukalvon. Se on mukana valvonnassa tulehdusreaktio ER [5].
SEPS1 suojaa soluja oksidatiivista vaurioita ja apoptoosin, ja ilmentyy laajalti erilaisissa kudoksissa [6-8].
Äskettäin - 105g > promoottori polymorfismi SEPS1 osoitettiin olevan voimakkaasti yhteydessä plasman pro-inflammatoristen sytokiinien, kuten interleukiini 1 beeta (IL-1β), interleukiini-6 (IL-6) ja tuumorinekroositekijä-alfa (TNF-α) . -105G ≫ Promoottori polymorfismi SEPS1 voi vaikuttaa SEPS1 mRNA [9]. Korvaaminen A alleeli G-alleelin asemassa -105 vähensi promoottorin aktiivisuutta HepG2-soluissa [10].
Kun raportti on polymorfismin SEPS1 promoottorialueen, jotkut kliiniset tutkimukset ovat osoittaneet assosiaatioita SEPS1 polymorfismin sepelvaltimotauti ja iskeeminen aivohalvaus [11] ja preeclampsia [12], kun taas muut tutkimukset eivät ilmoittaneet assosiaatioita tämä muunnos on tulehduksellinen suolistosairaus [13] tai aivoverisuonisairaus [14].
kuitenkin assosiaatio -105G > promoottori polymorfismi SEPS1 ja mahalaukun syövän riskiä ei ole vielä tutkittu.
IL-1β tasot on liitetty mahalaukun syöpä [15], ja koska SEPS1 polymorfismi vaikuttaa tasoja IL-1β, The SEPS1 polymorfismi voi olla tärkeä geneettinen tekijä mahalaukun syövän syntyyn.
tässä tapauskontrollitutkimuksessa, selvitimme assosiaatioita SEPS1 promoottorin polymorfismi ja sekä mahasyövän riskin ja tulehdusvasteet mahalaukun limakalvon mitattuna maha- biopsianäytteissä . Tool menetelmät
potilaiden ja verrokkien
tutkimuksessa oli mukana potilaita, jotka saivat ruoansulatuskanavan yläosan tähystykseen klo Fujita Health University Hospital Japanissa. Peräkkäin Koehenkilöiden seulottiin mahalaukun syövän ruoansulatuskanavan yläosan tähystykseen seuraa barium röntgentutkimuksen. Tapaukset olivat 268 Japani potilasta (193 urosta, 75 naarasta, keskimääräinen ikä 65,3 ± 12,0 vuotta), joilla oli diagnosoitu primaarinen mahasyövän ja valvonta olivat 306 henkilöä (184 urosta, 122 naista) ei mahasyöpä joka tehtiin myös ruoansulatuskanavan yläosan tähystykseen. Mahalaukun syöpä oli diagnosoitu histologisesti Patologian osasto meidän sairaalassa, ja syövät luokiteltiin mukaan Lauren n luokitus [16]. Syöpä lavastus ja anatomiset sijaintitietoja saatiin myös. Potilaat, joilla on systeemisiä sairauksia ja pahanlaatuisia kasvaimia muissa elimissä, tai jotka olivat saaneet steroideihin kuulumattomien tulehduskipulääkkeiden suljettiin pois.
Eettinen komitea School of Medicine Fujita Health University hyväksyi protokollan. Kirjallinen suostumus saatiin jokaisen tutkimuksen osallistuja.
Histologinen tutkimus ja DNA Extraction
Mahalaukun koepalanäytteistä otettiin ei-syöpä limakalvon Antrumin ja suurempi kaarevuus vatsaan käyttäen ylemmän ruoansulatuskanavan laajuus. Jotkin osat kunkin yksilön kiinnitettiin 10% puskuroituun formaliiniin ja upotettiin parafiiniin, kun taas muut osat jäädytettiin välittömästi ja varastoitiin -80 ° C: ssa, kunnes DNA: n uuttaminen. Kaikki histologiset diagnoosit tehtiin Division of Pathology meidän sairaalassa. Vakavuus krooninen gastriitti luokiteltiin patologi, joka ei ole pääsyä mihinkään kliinisiä tietoja, mukaan päivitetty Sydney järjestelmä [17] kunkin tekijän pisteytystä 0 (normaali) 3 (merkitty).
Genomista DNA uutettiin tallennetaan näytteitä -80 ° C: ssa käyttäen proteinaasi K ja DNA: n eristämiseksi sarjat (Qiagen, Valencia, CA).
polymorfismi Analyysi SEPS1 Gene
genotyyppi SEPS1 promoottorialueen asemassa -105 määritettiin käyttämällä PCR-pohjainen restriktiofragmenttien pituuspolymorfiaa (PCR-RFLP). Käytimme alukkeita, jotka olivat SEPS1 (-105) polymorfia-alueella. Sen jälkeen, tunnistaminen tehtiin sen jälkeen, kun PCR-monistuksen, käyttäen seuraavia alukkeita 5'-AAATCCGTGAACGAGGTCCG-3'and 5'-GAGCAACTAATCTGAATCAGG-3 '. PCR suoritettiin 0,1 ug genomista DNA: n tilavuudessa 20 ui. DNA denaturoitiin 94 ° C: ssa 5 minuutin ajan, mitä seurasi 35 sykliä 94 ° C: ssa 20 sekunnin ajan, 53 ° C: ssa 20 sekunnin ajan ja 72 ° C: ssa 40 sekunnin ajan, ja lopullinen pidennys 72 ° C: ssa 7 minuutin ajan . PCR-reaktiot suoritettiin käyttäen Blend Taq (Toyobo Co., Ltd., Osaka, Japani). Monistetut PCR-tuotteet digestoitiin yön yli 5 yksiköllä PspGI (New England BioLabs, Inc., Beverly, MA, USA) 75 ° C: ssa. Sen jälkeen hajotetut tuotteet analysoitiin 3% agaroosigeeleillä. Nämä geelit värjättiin etidiumbromidilla (0,5 ug /ml), ja genotyypit määritettiin analysoimalla eri taajuusalueilla. Kun läsnä on PspGI sivusto osoitetaan katkaisulla 324 bp monistettu tuote, jolloin saadaan fragmentteja, 179 ja 145 bp. Genotyypin varmistettiin suoralla sekvensoinnilla muutamassa satunnaisesti valitut näytteet.
Toteaminen helikobakteeri
Helikobakteeri
positiivisuus määritettiin mikroskooppitutkimuksella, ureahengitystestiä tai seerumin anti-HP-vasta-ainetiitterit. Infektio oli diagnosoitu, kun vähintään yksi näistä testeistä oli positiivinen.
Tilastollinen analyysi
Hardy-Weinberg tasapaino SEPS1 geenin alleelin kontrolleissa ja mahasyövän potilaita arvioitiin χ 2 tilastoja. Kliiniset ominaisuudet potilaiden välillä tai ilman mahalaukun syövän, ja erot gastriitti tulokset A: n kantajia ja G /G tutkittiin jonka U-testi. Logistinen-regressioanalyysi käytettiin arvioitaessa kertoimet suhde (OR) ja 95% luottamusvälit (CI) genotyyppejä, jossa säätö ikä, sukupuoli, ja helikobakteeri
infektion tila. P-arvo < 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
ominaisuudet aiheiden
ominaisuudet tapausten ja kontrollien on koottu taulukkoon 1. helikobakteeri
infektion ja ikä olivat korkeampia mahasyövän potilailla kuin (p < 0,05) .table 1 Ominaisuudet aiheista

GC
Controls
P

määrä
268
306
urokset /naaraat
193/75
184/122
NS
keski-ikä (± SD)
65,3 ± 12,0
62,7 ± 13,2
< 0.05A
HP positiivinen korko (%) B 86,2
68,0
< 0.05A
GC: mahasyövän, HP: Helicobacter pylori
kaasukromatografiaan vs. Controls, U-testi.
Tärkeimmät endoskooppinen havainnot kontrolliryhmässä olivat: mahahaavan 68 potilaalla ( 22,2%), pohjukaissuolihaava 35 (11,4%), maha- ja pohjukaissuolihaava 5 (1,7%), ja gastriitti 198 (64,7%).
jakautuminen SEPS1 genotyyppien
taulukossa 2 genotyyppi taajuudet of SEPS1 potilailla, joilla on mahalaukun syövän ja kontrolliryhmään. Polymorfismia asemassa -105 of SEPS1 oli kirjoitettu kaikissa 574 aiheita. Niistä tapauksista, jakelu genotyyppien oli seuraava: 88,4% oli GG, 11,2% oli GA, ja 0,4% oli AA. Kontrollien joukossa, jakauma oli seuraava: 92,5% oli GG, 7,2%: lla GA, ja 0,3% oli AA (taulukko 2). Taajuus SEPS1 polymorfismin kontrolleissa ja mahasyövän potilaat eivät poikkea merkittävästi siitä, odottaa syntyvän Hardy-Weinberg tasapaino (p = 0,42, 0,96 vastaavasti). Miehillä, verrattuna GG genotyypin genotyypit GA: n ja AA yhdistettynä liittyi lisääntynyt kertoimella mahasyövän (OR 1,97, 95% luottamusväli 0,95-4,06, p = 0,067; taulukko 3) .table 2 SEPS1 polymorfismia ja GC riski
genotyyppien
potilaalla on GC
n (%)
verrokeilla
n (% )
OR (95% CI)
P
G /G
237 (88,4) B 283 (92,5) B viite
G /A
30 (11,2)
22 (7,2) B 1,66 (0,91-3,01) B 0,097
A /A
1 (0,4) B-1 (0.3) B 0,77 (,05-+12,44) B 0,852
G /A + A /A
31
23
1,61 (0,90-2,89) B 0,112
GC: mahasyöpä, CI: luottavainen väli
Taulukko 3 välisestä assosiaatiosta SEPS1 polymorfismin ja sukupuoli


genotyyppi
G /G vs. G /A + A /A



G /G
G /A
A /A
OR (98% CI)
P
Kontrollipotilaat
mies
171
12
1
viittaus
female
112
10
0
GC potilaiden
uros
169
23
1
1,97 (0,95-4,06)
0,067
female
68
7
0
1,17 (0,42-3,23) B 0,764
GC: mahasyövän, CI: luottavainen väli
lisämäärityksistä, yhdistysten välillä SEPS1 polymorfismin ja viittaavia tekijöitä mahalaukun syövän, kuten kasvaimen sijainti, vaihe, ja Lauren n histologista luokitusta, arvioitiin. Kirjanpitoarvo -105 alleelin merkitsevästi liittyy lisääntynyt riski Laurenin suoliston tyyppinen mahasyöpä (OR: 1,99, 95% luottamusväli 1,01-3,93, p < 0,05) ja mahalaukun syövän sijaitsee keskellä kolmannessa osassa mahalaukkua (OR : 2,01, 95% luottamusväli 1,03-3,92, p < 0,05) (taulukko 4) .table 4 Association välillä SEPS1 polymorfismin ja kasvaimen sijainti, lavastus ja Lauren luokittelun
muuttujat (n)
genotyyppi
G /G vs. G /A + A /A


G /G
G /A
A /A
OR (95% CI)
P

Potilaat ilman GC (306) B 283
22
1
Viite
Kasvain sijainti
Cardia (5) B 5
0
0
1,93 (0,40-9,22)
0,411
Non-cardia (263) B 232
30
1
2,81 (,69-+11,48) B 0,15
Ylä kolmas ( 16) B-14
2
0
ND
Lähi kolmas (134) B 115
19
0
2,01 (1,03-3,92) B 0,041
Ala kolmas (113) B 103
9
1
1,18 (0,52-2,64)
0,696
Staging
Aikaisin (138) B 121
17
0
1,74 (0,88-3,47)
0,112
Advanced (130) B 117
12
1
1,52 (0,74-3,12)
0,253
Lauren luokittelun
Suoliston tyyppi (151) B 132
19
0
1,99 (1,01-3,93) B 0,047
Diffuusi tyyppi (110)
100
9
1
1,19 (0,54-2,63)
0,659
Mixed (7) B 5
2
0
6,82 (1,07-43,65 )
0,043
HUOMAUTUS: Kaikki tiedot on oikaistu sukupuolen, iän, ja helikobakteeri
infektion tila. ND: ei määritetty, GC: mahasyöpä, CI: luottavainen väli
Niistä 301 helikobakteeri
-positiivinen henkilöillä neutrofiilien infiltraatio, mononukleaaristen solujen tunkeutumisen surkastumista ja metaplasiaa tulokset on antral limakalvon ei ilmennyt merkittäviä eroja välillä -105 alleelin kantajia ja jotka olivat homotsygoottisia G-alleelin (tuloksia ei ole esitetty). Kontrollien joukossa, ei ollut merkittäviä genotyyppi eroja mahahaava-, pohjukaissuolihaava, ja gastriitti (tietoja ei esitetty).
Keskustelu
Tässä tutkimuksessa on japanilainen väestöstä, olemme osoittaneet ensimmäistä kertaa, että -105G > polymorfismi SEPS1 geeni liittyy lisääntynyt riski suolen tyyppiä mahasyövän ja mahasyövän sijaitsee keskellä kolmannessa osassa mahalaukkua. Vaikka alhainen seleeniä asema on liitetty vaaraa ihmisen mahasyövän [18, 19], ja korkea seleeni ruokavalio estää kasvun H. pylori
marsuille [20], ihmisen kliiniset kokeet eivät ole osoittaneet etuutta seleeni täydennykset ehkäisyssä precancerous mahavaurioita [21]. -105G ≫ Promoottori polymorfismi, joka sijaitsee ER-stressi vaste-elementti on seps1 koodaavan geenin SEPS1, oli voimakkaasti yhteydessä verenkierrossa pro-inflammatoristen sytokiinien, kuten IL-1 b, IL-6, ja TNF- a, ja SEPS1 geeni-ilmentymisen tasoja ihmisissä [9]. Fenotyypin seuraukset -105G > polymorfismi on tutkittu joissakin liittyvien sairauksien krooninen tulehdus [11-14]. Tulokset ovat olleet ristiriitaisia. Eräs tutkimus Suomen kohortin osoitti suhteessa muiden SEPS1 SNP ja sepelvaltimotauti tai aivoinfarkti tapahtumaa [11], ja yksi raportti suuressa Norja tapaus-verrokki kohortti osoitti A alleelin SEPS1-105G > polymorfismi on merkittävä riskitekijä preeclampsia [12]. Toisaalta, yksi raportti Saksassa osoitti SELS-105g > polymorfismi ei liittynyt IBD alttiuteen ja ei vaikuttanut tietyn taudin fenotyypin tai lisääntynyt TNF-alfa tasot IBD potilailla [13]. Myös yksi raportti osoitti ei-merkitseviä eroja of SEPS1 alleelifrekvenssit välillä nuorten aivohalvauspotilailla ja terveiden verrokkien Italiasta ja Saksasta [14].
Tutkimuksessamme ei ollut yhdistyksen yleinen välillä -105G > Muunnos ja mahasyövän. Kuitenkin yksityiskohtainen kliinis analyysi, huomasimme merkittäviä assosiaatioita kuljettaa A-alleelin ja kertoimet tietyntyyppisten mahasyövän, jossa säätö ikä, sukupuoli, ja helikobakteeri
infektion tila. Meillä on 74 terveillä vapaaehtoisilla DNA (kaikki ovat H. pylori
negatiivinen). Tutkimme näitä DNA noin SEPS1 polymorfismin -105G >. Tämän seurauksena, numerot GG olivat 70, numerot GA olivat 4 ja yksikään niistä ei ollut AA. Näistä tuloksista, ajattelimme meidän vertailu mahasyöpäpotilaista ja muiden mahasyöpäpotilaista oli asianmukainen vertailu analysoimiseksi yhdistyksen mahalaukun syövän riski ja SEPS1 polymorfismi muut kuin yhdistyksen helikobakteeri
.
Karsinogeenisia reitti suoliston tyyppi mahasyövän on lähinnä helikobakteeri
infektio. Infektio aiheuttaa tulehduksen ja kudosten uudistumista, ja nämä prosessit aiheuttavat poikkeama normaalista koulutusjakson mahalaukun eriyttäminen Syövän välillä [4, 22]. On ehdotettu, että SEPS1 polymorfismi voi olla mukana koulutusjakson kroonisesta mahalaukun tulehdus karsinogeneesiin. Kuitenkin AA genotyyppi on hyvin harvinaista Japanin väestö, ja siten, lopullisia johtopäätöksiä genotyyppi-fenotyyppi korrelaatioita Homotsygoottisen kantajilla SEPS1 promoottorin polymorfismi voidaan vetää suurempia tutkimuksia useita sairaalaan keskuksia.
Miesten keskuudessa, SEPS1 -105A alleelin kantajia oli kasvanut kertoimella mahasyövän verrattuna kanssa GG genotyypin. On yksi raportti osoittaa sukupuoleen liittyviä yhdistysten SEPS1 polymorfismi on sepelvaltimotauti [11]. Laatijat tutkimuksessa todettiin suhteiden polymorfia toisella alueella SEPS1 geenin ja sepelvaltimotaudin riskiä naisilla. He epäilivät, että sukupuoleen liittyviä assosiaatioita SEPS1 SNP johtuivat eroista taudin etiologian tai hormonialtistuksessa miesten ja naisten [11]. Epidemiologisissa tutkimuksissa, sukupuoli on myös liittyvät mahasyövän [23, 24]. Nämä epidemiologiset havainnot ovat sopusoinnussa sukupuoleen assosiaatio -105G > polymorfismi ja mahasyövän.
Raporttien perusteella seurausten heikentynyt SEPS1 geeniekspression ja SEPS1 -105G > polymorfismi toiminnallisesti mukana tulehduksellinen vasteet [9], me edelleen arvioidaan gastriitti tulokset on ei-syöpä alueilla antrum H. pylori potilailla. Kuitenkin emme löytäneet merkittäviä eroja SEPS1 -105GG homotsygoottisia ja -105A alleelin kantajia (tuloksia ei ole esitetty). On mahdollista, että tapausten määrä tämän analyysin olivat suhteellisen alhaiset. Myös tässä tutkimuksessa ei ollut suoraa vertailua tulehduksellisten sytokiinien tasoa genotyypit tämän polymorfismin kuten on raportoitu kirjallisuudessa [9]. Siksi tarkka rooli selenoproteins on mahasyövän ja tulehdusta ei ole vielä määritetty. Aiemmat raportit ovat havainneet yhdistysten välillä sytokiinien ja mahasyövän [15, 25]. Jatkossa tutkimuksissa analyysi näistä tulehduksellisten sytokiinien mahasyövässä on hyötyä ymmärtämään mekanismeja syövän vatsassa.
Päätelmä
Lopuksi kuljettaa A alleeli on SEPS1 -105G > polymorfismi on riskitekijä suolen tyyppiä mahasyövän ja mahasyövän sijaitsee keskellä kolmannes mahan on japanilainen väestöstä. A-alleelin voidaan edistää mahalaukun syöpä vaikuttamalla tulehdusreaktiota H. pylori
-infektio mahassa. Lisätutkimukset suuremmissa ikäluokat mahasyövän voidaan tarvita tutkia todellista asemaa SEPS1 ja merkittäviä vaikutuksia geneettisen korjauksilla selenoproteins vuonna krooninen tulehduksellinen vastauksia ja syövän syntymistä vatsassa.
Julistukset
Kiitokset
Me kiittää kaikkia hoitohenkilökunta on tähystys yksikössä Fujita Health University Hospital näytteiden ottamisesta, ja kiitämme Ms Y. Kimura hänen tieteellisen tiedon.
Tätä työtä tuki, osittain Grant-in-Aid for the 21st Century Center of Excellence Program Fujita Health University opetus-, kulttuuri-, urheilu-, tiede-, and Technology of Japan.
kilpailevat edut
kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia intressejä.

• Soveltaminen Weibull malli selviytymisen potilaiden mahalaukun cancer
• Rinnakkaiselo ruuansulatuskanavan tukikudosten kasvain ja tulehduksellinen myofibroblastic kasvain mahassa esittää mahdollisimman törmäyksessä kasvain: ensimmäisessä tapauksessa raportti ja kir…