Szelén-protein S (SEPS1) gén -105G > A promoter polimorfizmus befolyásolja a fogékonyság gyomorrák a japán population

szeleno-protein S (SEPS1) gén -105G > A promoter polimorfizmus befolyásolja a fogékonyság gyomorrák a japán népesség
Abstract
Háttér katalógusa gyulladás kulcstényező az karcinogene- a krónikus gyomorhurut okozta Helicobacter pylori katalógusa. Szelén-protein S (SEPS1) részt vesz a kontroll a gyulladásos válasz az endoplazmatikus retikulumban (ER). A közelmúltban a -105G > A polimorfizmus a promóter SEPS1 bemutattuk, hogy növeli a pro-gyulladásos citokin expressziót. Megvizsgáltuk a szövetség között ez a polimorfizmus és a kockázat a gyomorrák. Katalógusa Módszerek katalógusa Vettünk gyomor biopszia során endoszkópos 268 japán gyomorrákos betegek (193 férfi és 75 nő, átlagéletkor 65,3), és 306 a kontrollcsoportban ( 184 férfi és 122 nő, átlagéletkor 62,7), és kivontuk a DNS-t a biopsziás minták. Minden alany írásos beleegyezését adta. A genotipizálás A SEPS1 promoter polimorfizmus pozíciójában -105G > A, PCR-RFLP módszereket használtunk, és a PCR-termékeket emésztjük, PspGI.
Logisztikus regressziós analízist alkalmaztunk becslésére esélyhányados (OR) és a 95% -os konfidencia intervallumok (CI), az életkor, a nem, és a H. pylori fertőzés katalógusa állapotát. katalógusa Eredmények
esetek között, a genotípusok megoszlása ​​a következő volt: 88,4% volt GG, 11,2% volt GA, és 0,4% volt AA. Közül kontrollok, az eloszlás a következő volt: 92,5% volt GG, 7,2% volt, GA, és 0,3% volt az AA. Férfiak között, melyen az A allél fokozott esélye gyomorrák, míg a GG genotípus (OR: 2,0, 95% CI 1,0-4,1, p = 0,07). Összehasonlítva a GG genotípus, melyen az A allél szignifikánsan összefüggött a fokozott kockázatát intesztinális típusú gyomorrák (OR: 2,0, 95% CI 1,0-3,9, p < 0,05), valamint a gyomorrák található a középső harmadában a gyomor (OR: 2,0, 95% CI 1,0-3,9, p < 0,05).
Következtetés
-105G > a promoter polimorfizmusának SEPS1 járt a bél típusú gyomorrák. Ez a polimorfizmus befolyásolhatja a gyulladásos állapot a gyomor nyálkahártyáját. Nagyobb populáció alapú vizsgálatok szükségesek annak tisztázására viszonyának gyulladásos reakciók és SEPS1 polimorfizmus. Katalógusa Háttér katalógusa Gyomorrák továbbra is jelentős népegészségügyi problémát jelent világszerte. Bár az előfordulási és halálozási aránya a gyomorrák csökkent fokozatosan, gyomorrák a második csak a tüdőrák, mint a vezető daganatos halálok világszerte [1, 2]. Helicobacter pylori katalógusa (H. pylori katalógusa) jelölték a kórokozó gyomor carcinogenesis [3]. A gyulladás lehet kulcsfontosságú tényező a karcinogene- a krónikus gyomorhurut által kiváltott H. pylori katalógusa [4]. Azonban csak egy kis számú fertőzött betegek ténylegesen fejleszteni gyomorrák. Ez azt sugallja, hogy a befogadó genetikai tényezők, mint például a gének járó gyulladásos válaszokat, szintén fontos szerepet játszanak a gyomor karcinogenezis.
Szelén S (SEPS1, más néven Sels, SELENOS, VIMP) egy újszerű szelenoprotein található az endoplazmatikus retikulumban (ER) és a plazmamembrán. Ez szabályozásában részt vevő a gyulladásos válasz az ER [5].
SEPS1 védi a sejteket az oxidatív károsodás és az apoptózis, és széles körben kifejezve a különböző szövetekben [6-8].
Közelmúltban, a - 105G > a promoter polimorfizmusának SEPS1 kimutatták, hogy szoros kapcsolatban áll a plazma szintek proinflammatorikus citokinek, mint például interleukin-1-béta (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) és a tumor nekrózis faktor alfa (TNF-α) . A -105G > A promoter polimorfizmusának SEPS1 befolyásolhatja SEPS1 mRNS szinteket [9]. A helyettesítés az A allél a G allél pozícióban -105 csökkentette a promoter aktivitását a HepG2 sejtekben [10].
Miután a jelentés a polimorfizmus a SEPS1 promoter régió egyes klinikai vizsgálatok kimutatták közötti összefüggéseket SEPS1 polimorfizmus a koszorúér-betegség és az ischaemiás stroke [11] és a praeeclampsia [12], míg más tanulmányok nem számoltak egyesületek között ez a variáns gyulladásos bélbetegségben [13] vagy cerebrovascularis betegségben [14].
azonban a szövetség között a -105G > a promoter polimorfizmusának SEPS1 és a gyomorrák kockázatát még nem vizsgálták.
IL-1β szintek összefüggésbe hozták gyomorrák [15], és mivel a SEPS1 polimorfizmus befolyásolja az IL-1β, a SEPS1 polimorfizmus fontos genetikai tényező a gyomorrák kialakulásával.
Ebben az eset-kontroll tanulmányban megvizsgáltuk az egyesületek közötti SEPS1 promoter polimorfizmus és mind a gyomorrák kockázatát, és a gyulladásos választ gyomornyálkahártya mérve gyomor biopsziás mintákban .
módszerek katalógusa betegek és a kontrollok
betegekkel, akik a felső gastrointestinalis endoszkópia, a Fujita Health University Hospital Japánban. Egymás bevont alany átvizsgáljuk gyomorrák által a felső gasztrointesztinális endoszkópia majd bárium röntgen vizsgálat. Olyan esetek közül 268 japán beteg (193 férfi, 75 nő, átlagéletkor 65,3 ± 12,0 év), akiket diagnosztizált primer gyomorrák és kontrollok 306 fő (184 férfi, 122 nő) nélkül gyomorrák, aki szintén átesett a felső gasztrointesztinális endoszkópia. A gyomorrák diagnosztizáltak szövettanilag a Kórbonctani osztály a kórházban, és a rák sorolták szerint Lauren besorolását [16]. A rák stádium és az anatómiai helyére vonatkozó információt is kapunk. A szisztémás betegségek és rosszindulatú daganatok más szervek, illetve, akik kaptak a nem-szteroid gyulladáscsökkentő gyógyszerek kizárták.
Az Etikai Bizottság a School of Medicine Fujita Health University jóváhagyta a jegyzőkönyvet. Írásos beleegyezését adta az egyes vizsgálati résztvevőnek.
Szövettani vizsgálat és DNS extrakció katalógusa Gyomor biopsziás mintákat vettünk a nem rákos nyálkahártya az antrumban és a nagyobb görbület a gyomor, a felső gasztrointesztinális körét. Egyes részei minden mintából fixáltuk 10% -os pufferolt formalinnal és paraffinba ágyaztuk, míg a másik része azonnal lefagyasztottuk, és -80 ° C-on, amíg a DNS extrakció. Minden szövettani diagnózis került sor a Division of Pathology Kórházunk. A súlyossága krónikus gyomorhurut osztályozta patológus, aki nem férnek hozzá a klinikai adatok szerint a frissített Sydney rendszer [17] az egyes tényezők is szerezte 0 (normális) 3 (jelölt).
A genom DNS-t extraháltunk tárolt mintákban -80 ° C-proteináz-K és a DNS-extrakció kitek (Quiagen, Valencia, CA).
polimorfizmusa elemzése SEPS1 Gene
a genotípus a SEPS1 promoter régió pozíciójában -105 meghatároztuk PCR alapú restrikciós fragmens hossz polimorfizmus (PCR-RFLP). Mi használt primerek, amely tartalmazta a SEPS1 (-105) polimorfizmus területen. Ezt követően, az azonosító után végeztük PCR-amplifikáció, az alábbi primerek használatával 5'-AAATCCGTGAACGAGGTCCG-3'and 5'-GAGCAACTAATCTGAATCAGG-3 '. PCR-t végeztünk a 0,1 ng genomiális DNS-t 20 pl térfogatban. A DNS-t denaturáltuk 94 ° C-on 5 percig, majd 35 ciklusban 94 ° C 20 másodperc, 53 ° C-on 20 másodpercig és 72 ° C-on 40 másodpercig, a végső extenzió 72 ° C-on 7 percig . A PCR-reakciókat végeztünk Blend Taq (Toyobo Co., Ltd., Osaka, Japán). Az amplifikált PCR-termékeket emésztjük, egy éjszakán át 5 egység PspGI (New England Biolabs, Inc., Beverly, MA, USA) 75 ° C-on. Ezt követően, az emésztett termékeket elemeztük 3% -os agaróz gélen. Ezeket a géleket etidium-bromiddal festjük (0,5 ug /ml), és a genotípusokat analízis segítségével meghatározzuk a különböző sávok. Jelenléte PspGI helyszínen jelezte hasítása 324 bp amplifikált terméket, így darabjai 179 és 145 bp. Genotipizálás igazoltuk direkt szekvenálással néhány véletlenszerűen kiválasztott mintát.
Kimutatása a H. pylori
H. pylori
pozitivitás határoztuk meg mikroszkópos vizsgálat, karbamid kilégzési teszt, vagy a szérum anti-HP antitest titer. Fertőzést, ha legalább az egyik ilyen teszt pozitív volt. Katalógusa Statisztikai elemzés katalógusa Hardy-Weinberg a SEPS1 gén allél az ellenőrzések és gyomorrákos betegek értékelték χ 2 statisztikákat. Klinikai jellemzői közötti betegek vagy anélkül gyomorrák és különbségek gyomorhurut pontszámok között A fuvarozók és a G /G vizsgáltuk Mann-Whitney U teszt. Logisztikus regressziós analízist alkalmaztunk becslésére esélyhányados (OR) és a 95% -os konfidencia intervallum (CI) a genotípusok és az életkor, a nem, és a H. pylori fertőzés katalógusa állapotát. A p-érték < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Katalógusa eredményei katalógusa Jellemzői tárgyak katalógusa jellemzői az esetek ellenőrzések 1. táblázat foglalja össze a H. pylori fertőzés katalógusa és az életkor magasabb gyomorrákos betegek esetében, mint a (p < 0,05) .table 1 jellemzői tárgyak katalógusa katalógusa GC Matton Controls
P
Matton száma katalógusa 268 katalógusa 306 katalógusa férfiak /nők katalógusa 193/75 katalógusa 184/122 katalógusa NS katalógusa átlagéletkora (± SD)
65,3 ± 12,0 katalógusa 62,7 ± 13,2 katalógusa < 0.05a katalógusa HP pozitív arány (%) hotelben 86,2 katalógusa 68,0 katalógusa < 0.05a katalógusa GC: gyomorrák, HP: Helicobacter pylori Matton AGC vs. Controls, Mann-Whitney U teszt.
A fő endoszkópos lelet a kontroll csoport: gyomorfekély 68 beteg ( 22,2%), nyombélfekély 35 (11,4%), gyomor- és nyombélfekély, 5 (1,7%), és gastritis 198 (64,7%).
megoszlása ​​a SEPS1 genotípusok
2. táblázat mutatja a genotípus frekvenciák a SEPS1 betegeknél gyomorrák és a kontroll csoport. A polimorfizmus pozícióban -105 az SEPS1 begépelt minden 574 alanyok. Esetek között, a genotípusok eloszlását a következő volt: 88,4% volt GG, 11,2% volt GA, és 0,4% volt az AA. Közül kontrollok, az eloszlás a következő volt: 92,5% volt GG, 7,2% volt, GA, és 0,3% volt, AA (2. táblázat). A frekvencia SEPS1 polimorfizmus az ellenőrzések és gyomorrákos betegek nem térhet el jelentősen a várt alatt a Hardy-Weinberg egyensúly (p = 0,42, 0,96 -kal). Férfiak között, míg a GG genotípus, a genotípusok GA és AA kombinált járt megnövekedett esélye a gyomorrák (OR: 1,97, 95% CI 0,95-4,06, p = 0,067; 3. táblázat) .table 2 SEPS1 polimorfizmus és GC kockázat katalógusa genotípusok
betegek GC katalógusa n (%) Matton kontroll betegeknél katalógusa n (% ) Matton OR (95% CI) Matton P
G /G katalógusa 237 (88,4) hotelben 283 (92,5) hotelben hivatkozás
G /Egy fiatal 30 (11,2) hotelben 22 (7,2) hotelben 1,66 (0,91-3,01) hotelben 0,097 katalógusa A /Egy fiatal 1 (0,4) hotelben 1 (0.3) hotelben 0,77 (0,05-12,44) hotelben 0.852 katalógusa G /A + A /Egy fiatal 31 katalógusa 23 katalógusa 1,61 (0,90-2,89) hotelben 0,112 katalógusa GC: gyomorrák, CI: magabiztos intervallum katalógusa 3. táblázat közötti társulás SEPS1 polimorfizmus és a nemek katalógusa katalógusa katalógusa genotípus Matton G /G vs. G /A + A /A Matton katalógusa katalógusa katalógusa G /G Matton G /A Matton A /A Matton OR (98% CI) Matton P
Ellenőrző betegek
férfi
171 katalógusa 12 katalógusa 1 katalógusa referencia fiatal női katalógusa 112 katalógusa 10 katalógusa 0 katalógusa GC betegek katalógusa férfi katalógusa 169
23 katalógusa 1 katalógusa 1,97 (0,95-4,06) hotelben 0.067 fiatal női katalógusa 68 katalógusa 7 katalógusa 0 katalógusa 1,17 (0,42-3,23) hotelben 0,764
GC: gyomorrák, CI: magabiztos intervallum katalógusa a további elemzések, az egyesületek közötti SEPS1 polimorfizmus és klinikopatológiai jellemzői a gyomorrák, mint például a tumor helye, színpad, és Lauren szövettani osztályozás, értékeltük. Kezében egy -105 A allél szignifikánsan fokozott kockázatával jár a Lauren bél típusú gyomorrák (OR: 1,99, 95% CI 1,01-3,93, p < 0,05) és a gyomorrák található középső harmadában a gyomor egy részét (OR : 2,01, 95% CI 1,03-3,92, p < 0,05) (4. táblázat) .table 4 közötti társulás SEPS1 polimorfizmus és a tumor helye, staging és Lauren besorolás katalógusa változók (n) Matton genotípus Matton G /G vs. G /A + A /A Matton katalógusa
G /G Matton G /A Matton A /A Matton OR (95% CI) Matton P Matton
A betegek nélkül GC (306) hotelben 283 katalógusa 22 katalógusa 1 katalógusa Referencia katalógusa tumor helyét katalógusa Cardia (5) hotelben 5 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 1,93 (0,40-9,22) hotelben 0.411 katalógusa Non-cardia (263) hotelben 232 katalógusa 30 Pg: 1 katalógusa 2,81 (0,69-11,48) hotelben 0,15 katalógusa Felső harmadik ( 16) hotelben 14 katalógusa 2 | 0 katalógusa ND katalógusa közel egyharmada (134) hotelben 115 katalógusa 19 katalógusa 0 katalógusa 2,01 (1,03-3,92) hotelben 0,041 katalógusa Alsó harmadik (113) hotelben 103 katalógusa 9 katalógusa 1 katalógusa 1,18 (0,52-2,64) hotelben 0,696 katalógusa Staging katalógusa Early (138) hotelben 121
17 katalógusa 0 katalógusa 1,74 (0,88-3,47) hotelben 0,112 katalógusa Advanced (130) hotelben 117 katalógusa 12 Pg: 1 katalógusa 1,52 (0,74-3,12)
0,253 katalógusa Lauren besorolás katalógusa intestinalis típusú (151) hotelben 132 katalógusa 19 katalógusa 0 katalógusa 1,99 (1,01-3,93) hotelben 0,047 katalógusa diffúz típusú (110)
100 katalógusa 9 katalógusa 1 katalógusa 1,19 (0,54-2,63) hotelben 0.659 katalógusa Vegyes (7) hotelben 5 katalógusa 2 | 0 katalógusa 6,82 (1,07-43,65 ) hotelben 0,043 katalógusa Megjegyzés: Minden adat korrigált neme, kora, és a H. pylori fertőzés katalógusa állapotát. ND: nincs meghatározva, GC: gyomorrák, CI: magabiztos intervallum katalógusa közül 301 H. pylori-pozitív katalógusa egyénekben neutrofil infiltráció, mononukleáris sejtes beszűrődés, a sorvadás és a metaplasia pontszámok az antrális nyálkahártya nem mutatott szignifikáns különbséget között a -105 a allélt hordozók és alanyok homozigóta az G allél (az adatokat nem mutatjuk). Közül ellenőrzés, nem volt szignifikáns genotípus közötti különbségek a gyomorfekély, nyombélfekély, és gyomorhurut (adatokat nem mutatjuk).
Megbeszélés
Ebben a vizsgálatban egy japán népesség, már bizonyították először, hogy a a -105G > a polimorfizmusának SEPS1 gén fokozott kockázatával jár a bél típusú gyomorrák és gyomorrák található középső harmadában része a gyomor. Bár az alacsony szelén állapot összefüggésbe hozták kockázatának humán gyomorrák [18, 19], és a magas szelén diéta gátolja a növekedést a H. pylori katalógusa tengerimalacoknál [20], a humán klinikai vizsgálatok nem bizonyították egy előnyt szelén kiegészítők a megelőzés a rákmegelőző elváltozások gyomor [21]. A -105G > A promoter polimorfizmus található, amely egy ER stresszválasz eleme a seps1 kódoló gén SEPS1, erősen társított keringési szintje proinflammatorikus citokinek, például az IL-1b, IL-6 és TNF a, és SEPS1 génexpresszió szintjét emberekben [9]. A fenotípusos következményei ennek -105G > A polimorfizmus vizsgálták néhány kapcsolatos betegségek krónikus gyulladás [11-14]. Az eredmények ellentmondásosak. Egy tanulmány finn csoportban mutatta a kapcsolat más SEPS1 SNP-k és a szívkoszorúér-betegség, vagy ischaemiás stroke esetén [11], és egy cikk egy nagy norvég eset-kontroll csoportban mutatott allél a SEPS1-105G > A polimorfizmus szignifikáns kockázati tényező a praeeclampsia [12]. Másrészről, az egyik jelentés Németországban mutatta a SELS-105G > A polimorfizmus nem járt együtt IBD-érzékenység és nem járulnak hozzá egy adott betegség fenotípus vagy megnövekedett TNF-alfa-szinteket IBD-ben [13]. Szintén egy jelentés kimutatta, nem szignifikáns különbségeket SEPS1 allélgyakoriság közötti fiatal stroke betegek és egészséges kontroll Olaszország és Németország [14].
Vizsgálatunkban nem volt kapcsolat között összességében -105G > A variáns és gyomorrák. Azonban a részletes klinikopatológiai elemzés találtunk szignifikáns összefüggést hordozó allél és az esélye bizonyos típusú gyomorrák, a az életkor, a nem, és a H. pylori fertőzés katalógusa állapotát. Van 74 egészséges önkéntes DNS-t (mind a H. pylori
negatív). Megvizsgáltuk ezeket a DNS mintegy SEPS1 polimorfizmus -105G > A. Ennek eredményeként, a számok az GG voltak 70, a számok az GA 4 volt, és egyik sem volt AA. Ezekből az eredményekből azt gondoltuk mi összehasonlítását gyomorrákos betegek és a nem gyomorrákos betegek volt megfelelő összehasonlítást elemzésére egyesület kockázatát gyomorrák és SEPS1 polimorfizmus eltérő szövetség H. pylori katalógusa.
A rákkeltő útvonala a bél típusú gyomorrák elsősorban magában a H. pylori fertőzés katalógusa. A fertőzés gyulladást okoz, és a szövetek regenerálódását, és ezek a folyamatok hatására az eltérés a normál útvonal gyomortartalom differenciálódás rákmegelőző állapotok [4, 22]. Azt javasolta, hogy a SEPS1 polimorfizmus szerepe lehet az út a krónikus gyomor gyulladás kialakulásában. Azonban az AA genotípus nagyon ritka a japán népesség, és így határozott következtetéseket a genotípus-fenotípus összefüggések homozigóta hordozói ennek SEPS1 promoter polimorfizmus csak levonni nagyobb bevonásával végzett többszörös kórházi központok.
Férfiak között a SEPS1 -105A allélt hordozó nőtt esélye a gyomorrák képest a GG genotípus. Van egy jelentést, amely nemekre jellemző társulásai a SEPS1 polimorfizmus koszorúér-betegségben [11]. A szerzők a tanulmány megállapította közötti kapcsolatokat a polimorfizmus más régiójában SEPS1 gén és a szívkoszorúér-betegség kockázatát a nőknél. Azt gyanította, hogy a nem-specifikus társulások SEPS1 SNP voltak különbségek miatt a betegség etiológiája, illetve a hormonális férfiak és a nők [11]. Az epidemiológiai vizsgálatok nem is kapcsolódik gyomorrák [23, 24]. Ezek az epidemiológiai eredmények összhangban vannak a nem-specifikus összefüggés a -105G > A polimorfizmus és a gyomorrák.
A beszámolók alapján a következmények a károsodott SEPS1 génexpresszió és a SEPS1 -105G > A polimorfizmus, amely funkcionálisan részt vesz a gyulladásos válaszok [9], azt további értékelni gastritis pontszámokat a nem rákos területeken a antrum H. pylori pozitív betegekben. Ugyanakkor nem találtunk szignifikáns különbséget SEPS1 -105GG homozigóták és -105A allélt hordozók (nem közölt adatok). Lehetséges, hogy az esetek száma az elemzés viszonylag alacsony volt. Továbbá, ez a vizsgálat nem volt közvetlen összehasonlítását gyulladásos citokin szintek genotípusainak Ez a polimorfizmus amint leírták a szakirodalomban [9]. Ezért a pontos szerepe szelenoproteinek a gyomor carcinogenesis és a gyulladás még nem határozták meg. Korábbi beszámolók találtak összefüggést citokinek és gyomorrák [15, 25]. A további vizsgálatok, az elemzés ezen gyulladásos citokinek gyomorrákban hasznos lesz mechanizmusok megismerésével karcinogene- a gyomorban. Katalógusa Következtetés
Összefoglalva, hordozó allél a SEPS1 -105G > A polimorfizmus kockázati tényező a bél típusú gyomorrák és gyomorrák közepén található harmadik a gyomor egy japán populációban. Az A allél is hozzájárulhatnak a gyomorrák befolyásolásával gyulladásos válasz a H. pylori fertőzés katalógusa a gyomorban. További vizsgálatok a nagyobb korosztályok gyomorrák lehet szükség, hogy vizsgálja meg a tényleges szerepe SEPS1 és a fontos következményei genetikai eltérések a szelenoproteinek krónikus gyulladásos reakciók és karcinogenitás a gyomorban. Katalógusa nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa Mi köszönöm az összes orvosi személyzet az endoszkópia egység Fujita Health University Hospital mintavétel és köszönjük Ms. Kimura Y. neki tudományos input.
Ezt a munkát támogatja, részben egy Grant-in-Aid a 21. századi Kiválósági Központ Program Fujita Health University-re az Oktatási Minisztérium, Kulturális, Sport, Tudományos és Technológiai Japán.
Érdekütközés
a szerzők kijelentik, hogy nem ellentétes érdekek. katalógusa

• Alkalmazása Weibull modell betegek túlélési gyomorrák
• Együttélése emésztőrendszeri daganatok és gyulladásos fibroblast daganat a gyomor bemutató, mint egy ütközés tumor: az első esetben a jelentés és irodalmi áttekintés