Selenoprotein S (SEPS1) gen -105G > Un polimorfismo promotor influye en la susceptibilidad a cáncer gástrico en la población japonesa

Selenoprotein S (SEPS1) -105G gen > Un polimorfismo promotor influye en la susceptibilidad a cáncer gástrico en la población japonesa
Abstract
Antecedentes
La inflamación es un factor clave en el proceso de carcinogénesis de la gastritis crónica inducida por Helicobacter pylori
. Selenoprotein S (SEPS1) está implicada en el control de la respuesta inflamatoria en el retículo endoplasmático (ER). Recientemente, el -105G > se demostró Un polimorfismo en el promotor de SEPS1 para aumentar la expresión de citoquinas pro-inflamatorias. Se examinó la asociación entre este polimorfismo y el riesgo de cáncer gástrico.
Métodos
Nos tomamos biopsias de estómago durante endoscopias de 268 pacientes japoneses con cáncer gástrico (193 varones y 75 mujeres, con una media de edad 65,3), y 306 pacientes control ( 184 varones y 122 mujeres, media de edad 62,7) y se extrajo el ADN de las muestras de biopsia. Todos los sujetos dieron su consentimiento informado por escrito. Para la determinación del genotipo del polimorfismo promotor SEPS1 en la posición -105G > A, se utilizaron métodos de PCR-RFLP y los productos de la PCR fueron digeridos con PspGI se utilizó
análisis de regresión logística para estimar la odds ratio (OR) y de confianza del 95%. intervalos. (IC), ajustando por edad, sexo, y H. pylori
estado de infección
resultados Estar entre los casos, la distribución de los genotipos fue de la siguiente manera: el 88,4% eran GG, el 11,2% eran GA, y 0,4% eran AA. Entre los controles, la distribución fue la siguiente: 92,5% eran GG, 7,2% eran GA, y 0.3% eran AA. Entre los hombres, que llevan el alelo A se asoció con un aumento de las probabilidades de cáncer gástrico, en comparación con el genotipo GG (OR: 2,0; IC del 95%: 1,0 a 4,1; p = 0,07). En comparación con el genotipo GG, que lleva el alelo A se asoció significativamente con un mayor riesgo de cáncer gástrico de tipo intestinal (OR: 2,0; IC del 95%: 1,0 a 3,9, p < 0,05), así como de cáncer gástrico localizado en el tercio medio de el estómago (OR: 2,0, IC 1,0-3,9 95%, p < 0,05).
Conclusión Francia el -105G > Un polimorfismo promotor de SEPS1 se asoció con el tipo intestinal de cáncer gástrico. Este polimorfismo puede influir en las condiciones inflamatorias de la mucosa gástrica. Se necesitan estudios más amplios basados ​​en la población para aclarar la relación entre las respuestas inflamatorias y polimorfismo SEPS1.
Antecedentes
El cáncer gástrico sigue siendo un problema de salud pública en todo el mundo. Aunque las tasas de incidencia y mortalidad por cáncer gástrico han disminuido gradualmente, el cáncer gástrico es sólo superada por el cáncer de pulmón como la causa principal de muerte por cáncer en todo el mundo [1, 2]. Helicobacter pylori gratis (H. pylori
) fue designado como un patógeno causante de la carcinogénesis gástrica [3]. La inflamación puede ser un factor clave en el proceso de carcinogénesis de la gastritis crónica inducida por H. pylori
[4]. Sin embargo, sólo un pequeño número de pacientes infectados realmente desarrollar cáncer gástrico. Esto sugiere que los factores genéticos del huésped, tales como los genes asociados con respuestas inflamatorias, también pueden desempeñar un papel importante en la carcinogénesis de estómago.
Selenoprotein S (SEPS1, también conocido como SELs, Selenos, VIMP) es una novela selenoprotein situado en el endoplásmico retículo (ER) y la membrana plasmática. . Está implicado en el control de la respuesta inflamatoria en ER [5]
SEPS1 protege a las células contra el daño oxidativo y la apoptosis, y se expresa ampliamente en una variedad de tejidos [6-8]
Recientemente, el. - 105G > a polimorfismo promotor de SEPS1 se demostró estar fuertemente asociado con niveles plasmáticos de citoquinas pro-inflamatorias, tales como la interleuquina 1 beta (IL-1β), la interleucina 6 (IL-6) y factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) . El -105G > Un polimorfismo promotor de SEPS1 puede afectar los niveles de ARNm de SEPS1 [9]. La sustitución del alelo para el alelo G en la posición -105 reduce la actividad del promotor en las células HepG2 [10].
Después de que el informe de un polimorfismo en la región promotora SEPS1, algunos estudios clínicos han demostrado asociaciones entre el polimorfismo SEPS1 con la enfermedad coronaria del corazón y accidente cerebrovascular isquémico [11] y preeclampsia [12], mientras que otros estudios no informaron las asociaciones entre esta variante con la enfermedad inflamatoria intestinal [13] o enfermedad cerebrovascular [14].
sin embargo, la asociación entre el -105G > Un polimorfismo promotor de SEPS1 y el riesgo de cáncer gástrico todavía no se ha estudiado
niveles de IL-1ß se han asociado con el cáncer gástrico [15], y debido a que el polimorfismo SEPS1 afecta los niveles de IL-1β, el polimorfismo puede SEPS1. ser un factor genético importante para el desarrollo de cáncer gástrico.
en este estudio de casos y controles, se examinaron las asociaciones entre el polimorfismo promotor SEPS1 y tanto el riesgo de cáncer gástrico y las respuestas inflamatorias en la mucosa gástrica como se mide en muestras de biopsia gástrica .
Métodos pacientes y controles
Francia el estudio incluyó a pacientes que recibieron una endoscopia digestiva alta en el hospital de la Universidad de Salud Fujita en Japón. Consecutivamente los sujetos incluidos fueron seleccionados para el cáncer gástrico en endoscopia gastrointestinal superior seguido de un examen de rayos X de bario. Los casos fueron 268 pacientes japoneses (193 varones, 75 mujeres, edad media 65,3 ± 12,0 años) que fueron diagnosticados con cáncer gástrico primario, y los controles fueron 306 personas (184 hombres, 122 mujeres) sin cáncer gástrico que también fueron sometidos a endoscopia digestiva alta. El cáncer gástrico fue diagnosticado histológicamente en la División de Patología de nuestro hospital, y los cánceres se clasificó de acuerdo con la clasificación de Lauren 's [16]. Se obtuvieron también la estadificación del cáncer y la información de localización anatómica. Los pacientes con enfermedades sistémicas y tumores malignos en otros órganos, o que habían recibido no esteroides anti-inflamatorios fueron excluidos. Francia El Comité Ético de la Facultad de Medicina de la Universidad de Salud Fujita aprobó el protocolo. escrito el consentimiento informado se obtuvo de cada participante en el estudio.
estudio histológico y el ADN de extracción
muestras de biopsias gástricas fueron tomadas de la mucosa no canceroso en el antro y la curvatura mayor del estómago, usando un alcance gastrointestinal superior. Algunas partes de cada muestra fueron fijadas en 10% formalina tamponada y embebidos en parafina, mientras que las otras partes se congelaron y se almacenaron a -80 ° C hasta la extracción de ADN inmediatamente. Todos los diagnósticos histológicos se realizaron a la División de Patología de nuestro hospital. La gravedad de la gastritis crónica se clasificó por un patólogo que no tiene acceso a ninguna información clínica, de acuerdo con el sistema actualizado de Sydney [17] con cada factor de ser puntuados de 0 (normal) a 3 (marcado). Francia El genómico se extrajo ADN de las muestras almacenadas a -80 ° C utilizando proteinasa K y kits de extracción de ADN (Quiagen, Valencia, CA). Análisis FODA el polimorfismo del gen SEPS1 comentario el genotipo de la región promotora SEPS1 en la posición -105 se determinó utilizando los polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción basadas en la PCR (PCR-RFLP). Se utilizó cebadores que incluían la zona de polimorfismo SEPS1 (-105). Posteriormente, la identificación se realiza después de la amplificación por PCR, utilizando los siguientes cebadores 5 'AAATCCGTGAACGAGGTCCG-3' y 5'-GAGCAACTAATCTGAATCAGG-3 '. PCR se llevó a cabo con 0,1 g de ADN genómico en un volumen de 20 l. El ADN se desnaturalizó a 94 ° C durante 5 minutos, seguido de 35 ciclos a 94 ° C durante 20 segundos, 53 ° C durante 20 segundos, y 72 ° C durante 40 segundos, con una extensión final a 72 ° C durante 7 minutos . Las reacciones de PCR se realizaron utilizando Mezcla Taq (Toyobo Co., Ltd., Osaka, Japón). Los productos de PCR amplificados se digirieron durante la noche con 5 unidades de PspGI (New England BioLabs, Inc., Beverly, MA, EE.UU.) a 75 ° C. Posteriormente, los productos digeridos se analizaron en 3% geles de agarosa. Estos geles se tiñeron con bromuro de etidio (0,5 mg /ml), y los genotipos se determinaron por análisis de diferentes bandas. La presencia de un sitio de PspGI fue indicada por la escisión del producto amplificado 324 pb para producir fragmentos de 179 y 145 pb. La genotipificación se confirmó por secuenciación directa en algunas muestras seleccionadas al azar.
Detección de H. pylori
H. pylori
positividad se determinó por examen microscópico, prueba de aliento de urea, o los títulos de anticuerpos séricos anti-HP. La infección se diagnostica cuando al menos una de estas pruebas fue positiva análisis estadístico.
Hardy-Weinberg del alelo gen SEPS1 en los controles y pacientes con cáncer gástrico fueron evaluados por χ 2 estadísticas. características clínicas entre los pacientes con o sin cáncer gástrico, y las diferencias en las puntuaciones entre una gastritis transportistas y G /G se examinaron mediante la prueba de Mann-Whitney. Se utilizó un análisis de regresión logística para estimar la odds ratio (OR) y los intervalos de confianza del 95% (IC) para los genotipos, con ajuste por edad, sexo, y H. pylori
estado de infección. Un valor de p < 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.
Resultados
Características de los sujetos
Las características de los casos y los controles se resumen en la Tabla 1. H. pylori
y la edad fueron mayores en pacientes con cáncer gástrico que en los controles (p < 0,05) .Tabla 1 Características de los sujetos

GC
controles
P

número
268 306

machos /hembras
° 193/75
184/122
NS
edad media (± DE)
65,3 ± 12,0 62,7 ± 13,2
Hotel < 0.05A
tasa HP positivo (%) 86,2

68,0 Hotel < 0.05A
GC: cáncer gástrico, HP: Helicobacter pylori
AGC frente a los controles, Mann-Whitney U test
Los principales hallazgos endoscópicos para el grupo control fueron:. Úlcera gástrica en 68 pacientes ( 22,2%), úlcera duodenal en 35 (11,4%), úlcera gástrica y duodenal en 5 (1,7%), y la gastritis en 198 (64,7%).
Distribución de los genotipos SEPS1
Tabla 2 muestra las frecuencias genotípicas de SEPS1 en pacientes con cáncer gástrico y el grupo control. El polimorfismo en la posición -105 de SEPS1 se ha escrito en todos los 574 sujetos. Entre los casos, la distribución de los genotipos fue la siguiente: 88,4% eran GG, 11,2% eran GA, y 0.4% eran AA. Entre los controles, la distribución fue la siguiente: 92,5% eran GG, 7,2% eran GA, y 0.3% eran AA (Tabla 2). La frecuencia de SEPS1 polimorfismo en los controles y los pacientes con cáncer gástrico no se desvió significativamente de los previstos en virtud del equilibrio de Hardy-Weinberg (p = 0,42, 0,96, respectivamente). Entre los hombres, en comparación con el genotipo GG, los genotipos GA y AA combinadas se asoció con un aumento de las probabilidades de cáncer gástrico (OR: 1,97, IC 95%: 0,95 a 4,06, p = 0,067, Tabla 3) .Tabla 2 SEPS1 polimorfismo y GC riesgo
genotipos
pacientes con GC
n (%)
pacientes de control
n (% ) guía empresas OR (IC del 95%)
P
G /G
237 (88,4)
283 (92,5)
referencia
G /A
30 (11,2) 22
(7.2)
1,66 (0,91-3,01)
0,097
A /A
1 (0,4) 1
(0.3)
0,77 (0,05-12,44)
0.852
G /A + A /A
31
23
1,61 (0,90-2,89)
0,112
GC: cáncer gástrico; IC: intervalo de confianza sobre Table 3 Asociación entre el polimorfismo SEPS1 y género


genotipo
G /G vs G /A + A /A


G
/G
G /A
A /A
OR (IC del 98%)
P
pacientes de control

masculina
171 página 12
1

• Aplicación del modelo de Weibull para la supervivencia de los pacientes con la aplicación cancer
• La coexistencia de tumor del estroma gastrointestinal y myofibroblastic tumor inflamatorio del estómago que se presenta como un tumor de colisión: primer caso y convivencia literatura review