Het begin van de huidige pandemie van de coronavirusziekte 2019 (COVID-19) zag de reverse transcriptase-polymerasekettingreactie (RT-PCR) naar voren schieten als de gouden standaard voor het diagnosticeren van deze infectie. Deze test wordt meestal gebruikt om een positief/negatief resultaat te geven, maar kan ook worden gebruikt om de virale belasting in het geteste monster te schatten als de cyclusdrempel (Ct), of kruispunt (Cp) wordt onderzocht.
In de meeste gevallen van SARS-CoV-2-infectie, kinetiek van virale belasting laat eerst een sterke toename van de virale belasting zien, voordat de symptomen zich ontwikkelen, gevolgd door een langzame val. Virale culturen zijn alleen succesvol als het monster een lage Ct-waarde heeft (onder 27), terwijl wanneer deze hoger is dan 35, het virus is nauwelijks kweekbaar, wijst op een laag verspreidingsrisico. Echter, het is moeilijk om virale ladingen in verschillende populaties direct te vergelijken, door het gebruik van verschillende testen en methoden, die van invloed zijn op de Ct.
De huidige studie richtte zich daarom op de Ct in alle monsters uit een routinematige steekproefpopulatie, allemaal getest in één Nederlands regionaal laboratorium. Het doel was om een verschil te vinden tussen verschillende patiëntengroepen, inclusief ziekenhuisopname, huisarts, verzorgingstehuis, gezondheidswerkers (HCW's), en patiënten getest in testcentra voor volksgezondheid, maar ook tussen leeftijdsgroepen, met betrekking tot de viral load en de periode waarin de symptomen bestonden.
De studie omvatte meer dan 270, 000 patiënten, alleen het eerste resultaat gebruiken. Als er meerdere positieve resultaten waren, de eerste werd gebruikt, of het nu positief of negatief is. Ongeveer 9% was positief. In de eerste golf, meer dan een kwart van de tests werd uitgevoerd voor ziekenhuispatiënten, maar deze groep maakte slechts minder dan 1% uit in de tweede golf, waarvan meer dan 80% afkomstig is van het Nederlandse testsysteem voor de volksgezondheid.
Hogere Ct-waarden (lagere virale lasten) in respiratoire monsters werden geassocieerd met monsters verkregen in de eerste golf. Echter, in deze golf, Ct-waarden waren lager bij volksgezondheidspatiënten dan bij huisartsen, bij niet-gehospitaliseerde patiënten, en HCW's in verpleeghuizen. Met het begin van de tweede golf, verpleeghuisbewoners en huisartsen lieten lagere Ct-waarden zien.
Wanneer gestratificeerd op leeftijd in de volgende categorieën, namelijk, 0-12 jaar, 12-17 jaar, 18-29 jaar, 30-49 jaar, 50-59 jaar, 60-69 jaar, 70-79 jaar, en meer dan 79 jaar, de studie toont aan dat het ouder worden gekoppeld is aan een hoger percentage positieven en hogere virale ladingen. De jongere patiënten hadden veel meer kans op Ct-waarden boven de 30.
Ongeveer een derde van de kinderen onder de 12 had een Ct van meer dan 30, maar slechts de helft van de andere patiënten. De mediane Ct-waarden waren 4 keer hoger in de jongste groep dan in de oudste, wat overeenkomt met een 16-voudige verlaging van de virale belasting.
Wanneer zowel het tijdstip van aanvang van de symptomen als het testen bekend was, toenemende leeftijd bleek samen te hangen met lagere Ct-waarden, op elk interval tussen het begin van de symptomen en het testen. Dit werd waargenomen ondanks het feit dat de virale belasting toenam met een toename van dit interval.
Verdeling van SARS-CoV-2 PCR Cp-waarden binnen verschillende leeftijdsgroepen (n=18.290) Elke kleur komt overeen met één specifieke leeftijdsgroep die routinematig werd getest in de periode 1 januari-1 december. Voor elke groep de frequentie van gerapporteerde Cp- waarden werd gebruikt om een dichtheidsscore te berekenen waarvan de oppervlakte onder de curve 1 optelt.In dit vroegste onderzoek naar de verdeling van de virale belasting bij een breed scala aan patiënten, het is duidelijk dat de virale belasting altijd het hoogst is bij oudere patiënten, onafhankelijk van het geslacht of het begin van de symptomen. Opnieuw, de populatie die op deze infectie werd getest, was verschillend in de eerste en tweede golf. En ten derde, monsters in de tweede golf hadden een hogere mediane virale belasting.
De reden voor de verandering in geteste populaties is de verschuiving in het testbeleid, die zich richtte op gehospitaliseerde patiënten in de eerste golf, maar verschoven naar meer algemene testen naarmate de capaciteit verbeterde, tijdens de tweede golf.
De bevinding van lage virale lasten bij jongere patiënten is niet in overeenstemming met eerdere studies, wat het unieke belang van deze studie aantoont die gegevens van meer dan 2 gebruikte, 600 patiënten onder de 20 jaar, en rond 240 onder de 12. Echter, ze bieden verschillende disclaimers. Voor een, de moeilijkheid om pijnloos nasofaryngeale of orofaryngeale bemonstering uit te voeren bij kinderen kan hebben geleid tot een hoger percentage neus- of middenschelpmonsters, de resultaten aantasten.
Dit aspect moet grondig worden onderzocht, omdat eerdere studies tegenstrijdige bevindingen opleverden over de vraag of dergelijke monsters een verminderde virale lading hebben. Ten tweede, de meeste patiënten in de jongere leeftijdsgroep waren oud genoeg om de procedure te verdragen.
Verklaringen zoals een hogere testdrempel voor kinderen of beperkte testen lijken geen steek te houden, aangezien de toename van de virale lasten met de leeftijd stabiel blijft gedurende het jaar van de studie. In plaats daarvan, het kan belangrijk zijn om de distributie en expressie van de gastheercelreceptor te bestuderen, het angiotensine-converterend enzym 2 (ACE2), bij kinderen, differentiële immuniteit bij kinderen, verschillen in het microbioom, en reeds bestaande immuniteit tegen het coronavirus.
Eindelijk, de relatieve gevoeligheid van antigeentests ten opzichte van polymerasekettingreactie (PCR) -tests moet worden onderzocht in verband met de resultaten van deze studie. Aangezien bijna een derde van de kinderen Ct-waarden boven de 30 had, De gevoeligheid van de antigeentest zou in deze groep wel eens lager kunnen zijn.
De studie toont het belang aan van het gebruik van gegevens van een breed spectrum aan patiënten, in grote aantallen, uit één laboratorium, om de werkelijke verschuiving in de geteste patiëntenpopulatie en de verdeling van de virale belasting beter aan het licht te brengen. De lage viral load bij kinderen ondersteunt de stelling dat deze leeftijdsgroep geen sleutelrol speelt bij virale verspreiding. Er zal meer onderzoek nodig zijn om te begrijpen hoe dit aansluit bij hoesten en andere epidemiologische parameters die ook de overdracht beïnvloeden.
medRxiv publiceert voorlopige wetenschappelijke rapporten die niet peer-reviewed zijn en, daarom, mag niet als definitief worden beschouwd, begeleiden klinische praktijk/gezondheidsgerelateerd gedrag, of behandeld als gevestigde informatie.